瘦肉精检测技术

摘要：瘦肉精是一种引起广泛关注的非法饲料添加剂，人食用瘦肉精超标的肉制品会引起严重的不良反应，本文讲述了瘦肉精危害以及检测方法。

关键词：瘦肉精残留检测方法

Abstract:Clenbuterol Hydrochloride was a illegal feed additive which caused wide attention. It would bring serious harmful reaction if people eated Clenbuterol Hydrochloride. The article discussed toxicology and the way of assay of Clenbuterol Hydrochloride.

Key words:Clenbuterol Hydrochloride residue assay

1 盐酸克伦特罗概述

盐酸克伦特罗(Clenbuterol Hydrochloride，CLB)，又名瘦肉精，药品名为克喘素、氨哮素等，为白色或类白色的结晶粉末，无臭、味苦，易溶于水、甲醇、乙醇，微溶于丙酮、氯仿，不溶于乙醚和苯，化学性质稳定。它是一种B：肾上腺素受体激动剂，最早作为止喘药用于防治哮喘和支气管痉挛。20世纪70年代末，美国等发达国家开始了将CLB用作“营养重分配剂”及“促生长剂”的实用性开发研究，20世纪80年代后期，我国部分大专院校和科研机构也开始向饲料企业和养殖户推广这类物质作为饲料添加剂使用，但很快发现它在畜牧业发展和食品安全方面的副作用，便全面禁止其使用。

2 危害性

2．1 对动物的影响

(1)扩张气管，影响肌肉蛋白质、脂肪代谢及肝脏中的糖代谢，严重影响动物正常的生长发育。(2)糖降解作用不足，导致猪肉品质下降 (3)容易发生蹄损伤和跛行，大运动量会造成死亡，高温条件更容易发生。

2．2 对人的影响

自从上世纪80年代中期，欧美国家发现CLB的毒副作用以来，至今世界范围内已有数以千计甚至万计的人因食用残留有CLB的动物性产品而中毒。CLB残留引起的中毒事件最早发生在西班牙。在我国，最早披露的中毒事件发生在香港。今年三月份，中国最大肉制品加工企业双汇也发生了令人震惊的“瘦肉精事件”，对国家企业消费着造成了巨大的伤害。人中毒后主要表现为：(1)心肌收缩加强，心率加快，产生心悸、心慌；对原有心脑血管疾病、糖尿病、冠心病、甲状腺功能亢进、青光眼、前列腺肥大者可导致心动过速，室性期前收缩，甚至中毒性心肌炎、心肌梗死，心电图可呈S—T段压与T波倒置或低平等现象。(2)面颈、四肢肌肉颤动，有恶心、呕吐、头晕乏力、手抖甚至不能站立等现象。(3)孕妇中毒可导致癌变，胎儿致畸。

3 控制标准

检验CLB对动物和人构成严重危害，世界各国纷纷颁布法规，禁止将其用作生长促进剂。从1986年开始，欧美等发达国家已严禁畜牧生产中应用CLB，我国农业部在1997年3月以[农牧发(1997)3号文]严令禁止B一肾上腺素类激动剂在动物生产中的应用”。美国食品药物管理局(FDA)和世界卫生组织(WHO)建议CLB在动物组织中最高残留限量(MRL)分别为：肉0．2μg／kg，肝0．6μg／kg，肾0．61μg／kg，脂肪0．2μg／kg，奶0．051μg／kg。部分欧盟成员国如英国规定可食性组织中MRL值为0．5μg／kg，荷兰规定牛、马肝脏组织中的MRL值为0．51

μg／kg。

4 残留检测方法

瘦肉精检测方法有：简易检验法、高效液相色谱法(HPLC)、气相色谱一质谱注(GC —MS)，毛细血管区带电泳法(CE)，免疫分析技术(IA)。这些是目前国内外用于检测CLB的常用方法，但都不是十分理想．新兴的滴金免疫技术(DIGFA)和生物传感器技术(BS)以及荧光免疫分析法由于三者明显的技术优越性．将会成为瘦肉精主要检测方法。

4．1 感官识别

屠宰前，让待宰生猪进栏休息20min后，凡皮毛异常光亮，呼吸急促，后臀部外形饱满且突出，四肢严重颤抖或非外因而卧地不起者，基本上可以做出初步判断。屠宰后，可以从肉的颜色和品质上来判断。含有CLB的猪肉肉色较深，较鲜艳，脂肪层非常薄，在胴体两侧腹股沟的脂肪层内毛细血管分布较密，甚至呈充血状态。内脏实质器官(心、肝、肾)充血肿胀，用手指触之酥软星脂肪变性；间质器官如肺、气管切面见泡沫、气肿等病变特征，有时有少量“汗水”渗出肉面。而一般健康肉呈淡红色，肉质弹性好，也不会有“出汗”现象。感官检验法可用于对含有CLB动物性产品的粗略判断，主观性较强，但可为消费者购买放心肉提供一定的参考。

4．2 实验室检测目前已用于CLB检测的实验室方法主要有：分光光度法、免疫分析法、色谱分析法及各种联用技术分析法等。

4．2．1 分光光度法

由于CLB溶于水和乙醇，可直接用水进行提取，而且CLB既可显芳香第一胺类的鉴别反应，也可显氯化物的鉴别反应。因此，用分光光度计检测，可在243nm与296nm 的波长处得到最大吸收峰。

鉴于CLB残留对人和动物造成的危害，世界各国纷分光光度法在常温下有较好的稳定性。由于CLB在生物样品中含量甚微，该法检测限过高，达不到残留分析

要求，因此。目前只限于CLB药品本身的常规分析”。

4．2．2 免疫分析法(IA)

(1)酶联免疫分析法(EIA)

EIA中应用最为广泛的是酶联免疫吸附法(ELISA)。目前，国内用于CLB残留检测的ELISA试剂盒已经商品化。EIA法样品前处理简单或不需要前处理，成本低，具有操作简便、快速、仪器设备简单等优点，适合对活体动物做大批量样品的快速检测。欧盟等国家已将EIA作为“筛选法”，用于CLB的宰前尿检、血检及屠宰场的检疫。缺点是该法不能实现现场检测，且结果假阳性率较高，尤其是当样品中含有抗生素或磺胺类药物时，会使假阳性率进一步提高，被检阳性者需要用气相色谱一质谱联用法确证。

(2)滴金免疫分析法(DIGFA)

其基本原理是利用微孔滤膜的渗滤浓缩和毛细管作用，使抗原抗体反应在固相膜上快速进行，然后用胶体金标记的抗体来进行直接显色。由于胶体金肉眼可见，故阳性反应者在膜上呈现红色斑点，阴性反应则不会形成红色斑点。张敏娟等分别用该法和ELISA法对12份猪尿样品进行检测，两种方法阳性吻合率为85．71％(6／7)，当生猪尿样中CLB的浓度大于2700ppt时，吻合率达91．67％(11／12)。该法仪器设备简单，试剂安全，对操作者没有太高的专业技术要求，能实现现场检测。缺点是反应线颜色受反应时间影响较大。