化妆品微生物五项检测

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铜绿假单胞菌 检验操作流程
未检出2天，检出4天
铜绿假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa）属于假
单胞菌属，为革兰氏阴性杆菌，氧化酶阳性，能产生绿 脓菌素。此外还能液化明胶，还原硝酸盐为亚硝酸盐， 在 42℃±1℃条件下能生长。
该菌对人有致病力，可使伤处化脓，引起败血 症等。在自然界中分布甚广，空气、水、土壤
菌落总数的测定便于判明样品被细菌污染的程度，是对样品 进行卫生学总评价的综合依据。
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测试流程
Βιβλιοθήκη Baidu
48小时出结果（30-300）：
供试液 的制备
混合平板 的制备
细菌的培 养
书写检验 记录单
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数据 处理
3
检查结果、 观察与计数
TTC亦不可多加会抑制菌落生长
为便于区别化妆品中的颗粒与菌落，可在每 100mL 卵磷脂 吐温 80 营养琼脂中加入 1mL 0.5％的 TTC 溶液，如有细菌 存在，培养后菌落呈红色，而化妆品的颗粒颜色无变化。
革兰染色、镜检→ 氧化酶试验 绿脓菌素试验
生化试验 硝酸盐还原试验 42℃生长试验 明胶液化试验
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黄绿色 菌膜
灰白色 湿润
十六烷三甲基溴化铵平板
粉红/ 紫红色
SCDLP培养基
氧化酶试验
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盐酸层呈粉紫色 氯仿层呈蓝绿色
绿脓菌素试验
明胶液化 试验
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N2
硝酸盐还原产气试验 明胶液化 明胶培养基（高层）
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结果报告
被检样品经增菌分离培养后，经证实为革兰氏阴性杆 菌，氧化酶及绿脓菌素试验皆为阳性者，即可报告被 检样品中检出铜绿假单胞菌；如绿脓菌素试验阴性而 液化明胶、硝酸盐还原产气和42℃生长试验三者皆为 阳性时，仍可报告被检样品中检出铜绿假单胞菌。
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金黄色葡萄球菌 检验操作流程
未检出2天，检出3天
金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）为革兰氏阳
性球菌，呈葡萄状排列，无芽胞，无荚膜，能分解甘露 醇，血浆凝固酶阳性。
该菌是葡萄球菌中对人类致病力最强的一种， 能引起人体局部化脓性病灶，严重时可导致 败血症。
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SCDLP培养基或 7.5%NaCl肉汤
配培 养基 和稀 释液
Baird Parker’s平板
血浆凝固酶试验
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血浆凝块
甘露醇高盐琼脂
液态血浆
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结果报告
凡在上述选择平板上有可疑菌落生长，经染色镜检， 证明为革兰氏阳性葡萄球菌，并能发酵甘露醇产酸， 血浆凝固酶试验阳性者，可报告被检样品检出金黄色 葡萄球菌。
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霉菌和酵母菌 检验操作流程
霉菌和酵母菌数测定（Determination of molds and yeast count）化妆品检样在一定条件下培养后，1g或 1mL化妆品中所污染的活的霉菌和酵母菌数量，以判 明化妆品被霉菌和酵母菌污染程度及其一般卫生状况。
供试 液的 制备
增
菌 44.5±0.5℃ 检查
培 养
24-48h
结果 判断
不产酸不产气
书写检验 记录单
最终结 果判断
★粪大肠菌群检查流程图 7
分离培养
产酸产气
36±1 ℃
18~24h
蛋白胨水
培养
特
44.5±0.5℃ 24±2h
征 菌
落 靛基质
液面玫瑰红色
紫黑色
结果报告
根据发酵乳糖产酸产气，平 板上有典型菌落，并经证实 为革兰氏阴性短杆菌，靛基 质试验阳性，则可报告被检 样品中检出耐热大肠菌群。
化妆品微生物五项检验
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1
菌落总数检验
菌落总数（Aerobic bacterial count）：化妆品检样经过处理，
在一定条件下培养后（如培养基成分、培养温度、培养时间、 pH值、需氧性质等），1g（1mL）检样中所含菌落的总数。所 得结果只包括一群本方法规定的条件下生长的嗜中温的需氧性 和兼性厌氧菌落总数。
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SCDLP培养基
配培 养基 和稀 释液
供试 液的 制备
十六烷三甲基 溴化铵琼脂
增
菌 18~24h 培 36±1℃ 养
分 离 18~24h 纯 36±1℃ 化
无菌落或无特征菌落
灰白色、扁 平、周围有 水溶性蓝绿 色素
特征菌落
镜检
书写检验 记录单
最终结 果判断
精★选ppt铜绿假单胞菌检查流程图
一群需氧及兼性厌氧革兰氏阴性无芽胞杆菌，在 44.5℃培养24h—48h能发酵乳糖产酸并产气。
该菌主要来自人和温血动物粪便，可作为粪便污染指标 来评价化妆品的卫生质量, 推断化妆品中有否污染肠道 致病菌的可能。
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6
双倍胆盐乳糖
产酸：黄色 产气：气泡
EMB琼脂
镜检
配培 养基 和稀 释液
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4
接种阳性菌计算回收率
推荐了解：
人员培训能力掌握的检验重要指标。
有条件可做视具体样品测试结果。
在膏霜类化妆品中,微生物都是吸附或附着于颗粒状 的原料中,检测时不易洗脱下来,因此,需要验证检测方 法的有效性。
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5
耐热大肠菌群 检验操作流程
未检出2天，检出3-4天
耐热大肠菌群 Thermotolerant coliform bacteria系
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常规洁净工作台设置
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21
目前大部分微生物实验室布局
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人员操作方面： 无菌操作，避免污染； 一定专业技术或工作经验（招聘与外部审核时） 相互协作； 测试结果的证明。
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日常维护： 设备的计量与保证； 超净台及时清洁与杀菌（操作前后半小时）； 检验后材料的及时处理； 环境卫生（沉降菌的检测每周）。
供试 品的 处理
耐盐分
Baird Parker’s 或血琼脂
增 菌 24±2h 培 36±1℃ 养
分
离 24~48h 纯 36±1℃ 化
镜检
特征菌落
无菌落或无特征菌落
书写检验 记录单
最终结 果判断
革兰染色、镜检→ 生化试验:血浆凝固酶试验
甘露醇发酵试验
金黄色葡萄球菌检查流程图
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灰/黑色
本方法根据霉菌和酵母菌特有的形态和培养特性，在虎 红培养基上，置28℃±2℃培养5d，计算所生长的霉菌 和酵母菌数。（5-50）
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革兰氏染色操作流程
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保证检验结果正确
设备： 恒温培养设备 高压灭菌器（验证） 超净工作台（生物安全柜） 均质器(旋涡混合器) 天平（0.1g） 显微镜（可要可不要无硬性要求）