植物细胞组织培养的基本技术
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(七)、温室
应配有空调机、通风口、加湿器、恒温恒湿控制装 置、喷雾装置、光照调节装置以及必要的杀菌杀虫 装置及相应药剂。
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二、仪器设备和器皿用具
常见仪器设备
1、超净台 2、无菌箱 3、空调机 4、除湿机 5、恒温箱 6、烘箱 7、高压灭菌锅 8、冰箱
9、电子分析天平和托 盘天平
第二章 细胞组织培养的基本技术
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本章教学目的与要求
(1)掌握组织培养实验室的设计; (2)掌握组织培养常用的实验仪器设备及其使用方法; (3)掌握调控组织培养的主要环境条件。 (5)掌握灭菌的不同方法和具体操作过程; (6)掌握无菌接种的步骤; (7)掌握外植体的培养方法和步骤; (8)一般掌握外植体褐变和玻璃化的处理方法; (9)掌握试管苗驯化的基本程序;
配置: 在工作方便的前提下,接种室宜小不宜 大,一般7-8m2,要求地面、天花板及 四壁尽可能密闭光滑,易于清洁和消毒。 配置拉动门,以减少开关门时的空气扰 动。 接种室要求干爽安静,清洁明亮。在适 当位置吊装1-2盏紫外线灭菌灯,用以 照射灭菌。最好安装一小型空调,使室 温可控,这样可使门窗紧闭,减少与外 界空气对流。
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一、设计
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洗涤室
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(二)、准备室(repairing room)
完成培养基制备以及试管苗出瓶、清洗与整理工作。 准备室要求明亮、通风。
如果房间较多,可将准备室分为洗涤室和配置室两部分。洗 涤室专门负责试管苗出瓶与培养器皿的清洗工作;配置室则 负责培养基的配制、分装、包扎和高压灭菌等工作。
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(三)、缓冲室
进入无菌室前要在缓冲室里换上经过灭菌的卫生服、拖鞋, 戴上口罩。
应当在此室内安装灭菌用的紫外灯。控制无菌室及培养室的 配电板等。
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缓冲室
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(四)、无菌操作室(transfering room)
接种室是进行植物材料的分离接种及培养 物转移的一个重要操作室。其无菌条件的 好坏对组织培养成功与否起重要作用。
10、显微镜及解剖镜 11、水浴锅 12、摇床与转床 13、磁力搅拌器 14、电蒸馏水器 15、酸度计 16、离心机
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1、超净台和无菌箱
1、超净台,优点是操作方便自如,比较舒适,工作效率高,准备时间短。 开机10分钟即可操作,可进行长时间使用。在工厂化生产中,接种工作量 很大,需要经常长久地工作时,超净台是很理想的设备。
根据风幕形成的方式,超净台可分为水平式和垂直式二种型号。
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5、培养箱(植物光照培养箱)
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(二)各类玻璃器皿
1、培养器皿 2、分注器 3、离心管 4、刻度移液管 5、细菌过滤器 6、实验器皿
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1、培养器皿
1、培养器皿:在组织培养中配制培养基和进行培养需大量的 玻璃器皿。要求由碱性溶解度小的硬质玻璃制成,以保证长期 贮存药品及培养的效果;培养用的还要求透光度好,能耐高压 高温,能方便放入培养基和培养材料的器皿,根据培养的目的 和要求,可以采用不同种类、规格的玻璃器皿。其中以试管、 三角瓶、培养皿等使用较多。
(五)、培养室(culturing room)
培养架大多由金属制成。
规格:
一般设5层,最低一层离地高约10 cm,其他每层间隔30cm左右,培养 架即高1.7m左右。培养架长度都是 根据日光灯的长度而设计,如采用 40W日光灯,则长1.3 m,30 W的长 1m,宽度一般为60cm。
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(五)、培养室(culturing room)
培养室最重要的因子是温度,一般保持在20-27℃左右, 具备产热装置,并安装窗式或立式空调机。由于热带
植物和寒带植物等不同种类要求不同温度,最好不同种
类有不同的培养室。室内湿度也要求恒定,相对湿度以 保持在70%-80%为好,可安装加湿器。
控制日光照时间可安装定时开 关钟,一般需要每天光照10-16h
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无菌操作室
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(五)、培养室(culturing room)
培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。培养室的大小 可根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。
设计原则:
充分利用空间和节省 能源
高度比培养架略高为 宜
周围墙壁要求有绝热 防火的性能。
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植物细胞组织培养实验室构建及操作技术
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本章主要内容
商业性组织培养实验室和小工厂的设计与主要 设备
培养基及其配制 外植体的选择与培养 试管苗的驯化与移载
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第一节 商业性组织培养实验室和小工厂 的设计与主要设备
培养皿的清洗; 培养基的配制、分装和高压灭菌; 无菌操作——材料的表面灭菌和接种; 将培养物放到培养室培养; 试管苗的驯化、移栽和初期管理。
2、无菌箱,在投资少的情况下,可以用接种箱来代替超净台。接种箱依 靠密闭、药剂熏蒸和紫外灯照射来保证内部空间无菌。但操作活动受限制, 准备时间长,工作效率低。
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工作原理
超净台功率在145-260W左右,它装有小型鼓风机,使空气穿过 一个前置过滤器,在这里把大部分空气尘埃先过滤掉,然后再 使空气穿过一个细致的高效过滤器,它除去了大于0.3um的尘 埃、细菌和真菌孢子等,最后以较洁净的气流吹到工作台面。 超净空气的流速为每分钟24-30m,这已足够防止附近空气袭扰 而引起的污染,这样的流速也不会妨碍采用酒精灯对器械等的 灼烧消毒。在这样的无菌条件下操作,就可以保证无菌材料在 转移接种过程中不受污染。
也有的需要连续照明。现代组培实 验室大多设计为采用天然太阳光 照作为主要能源,这样不但可以 节省能源,而且组培苗接受太阳 光生长良好,驯化易成活。
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(六)、驯化室
驯化室要求清洁无菌,配有空调机、加湿器、恒温 恒湿控制仪、喷雾器、光照调节装置、通风口以及 必要的杀菌剂。
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(七)、温室
应配有空调机、通风口、加湿器、恒温恒湿控制装 置、喷雾装置、光照调节装置以及必要的杀菌杀虫 装置及相应药剂。
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二、仪器设备和器皿用具
常见仪器设备
1、超净台 2、无菌箱 3、空调机 4、除湿机 5、恒温箱 6、烘箱 7、高压灭菌锅 8、冰箱
9、电子分析天平和托 盘天平
第二章 细胞组织培养的基本技术
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本章教学目的与要求
(1)掌握组织培养实验室的设计; (2)掌握组织培养常用的实验仪器设备及其使用方法; (3)掌握调控组织培养的主要环境条件。 (5)掌握灭菌的不同方法和具体操作过程; (6)掌握无菌接种的步骤; (7)掌握外植体的培养方法和步骤; (8)一般掌握外植体褐变和玻璃化的处理方法; (9)掌握试管苗驯化的基本程序;
配置: 在工作方便的前提下,接种室宜小不宜 大,一般7-8m2,要求地面、天花板及 四壁尽可能密闭光滑,易于清洁和消毒。 配置拉动门,以减少开关门时的空气扰 动。 接种室要求干爽安静,清洁明亮。在适 当位置吊装1-2盏紫外线灭菌灯,用以 照射灭菌。最好安装一小型空调,使室 温可控,这样可使门窗紧闭,减少与外 界空气对流。
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一、设计
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洗涤室
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(二)、准备室(repairing room)
完成培养基制备以及试管苗出瓶、清洗与整理工作。 准备室要求明亮、通风。
如果房间较多,可将准备室分为洗涤室和配置室两部分。洗 涤室专门负责试管苗出瓶与培养器皿的清洗工作;配置室则 负责培养基的配制、分装、包扎和高压灭菌等工作。
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(三)、缓冲室
进入无菌室前要在缓冲室里换上经过灭菌的卫生服、拖鞋, 戴上口罩。
应当在此室内安装灭菌用的紫外灯。控制无菌室及培养室的 配电板等。
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缓冲室
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(四)、无菌操作室(transfering room)
接种室是进行植物材料的分离接种及培养 物转移的一个重要操作室。其无菌条件的 好坏对组织培养成功与否起重要作用。
10、显微镜及解剖镜 11、水浴锅 12、摇床与转床 13、磁力搅拌器 14、电蒸馏水器 15、酸度计 16、离心机
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1、超净台和无菌箱
1、超净台,优点是操作方便自如,比较舒适,工作效率高,准备时间短。 开机10分钟即可操作,可进行长时间使用。在工厂化生产中,接种工作量 很大,需要经常长久地工作时,超净台是很理想的设备。
根据风幕形成的方式,超净台可分为水平式和垂直式二种型号。
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5、培养箱(植物光照培养箱)
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(二)各类玻璃器皿
1、培养器皿 2、分注器 3、离心管 4、刻度移液管 5、细菌过滤器 6、实验器皿
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1、培养器皿
1、培养器皿:在组织培养中配制培养基和进行培养需大量的 玻璃器皿。要求由碱性溶解度小的硬质玻璃制成,以保证长期 贮存药品及培养的效果;培养用的还要求透光度好,能耐高压 高温,能方便放入培养基和培养材料的器皿,根据培养的目的 和要求,可以采用不同种类、规格的玻璃器皿。其中以试管、 三角瓶、培养皿等使用较多。
(五)、培养室(culturing room)
培养架大多由金属制成。
规格:
一般设5层,最低一层离地高约10 cm,其他每层间隔30cm左右,培养 架即高1.7m左右。培养架长度都是 根据日光灯的长度而设计,如采用 40W日光灯,则长1.3 m,30 W的长 1m,宽度一般为60cm。
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(五)、培养室(culturing room)
培养室最重要的因子是温度,一般保持在20-27℃左右, 具备产热装置,并安装窗式或立式空调机。由于热带
植物和寒带植物等不同种类要求不同温度,最好不同种
类有不同的培养室。室内湿度也要求恒定,相对湿度以 保持在70%-80%为好,可安装加湿器。
控制日光照时间可安装定时开 关钟,一般需要每天光照10-16h
2021/3/5
无菌操作室
12
(五)、培养室(culturing room)
培养室是将接种的材料进行培养生长的场所。培养室的大小 可根据需要培养架的大小、数目、及其他附属设备而定。
设计原则:
充分利用空间和节省 能源
高度比培养架略高为 宜
周围墙壁要求有绝热 防火的性能。
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植物细胞组织培养实验室构建及操作技术
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本章主要内容
商业性组织培养实验室和小工厂的设计与主要 设备
培养基及其配制 外植体的选择与培养 试管苗的驯化与移载
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2021/3/5
第一节 商业性组织培养实验室和小工厂 的设计与主要设备
培养皿的清洗; 培养基的配制、分装和高压灭菌; 无菌操作——材料的表面灭菌和接种; 将培养物放到培养室培养; 试管苗的驯化、移栽和初期管理。
2、无菌箱,在投资少的情况下,可以用接种箱来代替超净台。接种箱依 靠密闭、药剂熏蒸和紫外灯照射来保证内部空间无菌。但操作活动受限制, 准备时间长,工作效率低。
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工作原理
超净台功率在145-260W左右,它装有小型鼓风机,使空气穿过 一个前置过滤器,在这里把大部分空气尘埃先过滤掉,然后再 使空气穿过一个细致的高效过滤器,它除去了大于0.3um的尘 埃、细菌和真菌孢子等,最后以较洁净的气流吹到工作台面。 超净空气的流速为每分钟24-30m,这已足够防止附近空气袭扰 而引起的污染,这样的流速也不会妨碍采用酒精灯对器械等的 灼烧消毒。在这样的无菌条件下操作,就可以保证无菌材料在 转移接种过程中不受污染。
也有的需要连续照明。现代组培实 验室大多设计为采用天然太阳光 照作为主要能源,这样不但可以 节省能源,而且组培苗接受太阳 光生长良好,驯化易成活。
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(六)、驯化室
驯化室要求清洁无菌,配有空调机、加湿器、恒温 恒湿控制仪、喷雾器、光照调节装置、通风口以及 必要的杀菌剂。
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