石菖蒲的药理作用研究

石菖蒲的药理作用研究实验

【实验目的】

1.学习镇静药物的实验方法

2.应用小动物自主活动仪，研究石菖蒲、地西泮对小鼠自发活动的影响，从而研究石菖蒲挥发油对小白鼠的中枢神经的影响

3.学习动物惊厥模型的制备方法及抗惊厥药的实验方法

4.观察石菖蒲水煎液对动物电惊厥的保护作用

5.学习抗抑郁药物的实验方法

6.知道石菖蒲抗抑郁的实验机制

【实验原理】

1.镇静作用

小动物自主活动仪原理：在活动箱内，将一束或几束光线照射到对侧光电感应器上，动物在箱内每活动一次，感应电流发生变化，经过放大装置，使电脉冲驱使继电器启动，通过记录器记录动物活动次数。

地西泮是镇静催眠的代表药。石菖蒲对中枢神经系统作用明显,最新研究结果表明,总挥发油是镇静、催眠、抗惊厥的主要成分,α-细辛醚和β-细辛醚则是石菖蒲上述作用的最主要活性成分[1]。石菖蒲具有调节中枢神经系统、植物神经系统、内分泌系统、心血管系统和消化系统的作用,其最主要的药理作用表现为中枢镇静抗惊作用[2].

2.抗惊厥作用

石菖蒲具有调节中枢神经系统、植物神经系统、内分泌系统、心血管系统和消化系统的作用，其最主要的药理作用表现为中枢镇静抗惊作用[3] 。

实验中常用电刺激、声刺激或化学方法建立实验性动物惊厥模型，用来筛选抗癫痫。苯巴比妥钠能部分地对抗震颤素引起的大鼠实验性巴金森综合征的肌肉震颤。石菖蒲挥发油对单突触的膝反射无抑制，但对多突触的屈肌反射呈抑制作用，说明其抗惊作用与眠尔通类相似，系中枢性的肌肉松弛剂，作用部位在脊髓或皮层下。

3.抗抑郁作用

在小鼠悬挂试验和大鼠强迫游泳试验中,石菖蒲水提醇沉液与水提液一样均能使动物的不动时间显著缩短, 两者作用与抗抑郁药氟西汀相当。石菖蒲的乙醇提取液也与水提液一样能显著缩短小鼠的不动时间, 与氟西汀阳性对照组比较, 石菖蒲乙醇提取液组的作用与氟西汀无显著性差别, 水提液组作用稍差。石菖蒲醇提后的其他萃取部分(正丁醇、氯仿、醋酸乙酯) 在行为绝望动物模型上的作用较小或无效。在小鼠5HTP增强甩头试验中, 较大剂量(10g / kg) 的石菖蒲水提醇沉液与氟西汀一样能增加小鼠甩头反应次数。以上说明石菖蒲抗抑郁的有效部位主要存在于水提取液和乙醇提取液中, 其抗抑郁作用可能与阻断中枢5 - 羟色胺等单胺类递质的重摄取有关[4]。

【实验动物】

1.镇静作用

小鼠6只，实验前禁食12h

2.抗惊厥作用

小白鼠6只，雌雄不限，体重18-22g

3.抗抑郁作用

小鼠6只，雌雄不限

【药品与仪器】

1.镇静作用

0.05%地西泮溶液，0.05%石菖蒲挥发油，生理盐水

动物自主活动仪1台，电子天平1台，1ml注射器2支，烧杯2个

2.抗惊厥作用

0.05%石菖蒲挥发油，生理盐水，0.5%苯巴比妥钠，药理生理多用仪

3.抗抑郁作用

0.05%石菖蒲挥发油，生理盐水，0.5%盐酸阿米替林

电子天平, 注射器, 电子秒表，隔板，铁架台

【实验方法】

1.镇静作用

将小鼠随机分成3组, 每组2 只, 每组为一剂量组。甲组腹腔注射0.05%石菖蒲挥发油(0.2ml/10 g)，乙组腹腔注射0.05%地西泮溶液(0.2ml/10 g)，丙组腹腔注射生理盐水(0.2ml/10 g)，3 分钟后,将小鼠置于自主活动仪内，分别记录10分钟内动物的活动数, 用t值测定对照组与给药组之间有无显著差异。

2.抗惊厥作用

2.1 调机：将药理生理多用仪选择适宜参数：频率至4，电压调节旋钮置于适当位置（100～140V）。

2.2 动物筛选：将输出导线前两个鳄鱼夹用生理盐水浸湿，分别夹住小鼠两只耳朵，按“启动”按钮，选择发生前肢屈曲、后肢伸直的强直性惊厥的小鼠为合格小鼠，记录下各只动物惊厥阈值。如动物未出现惊厥，将电压逐渐升高，再次刺激，如仍未出现惊厥，弃之不用。

2.3 记录实验：将合格小鼠9只，称重并标记，随机分三组。第一组小鼠灌胃石菖蒲水煎液0.3ml/10g，第二组小鼠等体积灌胃生理盐水，第三组小鼠等体积灌胃苯巴比妥钠，30min后，各只动物以原惊厥阈值给予刺激，记录各动物的惊厥发生率和死亡率。

3. 抗抑郁作用

3.1 将动物随机分为三组: 生理盐水组( 对照组) 、盐酸阿米替林组（阳性对照组），石菖蒲组。

3.2 小鼠悬尾实验动物连续灌胃8d, 剂量0.2ml/10g, 第9天灌胃后1 h, 用黏膏条将其尾固定于连接有BL-420E+ 生物机能实验系统的张力换能器上,使其呈倒挂状态, 距离桌面20cm, 两侧用木板隔断其视线, 适应1min 后, 记录5min 内小鼠不动的时间为失望时间[5]。

3.3 统计学处理实验数据采用SAS 软件进行数据处理, 数据均以 x±s 表示,采用单因素方差分析比较各组间的差异。

【实验结果】

1.镇静作用

表1 腹腔注射石菖蒲醇溶液对小鼠自主活动的影响

组别药物动物数（n）剂量（g/kg）自主活动次数石菖蒲挥发油

地西泮溶液

生理盐水

2.抗惊厥作用

表2 石菖蒲抗电惊厥作用

组别剂量（g/kg）致惊厥阈值（参数）再次通电后的反应石菖蒲

苯巴比妥钠

生理盐水

3.抗抑郁作用

表3. 石菖蒲抗抑郁作用

组别药物动物数（n）剂量（g/kg）5min内小鼠不动的时间（s）石菖蒲挥发油

盐酸阿米替林组

生理盐水

【参考文献】

[1] 胡锦官,顾健,王志旺.石菖蒲及其有效成分对中枢神经系统作用的实验研究

[J].中药药理与临床,1999,15(3)：19.

[2] 刘新民. 石菖蒲的研究现状[J]. 中医药研究, 1992, (4) : 57.

[3] 唐洪梅，席萍石.菖蒲不同部位镇静抗惊厥作用实验研究.中国实验方剂学杂

志，2004,08（4）.

[4] 张均田. 防治衰老和促智药物的研究[J]. 赣南医学院学报，1991,11（4）：

191-197.

[5] 李明亚、陈红梅. 广东药学院药理研究室（广州510224）.中药材第24卷第

1期. 2001年1月.