蒽酮法测定苹果中可溶性糖含量实验
苹果、梨以及香蕉中所含可溶性糖和蛋白质的比较测定和探讨
苹果、梨以及香蕉中所含可溶性糖和蛋白质的比较测定和探讨姓名：赵云霞同组者：辛芝红指导教师：郝雪峰（太原师范学院生物系112班学号2011131229）摘要本文用考马斯亮蓝法、蒽酮法分别对苹果、梨和香蕉提取液中蛋白质含量、可溶性糖含量进了测定。
结果表明：等质量的香蕉、苹果、梨中，香蕉含糖量最高，苹果次之、梨最低；香蕉含蛋白质量最高、其次为梨、苹果最少。
Abstract this paper by Coomassie brilliant blue,anthrone colorimetry respectively on apple, pear and bananaextracts.Protein content, soluble sugar content in the determination of. The results show that: the quality of banana,apple, pear, banana and sugar content of apples, pears was the second highest, lowest; Banana containing proteinIs the highest, followed by the least, apple pear 关键词苹果、梨、香蕉、可溶性蛋白质、可溶性糖Key words apple, pear, banana, soluble protein, soluble sugar 引言苹果和梨、香蕉是我们生活中最常见也是最多糖是单糖缩合的多聚物。
水果多糖作为天然植物多糖中的一类，虽然早就引起了人们的注意，但早期的研究主要是为了搞清其作为结构物质在水果质构方面的作用及在水果贮藏与加工过程中的变化与控制，以改善和保持水果及其加工制品的感官品质。
近年来随着天然活性多糖研究的深入，对水果多糖的研究重点也逐步转向了以开发利用为目的的水果多糖的提取分离、结构、化学和生物活性及应用研究，已有人对苹果果肉中多糖蛋白质进行过测定（刘杰超，焦中高2009），但还没有人对三叶草体内多糖做过相关的研究，也未对其叶和茎中所含多糖进行过对比。
可溶性糖含量的测定蒽酮法心得体会
可溶性糖含量的测定蒽酮法心得体会在进行可溶性糖含量测定时，蒽酮法是一种常用的分析方法。
通过该方法，我们可以准确地测定样品中的可溶性糖含量。
进行样品的制备非常重要。
我们需要将样品完全溶解在适当的溶剂中，以确保蒽酮法能够准确地测定可溶性糖的含量。
避免在样品制备过程中引入任何可能干扰测定结果的物质。
蒽酮法的操作相对简单，但仍需要严格控制实验条件。
在进行分析时，我们应遵循标准操作程序，确保测定结果的准确性和可重复性。
此外，正确选择蒽酮试剂的浓度和使用适当的仪器设备也是关键。
在进行测定过程中，注意对实验环境的控制也是十分重要的。
避免有害物质的污染以及其他外界因素对实验结果的干扰，可以提高测定结果的可靠性。
对于蒽酮法测定结果的解读，我们需要结合样品的特性和实际需求进行分析。
根据测定结果，我们可以评估样品的可溶性糖含量，并据此进行后续的数据处理和实验设计。
通过蒽酮法测定可溶性糖含量是一项重要的实验技术。
在实验过程中，我们应严格控制实验条件、合理选择试剂和仪器，并对实验结果进行准确解读。
这将有助于我们更好地理解样品中的可溶性糖含量，并为后续研究提供有价值的参考数据。
蒽酮比色定糖法测定可溶性糖含量
蒽酮比色定糖法测定可溶性糖含量实验目的1.了解蒽酮法测定可溶性糖含量的原理2.学习求标准曲线方程—最小二乘法3. 掌握分光光度计的使用实验原理蒽酮比色定糖法是一个快速而方便的定糖方法，在强酸性条件下，蒽酮可以与游离的或多糖中存在的己糖、戊糖及己糖醛酸（还原性和非还原性）作用生成蓝绿色的糖醛衍生物，其颜色的深浅与糖的含量在一定范围内成正比。
蒽酮也可以和其他一些糖类发生反应，但显现的颜色不同。
当存在含有较多色氨酸的蛋白质时，反应不稳定，呈现红色。
上述特定的糖类物质，反应较稳定。
反应式：该法特点：灵敏度高，测定量少，快速方便。
实验步骤1．求标准曲线方程取6只试管，按下表配制（移取）葡萄糖（G）标准溶液，沸腾7分钟取出，用自来水冷至室温，用721分光光度计比色，波长620nm，1＃管作为参比(保留)，求标准曲线方程。
（G浓度为200μg／mL，蒽酮试剂：2克蒽酮／每升85%H2SO4）2. 样品含糖量的测定（1）取菜叶（包菜和白菜两个样）准确称取1.00克剪碎研细后，放入大试管，加入25mL蒸馏水，煮沸10分钟，通过漏斗滤入250mL容量瓶中（可以抽滤），并用煮沸蒸馏水提取两次，滤液并入容量瓶中，滤纸上的残渣用水冲两次，冷却定容至刻度。
（2）吸取0.5mL 滤液于编号的三只试管中，以蒸馏水补足1.00mL；另吸取1.00mL滤液于另编号的三只试管中，加蒽酮试剂5.0mL（于冷水浴中操作），摇匀后于沸水浴中煮沸7分钟，取出冷却至室温，以求标准曲线的1＃管作为参比，用721分光光度计在620nm处测吸光度或透过率。
最小二乘法求标准曲线方程的公式：X：G 的浓度（μg／mL）Y：吸光度A＝－�ST本实验要求相关系数r≥0.99。
实验十蒽酮比色法测定植物组织中总糖和可溶性糖的含量
实验十蒽酮比色法测定植物组织中总糖和可溶性糖的含量一、实验目的掌握蒽酮法测定总糖和可溶性糖含量的原理和方法。
二、实验原理蒽酮比色法是一个快速而简便的定糖方法。
酸可使糖类（如已糖基，戊醛糖及已糖醛酸）脱水生成糠醛，生成的糠醛或烃甲基糖醛与蒽酮脱水缩合，形成糠醛的衍生物，呈蓝绿色，该物质在620nm处有最大光吸收值。
在10~100ug范围内其他颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。
蒽酮也可以和其他一些糖类发生反应，但显现的颜色不同。
当存在含有较多色氨酸蛋白质时，反应不稳定，呈现红色。
而对于上述特定的糖类物质，反映较稳定。
多糖和寡糖可用酸水解成单塘和蒽酮试剂反应，因此利用蒽酮法可测组织中总糖和可溶性糖。
这一种方法具有很高的灵敏度，糖含量在30ug左右时就能进行测定，所以可作为微量测糖之用。
一般样品少的情况下，采用这一方法比较合适。
三、仪器，试剂和材料1．仪器（1）分光光度计；（6）漏斗，漏斗架个6个（2）电子天平；（7）容量瓶：50ml2个；（3）三角瓶：50ml2个（8）移液管；（4）刻度具塞试管；10ml13支；（9）水浴锅。
（5）试管架，试管夹各2个；2．试剂（1）葡萄糖标准液：100ug/ml；（2）浓硫酸；（3）蒽酮试剂：0.2g蒽酮，溶于100ml浓流酸中，现当日配制使用。
3．材料小麦幼苗分蕖节或其植物的幼嫩组织（大白菜心）。
四、操作步骤1．葡萄糖标准曲线的制作取7支试管，按下表配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液；管号1234567葡萄糖标准液/mL00.10.20.30.40.50.6蒸馏水/mL 1.00.90.80.70.60.70.8葡萄糖含量/ug0102030405060在每支试管中，加入蒽酮试剂4.0ml，迅速浸入冰水浴中冷却。
各加完后一起浸入沸水浴中，管口加盖玻璃球，以防蒸发。
自水浴重新煮沸起，准确煮沸10min取出，用流水冷却，室温放置10min，在620nm波长下比色。
以标准葡萄糖含量（ug）做横坐标，以吸光值作纵坐标，做出标准曲线。
[整理版]苹果中糖含量测定
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苹果中糖含量测定（蒽铜比色法）2010/10/8一、基本原理蒽铜可以和游离的己糖或多糖中的己糖基、戊醛糖及己糖醛起反应，反应后溶液城蓝绿色，在波长为260nm处测定其吸光度，此时吸收值最大。
二、试剂和溶液分析中，除非另有说明，限用分析纯试剂、蒸馏水或相同纯度的水。
1）蒽铜试剂（C14H10O）：取2g蒽铜溶于100ml 80%的H2SO4溶液中。
2）葡萄糖溶液（C6H12O6）：标准葡萄糖溶液 0.1mg/ml。
标准葡萄糖溶液的配置：称取葡萄糖100mg，溶于950ml蒸馏水中，用硫酸或氢氧化钠溶液调节溶液的PH=7，定量移入1000ml容量瓶中，稀释至刻度，混匀。
此溶液1ml，含葡萄糖0.1mg。
三、仪器：1）恒温水浴锅。
2）分光光度计。
四、分析步骤：（1）标准曲线的绘制：1）标准比色溶液的配置：适用于3cm光径长度比色皿的光度测量。
按表所示量，将葡萄糖标准溶液（0.1mg/ml）注入6个大试管中，每个试管按表分别加入蒸馏水（ml）和蒽酮试剂（ml），摇匀，把试管放在试管架上，浸入沸水浴中准确煮沸10min，不时摇动，然后取出，用自来水冷却至室温，放置10min。
表一：葡萄糖标准溶液中葡萄糖的含量试剂管号0 1 2 3 4 5标准葡萄糖溶液/ml 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5蒸馏水/ml 1.0 0.9 0.8 0.7 0.6 0.5蒽酮试剂/ml 4.0 4.0 4.0 4.0 4.0 4.02）吸光度测定：在30min内，以葡萄糖吸光度为零的溶液作为参比溶液，在波长620nm处，用分光光度计测定标准比色溶液的吸光度。
3）标准曲线的绘制：以5ml标准比色溶液中所含葡萄糖的毫克数为横坐标，相应的吸光度为纵坐标，用Excel作图。
表二：6组浓度测得吸光度值管号 0 1 2 3 4 5葡萄糖标准溶液体积/ml 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.5葡萄糖的对应量/mg 0 0.01 0.02 0.03 0.04 0.05吸光度值 0 0.035 0.087 0.110 0.165 0.222表三：标准曲线图（A=εbc）（2）测定：1）①试样及试液准备：称取33.23g苹果，用榨汁机搅碎，置于1000ml烧杯中，加水冲干净榨汁机内壁，最后定容至1000ml，然后用真空抽滤装置过滤。
蒽酮比色法测定可溶性糖
实验三蒽酮比色法测定可溶性糖
一、原理：糖在浓硫酸作用下可经脱水反应生成糖醛，并能进一步与蒽酮反应生成蓝绿色的糖醛衍生物，在一定浓度范围内，其颜色深浅与浓度大小成正比。
二、材料与仪器
植物叶片、分光光度计、水浴锅、漏斗、容量瓶、烧杯
三、步骤
1、取植物叶片0.15g，放入刻度试管中，加蒸馏水10ml。
2、将试管置于沸水中加热提取30min。
3、将提取液过滤，定容于25ml容量瓶。
4、取0.5ml提取液，依次加入1.5ml蒸馏水、0.5ml蒽酮乙酸乙酯溶液和5ml硫酸。
5、沸水浴保温1min。
6、630nm波长下，测定溶液吸光度值。
四、结果计算
可溶性糖含量（mg/g）=217.37X−3.0742∗25
w∗1000∗0.5。
蒽酮法测定可溶性糖方法[仅供参考]
![蒽酮法测定可溶性糖方法[仅供参考]](https://img.taocdn.com/s3/m/d594d35c7375a417876f8f16.png)
蒽酮法测定可溶性糖方法（一) 实验原理糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的定量。
糖类与蒽酮反应生成的有色物质在可见光区吸收峰为630 nm，故在此波长下进行比色。
（二）材料、仪器设备及设计1 材料12种源砂生槐叶片，2种处理，4个重复，共96个样。
2 仪器设备分光光度计，恒温水浴锅，20 ml刻度试管，5 ml和1 ml刻度吸管，5 ml和1 ml的移液枪，记号笔，吸水纸适量。
3 试剂（1）蒽酮乙酸乙酯试剂：取分析纯蒽酮1 g，溶于50 ml乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中，在黑暗中可保存数周，如有结晶析出，可微热溶解。
（2）100 ug/L蔗糖溶液：1%蔗糖标准液：精确称取蔗糖1.000 g，加入少量水溶解，移入100 ml容量瓶，加0.5 ml 浓硫酸，定容至刻度线。
100 ug/L蔗糖溶液的配制：用移液枪精确吸取1%蔗糖标准液1 ml，加入到100 ml容量瓶，加蒸馏水定容。
（3）浓硫酸（比重1.84）（三）实验步骤1．标准曲线的制作：按表1加入标准的蔗糖溶液，然后按顺序向试管中加入0.5 ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5 ml 浓硫酸，充分振荡，立即将试管放入沸水浴中，逐管准确保温1 min取出后自然冷却至室温，以空白作参比，在630 nm波长下测其光密度，以光密度为纵坐标，以糖含量为横坐标，绘制标准曲线，并求出标准线性方程。
管号试剂0 1，2 3,4 5,6 7,8 9,10100µg.1-1蔗糖0 0.2 0.4 0.6 0.8 1/ml水/ml 2 1.8 1.6 1.4 1.2 1 蔗糖量/µg 0 20 40 60 80 1002．取样取不同种源砂生槐幼苗，用蒸馏水冲洗干净，随后用吸水纸吸干水分。
将叶片切下，用锡箔纸包住，放入液氮中冷冻。
取完后将样品放入-80℃冰箱中保存。
设计性实验报告植物可溶性蛋白质和糖含量的测定
设计性实验报告题目植物可溶性蛋白质和糖含量的测定课程名称：基础生物化学实验实验学期：2011至2012学年第一学期植物组织中可溶性蛋白质和糖含量的测定摘要本文以生菜、苹果为材料，采用考马斯亮蓝法（蛋白质）、蒽酮法（糖）、分光光度计法进行了可溶性糖和可溶性蛋白含量的测定。
结果表明：生菜的蛋白质含量为5.88（mg/g），糖含量为0.0739g/100g；苹果中蛋白质含量为0.2926（mg/g），糖含量为0.2126g/100g。
即说明：生菜中蛋白质含量高于苹果，但苹果中的糖含量更高。
关键词可溶性蛋白、可溶性糖，考马斯亮蓝G-250染色法，蒽酮法，含量测定1、材料与方法1.1 蛋白质含量测定标准蛋白质溶液、考马斯亮蓝试剂、生菜、苹果分光光度计、离心机、研钵、烧杯、电子秤、移液管、试管等1.2 糖含量测定200ug/ml标准葡萄糖、蒽酮试剂、浓硫酸、生菜、苹果试管、水浴锅、分光光度计、研钵、电子秤、移液管、量筒、试管架2、实验步骤蛋白质含量的测定（考马斯亮蓝G-250染色法）2.1标准曲线的绘制取六只试管，按下表加入试剂，摇匀，向个管加入5ml考马斯亮蓝试剂，摇匀，并放置5min左右，以0号试管为空白对照，在595nm下比色测定吸光度。
以蛋白质含量为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
2.2样品测定2.2.1样品提取分别秤取生菜、苹果鲜样 0.25～0.5g，用5ml蒸馏水或缓冲液研磨成匀浆后，3000r/min离心10min，上清液备用。
2.2.2 吸取样品提取液1.0ml（蛋白质含量适当稀释），放入试管中，加入5ml考马斯亮蓝试剂，摇匀，放置2min后在595nm下比色，测定吸光度，并通过标准曲线查得蛋白质含量。
糖含量测定2.3.葡萄糖标准曲线的制作取6支20ml具寒试管，编号，按下表数据配制一系列不同浓度的标准葡萄糖溶液。
在每管中均加入0.5ml蒽酮试剂，再缓慢地加入5ml浓H2SO4，摇匀后，打开试管塞，置沸水浴中煮沸10分钟，取出冷却至室温，在620nm波长下比色，测各管溶液的光密度值（OD），以标准葡萄糖含量为横坐标，光密度值为纵坐标，作出标准曲线。
设计性实验报告植物可溶性蛋白质和糖含量的测定
设计性实验报告题目植物可溶性蛋白质和糖含量的测定课程名称：基础生物化学实验实验学期：2011至2012学年第一学期植物组织中可溶性蛋白质和糖含量的测定摘要本文以生菜、苹果为材料，采用考马斯亮蓝法（蛋白质）、蒽酮法（糖）、分光光度计法进行了可溶性糖和可溶性蛋白含量的测定。
结果表明：生菜的蛋白质含量为5.88（mg/g），糖含量为0.0739g/100g；苹果中蛋白质含量为0.2926（mg/g），糖含量为0.2126g/100g。
即说明：生菜中蛋白质含量高于苹果，但苹果中的糖含量更高。
关键词可溶性蛋白、可溶性糖，考马斯亮蓝G-250染色法，蒽酮法，含量测定1、材料与方法1.1 蛋白质含量测定标准蛋白质溶液、考马斯亮蓝试剂、生菜、苹果分光光度计、离心机、研钵、烧杯、电子秤、移液管、试管等1.2 糖含量测定200ug/ml标准葡萄糖、蒽酮试剂、浓硫酸、生菜、苹果试管、水浴锅、分光光度计、研钵、电子秤、移液管、量筒、试管架2、实验步骤蛋白质含量的测定（考马斯亮蓝G-250染色法）2.1标准曲线的绘制取六只试管，按下表加入试剂，摇匀，向个管加入5ml考马斯亮蓝试剂，摇匀，并放置5min左右，以0号试管为空白对照，在595nm下比色测定吸光度。
以蛋白质含量为横坐标，以吸光度为纵坐标绘制标准曲线。
蛋白质含0 20 40 60 80 100量（ug）2.2样品测定2.2.1样品提取分别秤取生菜、苹果鲜样 0.25～0.5g，用5ml蒸馏水或缓冲液研磨成匀浆后，3000r/min离心10min，上清液备用。
2.2.2 吸取样品提取液1.0ml（蛋白质含量适当稀释），放入试管中，加入5ml考马斯亮蓝试剂，摇匀，放置2min后在595nm下比色，测定吸光度，并通过标准曲线查得蛋白质含量。
糖含量测定2.3.葡萄糖标准曲线的制作取6支20ml具寒试管，编号，按下表数据配制一系列不同浓度的标准葡萄糖溶液。
在每管中均加入0.5ml蒽酮试剂，再缓慢地加入5ml浓H2SO4，摇匀后，打开试管塞，置沸水浴中煮沸10分钟，取出冷却至室温，在620nm波长下比色，测各管溶液的光密度值（OD），以标准葡萄糖含量为横坐标，光密度值为纵坐标，作出标准曲线。
蒽酮比色法测定可溶性糖
蒽酮比色法测定可溶性糖一、原理：糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糖醛，生成的糖醛或羟甲基糖醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糖醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比。
糖类与蒽酮反应生成的有色物质，在可见光区的吸收峰为630nm，可在此波长下进行比色，故可用于糖的定量。
二、材料、仪器设备及试剂（一）材料阴干野扁桃果实（二）仪器设备分光光度计、水浴锅、具塞刻度试管、移液管、容量瓶、定性滤纸等（三）试剂浓硫酸（比重1.84）、分析纯蔗糖、分析纯蒽酮、乙酸乙酯蒽酮乙酸乙酯试剂：取分析纯蒽酮1g，溶于50ml乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中，在黑暗中可保存数周，用时微热溶解结晶。
三、实验步骤（一）标准曲线1、1%蔗糖标准液将分析纯蔗糖在80℃下（2h）烘至恒重，精确称取1.000g，加少量水溶解，转入100ml容量瓶中，加入0.5ml浓硫酸，用蒸馏水定容至刻度。
2、100μg/L蔗糖标准液精确吸收1%蔗糖标准液1ml转入100ml容量瓶中，加水至刻度。
3、标准曲线取20ml刻度试管11支，从0-10分别编号，按下表加入溶液和水。
然后按顺序向试管中加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5ml浓硫酸，充分振荡，立即将试管放入沸水浴中，逐管均准确保温1min，取出后自然冷却至室温，以空白作参比，在630nm波长下测其吸光度，的数据如下：（二）可溶性糖的提取1、提取取野扁桃样品，擦净表面污物，称取果肉、果仁各5份（共10组）（详重见下表）分别放入10支刻度试管中，加5ml蒸馏水，塑料薄膜封口，于沸水中提取30min，提取液滤入25ml容量瓶，反复漂洗试管残渣，定容至刻度。
2、显色测定吸取样品提取液0.5ml于20ml刻度试管中，加蒸馏水1.5ml。
按顺序向试管中加入0.5ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5ml浓硫酸，充分振荡，立即将试管放入沸水浴中，逐管均准确保温1min，取出后自然冷却至室温，以空白作参比，在630nm 波长下测其吸光度，结果见下表：四、结果计算从回归方程求得糖量（y ） ×提取液量（5）×稀释倍数（5）可溶性糖含量＝ 吸取样品液的体积（0.5）×100％ 样品干重（0.05）×106实验结果：野扁桃果仁可溶性糖含量＝5.74％ 野扁桃果肉可溶性糖含量＝3.54％新疆野扁桃果实糖酸含量的测定——蒽酮比色法测可溶性糖指导老师：曾斌实验指导老师：帕提曼实验学生：苏瑞（063231240）实验时间：2008年10月。
蒽酮法测定可溶性糖方法
蒽酮法测定可溶性糖方法（一) 实验原理糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的定量。
糖类与蒽酮反应生成的有色物质在可见光区吸收峰为630 nm，故在此波长下进行比色。
（二）材料、仪器设备及设计1 材料12种源砂生槐叶片，2种处理，4个重复，共96个样。
2 仪器设备分光光度计，恒温水浴锅，20 ml刻度试管，5 ml和1 ml刻度吸管，5 ml和1 ml的移液枪，记号笔，吸水纸适量。
3 试剂（1）蒽酮乙酸乙酯试剂：取分析纯蒽酮1 g，溶于50 ml乙酸乙酯中，贮于棕色瓶中，在黑暗中可保存数周，如有结晶析出，可微热溶解。
（2）100 ug/L蔗糖溶液：1%蔗糖标准液：精确称取蔗糖 g，加入少量水溶解，移入100 ml容量瓶，加 ml浓硫酸，定容至刻度线。
100 ug/L蔗糖溶液的配制：用移液枪精确吸取1%蔗糖标准液1 ml，加入到100 ml容量瓶，加蒸馏水定容。
v1.0 可编辑可修改（3）浓硫酸（比重）（三）实验步骤1．标准曲线的制作：按表1加入标准的蔗糖溶液，然后按顺序向试管中加入 ml蒽酮乙酸乙酯试剂和5 ml 浓硫酸，充分振荡，立即将试管放入沸水浴中，逐管准确保温1 min取出后自然冷却至室温，以空白作参比，在630 nm波长下测其光密度，以光密度为纵坐标，以糖含量为横坐标，绘制标准曲线，并求出标准线性方程。
管号试剂01，23,45,67,89,10 100µ蔗糖/ml01水/ml21蔗糖量/µg020*********2．取样取不同种源砂生槐幼苗，用蒸馏水冲洗干净，随后用吸水纸吸干水分。
将叶片切下，用锡箔纸包住，放入液氮中冷冻。
取完后将样品放入-80℃冰箱中保存。
3．可溶性糖的提取将样品从冰箱中取出，称取－ g，记录重量，使用镊子将样品夹入刻度试管中，加入10 mL 蒸馏水，塑料薄膜封口，于沸水中提取30 min（提取2次），提取液过滤入25 ml 容量瓶中，反复冲洗试管及残渣，定容至刻度。
植物体内可溶性糖含量的测定
植物体内可溶性糖含量的测定——蒽酮法一、实验目的1.了解蒽酮法测定可溶性糖含量的原理2.掌握分光光度计的使用二、实验背景糖类物质是构成植物体的重要组成成分之一也是新陈代谢的主要原料和贮存物质。
不同载培条件不同成熟度都可以影响水果、蔬菜中糖类的含量。
因此对水果、蔬菜中可溶性糖的测定可以了解和鉴定水果、蔬菜品质的高低。
三、实验原理总糖是指样品中的还原单糖及在本法测定条件下能水解成还原单糖的蔗糖、麦芽糖和可部分水解为葡萄糖的淀粉。
蒽酮比色法是测定样品中总糖量的一个灵敏、快速、简便的方法。
其原理是糖类在较高温度下被硫酸作用脱水生成糠醛或糖醛衍生物后与蒽酮(C14HoO)缩合成蓝色化合物。
溶液含博量在每mL 150 pg以内，与蔥酮反应生成的颜色深浅与糖量成正比。
蒽酮不仅能与单糖也能与双糖、糊精、淀粉等直接起作用,样品不必经过水解。
四、材料、仪器及试剂1.材料：苹果2.仪器：分光光度计恒温水箱试管漏斗容量瓶试管架研钵刀片3.试剂：蒽酮试剂(称取100 mg蒽酮溶于100 mL 98%硫酸溶液(A.R)中）葡萄糖标准溶液(100 μg)/mL(精确称取100 mg干燥葡萄糖,用蒸馏水定容至1000 mL）。
样品溶液（可自选待测物制成样品溶液。
eg：称取0.1g苹果剪碎置于研钵中加入少量蒸馏水研磨成匀浆然后转入20ml刻度试管中用10ml蒸馏水分次洗涤研钵洗液一并转入刻度试管中。
置沸水浴中加盖煮沸10分钟冷却后过滤滤液收集于100ml容量瓶中用蒸馏水定容至刻度摇匀备用。
）四、实验方法1.葡萄糖标准曲线的制作：取七支干燥洁净的试管编号后，按下表操作。
编号123456700.100.200.300.400.600.80葡萄糖标准液(100ug/ml)H2O 1.00.900.800.700.600.400.20蒽酮试剂10101010101010每管加人葡萄糖标准液和水后立即混匀，迅速置于冰浴中，传各管都加人蒽酮试剂后，同时置于沸水浴中，准确加热7分钟，立即取出置冰浴中迅速冷却。
实验五可溶性总糖的测定(精)
管号 1
葡萄糖 0
标准液 （ml）
蒸馏水 1
（ml）
葡萄糖 0
含量 （μg）
2
3
4
5
6
7
0.1 0.2 0.3 0.4 0.6 0.8
0.9 0.8 0.7 0.6 0.4 0.2
10 20 30 40 60 80
在每支试管中立即加入蒽酮试剂4.0ml， 加完后一起浸于沸水浴中，准确煮沸10分钟取 出，用流水冷却，室温放置10分钟，在620nm 波长下比色。以标准葡萄糖含量作横坐标，以 吸光值作纵坐标作标准曲线。
三、仪器、试剂和材料
１、仪器 分光光度计；电子天平；三角瓶；大管；试管架； 漏斗；容量瓶；试管；水浴锅 ２、试剂 葡萄糖标准液；浓硫酸； 蒽酮试剂：0.2g蒽酮溶于100mL浓硫酸中当日配制 使用。 ３、材料 小麦
四、操作步骤
１、葡萄糖标准曲线的制作 取７支大试管，按下表数据配制一
系列不同浓度的葡萄糖溶液：
可溶性总糖的测定(蒽酮比色法)
一、目的
掌握蒽酮法测定可溶性糖含量 的原理和方法。
二、原理
强酸可使糖类脱水成糖醛，生成的糖醛或羟 甲基糖醛与蒽酮脱水缩合，形成糖醛的衍生物， 呈蓝绿色，该物质在620nm处有最大吸收。在10 －100μg范围内其颜色的深浅与可溶性糖含量 成正比。
这一方法有很高的灵敏度，糖含量在３ 0μg左右就能进行测定，所以可做为微量测糖 之用。一般样品少的情况下，采用这一方法比 较合适。
２、植物样品中可溶性糖的提取
将小麦剪碎至２mm以下，准确称取１克， 放入50三角瓶中，加沸水25ml，在水浴中加盖 煮沸10分钟，冷却后过滤，滤液收集在50ml容 量瓶中，定容至刻度。吸取提取液２ml置另一 50ml容量瓶中，以蒸馏水稀释定容不，摇匀测 定。
【标准】蒽酮法测定可溶性糖
【关键字】标准蒽酮法测定可溶性糖摘要：用蒽酮法测定苹果熟果中糖类的含量, 波长620 nm, 检测线性范围0. 01～0. 5 mg / ml, 相关系数为0. 999 3, RSD= 5. 64% 回收率为98. 56%。
此方法操作简便准确、显色灵敏、重现性好、不受还原性物质的干扰。
能测定总糖, 还能测定可溶性糖, 因此适合野生植物中糖类含量测定。
关键词：苹果果肉; 蒽酮法; 可溶性糖; 含量测定糖在浓硫酸作用下，可经脱水反应生成糠醛或羟甲基糠醛，生成的糠醛或羟甲基糠醛可与蒽酮反应生成蓝绿色糠醛衍生物，在一定范围内，颜色的深浅与糖的含量成正比，故可用于糖的定量测定。
该法的特点是几乎可以测定所有的碳水化合物，不但可以测定戊糖与己糖含量，而且可以测所有寡糖类和多糖类，其中包括淀粉、纤维素等（因为反应液中的浓硫酸可以把多糖水解成单糖而发生反应），所以用蒽酮法测出的碳水化合物含量，实际上是溶液中全部可溶性碳水化合物总量。
在没有必要细致划分各种碳水化合物的情况下，用蒽酮法可以一次测出总量，省去许多麻烦，因此，有特殊的应用价值。
但在测定水溶性碳水化合物时，则应注意切勿将样品的未溶解残渣加入反应液中，不然会因为细胞壁中的纤维素、半纤维素等与蒽酮试剂发生反应而增加了测定误差。
此外，不同的糖类与蒽酮试剂的显色深度不同，果糖显色最深，葡萄糖次之，半乳糖、甘露糖较浅，五碳糖显色更浅，故测定糖的混合物时，常因不同糖类的比率不同造成误差，但测定单一糖类时，则可避免此种误差。
糖类与蒽酮反应生成的有色物质在可见光区的吸收峰为620 nm ，故在此波长下进行比色。
一、材料实验材料: 苹果试剂:1. 葡萄糖标准溶液（100 μg/mL ）：准确称取10mg 分析纯无水葡萄糖，溶于蒸馏水并定容至10 mL ，使用时再稀释10 倍（100 μg/mL ）。
2．蒽酮试剂：称取0.1 g 蒽酮，溶于80% 浓硫酸（将98% 浓硫酸稀释，把浓硫酸缓缓加入到蒸馏水中）100mL 中，冷却至室温。
实验一 可溶性糖含量的测定——蒽酮法
实验十二胰岛素、肾上腺素对血糖浓度的影响血糖是指血液中糖，由于正常人血液中糖主要是葡萄糖，所以一般认为，血糖是指血液中的葡萄糖。
正常人空腹血糖浓度为4.4～6.7mmol/L（80～120mg/100ml）。
血糖是糖在体内的运输形式。
全身各组织都从血液中摄取葡萄糖以氧化供能，特别是脑、肾、红细胞、视网膜等组织合成糖原能力极低，几乎没有糖原贮存，必须不断由血液供应葡萄糖。
当血糖下降到一定程度时，就会严重妨碍脑等组织的能量代射，从而影响它们的功能。
所以维持血糖浓度的相对恒定有着重要的临床意义。
血糖浓度的调节血糖浓度能维持相对恒定是由于机体内存在一整套高效率的调节机制，精细地控制着血糖的来源与去路，使之达到动态平衡。
神经系统的调节作用神经系统对血糖浓度的调节作用主要通过下丘脑和自主神经系统对所控制激素的分泌，后者再通过影响血糖来源与去路关键酶的活性来实现。
神经系统的调节最终通过细胞水平的调节来达到目的。
下丘脑一方面通过内脏神经作用于肾上腺髓质，刺激肾上腺素的分泌；另一方面也作用于胰岛α-细胞，使其分泌胰高血糖素；同时还可以直接作用于肝。
三方面共同作用的结果是使肝细胞的磷酸化酶活化，使糖原分解加速；糖异生关键酶的活性增加，糖异生作用增加，从而使血糖浓度升高。
下丘脑还可通过兴奋迷走神经，使胰腺β-细胞分泌胰岛素，同时还可直接作用于肝，使肝细胞内糖原合成酶活化，促进肝糖原的合成；此外还抑制糖异生途径，促进糖的氧化和转化，总体上使血糖的去路增加，来源减少，最终达到使血糖浓度降低的目的。
激素使血糖浓度降低的激素 :胰岛素使血糖浓度升高的激素:胰高血糖素、肾上腺素、肾上腺皮质激素、生长素、甲状腺素它们对血糖的调节主要是通过对糖代谢各主要途径的影响来实现的。
在激素发挥调节血糖浓度的作用中，最重要的是胰岛素和胰高血糖素。
肾上腺素在应激时发挥作用，而肾上腺皮质激素、生长激素、甲状腺素等都可影响血糖水平，但在生理性调节中仅居次要地位。
实验二十一 可溶性总糖的测定(蒽酮比色法)
实验二十一可溶性总糖的测定（蒽酮比色法）一、目的掌握蒽酮法测定可溶性糖含量的原理和方法。
二、原理强酸可使糖类脱水生成糠醛，生成的糠醛或羟甲基糖醛与蒽酮脱水缩合，形成糠醛的衍生物，呈蓝绿色，该物质在 620 nm 处有最大吸收 . 在 10 -100ug 范围内其颜色的深浅与可溶性糖含量成正比。
这一方法有很高的灵敏度，糖含量在 30ug 左右就能进行测定，所以可做为微量测糖之用。
一般样品少的情况下，采用这一方法比较合适。
三、仪器、试剂和材料1 .仪器（ 1) 分光光度计(2 ）电子顶载天平(3 ）三角瓶： 50m1 X 1（ 4 ）大试管： 9 支（ 5) 试管架，试管夹（ 6 ）漏斗，漏斗架（ 7 ）容量瓶： 50rnl X 2（ 8 ）刻度吸管： 1m1X3 ， 2m1X1 ， 5mlX1（ 9 ）水浴锅2 .试剂（ 1) 葡萄糖标准液： l00ug/ml(2 ）浓硫酸(3) 蒽酮试剂 :0.2g 蒽酮溶于 100 ml 浓 H2SO4 中当日配制使用。
3 .材料小麦分蘖节。
四、操作步骤1 .葡萄糖标准曲线的制作取 7 支大试管，按下表数据配制一系列不同浓度的葡萄糖溶液：管号 1 2 3 4 5 6 7葡萄糖标准液（ ml ） 0 0.1 0.2 0.3 0.4 0.6 0.8蒸馏水（ ml ） 1 0.9 0.8 0.7 0.6 0.4 0.2葡萄糖含量（ ug ）0 10 20 30 40 60 80在每支试管中立即加入蒽酮试剂 4.0m1 ，迅速浸于冰水浴中冷却，各管加完后一起浸于沸水浴中，管口加盖玻璃球，以防蒸发。
自水浴重新煮沸起，准确煮沸 l0min 取出，用流水冷却，室温放置 10min ，在 620 nm 波长下比色。
以标准葡萄糖含量（ ug) 作横坐标，以吸光值作纵坐标，作出标准曲线。
2 .植物样品中可溶性糖的提取将小麦分蘖节剪碎至 2mm 以下，准确称取 Ig, 放入 50m1 三角瓶中，加沸水 25m1 ，在水浴中加盖煮沸10min ，冷却后过滤，滤液收集在 50m1 容量瓶中，定容至刻度。
实验8可溶性总糖的测定蒽酮法
实验8-可溶性总糖的测定(蒽酮法) 蒽酮法是一种常用的测定可溶性总糖的方法，其基本原理是糖类在强酸环境中与蒽酮反应生成蓝色化合物，该化合物的吸光度与糖含量成正比，因此可以通过测定吸光度来计算糖含量。
下面我们来详细了解一下实验步骤和注意事项。
一、实验原理蒽酮法测定可溶性总糖的原理是糖类在强酸环境中与蒽酮反应生成蓝色化合物，该化合物的吸光度与糖含量成正比。
在一定的范围内，溶液的吸光度与糖含量成正比，因此可以通过测定吸光度来计算糖含量。
该方法的优点是灵敏度高、准确性好、操作简单、干扰因素少。
二、实验步骤1.准备试剂和仪器试剂：蒸馏水、葡萄糖标准溶液（已知浓度）、待测溶液、蒽酮、浓硫酸。
仪器：电子天平、电热恒温水浴锅、分光光度计、容量瓶、移液管、试管、滴管、冰块等。
2.配制工作曲线（1）用移液管吸取葡萄糖标准溶液100μL，将其加入10个试管中。
（2）用移液管分别吸取蒸馏水1.0、2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、10.0mL，分别加入上述试管中，并加入蒸馏水至总体积为10mL。
（3）向每个试管中加入1.0mL蒽酮溶液，迅速混匀。
（4）向每个试管中加入浓硫酸5.0mL，迅速混匀。
（5）将试管放置在冰水浴中静置10min，使反应完全。
（6）从冰水浴中取出试管，在室温下放置10min，使溶液温度恢复到室温。
（7）用分光光度计测定各试管中溶液的吸光度（波长为625nm）。
（8）以吸光度为纵坐标，葡萄糖浓度为横坐标绘制工作曲线。
3.测定待测溶液的浓度（1）用移液管吸取待测溶液100μL，将其加入试管中。
（2）向试管中加入蒸馏水至总体积为10mL。
（3）按照步骤2.3~2.7进行操作，测定待测溶液的吸光度。
（4）根据工作曲线查得待测溶液的浓度。
4.计算待测溶液中可溶性总糖的含量可溶性总糖含量（mg/mL）= 查得浓度× 稀释倍数三、注意事项1.实验过程中要避免阳光直射，以免影响实验结果。
蒽酮比色法测可溶性糖
蒽酮比色法测可溶性糖一、实验目的1.1学习分光光度法的基本原理1.2学习对水果中糖含量进行测定的方法二、实验原理2.1分光光度法基本原理物质对光吸收的定量关系很早就受到了科学家的注意并进行了研究。
皮埃尔·布格（Pierre Bouguer）和约翰·海因里希·朗伯（Johann Heinrich Lambert）分别在1729年和1760年阐明了物质对光的吸收程度和吸收介质厚度之间的关系；1852年奥古斯特·比尔（August Beer）又提出光的吸收程度和吸光物质浓度也具有类似关系，两者结合起来就得到有关光吸收的基本定律——布格－朗伯－比尔定律，简称比尔－朗伯定律。
溶液中的物质在光的照射激发下，产生对光的吸收效应，不同的物质具有各自选择性的吸收光谱，因此，当某单色光通过溶液时，能量会被吸收而减弱，光能量减弱的程度和物质浓度有一定比例关系，即符合于比色原理——比尔定律。
朗伯-比尔定律：A=lg(1/T)=KbcA：为吸光度；T：为透射比,是投射光强度比上入射光强度；K: 摩尔吸收系数。
它与吸收物质的性质及入射光的波长λ有关；c：为吸光物质的浓度；b：为吸收层厚度；物理意义：是当一束平行单色光垂直通过某一均匀非散射的西光物质时,起其吸光度A与吸光物质的浓度c及吸收层厚度b 成正比。
2.2蒽酮比色法原理蒽酮比色法是一个快速而简便的定糖方法。
蒽酮可以和游离的己糖或多糖中的己糖基，戊醛糖及己糖醛酸反应，反应后溶液呈蓝绿色，在620nm处有最大吸收。
蒽酮可与其他一些糖类发生反应，但显现的颜色不同。
当样品中存有含较多色氨酸的蛋白质时，反应不稳定，呈现红色。
对于特定的糖类，反应较稳定。
本法多用于测定糖原含量，亦可用于测定葡萄糖含量。
三、实验试剂3.1蒽酮试剂：取0.2g蒽酮溶于100mL 80%(V/V)硫酸中，硫酸当日配制使用；3.2标准葡萄糖溶液(0.1mg/mL)：可滴加几滴甲苯作防腐剂；3.3糖样品溶液四、实验操作步骤4.1制作标准曲线：取干试管5支，依次加入标准糖溶液0mL，0.1mL，0.2mL，0.4mL，0.8mL并依次用蒸馏水补足体积到1mL，各管均加入蒽酮试剂4mL，震摇混匀。
实验8-可溶性总糖的测定(蒽酮法)
3、结果计算
(C×V×n)
植物样品含糖量（％）＝
×100
(a×W×106)
C-糖含量（μg）； V-提取液体积（ml） a-吸取样品液体积（ml）；n-稀释倍数 W-样品重（g）
含糖总量一般为：2.1—20%
五、实验思考
P114：
2
下周实验：P167
植物组织中过氧化氢酶活性
测定（高锰酸钾滴定法）
实验9 可溶性总糖的测定(蒽酮法)
一、实验目的
掌握蒽酮法测定可溶性糖含量 的原理和方法。
二、实验原理
强酸可使糖类脱水成糖醛或羟甲基糖醛，生 成的糖醛或羟甲基糖醛与蒽酮脱水缩合，形成 糖醛的衍生物，呈蓝绿色，该物质在630nm处有 最大吸收。在10－100μg范围内其颜色的深浅 与可溶性糖含量成正比。 这一方法有很高的灵敏度，糖含量在３0μg 左右就能进行测定，所以可做为微量测糖之用。 一般样品少的情况下，采用这一方法比较合适。
2、蔗糖标准曲线的制作
（1）取6支大试管，按下表数据配制一系列不同浓度 的蔗糖溶液：
管号
水（ml） 蔗糖含量（μg）
0
2 0
1
0.2 1.8 20
2
0.4 1.6 40
ห้องสมุดไป่ตู้
3
0.6 1.4 60
4
0.8 1.2 80
5
1.0 1.0 100
100ug/L蔗糖标准液（ml） 0
（2）在每支试管中立即加入蒽酮乙酸乙酯试剂0.5ml 和5ml浓硫酸，混匀，盖上塞子，沸水浴中准确保温 1min取出，自然冷却至室温，在630nm波长下比色。 以标准蔗糖含量作横坐标，以吸光值作纵坐标作标 准曲线。
三、实验器材
苹果可溶性糖含量测定生化实验大赛
不同品种苹果中可溶性糖含量的测定摘要随着生活水平的提高，人们越来越追求健康、优质的生活，而水果便成为人们日常生活的必需品，被誉为“水果之王”的苹果自然而然的成为了人们争相购买的首选。
而苹果中可溶性糖含量又可以作为衡量其品质的标准之一。
本实验通过分析几种品种苹果组织中可溶性糖含量，对我们挑选苹果有一定的帮助作用，从而确定适合个人的水果。
关键词不同品种苹果可溶性糖蒽酮法分光光度法标准曲线1、前言苹果(Malus pumila)，属于蔷薇科（Rosaceae)大宗水果，不仅是我国最主要的果品，也是世界上种植最广、产量最多的果品。
其味道酸甜适口，营养丰富。
据测定，每百克苹果含果糖6.5～11.2克，葡萄糖2.5～3.5克，蔗糖1.0～5.2克；还含有微量元素锌、钙、磷、铁、钾及维生素B1、维生素B2、维生素C和胡萝卜素等美国流传一种说法：“An apple a day keeps the doctor away.一天一苹果，医生远离我。
”。
此话虽然有些夸张，但苹果的营养和药用价值由此可窥见一斑。
又因苹果所含的营养既全面又易被人体消化吸苹果有“智慧果”、“记忆果”的美称。
人们早就发现，多吃苹果有增进记忆、提高智能的效果。
苹果不仅含有丰富的糖、维生素和矿物质等大脑必需的营养素。
所以，非常适合婴幼儿、老人和病人食用。
苹果功效与作用：1、苹果具有降低胆固醇含量的功效作用2、苹果的还具有通便和止泻的双重功效与作用3、苹果有降低血压的作用2、实验目的2.1掌握蒽酮法定量测定可溶性糖的原理和方法。
2.2掌握分光光度计的使用。
2.3植物体内的碳素营养状况以及农产品的品质性状，常以可溶性糖的含量作为重要指标。
通过综合整理生化实验中含量测量的各种方法，设计相关实验步骤，进一步掌握理解实验原理，提高科技创新思维能力，锻炼实验操作能力。
2.4通过相关实验分析不同水果组织中可溶性糖含量，了解不同水果可溶性糖含量的不同对我们挑选水果有一定的帮助作用，从而确定适合个人的水果。