高效毛细管电泳仪的应用、日常维护
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
检测池放入主机箱正面检测池座中,在缓冲 溶液瓶中加入新配制好的缓冲溶 液,将电极和毛细管的两端浸在缓冲溶液中, 保持毛细管两端出口在同一水平面 上,且毛细管内必须充满缓冲溶液,关好仪 器正门,确认仪器各部分连接正确后,按 动高压启动按钮,如果发生异常应立即按动 高压关断钮,检查并排除故障后,再重 新加压。
组次窗:两位数码管,用于显示当前操作的 组次值,共支持100 级操作(0-99) 节次窗:一位数码管,用于显示当前操作的 节次值,共支持10 节(0-9) 电压窗:设置状态显示设定的电压值,运行 状态显示电压输出值。 电流窗:设置时显示输出电流报警值,运行 时显示监测电流值。 时间窗:用于显示当前操作组次、节次的时 间设置值,正常工作时可倒计时。
特 点
1.仪器简单、易自动化 电源、毛细管、检测器、检测池 2.分析速度快、分离效率高 在3.1min内分离36种无机及有机阴离子,4.1min内分 离了24种阳离子;分离柱效:105~107万/m理论塔板数; 3.操作方便、消耗少 进样量极少,水介质中进行; 4.应用范围极广 有机物、无机物、生物、中性分子;生物大分子等; 分子生物学、医学、药学、化学、环境保护、材料等;
检测窗口:选择毛细管电泳流通池,使用开 窗器夹在距离毛细管出口9~10 cm 处,用 打火机将此处毛细管表面的聚酰亚胺烧去, 并用擦镜纸沾丙酮除去余炭,同时将毛细管 外部灰尘擦净,自下而上穿入毛细管流通池, 将毛细管窗口部位固定在流通池窗口,注意 应将流通池上部螺钉拧紧至毛细管不能上下 移动,而下部螺钉不能拧紧!将检测流通池 装在检测器上,用专用螺钉固定。
毛细管的清洗与维护
新毛细管使用:使用前分别用1mol/L、1mol/LNaOH、 水、及缓冲液冲洗毛细管30分钟。 如果仪器长时间不用(多于一个星期),清洗后用空气 吹毛细管20 分钟,并放于干燥环境下保存。方法如下: 清洗试剂吸入5ml 注射器中,将注射器插入清洗器的固 定孔中,用针头将毛细管引过清洗器接口的橡皮垫,连 接于注射器出口上,移动清洗器手柄使清洗器顶块压在 注射器推杆上即可进行毛细管冲洗。若是毛细管直接通 过清洗器接口的橡皮垫必须将毛细管口截去1mm,以 避免发生堵塞现象。
主要技术参数
1. 进样 液体压力差进样 50-100mm 2. 冲洗方式 弹簧助推正压冲洗 3. 毛细管 石英毛细管,长度50-100cm, 内径为25-75um 4. 检测器波长范围 190-700nm 5.输出电压 0-30kv,连续可调
仪器运行环境要求
1. 工作环境干燥,温度变化小,30℃,8 小时内温差波动不超过3℃ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ推荐在装有空 调的环境中)。 2. 环境湿度不大于80% 3. 测量过程中仪器不要摇动 4. 接通电源,仪器预热30分钟 5. 工作电流不要长时间超过150 微安,因 为过高的电流会是毛细管内的径向温度梯度 增加,使样品分离度降低。
紫外检测器
RESET:系统复位键,即使系统回到初始默认状态; A/Z:调零键,基线回零点; WL:波长调节键,调节波长至分析所需值(系统默认为254nm); TC:时间常数调节键,调节时间常数至分析所需值(系统默认为0.5s); RNG:量程调节键(共分为0.002、0.005、0.01、0.02、0.05、0.1、0.2、 0.5、1、2AU/MV10 档),调节信号输出量程(仅在使用记录仪时有效), 若信号线所接的是数据处理输出端子,此量程调节键不起作用; 1、2……9、· :数字及小数点键,用于输入所需数值; ENTER:确认键,在输入波长等后须按该键后系统方可确认当前的输入操 作。
分离原理
电泳仪
进样系统 分离系统
检测系统 数据处理系统
CL1020 高效毛细管电泳仪
北京华阳利民仪器有限公司
www.huayanglimin .com
仪器组成
CL101A 高压电源 CL1020 紫外检测器 CT 数据采集及处理工作站 毛细管电泳检测池
1. 电泳箱开关 5.毛细管 9 .液晶显示屏 13. 检测池 17.清洗器 2. 电泳分离支架 6. 进样支架 10. 数字按键 14.高压电源负极 3. 缓冲溶液瓶 7.检测器开关 11. 氘灯 15.高压负极插座 4. 高压电源正极 8.面板轻触键盘 12.前置放大器盒 16.高压连锁门控开关
根据实验需要设定仪器工作参数,见下述高 压电源及各检测器操作说明。 流体压差进样:将样品瓶放在高度进样架上, 根据需要调整进样高度 实验结束后关闭电源,用蒸馏水冲洗毛细管 30 分钟,或将缓冲溶液保持在毛 细管中即将毛细管至于压力清洗装置中。
仪器各组件操作说明
高压电源 CL 101A 高压电源是为高效毛细管电泳仪提供高压直流 电场驱动力的直流电源设备。电压输出连续可调
高效毛细管电泳仪的 使用与维护
兰作平 2014-3-25
基本原理
毛细管电泳(CE)又称高效毛细管电泳 (HPCE),是指离子或带电粒子以毛细管为分离 室,以高压直流电场为驱动力,依据样品中各组 分之间淌度和分配行为上的差异而实现分离的 液相分离分析技术。 高效毛细管电泳的柱效远高于高效液相色谱, 理论塔板数高达几十万块/米,特殊柱子可以达 到数百万。
常见故障及说明
半胱氨酸高效毛细管电泳实验
样 品:
半胱氨酸 缓冲溶液(buffer): 10 mmol/L NaH2PO4-Na2HPO4 1:1缓冲 溶液(NaH2PO4和Na2HPO4各5mMol/L), pH10.6.
0.1mol/L NaOH溶液,二次去离子水。
步 骤 仪器的预热和毛细管的冲洗:打开仪器和配套 的工作站。工作温度设置为30℃,不加电压, 冲洗新毛细管,顺序依次是:1 mol/L HCl溶 液30 min二次水5 min ,1 mol/L NaOH溶 液30 min,二次水5 min,10 mmol/L NaH2PO4-Na2HPO4 1:1缓冲溶液5 min,两次 运行之间依次用0.1 mol/L NaOH 2min, 二 次水2 min, 缓冲液5min。