微生物遗传学复习总结
微生物遗传育种知识点汇总
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复制:通过复制,遗传信息能够在细胞带间传递,同时是转录翻译的前奏。
转录:在一个DNA模板上合成一个与之互补的RNA链,mRNA,A,tRNA。
翻译:是蛋白质生物合成过程中的第一步。翻译是根据中心法则,将成熟的mRNA解码,并生成对应的特定氨基酸序列的过程。
3.1DNA复制
3、遗传与变异是生物界的共同特征,它们之间是辩证统一的。
2.1经典遗传学简述
一、分离定律
1、概念:(1)基因型:生物体全部遗传因子的总称。(2)表型:生物体表现出来的性状的总和。(3)杂交、亲本(P)、子一代(F1)、子二代(F2)、相对性状、显性、隐性。
2、Mendel:单因子杂交实验。
3、分离定律内容:控制一对相对性状的等位基因在形成配子时彼此分离,每个配子只能获得一个等位基因。
1、DNA的半保留复制模型;2、DNA的二向复制模型(θ模型);3、DNA的滚环复制模型。
3.2转录
1、转录的起始:(1)全酶与模板的DNA接触,生成非专一的,不稳定的复合物在模板上移动;(2)起始识别:全酶与-35序列结合,产生封闭的酶-启动子二元复合物;(3)全酶紧密地结合在-10序列处,模板DNA局部变性,形成开放的启动子二元复合体;(4)酶移动到I,第一个rNTP转录开始,σ因子释放,形成酶-启动子-rNTP三元复合体。
四、基因
1、孟德尔“遗传因子”——生物性状遗传的符号。
2、基因——位于染色体上的遗传功能单位。
(1)等位基因:一对同源染色体同一基因座上的一对基因。等位基因之间存在相互作用——显隐性关系。一个二倍体细胞中等位基因的关系:(1)完全显性:一个等位基因的功能已足够使某个性状表现。(2)不完全显性:当性状的表现对等位基因的功能有数量上的要求。(3)共显性:杂合子同时表现出双亲的特性。
天津科技大学 复习总结 微生物遗传学
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微生物遗传学复习资料一
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基因突变具有可逆性。 。 5、稀有性:自发突变频率很低:10-9-10-5 之间。 四、突变率的计算方法 突变率的计算方法 突变率: 也是突变在每一个细胞生存的单位生 突变率 每一个细胞在每一个世代中发生突变的机率, 物学时间由发生的概率。 突变频度: 没有涉及世代这一生物学时 突变频度 表示一定数目的野生型细胞中出现的突变型的数目, 间单位。
15 真核微生物:双链 DNA,主要存在于细胞核内的染色质中。主要有真菌如酵母菌 藻类 如绿藻 原生动物等。 16 真核生物的染色体是一条由线状 DNA 双链和 5 种蛋白质组成的直径为 10nm 的串珠状丝。 第二章 一 基因命名规则 ①每个基因座位用斜体或带下横线小写的三个英文字母表示(取自该基因特性的英文 单词前三个字母) ②产生同一表型的不同基因,在三个字母后用不同大写英文字母表示。 ③同一基因的不同突变位点,基因符号后加阿拉伯数字: ④染色体缺失时用Δ表示,如Δ(Lac、Pro),Lac:乳糖发解基因 ⑤表示质粒的符号应避免与染色体基因符号相同。 二 基因突变的类型 以突变发生的方式分: 自发突变 基因突变 诱发突变 以突变引起的表型变化分: 形态突变 生理生化突变 抗生突变 致病性变突 以引起突变的遗传物质变化分: 碱基置换 移码突变 以突变对遗传密码的影响分: 同义突变 错义突变 无义突变 三 基因突变的规律 1.随机性 基因突变的发生从时间、个体、位点和所产生的表型变化等方面都带有明显的随机性。 突变的发生(如抗药性)与微生物所接触的环境条件(药物存在如否)无关。 2.独立性 基因突变独立发生的,某一个基因的突变与另一基因的突变是在不相关的独立事体。 3.稳定性 基因突变是遗传物质发生改变,突型型基因具有相对稳定的结构,是可以遗传的。 4.可逆性
绪论和一章 1 分离法则 分离法则:一对基因在形成配子时完全按照原样分离到不同的配子中去,相互不发生影 响。 2 自由组合定律 自由组合定律:在配子形成时各对等位基因彼此分离后,独立自由地组合到配子中。 3 微生物作为遗传学研究材料的特点 微生物作为遗传学研究材料的特点: 单细胞或多细胞不分化的低等生物,病毒无细胞结构,适宜于作为遗传研究材料; ① 原核微生物一般为单倍体,许多真核微生物的营养体也是单倍体,不存在显性与隐 形基因问题; ② 绝大多数微生物均能在人工培养基上生长繁殖; ③ 代谢作用强,在培养基上积累大量代谢产物有利于基因表达的研究; ④ 生长繁殖迅速,有利于缩短研究周期。 4 作为遗传材料的优越性 作为遗传材料的优越性: ① 易于筛选到营养缺陷型。在基本和加富培养基上进行影印培养; ② 便于作为基因突变的研究材料; ③ 便于作为基因重组的研究材料,利用营养缺陷或抗药性标记; ④ 便于用作研究基因结构、功能和调控机制的研究材料; ⑤ 揭示一切生物基因的遗传规律; ⑥ 以微生物为载体,进行遗传工程研究。 5、经典遗传学的建立和发展 、 (奥)孟德尔(mendel,1822-1884) :经典遗传学之父,以豌豆为杂交材料于 1865 年发表 《植物杂交的试验》一文。首次提出植物的遗传性状是由遗传因子决定的假说,即孟德尔定 律(遗传因子的分离定律和自由组合定律) 。 约翰逊(Johnson,丹麦) :提议用基因(gene)一词来表示孟德尔的遗传因子。 摩尔根(Morgan,1866-1954,美) :以果蝇为材料,发现果蝇的基因分离存在连锁现象,提 出了遗传的染色体学说,认为染色体是遗传的物质基础,基因在染色体上呈线性排列。麦克 林托克(McClintock) :1931 年首次在光镜下观察玉米基因重组时染色体内部或之间发生断 裂和重组过程,还发现跳动基因(插入因子)存在。 华生(Watson)和克里克(Crick) :1953 年提出了 DNA 分子结构的双螺旋模型。 格里菲思(Griffith,1928,英) :首次发现肺炎双球菌的转化(transformation)现象。 比德尔(Beadle)和塔特姆(Tatum) :1941 年以粗糙脉饱菌(Neurospara crassa)为材料, 用 X 射线诱变筛选获得营养缺陷型(auxotroph)突变株,均不能在基本培养基上生长,提 出一个基因一种酶的假说。 卢里亚(Luria)和德尔布鲁克(Delbruck) :1943 年进行了著名的波动分析试验(fluctuation analysis) 证明细菌对噬菌体产生的抗性突变是自发产生的, , 与他们是否同噬菌体接触无关。 其结果随后又被纽可布(Newcombe,1949)用涂布试验(respreading exeperiment)和莱德 伯格(Lederberg,1952)用影印培养法(replica-plated incubation)进一步验证:细菌的基 因突变发生在它们与噬菌体或药物接触之前, 后者仅作为一种筛选手段, 将自发产生的抗性 突变从大量的突变中筛选出来。 莱德伯格(1946)和戴维斯(Davis) :揭示了与转化作用不同的细菌基因重组方式二 与转化作用不同的细菌基因重组方式二——接 与转化作用不同的细菌基因重组方式二 接 合作用(conjugation) 。 合作用 以 E.coli K12 两种营养缺陷型混合培养获得基本培养基上生长的野生型 (wild type)菌株。 莱德伯格和津德(Zinder) :1951 年发现细菌重组方式三 细菌重组方式三——转导作用 转导作用(transduction) 。 细菌重组方式三 转导作用 鼠伤寒沙门氏菌营养缺陷型 LT2 和 LT22A 分别培养在微孔过滤板隔开的U 型管两端, 数小
微生物的遗传与变异知识点整理
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第八章 微生物遗传第一节 遗传的物质基础 1三个经典的实验1928年 Griffith 转化实验(动物实验)实验说明:加热杀死的SIII 型细菌细胞内可能存在一种转化物质,它能通过某种方式进入RII 型细胞并使RII 型细胞获得稳定的遗传性状,转变为SIII 型细胞。
1944年O.T.Avery 、C.M.MacLeod 和M 。
McCarty 从热死S 型S. pneumoniae 中提纯了可能作为转化因子的各种成分,并在离体条件下进行了转化试验: 1952 噬菌体感染实验第二节 微生物的基因组结构基因:指DNA 链上编码多肽、tRNA 和rRNA 的特定核苷酸序列。
基因组(genome ):一个物种的单倍体的所有染色体及其所包含的遗传信息的总称 原核生物(如细菌)——多数为单倍体; 真核微生物——通常为双倍体;(例如啤酒酵母有16条染色体,可以单倍体生活,也可以双倍体生活)第三节 质粒和转座因子 质粒:独立于染色体外能自主复制的细胞质遗传因子,通常有三种构型:CCC 型、开环型(OC )、线型(L )F 质粒:与有性接合有关 R 质粒:与抗药性有关 Col 质粒:编码免疫蛋白毒性质粒:苏云金芽孢杆菌内毒素质粒 代谢质粒:降解复杂有机化合物 隐秘质粒:酵母的2μm 质粒转座因子:细胞中能改变自身位置的一段DNA 序列 插入序列(Insertion Sequence, IS )转座子(Transposon, Tn )Mu 噬菌体质粒 的 主 要 类 型转座引起的遗传效应插入突变产生染色体畸变基因的移动和重排第四节基因突变和修复4.1突变类型同义突变错义突变无义突变移码突变营养缺陷型抗性突变型条件致死突变型形态突变型抗原突变型产量突变型4.2自发突变——分子基础:碱基的互变异构---转换和颠换4.3诱发突变碱基结构类似物胸腺嘧啶类似物-----5-溴尿嘧啶腺嘌呤类似物--------2-氨基嘌呤插入染料溴化乙锭、吖啶橙诱变剂亚硝酸、羟胺类化合物、烷化剂辐射和热紫外线-----嘧啶二聚体生物诱变因子:转座因子4.4 诱变剂与致癌物质——Ames实验4.5 DNA损伤的修复光复活作用:光复合酶直接修复切除修复重组修复SOS修复第五节细菌的基因转移和重组转化(transformation)结合(conjugation,mating)转导(transduction)5.1 转化定义:受体细胞直接吸收了来自供体细胞的DNA片断,并把它整合到自己的基因组中,细胞部分遗传性状发生变化的现象叫转化。
第八章 微生物遗传学笔记
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杂交育种的优点:①由于杂交育种选用了已知性状的供体菌和受体菌作为亲本,故在方向性和自觉性方面,均比诱变育种前进了一大步。②利用杂交育种可以消除某一菌株在经过长期诱变处理后所出现的产量上升缓慢的现象
杂交育种的缺点:杂交育种的方法较复杂,目前还没有得到普遍的推广和使用,尤其在原核生物的领域中,应用转化、转导或接合等重组技术来培育可应用于生产实践上的高产菌株的例子还不多见。
2.转导:通过完全缺陷或部分缺陷噬菌体的媒介,把供体细胞的DNA小片段携带到受体细胞中,通过交换与整合,使后者获得前者部分遗传形状的现象。获得新遗传形状的受体细胞称为转导子(transductant)
3.接合(conjugation):供体菌通过性菌毛传递不同长度的单链DNA给受体菌,在后者细胞中发生交换、整合,从而使后者获得供体菌的遗传性状的现象。获得新性状的受体细胞称为接合子。
移码突变(frame-shift mutation)指诱变剂使DNA分子中的一个或少数几个核苷酸的增添(插入)或缺失,从而使该部位后面的全部遗传密码发生转录和转译错误的一类突变。
染色体畸变(chromosomal aberration)某些理化因子,如X射线等的辐射及烷化剂、亚硝酸等,除了能引起点突变外,还会引起DNA的大损伤——染色体畸变,包括以下两个方面:染色体结构上的缺失、重复、易位和倒位染色体数目的变化。
6.降解性(代谢)质粒
如假单胞菌属中发现。它们的降解性质粒可为一系列能降解复杂物质的酶编码,从而能利用一般细菌所难以分解的物质做碳源。这些质粒以其所分解的底物命名。
7.隐秘质粒:不显示任何表型效应,只能通过物理的方法检测的质粒。如酵母菌的2um质粒。
二.转座因子
插入(IS)序列、转座子(Tn)、特殊病毒(Mu噬菌体)
微生物遗传知识点总结
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微生物遗传知识点总结一、微生物的遗传物质1.DNA:微生物的遗传物质主要是DNA(脱氧核糖核酸),DNA是微生物的基因组主要组成部分,承载了微生物的遗传信息。
2.RNA:微生物的遗传物质中还包括RNA(核糖核酸),RNA在微生物的蛋白质合成中起到重要的作用,有mRNA、tRNA和rRNA等不同类型。
3.质粒:微生物的遗传物质中还存在质粒,质粒是细胞外遗传物质,可以自主复制和传递,在微生物的分子遗传研究中具有重要的意义。
二、微生物的遗传变异1.突变:突变是指微生物遗传物质的突发性变异,包括点突变、插入突变和缺失突变等,突变会导致微生物表型的变化,包括对抗药物的耐药性等特征。
2.重组:重组是指微生物遗传物质的重组和重排,包括同一基因组内的DNA重组和来自不同基因组的DNA重组,重组可以导致各种遗传特征的变异和产生新的遗传组合。
3.外源基因的导入:微生物可以通过外源基因的导入来获得新的遗传特征,包括外源DNA的转化、噬菌体的侵染和质粒的转移等方式。
三、微生物的遗传传递1.垂直传递:垂直传递是指微生物遗传物质从父代到子代的传递,包括细菌的有丝分裂、芽生、孢子形成和病毒的感染传递等方式。
2.水平传递:水平传递是指微生物遗传物质在同一代的微生物个体之间的传递,包括细菌的共享基因池、DNA转化和连接转移等方式,可以导致微生物之间的基因交换和遗传多样性的增加。
四、微生物遗传的调控机制1.DNA修饰:微生物可以通过DNA修饰来调控基因的表达,包括DNA 甲基化和DNA腺苷酸修饰等方式,这些修饰可以影响基因的转录和翻译过程。
2.转录调控:微生物可以通过转录因子的结合和解离来调控基因的转录水平,包括正调控和负调控,这些调控作用可以响应内外环境的变化。
3.蛋白质修饰:微生物可以通过蛋白质的修饰来调控蛋白质的活性和稳定性,包括翻译后修饰和酶的磷酸化、乙酰化和甲基化等方式。
4. RNA干涉:微生物可以通过RNA干涉机制来调控基因表达,包括小分子RNA的介导和crispr-cas系统等方式,这些机制可以抑制或靶向性地破坏特定基因的表达。
微生物遗传知识点总结
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微生物遗传知识点总结1. 细菌的遗传物质:细菌遗传物质主要为环状核糖体RNA(plasmid)和线状核糖体RNA(chromosome)。
环状核糖体RNA一般用来携带特定功能的基因,如抗药性基因等;线状核糖体RNA则包含了细菌的基本遗传信息。
2. 真菌的遗传物质:真菌的遗传物质为线状核糖体RNA (chromosome),真菌基因组(基因组大小较大)一般包含了细菌的基本遗传信息以及其他功能基因。
3.病毒的遗传物质:病毒遗传物质主要为DNA或RNA,可以是双链的或单链的。
病毒利用寄主细胞的复制机制进行自身的遗传,感染细胞后,病毒的基因会整合到宿主细胞的染色体上,成为细菌的一部分。
4.遗传修饰:微生物中常见的遗传修饰方式有化学修饰、DNA甲基化和结构修饰等。
这些修饰可以影响基因表达、DNA复制和修复等过程,从而影响微生物的遗传特征。
5.细菌的水平基因转移:细菌拥有多种水平基因转移机制,包括转染、共转移、转座子、转化等方式。
这些机制使得细菌能够快速适应环境变化,并具有快速产生新基因型的能力。
6.真菌的有性和无性生殖:真菌包括有性生殖和无性生殖两种方式。
有性生殖通过两个不同的配子的结合产生新的基因组,有助于增加基因的多样性;无性生殖则通过单个微生物细胞的分裂繁殖来维持和传递遗传信息。
7.病毒的突变:病毒突变是其遗传变异的主要方式。
突变可以是点突变(单个碱基的改变)、缺失突变(基因缺失)、插入突变(外源DNA插入)等方式,导致病毒的基因组结构和功能的改变。
8.抗药性的遗传机制:抗药性是微生物遗传的重要研究方向之一、细菌的抗药性主要通过基因的垂直传递和水平传递两种方式进行。
基因的垂直传递是指抗药性基因在细菌的染色体上遗传给后代细菌;水平传递则是指通过细菌间共享质粒等遗传物质,传递抗药性基因。
9.基因工程和生物技术:微生物遗传的研究对于基因工程和生物技术具有重要意义。
通过对微生物遗传物质进行改造和调控,可以实现基因的克隆、表达、突变和组合等操作,从而用于生物医学、农业、食品工业和环境保护等方面的应用。
微生物遗传育种期末复习总结
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微生物遗传育种期末复习总结2011-1-2绪论1、了解微生物遗传学的发展过程:2、20世纪40年代以前和20世纪40年代以后的主要科学发现第一章微生物遗传的物质基础1、大肠杆菌φ×174噬菌体2、大肠杆菌染色体DNA和质粒DNA3、真核微生物的遗传物质----染色质和核小体结构第二章基因突变1、了解基因命名规则2、突变率计算方法:固体(固体)培养基中培养突变率计算方法3、碱基类似物引起的诱变:以5-BU 2-AP和为例说明碱基替代过程。
说明图2.16的含义。
4、了解亚硝基胍(NTG)的作用,和图2.16的含义第二章基因突变5、DNA经过辐射处理通常的变化、电离辐射(直接作用和间接作用)和非电离辐射。
6、嵌合剂引起移码突变7、DNA损伤、修复:了解光修复、切除修复、重组修复、SOS系统基本含义。
8、营养缺陷型诱变筛选步骤及方法1)营养缺陷型浓缩:抗生素法、菌丝过滤法、差别杀菌2)营养缺陷型检出:逐个检出法、影印平板培养法、夹层培养法3)营养缺陷型鉴定:生长谱法9、诱变选育:诱变处理需要注意的环节,高产菌株筛选方法第三章孟德尔式遗传1 产生有性孢子的微生物遗传分析1)按顺序排列四分体的遗传分析①判断第一次分裂分离和第二次分裂分离②计算着丝粒距离③计算重组频率④四分体来源与染色体交换2)非按顺序排列四分体的遗传分析2 大肠杆菌的遗传学分析细菌接合过程的分析: F 因子与接合作用、细菌接合的三种方式、中断杂交试验及基因定位3 真菌的准性生殖1)什么是准性生殖的基本过程2)异核体的形成和图3.21的含义3)二倍体的获得方法4)体细胞重组体和非整倍体的检出方法5)体细胞重组体的来源6)有丝分裂定位:表3.11的含义4链霉菌遗传分析方法:图3.28的含义5 转化1)图3.29的含义2)感受态图3.31的含义3)转化因子的吸收和整合的基本过程4)共转化及图3.32的含义,表3.15的含义6转导1)图3.34和、图3.35、图3.37的含义、表3.19的含义2)局限性转导、稳定转导、不稳定转导、高频转导3)普遍性转导、完全转导、流产转导4)利用共转导进行基因定位7重组机制1)断裂重接模型和复制选择模型2)用部分杂合双链说明基因转变机制(图3.49的含义、表3.21的含义)3)Holliday模型含义4)重组的类型第四章非孟德尔式遗传一质粒1 质粒的命名原则2质粒的类型3质粒的大小和数量:图4.19的含义4不亲和群:图4.18的含义、质粒的相容和不相容性5质粒的复制:1)质粒的复制受到双重控制的证明2)一个能复制的和一个不能复制的复制子相结合后,复制由前者所控制3)两个都能进行复制的复制子结合后,复制的控制,表4.9和表4.10的含义6 质粒的转移:自主转移和诱动转移(F质粒诱动CoLE1质粒转移模型图)二、转座因子1转座因子种类:图4.22的含义2转座机制互补测验:图4.24的含义、图4.25的含义3 Tn3转座模型:图4.26的含义,图11-29转座作用的一种模型三、真核微生物的核外遗传物质1细胞质遗传,以粗糙脉孢菌生长缓慢的突变型为例说明母体遗传现象2酵母菌小菌落突变种类和原因第五章结构基因一、一个基因一种酶假说1、几个非等位基因突变产生同一营养缺陷型的现象如何解释?1)遗传代谢性障碍:以氨基酸D的缺陷型为例说明2)互养:图5.2 的含义2、一个基因一种酶假说的初步验证交叉反应物质:证明失活酶存在的实验过程、图5.3 的含义二、顺反子和互补群1 互补测验1)异核体形成测验2)顺反位置效应测验(重组实验、互补实验)2、互补测验系统:1 )杂基因子测验:2)流产转导测验3)F因子转导测验。
《微生物学》主要知识点-08第八章微生物的遗传
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第八章微生物的遗传概述:遗传(heredity or inheritanc® 和变异(variation)是生物体的最本质的属性之一。
遗传即生物的亲代将一整套遗传因子传递给子代的行为或功能。
变异指生物体在某种外因或内因的作用下所引起的遗传物质结构或数量的改变。
基因型(ge no type某一生物个体所含有的全部基因的总和。
表型(phe no type)某一生物所具有的一切外表特征及内在特性的总和。
饰变( modification)不涉及遗传物质结构改变而发生在转录、翻译水平上的表型变化。
8.1遗传变异的物质基础8.1.1三个经典实验1. 经典转化实验:1928年F.Griffith以Streptococcus pneumoniae为研究对象进行转化(transformation)实验。
1944年O.T.Avery等人进一步研究得出DNA是遗传因子。
S strun A2. 噬菌体感染实验:1952年Alfred D.Hershey和Martha Chase用32P标记病毒的DNA,用35S标记病毒的蛋白质外壳,证实了T2噬菌体的DNA是遗传物质。
3.植物病毒的重建实1956年H.Fraenkel-Conrat用含RNA的烟草花叶病毒(tobacco mosaic virus,TMV)与TMV 近源的霍氏车前花叶病毒(Holmes ribgrass mosaic virus,HRV)所进行的拆分与重建实验证明,RNA也是遗传的物质基础。
8.2微生物的基因组结构:基因组(genome是指存在于细胞或病毒中的所有基因。
细菌在一般情况下是一套基因,即单倍体(haploid);真核微生物通常是有两套基因又称二倍体(diploid )。
基因组通常是指全部一套基因。
由于现在发现许多非编码序列具有重要的功能,因此目前基因组的含义实际上是指细胞中基因以及非基因的DNA序列的总称,包括编码蛋白质的结构基因、调控序列以及目前功能还尚不清楚的DNA序列。
微生物学重点总结(3篇)
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微生物学重点总结微生物学第一章绪论1、微生物学。
一般定义为研究肉眼难以看见的称之为微生物的生命活动的科学。
2、微生物的发现。
第一个看见并描述微生物的人是荷兰商人安东列文虎克。
3、微生物学发展的奠基者及其贡献法国的巴斯德。
1>彻底否定了“自生说”;2>免疫学—预防接种;3>证实发酵是由微生物引起;4>创立巴斯德消毒法。
德国的科赫。
1>证实了____病菌是____病的病原菌;2>发现肺炎结核病的病原菌;3>提出证明某种微生物是否为某种疾病病原体的基本原则—科赫原则。
4、微生物的特点:个体小、结构简、胃口大、食谱广、繁殖快、易培养、数量大、分布广、种类多、变异易、抗性强。
第二章微生物的纯培养和显微技术1、无菌技术。
在分离、转接、及培养纯培养物时防止被其他微生物污染,其自身也不污染操作环境的技术。
2、菌落。
分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部生长、繁殖到一定程度形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体。
3、选择培养。
选择平板培养、富集培养。
4、古生菌。
是一个在进化途径上很早就与真细胞和真核生物相互独立的生物类群。
主要包括一些独特的生态类型的原核生物。
5、真菌。
霉菌(菌体由分枝或不分枝的菌丝构成)、酵母菌(一群单细胞真核微生物)。
6、用固体培养基获得微生物纯培养方法:1>涂布平板法:(菌落通常只在平板表面生长)将一定量的某一稀释度的样品悬液滴加在已倒好的平板表面,再用无菌涂布棒涂布均匀,经培养后挑取单个菌落。
特点:使用较多的常规方法,但有时涂布不均匀。
2>稀释倒平板法:(细菌菌落出现在平板表面及内部)取一定稀释度的样品与熔化的琼脂培养基混合,摇匀后倒入无菌培养皿中保温培养。
缺点:操作较麻烦,对好氧菌、热敏感菌效果不好。
3>平板划线法4>稀释摇管法第三章微生物细胞的结构和功能1、原核生物与真核生物的异同点:原核微生物真核微生物细胞壁除少数外都有肽聚糖无肽聚糖细胞膜一般无固醇常有固醇内膜简单,有间体复杂,有内质网等细胞器只有核糖体有很多种核糖体70s(50s+30s)80s(60s+40s)线粒体叶绿体中的70s细胞核拟核,无核膜、无核仁,无成有核膜、核仁,有多条染色体,dna与形染色体,dna不与rna和组rna和组蛋白结合,有有丝分裂蛋白结合,无有丝分裂大小直径通常小于2微米直径在2-100微米之间2、革兰氏阴阳性菌的特点。
【微生物生物学】第8章考点总结微生物遗传基础
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【微⽣物⽣物学】第8章考点总结微⽣物遗传基础第⼋章微⽣物遗传基础第⼀节遗传变异的物质基础遗传型:⼜称基因型,指某⼀⽣物个体所含有的全部遗传因⼦,即:基因的总和。
内在的可能性或潜⼒,是遗传物质上所负载的特定遗传信息。
具有某遗传型的⽣物,只有在适当的环境条件下,通过⾃⾝的代谢和发育,才能产⽣表型。
表型:指某⼀⽣物所具有的⼀切外表特征及内在特性的总和,是遗传型在合适环境下的具体体现。
变异:⽣物体在某种外因或内因作⽤下所引起的遗传物质结构或数量的改变(即:遗传型的改变)。
特点:群体中出现频率极低(10-5~10-10),性状变化的幅度⼤;变化后性状是稳定的、可遗传的。
基因组:存在于细胞内或病毒中的所有基因。
包括编码蛋⽩质的结构基因、调控序列以及⽬前功能尚不清楚的DNA序列。
1、⼤肠杆菌(K12)基因组:遗传信息连续性,DNA⼤部分⽤来编码蛋⽩质、RNA 等特点:功能相关的结构基因组成操纵⼦(元)结构结构基因的单拷贝及rRNA基因的多拷贝;基因组重复序列少⽽短存在基因⽔平转移的证据2、詹⽒甲烷球菌的基因组:第⼀个古菌完成测序;特点:只有40%的基因与其他⼆界⽣物有同源性负责信息传递功能(复制、转录和翻译)的基因类似于真核⽣物;RNA聚合酶的亚基及其序列类似真核⽣物RNA聚合酶II 和III, 不同于细菌;基因的操纵⼦及多顺反⼦结构、调控代谢、细胞分裂、固氮等基因同细菌;基本⽆内含⼦等同细菌3、啤酒酵母的基因组特点:DNA与组蛋⽩构成染⾊质的核⼩体;16条染⾊体, 12.067Mb(6287/5800个基因);有间隔区或内含⼦序列;⾼度重复三、质粒和转座因⼦1. 质粒:独⽴于染⾊体外,能进⾏⾃主复制的细胞质遗传因⼦。
为共价、闭合、环状超螺旋双链DNA分⼦【cccDNA】质粒的三种构型:CCC;OC;L(1). 质粒的类型(按功能划分)(a) 致育因⼦(F 因⼦):*接合质粒,⼀种控制⼤肠杆菌致育性的质粒(1946 ) ;*含有F质粒的菌株代号为F+ ,具有性菌⽑;*经接合作⽤F质粒可转⼊F-细胞使之成为F+细胞。
微生物学主要知识点08微生物的遗传
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微生物学主要知识点08微生物的遗传微生物的遗传是微生物学中的一个重要知识点,包括微生物的基因组结构、遗传物质的复制和转录、重组以及突变等方面。
了解微生物的遗传不仅可以帮助科学家研究微生物的进化和适应能力,还可以应用于微生物的工业生产和疾病防治等领域。
1.微生物的基因组结构:微生物的基因组由DNA组成,DNA通过多个螺旋体嵌入细胞的细胞核或质粒中。
微生物的基因组可以分为染色体和质粒两部分,质粒是一种较小的环状DNA。
染色体和质粒中都含有基因,基因通过编码蛋白质的方式决定了微生物的特征和功能。
2.遗传物质的复制和转录:微生物的DNA通过复制和转录的方式进行遗传物质的复制。
DNA复制是指将一个DNA分子复制成两个完全相同的DNA分子,从一个细胞传递到另一个细胞。
DNA转录是指根据DNA模板合成RNA的过程,RNA复制的结果是生成一个与DNA模板相对应的RNA分子。
这些RNA分子可以进一步转录成蛋白质。
3.重组:微生物的重组是指在微生物遗传物质中发生DNA片段的重新组合。
这种重组可以发生在同一染色体上的两个相同或不同的DNA片段之间,也可以发生在不同染色体或质粒之间。
微生物的重组有助于增加遗传多样性,并提高微生物的适应能力和进化速度。
4.突变:微生物的遗传中还会发生突变现象,突变是指DNA序列的改变。
突变可以是点突变,即DNA中的一个碱基替换为另一个碱基;也可以是插入和缺失,即DNA序列中添加或删除一个或多个碱基。
突变可能对微生物的生长和繁殖产生负面影响,也可能带来新的适应优势。
5.横向基因转移:微生物的遗传中还存在横向基因转移的现象。
横向基因转移是指将一个细胞(供体)中的基因转移到另一个细胞(受体)中,无需通过细胞分裂进行。
横向基因转移可以发生在同一物种的细菌之间,也可以发生在不同物种的细菌之间。
横向基因转移是微生物进化和适应性演化的重要驱动因素之一6.基因调控:微生物的基因表达受到一系列调控机制的控制。
微生物遗传育种知识点汇总
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微生物遗传育种知识点汇总1.微生物基因组学:微生物基因组学是研究微生物基因组结构、功能和表达的学科。
通过对微生物基因组的测序、比较分析和功能注释,可以了解微生物的遗传特性和功能。
2.微生物突变:微生物突变是指微生物在自然环境或实验室中发生的基因突变。
突变可以是基因变异、插入突变、缺失突变等,这些突变可能会导致微生物表型的变化。
3.微生物选择:微生物选择是通过对微生物的生长条件进行调控,选择出具有其中一种特定性状的菌株。
例如,可以通过对耐盐性的选择培养基进行培养,选择出具有耐盐性的微生物菌株。
5.基因工程微生物:基因工程微生物是指经过人工改造的微生物,具有特定基因表达或基因功能改变的能力。
基因工程微生物可用于生产重要医药、酶类、化学品等。
6.自然变异与人工选择:微生物在自然环境中会发生一定程度的自然变异,这些变异可以通过人工选择进行进一步改良。
例如,选择耐药性菌株进行生产抗生素。
7.反向遗传学:反向遗传学是指通过与传统遗传学相反的方式研究生物体的遗传特性。
利用反向遗传学可以探索微生物基因的功能和作用。
9.高通量筛选技术:高通量筛选技术是指通过自动化设备对大量微生物进行快速筛选和分析的技术。
这些技术可以大大提高筛选效率和准确性,用于微生物遗传育种中。
10.代谢工程:代谢工程是指通过改造微生物的代谢路径和基因表达调控来提高目标产物的产量和选择性。
代谢工程可通过基因工程、突变、选择和培养条件优化等手段实现。
11.微生物系统发育学:微生物系统发育学是研究微生物演化和亲缘关系的学科。
通过比较分析微生物基因组,确定其进化关系和分类地位。
以上是微生物遗传育种的一些基本知识点汇总。
微生物遗传育种是一个综合性学科,涉及到多个学科的知识和技术,对于改良微生物品种和开发新的微生物应用具有重要意义。
(完整版)遗传学知识点归纳(整理)3篇
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(完整版)遗传学知识点归纳(整理)(一)基因、DNA和染色体1.基因:指遗传信息在染色体上的基本单位,是控制个体形态、结构、功能以及遗传特征的遗传物质。
2.DNA:脱氧核糖核酸,是一种大分子聚合物,包含四种碱基,分别是腺嘌呤(A)、鸟嘌呤(G)、胸腺嘧啶(T)、胞嘧啶(C),这四种碱基的不同排列组合构成了不同的基因。
3.染色体:指遗传信息在细胞有丝分裂过程中可被观察和测定的可见的结构,是由DNA、蛋白质等构成的细胞核的主要组成部分,人类体细胞中通常有46条染色体(23对),其中一对性染色体决定个体的性别。
4.基因表达:指基因信息从DNA转录成RNA再翻译成蛋白质的过程,是生物体表现出各种形态、性状和生理功能的基础。
5.突变:指基因的突发性的基因变异,可导致个体的遗传特征发生变化,阳性突变可能会导致疾病的发生。
(二)遗传规律1.孟德尔遗传规律:指在同种基因型的个体之间产生的后代,表现出明显的分离和随机性。
2.随机吸配规律:指不论个体(除果蝇外),只要其一对染色体上的基因位点相互独立,其分离组合在后代的频率和概率不受影响而呈随机排列的规律。
3.连锁和基因重组:指一对染色体上的多个基因位点由于位置的接近而具有连锁性,但两个染色体在有丝分裂和减数分裂中的重组作用会破坏连锁基因,从而形成新的联合和分离组合。
4.多因素遗传规律:指人类遗传性状和疾病的发生、发展和表现受多个基因和环境因素相互作用的影响。
5.基因剪接:指在转录过程中RNA前体在剪接过程中剪下不必要的外显子以及与此同时,选择性的保留某些外显子与内含子并将其接合在一起,形成成熟RNA的过程。
(三)遗传学应用1.遗传学诊断:利用遗传学原理对个体遗传信息进行检测和分析,以确定某些遗传性状或疾病的遗传方式和危险程度。
2.基因治疗:指通过利用细胞和基因工程技术,将正常基因导入患者体内来代替缺少或异常的基因,以治疗某些遗传性疾病。
3.基因编辑:指使用CRISPR/Cas9等技术对人类基因进行修饰和编辑,可用于去除病原体基因、纠正遗传缺陷等。
微生物遗传学复习总结汇总教材
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微生物遗传学复习总结基因突变的类型形态突变型;细胞形态改变;菌落形态改变生化突变型:营养缺陷型;抗性突变型(抗药物、抗噬菌体);条件致死突变型(温度敏感突变型)等。
基因突变的特点:随机性(波动实验、涂布实验、影印实验)、独立性(交叉抗性:对两种抗生素同时由敏感变为抗性,如大肠杆菌中抗四环素的突变株往往也抗金霉素。
)、稳定性、可逆性、稀有性(10-9-10-5)、诱变剂可提高突变率。
突变率: 每一个细胞在每一个世代中发生突变的机率,也是突变在每个细胞生存的单位生物学时间内发生的概率。
突变频度: 突变频度常用来表明一定数目的野生型细胞中出现的突变型的数目,因此突变频度没有涉及世代这一生物学时间单位。
化学诱变剂①碱基类似物引起的诱变5-溴尿嘧啶:5-BU分子结构与T非常相似,溴原子取代T第5位的甲基。
诱发突变原理:Br改变分子在酮式和烯醇式之间平衡,使5-BU更易出现烯醇式结构,形成5-BU≡G, 5-BU上溴原子的作用被邻近的基团效应所抵消,使得A=BU 转变为G≡BU的倾向减弱,所以突变中GC→AT多于AT→GC。
②改变DNA结构的诱变剂亚硝酸:氧化脱氨基作用, 把氨基转变为酮基,使C→U 、A →H ,造成U·A 和H·C碱基错配,诱发GC→AT及AT→GC的变化。
羟胺:专一地作用C ,使之转变为能与A配对的形式专一性地引起GC→AT突变。
甲基磺酸乙酯EMS(烷化剂的一种):当其烷基加到G 和T 的与氢键相结合的氧原子后,将会引起G 和T 的错配,引起AT→GC和GC→AT的转换。
EMS 是能使DNA的许多位点发生烷化,强烈的诱变剂。
③DNA移码突变的化合物(丫啶类化合物、溴化乙锭、烷化剂)移码突变:由于DNA分子中一对或少数几对核苷酸的增加或缺失造成的突变。
丫啶类化合物:分子多数是扁平的,能够插入到DNA的碱基对之间,是有效的移码诱变剂。
这类化合物分子结构上的特点为,当与DNA接触时,能够逐渐插入到DNA链的两个碱基对之间,使原来相邻的碱基对彼此分开,当带有这类化合物的DNA复制时,很容易插入1个或2个碱基,引起移码突变。
微生物学第七章资料总结
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第七章微生物的遗传变异和育种1. 遗传:亲代与子代相似;变异:亲代与子代、子代间不同个体不完全相同。
遗传和变异是生命的最本质特性之一。
2. (1)遗传型:又称基因型,指某一生物个体所含有的全部遗传因子即基组(genome)所携带的遗传信息。
遗传型是一种内在可能性或潜力,其实质是遗传物质上所负载的特定遗传信息。
(生物的全部遗传因子及基因)(2)表型:又称表现型,指某一生物体所具有的一切外表特征和内在特性的总和,是其遗传型在合适环境下通过代谢和发育而得到的具体表现。
(具有一定遗传型的个体,在特定环境条件下通过生长发育所表现出来的形态等生物学特征的总和)表型是由遗传型所决定,但也和环境有关。
遗传性+环境条件→表型(经过代谢和发育)可能性→现实性(3)变异:(遗传物质改变,导致表型改变特点:具有遗传性、群体中极少数个体的行为)遗传型变异(基因变异、基因突变)指生物体在某种外因或内因的作用下所引起的遗传物质结构或数量的改变,亦即遗传型的改变。
(4)饰变:表型饰变:指不涉及遗传物质结构改变而只发生在转录、转译水平上的表型变化。
(表型的差异只与环境有关特点:暂时性、不可遗传性、表现为全部个体的行为)25℃培养产生红色灵杆菌素,37 ℃培养不产生色素。
3. 遗传物质必须具备复制and 进化只有能复制的物质,才能传种接代,才能类生类除了类生类之外,还得有类生非类的能力,这样才能更好地适应所处的环境,才能不断适应环境的变化。
4. 一、3个经典实验(一)经典转化试验最早:肺炎双球菌转化实验(格里菲斯F. Griffith(1928年))(1)动物实验(S型,致病菌,具荚膜,菌落表面光滑R型,非致病菌,无荚膜,菌落表面粗糙)(2)植物培养实验(见上图)(3)S型菌的无细胞抽提液试验★以上实验说明,加热杀死的S型细胞,在其细胞内可能存在一种具有遗传转化能力物质,它能通过某种方式进入R型细胞,并使R型细胞获得表达S型荚膜性状的遗传特性。
复习提纲--第6章微生物的遗传和变异共77页文档
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➢可逆性 实验证明,任何性状既有正向突变,也可发
生回复突变。回复突变率同样是很低的。
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(2) 自发突变机制 ➢ 背景辐射和环境因素的诱变
原因不详的低剂量诱变因素的长期综合诱变效应。 例如,宇宙空间的各种短波辐射或高温诱变效 应,以及自然界中普遍存在的一些低浓度的诱 变物质(的作用等。
32
➢微生物自身有害代谢产物的诱变效应
作用: 可用于环境治理和修复
11
3. 转座因子
插入序列(IS): 两端为40-1000bp的反向重复 序列, 中部为与转座有关的基因.能在染色体 DNA中移动或复制-移动的DNA序列.
转座子: 由一或两个IS 和一系列其他基因组 成.
12
(三) DNA的复制方式
13
环状DNA的复制策略
14
线型DNA的复制策略
3
(二)
1. 染色体DNA 细菌的遗传物质 ➢ 双链环状DNA, ➢无组蛋白与其相结合, ➢与细胞膜结合, ➢只有一个复制启始位点。 病毒中则有DNA或RNA,双链或单链,线 状或环状。
4
2.原核生物染色体外的DNA
原核生物染色体外DNA被统称为质粒。为双 链DNA。多数为环状,也有线状的大分子 结构。
5
(1)F因子
又称致育因子或性因子。是E.coli 等细菌 中决 定性别的质粒。它是一个94.5kb的小 型DNA分子。该质粒赋与寄物多种性能。 A.形成性纤毛。 B.细菌的结合与质粒DNA的转移。 C.整合到寄主的DNA上,在结合过程中带动 寄主DNA的转移。
6
(2)R因子
多数R因子是由相连的两个片段组成。其一 称R质粒,它含有调节DNA复制和拷贝数的 基因及转移基因。其二为抗性决定质粒。 其上含有其他抗生素的抗性基因。该质粒 赋予寄主对各种抗生素的抗性。能在不同 的细菌间转移。造成严重的抗药性问题。
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微生物遗传学复习总结基因突变的类型形态突变型;细胞形态改变;菌落形态改变生化突变型:营养缺陷型;抗性突变型(抗药物、抗噬菌体);条件致死突变型(温度敏感突变型)等。
基因突变的特点:随机性(波动实验、涂布实验、影印实验)、独立性(交叉抗性:对两种抗生素同时由敏感变为抗性,如大肠杆菌中抗四环素的突变株往往也抗金霉素。
)、稳定性、可逆性、稀有性(10-9-10-5)、诱变剂可提高突变率。
突变率: 每一个细胞在每一个世代中发生突变的机率,也是突变在每个细胞生存的单位生物学时间内发生的概率。
突变频度: 突变频度常用来表明一定数目的野生型细胞中出现的突变型的数目,因此突变频度没有涉及世代这一生物学时间单位。
化学诱变剂①碱基类似物引起的诱变5-溴尿嘧啶:5-BU分子结构与T非常相似,溴原子取代T第5位的甲基。
诱发突变原理:Br改变分子在酮式和烯醇式之间平衡,使5-BU更易出现烯醇式结构,形成5-BU≡G, 5-BU上溴原子的作用被邻近的基团效应所抵消,使得A=BU 转变为G≡BU的倾向减弱,所以突变中GC→AT多于AT→GC。
②改变DNA结构的诱变剂亚硝酸:氧化脱氨基作用, 把氨基转变为酮基,使C→U 、A →H ,造成U·A 和H·C碱基错配,诱发GC→AT及AT→GC的变化。
羟胺:专一地作用C ,使之转变为能与A配对的形式专一性地引起GC→AT突变。
甲基磺酸乙酯EMS(烷化剂的一种):当其烷基加到G 和T 的与氢键相结合的氧原子后,将会引起G 和T 的错配,引起AT→GC和GC→AT的转换。
EMS 是能使DNA的许多位点发生烷化,强烈的诱变剂。
③DNA移码突变的化合物(丫啶类化合物、溴化乙锭、烷化剂)移码突变:由于DNA分子中一对或少数几对核苷酸的增加或缺失造成的突变。
丫啶类化合物:分子多数是扁平的,能够插入到DNA的碱基对之间,是有效的移码诱变剂。
这类化合物分子结构上的特点为,当与DNA接触时,能够逐渐插入到DNA链的两个碱基对之间,使原来相邻的碱基对彼此分开,当带有这类化合物的DNA复制时,很容易插入1个或2个碱基,引起移码突变。
物理诱变剂①电离辐射:χ射线和γ射线、a射线、β射线、快中子、离子注入、宇宙射线②非电离辐射:红外线、紫外线辐射损伤DNA机理直接作用假说/靶学说:细胞吸收辐射能量后,发生诸如激发、电离、弹性碰撞等多种原发性物理过程,辐射的量子击中染色体,导致发生直接的原始损伤,整个过程就好象子弹击中靶子一样。
间接作用假说:生物细胞中的分子经辐射作用先产生各种自由基,这些自由基团再进一步与细胞内含物反应并通过一系列生物化学变化造成染色体损伤。
紫外线(UV)诱变的分子机理:UV对生物的损伤主要直接作用于DNA而引起遗传物质的改变。
UV可引起DNA链的断裂、DNA分子双链的交联、胞嘧啶和尿嘧啶的水合作用等多种损伤,但诱导形成胸腺嘧啶二聚体是主要的损伤。
同一条链上相邻的胸腺嘧啶之间的二聚体会阻碍碱基的正常配对,影响T与A的配对,DNA 复制到此位置时就会突然终止或在新链上出现错误的碱基,而引起突变。
紫外线的穿透力也很弱,UV波长范围为136—390nm,其中200—300nm范围对诱变有效。
254nm的UV最易被嘌呤和嘧啶碱基所吸收,因而诱变效果最强。
生物诱变剂插入因子、转座子、转座噬菌体:可以诱导这些转座因子向目标细胞中转移,插入目的基因中,造成基因突变。
不论是自发突变,还是诱发突变,都是通过理化因子作用DNA,改变其DNA结构,并最终改变遗传性状。
自发突变:受自然条件下存在的未知理化因子作用产生的突变;诱发突变:人为地选择了某些可强烈影响DNA结构的诱变剂处理所产生的突变。
诱变所产生的突变频率和变异幅度都显著高于自发突变。
引起自发突变的原因:生物体内存在的各种转座遗传因子的跳动;背景辐射和环境诱变;微生物自身所产生的诱变物质的作用;互变异构;环出效应。
突变热点:指DNA链中具有很高突变率的碱基位点。
突变热点具有远高于一般位点的突变率。
原因:5-甲基胞嘧啶(MeC)的存在;与DNA序列结构有关。
转座遗传因子:存在于细胞内,位于染色体或质粒上的一段特殊、可移动的DNA序列。
转座:转座遗传因子改变位置的行为。
转座子的转座遗传效应①具有插入突变效应,扩散抗药性基因;②使受体菌基因组发生缺失、重复、易位或倒位等重排,在某些情况下还可以启动或关闭某些其它基因;③极性效应:转座因子插入到一个操纵子的上游基因时,不仅破坏被插入的基因,而且也大大降低位于远离启动子一端的其他基因的表达。
应用:获得各种突变株、判定未知基因的位置、构建不同质粒融合或复制子融合的特殊菌株。
转座因子的类型和结构:插人序列(又称IS因子);转座子(又称易位子,Tn)(非组合型转座子-Ⅱ型转座子;转座噬菌体--Ⅲ型转座子,如Mu噬菌体;整合子;逆转座子-第2类内含子;接合型转座子;可移动转座子。
转座机制:保守转座;复制转座;剪切转座;逆转座。
转座诱变:随机诱变、定位诱变。
真正的回复突变:突变基因上被改变的碱基对在第二次突变时恢复成原来的碱基顺序,真正恢复到野生型基因的功能。
抑制基因突变:在DNA的不同位置上发生第二次突变抑制了原来突变基因的表达,恢复野生型表型,而不是直接改变回原来的野生基因型。
抑制作用:使突变型恢复为野生型表型,但这种恢复并非由于回复突变所造成,而是由于基因内抑制或基因间抑制所造成的一种表型上的恢复。
基因间抑制:指某一突变基因恢复野生型表型是由于另一座位的突变造成的,后一基因就称为前一基因的抑制基因。
这种抑制作用发生在两个基因之间,所以称为基因间抑制作用。
基因内抑制:指某一突变基因表型的恢复是由于这一突变基因内的另一位点上的突变所造成。
基因内抑制:置换抑制;移码突变的抑制。
基因间抑制:错义突变的抑制;无义突变的抑制;移码突变的抑制;基因间抑制—代谢抵偿。
DNA损伤的修复和基因突变有密切的关系,微生物细胞内存在着一系列的修复系统,DNA分子某一结构的改变或损伤(即前突变),并不一定会导致产生真正的突变,DNA损伤修复是细胞中多种酶共同作用的结果。
DNA损伤的修复:错配修复;光复活作用(紫外线照射后在DNA上形成的(T=T),可见光(波长300-600nm)照射,细胞内光复活酶识别T=T,利用光量子的能量将T=T的环丁酰环打开。
光复活作用是一种高度专一的修复方式,它只作用于紫外线引起的DNA嘧啶二聚体,不含光复活酶的生物细胞,没有光复活能力);切补修复(碱基切除修复,核苷酸切除修复);重组修复;SOS修复(增加细胞内原有修复酶的合成量,诱导产生新的修复酶系统);适应性修复。
两类修复机制(避免差错(无误)修复:错配修复、光复活作用、适应性修复和切除修复;倾向差错修复系统:切补修复、重组修复、SOS修复。
DNA损伤修复的生物学意义:维持生物的遗传稳定性和延续,保证复制的准确性和生物的稳定性;提供突变的基础(分离延迟:由于DNA损伤经过修复,可能产生杂合双链,必须经过复制才能产生突变的子代双链,而且还要经过一次复制,细胞中才出现突变基因型。
生理延迟:在一个野生型的细胞中,虽然产生了突变,出现突变基因型,但其表型可能仍然是野生型,必须经过数次分裂才能将原有的野生型酶的浓度稀释,逐渐表型突变的表型。
);修复与进化的关系;DNA修复与遗传疾病及肿瘤的关系。
诱变育种:采用理化、生物等诱变因素处理微生物,使其DNA发生改变,提高突变率,扩大遗传变异幅度,筛选出所需菌种的过程。
诱变育种程序:菌悬液的制备、诱变处理、突变后筛选、鉴定。
菌悬液的制备细胞:分散状态的单倍体或单核细胞。
菌龄:应采用对数期细胞。
用UV诱变时应采用的剂量:致死率70%左右为宜。
诱变剂选择原则:(1)诱变作用强;(2)诱变效果好;(3)使用安全;(4)操作方便。
营养缺陷突变株:由于丧失了合成某种营养物质(如氨基酸、核苷和维生素等)的能力后,在基本培养基上不能生长,只有在基本培养基中加入该突变菌株所缺陷的营养物质后才能生长。
筛选程序:诱变、浓缩、检出、鉴定。
浓缩的方法:菌丝过滤法;饥饿法;青霉素法:差别杀菌法(加热法)。
常用的检出方法:夹层法;限量补充法:影印法:点种法。
营养缺陷型的鉴定方法主要有两种:生长谱法;分类生长法。
利用鉴别培养法筛选突变型碘液:指示供试菌液化淀粉酶活力的大小。
抗毒素:先用霍乱弧菌毒素制备成抗毒素(抗体)。
产生毒素的菌落:周围混浊圈(毒素和抗毒素沉淀反应)。
不产毒素的菌落:周围无混浊圈。
高产菌株的筛选初筛:一般不作重复并应尽量利用表型特征,将有高产潜力的突变株筛选出来,然后再进入摇瓶筛选复筛:初筛选出较好的少数菌株进行复筛,随着测定菌株数目的减少,重复数可逐步增加,以提高其可靠性。
转化作用过程(Transformation)(肺炎双球菌)感受态(competence):细菌能够从周围环境中摄取DNA分子,并且不易被细胞内的限制性核酸内切酶分解时所处的一种特殊生理状态。
肺炎链球菌、枯草杆菌---对数后期。
前整合复合物在G+细菌中,单链DNA与SSB蛋白质结合,形成前整合复合物。
至少3种作用:①保护供体DNA免受降解;②促进DNA的吸收;③增强单链DNA的刚性,促进单链DNA的整合在肺炎双球菌中,这种结合蛋白位于细胞质,而在枯草杆菌中,这种蛋白位于周质空间。
G-细菌: 2种机制使DNA双链保持稳定:①DNA在周质空间与一种蛋白非共价结合形成复合物;②DNA与一种泡状细胞表面结构结合形成复合物。
这2种复合物都是DNase抗性的。
转化因子的整合①前整合复合物定位在染色体附近;②单链侵入,形成一种不稳定的受-供体复合物;③单链全部侵入,形成一种稳定的受-供体复合物,被取代的受体单链被降解;④形成一种共价闭合的复合物——异源双链DNA;⑤经错配修复,成为含外源DNA的转化子,或正常的受体DNA。
细菌吸附DNA双链,但吸收的是DNA单链人工转化系统人工方法处理可诱导感受态的产生,提高转化效率:利用Ca2+和改变温度的方法;PEG介导的转化:电转化(电穿孔法)。
共转化:在某些情况下受体细菌也能同时得到供体的两种性状。
这种受体细菌吸收外源DNA后同时出现两个遗传性状改变的现象称为共转化。
接合作用(大肠杆菌)(Conjugation)选择性标记:观察对象所带有的(遗传)标记,依据这种标记可以获得生长优势,或者失去生长优势;观察者依据这种标记可从混有不同基因型的群体中获得具有该标记的个体,选择重组子。
非选择性标记:观察者在一次试验中没有使用的、观察对象具有的(遗传)标记,观察分离现象。
正向筛选:依据选择性标记可以通过一次试验将带有选择性标记的个体筛选出来,如抗性标记。
反向筛选:必须通过几次试验才可以将带有该标记的个体筛选出来,如营养缺陷性标记。