动物性产品中兽药残留的快速检测方法
鸡蛋中兽药残留快速检测方案
方案| 鸡蛋中兽药残留快速检测方案一、概述鸡蛋富含胆固醇，营养丰富，一个鸡蛋重约50克，含蛋白质6-7克，脂肪5-6克。
鸡蛋蛋白质的氨基酸比例很适合人体生理需要、易为机体吸收，利用率高达98%以上，是人类经常食用一种动物源食品。
近年来随着人们生活水平的提高，蛋鸡行业的产能过剩，检测技术的不断进步和普及，食品安全和药物残留问题日渐显现，成为全球消费者和社会广泛关注的焦点。
兽药残留是指用药后蓄积或存留于畜禽机体或产品（如鸡蛋、奶品、肉品等）中原型药物或其代谢产物，包括与兽药有关的杂质的残留。
在动物源食品中较容易引起兽药残留量超标的兽药主要有抗生素类、磺胺类、呋喃类、抗寄生虫类和激素类药物。
二、鸡蛋中兽药残留来源在蛋鸡集中化饲养过程中，兽药不仅能够用于防治疾病，部分还可作为饲料添加剂使用，促使机体生长或者产蛋率提高。
鸡蛋中的兽药残留是怎样形成的呢？1.兽药本身存在质量问题，如含量超标、成分不符等；2.违规使用禁用药、淘汰药、人用药或原料药；3.用药不规范超剂量使用、长时间使用，不遵守休药期；改变给药途径、给药间隔和用药次数；4.环境污染问题，如鸡食用了被污染的水源、饲料等，从而造成兽药在鸡体内蓄积。
三、鸡蛋中兽药残留现状及危害近日，国家市场监督管理总局通报了4批次鸡蛋检出氟苯尼考而不合格。
从2018年1月以来，市监总局共通报了46批次氟苯尼考不合格鸡蛋，32批次恩诺沙星不合格鸡蛋，7批次氧氟沙星不合格鸡蛋。
氟苯尼考属于氯霉素类药物，恩诺沙星和氧氟沙星均属于氟喹诺酮类药物。
疫检测实验结果进行读取和分析。
可视化酶标板图直观图形化界面设计，便捷的样本信息录入功能，独。
畜禽肉中多类兽药残留的快速检测
畜禽肉中多类兽药残留的快速检测黄 立（昆明市食品药品检验所，云南昆明 650032）摘 要：建立了猪肉、牛肉、鸡肉中磺胺类、四环素类、喹诺酮类共15种兽药残留量的快速检测方法。
样品经过Na2EDTA-Mcllvaine缓冲液-2.5%乙酸乙腈溶液提取，经氯化钠、无水硫酸钠除水盐析后取乙腈相用高含碳量的C18吸附粉吸附净化，再用0.1%甲酸水乙腈（75+25）定容后上机检测。
结果显示，本方法测定三类混合药物的回收率在63.9%～104.0%，RSD在1.1%～12.2%，检测快速、灵敏度高、重复性好，定性定量准确可靠，适用于猪肉、牛肉及鸡肉中磺胺类、四环素类、喹诺酮类药物残留的快速检测。
关键词：液相色谱-串联质谱法；磺胺；四环素；喹诺酮Rapid Detection of Multiple Types of Veterinary Drug Residues in Livestock and Poultry MeatHUANG Li(Kunming Institute for Food and Drug Control, Kunming 650032, China) Abstract: A rapid method was established for the determination of 15 veterinary drug residues of sulfonamides, tetracyclines and quinolones in pork, beef and chicken. The samples were extracted by Na2EDTA-Mcllvaine buffer-2.5% acetic acid acetonitrile solution, and the acetonitrile phase was purified by adsorption with high carbon content C18 adsorbent powder after dehydration salting by sodium chloride and anhydrous sodium sulfate, and then fixed with 0.1% formic acid aqueous acetonitrile (75+25) and detected on the machine. The results showed that the method determines the recovery of the three types of mixed were 63.9%～104.0%, RSD were 1.1%～12.2%, rapid detection, high sensitivity, good repeatability, accurate and reliable qualitative and quantitative, suitable for the rapid detection of sulfonamides, tetracyclines, quinolones drug residues in pork, beef and chicken.Keywords: liquid chromatography-tandem mass spectrometry; sulfonamide; tetracycline; quinolone合理使用兽药可以提高畜禽养殖效率，节省成本，缩短出栏周期，进而增加收益，但越来越多的人为追求经济效益滥用药物，导致了一些兽药以残留的形式流入人体，从而对身体健康造成威胁[1]。
品检中的兽药残留检验方法
品检中的兽药残留检验方法兽药残留是指兽药在兽体内或畜禽产品中残留的化学物质。
合理使用兽药可以预防和治疗动物疾病，提高畜禽养殖效益。
然而，如果兽药残留超过安全标准，可能对消费者健康造成潜在风险。
因此，兽药残留的检验方法在品检中显得尤为重要。
兽药残留检验方法是确定畜产品中兽药残留水平的关键步骤。
本文将介绍一些常用的兽药残留检验方法，并讨论其原理和应用。
高效液相色谱-质谱联用法（HPLC-MS）是目前应用广泛的兽药残留检验方法之一。
该方法基于高效液相色谱（HPLC）和质谱联用仪（MS），通过对样品进行分离和定性分析，可以快速、准确地检测多种兽药残留物。
HPLC-MS方法具有高选择性、高灵敏度和高分辨率的特点，适用于不同类型的兽药残留物检测。
酶联免疫吸附测定法（ELISA）是一种基于免疫学原理的兽药残留检测方法。
该方法利用特异性抗体与兽药残留物结合，形成特异性抗原-抗体复合物，并通过酶作用产生颜色反应，从而定量检测兽药残留物的含量。
ELISA方法具有简单、快速、便捷的特点，适用于大规模的兽药残留检测。
气相色谱-质谱联用法（GC-MS）也是常用的兽药残留检验方法之一。
该方法利用气相色谱和质谱联用仪对样品进行分离和定性分析，可以检测挥发性兽药残留物和半挥发性兽药残留物。
GC-MS方法具有高分辨率、高灵敏度和高准确性的特点，适用于多种兽药残留物的分析。
快速液相色谱法（UPLC）也是兽药残留分析中常用的检测方法之一。
与传统的液相色谱相比，UPLC具有更高的分离效率、更短的分析时间和更低的溶剂消耗量。
因此，UPLC是一种高效、准确和经济的兽药残留检验方法。
综上所述，兽药残留检验方法在品检中起着重要的作用。
通过合理选择和应用适当的检验方法，可以快速、准确地检测畜产品中的兽药残留物。
这有助于确保畜产品的质量安全，保护消费者的健康。
未来，随着科技的进步，兽药残留检验方法还会不断发展和完善，以应对不断变化的兽药种类和畜产品需求。
动物源性食品中兽药多残留快速检测技术及精确质量数据库的建立
动物源性食品中兽药多残留快速检测技术及精确质量数据库的建立一、本文概述随着畜牧业的快速发展，兽药在动物源性食品生产中的应用日益广泛，兽药残留问题逐渐凸显，对食品安全和人体健康构成了潜在威胁。
建立一种快速、准确的兽药多残留检测技术，并构建精确的质量数据库，对于保障动物源性食品的安全性和提升兽药监管水平具有重要意义。
本文旨在探讨动物源性食品中兽药多残留快速检测技术的研究进展，并阐述精确质量数据库的建立方法与应用价值。
文章首先综述了目前国内外兽药多残留检测技术的现状和发展趋势，包括免疫分析法、色谱法、质谱法等多种检测方法的优缺点和适用范围。
在此基础上，文章重点介绍了几种新型的快速检测技术，如基于纳米材料的检测技术、生物传感器技术等，这些技术具有快速、灵敏、高通量等优点，为兽药多残留检测提供了新的思路和方法。
本文还详细阐述了精确质量数据库的建立过程，包括数据采集、数据处理、数据存储和数据挖掘等方面。
通过整合各种兽药残留数据，建立全面、准确、可靠的兽药残留数据库，为兽药监管和食品安全风险评估提供有力支持。
文章对兽药多残留快速检测技术和精确质量数据库的建立进行了展望，认为未来应加强技术创新和跨学科合作，推动兽药残留检测技术的进一步发展和完善，为保障动物源性食品的安全性和促进畜牧业的可持续发展做出更大贡献。
二、动物源性食品中兽药多残留问题的现状与挑战随着养殖业的快速发展，动物源性食品中兽药多残留问题逐渐凸显，成为全球性的食品安全难题。
兽药多残留不仅会对动物和人类健康产生直接危害，还会影响生态环境安全。
建立快速、准确、灵敏的兽药多残留检测技术及精确质量数据库至关重要。
目前，动物源性食品中兽药多残留问题的现状严峻。
一方面，养殖过程中为预防和治疗动物疾病，大量使用抗生素、激素等兽药，导致兽药残留问题日益严重。
另一方面，一些不法养殖者为了追求经济利益，滥用兽药，甚至使用违禁药物，进一步加剧了兽药多残留问题。
由于兽药种类繁多，不同药物之间的残留代谢规律复杂，也给兽药多残留检测带来了巨大挑战。
兽药残留快速检测
• 阳性结果表明盐酸克伦特罗含量在阈值以上，阴性 结果表明盐酸克伦特罗含量在阈值以下。
7 灵敏度
灵敏度（阈值）：根据每种检测 卡控制浓度而定，盐酸克伦特罗有 3ng/ml、5ng/ml、6ng/ml、15ng/ml 、20ng/ml、30ng/ml和50ng/ml等控 制规格，判断前请向供应厂家咨询控 制阈值。
8 注意事项
（1）肉及内脏中脂肪会导致假阳性结果 ，取样时请剔除肉眼可见的脂肪；
（2）盐酸克伦特罗检测卡应在常温下使 用，不用对刚屠宰的猪肉或冷冻猪肉 直接进行检测；
克伦特罗ELISA检测
1 适用范围
此方法应用于猪肉、内脏、猪尿 液及饲料中盐酸克伦特罗含量的检测 。
二、使用单位需自备的设备及试剂
用BSA(牛血清白蛋白)偶联的克伦特罗分子与胶体金颗粒 结合后，包被在醋酸纤维素膜上；在硝酸纤维素膜上将克伦 特罗抗体和BSA抗体分别包被在检测区（T）和质控区（C） 。当样本加到加样孔后，样本中的克伦特罗分子与克伦特罗BSA-胶体金偶联物一起层析泳动到检测区竞争与克伦特罗抗 体结合，剩余的克伦特罗-BSA-胶体金继续泳动到质控区与抗 体结合。因此，当样本中的克伦特罗浓度超过一定量后，胶 体金偶联物就不能与克伦特罗抗体结合，此时检测区不出现 紫红色线条；当样本中克伦特罗浓度低于一定值或样本中没 有克伦特罗时，胶体金偶联物就与克伦特罗抗体结合，从而 在检测区显示出一条紫红色线条；而无论样本中是否含有克 伦特罗分子，质控区都会出现紫红色线条，以示检测有效。
5 操作步骤
（1）从原包装铝箔袋中取出检测卡，在1小时内应尽 快地使用；
兽药农药残留快速检验
酶抑制法
速测卡法检测原理
胆碱酯酶可催化靛酚乙酸酯 （红色）水解为乙酸与靛酚（蓝 色），有机磷或氨基甲酸脂类农药 对胆碱酯酶有抑制作用，使催化、 水解、变色的过程发生改变，由此 可判断出样品中是否有高剂量有机 磷或氨基甲酸酯类农药的存在。
滥用抗生素，重复使用同类药物
有些兽药企业在产品中添加一些化学物质 ，但不在标签中进行说明，从而造成用户 盲目用药
用来掩饰有病畜禽临床症状，以逃避宰前 检验
食品中兽药残留的种类
兽药残留快速检测原理
微生物法
免疫学法
根据抗菌药物对微生物生理功能、 代谢的抑制作用，来定性或定量 确定样品中药物残留。
基于抗原-抗体特异性反应的检测 方法。
整体测定法
结果判定
打开与空白对照卡比对。
反应
将速测卡对折后，用手捏3分钟
预反应
放置10分钟
检样
取一片速测卡，将蔬菜上的液滴滴在白色药片上
样品预处理
擦去蔬菜表面泥土，剪成1cm左右见方碎片，取5g放入带盖瓶中，加 入10mL浸提液，静置2分钟以上
• 仪器测定法：将速测卡插入仪器中，将提取液2～3滴于速测卡白色 药片上，同时作一片空白实验，启动仪器自动运行预反应10分钟， 盖上仪器盖，3分钟时仪器报警，打开仪器观察结果。白色药片变 为天蓝色或与空白对照卡相同，为阴性结果。白色药片略有浅蓝色 为弱阳性，白色药片不变色为强阳性。
莱克多巴胺检测卡
莱克多巴胺
莱克多巴胺是一种人工合成的克仑巴安β肾上腺受体激动 剂，可用于治疗充血性心力衰竭症、肌肉萎缩症，增长肌肉，减 少脂肪蓄积，并对胎儿和新生儿生长有益。莱克多巴胺正被作为 一种新型瘦肉精被一些养猪场使用。对此药物在养殖业的适用范 围和安全性世界各国的规定不尽相同。自2011年12月5日起在中 国境内禁止生产和销售莱克多巴胺。
兽药残留检测方法
兽药残留检测方法
兽药残留检测方法主要包括以下几种：
1. 高效液相色谱法（HPLC）：通过对样品进行提取和分离，利用高效液相色谱仪进行检测。
该方法可以同时检测多种兽药残留，并且具有高灵敏度和高准确性。
2. 气相色谱法（GC）：对样品进行蒸馏提取后，利用气相色谱仪进行分离和检测。
该方法适用于挥发性兽药残留的检测，具有高分辨率和快速分析的优点。
3. 液相色谱串联质谱法（LC-MS/MS）：将高效液相色谱与串联质谱联用，可对多种兽药残留进行高灵敏度、高选择性的定性和定量分析。
4. 酶联免疫吸附法（ELISA）：利用免疫学技术，通过抗体与兽药残留结合来检测样品中的兽药残留。
该方法具有操作简单、快速、经济的特点，但灵敏度和选择性较低。
5. 生物传感技术：利用生物传感器对兽药残留进行检测，如基于表面等离子体共振（SPR）技术、电化学传感器等。
这些方法具有高灵敏度、高选择性和实时监测的特点。
总之，不同的兽药残留检测方法有着各自的特点和适用范围，可根据需求选择合适的方法进行检测。
兽药残留快速检测课件
了解兽药残留所 带来的食品安全 问题、获得关于 兽药残留的有关 标准依据和检测 试剂制造商信息 等；
理解常见的兽 药残留快速检 测的基本原理；
掌握常见的兽 药残留快速检 测基本方法和 基本操作技能 。
兽药和兽药残留的定义
兽药
指用于预防和治 疗畜禽疾病的药 物。
兽药残留
指给畜禽使用兽药 或添加剂后，药物 以其原形及其代谢 产物的形式蓄积或 储存在动物的细胞 、组织、器官或可 食性产品（如蛋、 奶）中。
3 主要仪器
食品加工机，低速离心机，电子秤（精 度0.1克），250ul单道微量移液器（移液枪 ）。
4 材料与试剂
克伦特罗胶体金法检测卡，检测试剂A（ 3%三氯乙酸溶液），检测试剂B（0.1N氢氧 化钠溶液），pH试纸（1-14），剪刀， 10ml试管（或离心管），一次性塑料吸管、 一次性手套等。
一、收养关系成立的条件 收养行为是民事法律行为的特定种类，收养
成立的实质要件既要符合民法中有关民事法律行 为的一般规定，又要符合收养法中有关收养行为 的专门规定。 （一）被收养人的条件 我国《收养法》第4条规定，下列不满14周岁的 未成年人可以被收养： 1、丧失父母的孤儿 2、查找不到父母的弃婴和儿童 3、生父母有特殊困难无力抚养的子女
5
二、收养制度的历史沿革
（一）古代法中的收养制度
收养制度由来已久，早在父系氏族社会就 为当时的习惯所确认； 进入阶级社会以后，收 养制度具有了一定的法律形式，成为不同时代、 不同国家的亲属制度、家庭制度的重要组成部分 。
在中国古代的宗法制度下，立嗣是收养的一 种特殊形式，立嗣的宗旨是为了承继宗祧，它同 近、现代的收养有着严格的区别：
3、关于继父母收养继子女的规定
动物生产中的兽药残留与监测技术
动物生产中的兽药残留与监测技术动物生产中的兽药使用在确保动物健康和提高生产效率方面发挥着重要作用。
然而，不正确的使用和管理可能导致兽药残留物在动物产品中的累积，对人类健康和环境造成潜在风险。
因此，兽药残留的监测与控制成为保障食品安全的重要环节。
本文将介绍动物生产中的兽药残留与监测技术。
一、兽药残留的危害兽药是为动物设计和使用的药物，用于预防和治疗动物疾病、促进生长和改善饲养效果。
但如果兽药不当使用或管理不善，就会导致动物体内残留物的积累。
这些兽药残留物可能通过食物链传递到最终的动物产品，如肉类、蛋类和奶制品中。
长期食用兽药残留物超标的动物产品会对人体健康产生危害，如导致抗药性菌株的出现、过敏反应和慢性疾病。
二、兽药残留的监测方法为了保障食品安全，监测动物产品中的兽药残留成为非常重要的环节。
目前，有多种技术可用于兽药残留的监测。
以下是几种常见的监测方法：1. 液相色谱-质谱联用技术（LC-MS/MS）液相色谱-质谱联用技术是一种常用且高效的兽药残留监测方法。
它通过将样品经过液相色谱分离后，再通过质谱仪进行定性和定量分析。
该技术能够对多种兽药进行同时分析，并具有极高的灵敏度和准确性，可以检测到极低浓度的兽药残留物。
2. 酶联免疫吸附测定法（ELISA）酶联免疫吸附测定法是一种快速检测兽药残留的方法。
该技术利用特异性抗体与兽药残留物结合，并通过测定酶标记的信号强度来确定残留物的浓度。
虽然ELISA技术可以提供快速结果，但它的准确性可能受到样品基质的干扰。
3. 生物传感器技术生物传感器技术利用生物体内的生物分子（如酶、细胞、抗体等）与兽药残留物之间的特异反应来监测兽药残留。
这种技术具有灵敏度高、响应迅速、操作简便等优点，是一种有潜力的监测方法。
三、兽药残留监测的挑战与展望尽管已经取得了一定的进展，但兽药残留监测仍面临一些挑战。
其中包括复杂样品基质的影响、残留物的多样性和低浓度残留物的检测等。
未来，需要继续改进和研究监测技术，以提高准确性和检测范围。
兽药残留检测原理
兽药残留检测原理兽药残留是指动物体内残留的药物，这些药物可能来自动物生病时使用的药物、添加剂或生长促进剂等。
兽药残留不仅会对动物本身健康产生影响，也可能危害人类健康。
因此，兽药残留检测在食品安全领域具有重要意义。
本文将介绍免疫分析法、微生物学法、理化分析法、生物传感器法、活体检测法、光谱分析法、色谱分析法、质谱分析法和酶抑制法等兽药残留检测原理。
1.免疫分析法免疫分析法是利用抗原抗体反应原理进行兽药残留检测的方法。
该方法可分为固相免疫分析法和液相免疫分析法。
固相免疫分析法中，待测样品中的药物与固相载体上的抗体结合，再加入标记物，通过信号放大系统检测药物残留量。
液相免疫分析法中，待测样品中的药物与液相载体上的抗体结合，加入酶或荧光物质等标记物，通过信号检测系统测定药物残留量。
2.微生物学法微生物学法是利用微生物学原理进行兽药残留检测的方法。
该方法可分为直接计数法和间接计数法。
直接计数法是通过对动物组织中的细菌进行培养计数，推测兽药残留量。
间接计数法是通过测定动物组织中抗生素残留量，推测兽药残留量。
3.理化分析法理化分析法是利用物理和化学方法进行兽药残留分析的方法。
可分为光谱分析和色谱分析法。
光谱分析法是利用不同物质对特定波长光线的吸收、反射或透射等特性，对兽药残留进行定性或定量分析。
色谱分析法则利用不同物质在固定相和流动相之间的分配差异，将兽药残留分离出来，再进行定性或定量分析。
4.生物传感器法生物传感器法是利用生物传感器技术进行兽药残留检测的方法。
生物传感器可分为组织传感器、酶传感器和生物芯片等。
组织传感器利用组织切片中的酶或细胞等生物活性物质作为传感器，检测兽药残留。
酶传感器利用药物对特定酶的抑制作用，测定兽药残留量。
生物芯片则利用微电子技术和微加工技术在芯片上构建生物传感器，检测兽药残留。
5.活体检测法活体检测法是一种直接在动物体内检测药物残留的方法。
可分为猪囊虫病检测法和鸡胚检测法等。
猪囊虫病检测法是通过观察猪肌肉组织中的囊虫数量，判断药物残留情况。
农业部公告2003年第236号——动物性食品中兽药残留检测方法
农业部公告2003年第236号——动物性食品中兽药残留检测方法文章属性•【制定机关】农业部(已撤销)•【公布日期】2003.01.22•【文号】农业部公告2003年第236号•【施行日期】2003.01.22•【效力等级】部门规范性文件•【时效性】现行有效•【主题分类】畜牧业正文农业部公告（2003年第236号）根据《兽药管理条例》规定，我部组织制定了12种动物性食品中兽药残留检测方法，现予发布，请各地遵照执行。
附件：动物性食品中兽药残留检测方法中华人民共和国农业部二00三年一月二十二日动物源性食品中兽药残留检测方法目录1、动物源食品中卡巴氧标示残留物检测方法--------------高效液相色谱法2、动物源食品中硝基咪唑类药物残留检测方法------------高效液相色谱法3、动物源食品中磺胺二甲嘧啶残留检测方法--------------高效液相色谱法4、动物源食品中拉沙洛西钠残留检测方法----------------高效液相色谱法5、动物源食品中恩诺沙星和环丙沙星残留检测方法--------高效液相色谱法6、动物源食品中恶喹酸和氟甲喹残留检测方法(鸡)--------高效液相色谱法7、动物源食品中恶喹酸和氟甲喹残留检测方法(鱼)--------高效液相色谱法8、动物源食品中苯唑西林残留检测方法(鸡)--------------高效液相色谱法9、动物源食品中青霉素素抗生素残留检测方法(鸡)--------高效液相色谱法10、动物源食品中苯唑西林残留检测方法(牛奶)-----------高效液相色谱法11、动物源食品中氯霉素残留检测方法(牛奶)-------------高效液相色谱法12、动物源食品中青霉素抗生素残留检测方法(牛奶)-------微生物法。
动物源性食品中91种兽药残留的检测-迪马
28
磺胺间二甲氧嘧啶 正模式
311.2/156.1
75
311.2/108.2
40
240.3/148.0
24
沙丁胺醇
正模式
240.3/222.1
240.3/148.0
14
60
240.3/166.1
18
302.5/164.1
21
莱克多巴胺
正模式
302.5/164.1
80
302.5/284.1
16
277.2/202.9
351.1/160.1
19
哌拉西林
正模式
518/160
518/160
35
Dikma Technologies
110 65 100 61 130 54 70 100 70 70 70 90
8
ProElut SPE Application
518/143
35
头孢氨苄
正模式
348/158 348/174
14 348/158
22
克伦特罗
正模式
277.2/202.9
70
277.2/259.2
14
226.1/152.2
31
特布他林
正模式
226.1/152.2
55
226.1/125.2
35
228.1/154.1
19
妥布特罗
正模式
228.1/154.1
60
228.1/172.1
17
321.3/303.2
26
依诺沙星
正模式
321.3/303.2
84
479.2/462.2
27
动物性产品兽药残留的检测方法
２ 世纪 ６ 年代后各种色谱的发展大大地提高了分析 ０ ０ 的灵敏度和分辨率 ， 拓宽了残 留分析范围， 而酶联免疫 方法在兽药残留方面的应用更是提高 了检测速度。
的Ｅ Ｉ ＬＳ Ａ试纸条检测法 ， 操作 比试剂盒简单 ， 提高了 检测速度和降低 了检测费用 ，能进行现场 、实时监 测， 但可靠性较差 ， 普遍出现假 阳性和漏检的情况 。
１高效液相 色谱Ｌ 是广泛应用 的兽药残留 检测方法。通过引入气相 色谱理论 ， 采用了高压泵 ， 高效 同定相和高灵敏度检测 器 ，弥补了气象色谱法 （ Ｃ 无法检测大分子量物质缺点 ， Ｃ ） 实现了分离速度 快、 效率高和操作 自动化。 几乎所有的化合物包括高极 性／ 离子型待测物和大分子物质 ， 均可用其进行测定。
６ 讨 论
以上 ５种 方 法 ， 有特 点 。仪 器分 析方 法一般 都 各
能得到 比较准确的结果 ， 但是存在分析设备昂贵 ， 分
析 时 间长 ， 法专 一 性 高 ， 方 必须 在 实验 室 进行 操 作 等
缺点 ， 无法实现在线监测 。免疫方法虽然能实现快速
解 吸 （ Ｄ） Ｆ 等解决 了难气化物质的离子化问题 ； 联用 结合 了色谱快速高效分离和 Ｍ 等快速定性 的优点 ， Ｓ
程 ， Ｅ ＩＡ法更灵敏 、 比 ＬＳ 更简便 、 更快速。 可用于各种
片法 （ Ｄ） 拭子法 （ Ｔ Ｐ） 。采用传统 的微生物 Ｐ 、 ＳＯ 等 检 测方 法 ， 点 是 时 间 长 ， 色状 态 判 断通 过 肉眼 辨 缺 显
抗原物质 的测定 ，尤其对体液 中的药物和激素的检 测更 为适用。但是其研究费用昂贵 ， 不适合 中国目前
鸡蛋中兽药残留的检测方法及防控方法 - 养鸡技术
鸡蛋中兽药残留的检测方法及防控方法-养鸡技术鸡蛋是生活中最常见的质优价廉的营养食品．深受人们的喜爱。
在蛋鸡集中化饲养过程中，兽药不仅能够用于防治疾病，部分还可作为饲料添加剂使用，促使机体生长或者产蛋率提高，但同时又容易在机体或者鸡蛋中残留，即使经过加热也依旧具有活性，从而间接导致耐药性传递及过敏、中毒、致癌或者致畸等。
现介绍鸡蛋中兽药残留规律、检测方法以及防治措施！1、兽药残留种类合成抗菌药物残留。
磺胺类药物，是一类药物的总称，主要特征是具有氨基苯磺酰胺结构，因其具有价格便宜、效果良好而在畜牧业中普遍应用。
尽管有关规定要求产蛋鸡不能够使用磺胺类药物，但在实际生产过程中依旧存在非常严重的误用和滥用现象，从而使其在鸡蛋中残留。
在我国，要求磺胺类药物的总残留量控制在每千克含有100 μg以下，同时还要求其中磺胺二甲基嘧啶的残留量控制在每千克含有25 μg以下。
喹诺酮类药物，主要使用的有恩诺沙星、二氟沙星、沙拉沙星、氟甲喹、达氟沙星，但要求处于产蛋高峰期的蛋鸡禁止使用。
在我国，农业部还明确规定鸡蛋中噢啉酸的残留量要控制在50 μg以下，且休药期应控制在6天。
硝基咪唑类药物，主要是作为驱虫药使用，通常以在饲料中添加的形式给药，从而使其残留在动物源性食品中。
国际上规定，所有食品动物可食性组织中硝唑眯唑类药物的残留量要求达到O，也就是说使用最先进的检测设备的定量限规定每千克含有1 μg。
抗生素类药物残留。
四环素类，是一种广谱抗生素，是由链菌霉生成，目前广泛使用的有四环素、多西环素、金霉素、土霉素等，相对来说鸡蛋中较少残留该类药物。
大环内酯类药物，主要作为饲料添加剂以及治疗药物使用，能够加速畜禽生长，促使饲料利用率提高，可作为治疗性兽药使用于无公害食品蛋鸡饲养中，但如果用药不规范就会导致残留现象的发生。
目前，主要使用的有泰乐菌素和红霉素，要求残留量分别控制在每千克含有100 μg和150 μg以下，休药期要控制在7天。
动物性食品中兽药残留的快速检测技术
食品科技动物性食品中兽药残留的快速检测技术郁爱萍（上海市崇明食品药品检验所，上海 202150）摘 要：近年来，我国食品安全事故时有发生，其中不少食品安全事故是由动物性食品中兽药残留超标或违规使用禁用药物导致的。
本文通过综述动物性食品中兽药残留快速检验的方法原理和应用案例，总结各类快速检测方法的优势和不足，为兽药残留检测领域的快速检验提供参考。
关键词：动物性食品；兽药残留；快速检测Rapid Detection of Veterinary Drug Residues in AnimalDerived FoodYU Aiping(Shanghai Chongming Institutes for Food and Drug Control, Shanghai 202150, China) Abstract: In recent years, food safety accidents have occurred frequently in China, many of which are caused by excessive residues of veterinary drugs in animal food or the illegal use of prohibited drugs. The principle and application cases of rapid detection of veterinary drug residues in animal derived foods were reviewed, and the advantages and disadvantages of various rapid detection methods were summarized, so as to provide reference for rapid detection of veterinary drug residues.Keywords: animal derived food; veterinary drug residue; rapid detection食品安全问题已经成为我国社会普遍关注的重大公共安全问题，2021年央视“3·15”晚会曝光了“养羊大县”河北省青县养羊产业中违规使用瘦肉精的问题，问题羊肉流入全国多地，造成了食品安全风险。
动物源性食品中兽药残留快速检测技术研究进展
动物源性食品中兽药残留快速检测技术研究进展动物源性食品中兽药残留快速检测技术研究进展随着畜牧业规模化和产业化，为了防止群体染病事件的发生，同时为了追求利益的最大化，养殖过程中兽药的使用量和使用范围逐渐被扩大化，国家对于兽药的安全使用有很多规定，但因为养殖者对法律法规及相关标准的不了解或受到利益的驱动，滥用、误用兽药，极易造成兽药残留超标。
食品安全监控体系不断发展完善，但兽药残留依然是动物源性食品中安全监管的重点和热点。
我国国家标准中兽药残留的检测方法有气相色谱法、液相色谱法、薄层色谱法、气相色谱-质谱联用法、液相色谱-质谱联用法等[1]，但是这些方法存在预处理复杂、需要配备昂贵的大型仪器、操作繁琐、对人员素质要求高、试验成本高等缺点，不利于进行食品安全监管的现场快速检测；而一些快检技术（如免疫技术、生物传感器技术、拉曼光谱检测技术）具有快捷、简便、成本低等特点，被广泛运用。
对近几年动物源性食品中兽药残留快速检测技术进行综述，重点介绍了酶联免疫技术、生物芯片技术、生物传感器技术、拉曼光谱检测技术等快速检测技术，并对快速检测技术在食品分析领域中，尤其是动物源性食品中兽药残留的应用前景进行了展望。
1 免疫技术1.1 酶联免疫技术酶联免疫技术是由免疫技术与现代测试手段相结合而建立的一种超微量测定技术[2]，对于兽药残留的检测一般采用3种竞争分析模式，即抗体包被直接竞争、抗原包被直接竞争和间接竞争[3]。
Wang L 等人[4]进行胶体金吸附和酶联免疫吸附交叉试验，这2种方法获得良好的相关性，可以快速测试动物源食品中14种磺胺残留。
王忠斌等人[5]建立了氨基糖苷类抗生素多残留的直接竞争ELISA分析方法，快速检测新霉素、卡那霉素、庆大霉素、链霉素等兽药中常用的氨基糖苷类抗生素。
王自良等人[6]研制的苯巴比妥ELISA试剂盒，线性检测范围广，达1.0～81.0 ng/mL，灵敏度高，检测限低。
王选年等人[7]研制的盐酸克伦特罗ELISA试剂盒，线性检测范围为0.5～128.0 ng/mL，与肾上腺素、去甲肾上腺素、莱克多巴胺及多种抗生素均无交叉反应性。
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动物性产品中兽药残留的快速检测方法——ELISA & CharmⅡ一、前言：1、现状目前兽医用药几乎占据了所有抗微生物药物的50%，因此食品病原菌、条件致病菌和共生菌不可避免的成了耐药菌。
在过去的50年中大约有100万吨的抗生素被释放到生物圈中。
欧洲动物卫生联盟（European Federation of Animal Health ，FEDESA）对欧盟和瑞士抗生素使用统计数据表明，仅1997年用于人类健康的抗生素达5460吨，用于动物健康的抗生素达3465吨，用于动物生长促进剂的抗生素达1575吨，并有逐年增加的趋势。
在我国，由于兽医用药制度的不完善及一些养殖厂受经济利益的驱使及相应的检测监督体系不健全，药物的滥用现象更为严重，动物产品中兽药的污染时有发生。
其潜在的致癌、致畸作用引起了社会的普遍关注，由于水产品中氯霉素含量过高，欧盟委员会于今年1月作出禁止中国动物源食品进口的协议，使得我国水产品对欧盟出口严重受挫，虽然现在部分产品开始解禁，但形式依然不容乐观；美国、日本等国也开始高度关注我国水产品的质量，并出台一系列相关政策，对我国出口动物性产品进行限制。
在现代文明的世界，健康第一的贸易法则将是关税、价格、质量所不可比拟的，政治上的友好往来无法替代经济贸易中的游戏规则。
2、食品中兽药残留对人类的危害2.1耐药菌株的产生抗生素使用和细菌耐药性永远是互相依存、互相制约的矛盾的两个方面，细菌耐药非正常增加，往往是抗生素的非正常使用的结果。
早在1920-30年青霉素问世时，Dr Fleming就提出了青霉素的耐药性问题。
随着时代的发展和各种新药的出现，耐药性菌株也接踵而至（即包括药物选择压力的结果也包括细菌自身的进化）。
抗生素的副作用以及耐药菌株的存在将严重威胁着人类的健康，而且临床亚治疗水平的抗生素更容易促使抗性基因的转移，比如对动物进行低水平四环素治疗，其粪肠菌群由对四环素敏感逐渐变成抗四环素最后发展成对其它药物也产生抗性。
在长期的生活中，恰恰是人类和动物肠道的正常菌群成了耐药基因的储存库，并不断的将耐药基因转移给致病菌，并在人和动物中交叉传播，尤其是释放到环境中耐药菌的危害更为严重，可造成耐药基因的迅速转移。
2.2抗生素的毒副作用残留在动物性食品中的抗生素被人们食用后，除了加速人体内耐药菌株的进化之外，抗生素本身的毒副作用往往威胁人类尤其是孕妇和婴儿的健康，这一点在过去往往很容易被忽视。
2.2.1氯霉素主要由Streptomyces venezuelae产生，目前已能人工合成。
它能抑制细菌蛋白质生物合成，其效应部位位于核糖体上，因而对大多数G+菌和G－菌都有杀伤力。
氯霉素的毒副作用较多，其常见的是再生障碍贫血、造血功能紊乱、灰婴综合征、肢体感觉和运动障碍及休克。
虽然氯霉素在动物疾病防治上曾发挥过一定的作用，但由于氯霉素可以产生致命性的副作用，因此欧盟已经在畜牧、水产业生产中禁止使用。
2.2.2 β－内酰胺β－内酰胺类抗生素通过抑制细菌转肽酶的活性而干扰细胞壁肽聚糖的合成，安苄青霉素和青霉素G是该类最常见的两种化合物，由Penicillium chrysogenum产生。
它可以通过胎盘传给胎儿，也能通过乳腺进入乳中。
最常见的副作用是以皮肤出现红斑为主要症状的过敏反应以及胃肠道紊乱引起的腹泻、恶心和呕吐。
2.2.3四环素包括Oxytetracycline (土霉素，OTC)、tetracycline (四环素，TC)、chlortetracycline (金霉素，CTC) 和doxycycline (强力霉素，DC)等。
2.2.4 β－兴奋剂为拟交感神经类药物，该类兴奋剂的受体为β2受体故得名。
该类兴奋剂可以促使肌肉骨骼肌血管壁扩张、支气管和子宫平滑肌松弛。
因而在兽医临床上β2兴奋剂被广泛用作支气管扩张药和子宫松弛药，同时也被非法用作动物营养再分配的促生长剂。
副作用，如：焦躁、震颤、过敏、神智不清、食欲不振、恶心和呕吐等以及心悸、高血压、心律失常、心动过速等心血管症状，其中拟交感神经类物质在组织中的溢出均可导致组织坏死。
2.2.5 雌激素是一种人工合成的非固醇类雌激素，主要用于治疗妇科紊乱、乳房和前列腺恶性肿瘤，为一种致癌物质；在肝脏中代谢缓慢，最终能随尿和粪便排出。
副作用包括：水肿、引起性欲冲动、改变月经周期、乳房异常发育、肝功能改变、胃肠道紊乱、衰竭、头痛、皮肤红斑、风疹。
对于雄性动物来说，大剂量的雌激素可以增加血管栓塞的危险。
此外，雌激素还能引起子宫内膜增生，使患子宫癌的频率增加。
大剂量使用雌激素还可以导致骨骼发育闭合，停止生长。
也能促使生殖道变形，对于雄性动物能使精子变形以及呕吐等。
2.2.6氨基甙类抗生素主要包括庆大霉素、链霉素、新霉素、卡那霉素等，为以氨基环醇和氨基糖相连成核糖单位的多价阳离子复合物。
氨基甙类通过与细菌核糖体不可逆结合而干扰细菌蛋白质的合成，进而导致细胞膜塌陷。
氨基甙类药物的主要副作用是对听觉器官和肾的毒性、过敏反应以及对神经肌肉的影响。
其中，庆大霉素能引起肝功紊乱、外周和中枢神经炎（包括脑炎、呆滞、抽搐）；链霉素能导致神经紊乱，包括视觉神经炎和外周神经炎，以及严重的皮炎、过敏等超敏感反应。
二、兽药残留的快速检测方法目前国际上对抗生素和激素类药物残留的检测主要有仪器分析法（包括HPLC和GC-MS）和生物学快速检测法（如：ELISA、RIA、CharmⅡ等）。
其中，仪器分析法既要求仪器设备具有相当高的精度，也要求技术人员具有一定的操作和分析技能。
作为仪器分析法，其昂贵的价格和软件更新的缓慢以及操作上的烦琐限制了此法的推广；但由于检测的灵敏度可以达到ng水平，在一些国家大型实验室里仍作为检验的参考依据使用。
而生物学快速检测法由于其操作上的简便、快速以及达到ng 水平的灵敏度等优点，以成为动物产品中兽药残留检测的一种重要手段。
尤其是ELISA（酶联免疫吸附试验）和CharmⅡ，其操作上的简便、快速和强烈的信噪比、达到ng水平的灵敏度等优点，其缺陷在于该法会出现假阳性结果，但做为一种快速筛选方法备受技术人员的青睐，在检测部门有着广泛的应用前景。
1、ELISA检测1.1 所需仪器设备酶标仪：常用的有美国的bio-lab(百乐)，Bio-Tex,芬兰Labsystem等，价格在5万人民币左右；氮气吹干仪：美国 Organomatic Associates，2万左右；洗板机（不一定要配置）：与酶标仪相应，价格在3-4万人民币左右；离心机：6000g/min，国产价格在5000左右；均质器：德国IKA，人民币6000左右；（拍式均质器：1-2万）移液器：单道：1550/件，多道：5000/件；恒温培养箱：固相萃取仪：1.2常用ELISA试剂盒英国朗道（RANDOX），德国拜发（r-Biopharm），德国Riedel-deHaen，荷兰E-D，美国NEOGEN，意大利Tecna等。
1.3检测原理(竞争法)1.3.1 抗原抗体的基本结构1.3.2检测的基础是基于抗原抗体的胶体特性与极性基的吸附作用。
抗体的蛋白质（免疫球蛋白），大多数抗原也是蛋白质，在水溶液中都具胶体特性，并带电荷，形成相对稳定的亲水胶体。
同时抗原、抗体含有羧基、氨基及肽链等极性基团，当两者由于理化特性相吻合互相吸引而结合后，成为憎水胶体系统。
抗原和抗体的相互吸引和结合是依靠下列各种分子间引力所促成：库仑吸引力/静电引力，抗原和抗体分子相反电荷的氨基和羧基之间相互吸引而促成；范德华引力，由于抗原和抗体分子的外层电子之间相互作用的扰动产生一种引力，引起分子吸引而发生结合，这种作用取决于分子的空间构型；、-COOH等亲水基团的抗体和相应的抗原接近时，可形成相对微弱和氢键结合作用，具-OH、-NH2可逆的氢键桥梁，使得抗原抗体结合；疏水作用，抗原抗体分子侧链上的某些氨基酸（如亮氨酸、颉氨酸及苯丙氨酸等）为疏水基团，当抗原抗体分子表面上的这些疏水基团密切接触时可排除水分子，在两者之间产生相互吸引力而发生结合。
1.3.3 抗原抗体的结合具有：特异性：取决于抗原决定簇的数量、性质和立体构型；抗体Fab段的高变区和相应抗原决定簇的结合能力. 所以抗原抗体的种类质量直接影响结果可逆行: 结合仅是分子表面的结合,而非共价键的结合,具有相对稳定性但为可逆反应.一定条件下(低PH、冬融、高浓度盐等) 所以缓冲液很重要最适比例性：两者量需具一定的量比关系才发生最强的结合反应。
所以抗原抗体的数量也是重要因素反应具阶段性：受环境中电解质、温度、PH、等因素的影响。
所以在ELISA实验时各种步骤一定要准确到位。
1.3.4以氯霉素为例：酶标板包被针对兔IgG（氯霉素抗体）的羊抗体。
加入氯霉素抗体，氯霉素酶标记物，氯霉素标准液或样品溶液。
游离氯霉素与氯霉素酶标记物竞争氯霉素抗体结合位点，同时氯霉素抗体也与固定的羊抗体结合。
没有结合的氯霉素酶标记物在洗涤步骤中被除去。
将酶基质和发色剂加到板孔中并孵育。
结合的氯霉素酶标记物将无色的发色剂转化为蓝色产物。
加终止液后使颜色由蓝变黄。
用450nm判读，吸光度值与样品中氯霉素含量成反比。
大多数试剂盒包被的是二抗。
RONDOX的试剂盒是直接将氯霉素特异性抗体预包被酶标板上，当在酶标孔中加入样品和酶标记氯霉素后，样品中的氯霉素和酶标记氯霉素竞争抗体结合位点，洗涤后底物显色，加酸终止之后，颜色由蓝变黄。
用450nm判读，颜色深度与样品中氯霉素含量成反比。
不同的ELISA原理直接影响其检测下限、特异性及结果的计算。
1.4 样品的前处理不同样品有其特定的前处理方法，主要有以下几种：1.4.1 有机物抽提法：（氯霉素）利用药物在有机物中的溶解性，达到分离纯化的目的样品均质称量乙晴和或乙酸乙酯抽提离心吹干异辛烷/氯仿或正己烷抽提离心取水相分析1.4.2 离子交换法（如：C18过柱法）（链霉素）离子交换是利用一些带离子基团的物质，吸附交换带相反电荷的蛋白质，将蛋白质按所带电荷不同或量的差异分成不同的组分。
样品称量C18洗柱吸柱干燥洗提吹干缓冲液重悬分析1.4.3 （免疫）亲和层析（雌激素）利用生物大分子的生物学特性而设计的层析分离技术，如利用抗原和抗体、酶和酶的抑制物或配体、激素和受体等之间的亲和力，在一定条件下，两者可紧密结合形成复合物，若将其中一者固定在载体上，则可从溶液中提取和分离相应的另一方，并达到很高的纯度。
现有商品化生产，（方便，减少装柱等繁琐步骤）其操作步骤与上者相似，可以按照试剂盒提供的步骤进行。
1.5酶标免疫分析程序（室温20-240C条件下操作）每一个盒中的试剂足够进行96个测量（包括标准测定孔），以E-D CAP检测试剂盒为例：1）取出试剂盒恢复至室温，充分混均；2）释缓冲液（以ddw）稀释备用（也可用磷酸盐缓冲液，但要）；3）洗缓冲液（以ddw）稀释备用，也可用PBST（磷酸盐土温—20缓冲液）；4）酶标记物的配制：按试剂盒说明配置、混均，2-8度阴暗处保存；5）抗体的配制：按试剂盒说明配置、混均，2-8度阴暗处保存；6）取足够的微空条，记录加样顺序；7）a．吸取100微升稀释缓冲液A1、A2（试剂空白），b．吸取50微升稀释缓冲液到B1、B2（零标准），c．吸取50微升标准液到C—H孔，d．加50微升样品到其余孔；8）加酶标记物和抗体到除A1、A2的所有孔；10）盖膜，震荡1分钟；11）在一定条件下孵育；12）洗板，一定要彻底充分，并且次数固定，推荐用洗板机（百乐）；13）加底物，室温培养（25度）孵育；14）加终止液；15）450nm波长下读数。