蛹虫草固体一级菌种培养基及液体菌种培养基的制作

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蛹虫草培养基配方

蛹虫草培养基配方蛹虫草培养基配方2.4.1斜面培养基PDA培养基:去皮马铃薯200g(煮汁)、葡萄糖20g、琼脂18g、水1000mL，pH自然。

2.4.2液体种子培养基去皮马铃薯200g(煮汁)、葡萄糖20 g、MgSO4;1.0 g、KH2PO4;1.0 g、定容至1000mL，pH自然。

2.5实验方法2.5.1蛹虫草固体培养2.5.1.1固体培养基配制固体培养基为大米培养基，即每瓶分别加入40 g大米与50mL营养液，然后于压力0.12MPa、温度121℃下灭菌20min。

原营养液成分如下:葡萄糖5g/L、黄豆8g/L、奶粉5g/L、柠檬酸三铵 1.0g/L、磷酸二氢钾 1.0g/L、硫酸镁 1.0g/L、维生素B110mg/L。

2.5.1.2菌种的活化将保存的原始菌株接种到PDA培养基上，23℃暗培养7d，得到活化的菌种。

2.5.1.3制备液体菌种将活化的菌种块(lcm-1cm)接入液体培养基中，静止培养24h后置于摇床上进行悬浮培养(转速为110r/min)，在23℃的条件下暗培养6d，得到液体菌种，将液体菌种用磁力搅拌器打碎后即可用于接种。

2.5.1.4接种在无菌条件下，往每瓶大米培养基中接种15ml稀释了250倍的液体菌种。

2.5.1.5菌丝体培养将接种好的培养瓶置于温度22℃、湿度55一60%条件下暗培养6d左右，直至菌丝体长满整个培养基表面和吃透整个培养基。

2.5.1.6子实体培养将菌丝体已长好的培养瓶置于有光照的适宜环境下培养至形成原基及子实体成熟。

2.5.1.7子实体采收待子实体成熟后，进行采收并称取每瓶子实体鲜重，然后于45℃条件下烘干至恒重，称每瓶子实体干重。

蛹虫草培育详细技术全套资料

蛹虫草培育技术全套蛹虫草生产工艺流程图1、削茧：即把蚕蛹从蚕茧中剥离出来，并进行挑拣，去除死蛹和不良蛹。

2、菌种培养基：按照菌种生长配方配制液体培养基，分装在摇瓶中，灭菌备用。

3、菌种培养：在装有灭菌过的培养基的摇瓶中接种原母种，置于恒温环境中的摇床上，培养7天。

即得菌液，用于接种（4接种）。

4、接种：将上述3得到的菌液通过接种针接种到上述1得到的优良蚕蛹体内。

5、硬化：将上诉4得到的接种后的蚕蛹，置于硬化室内，在恒温（并干燥）的环境下，硬化20天，让菌丝体布满蛹体内。

6、培养：将上述5硬化后的蚕蛹，置于培养室内，在恒温（湿度较大）的环境下培养30天，让菌体充分生长。

7、阴干：将培养生长好的菌体（连同载体蛹），置于干燥的阴干房内阴干5天，待水分降至20%以下，即转为干燥。

8、干燥：将上述7得到的半干后的菌体，置于烘房内，50度烘干至水分8%以下。

9、包装：按照上市要求，分装成若干g/袋。

9、检验：按照企业标准对产品进行检验，合格即可上市。

一、卫生要求1、进入净化车间需穿戴鞋套、净化服、帽子及口罩，并将个人物品放入个人衣柜内。

2、更衣完成后需洗手消毒并穿戴一次性手套。

3、严禁将食物、饮料等易造成微生物污染的物品带入净化车间内。

4、每天下班前需整理净化车间内卫生，所有接种用具均应摆放在指定位置，及时打扫工作台及地面卫生。

5、下班时，将鞋套、一次性手套丢入更衣室垃圾桶内，净化服、帽子等放置在个人物品柜内，净化服不得带出车间。

6、车间内垃圾、废料须每天清理，垃圾归整后统一倒入楼下垃圾箱内。

二、生产操作标准1、培养基制备及灭菌所有培养基配制必须按照培养基配方所要求药品、比例配制，不得私自更改配方或药品比例。

灭菌过程必须严格按操作方法要求执行。

操作方法：（1）称量：按培养基配方比例依次准确的称取配方药品放入烧杯中。

（2）熔化：在上述烧杯中先加入少于所需要的水量，用玻璃棒搅拌均匀，然后在石棉网上加热使其溶解。

培养蛹虫草的实验报告

培养蛹虫草的实验报告材料与方法一、材料1、菌种来源：蛹A，江苏铜山县七庙真菌厂；蛹B，武汉市新宇食用菌研究所；蛹C，河南清丰；蛹D，华中农大菌种中心；蛹Sc，华南师大生科院微生物研究室。

2、培养基：(1)斜面菌种培养基：综合PDA培养基。

(2)一级液体种培养基：玉米粉S0g，蔗糖10g，蛋白陈2g，KH PO0。

5g， KHPO40。

5g， MgSO4 1g，VitB微量，pH6-7，水1000ml(3)液体振荡发酵培养基：a综合PD培养基：马铃薯200g，蔗糖20g，蛋白陈5g，KHPO4 1g，KHPO41g，MgS04 1g， VitB微量，pH6-7，水1000ml。

b番薯培养基：番薯200g，其他同a。

玉米粉培养基：玉米粉50g，其他同a。

(4)液体静止培养基：d综合PD培养基：成分同a。

e综合PD +3g琼脂。

f 综合PD+5g蚕蛹粉。

g综合PD + 5g蚕蛹粉+3g琼脂。

1。

2方法。

二、一级液体菌种培养方法及条件将培养两周、长满的斜面菌种接种于母种培养基中，25℃，140r/min，摇床振荡培养5天。

液体发酵培养方法和条件250m1三角瓶，培养基65ml，接入一级液体种7ml。

每个菌种，分别接入a、 b、c、3种培养基，每组设3个重复；在25℃，140r/min 进行振荡培养，3天后长满，测定菌丝干重和粗多糖产量。

1、2、3 菌丝干重测定。

深层培养液经3000r/min离心，去上清液后得菌丝体，置60-70℃烘箱中烘干达恒重，称重。

1、2、4粗多糖产量的测定。

深层培养液离心后的滤液，常压蒸发浓缩为 10m1-15ml 粘稠状液体，加入三倍体积的95%乙醇沉淀，4℃冰箱中静置24小时，过滤后置60-70℃烘干至恒重，称重。

结果与分析蛹虫草的液体振荡培养菌种在不同液体培养基上生长的情况在马铃薯液体培养基上，5个菌种的生长势最好，生成的菌球最多。

而在玉米粉培养基上培养的菌种的生长势最差，生成的菌粒较少或小。

人工栽培蛹虫草液体菌种发酵工艺优化

人工栽培蛹虫草液体菌种发酵工艺优化蛹虫草是一种珍贵的药材，在中医药领域有着广泛的应用价值。

人工栽培蛹虫草是一种重要的保护性栽培方式，可以有效提高蛹虫草的产量和质量。

而液体菌种发酵工艺是人工栽培蛹虫草的关键环节之一，对于提高产量和质量具有重要意义。

本文将重点介绍人工栽培蛹虫草液体菌种发酵工艺的优化方法。

一、菌种筛选在人工栽培蛹虫草的液体菌种发酵过程中，合适的菌种选用至关重要。

一般来说，选用菌株的标准应包括菌株的活力、产孢量、产生药用成分的能力等。

通过多次试验筛选，选出活力强、产孢量高、产生有效成分的菌株，用于后续的液体菌种发酵。

二、菌种激活选好菌株后，需要进行菌种的激活。

菌种激活的目的是提高菌株的活力和产孢量，使其适应液体菌种发酵的环境。

常用的激活方法有液体培养和固体培养两种。

一般情况下，液体培养法能够更好地激活菌株，产生更多的孢子。

三、发酵液配方发酵液的配方是液体菌种发酵过程中的关键环节之一。

科学合理的发酵液配方可以提高发酵效果，增加产量。

一般来说，发酵液的配方包括碳源、氮源、无机盐和辅助培养物等。

碳源可以提供能量和碳，促进菌株的生长和繁殖。

氮源可以提供菌株合成蛹虫草多糖等活性成分的原料。

在配方中添加适量的无机盐和辅助培养物，可提供菌株所需的微量元素和生长因子，促进发酵液中菌株的繁殖和代谢。

四、发酵条件发酵条件的优化是提高液体菌种发酵效果的重要措施。

在液体菌种发酵中，温度、酸碱度、氧气供给和搅拌速度等都是重要因素。

一般来说，温度应在25-28摄氏度之间，酸碱度应保持在6-7之间，氧气供给要充足，搅拌速度要适中。

还需根据菌株的生长特性和环境条件进行调整，以提高液体菌种的发酵效果。

人工栽培蛹虫草液体菌种发酵工艺优化是保证蛹虫草产量和质量的关键环节。

只有通过合理的菌种筛选、菌种激活、发酵液配方和发酵条件优化等方法，才能提高液体菌种发酵效果，获得优质的蛹虫草产品。

希望本文对相关研究和生产工作有所启示和帮助。

人工栽培蛹虫草液体菌种发酵工艺优化

人工栽培蛹虫草液体菌种发酵工艺优化
蛹虫草是一种珍贵的中草药，具有重要的药用价值。

在传统的人工栽培过程中，蛹虫
草的发酵工艺是非常关键的环节，可以影响蛹虫草的产量和质量。

为了优化蛹虫草液体菌
种的发酵工艺，提高产量和质量，本文将从菌种培养基、培养条件等几个方面进行优化。

我们需要选取适宜的菌种培养基。

蛹虫草的菌种培养基主要由碳源、氮源、微量元素
和调节剂等组成。

对于蛹虫草的菌种培养基优化，可以选择蔗糖、麦芽糖、玉米浆等为碳源；酵母提取物、玉米浆蛋白等为氮源；Na2HPO4、MgSO4·7H2O等为微量元素。

还需要添加适量的调节剂，如亚洲指南洋参甙等，以提高菌种的生长和发酵效果。

调节培养条件也是优化菌种发酵工艺的重要步骤。

菌种的培养温度和pH值都会对发酵效果产生影响。

通常情况下，适宜的培养温度为25-30℃，而适宜的pH值为5-7。

光照条
件也是需要优化的因素之一。

适度的光照可以促进菌种的生长和发酵，但过强的光照会对
菌种的生理代谢产生不利影响。

需要合理控制光照条件，以提高菌种的产量和质量。

发酵时间也是优化菌种发酵工艺的关键因素之一。

蛹虫草的发酵时间一般在15-20天
左右。

在发酵过程中，需要定期检测菌种的生长情况和代谢产物的积累情况，以确定最佳
的发酵时间。

还可以通过添加适量的促进剂，如麦芽糖、酵母提取物等，来加速发酵过程，提高菌种的产量。

如何制作蛹虫草菌种

如何制作蛹虫草菌种
蛹虫草或蛹草，是菌结合的药用真菌。

很多人都误以为蛹虫草就是冬虫夏草，其实不然，两者有本质的区别，冬虫夏草是极为珍惜的野生中药材（冬虫夏草尚不能人工培育）。

今天就简要的跟大家分享一下蛹虫草菌种是如何制作的呢？
1、获取种源适应性强、出草率高的种源，是北虫草栽培成功的关键条件之一，除有条件自行分离、培育外，大部分生产者需通过引种渠道获得。

建议生产户应去矾有科研实力、具备试验条件、严谨、诚实、正规的单位引种，“好种山好苗”，以保证生产效果，
2、菌种转管配方：葡萄糖10克，蛋白胨10克，酵母膏2克，天门冬酰胺1克，磷酸二氢钾1.5克，硫酸镁0.6克，生长素5毫升，琼脂15-20克，水1000毫升，pH值6。

常规灭菌等操作，使用已备种源接种，一般每支种源可转接30支左右，具体过程不予赘述。

23-25°C条件下培养，经约10天左右，菌丝长满斜面，即为一级母种或二级母种；如种源是白行分离培养的F0级，则该次转接后的菌种为F1级，即一级母种还可继续进行再次转扩生产F2级，即二级母种；若种源是购买的F1级，则该次转接后的菌种为F2级，即二级母种。

二级母种只可用于栽培生产，不得再行继续转扩，否则，将导致“出草”稀少、稀疏、甚至根本不能“出草”的严重后果。

3、液体菌种生产有一次生产量大、生产周期短、易于人工控制：栽培接种后发菌快、菌丝立体式占领料面等诸多优势，已成为北虫草栽培用种的首选方式。

4、菌种的选择：选用菌丝洁白、适应性强、见光后转色、出草快、性状稳定的速生高产优质菌种，是栽培成功和高效的关键。

初学者应选购菌种量多的固体原种，有栽培经验者可购买斜面试管种或液体菌种。

一级菌种培养基制作的工艺流程

一级菌种培养基制作的工艺流程一级菌种是用于生产药品、食品、化工产品等的基础菌种，它的质量和稳定性直接影响着最终产品的质量和产量。

因此，一级菌种的培养基制作工艺流程确保了菌种的质量，并保障了产业的发展。

1.原料准备制作培养基的原材料通常包括蔗糖、酵母提取物、胰酵母、牛肉精粉、氯化钠、磷酸二氢钾、硫酸镁等。

这些原材料必须高纯度、优质、无菌，与规定的比例混合。

2.混合将所有原料按照一定比例混合，混合前需经过物理和化学处理，杀灭其中任何潜在的菌群。

3.调节pH值通过加入碱、酸等调节剂来使培养基的pH值达到特定的范围，一般是7.0-7.2，这是大多数一级菌种生长的最适pH范围。

4.蒸馏水加入培养基将高压蒸馏水加入培养基中，这是培养基中的水分来源，也是细菌生长的基础。

加水过程中要保证水质高纯，无菌。

5.混合均匀通过搅拌等手段将培养基混合均匀，保证培养基里的各种成分分布均匀，有利于菌种生长。

6.分装与灭菌将混合均匀的培养基分装到不同规格的瓶子或罐子里，然后经过灭菌处理。

灭菌的方法有各种不同的方法，如高压蒸汽灭菌、紫外线灭菌等，目的是杀灭培养基中残存的任何微生物污染。

以上就是一级菌种培养基制作的主要步骤。

在实际操作中，考虑到一级菌种在培养基上的生长情况，还需要针对不同的菌种做出一些微调。

对于色素生产菌，例如Streptomyces spp.，常常需要在培养基中添加一些特殊的营养成分，如L-苯丙氨酸、L-亮氨酸等营养物质，以促进菌种的生长和色素的产生。

对于乳酸菌等抗性菌种，需要在培养基中加入一些过氧化氢、吡啶三羧酸等化学物质来控制细菌的生长。

总之，一级菌种的培养基制作需要严格按照配方比例、工艺要求进行，以确保培养基的质量，从而保证菌种的质量。

人工种植虫草食用菌资料

一、固体试管培养基制作：（一）固体培养基制作1、配方原材料及比例：葡萄糖：20克琼脂粉：20克蛋白胨：3—5克磷酸二氢钾：0.5克维生素B1：1片水：1000毫升2、固体培养基制作工艺流程：（1）把所有化学试剂按比例提取放入瓶中，用脱脂棉封住瓶口，放入高压锅中进行加热灭菌。

当加热到110℃时，打开气阀门，观察压力表指针归零（0MPa）后，关闭放气阀门。

再次加热至125℃时持续加热40分钟后，再关掉电源让其自行冷却120分钟后，取出瓶子分装到试管中。

（装入试管1/5即可，用脱脂棉把试管口塞紧进行灭菌。

）（2）将分装好的试管（7支一捆用橡皮筋扎好）放入高压锅中用干毛巾盖在试管上进行灭菌，操作方法同上：（3）斜面制作：在试管培养基没有冷却凝固前，将试管口向上倾斜放在木条上，试管内的液体自然形成倾状，切勿让液体与棉花接触。

完全冷却后固体试管培养基制作完毕。

（二）原始母种（转管与扩管）注：将原始母种转管扩大成母种（需在接种箱内完成）：1、将接种箱内，使用甲醛10（毫升）高锰酸钾6（克）进行进行彻底消毒，时间为20分钟。

2、点燃酒精灯，对工具进行消毒同时利用火焰周围无菌区接种，避免杂菌感染。

3、转管接种操作：将原始母种与待转固体培养基试管进行转管。

（原始母种用量为一粒米大小）4、接种完毕后放入暗室（没有光线的培育室），18℃—24℃保温培养7—8天后，即可做为菌种保存，也可直接用来生产栽培种。

（三）液体菌种的制作1、配方原材料及用量：葡萄糖：30克蛋白胨：20克磷酸二氢钾：1克维生素B1：2片硫酸镁：0.5克水：1000毫升2、液体菌种制作工艺流程：（1）将原材料和水搅拌均匀混合在一起，装瓶用脱脂棉封口。

将封好的瓶子放入高压锅中进行灭菌，灭菌方法同上：（2）从高压锅中取出冷却后即可开始接种，将母种在无菌的环境下（消毒后的接种箱内进行）接种到瓶中（母种用量为试管的1/10）。

（3）接种后放入暗室中（没有光线的培育室），每天分早中晚将菌种瓶进行摇晃在摇晃过程中避免瓶中的液体与封口膜接触7—8天后瓶中长满白色菌丝，即可作为菌种使用。

蛹虫草液体菌种培养基及其菌种培养方法[发明专利]

专利名称：蛹虫草液体菌种培养基及其菌种培养方法专利类型：发明专利
发明人：龙新,徐宁,郑婷
申请号：CN201911168112.7
申请日：20191125
公开号：CN112831420A
公开日：
20210525
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：本发明提供一种蛹虫草液体菌种培养基，以重量份数计，包括以下原料：土豆2‑3份，小麦0.1‑0.2份，葡萄糖0.1‑0.3份，磷酸二氢钾0.05‑0.15份，蛋白胨0.3‑0.5份，蚕蛹粉0.5‑1.0份，自来水10份。

该方法得到的蛹虫草液体菌种培育发菌速度快，活力强，出草率高，菌种退化率低，能够规避培育风险。

申请人：湖南金芙农业科技有限公司
地址：421200 湖南省衡阳市衡阳县西渡镇蒸阳大道359号(衡阳市现代农业示范园内)
国籍：CN
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一种蛹虫草液体菌种的制备方法[发明专利]

专利名称：一种蛹虫草液体菌种的制备方法专利类型：发明专利
发明人：金梅,彭兴南,郑大斌
申请号：CN201210425277.X
申请日：20121031
公开号：CN102893809A
公开日：
20130130
专利内容由知识产权出版社提供
摘要：一种蛹虫草液体菌种的制备方法，具体步骤为：将蛹虫草液体种培养基装入玻璃瓶中，每瓶装入的液量占瓶总容积30-50%，封口灭菌，冷却后在无菌条件下接入蛹虫草斜面菌种，21±2℃下先静置24-36小时再人工间歇摇瓶培养5-10天，待静置2小时以上观察絮状菌丝自然堆积体占整个液体体积一半以上时，经剔除检验不合格的样品即得到蛹虫草液体菌种可直接用于蛹虫草栽培。

本发明提供的方法不需要传统方法中所用的摇床等设备，液体种配制成份不需添加消泡剂，液体种使用前菌丝无需打碎，无需稀释；并且提供了一种实用的液体菌种简易检测方法以及接种后有效降低污染率的暗光培养条件；本发明设施简易，操作方便易于普及推广。

申请人：长阳金梅生物科技有限公司
地址：443500 湖北省宜昌市长阳土家族自治县龙舟坪镇东风岭小区68号
国籍：CN
代理机构：宜昌市三峡专利事务所
代理人：成钢
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