乙醛脱氢酶(ALDH)活性检测试剂盒说明书微量法
乙醛脱氢酶测定方法
乙醛脱氢酶测定方法《乙醛脱氢酶测定方法》乙醛脱氢酶是一种重要的酶类，在生物化学研究和临床分析中具有广泛的应用价值。
乙醛脱氢酶的活性测定方法对于研究其功能和机制具有重要意义。
本文将介绍一种常用的乙醛脱氢酶测定方法。
该方法是基于酶促反应的原理，通过观察乙醛脱氢酶催化乙醛氧化生成的产物的酶活性来确定其活性。
操作步骤如下：步骤1：制备试样。
将待测的乙醛脱氢酶样品与适量的缓冲液混合，使最终稀释至一定浓度。
为了保证反应的准确性和可靠性，可以设置空白对照组。
步骤2：加入底物。
将乙醛底物加入试管中，底物的浓度应该控制在一定范围内，以保证反应的线性变化。
同时，添加辅助试剂，以提高酶催化反应的效率。
步骤3：反应进行。
将试管置于适宜的温度下，通常为37℃，并在一定的时间内进行反应。
反应时间的选择应根据具体实验要求进行调整。
步骤4：反应停止。
根据实验需求，在反应一定时间后，使用适当的方法停止反应。
常用的方法有加入酸性或碱性溶液，或通过变温停止反应。
步骤5：测定产物。
通过添加适当的试剂，使产生的酶催化产物发生颜色变化或发光，然后使用分光光度计或荧光测定仪等分析仪器进行测定。
通过比较样品和对照组的吸光度或荧光值，可以得到活性测定结果。
需要注意的是，乙醛脱氢酶活性的测定方法还可以依据具体实验要求进行修饰和改进。
例如，可以根据需求调整底物的浓度范围，或者加入辅助试剂来提高酶催化反应的效率。
综上所述，《乙醛脱氢酶测定方法》是一种常用的乙醛脱氢酶活性测定方法。
通过观察酶催化反应产生的颜色变化或发光，可以得到准确可靠的活性测定结果。
这种方法的优点是操作简便，结果可靠，适用于大量样品的测定。
同时，在研究乙醛脱氢酶功能和机制、临床诊断和药物筛选等领域有着广泛的应用前景。
3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)活性检测试剂盒说明书 微量法
3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC2215规格：100T/96S产品内容：提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：粉剂×1瓶，-20℃保存。
试剂二：液体20mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体12uL×1支，4℃保存。
临用前加入0.4mL蒸馏水充分混匀，或根据比例现配现用；用不完的试剂4℃保存一周。
产品说明：GAPDH（EC1.2.1.12）催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸，是糖酵解途径的关键酶，与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关，在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。
3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3二磷酸甘油酸。
GAPDH逆向催化1,3二磷酸甘油酸和NADH生成3磷酸甘油醛、无机磷和NAD+，340nm处测定NADH的减少量可反映GAPDH活性的高低。
试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后，8000g，4℃，离心20min，取上清，置冰上待测。
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
血清（浆）：直接检测。
二、测定步骤：1、分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至340nm，分光光度计蒸馏水调零。
细胞乙醛脱氢酶2活性比色法定量检测试剂盒产品说明书主001
细胞乙醛脱氢酶2活性比色法定量检测试剂盒产品说明书主要用途细胞乙醛脱氢酶2活性比色法定量检测试剂盒是一种旨在使用乙醛脱氢酶2敏感性抑制剂，通过检测反应系统中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）还原后峰值的增高，即采用比色法来测定细胞裂解萃取液样品中酶活性的权威而经典的技术方法。
该技术由大师级科学家精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种细胞包括胚胎干细胞、神经干细胞等裂解悬液样品（动物、人体等）乙醛脱氢酶2的特异活性检测。
产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。
技术背景乙醛脱氢酶（aldehyde dehydrogenase；ALDH；EC1.2.1.3），又称为乙醛NAD氧化还原酶（aldehyde NAD－oxidoreductase）是一类NAD（P）依赖性酶，催化广谱的外源性或内源性脂肪族和芳香族乙醛类底物氧化，包括乙醇、氨基酸、生物胺（biogenic amine）、维生素、固醇类、脂质、药物和环境分子等代谢产物。
乙醛脱氢酶是乙醇在体内分解代谢过程中两种主要酶之一。
乙醛脱氢酶把乙醛中的两个氢原子脱掉，使乙醛转化为乙酸，生成的乙酸进入脂肪酸氧化途径，最终被氧化成二氧化碳和水。
乙醛脱氢酶主要有两种同工酶：ALDH1和ALDH2。
ALDH1存在于胞液中，ALDH2存在于线粒体中，ALDH2比ALDH1的活性高。
乙醛脱氢酶的缺少，使酒精不能被完全分解为水和二氧化碳，而是以乙醛继续留在体内，使人喝酒后产生恶心欲吐、昏迷不适等醉酒症状。
基于来自于乙醇代谢产生的乙醛（acetaldehyde），在7-羟基-3-（4-羟苯基）-异黄酮-7-糖苷（Daidzein-7-O-β-D-glucopyranoside；Daidzin）存在与否的情况下，由乙醛脱氢酶2的催化作用，转化为乙酸（acetic acid）产物后，通过测定反应体系中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（oxidized reduced nicotinamide adenine dinucleotide；NAD）转化为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide；NADH）的变化（340nm波长），来定量分析乙醛脱氢酶2的特异活性。
细菌乙醇脱氢酶总活性光度法定量检测试剂盒产品说明书(中
细菌乙醇脱氢酶总活性光度法定量检测试剂盒产品说明书（中文版）主要用途细菌乙醇脱氢酶总活性光度法定量检测试剂是一种旨在通过检测反应系统中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD）还原后峰值的增高，即采用光度法来测定细菌裂解样品中酶活性的权威而经典的技术方法。
该技术经过精心研制、成功实验证明的。
其适用于各种细菌菌株裂解悬液样品乙醇脱氢酶的总活性检测。
产品严格无菌，即到即用，操作简捷，性能稳定。
技术背景乙醇脱氢酶（alcohol dehydrogenase；ADH；EC1.1.1.1），又称为乙醇NAD氧化还原酶（alcohol NAD- oxidoreductase），属于氧化还原酶家属成员之一，是一组含有6个亚酶的催化乙醇氧化的锌依赖性金属酶蛋白。
存在于许多生物体中。
通过氧化原发性和继发性醇类分子和半缩醛（hemiacetals），转化产生乙醛或酮。
乙醇脱氢酶分成三类：一类为辅酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（nicotinamide adenine dinucleotide；NAD）或辅酶烟酰胺腺嘌呤二核苷酸磷酸（nicotinamide adenine dinucleotide phosphate；NADP）依赖型；一类为吡咯喹啉醌-，血红素基团、F420（Pyrroloquinoline quinone，haem group，F420）依赖型；一类为黄素腺嘌呤二核苷酸（Flavin adenine dinucleotide）依赖型。
NAD或NADP依赖型乙醇脱氢酶又可以分成三种：一种为锌依赖性的中长链型（350氨基酸残基）；一种为锌非依赖性的短链型（250氨基酸残基）；一种为铁激活性（385氨基酸残基）。
在微生物中，乙醇脱氢酶起着发酵功能。
且用于酒精性饮料、工业溶剂、醋的生产，参与外源性芳香族化合物（xenobiotic aromatic compounds ）的降解，帮助细菌或酵母在甲醇环境中生长。
基于底物乙醇，在乙醇脱氢酶的作用下，转化为乙醛（aldehyde）产物后，通过测定反应体系中氧化型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（oxidized nicotinamide adenine dinucleotide；NAD）转化为还原型烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（reduced nicotinamide adenine dinucleotide；NADH）的变化（340nm 波长），来定量分析乙醇脱氢酶的总活性。
NADH氧化酶(NOX)活性检测试剂盒说明书 微量法
NADH氧化酶（NOX）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC0635规格：100T/48S产品内容：试剂一：液体50mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：液体10mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体1mL×1瓶，-20℃保存。
试剂四：液体35mL×1瓶，4℃保存。
试剂五：液体5mL×1瓶，4℃保存。
试剂六：粉剂×2瓶，-20℃保存；临用前每瓶加入4.5mL双蒸水，用不完的试剂仍-20℃保存。
产品说明：NOX（EC1.6.99.3）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，可在氧气存在下，直接将NADH氧化为NAD。
该酶不仅参与NAD的再生，而且与免疫反应密切相关。
NOX能够将NADH氧化为NAD，NADH的氧化与2,6二氯酚靛蓝（DCPIP）的还原相偶联，蓝色的DCPIP被还原为无色的DCPIP，在600nm下测定蓝色DCPIP的还原速率计算出NADH氧化酶活性的大小。
需自备的仪器和用品：可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、微量玻璃比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水操作步骤：一、样品测定的准备：1、组织、细菌或细胞中胞浆蛋白与线粒体蛋白的分离：2、准确称取0.1g组织或收集500万细胞，加入1mL试剂一和10uL试剂三，用冰浴匀浆器或研钵匀浆。
3、将匀浆600g，4℃离心5min。
4、将上清液移至另一离心管中，11000g，4℃离心10min。
5、将上清液转移至另一EP管中，用于线粒体中泄露NOX活性测定。
6、沉淀即为线粒体，加入200uL试剂二和2uL试剂三，用于NOX活性测定。
7、NOX总酶活即为上清中NOX活性与沉淀中NOX活性之和。
二、测定步骤和加样表：1、可见分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至600nm，蒸馏水调零。
2、试剂四37℃保温放置。
试剂名称（µL）测定管对照管试剂四175175试剂五2525样本1010蒸馏水40试剂六40-将上述试剂按顺序在微量玻璃比色皿/96孔板中操作，加入试剂六后立即混匀，同时开始计时，在600nm 波长下记录20秒时的初始吸光度A1，迅速将比色皿连同反应液一起放入37℃水浴中，准确反应1分钟。
小鼠乙醛脱氢酶(ALDH)说明书
小鼠小鼠乙醛脱氢酶乙醛脱氢酶乙醛脱氢酶（（ALDH)酶联免疫酶联免疫分析分析分析试剂试剂盒使用说明书盒使用说明书盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用。
检测范围检测范围：： 96T0.3µmol/L - 15µmol/L使用目的使用目的：：本试剂盒用于测定小鼠血清、血浆及相关液体样本中乙醛脱氢酶（ALDH)含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中小鼠乙醛脱氢酶（ALDH)水平。
用纯化的小鼠乙醛脱氢酶（ALDH)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入乙醛脱氢酶（ALDH)，再与HRP 标记的乙醛脱氢酶（ALDH)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB 显色。
TMB 在HRP 酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的乙醛脱氢酶（ALDH)呈正相关。
用酶标仪在450nm 波长下测定吸光度（OD 值），通过标准曲线计算样品中小鼠乙醛脱氢酶（ALDH)浓度。
试剂盒组成 1 30倍浓缩洗涤液 20ml ×1瓶 7 终止液 6ml ×1瓶 2 酶标试剂 6ml ×1瓶 8 标准品（24µmol/L ） 0.5ml ×1瓶3 酶标包被板 12孔×8条 9 标准品稀释液 1.5ml ×1瓶4 样品稀释液 6ml ×1瓶 10 说明书 1份5 显色剂A 液 6ml ×1瓶 11 封板膜 2张 6显色剂B 液6ml ×1/瓶12密封袋1个标本标本要求要求1．标本采集后尽早进行提取，提取按相关文献进行，提取后应尽快进行实验。
若不能马上进行试验，可将标本放于-20℃保存，但应避免反复冻融2．不能检测含NaN3的样品，因NaN3抑制辣根过氧化物酶的（HRP ）活性。
操作步骤1. 标准品的稀释：本试剂盒提供原倍标准品一支，用户可按照下列图表在小试管中进行稀释。
丙酮酸脱氢酶(PDH)活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4319
丙酮酸脱氢酶（PDH）活性检测试剂盒说明书注意：本产品试剂有所变动，请注意并严格按照该说明书操作。
货号：UPLC-MS-4319规格：100T/96S微量法产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件试剂一液体110mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体0.6mL×2支-20℃保存试剂三液体7.5mL×2瓶2-8℃保存试剂四液体13mL×1瓶2-8℃保存试剂五粉剂×2支-20℃保存试剂六液体1mL×1支2-8℃保存试剂七液体4mL×1瓶2-8℃保存溶液的配制：1.试剂二：为易挥发试剂，用完后尽快密封，-20℃保存。
2.工作液的配制：临用前把5.75mL试剂四、一支试剂五、0.45mL试剂六、1.75mL试剂七转移到一瓶试剂三中混合溶解待用（共15.45mL，约85T）；用不完的试剂-20℃分装保存，可保存4周。
避免反复冻融。
产品说明：PDH（EC4.1.1.1）广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，是丙酮酸脱氢酶复合体(PDHC)催化丙酮酸氧化脱羧的限速酶，催化丙酮酸脱梭生成羟乙基-TPP，把糖酵解和三羧酸循环连接起来。
PDH催化丙酮酸脱氢，同时还原2,6-二氯酚靛酚（2,6-DCPIP），从而导致605nm光吸收的减少。
Pyruvic Acid+Thiamine Pyrophosphate PDHHydroxyethyl Thiamine PyrophosphateDichlorophenolindophenol(605nm)+Hydroxyethyl Thiamine Pyrophosphate ReducedDichlorophenolindophenol注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
辅酶 I NAD (H)含量检测试剂盒(WST 显色法)说明书__ 微量法UPLC-MS-6008
辅酶I NAD(H)含量检测试剂盒（WST显色法）说明书微量法货号：UPLC-MS-6008规格：100T/48S产品内容：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件酸性提取液液体25mL×1瓶2-8℃保存碱性提取液液体25mL×1瓶2-8℃保存试剂一液体6mL×1瓶2-8℃保存试剂二液体2mL×1瓶2-8℃保存试剂三液体4mL×1瓶2-8℃保存试剂四液体0.9mL×1支-20℃保存试剂五液体15mL×1瓶2-8℃保存NAD标准品粉剂×1支-20℃保存NADH标准品粉剂×1支-20℃保存溶液的配制：1、NAD标准品：临用前加入1.5mL蒸馏水，即2µmol/mL。
-20℃可以保存2周。
2、NADH标准品：临用前加入1.4mL蒸馏水，即2µmol/mL。
-20℃可以保存2周。
产品说明：辅酶I包括还原型和氧化型两种形式，在生物氧化中起传递氢的作用。
氧化型辅酶I又称烟酰胺腺嘌呤二核苷酸（NAD+）是脱氢酶的辅酶，它在糖酵解、糖异生、三羧酸循环和呼吸链中发挥着不可替代的作用。
中间产物会将脱下的氢递给NAD，使之成为NADH（还原型辅酶I）。
而NADH则会作为氢的载体，在呼吸链中通过化学渗透偶联的方式，合成ATP。
NAD(H)在机体内有重要的生理意义，与物质代谢、能量代谢、抗细胞衰老、抗氧化以及一些疾病的发生密切相关。
体内辅酶I含量降低会导致细胞损伤或衰亡。
分别用酸性和碱性提取液提取样本中NAD+和NADH，在1-mPMS作用下，WST-1可与NADH反应，产生水溶性formazan，在450nm下有特征吸收峰，而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH，进一步采用WST-1检测。
Ethanol+NAD+Alcohol Dehydrogenase Acetaldehyde+H++NADHNADH+WST-1+1-mPMS Formazan（450nm）注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
乙醇脱氢酶(ADH)检测试剂盒(乙醛微板法)
乙醇脱氢酶(ADH)检测试剂盒(乙醛微板法)简介：乙醇脱氢酶(Alcohol dehydrogenase，ADH)的系统名为乙醇：辅酶I氧化还原酶（alcohol：NAD+oxidoreductase），大量存在于人和动物肝脏、植物及微生物细胞之中，是一种含锌金属酶，具有广泛的底物特异性。
乙醇脱氢酶够以烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)为辅酶，催化伯醇和醛之间的可逆反应：CH3CH2OH+NAD+→CH3CHO+NADH+ H+。
在人和哺乳动物体内，乙醇脱氢酶与乙醛脱氢酶(ALDH)构成了乙醇脱氢酶系，参乙醇脱氢酶与体内乙醇代谢，是人和动物体内重要的代谢酶。
作为生物体内主要短链醇代谢的关键酶，它在很多生理过程中起着重要作用。
丙酮酸脱羧酶(PDC)、乙醇脱氢酶(ADH)是乙醇发酵途径的关键酶，无氧呼吸途径代谢产物的过程积累对细胞产生毒性，影响线粒体结构和三羧酸循环的相关酶活性。
Leagene乙醇脱氢酶(ADH)检测试剂盒(乙醛微板法)检测原理是在弱碱条件下，以乙醛为底物，乙醛在ADH催化下被NADH还原为乙醇，ADH每催化1分子乙醛消耗1分子NADH，通过分光光度比色法(酶标仪)测定吸光度的变化，计算出NADH的消耗速率进一步推算出乙醇脱氢酶活性水平。
该试剂盒主要用于检测植物样本、血清等中乙醇脱氢酶活性。
该试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。
组成：自备材料：1、研钵或匀浆器2、离心管或试管3、低温离心机4、96孔板5、酶标仪编号名称TE0471100TStorage试剂(A):ADH Lysis buffer250ml4℃避光试剂(B):PMSF1ml-20℃试剂(C):ADH Assay buffer20ml RT试剂(D):NADH1支-20℃使用说明书1份操作步骤(仅供参考)：1、配制ADH Lysis buffer工作液：取出ADH Lysis buffer和PMSF，恢复至室温，ADHLysis buffer：PMSF按一定比例混合，混匀，即配即用，不易久置，否则蛋白酶抑制剂PMSF的效率会有所下降。
乙醛脱氢酶检测
乙醛脱氢酶检测
乙醛脱氢酶（Acetaldehyde dehydrogenase），是醛脱氢酶的一种，负责催化乙醛氧化为乙酸的反应，肝中的乙醇脱氢酶负责将乙醇（酒的成分）氧化为乙醛，生成的乙醛作为底物进一步在乙醛脱氢酶催化下转变为无害的乙酸（即醋的成分）。
已知人类的乙醛脱氢酶由三个基因所编码：ALDH1A1、ALDH2及最近发现的ALDH1B1（亦称ALDH5）。
迪信泰检测平台采用生化的方法检测辅酶类物质，使用相应的酶类的试剂盒可以高效、精准的检测乙醛脱氢酶。
此外，我们还提供其他辅酶类的检测服务，以满足您的不同需求。
生化法测定乙醛脱氢酶样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）
2. 相关参数（中英文）
3. 图片
4. 原始数据
5. 乙醛脱氢酶活性信息。
乙醛脱氢酶测定方法
乙醛脱氢酶测定方法
需要注意的是，具体的实验步骤和条件可能因实验目的、样品类型和实验室设备而有所不 同。在进行乙醛脱氢酶测定前，应参考相关的步骤： 1. 准备一组试管，每个试管中加入以下试剂（体积可根据需要调整）： - 0.1 M 磷酸盐缓冲液 1 mL - 0.1 M 乙醛溶液 0.1 mL - 待测样品 0.1 mL（如果有） 2. 在每个试管中加入适量的乙醛脱氢酶溶液，使最终体积为2 mL。 3. 在每个试管中加入适量的NAD+溶液，使最终体积为3 mL。 4. 将试管放入37°C的恒温水浴中，孵育一定时间（通常为10-30分钟）。
乙醛脱氢酶测定方法
5. 孵育结束后，使用分光光度计测量每个试管中的吸光度。乙醛脱氢酶催化乙醛氧化生 成乙酸，同时还伴随着NAD+还原为NADH。通过测量NADH的吸光度变化，可以间接测定 乙醛脱氢酶的活性。
6. 使用一个空白试管作为对照，其中不加入乙醛溶液，其他步骤相同。
3. 数据分析： - 计算每个试管的吸光度差值（样品试管减去空白试管）。 - 根据已知的标准曲线或对照样品，将吸光度差值转换为乙醛脱氢酶的活性。
乙醛脱氢酶测定方法
乙醛脱氢酶（aldehyde dehydrogenase，ALDH）是一种酶，主要参与乙醛的代谢过程 。以下是一种常用的乙醛脱氢酶测定方法：
1. 材料准备： - 0.1 M 磷酸盐缓冲液（pH 7.4） - 0.1 M 乙醛溶液 - 0.1 M NAD+（辅酶）溶液 - 待测样品
乙醛脱氢酶测定方法
乙醛脱氢酶测定方法
乙醛脱氢酶测定方法
乙醛脱氢酶测定方法主要包括以下步骤：
1. 准备试样：收集需要测定乙醛脱氢酶活性的生物样品，如血液、组织或细胞提取物。
2. 制备试剂：配制乙醛脱氢酶活性测定所需的缓冲液和底物。
缓冲液通常为磷酸盐缓冲液，pH值通常为7.4。
底物一般为乙醛。
3. 反应体系建立：将准备好的试样和试剂混合，加入乙醛脱氢酶底物和缓冲液，建立乙醛脱氢酶反应体系。
4. 反应过程：将乙醛脱氢酶反应体系放置于适当的温度下（通常为37℃），反应一定时间。
5. 反应终止：通过加入适当的反应终止剂，如硫酸，停止乙醛脱氢酶反应。
6. 产物测定：使用测定乙醛脱氢酶产物的方法，如酶偶联法、光度法或荧光法等，测定乙醛脱氢酶的活性。
7. 数据分析：根据产物的测定结果，计算出乙醛脱氢酶的活性，并进行数据统计和分析。
需要注意的是，在进行乙醛脱氢酶测定方法时，应严格控制实
验条件，如温度、反应时间等，以确保测定结果的准确性和可重复性。
大鼠乙醛脱氢酶(ALDH)酶联免疫分析 试剂盒 说明书
大鼠乙醛脱氢酶（ALDH）酶联免疫分析试剂盒使用说明书本试剂盒仅供研究使用预期应用ELISA法定量测定大鼠血清、血浆或其它相关液体中乙醛脱氢酶（ALDH）含量。
实验原理本试剂盒应用双抗体夹心酶标免疫分析法测定标本中乙醛脱氢酶水平。
用纯化的抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入乙醛脱氢酶抗原、生物素化的抗大鼠乙醛脱氢酶抗体、HRP标记的亲和素，经过彻底洗涤后用底物TMB显色。
TMB在过氧化物酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。
颜色的深浅和样品中的乙醛脱氢酶呈正相关。
用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），计算样品浓度。
试剂盒组成及试剂配制1.酶联板：一块（96孔）标准品（冻干品）：2瓶，每瓶临用前以样品稀释液稀释至1ml，盖好后静置10分钟以上，然后反复颠倒/搓动以助溶解，其浓度为100ng/ml，做系列倍比稀释后，分别稀释100ng/ml，50ng/ml，25ng/ml，12.5ng/ml，6.25ng/ml，3.12ng/ml，1.56ng/ml，样品稀释液直接作为标准浓度0ng/ml，临用前15分钟内配制。
如配制50ng/ml标准品：取0.5ml100ng/ml的上述标准品加入含有0.5ml样品稀释液的Eppendorf管中，混匀即可，其余浓度以此类推。
2.样品稀释液：1×20ml/瓶。
3.检测稀释液A：1×10ml/瓶。
4.检测稀释液B：1×10ml/瓶。
5.检测溶液A：1×120ul/瓶（1:100）临用前以检测稀释液A1:100稀释，稀释前根据预先计算好的每次实验所需的总量配制（每孔100ul），实际配制时应多配制0.1-0.2ml。
如1ul检测溶液A加99ul检测稀释液A的比例配制，轻轻混匀，在使用前一小时内配制。
6.检测溶液B：1×120ul/瓶（1:100）临用前以检测稀释液B1:100稀释。
乙醛脱氢检测实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解乙醛脱氢酶的活性测定原理和方法。
2. 学习使用分光光度法检测乙醛脱氢酶活性。
3. 掌握实验操作技能，提高实验数据分析能力。
二、实验原理乙醛脱氢酶是一种酶，能将乙醛氧化成乙酸，同时自身被还原。
在反应过程中，NADH被氧化成NAD+，NADH在340nm处的吸光度发生变化，通过测定吸光度变化，可以计算出乙醛脱氢酶的活性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 乙醛溶液- NADH溶液- 乙醛脱氢酶- Tris-HCl缓冲液（pH 7.8）- 硫酸铵- 氯化钠- 丙酮- 磷酸盐缓冲液- 光度计2. 实验仪器：- 电子天平- 恒温水浴锅- 移液器- 离心机- 烧杯- 试管四、实验步骤1. 配制工作液：- 称取乙醛脱氢酶，用Tris-HCl缓冲液（pH 7.8）溶解，配制成一定浓度的酶溶液。
- 称取NADH，用Tris-HCl缓冲液（pH 7.8）溶解，配制成一定浓度的NADH溶液。
- 称取硫酸铵、氯化钠、丙酮，用Tris-HCl缓冲液（pH 7.8）溶解，配制成一定浓度的底物溶液。
2. 检测乙醛脱氢酶活性：- 将乙醛溶液、NADH溶液、乙醛脱氢酶溶液、Tris-HCl缓冲液（pH 7.8）按照一定比例混合，置于恒温水浴锅中保温5分钟。
- 取一定量的混合液，加入磷酸盐缓冲液，使pH值调整为7.8。
- 将混合液置于光度计中，在340nm处测定吸光度。
- 每隔一定时间，重复测定吸光度，直至吸光度变化趋于稳定。
3. 数据处理：- 根据吸光度变化，计算乙醛脱氢酶的活性。
五、实验结果与分析1. 实验结果：- 乙醛脱氢酶活性为XX U/mg蛋白质。
2. 分析：- 通过本实验，成功测定了乙醛脱氢酶的活性。
- 实验结果符合预期，说明实验操作正确，实验原理正确。
六、实验讨论1. 实验过程中，需要注意以下几点：- 操作要准确，避免误差。
- 控制好反应条件，如温度、pH值等。
- 定期检测吸光度，确保实验数据的准确性。
人乙醛脱氢酶2ALDH2定量检测试剂盒ELISA-艾恩斯生物科技
仅供科研使用，不得用于临床检验。
人乙醛脱氢酶2（ALDH2）定量检测试剂盒（ELISA）说明书货号：INS-1011652使用前，请务必仔细阅读说明书，如有不清楚的，请拨打24h技术支持专线：************或181****9172，咨询清楚再进行实验。
黄石市艾恩斯生物科技有限公司网址：电话：************【产品名称】通用名称：人乙醛脱氢酶2（ALDH2）定量检测试剂盒（ELISA）英文名称：Human aldehyde dehydrogenase 2 ELISA KIT【包装规格】48人份/盒，96人份/盒【预期用途】仅供科研使用，定量检测血清、血浆、细胞培养上清液中人乙醛脱氢酶2（ALDH2）的浓度。
【检验原理】本试剂盒采用双抗体夹心酶联免疫吸附试验（ELISA）。
在预包被抗人乙醛脱氢酶2（ALDH2）抗体（固相抗体）的微孔酶标板中，加入人乙醛脱氢酶2（ALDH2）校准品和待测样本，再加入另一株HRP标记的抗人乙醛脱氢酶2（ALDH2）抗体（酶标抗体），经过温育与充分洗涤，去除未结合的组分，在微孔板固相表面形成固相抗体-抗原-酶标抗体的夹心复合物。
加底物A和B，底物在HRP催化下，产生蓝色产物，在终止液（2M 硫酸）作用下，最终转化为黄色，在酶标仪上测定吸光度（OD值），吸光度（OD值）与待测样品中人乙醛脱氢酶2（ALDH2）的浓度正相关。
拟合校准品曲线，可以计算出样本中人乙醛脱氢酶2（ALDH2）的浓度。
【主要组成成分】主要成分组分数量主要成分校准品0.5ml/管*6管抗原配制的6个浓度标准品包被微孔板96T预包被固相抗体HRP标记抗体6mL HRP标记的检测抗体样本稀释液6mL磷酸盐缓冲液底物液A6mL过氧化脲工作液底物液B6mL TMB工作液终止液6mL2M 硫酸20×浓缩洗涤液30mL含0.15%Tween20的PBS 说明书1份--自封袋1个--不干胶2片--校准品浓度依次为：120、60、30、15、7.5、3.75 U/L。
乙醛脱氢酶(ALDH)活性检测试剂盒说明书微量法
乙醛脱氢酶（ALDH）活性检测试剂盒说明书微量法注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC0755规格：100T/96S产品内容：提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体10mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂40mg×1瓶，-20℃避光保存。
临用前加入3mL蒸馏水溶解，-20℃分装保存；或者按比例现用现配。
试剂三：液体0.5mL×1支，4℃避光保存。
试剂四：液体1mL×1支，4℃保存。
试剂五：液体2mL×1瓶，4℃保存。
产品说明：乙醛脱氢酶(EC 1.2.1.10)是醛脱氢酶的一种，广泛存在于各种动物、植物和微生物体内。
在辅酶I 的存在下，它催化乙醇在内的某些一级或二级醇、醛或酮的脱氢反应。
在人类和许多动物体内，线粒体乙醛脱氢酶能把对生物体有害的醇类转化，所以在细胞解毒研究中乙醛脱氢酶受到高度关注；同时，乙醛脱氢酶在分子生物学以及相关疾病的检测方面有较广泛的研究应用。
乙醛脱氢酶催化乙醛和NAD+转化为乙酸和NADH，利用NADH在340nm处吸光值的变化即可计算得到乙醛脱氢酶的活性。
试验中所需的仪器和试剂：紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、粗酶液提取：组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后，10000g，4℃，离心20min。
细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000g，4℃，离心20min，取上清置于冰上待测。
液体：直接检测。
二、测定步骤：1、紫外分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
3-磷酸甘油醛脱氢酶(GAPDH)活性检测试剂盒说明书__微量法UPLC-MS-4201
3-磷酸甘油醛脱氢酶（GAPDH）活性检测试剂盒说明书货号:UPLC-MS-4201规格:100T/96S微量法产品组成：使用前请认真核对试剂体积与瓶内体积是否一致，有疑问请及时联系工作人员。
试剂名称规格保存条件提取液液体100mL×1瓶4℃保存试剂一粉剂×1瓶-20℃保存试剂二液体20mL×1瓶4℃保存试剂三液体12µL×1瓶4℃保存溶液的配制：1、试剂三：液体置于试剂瓶内EP管中。
根据用量按照试剂三:蒸馏水为3:100的体积比例充分混匀，现用现配；2、工作液的配制：将试剂二全部倒入试剂一瓶中，充分溶解，根据需要取一定的量37℃（哺乳动物）或25℃（其它物种）预热10min；用不完的试剂分装后-20℃保存，禁止反复冻融。
产品说明：GAPDH（EC1.2.1.12）催化3-磷酸甘油醛氧化生成1,3-二磷酸甘油酸，是糖酵解途径的关键酶，与糖异生途径、体内血糖浓度的维持和糖尿病的发生密切相关，在机体糖、脂、蛋白代谢紊乱疾病中发挥重要作用。
3-磷酸甘油酸激酶催化三磷酸甘油酸和ATP生成1,3-二磷酸甘油酸。
GAPDH逆向催化1,3-二磷酸甘油酸和NADH生成3-磷酸甘油醛、无机磷和NAD+，340nm处测定NADH的减少量可反映GAPDH活性的高低。
注意：实验之前建议选择2-3个预期差异大的样本做预实验。
如果样本吸光值不在测量范围内建议稀释或者增加样本量进行检测。
需自备的仪器和用品：紫外分光光度计/酶标仪、低温离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：一、样本处理（可适当调整待测样本量，具体比例可以参考文献）组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后，8000g，4℃，离心20min，取上清，置冰上待测。
细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20%或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；8000g4℃离心10min，取上清，置冰上待测。
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乙醛脱氢酶（ALDH）活性检测试剂盒说明书微量法
注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。
货号：BC0755
规格：100T/96S
产品内容：
提取液：液体100mL×1瓶，4℃保存。
试剂一：液体10mL×1瓶，4℃保存。
试剂二：粉剂40mg×1瓶，-20℃避光保存。
临用前加入3mL蒸馏水溶解，-20℃分装保存；或者按比例现用现配。
试剂三：液体0.5mL×1支，4℃避光保存。
试剂四：液体1mL×1支，4℃保存。
试剂五：液体2mL×1瓶，4℃保存。
产品说明：
乙醛脱氢酶(EC 1.2.1.10)是醛脱氢酶的一种，广泛存在于各种动物、植物和微生物体内。
在辅酶I 的存在下，它催化乙醇在内的某些一级或二级醇、醛或酮的脱氢反应。
在人类和许多动物体内，线粒体乙醛脱氢酶能把对生物体有害的醇类转化，所以在细胞解毒研究中乙醛脱氢酶受到高度关注；同时，乙醛脱氢酶在分子生物学以及相关疾病的检测方面有较广泛的研究应用。
乙醛脱氢酶催化乙醛和NAD+转化为乙酸和NADH，利用NADH在340nm处吸光值的变化即可计算得到乙醛脱氢酶的活性。
试验中所需的仪器和试剂：
紫外分光光度计/酶标仪、台式离心机、水浴锅、微量石英比色皿/96孔UV板、可调式移液枪、研钵/匀浆器、冰和蒸馏水。
操作步骤：
一、粗酶液提取：
组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液）进行冰浴匀浆，然后，10000g，4℃，离心20min。
细胞：按照细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细胞加入1mL 提取液），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；然后10000g，4℃，离心20min，取上清置于冰上待测。
液体：直接检测。
二、测定步骤：
1、紫外分光光度计/酶标仪预热30min以上，调节波长至340nm，蒸馏水调零。
2、将试剂一37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）预热15min。
3、操作表：
试剂名称空白管测定管
样本（µL）40
蒸馏水（µL）10060
试剂一（µL）6060
试剂二（µL）2020
试剂三（µL）44
试剂四（µL）66
试剂五（µL）1010
在微量石英比色皿/96孔UV板中分别加入上述试剂，充分混匀后于340nm处测定30s时的吸光值A1，迅速置于37℃（哺乳动物）或25℃（其他物种）水浴或培养箱1min（酶标仪有控温功能可将温度调至37℃或25℃），拿出迅速擦干测定90s时的吸光值A2，计算△A测定管=A2测定-A1测定，△A空白管=A2空白-A1空白，△A=△A测定管-△A空白管。
空白管只需做一次。
三、ALDH酶活计算
1、按微量石英比色皿计算：
（1）按蛋白浓度计算
酶活定义：每毫克蛋白每分钟催化还原1nmol NAD+的酶量为1个酶活单位。
ALDH酶活（U/mg prot）=△A÷（ε×d）×109×V反总÷（V样×Crp）÷T=804×△A÷Cpr
（2）按样本质量计算
酶活定义：每克样品每分钟催化还原1nmol NAD+的酶量为1个酶活单位。
ALDH酶活（U/g鲜重）=△A÷（ε×d）×109×V反总÷（V样×W÷V样总）÷T
=804×△A÷W
（3）按照细胞数量计算
酶活定义：每104个细胞每分钟催化还原1nmol NAD+的酶量为1个酶活单位。
ALDH酶活（U/104cell）=△A÷（ε×d）×109×V反总÷（V样÷V样总×细胞数量（万个））÷T
=804×△A÷细胞数量（万个）
（4）按液体体积计算
酶活定义：每mL样本每分钟催化还原1nmol NAD+的酶量为1个酶活单位。
ALDH酶活（U/mL）=△A÷（ε×d）×109×V反总÷V样÷T=804×△A
ε：NADH摩尔消光系数，6.22×103L/mol/cm；d：比色皿光径，1cm；
V反总：反应体系总体积，2×10-4L；V样：反应体系中样本体积，0.04mL；
Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL需自行测定；W：样本质量，g；
T：反应时间，1min；109：单位换算系数，1mol=109nmol。
2、按96孔UV板计算：
将上述公式中的d-1cm改为d-0.6cm（比色皿光径）进行计算即可。
注意事项：
1、空白管为检测各试剂组分质量的检测孔，正常情况下，其OD值不超过0.3，变化不超过0.01。
2、△A大于1时，建议将样品稀释后再进行测定。
当△A小于0.01时，可以延长反应时间（5min或10min）
来测定。
3、试剂五沸点低，在使用时保持低温以保证正确的吸取量。