常用蛋白酶切割位点

蛋白酶酶切位点

蛋白酶酶切位点木瓜蛋白酶巯基蛋白酶具有广泛特异性TPCK,TLCK,抑蛋白酶醛肽α-巨球蛋白,烷化剂胃蛋白酶酸蛋白酶广泛特异性胃蛋白酶抑制素胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶在K或R之后TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽抑肽酶,α巨球蛋白人体20种氨基酸及其英文缩写名称三字符号单字符号丙氨酸Ala A精氨酸Arg R天冬氨酸Asp D半胱氨酸Cys C谷氨酰胺Gln Q谷氨酸Glu/Gln E组氨酸His H异亮氨酸Ile I甘氨酸Gly G天冬酰胺Asn N亮氨酸Leu L赖氨酸Lys K甲硫氨酸Met M苯丙氨酸Phe F脯氨酸Pro P丝氨酸Ser S苏氨酸Thr T色氨酸Trp W酪氨酸Tyr Y缬氨酸Val V【生化】特异性蛋白酶的酶切位点胰蛋白酶arg、lys，得到以arg、lys为C末端残基的肽段。

胰凝乳蛋白酶phe、trp、tyr 等疏水aa。

胃蛋白酶phe、trp、tyr等疏水aa。

木瓜蛋白酶arg、lys。

葡萄球菌蛋白酶，磷酸缓冲液ph7.8时断裂glu、asp。

碳酸氢铵缓冲液ph7.8或醋酸铵缓冲液ph4.0时断裂glu。

梭菌蛋白酶arg，用于不溶性蛋白的长时间裂解。

CNBr断裂Met。

羟胺断裂asn—gly间的肽键。

二硫键可以用巯基化合物还原法或者过甲酸氧化法断裂.。

木瓜蛋白酶（Papain），又称木瓜酶，是一种蛋白水解酶。

木瓜蛋白酶是番木瓜（Carieapapaya）中含有的一种低特异性蛋白水解酶，广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内，其中在未成熟的乳汁中含量最丰富。

木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸，属于巯基蛋白酶，它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特点，因此在食品、医药、饲料、日化、皮革及纺织等行业得到广泛应用。

木瓜蛋白酶是一种蛋白水解酶，分子量为23406，由一种单肽链组成，含有212个氨基酸残基。

至少有三个氨基酸残基存在于酶的活性中心部位，他们分别是Cys25、His159和Asp158，另外六个半胱氨酸残基形成了三对二硫键,且都不在活性部位。

蛋白酶的分类及酶切位点

蛋白酶的分类及酶切位点氨基酸0.ppt氨基酸的名称与符号alanine 丙氨酸Ala Aarginine 精氨酸Arg Rasparagine 天冬酰氨Asn Asx Naspartic acid 天冬氨酸Asp Asx Dcysteine 半胱氨酸Cys Cglutamine 谷氨酰胺Gln Glx Qglutamic acid 谷氨酸Glu Glx Eglycine 甘氨酸Gly Ghistidine 组氨酸His Hisoleucine 异亮氨酸Ile Ileucine 亮氨酸Leu Llysine 赖氨酸Lys Kmethionine 甲硫氨酸Met Mphenylalanine 苯丙氨酸Phe Fproline 脯氨酸Pro Pserine 丝氨酸Ser Sthreonine 苏氨酸Thr Ttryptophan 色氨酸Trp Wtyrosine 酪氨酸Tyr Yvaline 缬氨酸Val V血清终止胰酶消化的原理血清终止的原理其实是竞争抑制。

就是用过量的牛血清中含有的蛋白来和胰酶结合。

不给胰酶消化细胞蛋白的机会。

细胞传代时，血清为什么能终止胰酶消化？胰蛋白酶的酶切位点是肽链的Lys和Arg两个残疾的羧基端肽键，血清的加入可使酶饱和，严格上说不是竞争性抑制，因为血清蛋白不是抑制剂，还是底物！什么样的细胞不能用胰酶-EDTA消化植物细胞不能用胰酶-EDTA消化，要用纤维素酶消化。

应该是肿瘤细胞吧。

正常的细胞，貌似都需要用胰酶或者胶原酶消化。

EDTA-胰酶，只不过是在胰酶里加入了EDTA而已。

EDTA是乙二胺四乙酸，一种金属螯合剂。

一般和胰蛋白酶配合使用。

原因在于，钙，镁等金属离子会降低胰酶活力，故在使用胰酶消化液时要配合加入EDTA。

它可以螯合这些离子，消除对胰酶的抑制。

干细胞饲养层制作中，胰酶—EDTA消化成纤维细胞（MEF）时，EDTA的作用是什么？应该是胰酶分散细胞，EDTA鳌合金属离子使金属酶失活《军医进修学院学报》1992年02期加入收藏投稿正常人血浆蛋白酶解产物对胃癌细胞肺转移抑制作用的研究焦顺昌赵东海黄昌霞王洪海【摘要】：本文采用胰凝乳蛋白酶和胃蛋白酶联合消化方法得到正常人血浆(NHP)有限蛋白酶解产物(NHP-EP)。

蛋白酶酶切位点

蛋白酶酶切位点木瓜蛋白酶巯基蛋白酶具有广泛特异性TPCK,TLCK,抑蛋白酶醛肽α-巨球蛋白,烷化剂胃蛋白酶酸蛋白酶广泛特异性胃蛋白酶抑制素胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶在K或R之后TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽抑肽酶,α巨球蛋白人体20种氨基酸及其英文缩写名称三字符号单字符号丙氨酸Ala A精氨酸Arg R天冬氨酸Asp D半胱氨酸Cys C谷氨酰胺Gln Q谷氨酸Glu/Gln E组氨酸His H异亮氨酸Ile I甘氨酸Gly G天冬酰胺Asn N亮氨酸Leu L赖氨酸Lys K甲硫氨酸Met M苯丙氨酸Phe F脯氨酸Pro P丝氨酸Ser S苏氨酸Thr T色氨酸Trp W酪氨酸Tyr Y缬氨酸Val V【生化】特异性蛋白酶的酶切位点胰蛋白酶arg、lys，得到以arg、lys为C末端残基的肽段。

胰凝乳蛋白酶phe、trp、tyr 等疏水aa。

胃蛋白酶phe、trp、tyr等疏水aa。

木瓜蛋白酶arg、lys。

葡萄球菌蛋白酶，磷酸缓冲液ph7.8时断裂glu、asp。

碳酸氢铵缓冲液ph7.8或醋酸铵缓冲液ph4.0时断裂glu。

梭菌蛋白酶arg，用于不溶性蛋白的长时间裂解。

CNBr断裂Met。

羟胺断裂asn—gly间的肽键。

二硫键可以用巯基化合物还原法或者过甲酸氧化法断裂.。

木瓜蛋白酶（Papain），又称木瓜酶，是一种蛋白水解酶。

木瓜蛋白酶是番木瓜（Carieapapaya）中含有的一种低特异性蛋白水解酶，广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内，其中在未成熟的乳汁中含量最丰富。

木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸，属于巯基蛋白酶，它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特点，因此在食品、医药、饲料、日化、皮革及纺织等行业得到广泛应用。

木瓜蛋白酶是一种蛋白水解酶，分子量为23406，由一种单肽链组成，含有212个氨基酸残基。

至少有三个氨基酸残基存在于酶的活性中心部位，他们分别是Cys25、His159和Asp158，另外六个半胱氨酸残基形成了三对二硫键,且都不在活性部位。

tev蛋白酶切位点的dna序列

tev蛋白酶切位点的dna序列
Tev蛋白酶切位点的DNA序列是指Tev蛋白酶可以识别并切割的DNA序列，也被称为Tev切割位点。

Tev蛋白酶是一种常用的内切酶，具有高度特异性和高效性。

Tev蛋白酶的切割位点为5'-G|TATAC-3'，其中“|”所示的位置为切割位点。

因此，Tev蛋白酶切割位点的DNA序列为5'-GTTAAC-3'。

Tev蛋白酶的切割位点的序列具有较高的特异性和保守性，因此在进行基因克隆和重组DNA技术时，Tev蛋白酶切割位点的选择非常重要。

在进行DNA片段连接时，通过在DNA的末端引入Tev蛋白酶切割位点，可以使用Tev蛋白酶将DNA 片段剪切开，并通过该切口将不同的DNA片段连接起来。

需要注意的是，Tev蛋白酶切割位点的DNA序列只是其中一种常用的切割位点序列，不同种类的内切酶所识别的切割位点序列也是不同的。

因此，在进行基因克隆和重组DNA技术时，需要选择适合特定目的的内切酶切割位点序列。

蛋白酶酶切位点

蛋白酶酶切位点蛋白酶的分类及作用位点蛋白酶分类作用位点已知抑制物,,氨基肽酶金属蛋白酶带有自由氨基的L-氨基酸氨基末端,22双吡啶,1,1()-菲咯啉不分解由X-Pro、D或Q组成的肽键菠萝蛋白酶巯基蛋白酶无特异性α2巨球蛋白,TPCK,TLCK,烷化羧肽酶A 锌金属蛋白酶带有自由氨基酸的L-氨基酸羧基端,EDTA,EGTA不能分解R、P或羟脯氨酸羧肽酶B 锌金属蛋白酶 K- Lys,R- Arg羧基端 EDTA,EGTA,碱性氨基酸羧肽酶Y 丝氨酸羧肽酶氨基酸羧基端 PMSF组织蛋白酶C 琉基蛋白酶氨基端双肽,可通过K,R或P氨基醋酸碘, 甲醛端作为第二或第三个氨基酸封闭胰凝乳蛋白酶丝氨酸蛋白酶在F- Phe,T- Thr或Y- Tyr之后抑肽酶,PMSF,TPCK,α-巨球蛋白胶原酶金属蛋白酶在P-X-G-P肽链中X之后EDTA,EGTA,还原剂,但无血清存在2+dispase 金属蛋白酶无特异性 EDTA,EGTA,Hg,重金属内肽酶Arg-C 丝氨酸蛋白酶在R- Arg之后α巨球蛋白,TLCK 内肽酶Asp-N 金属蛋白酶在D- Asp和C-Cys半胱氨酸之前EDTA,α菲咯啉内肽酶Glu-C 丝氨酸蛋白酶在E- Glu/Gln 或D- Asp之后α巨球蛋白,TLCK 内肽酶Lys-C 丝氨酸蛋白酶在K- Lys之后TLCK,抑肽酶,抑蛋白酶醛肽肠激酶丝氨酸蛋白酶在D-D-D-D-K-肽链中K之后Xa因子丝氨酸蛋白酶在R- Arg之后 PMSF,APMS,大豆胰蛋白酶抑制物无花果蛋白酶琉基蛋白酶无特异性TPCK,TLCK,α-巨球蛋白激肽释放酶丝氨酸蛋白酶在一些R- Arg之后抑肽酶,抑蛋白酶醛肽木瓜蛋白酶巯基蛋白酶长期孵育时具有广泛特异性arg、lys TPCK,TLCK,抑蛋白酶醛肽α—、gly、L-Citrulline 巨球蛋白,烷化剂胃蛋白酶酸蛋白酶广泛特异性phe、trp、tyr等疏水aa 胃蛋白酶抑制素纤溶酶丝氨酸蛋白酶在K- Lys或R- Arg之后 PMSF,TLCK,抑肽酶,α-巨球蛋白链霉蛋白酶混合型无特异性 B,M,完整药片蛋白酶K 丝氨酸蛋白酶广泛特异性 PMSF,PefablocSc 枯草杆菌蛋白酶丝氨酸蛋白酶无特异性PMSF,α巨球蛋白,苯甲脒热溶素锌金属蛋白酶在非极性残基之前 EDTA凝血酶丝氨酸蛋白酶在K- Lys之后 TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽抑肽酶,α巨球蛋白,苯甲脒胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶在K- Lys或R -Arg之后arg、lys TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽抑肽酶,α巨球蛋白蛋白酶分类作用位点已知抑制物木瓜蛋白酶巯基蛋白酶具有广泛特异性 TPCK,TLCK,抑蛋白酶醛肽α-巨球蛋白,烷化剂胃蛋白酶酸蛋白酶广泛特异性胃蛋白酶抑制素胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶在K或R之后 TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽抑肽酶,α巨球蛋白人体20种氨基酸及其英文缩写1名称三字符号单字符号丙氨酸 Ala A精氨酸 Arg R天冬氨酸 Asp D半胱氨酸 Cys C谷氨酰胺 Gln Q谷氨酸 Glu/Gln E组氨酸 His H异亮氨酸 Ile I甘氨酸 Gly G天冬酰胺 Asn N亮氨酸 Leu L赖氨酸 Lys K甲硫氨酸 Met M苯丙氨酸 Phe F脯氨酸 Pro P丝氨酸 Ser S苏氨酸 Thr T色氨酸 Trp W酪氨酸 Tyr Y缬氨酸 Val V【生化】特异性蛋白酶的酶切位点胰蛋白酶arg、lys,得到以arg、lys为C末端残基的肽段。

蛋白酶切位点

.
Arg-|-Xaa, Lys-|-Xaa,
AminopeptidaseA,or angiotensinase,or glutamyl-aminopeptidase
.
Glu-|-Xaa>>Asp-|-Xaa,
Dipeptidyl-peptidaseI,or cathepsin(组织蛋白酶)C or J
.
Plasma kallikrein (血浆激肽释放酶)
.
Arg-|-Xaa, Lys-|-Xaa,including
Arg-|-Ser,Lys-|-Arg,
Leukocyteelastase(白细胞弹性蛋白酶),orneutrophilelastase(中性白细胞弹性蛋白酶),orlysosomalelastase(溶酶体弹性蛋白酶)
≠AlaorVal
脑啡肽酶),or enkephalinase(脑啡肽酶),or neutralendopeptidase
.
Xaa-|-Tyr,Xaa-|-Phe, Xaa-|-Trp,and
Xaa-|-Leu,
Thimet oligopeptidase(甲拌磷寡肽酶),or endo-oligopeptidase A,or endopeptidase(肽链内切酶),or pz-peptidease(肠促胰酶素)
.
Xaa-Yaa-|-Zaa,if Xaa≠ArgorLys,or
Yaa ≠Pro,orZaa≠Pro
Dipeptidyl-peptidase IV
.
Preferentially Xaa-Pro-|-Zaa,(but also Xaa-Ala-|-Yaa)withYaa ≠Pro or Hyp
Prolyl tripeptyl-peptidase

蛋白酶酶切位点

蛋白酶酶切位点木瓜蛋白酶疏基蛋白酶具有广泛特异性TPCKJLCK,抑矍白酶醛肽6巨球蛋白,烷化剂胃蛋白酶酸蛋白酶广泛特异性胃矍白酶抑制素胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶在K或R之后TLCXPMSF■抑蛋白酶醛肽抑肽酶Q巨球蛋白名称三字符号单字符号Ala A Arg RGlu/GIn E His H lie I Gly G Asn NLeu L Lys Met Phe Pro Ser Thr Trp Tyr Vai胰蛋白酶lys,得到以mg 、lys 为C 末端残基的肽段。

胰凝乳蛋白酶phe 、trp. tyr 等疏水OQ 。

胃蛋白酶phe 、trp 、tyr 等疏水QQ 。

木瓜蛋白酶arg s lys o 葡萄球菌堂白酶，磷酸缓冲液Ph7.8时断裂glu 、aspo 碳酸氢钱缓冲液ph7.8或醋酸钱缓冲液ph4.0 时断裂glu 。

梭菌蛋白酶org,用于不溶性蛋白的长时间裂解。

CNBr 断裂Met 。

羟胺断裂asn —gly 间的肽键。

二硫键可以用铳基化合物还原法或者过甲酸氧化法断裂・。

o 木瓜蛋白酶是番木瓜(Carieapapaya)中含有的一种低特异性蛋白水解酶，广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内，其中在未成熟的乳汁中含量最丰冨。

木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸，属于蔬基蛋白酶，它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特点，因此在食品、医药、饲料、日化、皮革及纺织等行业得到广泛应用。

木瓜蛋白酶是一种蛋白水解酶，分子量为23406,由一种单肽链组成，含有212个氨基酸残基。

至少有三个氨基酸残基存在于酶的活性中心部位，他们分别是Cys25、His 159和 Aspl5&另外六个半胱氨酸残基形成了三对二硫键，旦都不在活性部位。

纯木瓜蛋白酶制品可含有：(1)木瓜蛋白酶，分子S 21000,约占可溶性蛋白质的10%; (2)木瓜凝乳蛋白酶，分子量26000,约占可溶性愛白质的45%; (3)溶菌酶,分子fi 25000,约占可溶性蛋白质的20%;及纤维素酶等不同的酶。

蛋白酶的分类及酶切位点

蛋白酶的分类及酶切位点氨基酸0.ppt氨基酸的名称与符号alanine 丙氨酸Ala Aarginine 精氨酸Arg Rasparagine 天冬酰氨Asn Asx Naspartic acid 天冬氨酸Asp Asx Dcysteine 半胱氨酸Cys Cglutamine 谷氨酰胺Gln Glx Qglutamic acid 谷氨酸Glu Glx Eglycine 甘氨酸Gly Ghistidine 组氨酸His Hisoleucine 异亮氨酸Ile Ileucine 亮氨酸Leu Llysine 赖氨酸Lys Kmethionine 甲硫氨酸Met Mphenylalanine 苯丙氨酸Phe Fproline 脯氨酸Pro Pserine 丝氨酸Ser Sthreonine 苏氨酸Thr Ttryptophan 色氨酸Trp Wtyrosine 酪氨酸Tyr Yvaline 缬氨酸Val V血清终止胰酶消化的原理血清终止的原理其实是竞争抑制。

就是用过量的牛血清中含有的蛋白来和胰酶结合。

不给胰酶消化细胞蛋白的机会。

细胞传代时，血清为什么能终止胰酶消化？胰蛋白酶的酶切位点是肽链的Lys和Arg两个残疾的羧基端肽键，血清的加入可使酶饱和，严格上说不是竞争性抑制，因为血清蛋白不是抑制剂，还是底物！什么样的细胞不能用胰酶-EDTA消化植物细胞不能用胰酶-EDTA消化，要用纤维素酶消化。

应该是肿瘤细胞吧。

正常的细胞，貌似都需要用胰酶或者胶原酶消化。

EDTA-胰酶，只不过是在胰酶里加入了EDTA而已。

EDTA是乙二胺四乙酸，一种金属螯合剂。

一般和胰蛋白酶配合使用。

原因在于，钙，镁等金属离子会降低胰酶活力，故在使用胰酶消化液时要配合加入EDTA。

它可以螯合这些离子，消除对胰酶的抑制。

干细胞饲养层制作中，胰酶—EDTA消化成纤维细胞（MEF）时，EDTA的作用是什么？应该是胰酶分散细胞，EDTA鳌合金属离子使金属酶失活《军医进修学院学报》1992年02期加入收藏投稿正常人血浆蛋白酶解产物对胃癌细胞肺转移抑制作用的研究焦顺昌赵东海黄昌霞王洪海【摘要】：本文采用胰凝乳蛋白酶和胃蛋白酶联合消化方法得到正常人血浆(NHP)有限蛋白酶解产物(NHP-EP)。

蛋白酶切位点

Enzymes E.C.Number Cleavage sites Serine proteases E.C.3.4.21.α-chymotrypsin(胰凝乳蛋白酶，糜蛋白酶)E.C.3.4.21.1Tyr-|-Xaa,Trp-|-Xaa,Phe-|-Xaa,andalso Leu-|-Xaa,Met-|-Xaa,Trypsin(胰朊酶，胰蛋白酶) E.C.3.4.21.4Arg-|-Xaa,Lys-|-Xaa,Pancreatic elastase(胰弹性蛋白酶) E.C.3.4.21.36Ala-|-Xaa,and also Gly-|-Xaa,Val-|-Xaa,Ser-|-Xaa,Thrombin(凝血酶) E.C.3.4.21.5Arg-|-Gly,Plasmin(胞质素，胞浆素) E.C.3.4.21.7Lys-|-Xaa,>Arg-|-XaaProlyl oligopeptidase,or prolylendopeptidaseE.C.3.4.21.26Pro-|-Xaa,>>Ala-|-XaaPlasma kallikrein(血浆激肽释放酶) E.C.3.4.21.34Arg-|-Xaa,Lys-|-Xaa,includingArg-|-Ser,Lys-|-Arg,Leukocyte elastase(白细胞弹性蛋白酶),or neutrophil elastase(中性白细胞弹性蛋白酶),or lysosomalelastase(溶酶体弹性蛋白酶)E.C.3.4.21.37Val-|-Xaa,Ala-|-Xaa,Cysteine proteases E.C.3.4.22.Cathepsin B(组织蛋白酶) E.C.3.4.22.1Arg-Arg-|-Xaa,and also Leu-|-Xaa,Ala-|-Xaa,Phe-|-Xaa,Trp-|-Xaa,Clostripain(梭菌蛋白酶),or endoproteinase Arg-C E.C.3.4.22.8Arg-|-Xaa including Arg-|-Pro,but notLys-|-XaaCalpain(钙激活中性蛋白酶)-1,or μ-calpain E.C.3.4.22.52Met-|-Xaa,Tyr-|-Xaa andArg-|-Xaa(with Leu or Val as the P2residue)Aspartic acid proteases E.C.3.4.23.Pepsin(胃朊酶，胃蛋白酶) E.C.3.4.23.1Preferentially Phe-|-Xaa,Tyr-|-Xaa,and also Leu-|-Xaa,andTrp-|-Xaa,,ideally with Xaa=Phe,Trp,or TyrCathepsin(组织蛋白酶)D E.C.3.4.23.5Preferentially Phe-|-Xaa,Tyr-|-Xaa,and also Leu-|-Xaa,ideally with Xaa≠Ala or ValMetalloproteases E.C.3.4.24.Neprilysin(脑啡肽酶),or enkephalinase(脑啡肽酶),or neutral endopeptidase E.C.3.4.24.11Xaa-|-Tyr,Xaa-|-Phe,Xaa-|-Trp,andXaa-|-Leu,Thimet oligopeptidase(甲拌磷寡肽酶),or endo-oligopeptidase A,or endopeptidase(肽链内切酶)24.15,or pz-peptidease(肠促胰酶素)E.C.3.4.24.15Xaa-|-Arg,Xaa-|-Ser,Xaa-|-Ile,Xaa-|-Ala,Xaa-|-Gly,Aminopeptidases E.C.3.4.11.N-termLeucyl-aminopeptidase E.C.3.4.11.1Preferentially Leu-|-Xaa,but notArg-|-Xaa,and Lys-|-Xaa,Aminopeptidase M or N,or alanyl-aminopeptidase,or membrane alanine aminopeptidase E.C.3.4.11.2Preferentially Ala-|-Xaa,andTyr-|-Xaa,if Yaa-Pro-|-Xaa in termwith Yaa=Ala,Val,Leu,Ile,Phe,Tyr orTrp,then the dipeptide Yaa-Pro couldbe releasedAminopeptidase B E.C.3.4.11.6Arg-|-Xaa,Lys-|-Xaa, Aminopeptidase A,orangiotensinase,orglutamyl-aminopeptidaseE.C.3.4.11.7Glu-|-Xaa>>Asp-|-Xaa,Dipeptidyl-peptidases andtripeptidyl-peptidasesE.C.3.4.14.N-term(di-and tripeptides)Dipeptidyl-peptidase I,or cathepsin(组织蛋白酶)C or J E.C.3.4.14.1Xaa-Yaa-|-Zaa,if Xaa≠Arg or Lys,orYaa≠Pro,or Zaa≠ProDipeptidyl-peptidase IV E.C.3.4.14.5Preferentially Xaa-Pro-|-Zaa,(but alsoXaa-Ala-|-Yaa)with Yaa≠Pro or Hyp Prolyl tripeptyl-peptidase E.C.3.4.14.12Xaa-Yaa-Pro-|-Zaa,if Zaa≠Pro Peptidyl-Dipeptidases E.C.3.4.15.C-termPeptidyl-depeptidase A,or angiotensin-converting enzyme E.C.3.4.15.1Xaa-|-Yaa-Zaa,if Yaa≠Pro or Zaa≠Asp or GluMetallo-carboxypeptidases E.C.3.4.17.C-termCarboxypeptidase A E.C.3.4.17.1Xaa-|-Yaa if Yaa≠Asp,Glu,Arg,Lysor ProCarboxypeptidase B,or E.C.3.4.17.2Xaa-|-Arg and Xaa-|-LysprotaminaseCarboxypeptidase N,orLysine(arginine),Carboxypeptidase(羧基肽酶),orkininase I(激肽酶)E.C.3.4.17.3Xaa-|-Lys>>Xaa-|-Arg Carboxypeptidase U or R E.C.3.4.17.20Xaa-|-Arg and Xaa-|-LysGlutamate Carboxypeptidase II,or folate hydrolase E.C.3.4.17.21Xaa-|-Glu,preferentially with Xaa=Asp or Glu。

常用蛋白酶切割位点

常用融合蛋白切割位点
1.胰蛋白酶属肽链内切酶，能把多肽链中Lys和Arg残基中的羧基侧切断。

2.胰凝乳蛋白酶（亦称糜蛋白酶）属肽链内切酶，主要切断多肽链中的芳香族氨基酸（Phe、Trp、Tyr）残基的羧基一侧。

3.羧肽酶（分A和B型），一般的题目中没有特别指明的话就是两种类型的功能都具备，可以从羧基端切除氨基酸（若羧基端的第1个或第2个氨基酸为Pro的则不能切除）。

4.溴化氰处理，专一性的切割甲硫氨酸羧基端的肽键。

如有侵权请联系告知删除，感谢你们的配合！。

蛋白酶酶切位点

蛋白酶酶切位点蛋白酶的分类及作用位点蛋白酶分类作用位点已知抑制物,,氨基肽酶金属蛋白酶带有自由氨基的L-氨基酸氨基末端,22双吡啶,1,1()-菲咯啉不分解由X-Pro、D或Q组成的肽键菠萝蛋白酶巯基蛋白酶无特异性α2巨球蛋白,TPCK,TLCK,烷化羧肽酶A 锌金属蛋白酶带有自由氨基酸的L-氨基酸羧基端,EDTA,EGTA不能分解R、P或羟脯氨酸羧肽酶B 锌金属蛋白酶 K- Lys,R- Arg羧基端 EDTA,EGTA,碱性氨基酸羧肽酶Y 丝氨酸羧肽酶氨基酸羧基端 PMSF组织蛋白酶C 琉基蛋白酶氨基端双肽,可通过K,R或P氨基醋酸碘, 甲醛端作为第二或第三个氨基酸封闭胰凝乳蛋白酶丝氨酸蛋白酶在F- Phe,T- Thr或Y- Tyr之后抑肽酶,PMSF,TPCK,α-巨球蛋白胶原酶金属蛋白酶在P-X-G-P肽链中X之后EDTA,EGTA,还原剂,但无血清存在2+dispase 金属蛋白酶无特异性 EDTA,EGTA,Hg,重金属内肽酶Arg-C 丝氨酸蛋白酶在R- Arg之后α巨球蛋白,TLCK 内肽酶Asp-N 金属蛋白酶在D- Asp和C-Cys半胱氨酸之前EDTA,α菲咯啉内肽酶Glu-C 丝氨酸蛋白酶在E- Glu/Gln 或D- Asp之后α巨球蛋白,TLCK 内肽酶Lys-C 丝氨酸蛋白酶在K- Lys之后TLCK,抑肽酶,抑蛋白酶醛肽肠激酶丝氨酸蛋白酶在D-D-D-D-K-肽链中K之后Xa因子丝氨酸蛋白酶在R- Arg之后 PMSF,APMS,大豆胰蛋白酶抑制物无花果蛋白酶琉基蛋白酶无特异性TPCK,TLCK,α-巨球蛋白激肽释放酶丝氨酸蛋白酶在一些R- Arg之后抑肽酶,抑蛋白酶醛肽木瓜蛋白酶巯基蛋白酶长期孵育时具有广泛特异性arg、lys TPCK,TLCK,抑蛋白酶醛肽α—、gly、L-Citrulline 巨球蛋白,烷化剂胃蛋白酶酸蛋白酶广泛特异性phe、trp、tyr等疏水aa 胃蛋白酶抑制素纤溶酶丝氨酸蛋白酶在K- Lys或R- Arg之后 PMSF,TLCK,抑肽酶,α-巨球蛋白链霉蛋白酶混合型无特异性 B,M,完整药片蛋白酶K 丝氨酸蛋白酶广泛特异性 PMSF,PefablocSc 枯草杆菌蛋白酶丝氨酸蛋白酶无特异性PMSF,α巨球蛋白,苯甲脒热溶素锌金属蛋白酶在非极性残基之前 EDTA凝血酶丝氨酸蛋白酶在K- Lys之后 TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽抑肽酶,α巨球蛋白,苯甲脒胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶在K- Lys或R -Arg之后arg、lys TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽抑肽酶,α巨球蛋白蛋白酶分类作用位点已知抑制物木瓜蛋白酶巯基蛋白酶具有广泛特异性 TPCK,TLCK,抑蛋白酶醛肽α-巨球蛋白,烷化剂胃蛋白酶酸蛋白酶广泛特异性胃蛋白酶抑制素胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶在K或R之后 TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽抑肽酶,α巨球蛋白人体20种氨基酸及其英文缩写1名称三字符号单字符号丙氨酸 Ala A精氨酸 Arg R天冬氨酸 Asp D半胱氨酸 Cys C谷氨酰胺 Gln Q谷氨酸 Glu/Gln E组氨酸 His H异亮氨酸 Ile I甘氨酸 Gly G天冬酰胺 Asn N亮氨酸 Leu L赖氨酸 Lys K甲硫氨酸 Met M苯丙氨酸 Phe F脯氨酸 Pro P丝氨酸 Ser S苏氨酸 Thr T色氨酸 Trp W酪氨酸 Tyr Y缬氨酸 Val V【生化】特异性蛋白酶的酶切位点胰蛋白酶arg、lys,得到以arg、lys为C末端残基的肽段。

常用蛋白酶的作用位点

常用蛋白酶的作用位点哎呀，今天咱们来聊聊常用蛋白酶的作用位点，这可是个有趣的话题，绝对让你开眼界。

蛋白酶，听起来就像是科学家们在实验室里用显微镜研究的神秘生物，其实它们就在我们日常生活中，和我们息息相关。

想象一下，咱们吃的肉啊、豆腐啊，里面就有这些小家伙在默默工作，帮助我们消化食物。

你要是没见过蛋白酶的样子，那就真是小瞧了它们。

它们可不是光听名字好听，实际上还挺厉害的。

蛋白酶主要的工作就是切割蛋白质，听上去是不是有点简单？其实它们的工作方式就像是厨师在切菜。

想想一大堆蔬菜，有的细、有的粗，厨师得根据需要来切成不同的形状。

蛋白酶也是如此，它们会根据不同的蛋白质结构，选择合适的“切割点”，把大蛋白质切成小块，方便我们消化吸收。

就好像你把一块大牛肉切成小块，容易下嘴，对吧？这就是蛋白酶的魅力所在。

说到切割点，那就得提到几种常见的蛋白酶。

比如说，胃蛋白酶，它可是胃里的大力士，专门负责把肉类的蛋白质分解。

你一吃肉，它就开始工作，把那些看似坚不可摧的蛋白质拆解得七零八落，真是威风凛凛。

不过呀，胃蛋白酶的工作可不是无休止的，它在酸性环境下活得特别好，基本上是个“酸性小霸王”。

可见，科学真是无处不在啊，连吃饭都得靠它们来帮忙。

再说说胰蛋白酶，嘿，这家伙可是从胰腺里分泌出来的，任务也是不轻松。

它跟胃蛋白酶不同，更加喜欢中性的环境。

想象一下，蛋白质进了肠子，胰蛋白酶就像个聪明的侦探，找到了最适合的“切割点”，把那些蛋白质切得规规整整，方便后面的小肠吸收。

对了，咱们的小肠可是营养吸收的“超级市场”，得靠它把蛋白质弄得小巧玲珑，才能被咱们的身体吸收进去。

再聊聊木瓜酶，这家伙可是在热带水果里出道的明星。

吃个木瓜，蛋白质就得到了“贴心服务”。

它能把食物中的蛋白质分解得特别好，所以很多人用它来嫩肉。

想想那个时候，菜市场里一片繁忙，大家都在挑选最好的木瓜，既能解馋又能帮忙，真是两全其美。

再来讲讲植物蛋白酶，这个可有趣了，它们在植物里广泛存在，很多时候也跟我们的饮食有关。

蛋白酶切位点

Enzymes E.C. Number Cleavage sites Serine proteases E.C.3.4.21.α-chymotrypsin(胰凝乳蛋白酶，糜蛋白酶)E.C.3.4.21.1Tyr-|-Xaa, Trp-|-Xaa, Phe-|-Xaa, andalso Leu-|-Xaa, Met-|-Xaa,Trypsin(胰朊酶，胰蛋白酶) E.C.3.4.21.4Arg-|-Xaa, Lys-|-Xaa,Pancreatic elastase(胰弹性蛋白酶) E.C.3.4.21.36Ala-|-Xaa,and also Gly-|-Xaa,Val-|-Xaa, Ser-|-Xaa,Thrombin(凝血酶) E.C.3.4.21.5Arg-|-Gly,Plasmin(胞质素，胞浆素) E.C.3.4.21.7Lys-|-Xaa,> Arg-|-XaaProlyl oligopeptidase,or prolylendopeptidaseE.C.3.4.21.26Pro-|-Xaa,>> Ala-|-XaaPlasma kallikrein(血浆激肽释放酶) E.C.3.4.21.34Arg-|-Xaa, Lys-|-Xaa,includingArg-|-Ser, Lys-|-Arg,Leukocyte elastase(白细胞弹性蛋白酶),or neutrophil elastase(中性白细胞弹性蛋白酶),or lysosomalelastase(溶酶体弹性蛋白酶)E.C.3.4.21.37Val-|-Xaa, Ala-|-Xaa,Cysteine proteases E.C.3.4.22.Cathepsin B(组织蛋白酶) E.C.3.4.22.1Arg-Arg-|-Xaa, and also Leu-|-Xaa,Ala-|-Xaa, Phe-|-Xaa, Trp-|-Xaa,Clostripain(梭菌蛋白酶),or endoproteinase Arg-C E.C.3.4.22.8Arg-|-Xaa including Arg-|-Pro,but notLys-|-XaaCalpain(钙激活中性蛋白酶)-1,or μ-calpain E.C.3.4.22.52Met-|-Xaa, Tyr-|-Xaa andArg-|-Xaa(with Leu or Val as the P2residue)Aspartic acid proteases E.C.3.4.23.Pepsin(胃朊酶，胃蛋白酶) E.C.3.4.23.1Preferentially Phe-|-Xaa, Tyr-|-Xaa,and also Leu-|-Xaa,andTrp-|-Xaa,,ideally with Xaa=Phe,Trp,or TyrCathepsin(组织蛋白酶)D E.C.3.4.23.5Preferentially Phe-|-Xaa, Tyr-|-Xaa,and also Leu-|-Xaa, ideally with Xaa≠ Ala or ValMetalloproteases E.C.3.4.24.Neprilysin(脑啡肽酶),or enkephalinase(脑啡肽酶),or neutral endopeptidase E.C.3.4.24.11Xaa-|-Tyr, Xaa-|-Phe, Xaa-|-Trp, andXaa-|-Leu,Thimet oligopeptidase(甲拌磷寡肽酶),or endo-oligopeptidase A,or endopeptidase(肽链内切酶)24.15,or pz-peptidease(肠促胰酶素)E.C.3.4.24.15Xaa-|-Arg, Xaa-|-Ser, Xaa-|-Ile,Xaa-|-Ala, Xaa-|-Gly,Aminopeptidases E.C.3.4.11.N-termLeucyl-aminopeptidase E.C.3.4.11.1Preferentially Leu-|-Xaa,but notArg-|-Xaa,and Lys-|-Xaa,Aminopeptidase M or N,or alanyl- aminopeptidase,or membrane alanine aminopeptidase E.C.3.4.11.2Preferentially Ala-|-Xaa,andTyr-|-Xaa,if Yaa-Pro-|-Xaa in termwith Yaa = Ala,Val,Leu,Ile,Phe,Tyr orTrp,then the dipeptide Yaa-Pro couldbe releasedAminopeptidase B E.C.3.4.11.6Arg-|-Xaa, Lys-|-Xaa, Aminopeptidase A,orangiotensinase,orglutamyl-aminopeptidaseE.C.3.4.11.7Glu-|-Xaa>> Asp-|-Xaa,Dipeptidyl-peptidases andtripeptidyl-peptidasesE.C.3.4.14.N-term(di-and tripeptides)Dipeptidyl-peptidase I,or cathepsin(组织蛋白酶) C or J E.C.3.4.14.1Xaa-Yaa-|-Zaa,if Xaa ≠ Arg or Lys,orYaa ≠ Pro,or Zaa ≠ ProDipeptidyl-peptidase IV E.C.3.4.14.5Preferentially Xaa-Pro-|-Zaa,(but alsoXaa-Ala-|-Yaa) with Ya a ≠ Pro or Hyp Prolyl tripeptyl-peptidase E.C.3.4.14.12Xaa-Yaa-Pro-|-Zaa,if Zaa ≠ Pro Peptidyl-Dipeptidases E.C.3.4.15.C-termPeptidyl-depeptidase A, or angiotensin-converting enzyme E.C.3.4.15.1Xaa-|-Yaa-Zaa,if Yaa ≠ Pro or Zaa ≠Asp or GluMetallo-carboxypeptidases E.C.3.4.17.C-termCarboxypeptidase A E.C.3.4.17.1Xaa-|-Yaa if Yaa ≠ Asp,Glu,Arg,Lysor ProCarboxypeptidase B,or E.C.3.4.17.2Xaa-|-Arg and Xaa-|-LysprotaminaseCarboxypeptidase N,orLysine(arginine),Carboxypeptidase(羧基肽酶),orkininase I(激肽酶)E.C.3.4.17.3Xaa-|-Lys>> Xaa-|-Arg Carboxypeptidase U or R E.C.3.4.17.20Xaa-|-Arg and Xaa-|-LysGlutamate Carboxypeptidase II,or folate hydrolase E.C.3.4.17.21Xaa-|-Glu,preferentially with Xaa=Asp or Glu。

蛋白酶酶切位点

蛋白酶酶切位点木瓜蛋白酶巯基蛋白酶具有广泛特异性TPCK,TLCK,抑蛋白酶醛肽α-巨球蛋白,烷化剂胃蛋白酶酸蛋白酶广泛特异性胃蛋白酶抑制素胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶在K或R之后TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽抑肽酶,α巨球蛋白名称三字符号单字符号Ala AArg RAsp DCys CGln QGlu/Gln EHis HIle IGly GAsn NLeu LLys KMet MPhe FPro PSer SThr TTrp WTyr YVal V胰蛋白酶arg、lys，得到以arg、lys为C末端残基的肽段。

胰凝乳蛋白酶phe、trp、tyr 等疏水aa。

胃蛋白酶phe、trp、tyr等疏水aa。

木瓜蛋白酶arg、lys。

葡萄球菌蛋白酶，磷酸缓冲液ph7.8时断裂glu、asp。

碳酸氢铵缓冲液ph7.8或醋酸铵缓冲液ph4.0时断裂glu。

梭菌蛋白酶arg，用于不溶性蛋白的长时间裂解。

CNBr断裂Met。

羟胺断裂asn—gly间的肽键。

二硫键可以用巯基化合物还原法或者过甲酸氧化法断裂.。

木瓜蛋白酶是番木瓜（Carieapapaya）中含有的一种低特异性蛋白水解酶，广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内，其中在未成熟的乳汁中含量最丰富。

木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸，属于巯基蛋白酶，它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特点，因此在食品、医药、饲料、日化、皮革及纺织等行业得到广泛应用。

木瓜蛋白酶是一种蛋白水解酶，分子量为23406，由一种单肽链组成，含有212个氨基酸残基。

至少有三个氨基酸残基存在于酶的活性中心部位，他们分别是Cys25、His159和Asp158，另外六个半胱氨酸残基形成了三对二硫键,且都不在活性部位。

纯木瓜蛋白酶制品可含有：（1）木瓜蛋白酶，分子量21000，约占可溶性蛋白质的10%；（2）木瓜凝乳蛋白酶，分子量26000，约占可溶性蛋白质的45%；（3）溶菌酶，分子量25000，约占可溶性蛋白质的20%；及纤维素酶等不同的酶。

蛋白酶-酶切位点

or angiotensinase, or glutamyl-aminopeptidase Dipeptidyl-peptidases and tripeptidyl-peptidases Dipeptidyl-peptidase I, or cathepsin C or J
Dipeptidyl-peptidase IV
Cathepsin B
Clostripain, or endoproteinase Arg-C Calpain-1,
酶名称
中文
E.C.号
酶切位点
丝氨酸蛋白酶
胰凝乳蛋白酶，糜蛋白酶
胰朊酶，胰蛋白酶胰弹性蛋白酶凝血酶胞质素，胞浆素
E.C.3.4.21
E.C.3.4.21.1
E.C.3.4.21.4 E.C.3.4.21.36 E.C.3.4.21.5 E.C.3.4.21.7
基氨肽酶
二肽基肽酶和三肽基肽酶组织蛋白酶
E.C.3.4.14 E.C.3.4.14.1
二肽基肽酶 IV
C.3.4.14.5
脯氨酰三肽-肽酶
E.C.3.4.14.12
肽基-二肽酶
E.C.3.4.15
肽基-二肽酶 A，血管紧张素转化 E.C.3.4.15.1
酶
金属羧肽酶
E.C.3.4.17
羧肽酶 A
羧肽酶 N，羧基肽酶，激肽酶 I E.C.3.4.17.3 Xaa-|-Lys >>Xaa-|-Arg
羧肽酶 U 或 R 谷氨酸羧肽酶，叶酸水解酶
E.C.3.4.17.20 E.C.3.4.17.21
Xaa-|-Arg and Xaa-|-Lys Xaa-|-Glu, preferentially with Xaa=Asp or Glu

蛋白酶酶切位点

蛋白酶酶切位点木瓜蛋白酶巯基蛋白酶具有广泛特异性TPCK,TLCK,抑蛋白酶醛肽α-巨球蛋白,烷化剂胃蛋白酶酸蛋白酶广泛特异性胃蛋白酶抑制素胰蛋白酶丝氨酸蛋白酶在K或R之后TLCK,PMSF,抑蛋白酶醛肽抑肽酶,α巨球蛋白名称三字符号单字符号Ala AArg RAsp DCys CGln QGlu/Gln EHis HIle IGly GAsn NLeu LLys KMet MPhe FPro PSer SThr TTrp WTyr YVal V胰蛋白酶arg、lys，得到以arg、lys为C末端残基的肽段。

胰凝乳蛋白酶phe、trp、tyr 等疏水aa。

胃蛋白酶phe、trp、tyr等疏水aa。

木瓜蛋白酶arg、lys。

葡萄球菌蛋白酶，磷酸缓冲液ph7.8时断裂glu、asp。

碳酸氢铵缓冲液ph7.8或醋酸铵缓冲液ph4.0时断裂glu。

梭菌蛋白酶arg，用于不溶性蛋白的长时间裂解。

CNBr断裂Met。

羟胺断裂asn—gly间的肽键。

二硫键可以用巯基化合物还原法或者过甲酸氧化法断裂.。

木瓜蛋白酶是番木瓜（Carieapapaya）中含有的一种低特异性蛋白水解酶，广泛地存在于番木瓜的根、茎、叶和果实内，其中在未成熟的乳汁中含量最丰富。

木瓜蛋白酶的活性中心含半胱氨酸，属于巯基蛋白酶，它具有酶活高、热稳定性好、天然卫生安全等特点，因此在食品、医药、饲料、日化、皮革及纺织等行业得到广泛应用。

木瓜蛋白酶是一种蛋白水解酶，分子量为23406，由一种单肽链组成，含有212个氨基酸残基。

至少有三个氨基酸残基存在于酶的活性中心部位，他们分别是Cys25、His159和Asp158，另外六个半胱氨酸残基形成了三对二硫键,且都不在活性部位。

纯木瓜蛋白酶制品可含有：（1）木瓜蛋白酶，分子量21000，约占可溶性蛋白质的10%；（2）木瓜凝乳蛋白酶，分子量26000，约占可溶性蛋白质的45%；（3）溶菌酶，分子量25000，约占可溶性蛋白质的20%；及纤维素酶等不同的酶。

常用蛋白酶切割位点

Ni-NTon Leu- Glu-Val- Leu-Phe- Gl n▼ Gl y-Pro
L-E-V- L- F-Q▼ G- P
Am ersham -Bios ciences
GSTrap for GST fusion enzyme
TAGZyme His-tag removal by Exoproteolytic Digestion
Factor Xa Ile- Glu /Asp- Gl y-Arg▼
I-E/D- G-R▼
Am ersham -Bios ciences , New England Biolabs, Roche
Benzam idine-Agaros e
Enterokinase Asp-Asp- Asp- Asp-L ys▼
常用融合蛋白切割位点
PROT EAS E
COMP ANY
Protease Capture
Thrombin Leu-Val-Pro-Arg▼ Gly-Ser
L-V-P-R▼ G-S
Amersham-Biosciences, Novagen, SIGMA, Roche
Benzam idine-Agaros e
Ni-NTA (6His recomb. enzyme)
Kex-2 -Arg-X-Lys/ Arg- Arg▼
羧肽酶
Ni-NTA (6His recomb. enzyme)
Invitrogen – Life Technologies,
KEX2 对 arg 的专一性高，要求最重要。 Arg 前为 lys 效率最高，不切-Arg-lys，
Qiagen
Ni-NTA (6His recomb. enzyme)
Intein Site dithiothreitol cleavage