植物病理学实验实验七、侵染性病害侵染过程的观察

三、实验内容
1.教师示范病毒病接种。以烟草花叶病毒病 为例，采用汁液摩擦接种法接种。放于温 室培养发病，定期进行观察病害进展情况， 了解病毒病害的侵染过程。
2.学生三个人一个小组进行真菌病害接种。 以小麦条锈病为例，采用喷雾接种法接种， 定期观察接种后小麦苗的生长情况，并调 查小麦条锈病的发生情况，了解真菌病害 的侵染过程，练习真菌病害人工接种方法。
用研钵将烟草花叶病毒源研成匀浆； 3.在健康叶片正面撒上依稀可见的800目金刚砂； 4.用洗净的手指蘸少许毒源匀浆，在健康的烟草叶
片上摩擦三次（不要用力过大）。同时用清水摩 擦作对照，注意应先作对照摩擦试验，后做病毒 汁液摩擦接种，以免对照感染TMV； 4.用洗瓶冲掉叶面上残留的汁液； 5.将接种后的烟草苗放于温室中进行培养观察。
接种方法
种传：拌种、浸种； 土传：菌土、浸根； 气传：喷雾、涂抹、注射、针刺、
喷粉、扫接； 虫传：媒介虫传； 嫁接传：菟丝子、嫁接。
侵染性病害侵染过程
侵染过程一般包括:
接触期 侵入期 潜育期 发病期
烟草花叶病毒病示范接种
1.用磷酸肥皂将所有器具及手洗净； 2.在研钵中加入少量pH7.0的0.1M的磷酸缓冲液，
实验七
侵染性病害侵染过程 的观察
一、实验目的
1.学习侵染性病害病原接种方法。 2.了解植物病害的侵染过程。
二、实验材料
1. 温 室 培 养 好 的 3-4 叶 期 烟 草 ， TMV毒源（感染TMV的烟叶）， 800目金刚砂，研钵，洗瓶等。
2.温室培养好的3-4叶期铭贤169 小麦苗；吐温-20；小麦条锈病 菌毒性小种；喷壶等。
小麦条锈病菌接种
➢小 麦 条 锈 病 病 原 物 为 条 形 柄 锈 菌 （Puccimia striiformis），担子菌门柄锈菌 属。
条锈菌菌种繁殖的主要步骤
种苗 1.喷雾法 2.撒粉法
源自文库
菌种
有活性的新鲜孢子 量比：1：3
步骤
接种 潜育 收菌
滑石粉
3.涂抹法
光照
主要因素
温度
试管套 病叶
防止交叉 叉污染
小麦条锈病菌喷雾接种
1.取少量新鲜的小麦条锈病菌夏孢子，放于小培 养皿中，加少量清水，滴入1-2滴吐温－20， 用玻棒轻轻搅拌，直至浆糊状，用清水洗入喷 壶，摇匀，配成孢子悬浮液；
2.用喷壶将配好的孢子悬浮液在培养好的小麦苗 上进行喷雾接种，喷雾要均匀一致。同时用清 水作为对照；
3.接种后，将小麦苗移入大铁筒内，摆放整齐， 用一块表面喷清水的塑料薄膜覆盖铁筒，密封 保湿，保湿12-15小时后揭去薄膜，置于温室 内培养，定期观察发病情况。
干燥保存
苗龄达到 1叶1心叶
接种
潜育期 约8天后开始现斑
作业
1.写出烟草花叶病毒病接种的简要步骤，并说明其 原理，记载并分析结果。
2.写出小麦条锈病菌接种的简要步骤，调查小麦条 锈病菌的潜育期、寄主反应型、病害普遍率、严 重度，计算发病率和病情指数，并将结果记入下 表。
小麦条锈病接种试验结果
品种名 称
潜育期（天）
反应 型
普遍率（％） 严重度（％） 病情指数（％）
接种日期： 月
日 调查日期：
月
日