显微分析技术.72页PPT
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《显微分析》PPT课件
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在荧光屏或感光底片上成像
透射显微镜 构造原理和
光路
b) 透射光学 显微镜
a) 透射电子显微镜
图8-3 TEM与透射光学显微镜的构造原理和光路
• 物镜(M0)用来获得被检物的一次放大像和衍射谱，它决定 显微镜的分辨率，是电镜的心脏．中间镜(Mi)是个可变倍 率的弱透镜，它的作用是把物镜形成一次中间像或衍射谱 射到投影镜的物面上．投影镜(Mp)把中间镜形成的二次像 及衍射谱放大到荧光屏上，一般具有2—3个聚光镜和4—6 个物镜加投影镜。
8. 主要作用： 用于选区衍射，也就是选择样品上的一个
Ⅰ 点分辨本领的测定
将铂、铂-铱或铂-钯等金属或合金，用真 空蒸发的方法获得粒度为5~10埃，间距为2~10 埃的粒子，将其均匀地分布在火棉胶（或碳） 支持膜上，在高放大倍数下拍摄这些粒子的像， 并经光学放大（5倍左右），从照片上找出粒 子间最小的间距，除以总放大倍数，即为相应 电子显微镜的点分辨本领。
创造了相衬显微术。
二、 电子束与固体样品相互作用
如图，当高能电子束轰 击样品表面时，由于入 射电子束与样品间的相 互作用，99％以上的入 射电子能量将转变成热 能，其余约1％的入射电 子能量，将从样品中激 发出各种有用的信息， 它们包括：
图8-1 电子与试样作用产生的信息 1-大倍数等于成像系统各透镜放大倍数的乘积． 即：
M＝Ｍ0×Mi×Mp
2 镜筒内为什么保持高真空状态
3 ⑴ 防止高速电子受空气分子碰撞而改变运 动轨迹；
4 ⑵ 避免因空气分子电离而引起放电而破坏 了电子枪电极间的绝缘；
5 ⑶ 避免阴极氧化及样品污染。
3 为什么使用电磁透镜？
使用静电透镜（用电场聚焦）需要高 压，给设备的设计和操作带来不便。
生物显微技术ppt课件
G. 氯化汞 性质：无色粉末，剧毒
优点：渗透力强，对蛋白质有强烈的沉淀 作用
缺点：材料收缩
*常与甲醛、冰醋酸、丙酸等配合使用。 用碘除汞
H. 碘 性质：棕红色晶体
优点：渗透力强，野外使用方便
缺点：易挥发，标本不能长期保存
*溶于碘化钾溶液配置固定液；使用时可与 福尔马林配合使用。是低等单细胞生物、 浮游生物的良好固定液
有必要，必须采用与固定剂中的酒精浓度相同或相近 的酒精。
2.凡是含有铬酸、重铬酸钾、锇酸的固定剂，必须用流 水冲洗，冲洗时间应等于或多于固定时间。
3.如固定液中含有氯化汞，应根据溶液的性质用水或酒 精冲洗，冲洗完毕必须在70%酒精中加碘液去汞 。
4.含有苦味酸的固定剂，宜选用70%的酒精进行洗涤。苦 味酸的黄色在70%酒精中能自行脱去,或加入碳酸钾饱 和水溶液除去。
I. 锇酸 性质：灰黄色结晶，强氧化剂，剧毒
优点：目前最好的固定剂之一，脂类物质 唯一的固定剂
缺点：渗透力弱，组织固定不均匀，价格 昂贵
*取材较小，固定后用过氧化氢漂洗
第二节 洗涤和脱水
一、洗涤的目的和原则
洗涤的目的：将组织间隙中的固定剂清洗干净以免妨碍 染色或使材料在后续处理中变质。
洗涤的原则: 1.固定剂为酒精，或酒精混合物，一般不要求冲洗，如
第二章 光学透镜 第二节 凸透镜成像
➢ 显微镜的物镜、目镜和聚光镜都是由多个单透 镜或复透镜组成的透镜组，但其实质上只相当 于一个凸透镜。凹透镜所成的像总是缩小的虚 像，在显微镜上不能单独使用。
第七节 脱蜡与染色
四、染色过程中使用的其他辅助试剂
a. 媒染剂
有的染料不能直接使细胞或组织着色。媒染 剂通常能在水中电离金属离子（金属盐类或 金属氧化物）而与染料结合成有色复盐（不 溶于水或酒精）
《生物显微技术》课件
详细描述
荧光显微镜在观察细胞和组织时，利用荧光物质对样品进行 标记。这些荧光物质在特定波长的光激发下发出荧光，通过 显微镜的观察和记录，可以了解细胞内分子的分布和动态变 化。
共聚焦显微镜观察法
总结词
共聚焦显微镜采用点扫描方式，逐层 扫描样品，获得高分辨率的三维图像 。
详细描述
共聚焦显微镜采用点扫描方式，逐层 扫描样品，并对每个点进行聚焦成像 。这种技术能够获得高分辨率的三维 图像，适用于观察细胞和组织的结构 和动态变化。
分子生物学研究
检测基因表达、蛋白质合成等分子水平的变化。
生态学研究
观察和研究动植物种群、群落和生态系统结构与 功能。
环境监测中的应用
1 2
污染物检测
检测水体、土壤和空气中的有害物质，评估环境 质量。
生态监测
观察和记录动植物种群变化、生态系统健康状况 。
3
放射性监测
检测放射性物质，保障人类和环境安全。
达和定位。
荧光染色
利用荧光染料对细胞或 组织进行染色，以便于 在显微镜下观察和记录
。
特殊染色
针对某些组织或细胞类 型，使用特殊的染色方
法以显示其特征。
观察与记录
显微镜操作
调整显微镜焦距、光线等参数，以便清晰观 察组织结构和细胞形态。
记录方式
采用拍照、绘图或文字描述等方式记录观察 结果。
观察目标
观察组织样本中的细胞形态、排列、结构以 及抗原表达等情况。
目前，生物显微技术已经 广泛应用于生物学、医学 、农业等领域的基础研究 和应用研究。
应用领域
生物学
研究细胞结构、细胞器功能、 基因表达等。
医学
诊断疾病、研究药物作用机制 、观察病理组织等。
荧光显微镜在观察细胞和组织时，利用荧光物质对样品进行 标记。这些荧光物质在特定波长的光激发下发出荧光，通过 显微镜的观察和记录，可以了解细胞内分子的分布和动态变 化。
共聚焦显微镜观察法
总结词
共聚焦显微镜采用点扫描方式，逐层 扫描样品，获得高分辨率的三维图像 。
详细描述
共聚焦显微镜采用点扫描方式，逐层 扫描样品，并对每个点进行聚焦成像 。这种技术能够获得高分辨率的三维 图像，适用于观察细胞和组织的结构 和动态变化。
分子生物学研究
检测基因表达、蛋白质合成等分子水平的变化。
生态学研究
观察和研究动植物种群、群落和生态系统结构与 功能。
环境监测中的应用
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污染物检测
检测水体、土壤和空气中的有害物质，评估环境 质量。
生态监测
观察和记录动植物种群变化、生态系统健康状况 。
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放射性监测
检测放射性物质，保障人类和环境安全。
达和定位。
荧光染色
利用荧光染料对细胞或 组织进行染色，以便于 在显微镜下观察和记录
。
特殊染色
针对某些组织或细胞类 型，使用特殊的染色方
法以显示其特征。
观察与记录
显微镜操作
调整显微镜焦距、光线等参数，以便清晰观 察组织结构和细胞形态。
记录方式
采用拍照、绘图或文字描述等方式记录观察 结果。
观察目标
观察组织样本中的细胞形态、排列、结构以 及抗原表达等情况。
目前，生物显微技术已经 广泛应用于生物学、医学 、农业等领域的基础研究 和应用研究。
应用领域
生物学
研究细胞结构、细胞器功能、 基因表达等。
医学
诊断疾病、研究药物作用机制 、观察病理组织等。
显微操作技术(全面)PPT课件
1979年Willadsen和Meineck-Tillman等成功 地进行了绵羊早期胚胎的分割。
20世纪80年代以后，哺乳动物胚胎分割技术 发展迅速，Willadsen等在总结前人经验的基础上， 建立了系统分割方法，并运用这种方法获得绵羊的 四分之一和八分之一胚胎后代和牛的四分之一胚胎 后代。
（二）胚胎切割技术
干细胞应用前景非常广阔，比如可用于细胞治疗、 基因治疗、药物筛检和毒性的检测、生物体发育机制 研究等。其中最吸引人的应用，是将干细胞分化成某 一特定的细胞、组织，甚至器官，通过移植，使之再 建起受损的组织，甚至器官。比如，将干细胞在体外 分化为胰岛素细胞，注入病人胰脏中，通过增殖，构 成病人新的胰岛组织，它就可以替代病人受损的胰岛 组织，使依赖注射胰岛素维持生命的病人得到根治。 人们预言，干细胞有可能用于治疗人类几乎所有的组 织坏死性或退化性疾病，它将是人类医疗史上的一次 革命。
近些年来，胚胎移植技术已在动物引种和改 良方面广泛应用，已成为体外受精、嵌合体、转 基因和克隆动物实现的应用技术，试管牛、转基 因猪和克隆羊均是通过胚胎移植途径生出的。
(二)胚胎移植的基本原则
1.胚胎移植前后所处环境的同一性 （１）供体和受体在分类学上的相同属性 （２）动物生理上的一致性 （３）动物解剖部位的一致性 2.胚胎发育的期限 3.胚胎的质量
• 早期胚胎一定时间内处于游离状态
• 供体和受体会不会发生排斥/
• 同种动物之间基本上不排斥
生 理 学
• 为什么移植的胚胎能保留供体双亲的特性?
基
• 胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系,但遗传特性不受受体的影响
础
.
胚胎移植的技术程序
胚胎移植时，希望一次从 供体母畜得到多数胚胎，所以 要进行超数排卵处理，同时， 胚胎移植成功的根本条件是供 体和受体必须同时发情，故需 人为控制供受体的发情时间， 进行同期化处理。
20世纪80年代以后，哺乳动物胚胎分割技术 发展迅速，Willadsen等在总结前人经验的基础上， 建立了系统分割方法，并运用这种方法获得绵羊的 四分之一和八分之一胚胎后代和牛的四分之一胚胎 后代。
（二）胚胎切割技术
干细胞应用前景非常广阔，比如可用于细胞治疗、 基因治疗、药物筛检和毒性的检测、生物体发育机制 研究等。其中最吸引人的应用，是将干细胞分化成某 一特定的细胞、组织，甚至器官，通过移植，使之再 建起受损的组织，甚至器官。比如，将干细胞在体外 分化为胰岛素细胞，注入病人胰脏中，通过增殖，构 成病人新的胰岛组织，它就可以替代病人受损的胰岛 组织，使依赖注射胰岛素维持生命的病人得到根治。 人们预言，干细胞有可能用于治疗人类几乎所有的组 织坏死性或退化性疾病，它将是人类医疗史上的一次 革命。
近些年来，胚胎移植技术已在动物引种和改 良方面广泛应用，已成为体外受精、嵌合体、转 基因和克隆动物实现的应用技术，试管牛、转基 因猪和克隆羊均是通过胚胎移植途径生出的。
(二)胚胎移植的基本原则
1.胚胎移植前后所处环境的同一性 （１）供体和受体在分类学上的相同属性 （２）动物生理上的一致性 （３）动物解剖部位的一致性 2.胚胎发育的期限 3.胚胎的质量
• 早期胚胎一定时间内处于游离状态
• 供体和受体会不会发生排斥/
• 同种动物之间基本上不排斥
生 理 学
• 为什么移植的胚胎能保留供体双亲的特性?
基
• 胚胎虽然与受体有生理和组织上的联系,但遗传特性不受受体的影响
础
.
胚胎移植的技术程序
胚胎移植时，希望一次从 供体母畜得到多数胚胎，所以 要进行超数排卵处理，同时， 胚胎移植成功的根本条件是供 体和受体必须同时发情，故需 人为控制供受体的发情时间， 进行同期化处理。
第七章显微分析法 ppt课件
➢按光源分 ✓普通白光显微镜：自然光、可见光 ✓红外光显微镜：与红外光谱联用作微区定性定量分析 ✓紫外光显微镜：以紫外线或近紫外为光源 ✓X射线显微镜：以X射线为光源，分辨率极高
For Polymer： 偏光显微镜、干涉显微镜、相差显微镜、金相显微镜
偏光显微镜的结构及原理
➢黑十字消光原理
相差显微镜
a
b
c
d
e
f
SEM images of poly(NB-co-NB-COOCH3) electrospun fibers with 7.9% NB-COOCH3 molar ratio at different magnification.
a
b
c
d
Structures of surface layer (a, b) and cross section (c, d) for poly(NB-
Ernst Ruska(1986 Nobel Prize)
透射电镜的结构
透射电镜的明、暗场及衍射模式
透射电镜的功能及发展
从1934年第一台透射电子显微镜诞生以来，75 年的时间里它得到了长足的发展。这些发展主 要集中在三个方面。 •透射电子显微镜的功能的扩展； •分辨率的不断提高（ HREM ）； •将计算机和微电子技术应用于控制系统、观察 与记录系统等。
➢按光源照射方式分
✓透射光显微镜：入射光透过样品进入物镜与目镜， 主要用于透明样品的观察
✓反射光显微镜：主要用于不透明物体的观察，光线 从侧面或垂直方向照射到样品表面，由反射光分析样 品的形态
✓暗场显微镜：对于超微粒子（尺寸小于0.1μm）， 小于显微镜的分辨率极限，亮场不能发现，在暗的背 景下，用斜照法阻挡透过表体细节的直射光，利用粒 子的散射光能观察到亮的微粒子像
第六章--光学显微分析PPT课件
-
6
6.2 单偏光镜下晶体的光学性质
研究对象:岩石薄片
-
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6.2 单偏光镜下晶体的光学性质
可观察的内容： （1）矿物的外表特征，如形态、解理等；
（2）与矿物对光波的吸收有关的光学性质，如颜色、 多色性、吸收性等；
（3）与矿物的折射率有关的光学性质，如突起，糙面， 轮廓，贝克线等。
-
8
6.2 单偏光镜下晶体的光学性质
由包裹物的成分和形态可分析晶体生长时的物理化学环境。
-
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6.2 单偏光镜下晶体的光学性质
6.2.1晶体形态
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6.2单偏光镜下晶体的光学性质
6.2.2 解理及解理夹角
1.解理—晶体沿着一定方向裂开成光滑平面的性质。 许多矿物具有解理，但不同矿物的解理完善程度、解理方 向、解理组数等内容不同，可作为鉴定矿物的特征之一。
②与切片方向 有关（如 ⊥OA切面上 无多色性）；
③与切片厚度 有关（切片越 厚，多色性越 明显）。
-
24
6.2单偏光镜下晶体的光学性质
6.2.4矿物的轮廓、贝克线、糙面及突起
1、轮廓与贝克线
在薄片中二折射率不同的 介质接触处，可看到较暗 的边缘——轮廓；在轮廓 的附近可见到一条明亮的 细线——贝克线。升降镜 筒，贝克线发生移动。
原因：薄片中解理逢被树胶充 填，二者折射率不等，即可见 解理缝。
清晰度：
①与解理的完全程度有关；
②与晶体和树胶的折射率差值 有关；
③与切片方向有关。
-
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6.2单偏光镜下晶体的光学性质
6.2.2 解理及解理夹角
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显微分析技术.
21、没有人陪你走一辈子，所以你要 适应孤 独，没 有人会 帮你一 辈子， 所以你 要奋斗 一生。 22、当眼泪流尽的时候，留下的应该 是坚强 。 23、要改变命运，首先改变自己。
24、勇气很有理由被当作人类德性之 首，因 为这种 德性保 证了所 有其余 的德性 。--温 斯顿． 丘吉尔 。 25、梯子的梯阶从来不是用来搁脚的 ，它只 是让人 们的脚 放上一 段时间 ，以便 让别一 只脚能 够再往 上登。
Hale Waihona Puke 谢谢11、越是没有本领的就越加自命不凡。——邓拓 12、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。——爱尔兰 13、知人者智，自知者明。胜人者有力，自胜者强。——老子 14、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。——歌德 15、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。——迈克尔·F·斯特利
21、没有人陪你走一辈子，所以你要 适应孤 独，没 有人会 帮你一 辈子， 所以你 要奋斗 一生。 22、当眼泪流尽的时候，留下的应该 是坚强 。 23、要改变命运，首先改变自己。
24、勇气很有理由被当作人类德性之 首，因 为这种 德性保 证了所 有其余 的德性 。--温 斯顿． 丘吉尔 。 25、梯子的梯阶从来不是用来搁脚的 ，它只 是让人 们的脚 放上一 段时间 ，以便 让别一 只脚能 够再往 上登。
Hale Waihona Puke 谢谢11、越是没有本领的就越加自命不凡。——邓拓 12、越是无能的人，越喜欢挑剔别人的错儿。——爱尔兰 13、知人者智，自知者明。胜人者有力，自胜者强。——老子 14、意志坚强的人能把世界放在手中像泥块一样任意揉捏。——歌德 15、最具挑战性的挑战莫过于提升自我。——迈克尔·F·斯特利