新鲜蔬菜中β-胡萝卜素的提取、分离、测定
胡萝卜素的提取.
β－胡萝卜素的提取分离研究β－胡萝卜素的提取摘要：β－胡萝卜素是安全的、无毒的天然色素，在生物食品等领域均有展应用。
β－胡萝卜素的提取工艺众多，工艺各有特点。
简要介绍了溶剂提取法提取胡萝卜素，柱色谱分离β－胡萝卜素，薄层色谱法检验分离效果的方法。
学习柱色谱法、薄层色谱法的原理及其方法。
掌握从胡萝卜中分离提纯β－胡萝卜素的原理和方法。
学会用色谱法从胡萝卜中提取胡萝卜素并鉴定之。
关键词：β－胡萝卜素提取分离引言：胡萝卜是传统蔬菜和食用天然胡萝卜素的重要来源。
β－胡萝卜素是500多种类胡萝卜素的一种。
是橘黄色脂溶性化合物，它是一种重要的食用天然色素和营养强化剂，易溶于许多有机溶剂，如：乙酸乙酯、氯仿。
几乎不溶于丙二醇、甘油、酸和碱‘不溶于水。
β－胡萝卜素是一种非常安全的、无任何毒副作用的营养元素，具有解毒作用。
是维护人体健康不可缺少的营养素。
在抗癌、预防心血管疾病、白内障及抗氧化方面有显著的功能，可预防因老化引起的多种退化性疾病。
另外，β－胡萝卜素在食品工业中的应用也日益广泛。
胡萝卜中含有丰富的胡萝卜素，是β－胡萝卜素含量最高的蔬菜之一。
本文以胡萝卜为原料，采用色谱分离的方法研究了胡萝卜素的提取。
正文1.1胡萝卜中的成分每100克胡萝卜中，约含蛋白质0.6克，脂肪0.3克，糖7.6～8.3克，铁0.6毫克，维生素A（胡萝卜素）1.35～17.25毫克，维生素B1 0.02～0.04毫克，维生素B2 0.04～0.05毫克，维生素C12毫克，热量150.7千焦，另含果胶、淀粉、无机盐和多种氨基酸。
各类品种中尤以深橘红色胡萝卜素含量最高，各种胡萝卜所含能量在79.5千焦～1339.8千焦之间。
胡萝卜是一种质脆味美、营养丰富的家常蔬菜，素有“小人参”之称。
胡萝卜富含糖类、脂肪、挥发油、胡萝卜素、维生素A、维生素B1、维生素B2、花青素、钙、铁等人体所需的营养成分。
1.2 β－胡萝卜素的性质分子式，其分子式为 C40H56，紫红或暗红色的结晶性粉末。
高效液相色谱法测定15种蔬菜中的胡萝卜素
2、重复性和精密度
此外，该方法具有较好的重复性和精密度，能够满足实际测定的要求。通过 本研究的开展，为准确评估蔬菜的营养价值提供了科学依据。
谢谢观看
2、样品中胡萝卜素的测定结果
表1 15种蔬菜中胡萝卜素的含量（mg/100g）
3、样品中水分含量的测定结果
3、样品中水分含量的测定结果
采用烘干法测定了15种蔬菜中的水分含量，结果如表2所示。由表可知，不同 蔬菜中的水分含量也存在显著差异。其中，生菜和芹菜中的水分含量较高，分别 为94.7%和92.5%；红薯和土豆中的水分含量较低，分别为79.3%和78.6%。其他 蔬菜中的水分含量介于上述两者之间。
采用高效液相色谱法测定蔬菜中类胡萝卜素，需对方法进行重复性和精密度 评估。实验结果表明，该方法的重复性和精密度均较好，能够满足实际测定的要 求。
2、重复性和精密度
结论 本次演示介绍了高效液相色谱法测定蔬菜中类胡萝卜素的方法及注意事项。 该方法具有分离效果好、分析速度快、灵敏度高等优点，能够准确测定蔬菜中类 胡萝卜素的含量。通过对不同种类蔬菜中类胡萝卜素含量的测定，发现叶菜类蔬 菜中类胡萝卜素含量较高，而根茎类蔬菜中类胡萝卜素含量较低。
2、实验方法
（2）色谱条件：采用高效液相色谱仪进行分离分析，色谱柱为C18柱（5μm， 4.6mm×250mm），流动相为甲醇-丙酮（1:1），流速为1ml/min，检测波长为 450nm，柱温为30℃。
2、实验方法
（3）标准曲线绘制：精确称取适量胡萝卜素标准品，用甲醇-丙酮（1:1）混 合溶剂配制成不同浓度的标准溶液。分别进样分析，以峰面积（A）对胡萝卜素 浓度（C）绘制标准曲线。
3、高效液相色谱法测定类胡萝 卜素
3、高效液相色谱法测定类胡萝卜素
《从番茄中提取番茄红素和β-胡萝卜素》实验综述报告
０ ２ ６ Ｏ ，６ —８
作 为萃取剂 。因为 Ｃ Ｈ ： Ｃ ｌ ： 不 与水 混溶 ， 所 以必须先除去样品中的水 分 才能有效地从组织 中萃取胡萝 卜 素来 。 故在此之前先用 ９ ５ ％的乙 醇 把番茄组织 中的水 分除去 。根据番茄 红素与 Ｂ一胡 萝 卜 素极性
的差别 ， 用柱层析可 以将它们分离 。分离 效果可 以用薄层层析进行
检验 。 ４ 实 验 步 骤
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番茄红素 Ｒ，
Ｂ 一 胡萝 卜 素
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２ ～ｇ —６ ７
６ 注意事项 ４ ． １ 仪器及药 品 ６ ． １ Ｂ一胡萝 卜 素对光及 氧非常敏感 ， 对酸 、 碱也敏感 ， 重金 属 始 回流装置 、 旋转蒸 发仪 、 分 液漏斗 、 层析柱 、 层析缸 、 圆底烧瓶 、 离子特别是铁离子也可使其颜色消失。 抽 滤装 置 、 柱色谱 、 玻璃 棒 、 破碎 机 、 番 茄（ 市售 ） ９ ５ ％乙醇 、 二氯 甲 ６ ． ２番茄红素 的耐光 、 耐氧化性也很差。实验 时要特别注意。 烷、 中性 Ａ ｌ ２ （ ） ， 、 环 己烷 、 石油醚（ ６ ０ — ９ ０ ＇ ： Ｃ） 、 硅胶板 。 ７ 思 考 题 ４ ． ２ 步 骤 ７ ． １一般每公斤新鲜成熟 的番茄含 Ｏ ． ０ ２克番茄红 素 ， 试分析 可 ４ ． ２ ． １ 提 取 能导致提取率降低 的原因。 新鲜番茄洗净 ， 称取 ３ ０克 ， 用破碎机破碎 ， 放人 ５ ０毫升 圆底烧 ７ ． ２柱色谱分离 Ｂ一胡萝 卜 素和番茄红素 时若分离效果不好可 瓶 中， 加入 ｌ ５毫升 ９ ５ ％乙醇 ， 摇匀 ， 装上 回流冷凝管 。 在水浴 上加热 能 的原 因有哪些？ 回流 １ ０ 分 钟趁热抽滤 （ 只把溶液倒 出 ， 残渣 留在瓶 中） 。再加入 １ ０ 参考文献 毫升二氯 甲烷 ， 在水浴上 回流 ５ 分 钟。冷却 ， 将上层溶 液倾 出抽滤 ， ［ １ 】 王清廉， 沈风 嘉． 有机 化学实验【 Ｍ】 ． 北京 ： 高等教育 出版社， １ ９ ９ ２ ． 固体仍 留在烧瓶 中， 再加 １ Ｏ毫升二氯 甲烷重复萃取一次 。 合并 乙醇 ［ ２ 】 阚健全 ． 食 品化 学［ Ｍ 】 ． 北京 ： 中国农业大学出版社， ２ ０ ０ ８ ． 和二氯 甲烷 的提取液 ，倾 人 １ ２ ５毫升分 液漏斗 中 ，加几 毫升饱和 ［ ３ ］ ｚ艺旋， 杨志伟等． 番茄红素提取的研 究进展［ Ｊ 】 ． 安徽 化工， ２ ０ １ ６ ， ０ ６ ： ８ －２ ０． Ｎ ａ Ｃ １ 溶液， 振摇 ， 静置分层 。将分 出的二 氯 甲烷溶液 置于旋转蒸发 】 仪上 ， 旋 蒸 至 仅 有 少 量 的粘 稠 状 物 质 ， 盖上盖子待用 。 ４ ． ２ ． ２柱色谱分离 Ｂ一胡 萝 卜 素和番茄红素 称取 １ ０克 中Ｊ 胜氧化铝 ， 置 于烧 杯中 ， 加人 １ Ｏ毫升石油 醚， 搅拌 均匀成浆状 。将 它从 色谱柱顶加入 ， 此 时柱 中应 先加入 ７毫升石油 醚 。打开活塞 ， 让液体流人接收瓶 中。继续将 料注人柱 中 ， 直到得到 １ ５厘米 高的氧化铝柱 。在这 过程 中 ， 应轻 轻 叩击柱子 ， 并要 以稳 定 的速率装柱 ， 使柱装 得均匀。 装好的柱不能有 裂缝 和气泡 ， 否则影响 分离效果 。在装 好的氧化铝柱表 面放 上 ０ ． ５ 厘 米厚 的棉花 ， 然后放 走过剩的溶剂 ， 直至溶剂 面刚刚达 到棉花顶部上 面， 关闭活塞 。 将粗制的类胡萝 卜 素溶于 １ —２毫升石油醚 中，用滴管加人柱 顶。 并 留下几滴供 以后 的薄层色谱用 ， 打开活塞 。 让有色物质 流到 柱上 。当柱顶 刚变 干时 即关 闭活塞 。用滴管沿柱的四壁加人几毫升
胡萝卜素和番茄红素的提取分离和测定
β—胡萝卜素和番茄红素的提取分离与测定一，实验目的1、学习柱色谱法、薄层色谱法的原理及其方法。
2、掌握从胡萝卜或番茄中分离提纯胡萝卜素和番茄红素的原理和方法。
3、学会用色谱法从胡萝卜或番茄中提取胡萝卜素和番茄红素并鉴定之。
4、初步了解胡萝卜素和番茄红素的来源以及生产方法。
二，实验原理：胡萝卜素是最早发现的一个多烯色素。
后来，又发现了许多在结构上与胡萝卜素类似的色素，于是就把这类物质叫做胡萝卜色素类化合物，或者叫做类胡萝卜素。
这类化合物大都难溶于水，易溶于弱极性或非极性的有机溶剂，因此又把这类物质叫做脂溶性色素。
番茄红素是胡萝卜素的开链异物体。
番茄红素在成熟的红色植物果实如番茄、西瓜、胡萝卜、草莓、柑桔等中含量最高，其中含量最多的是番茄。
β-胡萝卜素和番茄红素的分子式均为C40H56，分子量为536.85，β-胡萝卜素的熔点184℃，番茄红素的熔点174℃。
β-胡萝卜素和番茄红素是不饱和碳氢化合物，难溶于甲醇、乙醇，可溶于乙醚、石油醚、正已烷、丙酮，易溶于氯仿、二硫化碳、苯等有机溶剂。
根据β-胡萝卜素和番茄红素的上述性质，故可利用石油醚、乙酸乙酯等弱极性溶剂将它们从植物材料中浸提出来。
然后，根据它们对吸附剂吸附能力的差异，用柱色谱进行分离，用薄层色谱检测分离效果。
并根据它们在可见光区有强烈吸收的性质，用紫外-可见分光光度法进行测定，β-胡萝卜素的最大吸收峰为451nm，番茄红素的最大吸收峰为472nm。
1、柱色谱法柱色谱（柱上层析）常用的有吸附柱色谱和分配柱色谱两类。
前者常用氧化铝、硅胶作固定相。
在分配柱色谱中以硅胶、硅藻土和纤维素作为支持剂，以吸收大量的液体作固定相，而支持剂本身不起分离作用。
吸附柱色谱通常在玻璃管中填入表面积很大，经过活化的多孔性或粉状固体吸附剂。
当待分离混合物溶液流过吸附柱时，各种成分同时被吸附在柱的上端。
当洗脱剂流下时，由于不同化合物吸附能力不同，往下洗脱的速度也不同，于是形成不同层次，即溶质在柱中自上而下按对吸附剂亲和力大小分别形成若干色带，再用溶剂洗脱时，已经分开的溶质可以从柱上分别洗出收集；或者将柱吸干，挤出后按色带分割开，再用溶剂将各色带中的溶质萃取出来。
蔬菜中天然色素的提取分离和测定
蔬菜中天然色素的提取、分离和测定一、目的与要求1．进一步熟悉和掌握薄层色谱的原理。
2．掌握薄层层析法分离微量组分的操作技术。
3．了解蔬菜中主要色素的基本性质，通过色素的提取和分离，了解天然物质分离提纯方法及原理。
二、基本原理（一）菠菜中的色素简介菠菜叶中富含多种色素成分，如叶绿素（绿色）、胡萝卜素（橙黄色）和叶黄素（黄色）等多种天然色素。
叶绿素存在两种结构相似的形式即叶绿素a(C 55H 72O 5N 4Mg) 和叶绿素b(C 55H 7O 6N 4Mg)，结构见图1。
二者差别仅是 a 中一个甲基被 b 中的甲酰基所取代。
它们都是吡咯衍生物与金属镁的络合物，是植物进行光合作用所必需的催化剂。
NN N N H 3C CHCH 2R CH 2CH 3CH 3H 3C O CO 2CH 3CH 2CH 2O O CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3Mg图1 叶绿素a 和叶绿素b 的结构（叶绿素a ：R=CH 3， 叶绿素b ：R=CHO ）H 3C CH 3R CH 3H 3C R H 3C CH 3CH 3CH 3CH 3CH 3图2 β-胡萝卜素和叶黄素的结构（β-胡萝卜素：R =H ，叶黄素：R = OH ）胡萝卜素（C 40H 56，见图2）是具有长链结构的共轭多烯。
它有三种异构体，即 α-, β - 和γ - 胡萝卜素，其中β - 异构体含量最多，也最重要。
在生物体内，β - 体受酶催化氧化即形成维生素 A 。
目前β - 胡萝卜素已可进行工业生产，可作为维生素 A 使用，也可作为食品工业中的色素。
叶黄素（C 40H 56O 2，见图2）是胡萝卜素的羟基衍生物，它在绿叶中的含量通常是胡萝卜素的两倍。
与β - 胡萝卜素相比，叶黄素较易溶于醇而在石油醚中溶解度较小。
根据这些色素在有机溶剂中的溶解性,可将它们提取出来。
1．菠菜中各色素的理化性质绿色植物中的叶绿体色素在把光能转变为化学能的光和作用中起着重要作用。
β―胡萝卜素和番茄红素提取分离与测定
β―胡萝卜素和番茄红素提取分离与测定β—胡萝卜素和番茄红素提取分离与测定一、实验目的1、学习从天然产物中提取有机化合物的方法。
2、学习用薄层层析法检验有机化合物的基本原理，点样，展开和计算Rf 值的方法。
二．仪器和试剂仪器三角瓶（50ml）、分液漏斗（150ml）、蒸馏瓶（50ml）、普通蒸馏装置（或减压蒸馏装置）、漏斗、色谱柱、硅胶薄层板、量筒、烧杯、层析缸。
试剂胡萝卜、丙酮、石油醚（bp30~60℃）、硅胶（层析用，200~300目）、无水硫酸钠、石油醚（bp60~90℃）、丙酮：石油醚（1：9）（V/V）。
三．实验方案1、含类胡萝卜素石油醚溶液的制备将新鲜胡萝卜洗净、擦干,切去尾部，切碎。
称取碎鲜胡萝卜【1】10g于小研钵中,研碎。
碎胡萝卜移至50mL三角烧瓶中，每次用丙酮10mL萃取2次，再用石油醚（bp30~60℃）萃取固体两次，每次10mL。
把石油醚溶液加到丙酮液中。
在分液漏斗中将混合液与50mL饱和氯化钠溶液【2】振荡，分去下层，用蒸馏水洗涤上层液两次，每次50mL，分去水，用无水硫酸钠干燥石油醚液（约1h）,把混合液倒入50mL圆底烧瓶中，热水浴加热蒸馏，除去溶剂，得固体。
在制得的固体物加入3mL石油醚（bp60~90℃）拌硅胶1g，在通风橱内抽干，得黄色硅胶颗粒，待上柱。
2、装柱和分离取20cm*1cm色谱柱一根，垂直装置，以50ml三角烧瓶作洗脱液的接受器。
用镊子取少许脱脂棉【3】放于干净的色谱柱底部，轻轻塞紧，再在脱脂绵上盖一层厚0."5cm的海石砂（或用一张比柱内径略小的滤纸代替），关闭活塞，向柱内倒入石油醚（bp60－90℃）至约为柱高的3／4处，打开活塞，控制流出速度为1滴/s。
通过一干燥的玻璃漏斗慢慢加入层析硅胶。
用洗耳球轻轻敲打柱身，使填装紧密。
当装填到3/4时，再在上面加一层0."5cm厚的海石砂，操作时一直保持上述流速，注意不能使液面低于砂子的上层。
胡萝卜素分离及提取
实验步骤
称取10g新鲜胡萝卜，捣碎，置于50mL的三角烧瓶中， 重复萃取2次，每次用10mL.丙 酮。最后用石油醚萃取固体2次，每次用10mL。把石油醚溶液加到丙酮溶液里面中。在分 液漏斗中将混合物与50mL饱和氯化钠溶液振荡，分出有机层，用蒸馏水洗涤2次，每次 50mL，分去水，用无水硫酸钠干燥石油醚溶液（约1小时），再加入3mL石油醚、硅胶1g， 在通风橱抽干溶剂，得黄色硅胶颗粒，待上柱。 装柱，用石油醚作洗脱剂，待黄色组分绝大部分洗出后，把洗脱液换成10％丙酮和 90％石油醚混合液进行洗脱，控制洗速1滴/s。收集好3份洗出液，对各段洗出液进行薄层 色谱分析。
胡萝卜中色素的分，其胡萝卜素含量丰富，有α和γ 等几种异构体，其中β型占主要成分。β—胡萝卜素难溶于水，易溶 于极性或非极性的有机溶剂。 分子式：
实验方法
1.制备 ①萃取 浓缩法 ②柱层析法 2.鉴定 薄层色谱法
实验仪器及药品
仪器：锥形瓶，色谱柱，烧杯，玻璃棒 药品：胡萝卜，丙酮，硅胶，石油醚，无水硫酸钠
实验步骤：
1.取10g新鲜胡萝卜· ，捣碎、烘干
2.将胡萝卜粉末与50ml石油醚装入圆底烧瓶中，加热回
流30min
3.过滤，将滤液装入圆底烧瓶中，组装蒸馏装置，浓缩
4.放入通风橱使溶剂挥发完全，得到产品 5.将步骤3中滤液取少量做薄层色谱检测
实验装置
回流
过滤
蒸馏
β-胡萝卜素和番茄红素的分离提取和鉴定
β-胡萝卜素和番茄红素的分离提取和鉴定β-胡萝卜素和番茄红素的提取分离与测定一、实验目的1.掌握从胡萝卜或番茄中提取分离β-胡萝卜素和番茄红素的原理与方法；2.巩固用柱色谱和薄层色谱分离、检测有机化合物的实验技术；3.学会用分光光度法测定β-胡萝卜素和番茄红素的方法。
二、胡萝卜素和番茄红素的主要理化性质三、实验原理β-胡萝卜素和番茄红素是脂溶性的不饱和碳氢化合物，难溶于甲醇、乙醇，可溶于乙醚、石油醚、正已烷、丙酮，易溶于氯仿、二硫化碳、苯等有机溶剂。
可利用石油醚、乙酸乙酯等弱极性溶剂将它们从植物材料中浸提出来。
然后，根据它们对吸附剂吸附能力的差异，用柱色谱进行分离，用薄层色谱检测分离效果。
四、初步设计实验方案1.类胡萝卜素的提取①称取20g新鲜番茄果肉，捣碎，置于50 mL三角瓶中，再加入5g食盐，用玻棒搅拌，使食盐与番茄果肉充分混合均匀，放置一定时间，便会看到果肉组织中水分大量渗出。
脱水时间持续15~30 min。
随后将脱除下来的水分滤入150 mL分液漏斗中。
②向经过食盐脱水的番茄果肉加入10 mL丙酮，用玻棒搅拌，并静置5~10 min。
然后将丙酮提取液也滤入分液漏斗中。
③向经过丙酮处理的番茄果肉加入10 mL乙酸乙酯浸提5 min。
浸提过程中应不时振摇三角瓶，使番茄果肉与溶剂充分接触；若室温过低，可将三角瓶置于温水浴中温热，但应注意不能使浸提溶剂明显挥发损失。
5 min后将提取液也滤入分液漏斗中，并用玻棒轻压残渣尽量使溶剂流尽。
再用乙酸乙酯重复提取2次，每次10 mL，合并提取液至分液漏斗中。
④充分振摇分液漏斗中的混合溶液，静置，完全分层后，分去水层，有机层（酯层）再用蒸馏水洗2次，每次8-10 mL，弃去水层。
酯层自分液漏斗上口倒入干燥的小三角瓶中，加入适量无水硫酸镁（或无水硫酸钠）干燥15 min（注意：应避光）。
⑤干燥后的酯层滤入50 mL干燥的蒸馏瓶中，水浴加热，小心蒸馏（最好减压蒸馏）浓缩至1-2 mL。
新鲜蔬菜中β-胡萝卜素的提取、分离和测定
新鲜蔬菜中β-胡萝卜素的提取、分离和测定β-胡萝卜素是一种具有重要营养和生理功能的天然营养素，在新鲜蔬菜中含量较高。
因此，对β-胡萝卜素的提取、分离和测定具有重要的研究价值和实际意义。
β-胡萝卜素是一种脂溶性化合物，因此其提取需要利用适当的溶剂。
下面介绍三种常用的提取方法：1.乙醇提取法将新鲜蔬菜切碎，并用95%乙醇浸泡，浸泡时间通常为30分钟至1小时。
然后，通过离心或过滤将溶液中的固体物质去除，使溶液清澈透明。
最后，使用氮气吹干溶液，得到β-胡萝卜素提取物。
2.超声波辅助提取法3.超临界流体萃取法超临界流体萃取法是利用超临界二氧化碳作为萃取溶剂，对物质进行分离和提取。
将新鲜蔬菜切碎，加入适量的超临界CO2，进行高压超临界萃取处理，将β-胡萝卜素萃取出来。
优点是温和无毒，不会对营养素产生影响，但设备成本较高。
在上述提取方法得到的β-胡萝卜素提取物中，还可能存在其他有机物、杂质等。
因此，需要采用适当的分离方法进行分离和纯化。
1.硅胶柱层析法硅胶柱层析法是一种常用的纯化方法。
将提取物加入到预处理的硅胶柱或凝胶柱中，根据样品成分的极性大小，采用不同的洗脱剂进行洗脱和分离，最终得到高纯度的β-胡萝卜素。
2.薄层色谱法薄层色谱法是一种高效、简便的分离方法。
将提取物涂布在预处理好的薄层板上，然后将其置于含有适量洗脱剂的仪器中，逐渐进行洗脱和分离，最终通过紫外光谱法等方法确定纯度。
β-胡萝卜素的测定可以通过高效液相色谱法、紫外光谱法、荧光法等方法进行。
1.高效液相色谱法高效液相色谱法是一种准确、快速、高分辨率的测定方法。
利用高效液相色谱仪，将样品中提取的β-胡萝卜素与标准溶液进行比较，通过色谱图谱进行分析，测定样品中β-胡萝卜素的含量。
2.紫外光谱法紫外光谱法是一种常用的定性和定量分析方法。
将提取物溶液置于紫外分光光度计中，通过比较不同波长下的吸收曲线，可以测定出样品中β-胡萝卜素的含量。
3.荧光法综上所述，对于新鲜蔬菜中β-胡萝卜素的提取、分离和测定，需根据实际情况选择适当的方法。
β-胡萝卜素检测
β-胡萝卜素检测
胡萝卜素属于类胡萝卜素的一种，是广泛存在于蔬菜、水果等植物中的一种天然色素，根据双键数的不同，可分为α-胡萝卜素、β-胡萝卜素和γ-胡萝卜素三类。
其中，β-胡萝卜素是最重要的组分。
β-胡萝卜素在植物中的含量丰富，而且性质稳定，还可作为食品添加剂。
迪信泰检测平台采用高效液相色谱(HPLC)方法，使用Agilent或者Waters高效液相色谱仪，配备DAD检测器或ELSD检测器，可检测各类样品中β-胡萝卜素含量变化。
此外，我们还提供其他色素检测服务，以满足您的不同需求。
送样要求和检测周期。
HPLC测定β-胡萝卜素样本要求：
1. 请确保样本量大于0.2g或者0.2mL。
周期：2~3周。
项目报告。
项目结束后迪信泰检测平台将会提供详细中英文双语技术报告，报告包括：
1. 实验步骤（中英文）。
2. 相关质谱参数（中英文）。
3. 质谱图片。
4. 原始数据。
5. β-胡萝卜素含量信息。
迪信泰检测平台可根据需求定制其他物质测定方案，具体可免费咨询技术支持。
胡萝卜素作用，提取，测定方法等汇总
胡萝卜素作用，提取，测定方法等汇总胡萝卜素的作用1、防止皮肤干燥，粗糙.2、有效促进健康及细胞发育，预防先天不足.3、有助于提高人体免疫力，预防感冒.4、促进骨骼及牙齿健康成长.5、改善生殖功能.6、有助于良好的视觉功能.7、预防胃、食道、肺、赶等癌症，预防心血管疾病和脑淤血.胡萝卜素的提取溶剂：应选择使用水不溶性有机溶剂，如石油醚。
1、实验步骤：①原料加工：取500g新鲜胡萝卜，清水清洗，沥干、粉碎、烘干。
②原料装填：将胡萝卜粉与200mL石油醚装入蒸馏瓶。
③加热萃取：安装萃取回流装置，沸水浴加热萃取30min。
④过滤：将萃取物过滤，除去固体物，得到萃取液。
⑤浓缩：安装水蒸气蒸馏装置，加热萃取液，萃取剂挥发，得到胡萝卜素。
*注意事项：烘干胡萝卜时，温度过高、时间过长，胡萝卜素会分解。
2、胡萝卜素的纸层析鉴定：①制备滤纸条：取18 30cm滤纸条，于距底端2cm处划基线，取ABCD四个点。
②点样：用最细，以石油醚为展开剂进行纸层析，胡萝卜素极性最小，移动速度最快，从而与其他色素分离，剪下含胡萝卜素的区带，洗脱后于450nm波长下定量测定。
2.适用范围参照GB12389-90。
本方法适用于植物性食物和含有植物性食物的混合食物中胡萝卜素的测定，其最小检出限为0.11 g。
3.仪器和设备(1) 实验室常用设备。
(2) 玻璃层析缸。
(3) 分光光度计。
(4) 旋转蒸发器：具150ml球形瓶。
(5) 恒温用石油醚准确稀释，使每毫升溶液相当50 g，避光保存于冰箱中。
5.操作步骤5.1样品的采集和处理(1) 粮食：样品用水洗三次，置60℃烤箱中拷干，磨粉，储于塑料瓶中，放一小包樟脑精，盖紧瓶塞保存，备用。
(2) 蔬菜与其他植物性食物：取可食部用水冲洗三次后，用纱布吸去水滴，切碎，用匀浆器制成匀浆，贮于塑料瓶中，冰箱内保存备用。
5.2测定步骤(以下步骤需在避光条件下进行)(1)样品提取：取适量样品，相当于原样1～5g(含胡萝卜素约20～80 g)匀浆，粮食样品视其胡萝卜素含量而定，置100ml带塞锥形瓶中，加入丙酮20ml，石油醚5ml，振摇1min，静置5min，将提取液转入盛有100ml 5%硫酸钠溶液的分液漏斗中，再于锥形瓶中加入10ml丙酮--石油醚混合液，振摇1min，静置5min，将提取液并入分液漏斗中。
β—胡萝卜素和番茄红素提取分离与测定
β—胡萝卜素和番茄红素提取分离与测定摘要：本文综述了从新鲜胡萝卜中提取分离β-胡萝卜素和番茄红素的原理及方法，并且介绍了β-胡萝卜素和番茄红素的理化性质、化学结构以及生理功能。
同时就该实验做了一定的分析。
关键词：番茄红素，β—胡萝卜素，提取，分离，测定一．文献综述多种研究表明：摄入富含类胡萝卜素的果蔬能降低人群某些癌症的发病率。
番茄红素是人类血浆和组织中重要的类胡萝卜素，是类胡萝卜素中最有效的单线态氧淬灭剂，在体内具有抗氧化、防备和抑制癌症、抑制诱变、保护心血管、防治白内障、调理机体免疫力等功能。
番茄红素的抗氧化作用包括猝灭单线态氧、消除自由基以及与其它氧化剂协同抗氧化作用等。
其猝灭单线态氧的能力最强，是目前抗氧化剂β-胡萝卜素的2～3倍，维生素E的100倍，番茄红素可以通过猝灭单线态氧预防脂类过氧化反应，保护细胞免受自由基的损伤。
1、番茄红素的国内外研究历史1873年，Hartsen最早从Tamus communis L.中分离得到深红色的番茄红素结晶。
1875年，Millardat从番茄中获得一种含有番茄红素的粗提物，当时命名为Solanorubin。
1913年，Dugger根据它对生长条件的影响，又把它命名为lycoperison。
而Schunck（1930年）的“lycopene”名称（中文即番茄红素）一直沿用至今。
1.1国外对番茄红素的研究现状1989年，Masic发现番茄红素在所有类胡萝卜素中对单线态氧的猝灭速度最高；1991年，Campbell发现肝癌患者的肝脏中番茄红素含量较低；1994年，Franceschi发现消化道癌的发生与番茄红素的摄入有关。
随后，对番茄红素的功能的研究成为一大热点。
1995年～2003年与番茄红素有关的报道达800多篇，内容涉及番茄红素的吸收、运输及新陈代谢的动力学；番茄红素与癌症、心脏病及其他多种疾病的关系；番茄红素的提取、测定及番茄产品的开发研究等。
八、蔬菜中胡萝卜素的测定（纸层析法）
食品检验实验：蔬菜中胡萝卜素的测定(纸层析法)(一)原理蔬菜的植物色素包括叶绿素、叶黄素及胡萝卜素等，它们能被丙酮石油醚溶液提取出来。
将样品提取液进行纸上层析，由于胡萝卜素极性最小，故被石油醚洗走的速度最快，从而可将胡萝卜素与其他色素分开，然后将胡萝卜素层析带洗脱进行比色定量。
(二)器材1．小乳钵。
2．10ml容量瓶。
3．层析缸。
4．层析纸。
5．分液漏斗50ml或100ml6．光电比色计。
(三)试剂1．石油醚(沸程60～90℃分析纯)。
2．丙酮(分析纯)。
3．丙酮-石油醚液(3：7) 以三份丙酮和七份石油醚振摇混合。
4．经过处理的河沙取河沙置于烧杯中，加10％HCl至高出沙面约1cm煮沸(煮时不断搅动)，然后弃去HCl，用蒸馏水洗至无酸为止。
5．无水硫酸钠(分析纯)。
6．β-胡萝卜素标准溶液精确称取纯β-胡萝卜素40mg于几毫升氯仿里，然后以石油醚稀释至100ml容量瓶中定容。
取该溶液5ml用石油醚稀释至50ml容量瓶中定容，即得40μg／ml的胡萝卜素标准应用液，置冷暗处保存。
(四)操作步骤1．在分液漏斗内先放30ml水。
2．称取绿叶蔬菜的均匀样品2g放入乳钵中(备25ml 3：7的丙酮-石油醚溶液)。
加少许河沙和数毫升丙酮-石油醚溶液于乳钵内，将样品研磨成糊状，用滴管吸取提取液至分液漏斗内。
这样，25ml丙酮-石油醚分十数次提取，直至提取液基本无色为止。
3．振摇分液漏斗，使丙酮溶于水中，待分层后，放去水层，加水洗涤3～4次以除尽丙酮。
过滤前，用吸水纸条吸干分液漏斗管口的水分。
4．将提取液通过盛有无水硫酸钠的漏斗，滤入10ml容量瓶内，再加少许石油醚洗涤漏斗及滤纸上附着的色素，并注入容量瓶内，加石油醚至10ml刻度，混匀。
5．层析(1)点样：于滤纸底端距边约3cm处，用铅笔画一基线，以1ml注射器准确吸取石油醚提取液0．5ml，徐徐点在基线的一条(或一点)上。
(2)展开：将点好样的滤纸卷成圆筒状(或呈长条状)，两边用线系牢，但不使两边重叠，放人事先以石油醚饱和的层析缸内，层析纸要放正，不接触缸边，层析纸基线下1／3浸入液面以内，进行上行展开。
对β-胡萝卜素测定方法的认识
对Β-胡萝卜素测定方法的认识姓名：***班级：应用化学122班学院：化学工程学院学校：新疆农业大学对β-胡萝卜素测定方法的认识摘要：食品中的β-胡萝卜素可以用纸上层析法、薄层色谱法、分光光度法及高效液相色谱法等方法测定。
本文简述了这些方法的原理条件及优缺点，并谈了谈自己的认识。
Β-胡萝卜素作为维生素A的前体，是人体重要营养素，也能够影响蛋白质的合成和利用，促进体内软组织的生长发育。
同时，β-胡萝卜素还有一定的防癌作用。
因此，对β-胡萝卜素的研究倍受广注。
β-胡萝卜素分子中存在多个共轭双键结构，对许多物理、化学、生物等因素都不稳定，例如光辐射、高温、酸、碱、游离卤素、水分等，但氧是影响胡萝卜素稳定的主要因素。
它不溶于水、丙二醇、甘油、酸和碱，溶于二硫化碳、苯、氯仿、己烷及植物油等，几乎不溶于甲醇和乙醇。
1 测定方法1·1 天然β-胡萝卜素的提取取切碎混匀的菜样30g，加入适量水(一般约l：0.5—2)，于捣碎机中捣碎，使匀浆呈稠糊状。
因β-胡萝卜素对弱碱比较稳定，所以选用氨水：乙醇（5:35）作为稳定剂。
稳定剂可以加快沉淀且使沉淀完全，从而减少β-胡萝卜素损失，提高提取率。
加入2%的CaCl2·2H2O其沉淀量最大，且β-胡萝卜素的含量最高。
因β-胡萝卜素是脂溶性物质，可以溶解在有机试剂中，根据相似相溶规律和β-胡萝卜素的理化性质，我们选用亲脂性较强的有机溶剂。
为避免β-胡萝卜素的不必要损失，在除去溶剂时应避免高温，故应优先选择低沸点的溶剂。
同时，根据β-胡萝卜素在不同溶剂中的溶解度；可以得出石油醚可以作为很好的β-胡萝卜素的溶剂。
因为蔬菜糊中含有大量的水分，直接选用石油醚很难从其中萃取β-胡萝卜素，选用水溶性的丙酮和石油醚的混合液萃取，这样丙酮会有效地使渣干燥因而在随后的萃取中，色素可以高效地进入萃取液，提高了萃取率。
故在萃取过程中，为了提高萃取率，应加入氨水：乙醇（5:35）作为稳定剂，2%的CaCl2·2H2O作为沉淀剂；用石油醚和丙酮混合物作为提取剂。
提取番茄中β—胡萝卜素并测定含量
３１ 方 法 的精 密度 试 验 。采 用 番 茄 皮 渣 样 品 ， 别 用 本 法 和 ． 分
Ｇ １３９ ９ 纸 层 析 法 平 行 测 ６ ， 算 标 准 偏 差 。结 果 见 表 ｌ Ｂ ２８－ ０ 次 计 。
因此 ， 们 参 照有 关 ｐ 胡 萝 ｈ 测 定 的 经 验 ， 番 茄 皮 渣 中 ｐ 我 一 素 对 一
１ 仪 器 与试 剂 。７ ２ 光 光 度 计 ； 析 管 ： ｃ ｉ ×４ ｃ 中 ． １ ２分 层 ｌｍ ． ｄ ０ ｍ；
由表 １ 以看 出 ， 用 本 方 法 测 定 Ｂ 胡 萝 卜索 ， 精 密 度 要 可 采 一 其
比纸 层 析 法 高 。
性 氧 化 镁 ：０ ２０目 ； 油 醚 （ 程 ３ ～ ６ ℃ ） 丙 酮 、 水 硫 酸 钠 ： 石 沸 Ｏ ０ 、 无 均
胡 萝 卜素 极性 的差 别 ， 柱 层 析 可 以将 它 们 分 离 。 用 Ｂ 胡 萝 卜素 的含 量 采 用 色 价 的测 定 及 计 算 方 法 。色 价 是 色 ～ 素 在 商 业 上 的 浓 度 计 量 方 式 ， 点 是 不 需 要 校 准样 ， 不 需 作 标 准 特 也
曲线 ， 单 快 速 。取 样 品 ｍ 克 ， 天 平 上 准 确 称 重 ， Ｖ ｌ 油 醚 简 在 用 ｍ 石
确性 高， 现 性好 。 重
４４２ ） ３ ０ ５
脱 。将 渗 滤 液 用 石 油 醚 定 容 ， ｌｍ 比色皿 ， 波 长 ４Ｏ ｍ处 测 定 用 ｃ 于 ５ｈ
其吸光度值 。
２３ 标 准 曲 线 的 测 定 。取 ｌｒｇ ． Ｏｎ／ Ｌ的 Ｇ 一胡 萝 卜 标 准 溶 液 ０ 索
・ ５ ０・５ １． ， ２， ， ０ ２・０ ３・Ｏ Ｌ分 别 定 容 至 ２ ｍＬ容 量 瓶 中 ， ， ｍ ５ 以石 油 醚 稀 释 ， 样 品测 定 步骤 操 作 ， 其 吸 光 度 。 按 测 以浓 度 为 横 坐 标 ， 光度 为纵 坐标 绘 制 标 准 曲线 。 吸
胡萝卜素含量的测定
思考题：
• 1、高效液相色谱仪的组成与工作主要 流程？
• 2、高效液相色谱的特点？ • 进行哪些预处理？ • 4、色谱图中β-胡萝卜素吸收峰峰高、峰
面积与样品中β-胡萝卜素浓度和纯度有 何关系？
•
β-胡萝卜素含量测定原理
β-胡萝卜素为脂溶性维生素A的前体，存在于各 种动植物体内，可以直接用有机溶剂提取后进行 检测，然后利用反相色谱法分析。
3、. 实验仪器和材料
仪器： 高效液相色谱仪 紫外检测器等。
试剂材料：β-胡萝卜素； 乙酸乙酯； 正己烷； 色谱甲醇； 新鲜胡萝卜。
4、实验操作步骤：
• 式中 m：10g(mL)样品中β-胡萝卜素含量（mg）；
• m1：标样进样体积中β-胡萝卜素含量（mg）；
• m2：样品称样质量（g或mL）；
• A1：标样峰面积值；
• A2：样品峰面积；
• V1：样品进样质量（μL）；
• V2：样品定容体积（mL）。
实验注意事项
• 1、样品的预处理； • 2、流动相的过滤脱气处理； • 3、色谱条件的选择。
高效液相色谱 法测定 β—
胡萝卜素含量
实验指导
一、实验目的 二、实验原理 三、实验仪器材料 四、实验操作步骤 五、实验结果 六、实验思考题
1、实验目的
1、理解高效液相色谱法的目的和意义； 2、理解和掌握高效液相色谱法的原理和方法； 3、掌握高效液相色谱仪的操作。
2、实验原理
高效液相色谱仪的组成与工作主要流程如下图所示：
（1）标准溶液的配制：精确称取100mg的含量为30%的β-胡 萝卜素标准品用乙酸乙酯溶解定容到100mL的棕色容量 瓶中。进样时取1ml，稀释定容到100ml。
（2）样品的制备：取样品，捣碎成浆状，称取10g，加甲醇、 正己烷各10ml研磨。过滤后，滤液以及用乙酸乙酯洗 涤渣的滤液一并接收在三角瓶中，提取液放入100ml棕 色容量瓶中，乙酸乙酯定容到100ml。
胡萝卜素的提取(DOC)
β－胡萝卜素的提取分离研究β－胡萝卜素的提取摘要：β－胡萝卜素是安全的、无毒的天然色素，在生物食品等领域均有展应用。
β－胡萝卜素的提取工艺众多，工艺各有特点。
简要介绍了溶剂提取法提取胡萝卜素，柱色谱分离β－胡萝卜素，薄层色谱法检验分离效果的方法。
学习柱色谱法、薄层色谱法的原理及其方法。
掌握从胡萝卜中分离提纯β－胡萝卜素的原理和方法。
学会用色谱法从胡萝卜中提取胡萝卜素并鉴定之。
关键词：β－胡萝卜素提取分离引言：胡萝卜是传统蔬菜和食用天然胡萝卜素的重要来源。
β－胡萝卜素是500多种类胡萝卜素的一种。
是橘黄色脂溶性化合物，它是一种重要的食用天然色素和营养强化剂，易溶于许多有机溶剂，如：乙酸乙酯、氯仿。
几乎不溶于丙二醇、甘油、酸和碱‘不溶于水。
β－胡萝卜素是一种非常安全的、无任何毒副作用的营养元素，具有解毒作用。
是维护人体健康不可缺少的营养素。
在抗癌、预防心血管疾病、白内障及抗氧化方面有显著的功能，可预防因老化引起的多种退化性疾病。
另外，β－胡萝卜素在食品工业中的应用也日益广泛。
胡萝卜中含有丰富的胡萝卜素，是β－胡萝卜素含量最高的蔬菜之一。
本文以胡萝卜为原料，采用色谱分离的方法研究了胡萝卜素的提取。
正文1.1胡萝卜中的成分每100克胡萝卜中，约含蛋白质0.6克，脂肪0.3克，糖7.6～8.3克，铁0.6毫克，维生素A（胡萝卜素）1.35～17.25毫克，维生素B1 0.02～0.04毫克，维生素B2 0.04～0.05毫克，维生素C12毫克，热量150.7千焦，另含果胶、淀粉、无机盐和多种氨基酸。
各类品种中尤以深橘红色胡萝卜素含量最高，各种胡萝卜所含能量在79.5千焦～1339.8千焦之间。
胡萝卜是一种质脆味美、营养丰富的家常蔬菜，素有“小人参”之称。
胡萝卜富含糖类、脂肪、挥发油、胡萝卜素、维生素A、维生素B1、维生素B2、花青素、钙、铁等人体所需的营养成分。
1.2 β－胡萝卜素的性质分子式，其分子式为 C40H56，紫红或暗红色的结晶性粉末。
新鲜蔬菜中β-胡萝卜素提取和测定的研究
新鲜蔬菜中β-胡萝卜素提取和测定的研究
刘晓燕;陈章鑫;姜黎
【期刊名称】《绵阳师范学院学报》
【年(卷),期】2009(28)2
【摘要】用三种不同方法提取不同新鲜蔬菜中的β-胡萝卜素,并对β-胡萝卜素含量进行测定.结果表明,比较优先的β-胡萝卜素提取方法是:试样用4%Na0H甲醇溶液在60℃-70℃皂化1 h,用3:7(v/v)的丙酮-石油醚混合溶剂提取,以MgO为吸附剂,丙酮一石油醚为洗脱剂分离,提取液用紫外分光光度计在波长447 nm,1cm比色皿条件下测定,得出蔬菜中β-胡萝卜素含量:胡萝卜为0.134 mg·g-1,红椒为
0.0863 mg·g-1,菠菜为0.0426 mg·g-1.该方法工艺简单,提取率较高.
【总页数】6页(P46-50,55)
【作者】刘晓燕;陈章鑫;姜黎
【作者单位】绵阳师范学院化学与化学工程学院,四川绵阳,621000;绵阳师范学院法学与社会学院,四川绵阳,621000;绵阳师范学院化学与化学工程学院,四川绵阳,621000
【正文语种】中文
【中图分类】S631
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β-胡萝卜素和番茄红素的提取分离与测定
β-胡萝卜素和番茄红素的提取分离与测定1．实验目的：掌握色素提取方法、柱层析分离方法及薄层色谱初步定性方法。
了解β－胡萝卜素与番茄红素性质的差别。
2．实验原理：番茄中含有番茄红素和少量的β－胡萝卜素，二者均属于类胡萝卜素。
类胡萝卜素为多烯类色素，不溶于水而溶于脂溶性有机溶剂。
本实验先用乙醇将番茄中的水脱去，再用二氯甲烷萃取类胡萝卜素。
因为二氯甲烷与水不混溶，故只有除去水分后才能有效地从组织中萃取出类胡萝卜素。
根据番茄红素与β－胡萝卜素极性的差别，用柱层析可以将它们分离。
分离效果可以用薄层层析进行检验。
3．实验仪器及材料：新鲜番茄（或番茄酱）。
95％乙醇，二氯甲烷，石油醚（60℃～90℃），氯仿，中性或酸性氧化铝（柱层析用），环己烷，硅胶G，饱和氯化钠溶液，无水硫酸钠。
4．实验过程：1）原料处理与色素提取称取新鲜番茄浆20 g于100 mL圆底烧瓶中，加95％乙醇40 mL，摇匀，装上回流冷凝管，在水浴上加热回流5min，趁热稠滤，只将溶液倾出，残渣留在瓶内，加入30 mL二氯甲烷，水浴上加热回流5 min，冷却，将上层溶液倾出抽滤，固体仍保留在烧瓶内，再加10 mL二氯甲烷重复萃取一次。
合并乙醇和2次二氯甲烷提取液，倒入分液漏斗中，加5 mL饱和氯化钠溶液（有利分层），振摇，静止分层。
分出橙黄色有机相，使其流经一个在颈部塞有疏松棉花且在棉花上铺一层1 cm厚的无水硫酸钠的三角漏斗，以除去微量水分。
将此溶液贮存于干燥的有塞子的锥形瓶中。
层析之前，将此溶液在通风橱中用热水浴蒸发至干。
2）层析柱的制备取一支长15cm左右内径为的干燥的层析柱，将其垂直固定于铁架上，底部铺上少量棉花，打开活塞。
称取8g氧化铝小心倾入层析柱中，在氧化铝上铺一层棉花。
然后向柱内加入15ml石油醚，让溶剂浸润并流过层析柱，注意柱顶部溶剂不能干涸。
待溶剂液面刚好与氧化铝表面相切时，关闭活塞，备用。
3）柱层析分离向蒸干的粗样品中加入2ml苯使其溶解。
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新鲜蔬菜中β-胡萝卜素的提取、分离和测定
班级：临五一班（2小班）姓名：任依梦学号：5117119051
【实验目的】
●掌握从新鲜胡萝卜中提取、分离β-胡萝卜素的方法
●掌握应用紫外-可见吸收光谱法测定β-胡萝卜素的紫外光谱图
●了解共轭多烯化合物π→π*跃迁吸收波长的计算方法及共轭多烯化合物的紫
外吸收光谱特征
【实验原理】
简介胡萝卜素是维生素A的前体，具有类似维生素A的活性，有α、β、γ异构体，其中以β-胡萝卜素生理活性最强。
β-胡萝卜素的结构如下：
β-胡萝卜素是长链多烯化合物，它的π-π*跃迁吸收带处于可见光区，因此纯β-胡萝卜素是橘红色晶体。
提取胡萝卜素不溶于水，可溶于有机溶剂，故可用有机溶剂来提取。
分离采用柱层析法将提取液中β-胡萝卜素分离出来。
测定经分离提纯的β-胡萝卜素含量可以直接用紫外-可见分光光度法测定。
【实验步骤】
1.β-胡萝卜素的提取
20g新鲜胡萝卜+40mL1：1丙酮-石油醚混合溶剂研磨5min（研钵）萃取（分液漏斗）
2.柱层析
在层析柱中加入少许浸有石油醚的脱脂棉→加入一半层析柱高的石油醚→加入20g中性氧化铝→在氧化铝上面加一圆形滤纸→加入β-胡萝卜素提取液→用9:1（体积比）石油醚-丙酮溶液洗脱，进行层析
3.β-胡萝卜素的紫外-可见吸收光谱的测定
将层析分离得到的橙黄色试样稀释后加到1cm的比色皿中，以石油醚作空白试剂，用分光光度计测定400~600nm范围内的吸收
【实验结果】
β-胡萝卜素的吸收曲线。