甘油三酯(triglyceride, TG )含量测定试剂盒说明书
货号: QS2408 规格：50管/48样甘油三酯（triglyceride, TG）含量测定试剂盒说明书
可见分光光度法
注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。
测定意义：
TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，不仅是细胞膜的主要成分，也是重要呼吸底物。
测定原理：
用异丙醇抽提取TG，KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸，过碘酸氧化甘油生成甲醛，在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色物质，在420 nm有特征吸收峰，其颜色的深浅与TG含量成正比。
自备实验用品及仪器：
可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水
试剂组成和配置：
试剂一：液体60mL×2瓶，4℃保存。
试剂二：液体15mL×1瓶，4℃保存。
试剂三：液体30mL×1瓶，4℃保存。
试剂四：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂五：液体30mL×1瓶，4℃避光保存。
试剂六：液体30mL×1瓶，4℃避光保存。
标准品：液体1mL×1支，1mg/mL标准甘油三酯溶液，4℃避光保存。
TG的提取：
1、组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，
加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清待测。
2、细胞、细菌：先收集400-500万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加1mL试剂一，超声波破碎1min（强度20％，超声2s，停1s），8000g，4℃离心10min，取上清待测。
3、血清（浆）等液体样品：直接测定。
测定操作：
1. 分光光度计预热30min，调节波长到420 nm，蒸馏水调零。
0.15mL，置于新的EP管中。
3．甘油三酯含量测定：
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注意：空白管和标准管只需测定一次。
计算公式：
1. 血清（浆）中甘油三酯含量：
TG含量（mg/dL）=C标准品×（A测－A空）÷（A标－A空）×100
=100×（A测－A空）÷（A标－A空）
C标准品：1mg/mL；100mL：血清体积，1dL=100 mL。
2. 组织中甘油三酯含量：
(1)按样本蛋白浓度计算
TG含量（mg/ mg prot）= C标准品×（A测－A空）÷（A标－A空）÷Cpr
=（A测－A空）÷（A标－A空）÷ Cpr
(2)按样本质量计算
TG含量（mg/ g鲜重）=C标准品×（A测－A空）÷（A标－A空）÷W
=（A测－A空）÷（A标－A空）÷ W
C标准品：1mg/mL ；Cpr：样本蛋白浓度，mg/mL；W：样本鲜重，g/mL
3. 细胞、细菌中甘油三酯含量：
TG含量（mg/104cell）=C标准品×（A测－A空）÷（A标－A空）÷细菌或细胞（104cell /mL）=（A测－A空）÷（A标－A空）÷细菌或细胞（104 cell /mL）
C标准品：1mg/mL。
注意事项：
1. 试剂盒中有易挥发性物质，实验过程中需佩戴手套和口罩，试剂瓶盖打开后应该及时盖紧。
2. 加试剂二后需剧烈震荡，使待测液中甘油三酯得到充分提取。
3. 最低检出限为100μmol/L。
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甘油三酯(triglyceride, TG)含量测定试剂盒说明书
货号：MS2408 规格：100管/96样甘油三酯（triglyceride, TG）含量测定试剂盒说明书 微量法 注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义： TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，不仅是细胞膜的主要成分，也是重要呼吸底物。 测定原理： 用异丙醇抽提取TG，KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸，过碘酸氧化甘油生成甲醛，在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色物质，在420 nm有特征吸收峰，其颜色的深浅与TG含量成正比。 自备实验用品及仪器： 可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板、水浴锅、可调式移液枪、双蒸水 试剂组成和配置： 试剂一：液体60mL×2瓶，4℃保存。 试剂二：液体5mL×1瓶，4℃保存。 试剂三：液体6mL×1瓶，4℃保存。 试剂四：液体2mL×1瓶，4℃避光保存。 试剂五：液体6mL×1瓶，4℃避光保存。 试剂六：液体6mL×1瓶，4℃避光保存。 标准品：液体1mL×1支，1mg/mL标准甘油三酯溶液，4℃避光保存。 TG的提取： 1、组织中TG的提取：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清，即TG待测液。 2、细胞、细菌中TG的提取：先收集400-500万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加1mL试剂一，超声波破碎1min（强度20％，超声2s，停1s），8000g，4℃离心10min，取上清，即TG 待测液。 3、血清（浆）样品：直接测定。 测定操作： 1. 可见分光光度计/酶标仪预热30min，调节波长到420 nm，蒸馏水调零。 15μL，置于新的Ep 管。 3．甘油三酯含量测定： 第1页，共3页
甘油三酯测定试剂盒(GPO-PAP法)产品技术要求danda
甘油三酯测定试剂盒(GPO-PAP法) 适用范围：本品用于体外定量测定人血清中甘油三酯的含量。 1.1规格 规格1： (试剂1：20mL；试剂2： 5mL)； 规格2： (试剂1：40mL；试剂2：10mL)； . 规格3： (试剂1：80mL；试剂2：20mL)； 校准品：（选配） 规格1（0.3mL×1；1水平)；规格2（0.5mL×1；1水平)；规格3（1.0mL×1；1水平)； 质控品：（选配） 规格1（0.5mL×2；2水平)；规格2（1.0mL×2；2水平)。 1.2组成 试剂盒组成见表1 表1甘油三酯测定试剂盒组成
注：校准品及质控品赋值具有批特异性，每批次浓度详见标签。 2.1试剂 2.1.1外观 试剂盒外观应整洁，文字符号标识清晰；组分齐全，液体无漏液；试剂1为淡黄色透明液体；试剂2为无色透明液体，不得有沉淀和絮状物。 2.1.2装量 每瓶不少于标示值。 2.1.3试剂空白吸光度 用指定的空白样品测试试剂（盒），在光径1cm下，在A546nm处测定试剂空白吸光度A≤0.1。 2.1.4分析灵敏度 在温度37℃，测定2.26 mmol/L样本，吸光度变化在0.10-0.35之间。
2.1.5线性范围 2.1.5.1在[0.2，10.0] mmol/L内,相关系数R≥0.990。 2.1.5.2在[0.2，2.0] mmol/L内，线性绝对偏差不超过±0.2mmol/L；(2.0，10.0] mmol/L内，线性相对偏差不超过±10%。 2.1.6重复性 重复测试(1.1±0.22) mmol/L和(3.0±0.6)mmol/L样本，所得结果的变异系数（CV%）应不大于5%。 2.1.7批间差 测定(1.1±0.22) mmol/L和(3.0±0.6)mmol/L样本，所得结果的批间相对极差（R）应不大于10%。 2.1.8准确度 用国家标准物质GBW09148检测，实测值与标示值的相对偏差在±10%内。 2.2校准品 2.2.1外观 校准品为淡黄色液体。 2.2.2装量 每瓶不少于标示值。 2.2.3准确度 与配套试剂组成测试系统，指标要求同2.1.8。 2.2.4 校准品溯源性 根据GB/T21415-2008的要求，校准品溯源至国家标准物质GBW09148。 2.3质控品
血钙浓度检测试剂盒说明书 微量法
血钙浓度检测试剂盒说明书微量法 注意：正式测定前务必取2-3个预期差异较大的样本做预测定。货号：BC0725规格：100T/96S 产品内容： 试剂一：液体5mL×1瓶，4℃保存。试剂二：液体5mL×1瓶，4℃保存。 试剂三：液体×1瓶（空瓶，试剂自备）。取15mL 试剂瓶，依次加入9mL 无水甲醇和1mL 丙酮，盖紧混匀即可。 标准液：液体0.5mL×1支，2μmol/mL CaCl 2?2H 2O 溶液，4℃保存。临用前进行5倍稀释得到0.4μmol/mL 标准溶液。产品说明： 血钙几乎全部存在于血浆中，所以血钙主要指血浆钙。血浆钙有离子钙和结合钙两种形式，其中只有离子钙直接起生理作用，它与结合钙处于动态平衡，并受血液pH 的影响。血钙水平与多种重要的生理功能相关，过高或过低都会影响正常生理功能。本试剂盒用于检测血液中游离钙浓度。 在强碱溶液中游离钙与GBHA 反应生成红色钙-GBHA 复合物，在520nm 有吸收峰；通过测定520nm 吸光度，计算游离钙浓度。自备仪器和用品： 可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量玻璃比色皿/96孔板、无水甲醇、丙酮和蒸馏水。操作步骤： 1.分光光度计/酶标仪预热30min 以上，调节波长到520nm，蒸馏水调零。 2.加样表： 名称（μL） 空白管标准管测定管血浆--12蒸馏水12--0.4μmol/mL 标品 -12 -
试剂一505050 试剂二505050 试剂三100100100混匀；静置5min后于520nm测定吸光度A，记为A测定管、A空白管、A对照管。血钙浓度计算： 血钙含量(μmol/dL)=[C标准液×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管)]×100 =40×(A测定管－A空白管)÷(A标准管－A空白管) C标准液：0.4μmol/mL；100：单位换算系数，1dL=100mL。 注意事项： 1、宜早晨空腹采血，并且采血后应该尽快完成测定； 2、尽量在10min内完成测定； 3、因反应完成后需尽快测定，使用微量比色皿时，建议每批次测定5-10个样本； 4、若A测定管高于0.8，建议用蒸馏水稀释后测定。
人类K-ras基因突变检测试剂盒说明书
人类K-ras基因突变检测试剂盒（PCR-熔解曲线法）说明书 【产品名称】 通用名：人类K-ras基因突变检测试剂盒（PCR-熔解曲线法） 英文名：Diagnostic kit for Mutations of Human K-ras Gene (PCR-Melting Curve Analysis) 【包装规格】 20测试/盒 【预期用途】 K-ras基因位于12号染色体短臂上，是重要的癌基因之一，编码一种21kD 的kras蛋白，参与细胞内的信号传递，主要包括PI3K/PTEN/AKT 和 RAF/MEK/ERK信号转导途径，这些转导途径是当前肿瘤靶向药物研究的热点，靶向药物通过抑制这些途径发生药理作用。K-ras基因第12和13密码子发生突变，将导致kras蛋白变异并处于持续激活状态，使药物失效。。据中国2010版《肿瘤学临床实践指南》，在一项包含101例肺腺癌亚型细支气管肺泡癌患者的回顾性研究中，所有患者均接受厄洛替尼单药一线治疗。K-ras突变者无一例缓解（0/18），而无K-ras突变者则有20例缓解（20/62，32%），差别有统计学意义（P <0.01）。因此，指南建议，非小细胞肺癌和结直肠癌患者使用靶向药物前应进行K-ras基因突变状态的检测。 本试剂盒以人非小细胞肺癌、结直肠癌肿瘤组织切片提取的基因组DNA为检测样本，用于检测肿瘤组织K-ras基因第12，13密码子的12种体细胞突变（表1），提供突变状态的定性结果。为临床肿瘤靶向药物的个体化用药提供辅助诊断依据，本品适用于进入个体化靶向治疗疗程前的患者使用。 【检验原理】 本试剂盒基于实时PCR平台，结合了特异引物、荧光探针和熔解曲线技术，定性检测DNA样品中K-ras基因12，13密码子是否存在突变。用一对K-ras基因特异引物，该引物可
glp-1试剂盒说明书
人胰高血糖素样肽1（GLP-1）ELISA 定量检测试剂盒 点击放大 产品型号： 48T/96T 产品报价： 产品特点： 本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法 （ELISA ），定量检测人血清、血浆及相关液体样本中 胰高血糖素样肽1（GLP-1）的含量 本试剂盒只能用于科学研究，不得用于医学诊断。 人胰高血糖素样肽1（GLP －－1）定量检测试剂盒（ELISA ） 使用说明书 【试剂盒名称】 人胰高血糖素样肽1（GLP-1）定量检测试剂盒（ELISA ） 【试剂盒用途】 定量检测人血清、血浆及相关液体样本中胰高血糖素样肽1（GLP-1）的含量。 【检测原理】 本试剂盒采用双抗体两步夹心酶联免疫吸附法（ELISA ）。将标准品、待测样本加入到预 先包被人胰高血糖素样肽1（GLP-1）单克隆抗体透明酶标包被板中，温育足够时间后，洗涤 除去未结合的成分，再加入酶标工作液，温育足够时间后，洗涤除去未结合的成分。依次加 入底物A 、B ，底物（TMB ）在辣根过氧化物酶（HRP ）催化下转化为蓝色产物，在酸的作 用下变成黄色，颜色的深浅与样品中人胰高血糖素样肽1（GLP-1）浓度呈正相关，450nm 波 长下测定OD 值，根据标准品和样品的OD 值，计算样本中人胰高血糖素样肽1（GLP-1）含 量。 【试剂盒组成】
1 酶标包被板12孔×8条7 显色剂A液6mL 2 标准品0.3mL×6管8 显色剂B液6mL 3 20倍浓缩洗涤液25mL 9 终止液6mL 4 样本稀释液6mL 10 说明书1份 5 特殊稀释液6mL 11 封板膜2张 6 酶标试剂6mL 12 密封袋1个 备注：标准品（1号→6号）浓度依次为：8、4、2、1、0.5、0.25pmol/L 【需要而未提供的试剂和器材】 1、37℃恒温箱 2、标准规格酶标仪 3、精密移液器及一次性吸头 4、蒸馏水 5、一次性试管 6、吸水纸 【操作步骤】 1、准备：从冰箱取出试剂盒，室温复温平衡30分钟。 2、配液：用蒸馏水将20倍浓缩洗涤液稀释成原倍的洗涤液。 3、加标准品和待测样本：取足够数量的酶标包被板，固定于框架上，分别设置标准品孔、待测样本孔和空白对照孔，记录各孔位置，在标准品孔中加入标准品50μL；待测样本孔中先加入待测样本10μL，再加样本稀释液40μL（即样本稀释5倍）；空白对照孔不加。 4、温育：37℃水浴锅或恒温箱温育30min。 5、洗板：弃去液体，吸水纸上拍干，每孔加满洗涤液，静置1min，甩去洗涤液，吸水纸 上拍干，如此重复洗板4次（也可用洗板机按说明书操作洗板）。
柠檬酸(citric acid, CA)含量测定试剂盒说明书
货号：MS2101 规格：100管/96样柠檬酸（citric acid, CA）含量测定试剂盒说明书 微量法 注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义： CA是生物体内常见的有机酸，是重要的食品风味物质。此外，CA是三羧酸循环第一步反应的产物。 测定原理： 酸性条件下，柠檬酸还原Cr6+生成Cr3+，在545nm处有特征吸收峰；通过测定545nm吸光值的增加，即可计算出样品中柠檬酸含量。 自备实验用品及仪器： 低温离心机、水浴锅、可调式移液枪、可见分光光度计/酶标仪、微量石英比色皿/96孔板和蒸馏水。 试剂组成和配置： 试剂一：液体×2瓶，4℃保存。 试剂二：液体×1瓶，4℃保存。 试剂三：液体×1管，－20℃保存。 试剂四：粉剂×1管，室温保存。临用前配制，加入2mL试剂一，充分溶解。 试剂五：液体×1管，4℃避光保存。 标准品：液体×1管，250μmol/L柠檬酸标准液，4℃保存。 样品中柠檬酸提取： 1.液体样品中柠檬酸提取：取0.1mL液体加试剂一0.9mL，充分混匀，11000g，4℃离心10min， 取上清液，待测。 2.组织中柠檬酸提取：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约 0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆。11000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。 3.线粒体中柠檬酸提取：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取 约0.1g组织，加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，600g/min，4℃离心5min；取上清至另一EP管中，11000g，4℃离心10min，弃上清（此上清液可用于细胞质CA含量测定）；向沉淀中加试剂二200μl，以及试剂三2μl，充分悬浮溶解，11000g，4℃离心10min，取上清液，待测。 4.细菌、真菌中：按照细胞数量（104个）：试剂一体积（mL）为500~1000：1的比例（建议 500万细胞加入1mL试剂一），冰浴超声波破碎细胞（功率300w，超声3秒，间隔7秒，总时间3min）；11000g，4℃离心10min，取上清置冰上待测。 测定操作： 1. 分光光度计/酶标仪预热30 min，调节波长到545 nm，蒸馏水调零。 2. 试剂一置于30℃水浴中预热30min。 3. 空白管：取0.5 mL EP管，依次加入20μL蒸馏水，140μL试剂一，20μL试剂四，20μL 试剂五，混匀后室温静置30min，于545nm测定吸光度，记为A空白管。 第1页，共3页
甘油三酯(triglyceride, TG )含量测定试剂盒说明书
货号: QS2408 规格：50管/48样甘油三酯（triglyceride, TG）含量测定试剂盒说明书 可见分光光度法 注意：正式测定之前选择 2-3个预期差异大的样本做预测定。 测定意义： TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，不仅是细胞膜的主要成分，也是重要呼吸底物。 测定原理： 用异丙醇抽提取TG，KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸，过碘酸氧化甘油生成甲醛，在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色物质，在420 nm有特征吸收峰，其颜色的深浅与TG含量成正比。 自备实验用品及仪器： 可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1ml玻璃比色皿、双蒸水 试剂组成和配置： 试剂一：液体60mL×2瓶，4℃保存。 试剂二：液体15mL×1瓶，4℃保存。 试剂三：液体30mL×1瓶，4℃保存。 试剂四：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。 试剂五：液体30mL×1瓶，4℃避光保存。 试剂六：液体30mL×1瓶，4℃避光保存。 标准品：液体1mL×1支，1mg/mL标准甘油三酯溶液，4℃避光保存。 TG的提取： 1、组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织， 加入1mL试剂一）进行冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清待测。 2、细胞、细菌：先收集400-500万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加1mL试剂一，超声波破碎1min（强度20％，超声2s，停1s），8000g，4℃离心10min，取上清待测。 3、血清（浆）等液体样品：直接测定。 测定操作： 1. 分光光度计预热30min，调节波长到420 nm，蒸馏水调零。 0.15mL，置于新的EP管中。 3．甘油三酯含量测定： 第1页，共2页
甘油三酯(TG)测定试剂盒(GPO-PAP法)产品技术要求lideman
甘油三酯(TG)测定试剂盒（GPO-PAP法） 适用范围：本产品用于体外定量测定人血清中甘油三酯的含量。 1.1包装规格 试剂（R）：5×80mL； 2×80mL； 7×60mL； 5×40mL； 3×400mL； 2×100mL；1×20mL；4×80mL；4×100mL；624测试/盒：208.8mL；7×61mL； 1100测试/盒：【4×80mL】； 1100测试/盒：【5×40mL】； 校准品（选配）：1×3mL。 1.2主要组成成分 1.2.1试剂组成 表1 试剂组成
1.2.2校准品组成：单水平液体校准品，在水基质缓冲液中添加甘油，定值范围：（1.5～3）mmol/L。稳定剂<0.1%。 注：校准品浓度具有批特异性，具体浓度见标签。 2.1 外观 液体单试剂：浅粉红色澄清液体。 校准品：无色至浅黄色液体。 2.2 净含量 液体试剂的净含量不得低于标示体积。 2.3 空白吸光度 在37℃、（505nm±10%范围内的）波长、1cm光径条件下，用去离子水或（生理盐水）作为样品加入试剂测试时，试剂空白吸光度小于0.1 ABS。 2.4 分析灵敏度 浓度为2.28mmol/L时，吸光度变化范围为(0.05-0.30)。 2.5 线性 在[0.05，11.4]mmol/L线性范围内，线性相关系数r2不小于0.998。在(5，11.4]mmol/L范围内的相对偏差应不超过±10%；测定结果[0.05，5]mmol/L时绝对偏差应不超过±0.50 mmol/L。 2.6 重复性 变异系数CV应小于5%。
2.7 批间差 不同批号之间测定结果的相对极差应小于6%。 2.8 准确度 用国际参考物质（SRM909）作为样本进行检测，测量结果与参考物质靶值的相对偏差应不超过±10%。 2.9 稳定性 原包装试剂（含校准品），在2℃~8℃下有效期为18个月，取失效期的试剂盒检测其外观、试剂空白、分析灵敏度、线性范围、重复性、准确度应分别符合2.1、2.3、2.4、2.5、2.6、2.8的要求。 2.10 校准品的溯源性 校准品溯源至国际参考物质（SRM909）。
试剂盒使用说明书
牛气肿疽(symptoinatic anthrax)酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定牛血清，血浆及相关液体样本中牛气肿疽(symptoinatic anthrax)的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中牛气肿疽(symptoinatic anthrax)水平。用纯化的牛气肿疽(symptoinatic anthrax)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入牛气肿疽(symptoinatic anthrax)，再与HRP标记的牛气肿疽(symptoinatic anthrax)抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的牛气肿疽(symptoinatic anthrax)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中牛气肿疽(symptoinatic anthrax)浓度。 试剂盒组成： 试剂盒组成48孔配置96孔配置保存说明书1份1份 封板膜2片（48）2片（96） 密封袋1个1个 酶标包被板1×481×962-8℃保存标准品：1800pg/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存 样本处理及要求： 1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心 20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程 中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/ 分）。仔细收集上清。检测细胞内的成份时，用PBS（PH7.2-7.4）稀释细胞悬液，细胞浓度达到100万/ml左右。通过反复冻融，以使细胞破坏并放出细胞内成份。离心20分
肌红蛋白测定试剂盒说明书
肌红蛋白（MYO）测定试剂盒（化学发光免疫分析法） 说明书 【产品名称】 通用名称：肌红蛋白（MYO）测定试剂盒（化学发光免疫分析法） 英文名称：Myoglobin（CLIA） 【包装规格】 2×30 人份/盒、2×50 人份/盒、2×100 人份/盒 【预期用途】 用于体外定量测定人体血清或（和）血浆中肌红蛋白的含量。 肌红蛋白（MYO）分子量为17.8 kD，由一个多肽链和一个亚铁血红素辅基组成，由人体骨骼肌和心肌细胞合成并贮存，不存在于其它细胞。实验证明由骨骼肌和心肌来源的两种肌红蛋白无免疫学上的差异。肌红蛋白的主要生理功能为携带氧气供细胞呼吸。肌红蛋白是检测急性心肌梗死(AMI) 的早期指标，具有极高的灵敏度但是特异性较差，在AMI 早期心肌细胞受损，由于MYO 的分子量小，可以很快从破损的细胞中释放出来，在AMI 发病1～3 小时后血中浓度迅速上升，6～7 小时达峰值，12 小时内几乎所有AMI 患者MYO 都有升高，升高幅度大于各心肌酶，因此可以作为AMI 的早期诊断标志物。由于MYO 也存在于骨骼肌中，而且仅从肾脏清除，所以急性肌损伤、急性或慢性肾衰竭、严重的充血性心力衰竭、长时间休克及各种原因引起的肌病患者、肌内注射、剧烈的锻炼、某种毒素和药物摄入后，MYO 都会升高。因此，采用血清MYO 水平作为诊断AMI 的早期指标，仅限于没有上述相关疾病的患者。在有急性症状的患者中，4 小时内MYO 水平不升高，AMI 的可能性极低。由于在AMI 后血中MYO 很快从肾脏清除，发病l8～30 小时内可完全恢复到正常水平。故MYO 测定有助于在AMI 病程中观察有无再梗塞或者梗塞再扩展。MYO 频繁出现增高，提示原有心肌梗死仍在延续。另外，在神经肌肉疾病如肌营养不良、肌萎缩和多肌炎时血清MYO 水平亦升高。心脏外科手术患者血清MYO 升高，可以作为判断心肌损伤程度及愈合情况的一项客观指标。 【检验原理】 肌红蛋白测定采用双位点夹心化学发光免疫分析法，其检测原理如下： 第一步：将样本与包被着抗肌红蛋白抗体的超顺磁性微粒（磁珠）以及抗肌红蛋白抗体-碱性磷酸酶标记物添加到反应管中，经过孵育，样本中的肌红蛋白和包被在磁珠上的抗肌红蛋白抗体结合，同时抗肌红蛋白抗体-碱性磷酸酶标记物与样本中肌红蛋白另一位点结合。反应完成后，磁场吸住磁珠，洗去未结合的物质。 第二步：将化学发光底物添加到反应管内，发光底物（3-(2-螺旋金刚烷)-4-甲氧基-4-(3-磷氧酰)-苯基-1,2-二氧环乙烷，AMPPD）被碱性磷酸酶所分解，脱去一个磷酸基，生成不稳定的中间产物，该中间产物通过分子内电子转移产生间氧苯甲酸甲酯阴离子，处于激发态的间氧苯甲酸甲酯阴离子从激发态返回基态时，产生化学发光，再通过光电倍增管对反应中所产生的光子数进行测量。所产生光子数与样本内肌红蛋白的浓度成正比。样本内分析物的量由校准曲线来确定。 【主要组成成分】
甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP单试剂微板法)
甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP 单试剂微板法) 简介： 甘油三酯(Triglyceride ，TG ）又称三酰甘油，是3分子长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，是人体内含量最多的脂类，大部分组织均可以利用甘油三酯分解产物供给能量，同时肝脏、脂肪等组织还可以进行甘油三酯的合成。 Leagene 甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP 单试剂微板法)又称磷酸甘油氧化酶法或磷酸甘油氧化酶-过氧化物酶偶联法等，甘油三脂被LPL 水解为甘油和脂肪酸，再经过氧化物酶(POD)催化，使4-氨基安替比林与酚(三者合称PAP)反应，生成红色苯醌亚胺(Trinder 反应)。酶标仪在500~520nm 处进行比色测定。本试剂盒用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的甘油三脂含量定量测定。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 操作步骤(仅供参考)： 1、 样本处理： ①血清、血浆、脑脊液样本：从待测样本中分理出的血清或血浆不应有溶血，直接检测，如超过线性范围，用生理盐水稀释后检测。 ②细胞样本： a 、取适量的细胞(一般推荐>106以上)，弃上清，留取沉淀。 b 、用PBS 或生理盐水清洗1~2次，弃上清，留取沉淀。 c 、加入200~300μl 的PBS 或生理盐水匀浆，冰浴条件下超声破碎细胞，功率300W ，每次3~5s ，间隔30s ，重复3~5次。亦可手动匀浆，制备好的匀浆液不可离心，待用。 d 、③组织样本：准确称取适量组织样本，按质量(g)：生理盐水或PBS(ml)=1：9的比例， 编号 名称 TC1241100T Storage 试剂(A): GPO-PAP 工作液 Tris-HCl buffer 30ml -20℃ 避光 LPL 、GK 4-氨基安替比林 对氯酚 试剂(B): Glycerol 标准(1.7mmol/L) 1ml RT 试剂(C): ddH 2O 1ml RT 使用说明书 1份
脯氨酸(PRO)含量测定试剂盒说明书
货号：QS1605 规格：50管/48样脯氨酸（PRO）含量测定试剂盒说明书 可见分光光度法 正式测定前务必取2-3 个预期差异较大的样本做预测定 测定意义： Pro广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中，逆境条件下，植物体内Pro含量显著增加。Pro增加量在一定程度上反映了抗逆性，抗旱性强的品种往往积累较多的脯氨酸。因此，脯氨酸增加量可以作为抗逆育种的生理指标之一。 测定原理： 用磺基水杨酸（SA）提取Pro，加热处理后，Pro与酸性茚三酮溶液反应生成红色；加甲苯萃取后，在520nm测定吸光度。 自备实验用品及仪器： 可见分光光度计、水浴锅、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、冰乙酸50mL、甲苯50mL、研钵、冰和蒸馏水。 试剂的组成和配制： 提取液：液体50mL×1瓶，4℃保存。 试剂一：冰乙酸25 mL×1瓶，4℃保存。（自备） 试剂二：液体25 mL×1瓶，4℃保存。 试剂三：甲苯50mL×1瓶，4℃保存。（自备） 样品测定的准备： 1、细菌、细胞或组织样品的制备： 细菌或培养细胞：先收集细菌或细胞到离心管内，离心后弃上清；按照细菌或细胞数量（104个）：提取液体积（mL）为500~1000：1的比例（建议500万细菌或细胞加入1mL提取液），超声波破碎细菌或细胞（冰浴，功率20％或200W，超声3s，间隔10s，重复30次）；之后置95℃水浴振荡提取10min；10000g，25℃离心10min，取上清，冷却后待测。 组织：按照组织质量（g）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL提取液），进行冰浴匀浆；之后置95℃水浴振荡提取10min；10000g，25℃离心10min，取上清，冷却后待测。 2、血清（浆）样品：按照血清（浆）体积（mL）：提取液体积(mL)为1：5~10的比例（建议取0.1mL血清（浆）加入1mL提取液），充分混匀，之后置95℃水浴振荡提取10分钟，10000g，25℃离心10分钟，取上清，冷却后待测。 测定步骤： 1、分光光度计预热30min以上，调节波长至520nm，蒸馏水调零。 2、样本测定： (1)取0.5mL样本+0.5mL试剂一+0.5mL试剂二于有盖试管中，置95℃水浴中保温30min（盖紧，防止水分散失），每10min振荡一次。 (2)待冷却后，在试管中加入1mL试剂三，振荡30s，静置片刻，使色素转至试剂三中；吸取0.8mL-1mL上层溶液于1mL玻璃比色皿中，于520nm波长处比色，记录吸光值A。 第1页，共2页
试剂盒使用说明书
人上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)酶联免疫分析（ELISA） 试剂盒使用说明书 本试剂仅供研究使用目的：本试剂盒用于测定人血清，血浆及相关液体样本中上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)的含量。 实验原理： 本试剂盒应用双抗体夹心法测定标本中人上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)水平。用纯化的人上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)抗体包被微孔板，制成固相抗体，往包被单抗的微孔中依次加入上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)，再与HRP 标记的羊抗人抗体结合，形成抗体-抗原-酶标抗体复合物，经过彻底洗涤后加底物TMB显色。TMB在HRP酶的催化下转化成蓝色，并在酸的作用下转化成最终的黄色。颜色的深浅和样品中的上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)呈正相关。用酶标仪在450nm波长下测定吸光度（OD值），通过标准曲线计算样品中人上皮中性粒细胞活化肽78(ENA-78/CXCL5)含量。 试剂盒组成： 试剂盒组成48孔配置96孔配置保存 说明书1份1份 封板膜2片（48）2片（96） 密封袋1个1个 酶标包被板1×481×962-8℃保存 标准品：18ng/ml0.5ml×1瓶0.5ml×1瓶2-8℃保存标准品稀释液 1.5ml×1瓶 1.5ml×1瓶2-8℃保存酶标试剂3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存样品稀释液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂A液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存显色剂B液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存终止液3ml×1瓶6ml×1瓶2-8℃保存浓缩洗涤液（20ml×20倍）×1瓶（20ml×30倍）×1瓶2-8℃保存 样本处理及要求： 1.血清：室温血液自然凝固10-20分钟，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上 清，保存过程中如出现沉淀，应再次离心。 2.血浆：应根据标本的要求选择EDTA或柠檬酸钠作为抗凝剂，混合10-20分钟后，离心 20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程中如有沉淀形成，应该再次离心。 3.尿液：用无菌管收集，离心20分钟左右（2000-3000转/分）。仔细收集上清，保存过程 中如有沉淀形成，应再次离心。胸腹水、脑脊液参照实行。 4.细胞培养上清：检测分泌性的成份时，用无菌管收集。离心20分钟左右（2000-3000转/
甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP单试剂比色法)
甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP单试剂比色法) 简介： 甘油三酯(Triglyceride，TG）又称三酰甘油，是3分子长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，是人体内含量最多的脂类，大部分组织均可以利用甘油三酯分解产物供给能量，同时肝脏、脂肪等组织还可以进行甘油三酯的合成。用酶学方法测定TG是生化检测中的常用方法，其特点是：1、灵敏度、准确度、精密度均高；2、使用温和的反应条件；3、操作简便；4、适用于自动分析仪。 Leagene甘油三脂(TG)检测试剂盒(GPO-PAP单试剂比色法)又称磷酸甘油氧化酶法或磷酸甘油氧化酶-过氧化物酶偶联法等，甘油三脂被LPL水解为甘油和脂肪酸，后者经甘油激酶和ATP磷酸化，G-3-P被磷酸甘油氧化酶氧化，并产生过氧化氢，再经过氧化物酶(POD)催化，使4-氨基安替比林与酚(三者合称PAP)反应，生成红色苯醌亚胺(Trinder反应)。分光光度计在进行比色测定。本试剂盒用于人或动物的血清、血浆、脑脊液、细胞、组织等样本中的甘油三脂含量定量测定。本试剂盒仅用于科研领域，不宜用于临床诊断或其他用途。 组成： 自备材料： 1、生理盐水或PBS 2、离心管、小试管或96孔板 3、水浴锅或恒温箱 4、分光光度计或酶标仪 5、全自动或半自动生化分析仪操作步骤(仅供参考)：编号 名称TC1243 100T Storage 试剂(A): GPO-PAP 工作液Tris-HCl buffer 2×50ml-20℃避光LPL、GK 磷酸甘油氧化酶(GPO) 过氧化物酶(POD) 4-氨基安替比林 对氯酚 试剂(B): Glycerol标准(1.7mmol/L) 1ml RT 试剂(C): ddH2O 1ml RT 使用说明书1份
甘油三酯测定的参考值和临床意义
甘油三酯属中性脂肪，人体储存了大量甘油酯，其首要功能是为细胞代谢提供能量。血浆中的甘油酯90％～95％是甘油三酯。饮食中脂肪被消化吸收后，以甘油三酯形式形成乳糜微粒循环于血液中，乳糜微粒中的80％以上为甘油三酯。血中乳糜微粒的半寿期仅为l0～15min，进食后l2h，正常人血中几乎没有乳糜微粒，甘油三酯恢复至原有水平。参考值：TG水平与种族、年龄、性别以及生活习惯（如饮食、运动等）有关，我国人的TG水平显著低于欧美白人。国内李健斋等根据北京市人群的调查，中年男女的TG平均水平约为95mg／dl （1.07mmol／L）和90mg／dl（1.02mmol／L），老年男女分别约为l05mg／dl（1.19mmol／L）和120mg／dl（1.36mmol／L）。应注意TG水平的个体内与个体间变异都比TC大，人群调查数据比较分散，呈明显的正偏态分布。前瞻性研究分析显示高TG也是CHD的独立危险因子。虽然继发性或遗传性因素可升高TG水平，但临床中大部分血清TG升高见于代谢综合征。我国血脂异常防治建议提出，国人成年人的合适TG水平≤1.69mmol／L（150mg／dl）；>1.69mmol／L为TG升高。NCEP-ATPIll文件将血清TG分为4个水平：≥5.64mmol／L（500mg ／dl）为极高，2.26mmol／I，～5.63mmol／L（200～499mg／dl）为升高，l.69mmol／L～2.25mmol／L（150～199mg／dl）为l临界范围，<1.69mmol／L（150mg／dl）为合适水平。临床意义：（1）甘油三酯升高：现在认为甘油三酯也是冠心病发病的一个危险因素，当其升高时也应该给予饮食控制或药物治疗。其升高可见于各种高脂蛋白血症、糖尿病、痛风、梗阻性黄疸、甲状腺功能低下、胰腺炎等。（2）甘油三酯降低：见于低脂蛋白血症、营养吸收不良、甲状腺功能亢进、甲状旁腺功能亢进，还可见于过度饥饿、运动等。方法学：化学法已被淘汰，由酶法代替。酶法快速准确，操作简单，并能在自动生化分析仪上进行大批量标本检测。
人III型前胶原ELISA 检测试剂盒使用说明书
人III型前胶原ELISA 检测试剂盒使用说明书提供商：上海乔羽生物科技有限公司 本试剂仅供研究使用标本：血清或血浆 试验原理： PC-III试剂盒是固相夹心法酶联免疫吸附实验（ELISA）.已知PC-III浓度的标准品、未知浓度的样品加入微孔酶标板内进行检测。先将PC-III和生物素标记的抗体同时温育。人III型前胶原ELISA 检测试剂盒洗涤后，加入亲和素标记过的HRP。再经过温育和洗涤，去除未结合的酶结合物，然后加入底物A、B，和酶结合物同时作用。产生颜色。颜色的深浅和样品中PC-III的浓度呈比例关系。 自备材料 蒸馏水。 加样器：5ul、10ul、50ul、100ul、200、500ul、1000ul。 振荡器及磁力搅拌器等。 安全性 避免直接接触终止液和底物A、B。一旦接触到这些液体，请尽快用水冲洗。 实验中不要吃喝、抽烟或使用化妆品。 不要用嘴吸取试剂盒里的任何成份。 操作注意事项 试剂应按标签说明书储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃，不可保存。 实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存，以免变质。 不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。保质前使用。 使用一次性的吸头以免交叉污染，人III型前胶原ELISA 检测试剂盒吸取终止液和底物A、B液时，避免使用带金属部分的加样器。 使用干净的塑料容器配置洗涤液。使用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。 底物A应挥发，避免长时间打开盖子。底物B对光敏感，避免长时间暴露于光下。避免用手接触，有毒。实验完成后应立即读取OD值。 加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。 按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
甘油三酯测定的操作规程
甘油三酯测定的操作规程 1、用途：测定人血清中甘油三酯的浓度。 2、检验原理：用脂蛋白酯酶使血清中甘油三酯水解为甘油和脂肪酸，将生成的甘油用甘油酯酶及三磷酸腺苷磷酸化，产生磷酸二氢丙酮和过氧化氢，生成红色醌亚胺色素，醌亚胺最大吸收在500nm处左右，吸光度与标本中甘油三酯的含量成正比。 3、适用仪器：奥林巴斯AU480型全自动生化分析仪。 4、样本要求： 4.1、样本种类：新鲜无溶血血清。 4.2、样本采集：常规静脉采血约2ml，不抗凝。置普通管中，或采用含有分 离胶的真空采血管。 4.3、样本干扰：对反映吸光度有干扰的样本，包括溶血和浑浊的样本都可能 影响检测结果遇上述情况建议重新采集标本。 4.4、样本保存：血清样本2℃—8℃可稳定3天，-20℃~-15℃可保存一个月， 忌反复冻融。 5、检测方法： 5.1、试剂的准备：试剂开瓶即可使用。 5.2、检测步骤： 品加载→测定→结果审核→报告。
5.3、校准：应使用试剂盒配套的校准品，校准周期为28天，当试剂更换批号、 出现质控漂移、仪器做完保养后及重要零件更换时，须重新校准。 5.4、结果计算：全自动生化分析仪会自动给出检测结果。 6、参考范围： (各医院应根据本地区实际情况建立自己的参考范围。） 7、注意事项： 7.1、试剂具有一定的酸碱性，避免直接接触皮肤和眼睛，切勿吞咽。 7.2、使用后的器具应按照规定处理，扔入指定的垃圾箱内，不可随处乱扔， 防止环境污染和二次使用。 7.3、由于运输过程产生渗液或漏夜的产品，或在运输贮存中没有按照说明书 要求进行维护的试剂，不可使用。 7.4、试剂只用于体外诊断。 8、参考文献： 王惠萱、李雪梅、王冈，临床检验操作手册，云南科技出版社，2008. 中华人民共和国卫生部医政司，全国临床检验操作规程（第三版），东南大学出版社，2006。陆永绥、李清华、张伟民主编，临床检验自动化仪器分析标准操作规程，浙江大学出版社，2006.
甘油三酯(TG)含量检测试剂盒说明书 可见分光光度法
甘油三酯（TG）含量检测试剂盒说明书可见分光光度法 注意：正式测定之前选择2-3个预期差异大的样本做预测定。 货号：BC0620 规格：50T/48S 试剂内容： 试剂一：自备，取100mL玻璃空瓶，加入45mL正庚烷，45mL异丙醇，盖紧后混匀，4℃保存。 试剂二：液体7mL×1瓶，4℃保存。 试剂三：液体30mL×1瓶，4℃保存。 试剂四：液体10mL×1瓶，4℃避光保存。 试剂五：液体30mL×1瓶，4℃避光保存。 试剂六：液体30mL×1瓶，4℃避光保存。 标准品：粉剂×1瓶，临用前加5mL试剂一，即1mg/mL甘油三酯标准溶液，4℃保存。 产品说明： TG是长链脂肪酸和甘油形成的脂肪分子，不仅是细胞膜的主要成分，也是重要呼吸底物。测定原理：用异丙醇抽提取TG，KOH皂化TG后水解生成甘油及脂肪酸，过碘酸氧化甘油生成甲醛，在氯离子存在下甲醛与乙酰丙酮缩合生成黄色物质，在420nm有特征吸收峰，其颜色的深浅与TG含量成正比。 自备仪器和用品： 可见分光光度计、水浴锅、可调式移液枪、1mL玻璃比色皿、双蒸水和100mL玻璃空瓶。 操作步骤: 一、TG的提取： 1、组织：按照组织质量（g）：试剂一体积(mL)为1：5~10的比例（建议称取约0.1g组织，加入1mL试剂一） 进行冰浴匀浆，8000g，4℃离心10min，取上清待测。 2、细胞、细菌：先收集400-500万细胞或细菌到离心管内，弃上清，加1mL试剂一，超声波破碎1min（强 度20％，超声2s，停1s），8000g，4℃离心10min，取上清待测。
3、血清（浆）等液体样品：直接测定。 二、测定操作： 1.分光光度计预热30min，调节波长到420nm，蒸馏水调零。 2.水浴锅预热到65℃。 试剂名称（μL）空白管标准管测定管 双蒸水200 1mg/mL标准液200 TG待测液200 试剂一625625625 试剂二125125125 加试剂一后充分混匀，再加试剂二，剧烈振荡30s，静置，待分层后取上层溶液75μL，置于新的EP 管中。 3．甘油三酯含量测定： 试剂名称（μL）空白管标准管测定管 上层溶液757575 试剂三250250250 试剂四757575 充分混匀，65℃水浴3min 试剂五250250250 试剂六250250250 充分混匀，65℃水浴15min 取出EP管，待冷却后，于420nm处比色，记为A空，A标和A测。 注意：空白管和标准管只需测定一次。 三、计算公式： 1.血清（浆）中甘油三酯含量： TG含量（mg/dL）=C标准品×（A测－A空）÷（A标－A空）×100 =100×（A测－A空）÷（A标－A空） C标准品：标准品浓度，1mg/mL；100：单位换算系数，1dL=100mL。
小鼠SP检测试剂盒使用说明
小鼠SP检测试剂盒使用说明 货号：SP0011 产品内容： 封闭液（正常山羊血清）3ml6ml18ml 3%H2O23ml6ml18ml Bio-羊抗小鼠IgG浓缩液30ul60ul180ul 链酶亲和素-POD浓缩液30ul60ul180ul 稀释液10ml20ml60ml 20×DAB显色液A0.3ml0.6ml 1.8ml 20×DAB显色液B0.3ml0.6ml 1.8ml 保存： 如果长时间不使用，请将所有试剂存放于-20℃，如经常使用，可将封闭液，3%H2O2和20×DAB显色液B存放于2-8℃以方便使用。 产品说明： 小鼠SP检测试剂盒适合于一抗为小鼠IgG的免疫组化实验DAB显色。 SP试剂盒是专为免疫组化和其他免疫检测而设计的，用以显示组织和细胞中抗原分布。链霉亲和素(StreptAvidin)是一种从链霉菌中提取的蛋白质，同亲和素一样，对生物素有极高的亲和力，亲和素是一个碱性蛋白质（PI=10），经改造后可以转变成中性蛋白质。链霉亲和素等电点接近中性，对组织和细胞的非特异吸附很低，因此基于链霉亲和素的免疫组化方法背景很低。 操作步骤:（以石蜡切片为例） 1.切片常规脱蜡至水(三次二甲苯，三次乙醇)。 2.3%H2O2室温处理5-10分钟以灭活内源性酶。蒸馏水洗3次。
3.可选步聚： a、热修复抗原，将切片浸入0.01M柠檬酸钠缓冲液（PH6.0），电炉或微波炉加热至沸腾后断电，间隔5-10分钟后，反复1-2次。冷却后PBS（pH7.2-7.6）洗涤1-2次。 b、酶消化，滴加消化液，37℃10分钟，PBS（pH7.2-7.4）洗涤2-3次。 c、跳过此步，直接进入下一步。 4.滴加封闭液，室温20分钟。甩去多余液体，免洗。 5.用稀释液将一抗按一定比例稀释（稀释后的一抗4℃可保存一周），也可另行购买抗体稀释液。滴加稀释的一抗37℃孵育1小时左右或20℃2小时左右，也可4℃过夜。PBS （pH7.2-7.4）洗涤3次，每次2分钟。（一抗的稀释度、孵育时间和温度与染色强度、背景有直接关系。一般来说，阳性染色强度不够时，可提高一抗浓度和延长孵育时间；背景过高时，可降低一抗浓度和缩短孵育时间。） 6．根据用量，用稀释液将Bio-羊抗小鼠IgG浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul Bio-羊抗小鼠IgG浓缩液混匀，此工作液4℃可保存一周)。滴加Bio-羊抗小鼠IgG 工作液，20-37℃孵育30分钟。PBS（pH7.2-7.4）洗涤3次，每次2分钟。 7．根据使用量，用稀释液将链酶亲和素-POD浓缩液按1:100稀释成工作液(1ml稀释液加入10ul链酶亲和素-POD浓缩液混匀，此工作液4℃可保存一周)。滴加链酶亲和素-POD工作液，20-37℃，30分钟。PBS（pH7.2-7.4）洗涤4次，每次5分钟。 8．DAB显色：根据用量，用PBS（pH7.2-7.4）配制，按1ml PBS加入50ul20×DAB显色液A，加入50ul20×DAB显色液B。充分混匀后滴加到切片上。室温显色，镜下控制反应时间，一般在5-30分钟之间。蒸馏水洗涤终止反应。 9．苏木素轻度复染。脱水，透明，封片。显微镜观察。 对于细胞爬片，固定后，PBS漂洗两次，再用0.5%Triton X-100室温孵育20分钟，