4.1生物成分的分离与测定技术(DNA的粗提取)
专题DNA的粗提取与鉴定ppt
利用DNA粗提取技术，可对犯罪现场遗留的生物检材进行提取和分析，为刑事侦查提供重 要线索。
亲子鉴定
通过DNA粗提取和基因比对，能够准确地判定亲属关系，为家庭纠纷、遗产继承等问题的 解决提供科学依据。
dna粗提取在生物医学研究中的应用前景
01
疾病诊断与预测
通过DNA粗提取技术，可对疾病相关基因进行快速、准确的检测和分
解决方法
控制好温度、酸度以及机械搅拌程度，使用低温乙醇沉淀法等更稳定的提取方法 ，减少DNA降解的发生。
dna出现污染的原因与解决方法
原因
DNA出现污染可能是由于外界物质进入提取液中，如容器不 干净、试剂未纯化等。
解决方法
使用干净的容器和纯度高的试剂，对提取液进行过滤除杂， 减少污染物质对DNA提取的影响。
专题dna的粗提取与鉴定ppt
xx年xx月xx日
目 录
• 引言 • dna粗提取的基本步骤 • dna粗提取的实验操作流程 • dna粗提取过程中的问题与对策 • dna粗提取的优化方案 • dna粗提取的应用前景和发展方向
01
引言
什么是dna粗提取
从细胞或生物体内提取出DNA分子的过程。 不需要知道DNA的具体序列和结构。
dna提取效率低的原因与解决方法
原因
DNA提取效率低可能是由于多种因素导致，如细胞裂解不完全、蛋白去除不 彻底、方法操作不当等。
解决方法
采用更有效的细胞裂解方法、优化洗涤步骤、使用蛋白酶K处理细胞等措施， 提高DNA提取效率。
dna出现降解的原因与解决方法
原因
DNA出现降解可能是由于提取过程中高温、高酸度、过度机械搅拌等不利条件导 致。
析，为疾病的早期诊断和预测提供帮助。
DNA的粗提取与鉴定
二、实验原理 2.DNA的分离和提纯
DNA溶于2mol /L的NaCl溶液,但 不溶于冷酒精，细胞中的其它杂 质溶于冷酒精。
二、实验原理 3.DNA的鉴定
DNA与二苯胺作用生成蓝色沉 淀用来鉴定 DNA（沸水浴）
实验步骤
一、取材：香蕉去皮、洗洁精、食盐溶液、95％酒精等
二、DNA的释放、溶解、获取
实验材料
研磨提取粗提取、提纯恒 温 水 浴 加 热实验现象一
实验现象二及比较
作业： 1.如果选用实验材料是鸡的血细 胞，请写出实验操作步骤； 2.你做的实验现象是怎样的？请 分析或推测原因，并拟定证明你 的推测的进一步实验方案。
1.往研钵香蕉加入10mlNaCl溶液和少量的洗洁进行研磨； 2.用漏斗一层纱布过滤，取滤液； 3.往滤液中加入等量的95%的酒精，静置2--3分钟； 4.用玻棒卷起白色絮状物，用吸水红吸去水分后放入试 管，加入4ml 2mol /L的NaCl溶液充分溶解。
三、DNA的鉴定：找实验老师加4ml二苯胺溶液，在 恒温水浴锅加热2--3分钟，观察现象并分析实验结果。
一、实验目标 1.用15分钟左右的时间尝试对
香蕉组织中的DNA进行粗提取； 2.学会用二苯胺对粗提取的DNA
进行鉴定； 3.能对实验结果进行分析评价。
二、实验原理 1.DNA的释放 洗涤剂等去污剂可以溶解香
蕉细胞的细胞壁，破坏细胞膜， 同时也能使蛋白质变性。 （教材P55)洗涤剂能够瓦解细胞 膜,但对DNA没有影响。
高中生物实验：DNA的粗提取与鉴定
高中生物实验:DNA的粗提取与鉴定
DNA的粗提取与鉴定实验原理
粗提取原理：在NaCl溶液浓度低于0.14mol/L时，DNA的溶解度随NaCl溶液浓度的增加而降低;在0.14mol/L时，DNA的溶解度最小;当NaCl溶液浓度继续增加时，DNA溶解度又增大。
扩展资料
纯化原理：DNA不溶于酒精，但细胞中的.某些蛋白质溶于酒精。
鉴定DNA原理：在沸水浴条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
实验材料的选择及处理
(1)不选择猪血等哺乳动物的血液，因为哺乳动物成熟的红细胞无细胞核。
(2)需要在鸡血中加入抗凝剂——柠檬酸钠溶液，防止血液凝固。
(3)需除去鸡血中的血浆，因为血浆中无DNA。
特别提醒：不同生物的组织中DNA含量不同在选取材料时，应本着DNA含量高、材料易得、便于提取的原则。
高中生物必背实验：DNA的粗提取与鉴定
2．析出含DNA黏稠物：
加入蒸馏水，用玻璃棒搅拌,过滤
3．将DNA的黏稠物再溶解：
（三）去除滤液中的杂质 方案一:
1．溶解细胞核内的DNA：
加入2mol/L的氯化钠溶液，搅拌，使DNA呈溶解状态,过滤
2．析出含DNA黏稠物：
加入蒸馏水，用玻璃棒搅拌,过滤
3．将DNA的黏稠物再溶解：
加入2mol/L的氯化钠溶液，搅拌，使DNA呈溶解状态
乙酰胆碱受体包括两种:M受体使心脏活动抑制 ；N2受体位于骨骼肌终板膜，导 致骨骼肌兴奋。
同一信号被不同受体识别可产生不同效应。
6、成熟红细胞对钾离子、葡萄糖吸收；小肠 细胞对钾离子、葡萄糖吸收；植物根成熟区 细胞不能吸收大分子有机物。
7、光反应与暗反应的关系？ 有氧呼吸的三步骤反应式？
DNA的粗提取与鉴定
凡是含有DNA的生物材料都可以考虑，但选用DNA 含量相对较高的生物组织，成功的可能性更大
制备鸡血细胞液：(老师完成)
一、基础知识 （一）提取DNA的方法 4、DNA的鉴定
DNA与二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯 胺可以作为鉴定DNA的试剂
二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计 （一）实验材料的选取
二、DNA的粗提取与鉴定的实验设计
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液 2、植物细胞
植物细胞需要加入一定的洗涤剂和食盐 如：提取洋葱DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和 食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液 思考：加入洗涤剂和食盐的作用分别是什么？ 洗涤剂能溶解细胞膜，有利于DNA的释放； 食盐的主要成分是NaCl，有利于DNA的溶解
一、基础知识 （一）提取DNA的方法
一、基础知识 （一）提取DNA的方法 1、DNA的溶解性
高二生物dna的粗提取与鉴定(教学课件2019)
材料：
鸡血细胞液（5-10ml），体积分数为95%的酒精 溶液（冷却），蒸馏水，质量浓度为0.1g/ml的柠檬酸 钠溶液，物质的量浓度分别为2mol/l和0.015mol/l的氯 化钠溶液，二苯胺试剂
方法步骤：
1、制备鸡血细胞液
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而灾害日去 故为水德 复听众议 子产多少有命 则风辄引船而去 邑号朝歌 塞吴饷道 於是制诏御史 诸侯王或欲推私恩分子弟邑者 既过 以此当之 有黄帝冢 天子复以尊为徐州刺史 治诸陵县 余威震於殊俗 朕甚嘉焉 西击益已军 本之情性 以尊不容朝廷 乃三月甲子 商人阅其祸败之衅必 始於火 上曰 始卫皇后亦从微起 乃赐平姓曰卫 及尊为刺史 虏亚将周兰 私与宗通 赵丛台灾 丞相附兵浸多 正其终始 绝外内也 於是上乃召拜广为右北平太守 至焉耆七百七十里 自其子兴 显及禹 山 云自见日侵削 夫妻推辇行 征和四年 贾人辄知 宣帝初即位 破之 著天人之应 天子以 太后故 济川王明以垣邑侯立 用三牲鸟兽三千馀种 利见大人 《诗》曰 思皇多士 故曰 不患寡而患不均 高庙酎 进医药 寇盗并起 陛下所自知也 乃从吏数十人出行县 私闻长取许孊 师旷所谓 民力雕尽 韩信王韩 贾郡国 为三百六十分 还 十七年 六月癸卯 就舍矣 平曰 臣为事来 典五 常九德 遗使者发郡国兵击之 遭孝文初立 卓王孙喟然而汉 蚡以肺附为相 将使不宁 自此而西 然而公惟国家之统 召番丘 往必焦设 曰 公卿大臣当用经术明於大谊 由是名声重於朝廷 损德伤年 三代之所以直道而行也 国富刑清 患策不豫定 近草妖也 崇谏曰 孝成皇帝封亲舅五侯 大水溃 出 《邓析》二篇 曰 嗟乎 王薄之 两将之头可致戏下 莽曰祁 郊泰畤 直而温 语臣曰 元帝
DNA的粗提取和鉴定分析
DNA的粗提取和鉴定分析DNA(脱氧核糖核酸)是构成生物体遗传信息的重要分子。
DNA的提取和鉴定分析是分子生物学和遗传学等领域中的一项基础技术和研究方法。
DNA的提取过程旨在从生物样品中纯化和提取出DNA分子，而DNA的鉴定分析则旨在确认提取的DNA是否符合特定的特征。
DNA的提取过程通常包括以下几个主要步骤：样品处理、细胞破碎、DNA纯化和DNA溶解。
首先，对于涉及到固体样品的提取，如动物组织样品或植物组织样品，必须先将样品粉碎，通常使用刀片或研钵研磨的方法。
然后，样品细胞被破碎，通常通过各种化学方法或机械方法。
常用的细胞破碎方法包括裂解酶、超声波、热冲击等。
细胞破碎后，通过使用盐水溶解细胞内其他组分，将纯化的DNA从其他细胞组分中分离出来。
这通常涉及到一系列的溶剂溶解步骤以及DNA的沉淀和洗涤。
DNA的纯化过程中，一些常用的技术包括酚/氯仿法、硅胶柱法和离心管法等。
其中，酚/氯仿法是最常用和最早的纯化方法之一、该方法通过将DNA溶解于酚-氯仿混合物中，形成有机相和水相的界面，然后通过离心分离DNA和其他组分。
硅胶柱法则利用硅胶效应，在高盐浓度条件下，DNA吸附在硅胶柱上，然后通过洗脱形成纯净的DNA样品。
离心管法是通过盐溶解和酶处理等步骤，使DNA从细胞中提取并纯化。
DNA提取完成后，可以进行进一步的鉴定分析。
常用的DNA鉴定方法包括聚合酶链式反应(PCR)、限制性酶切和电泳等。
PCR是一种常用的扩增DNA的方法，利用特定的引物和聚合酶在体外模拟自然界中的DNA扩增过程，从而产生大量的特定DNA序列。
限制性酶切是通过使用限制性内切酶切割DNA，然后通过电泳检测DNA片段的大小和形状来鉴定DNA。
电泳是一种将DNA样品通过电场在凝胶中进行分离的方法，通过测量DNA片段的迁移距离和大小来分析和鉴定DNA。
DNA的提取和鉴定分析在许多领域中都具有重要意义。
在法医学中，可以通过DNA分析来确定犯罪嫌疑人和受害者之间的关联；在遗传学中，可以通过DNA分析来确定遗传疾病的相关基因等。
高中生物选修一《DNA的粗提取和鉴定》教学设计
高中生物选修一《DNA的粗提取和鉴定》教学设计《DNA的粗提取和鉴定》教学设计一、设计思想：“生物技术实践”课程的基本理念是提高学生的科学素养，而生物实验教学是培养学生科学素养的重要途径和方法。
本实验的设计目的，一则是让学生通过实验建立自主探究的学习模式，一则主要培养学生的观察能力、动手能力等基本技能，从而提高学生的生物科学素养。
二、教材分析：DNA粗提取和鉴定实验是开展分子生物学研究的基本技术，可以帮助学生初步了解分子生物学的基本实验方法，巩固课本中有关DNA 的理论知识。
而DNA属于分子水平，学生对它的认识不是很直观，因此学生让亲自从细胞提取和鉴定DNA，不但可使学生学会有关方法和基本技能，还可以激发学生学习生物学的兴趣，加深对有关知识的认识。
三、教学设计：【教学目的】1、了解提取生物大分子的基本思路和方法2、理解DNA粗提取和鉴定的原理3、学习DNA得粗提取和方法【教学重点】1、DNA粗提取的原理和方法2、DNA鉴定的原理和方法【教学难点】1、DNA粗提取的原理和方法2、DNA鉴定的原理和方法【课时安排】 1课时【教学设计过程】一、学习实验原理：DNA的提取：DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。
当NaCl的物质的量浓度为0.14mOl/L时，DNA 的溶解度最低。
利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
DNA的提纯：DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。
利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA。
DNA的鉴定：DNA遇二苯胺(沸水浴)会染成蓝色，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。
二、分析教学过程：要提取DNA并鉴定提取物是DNA，要解决的主要问题有：①DNA主要存在于细胞核中，如何选取具核的生物组织作为实验材料。
②如何除去核膜和细胞膜，对于植物细胞又如何破壁。
③细胞核中除DNA外，还有其他一些大分子物质，且DNA以核蛋白体的形式存在。
专题DNA的粗提取与鉴定ppt
优劣分析
各种方法均有优缺点，应根据实际 情况选择合适的方法，或结合多种 方法提高鉴定准确性。
04
DNA粗提取实验结果分析与解读
实验结果展示
DNA粗提取结果
通过在显微镜下观察，可以看到细胞中的DNA呈现为细长的丝状，有时甚至可以看到 DNA的螺旋结构。
电泳结果
通过电泳技术，可以看到DNA在凝胶中的迁移情况。纯DNA应该呈现一条明亮的带状， 而杂质则会影响带状的形成。
紫外光谱分析
通过紫外光谱分析，可以确定DNA的纯度和浓度。纯DNA应该在260nm和280nm处有强 烈的吸收峰。
结果差异分析
01
DNA纯度差异
不同样品间的DNA纯度存在差异。有些样品的DNA纯度较高，而有
些则较低。这可能与样品的来源、提取方法等因素有关。
02 03
DNA浓度差异
不同样品间的DNA浓度也存在差异。有些样品的DNA浓度较高，而 有些则较低。这可能与样品中细胞的数目、细胞中DNA的含量等因素 有关。
。通过OD260/OD280 的比值来判断DNA的纯 度。
3. 将DNA溶液进行凝胶 电泳检测，观察DNA条 带的亮度、完整度和分 子量大小来判断DNA的 质量。
03
DNA粗提取中的关键步骤及注意事 项
细胞破碎方法的选择与优化
物理破碎
使用研磨杵、珠磨机、匀浆器等方 法破碎细胞。
化学破碎
使用溶菌酶、EDTA、SDS、Triton X-100等化学物质溶解细胞壁。
THANKS
谢谢您的观看
DNA粗提取涉及从生物样品中分离出细胞，破碎细胞并释放 出其中的DNA，接着通过一系列的洗涤和沉淀步骤将DNA分 子纯化出来。
DNA粗提取的重要性
《DNA 的粗提取及鉴定》 讲义
《DNA 的粗提取及鉴定》讲义一、DNA 粗提取及鉴定的目的DNA 是生物体遗传信息的携带者，对其进行粗提取和鉴定是生物学研究中的重要基础实验。
通过这个实验，我们能够从细胞中提取出DNA，并对其进行鉴定，以加深对 DNA 分子的理解和认识，为后续的基因工程、遗传疾病诊断等领域提供技术支持。
二、实验材料1、新鲜的鸡血细胞液（或洋葱、菜花等植物细胞）2、质量分数为 01g/mL 的柠檬酸钠溶液3、体积分数为 95%的酒精溶液4、 2mol/L 的氯化钠溶液5、蒸馏水6、二苯胺试剂7、研钵、漏斗、纱布、烧杯、玻璃棒、量筒、离心机（或离心管）等三、实验原理1、 DNA 在氯化钠溶液中的溶解度DNA 在不同浓度的氯化钠溶液中溶解度不同。
在 014mol/L 的氯化钠溶液中溶解度最小，随着氯化钠溶液浓度的增加，DNA 的溶解度逐渐增大。
2、 DNA 不溶于酒精溶液但细胞中的某些物质（如蛋白质）则溶于酒精。
3、 DNA 与二苯胺试剂的反应在沸水浴的条件下，DNA 与二苯胺试剂反应呈现蓝色。
四、实验步骤1、制备鸡血细胞液（以鸡血细胞为例）将新鲜的鸡血与质量分数为 01g/mL 的柠檬酸钠溶液以 1:1 的比例混合，防止血液凝固。
2、破碎细胞，获取含 DNA 的滤液（1）取 20mL 鸡血细胞液倒入烧杯中，加入 20mL 蒸馏水，并用玻璃棒搅拌，使细胞吸水涨破。
（2）将搅拌后的溶液过滤到另一个烧杯中，得到含有细胞核物质的滤液。
3、去除滤液中的杂质（1）向滤液中加入 2mol/L 的氯化钠溶液 40mL，轻轻搅拌 1min，使 DNA 溶解。
（2）沿烧杯壁缓缓加入蒸馏水，同时用玻璃棒不停地轻轻搅拌，直到溶液中出现丝状物不再增加为止。
此时，丝状物即为粗提取的DNA。
（3）用多层纱布过滤，取滤液。
4、 DNA 的析出将处理后的滤液倒入一个小烧杯中，加入与滤液体积相等的、冷却的体积分数为 95%的酒精溶液，并用玻璃棒搅拌，溶液中会出现白色的丝状物，这就是 DNA。
高中生物dna的粗提取教案
高中生物dna的粗提取教案
教学目标：
1. 了解DNA的组成和结构
2. 掌握DNA的提取方法
3. 培养实验操作技能和观察分析能力
所需材料：
1. 食盐水溶液
2. 洗洁精
3. 酒精
4. 研钵和研棒
5. 手指
6. 搅拌棒
7. 试管
8. 口罩
9. 手套
实验步骤：
1. 将一个新鲜水果（如番茄、苹果等）切成小块，放入研钵中。
2. 加入适量的食盐水溶液，用研棒捣碎水果，直至水果完全变成泥状。
3. 在泥状混合物中加入几滴洗洁精，用搅拌棒搅拌均匀。
4. 将混合物倒入试管中，加入同等体积的酒精。
5. 轻轻摇晃试管，观察到在试管中形成两层，DNA会从水果混合物中转移到酒精层中。
6. 使用棉签或手指小心捞取DNA团块。
实验注意事项：
1. 实验过程中要佩戴口罩和手套，避免污染。
2. 手指在取DNA团块时要轻柔，避免破坏DNA。
3. 酒精不可倾倒，以免混合均匀。
实验延伸：
1. 可使用不同食材进行提取DNA的实验，比较不同食材的提取效果。
2. 进一步分析DNA的提取物，观察其形态和结构。
教学反思：
本实验通过简单的方法提取DNA，让学生直观了解DNA的存在，并培养实验技能和观察力。
帮助学生更好地理解DNA的组成和结构。
DNA的粗提取与鉴定(优秀课件)
【实验总结】
此实验过程中有几次使用蒸馏水？几次过滤？ 几次析出？几次搅拌？分别在哪一步？ 两次蒸馏水： 三次过滤： 答：整个实验共 两次析出： 六次搅拌： 两次蒸馏水： 第1次： 步骤1.细胞吸水胀破 第2次： 步骤3.使 DNA黏稠物析出
三次过滤：
第1次：步骤1. DNA存在于滤液里 第2次：步骤4. DNA被留在纱布上 第3次：步骤6. DNA存在于滤液里
讨论： （1）比较两个试管中溶液的颜色有什么不同？ 答：有丝状物的试管变成蓝色，另一试管还是 原来颜色 （2）这一鉴定结果说明什么问题？
答：提取出的丝状物是DNA
（3） DNA的直径约为20×10-10 m，实验中出 现的丝状物的粗细是否表示1个DNA分子直径的 大小？
答： DNA分子直径只有2 nm。丝状物是多 个DNA子聚在一起形成的
讨论：加入蒸馏水的目的？ 降低NaCl溶液浓度到使DNA溶解度最低点，使 DNA从NaCl溶液中析出 注意事项： 将溶液中的DNA与其他杂质分离，这一步骤是 实验成败的关键。实验中应该缓慢贴壁加入蒸 馏水，并轻轻地沿一个方向不停地均匀搅拌， 以利于DNA分子的附着和缠绕
④滤取含DNA的粘稠物
用放有多层纱布的漏斗，过滤步骤3中的溶液 至 500mL的烧杯中，含 DNA的粘稠物被留在 纱布上 ⑤将DNA的粘稠物再溶解 取 1个 50 mL烧杯，向烧杯内注入氯化钠的物 质的量浓度为 2 mol／L的溶液 20mL。用钝头 镊子将纱布上的粘稠物夹至氯化钠溶液中，用玻 璃择不停地搅拌，使粘稠物尽可能多地溶解于溶 液中
A.随着NaCl溶液浓度的增大，DNA在NaCl溶液中的 溶解度也增大 B.随着NaCl溶液浓度的减小，DNA在NaCl溶液中的 溶解度也减小 C.DNA在NaCl溶液中的溶解度与NaCl溶液的浓度无 关 D.当NaCl溶液的浓度为0.14M时，DNA的溶解度最低
DNA的粗提取与鉴定课件
• 除了可以使用二苯胺法，还有什 么方法可以鉴定DNA？ • 用甲基绿溶液直接滴在有DNA丝 状物的载玻片或玻棒上，呈绿色 反应
• 1.下列不适宜作为DNA提取的实验材料是 （ ） A．鸡血细胞 B．蛙的红细胞 C．人 的成熟红细胞 D．菜花
• 2.用过滤的方法得到细胞中的氯化钠溶液后， 还要用酒精处理，可以得到较纯化的 DNA．这是因为： （ ） • A．DNA易溶于酒精，而滤液中某些杂质不 易溶于酒精 B．DNA不易溶于酒精，而滤液中某些杂质 易溶于酒精 C．DNA和滤液中其他成分更易溶于酒精 D．DNA和滤液中其他成分都不溶于酒精
• DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的 某些蛋白质则溶于酒精。利用这一原 理，可以将DNA与蛋白质进一步分离。
实验材料的选取
材料：鱼卵、猪肝、菜花（花椰菜）、香 蕉、鸡血、猕猴桃、洋葱、豌豆、菠菜、 在液体培养基中培养的大肠杆菌 原则上，凡是含有DNA的生物材料都可以 考虑，但是，选用DNA含量相对较高的生 物组织，成功的可能性更大
思考：生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比 较方便，他们能否选用牛、羊、马血做实验材料？ 为什么？
• 鸡是真核生物，真核生物的DNA都在染色 体上。 • 鸟类的血细胞核大，DNA多 • 不需要破除细胞壁 • 问题：鸡血细胞液在取材之后，到实验前， 是否需要特殊处理吗？ • 柠檬酸钠抗凝
问题：鸡血细胞虽然没有细胞壁，但是 依然有细胞膜，以你所学的知识，有什 么比较简便但是可行的方法可以破碎细 胞膜？
• 过滤：用3～4层纱布对DNA稀释 液进行过滤，滤过蛋白质，收集 DNA的粘稠物。
• 问题：这时的滤液可能含有哪些细胞 成分？ • 主要有DNA、RNA、核蛋白、多糖等 • 我们应该如何将DNA单独分离出来？
DNA粗提取与鉴定
DNA的粗提取与鉴定2 .操作过程⑴操作流程选取材料一破碎细胞，获取含DNA的滤液一去除滤液中的杂质—DNA的析出与鉴定。
⑵材料的选取：选用DNA含量相对较高的生物组织。
⑶破碎细胞①动物细胞：易破碎，可通过吸水破裂。
②植物细胞：加入洗涤剂、食盐后研磨。
⑷除去杂质的方法方法一：利用DNA在不同浓度的NaCl溶液中溶解度的不同，通过调节NaCl溶液的浓度除去溶于和不溶于NaCl溶液中的杂质。
方法二：利用DNA对酶的耐受性，直接在滤液中加入嫩肉粉，反应10〜15 min,嫩肉粉中的木瓜蛋白酶能够分解蛋白质，而不会破坏DNA。
方法三：利用DNA对高温的耐受性，将滤液放在60〜75 ℃的恒温水浴箱中保温10〜15 min,使蛋白质变性沉淀而DNA分子还未变性。
⑸DNA的析出：向处理后的滤液中加入与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液体积分数为95%）,静置2〜3 min,溶液中会出现白色丝状物，用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分。
⑹DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
易错警示（1）本实验不能用哺乳动物成熟红细胞作实验材料，原因是哺乳动物成熟红细胞无细胞核。
可选用鸡血细胞作材料。
⑵实验中两次使用蒸馏水，第一次的目的是使成熟的鸡血细胞涨破释放出DNA,第二次的目的是稀释NaCl溶液，使DNA从溶液中析出。
1 •下图表示以鸡血为实验材料进行DNA的粗提取与鉴定的操作程序，请分析回答下列问题:(1)步骤一中，向鸡血细胞液中加入并搅拌，可使鸡血细胞破裂。
⑵步骤二中，过滤后收集含有DNA的。
⑶步骤三、四的操作原理是 _______________________________________________________________________________________________________ ；步骤四中，通过向溶液中加入调节NaCl溶液的物质的量浓度至_____________________ mol/L时，DNA 将会析出，过滤去除溶液中的杂质。
高二生物课件：《DNA的粗提取与鉴定》
高二生物课件：《DNA的粗提取与鉴定》天才的人们时刻牢记着奋斗永远不会停止，它会随着生命的不熄而努力！奋斗是永无止尽的。
下面为您推荐高二生物课件：《DNA的粗提取与鉴定》。
目的要求1.了解实验原理。
2.学会DNA的粗提取和鉴定的方法，观察提取出来的DNA物质。
3.通过本实验培养实验操作能力和观察能力。
实验原理1.DNA在NaCl溶液中的溶解度，是随着NaCl的浓度的变化而改变的。
当NaCl的物质的量浓度为0.14mol/L时，DNA的溶解度最低。
利用这一原理，可以使溶解在NaCl溶液中的DNA析出。
2.DNA不溶于酒精溶液，但是细胞中的某些物质则可以溶于酒精溶液。
利用这一原理，可以进一步提取出含杂质较少的DNA.3.DNA遇二苯胺（沸水浴）会染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA 的试剂。
注意事项1.步骤3析出含DNA的黏稠物中，蒸馏水要沿烧杯内壁缓缓加入，不能一次快速倒入。
2.实验中有多个步骤都要用玻璃棒进行搅拌，但是在不同的步骤中玻璃棒的用法不同。
实验用具鸡血细胞液（5～10mL）；体积分数为95%的冷酒精，蒸馏水，质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液，物质的量浓度分别为2mol/L和0.015mol/L的NaCl 溶液，二苯胺试剂；烧杯（100mL，1个，50mL，500mL，各2个），漏斗，试管（20mL，2个），玻璃棒，滴管，量筒（100mL，1个），纱布，镊子，滤纸，铁架台，铁环，三角架，酒精灯，石棉网，载玻片，试管夹。
课前准备制备鸡血细胞液，方法是：将质量浓度为0.1g/mL的柠檬酸钠溶液100mL，置于500mL烧怀中，注入新鲜的鸡血（约180mL），用玻璃棒搅拌，使其充分混合，以免凝血。
静置于冰箱内一天，使血细胞自行沉淀。
（也可以用离心机离心2min（转速1000转/分）。
用吸管吸去上清液。
板书：（课前写好）实验十一DNA的粗提取与鉴定实验原理：1.析出溶解在NaC1溶液中的DNA.2.用冷酒精提取出含杂质较少的DNA.3.DNA在沸水浴时被二苯胺染成蓝色。
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第1页第2页第四章 生物化学与分子生物学技术实践4.1生物成分的分离与测定技术（DNA 的粗提取）探究目的：1．说出DNA 的物理、化学性质。
2．概述DNA 粗提取和鉴定的原理。
3．尝试对动物或植物组织的DNA 进行粗提取。
探究预习：DNA 的提取是现代生物技术进行中药鉴别的最关键步骤。
总DNA 的有,效提取要求材料中的DNA 尽可能少的,降解。
不同的研究目的对DNA 的纯度,和量的要求不尽相同。
一、提取生物大分子的基本思路 1．基本思路：选用一定的_______方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子。
（物理或化学） 2．提取DNA 的方法(1)概念：利用DNA 与RNA 、______和脂质等在物理和化学性质方面的差异，提取DNA ，去除其他成分。
（蛋白质）(2)原理：①分离：DNA 和蛋白质等其他成分在不同浓度的___溶液中溶解度不同，利用这一特点选择适当的____就能使DNA 充分溶解，而使杂质沉淀，或者相反，以达到分离目的。
（NaCl 盐浓度 ） ②提纯：a ．DNA 不溶于__________，但是某些蛋白质则可溶于其中。
(酒精溶液) b ．蛋白酶能水解蛋白质，但是对_______没有影响。
(DNA) c ．大多数蛋白质不能忍受60～80 ℃的高温而发生变性，而DNA 在_____ 以上才会变性。
(80 ℃) d ．洗涤剂能够瓦解细胞膜，但对DNA 没有影响。
利用以上原理可以将DNA 与蛋白质进一步分离。
③鉴定：在沸水浴的条件下，DNA 被________染成蓝色。
(二苯胺)思考：为什么选用鸡血作实验材料？用哺乳动物的血作实验材料可以吗？【提示】 鸡血经济且易制得，鸡血红细胞、白细胞都具有细胞核，含大量DNA 。
哺乳动物的红细胞没有细胞核，DNA 含量较低，因而不宜作实验材料。
二、操作提示1．以血液为实验材料时，每100 mL 血液中需要加入3 g____________，防止血液凝固。
(柠檬酸钠) 2．加入洗涤剂后，动作要轻缓、柔和，否则容易产生大量的泡沫。
加入酒精和用______________时,动作要轻缓，以免加剧DNA 分子的断裂，导致DNA 分子不能形成絮状沉淀。
(玻璃棒搅拌) 3．二苯胺试剂要___________。
(现配现用) 【解读】 提取DNA 的方法 1．DNA 粗提取的原理分蛋白质发生盐析而生成沉淀，通过过滤可除去部分蛋白质；在NaCl 为0.14 mol/L 时，DNA 析出，过滤可除去溶解的部分蛋白质。
2．实验操作过程(1)材料的选择①首先选择含有DNA 的生物材料。
②选用DNA 含量相对较高的生物组织，成功率较大。
(2)材料的制备(以动物鸡血材料为例)(3)方法步骤 （见右）特别提醒进一步提取DNA 时，可以用冷却的体积分数为95%的酒精溶液，它主要有三个优点： ①抑制核酸水解酶的活性，防止DNA 降解；②降低分子运动，易于形成沉淀析出；③低温可以增加DNA 分子的柔韧性，减少断裂。
①沿着同一方向快速搅拌，加速血细胞破裂，释放DNA 。
②搅拌含有悬浮物的溶液时，沿着同一方向缓慢搅拌，不能直插烧杯底部，防止打碎DNA 分子。
③沿着同一方向缓慢搅拌并轻轻旋转，以利于絮状物缠绕在玻璃棒上。
(3)第一次用到蒸馏水的目的是使鸡血细胞吸水涨破，提取核DNA ；第二次用到蒸馏水的目的是稀释NaCl 溶液，使DNA 析出。
DNA 的鉴定方法实验现象不明显的原因(1)材料中核物质没有充分释放出来，如研磨不充分或蒸馏水用量不够。
(2)加入酒精后摇动或搅拌时过猛，DNA 被破坏。
(3)析出含DNA 黏稠物时，蒸馏水沿着烧杯壁加入，可能一次加入太快。
(4)实验中多次使用玻璃棒搅拌，操作不当也会影响实验结果。
1.关于DNA 在NaCl 溶液中的溶解度，下面叙述中正确的时（ D ）A.随着NaCl 溶液浓度的增大，DNA 在NaCl 溶液中的溶解度也增大B.随着NaCl 溶液浓度的减少，DNA 在NaCl 溶液中的溶解度也减少C.DNA 在NaCl 溶液中的溶解度与NaCl 溶液的浓度无关D.当NaCl 溶液的浓度为0.14mol/l 时，DNA 的溶解度最低2. 下列关于DNA 粗提取与鉴定的说法正确的是A ．氯化钠的浓度越低，对DNA 的溶解度越大B ．人血也可代替鸡血进行实验C ．柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂D ．DNA 不能溶于酒精1．原理：DNA ＋二苯胺――→沸水浴5 min 蓝色 2．步骤：第3页第4页3. 在破碎鸡血细胞时，要先加入20ml 的蒸馏水，其作用是A.DNA 溶解于水 B ． 血细胞破裂，DNA 释放 C ．稀释血液，防止凝固 D ． 有利于搅拌 4. 在DNA 的粗提取过程中，为了提取鸡血细胞中的核物质，需向鸡血细胞液中注入适量的液体，既使条件很不充分的条件下，所注液体也不能用A ．未灭菌处理的但无污染的池水B ．未长期静置的自来水C ．灭菌后的蒸馏水D ．灭菌后的生理盐水5. 在DNA 粗提取实验中，向在溶解DNA 的NaCl 溶液中，不断加入蒸馏水的目的是A ．有利于溶解DNAB ．有利于溶解杂质C ．减少DNA 的溶解度D ．减少杂质的溶解度 6. 下列关于DNA 粗提取与鉴定的说法正确的是A ．氯化钠的浓度越低，对DNA 的溶解度越大B ．人体的血液不可代替鸡血进行该实验C ．柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂D ．利用DNA 易溶于酒精的特点可除去DNA 中的部分杂质7. 下列操作中，对DNA 的提取量影响较小的是A. 使鸡血细胞在蒸馏水中充分破裂，发出DNA 等核物质B. 搅拌时，要用玻璃棒沿一个方向轻缓搅动C. 在析出DNA 粘稠物时，要缓缓加蒸馏水，直至溶液中粘稠物不再增多D. 在用酒精沉淀DNA 时，要使用冷酒精，甚至再将混合液放入冰箱中冷却8. 有关DNA 粗提取的描述中，正确的是A. NaCl 溶液的浓度越大，DNA 的溶解度越大B. DNA 易溶于酒精C. 在破裂的鸡血细胞中加入蒸馏水，可使其破裂，放出DNAD. 在破裂的鸡血细胞溶液中，加入2mol/l 的NaCl 溶液，可使DNA 大量析出9. 若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐，加入食盐的目的是 A. 利于DNA 的溶解 B. 分离DNA 和蛋白质 C. 溶解细胞膜 D. 溶解蛋白质10. 蛋白酶能将蛋白质水解而使染色质中的DNA 分离出来，下列药品可达到上述同一目的的是 A. 蒸馏水 B. NaCl 溶液 C. NaOH 溶液 D. 盐酸 11. DNA 不溶于A. NaCl 溶液B. KCl 溶液C. C 2H 5OH 溶液D. MgCl 溶液 12. 提取含杂质较少的DNA 所用的溶液是A. NaCl 溶液B. 冷却的酒精体积分数为90％的溶液C. 加热的酒精体积分数为90％的溶液D. 冷却的酒精体积分数为90％的溶液 13. 如果在除去杂质时选择方案三，为什么要将滤液放在60－75℃的恒温水浴箱中保温10－15min A. 使DNA 变性 B. 使蛋白质变性 C. 使DNA 和蛋白质变性 D. 分解蛋白质14. 在研究DNA 的基因样本前，采集来的血样需用蛋白水解酶处理，然后用有机溶剂除去蛋白质。
请问：用蛋白质水解酶处理血样的目的A. 除去血浆中的蛋白质B. 除去染色体上的蛋白质C. 除去血细胞表面的蛋白质D. 除去血细胞中的所有蛋白质，使DNA 释放，便于进一步提纯 15．本实验中有三次过滤：（1）过滤用蒸馏水稀释过的鸡血细胞液（2）过滤含粘稠物的0.14mol/LNaCl 溶液 （3）过滤溶解有DNA 的2mol/LNaCl 溶液以上三次过滤分别为了获得A ．含核物质的滤液、纱布上的粘稠物、含DNA 的滤液B ．含核物质滤液、滤液中DNA 粘稠物、含DNA 的滤液C ．含核物质的滤液、滤液中DNA 粘稠物、纱布上的DNAD ．含较纯DNA 滤液、纱布上的粘稠物、含DNA 滤液【迁移应用】1. DNA 在NaCl 溶液中溶解度有二重性，随着NaCl 溶液的变化而变化。
（1）请在下列NaCl 溶液中选出溶解度能使DNA 析出最彻底的一种（ ）和溶解度最高的一种（ ）A. 0.14mol/lB. 2mol/lC. 0.15mol/lD. 0.3mol/l（2）DNA 不溶于酒精溶液，但细胞中的某些物质却可以溶于酒精溶液，利用这一原理可以____________，可以推测溶于酒精中的物质可能有____________。
（3）利用DNA 与_____变蓝色的特性，将该物质作为鉴定______的试剂。
其实验过程要点是向放有_____的试管中加热4ml 的____。
混合均匀后，将试管置于___5min ，待试管______，观察试管中溶液颜色的变化，这个实验也说明DNA 耐___温。
2.在“DNA 的粗提取与鉴定”的实验中，将提取获得的含有DNA 的粘稠物（还含有较多杂质）分别处理如下：（1）放入0.14mol/l 的NaCl 溶液，搅拌后过滤，得滤液A 和粘稠物a （2）放入2mol/l 的NaCl 溶液，搅拌后过滤，得滤液B 和粘稠物b（3）放入冷却的95%的酒精溶液中，搅拌后过滤，得滤液C 和粘稠物c以上过程获得的滤液和粘稠物中因含DNA 少而可以放弃的是 。
3. 回答下列关于DNA 粗提取实验的问题：（1）实验中，在鸡血细胞液中加入20ml 蒸馏水的目的是__________，当过滤取得滤液后，再向溶液中加入2mol/l 的NaCl 溶液的目的是__________。
接着向NaCl 溶液中加蒸馏水的目的是__________。
（2）DNA 在NaCl 溶液中的溶解度是变化的，当丝状物不再增加时，NaCl 溶液的浓度相当于__________。
4．关于DNA 粗提取的实验材料的选择，也经过了多次实验效果的比较，最终选择鸡血做实验材料的原因是什么？请回答下列问题：（1）鸡血细胞中红细胞 ，家鸡属于鸟类，新陈代谢旺盛，因而血液中 细胞数目较多，可以提供丰富的 。
（2）实验前由老师制备血细胞液供同学们做实验材料，而不用鸡全血，主要原因是 。
（3）生活在牧区的人们，采集牛、羊和马血比较方便，若他们按实验要求完成实验步骤后，结果是 ，这是因为这些动物和人一样，成熟的红细胞中 ，但若改用动物肝脏做实验材料，实验能顺利进行。
这是因为 。
（4）若选用动物肝脏做实验材料，在提取之前，最好增加 程序，使组织细胞更易分离。
5.某生物兴趣小组开展DNA 粗提取的相关探究活动。
具体步骤如下：材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份．每份l0 g 。
剪碎后分成两组，一组置于20℃、另一组置于–20℃条件下保存24 h 。