ATCC菌种活化方法
菌种活化_操作方法
低温保存管（cryotube）中之一般菌种临时存放及活化A. 低温保存管之临时存放及解冻1. 低温保存管（cryotube）应存放于－20℃ ~ －80℃之低温条件下。
2. 准备 37℃之 70﹪（V/V）酒精浴槽（只能在电气水浴槽中改放酒精，不可以火加温，以免危险；若以 37℃水浴取代，应避免水中微生物污染），其中事先安放小试管架（可放置 cryotube 之大小），液面不可高达管塞。
3. 将 cryotube 从低温保存条件中取出，置于 37℃浴槽之小试管架上。
4. 不断轻微摇动 cryotube，液面不可高至管塞，直至结冰完全溶解（约需 2 分钟）。
B. 菌株活化: 在无菌操作下1. 用无菌微量吸管，从已溶解之 cryotube 吸取 50 ?l（或 1 ~ 2 滴）之菌液，滴入固态指定培养基(培养基编号及温度示于菌株订购单)某一边缘附近，以划线法接种于培养基。
2. 将接种好的培养基置于指定温度的培养箱中培养。
C. 划线法1. 手持金属接种环，用酒精灯将接种环（共约 5 公分）烧至火红，并不断来回烧烤金属固定杆之前约 10 公分，等待约 10 秒钟，将接种环前端轻触培养基边缘凝胶（无菌体部份），待接种环完全冷却后，以环沾黏菌滴，由培养基边缘向中央轻轻横划紧接的并行线，直到涵盖 1/3 培养基为止（I 区）。
2. 灼烧接种环，待数秒冷却后，旋转培养基自 I 区涂布的边缘再横划数条线到未接种的区域（II 区）。
3. 重复 2. 的动作完成 III 区与 IV 区。
4. 灼烧接种环，将接种环归位。
D. 图示（1）金属接种环（2）平板划线法冷冻干燥管之开管说明下列步骤请在无菌环境下操作：1、以沾有70%酒精的棉花，擦拭外管，在火焰上加热外管之尖端。
2、滴数滴无菌水于加热处，使外管破裂，再以硬棒敲破尖端。
3、取出隔热纤维纸和内管，以灭菌过的镊子取出内管之棉塞。
4、( a ) 适用于细菌用无菌吸管，吸取0.3-0.5 ml指定之液体培养基，滴入内管内，并轻微震荡（可用该吸管协助），直到均匀悬浮。
ATCC15834发根农杆菌使用说明
（必要时，可适当延长培养时间）。
菌 株 传 代 ：
将得到的菌株的新鲜培养物转接到适宜的固体培养基及液体培养基中（尽量
增大接种量：如用无菌吸管吸取≥50μl 新鲜培养物至固体培养基，边移动边缓
慢释放），适宜温度下培养，用以菌株的保藏、传代及制备工作菌株。
面蘸取少量涂板或进行液体培养即可。也可以完全融解后使用，但随着冻融次数
的增加，细菌的活力会逐渐下降。
2，为保证菌种纯正，避免其它细菌污染，尽量先划平板，然后再挑单克隆
菌落进行后续操作。
冷 冻 管 开 封 ：
用浸过 75%酒精的脱脂棉严格消毒冷冻管盖。
ATCC15834 发根农杆菌
编号
名称
北京华越洋生物 NRR01170 ATCC15834 发根农杆菌
基 本 信 息 ：
名称：ATCC15834 发根农杆菌
规格：300ul 甘油菌
储 存 温 度 ： -‐80℃
简 介 ：
注 意 事 项 ：
1、菌种活化前，将冷冻管保存在低温、清洁、干燥的环境中，长时间室温下放
置会导致菌种衰退；
2、冷冻管开封、冻干粉复溶、菌株恢复培养等操作应在无菌条件下进行；
3、一些菌种经过冷冻干燥保存后，延迟期较长，部分需连续两次继代培养才能
正常生长；
4、苛养菌的培养需采用含特定营养成分的培养基，敬请正确选择，不清楚时来
菌 株 复 溶 ：
无菌环境中旋开装有复溶液的滴瓶盖，吸取 1ml 左右复溶液，加入到冷冻
管中。轻轻振荡，使冻干菌株溶解呈悬浮状。
菌株复壮：
用无菌吸管吸取菌悬液，转移到复溶液滴瓶中。做好标识，在适宜温度下培
养。细菌在 30-‐35℃培养箱中培养 24-‐48h，真菌在 23-
atcc标准菌株说明书
atcc标准菌株说明书
1、ATCC菌种批号说明:菌名称简称的拼音首字母+转种日期-代数-编号。
2、菌株每转种一次即增加一代，实验用应控制在五代以内。
3、购买菌株后，立即进行转种，不宜长期冷藏保存。
4、转种方式:
普通菌斜面:用接种环挑取斜面上的菌落，转种至适宜的液体培养基中，按药典规定的时间培养后，将液体培养物分装至无菌冻存管中，每支 1.5~2.0ml，冰箱冷冻(-20°℃)保存。
每次实验取一支转种后使用。
如:生孢梭菌:将小管中液体培养物接入硫乙醇酸盐液体培养基中，ATCC菌种按药典规定的时间培养后，将液体培养物分装至无菌冻存管中，每支1.5~2.0ml，冰箱冷冻(-20℃)保存。
每次实验取一支转种后使用。
黑曲霉:用接种环蘸取小管中孢子悬液，并涂布至改良马丁琼脂斜面上，培养1周后，按药典方法将孢子洗下，孢子悬液冰箱冷藏(4℃)保存。
实验时可直接取该悬液稀释至合适的级别后使用。
5、转种的液体培养基体积推荐为100ml，可分装约40~50支无菌冻存管，平时使用时应定期进行菌株的鉴定，若菌落形态不典型或特征反应不明显，说明该ATCC菌种已不适宜继续使用，应销毁后购买新菌株。
活化菌种的方法
活化菌种的方法菌种的活化是指将冷冻、干燥或其他方式保存的菌种重新复苏，使其具有生物活性和生长能力的过程。
活化菌种的方法有很多种，根据菌种的特点和保存方式的不同，选择不同的方法进行活化。
本文将介绍几种常见的活化菌种的方法。
一、液体培养法液体培养法是一种简单、易操作的活化菌种方法。
首先将保存的菌种接种到含有适当营养成分的液体培养基中，然后在适当的温度、湿度和通气条件下培养。
液体培养法的优点是适用范围广，可以用于多种菌种的活化，且容易控制生长条件，可以获得较高的活化率。
但液体培养法需要较长的时间才能获得足够的活化菌种，而且需要较大的培养设备和操作空间。
二、固体培养法固体培养法是将保存的菌种接种到含有适当营养成分的固体培养基上，然后在适当的温度、湿度和通气条件下培养。
固体培养法的优点是可以获得单个菌落，可以对菌株进行纯化和鉴定。
但固体培养法的缺点是需要较长时间才能获得足够的活化菌种，而且需要较大的培养设备和操作空间。
三、滴定法滴定法是将保存的菌种加入到含有适当营养成分的液体培养基中，然后逐渐加入新的培养基，使菌株逐渐适应新的环境。
滴定法的优点是可以逐渐适应新的环境，可以获得较高的活化率。
但滴定法需要较长的时间才能获得足够的活化菌种，而且需要较大的培养设备和操作空间。
四、化学处理法化学处理法是利用化学物质对保存的菌种进行处理，使其重新复苏。
常用的化学处理方法包括酸碱处理、渗透压处理、氧化还原处理等。
化学处理法的优点是操作简单，可以获得较高的活化率。
但化学处理法对菌株的适应性要求较高，有可能对菌株造成伤害，影响其生物活性和生长能力。
五、生物处理法生物处理法是利用其他微生物对保存的菌种进行处理，使其重新复苏。
常用的生物处理方法包括共培养法、共生法、共生菌法等。
生物处理法的优点是可以利用其他微生物对菌株进行适应性调节，可以获得较高的活化率。
但生物处理法对微生物的适应性要求较高，且需要较长时间才能获得足够的活化菌种。
ATCC菌种保藏与使用
LYFO DISK 操作流程
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KwikKwik-Stik & Lyfo Disk 推荐生长条件
如何选择最适合的菌种生长条件
1.最初的生长最好是在非选择性琼脂培养基上。 1.最初的生长最好是在非选择性琼脂培养基上。 最初的生长最好是在非选择性琼脂培养基上 除非特殊情况或特别推荐， 除非特殊情况或特别推荐，最初的生长一般不 考虑液体培养基。 考虑液体培养基。这是由于在液体培养基中获 得冻干菌株的纯种比较困难，污染所带来的杂 得冻干菌株的纯种比较困难， 菌可能会过度生长，影响得到目标菌株的纯种。 菌可能会过度生长，影响得到目标菌株的纯种。 2、以下列出可供选择的琼脂培养基和相应的 生长条件，供各实验室培养菌种时参考。 生长条件，供各实验室培养菌种时参考。
方法12 方法12
马铃薯葡萄糖琼脂——55℃ 正常环境，48小 马铃薯葡萄糖琼脂——55℃,正常环境，48小 时。
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简介与说明： 简介与说明：
微生物的长期保存是一个挑战，生物需要低温贮存并 微生物的长期保存是一个挑战， 尽量提供最少干扰的可能性。然而， 尽量提供最少干扰的可能性。然而，Microbank™ 提供了一种保存液来应对对这个问题。 提供了一种保存液来应对对这个问题。
用途： 用途：
标记颜色的25 标记颜色的25 个小珠被包装容纳在包含保存剂的保 存管里，小珠被冲洗和吸附细菌在上面， 存管里，小珠被冲洗和吸附细菌在上面，之后保存管 在贮存期内保持在-70° 当需要培养， 在贮存期内保持在-70°C，当需要培养，单个小珠 很简单的移出保存管，并直接划线在微生物培养基上。 很简单的移出保存管，并直接划线在微生物培养基上。
菌种活化操作步骤
菌种活化操作步骤引言：菌种活化是一项重要的实验室技术，用于使冷冻保存的微生物菌种恢复活力并进行后续研究。
本文将介绍菌种活化的操作步骤，以帮助读者正确进行实验并获得可靠的结果。
一、准备工作1.1 材料准备确保准备好以下实验材料：- 冷冻保存的菌种样本- 无菌培养基- 无菌培养皿或试管- 灭菌的移液器和吸头- 灭菌的培养箱或恒温培养箱- 无菌操作台或洁净工作台1.2 环境准备在进行菌种活化之前，必须确保实验环境的无菌和洁净。
清洁操作台或洁净工作台，并使用适当的消毒剂擦拭工作表面。
同时，确保培养箱或恒温培养箱已经预热到适当的温度。
二、菌种活化步骤2.1 无菌操作在进行菌种活化之前，务必进行无菌操作。
戴上手套，使用灭菌的移液器和吸头，避免任何外界污染。
2.2 菌种接种将冷冻保存的菌种样本取出，迅速将其转移到无菌培养基中。
使用移液器，将适量的菌种悬浮液滴入无菌培养皿或试管中。
确保每个培养皿或试管只接种一种菌种。
2.3 培养条件设置根据菌种的特性，设置适当的培养条件。
这包括温度、pH值、培养基成分等。
将接种好的培养皿或试管放入预热好的培养箱或恒温培养箱中。
2.4 培养过程管理在菌种活化的过程中，需要定期观察和管理培养过程。
这包括检查培养皿或试管中的菌落形态和生长情况，以及调整培养条件，如温度和培养基的补充。
2.5 菌种分离与保存当菌种活化成功后，可以进行菌种分离和保存。
使用无菌技术，将菌落转移到新的培养皿或试管中，并进行进一步的鉴定和研究。
同时，将一部分菌种保存在冷冻条件下，以备将来使用。
结论：菌种活化是一项关键的实验技术，为后续的微生物研究提供了可靠的菌种资源。
通过正确的操作步骤，可以成功地活化冷冻保存的菌种，并获得可靠的实验结果。
在进行菌种活化实验时，务必遵循无菌操作规范，并根据菌种的特性进行适当的培养条件设置和管理。
这将有助于保证实验的准确性和可重复性，为微生物研究提供坚实的基础。
atcc 0代菌种标准
ATCC 0代菌种标准一、菌种识别ATCC 0代菌种是指由美国菌种保藏中心（ATCC）保存的、具有特定基因型和表型特征的微生物菌种。
在菌种识别方面，ATCC 0代菌种的标准包括：1.微生物分类学鉴定：通过形态学、生理学和分子生物学等方法对菌种进行分类学鉴定，确保其属于正确的物种。
2.基因型特征：通过基因测序、PCR等方法确定菌种的基因型特征，以确保其与所保藏的菌种一致。
3.表型特征：观察菌种的表型特征，如形态、大小、颜色、运动性等，以确保其与所保藏的菌种一致。
二、培养条件ATCC 0代菌种的培养条件应符合微生物培养的基本要求，包括培养基、温度、湿度、气体环境等。
具体培养条件应根据不同菌种的要求进行设置。
在培养条件方面，ATCC 0代菌种的标准包括：1.培养基：选择适宜的培养基，以支持菌种的生长和繁殖。
培养基的成分和制备方法应根据不同菌种的要求进行选择和制备。
2.温度：控制培养温度，以支持菌种的生长和繁殖。
不同菌种所需的温度条件可能不同，应根据菌种的要求进行设置。
3.湿度：控制培养湿度，以支持菌种的生长和繁殖。
不同菌种所需的湿度条件可能不同，应根据菌种的要求进行设置。
4.气体环境：控制培养气体环境，以支持菌种的生长和繁殖。
不同菌种所需的气体环境可能不同，应根据菌种的要求进行设置。
三、基因型和表型特征ATCC 0代菌种应具有特定的基因型和表型特征，这些特征是鉴别和区分不同菌种的标志。
在基因型和表型特征方面，ATCC 0代菌种的标准包括：1.基因型特征：确定菌种的基因型特征，包括染色体序列、质粒序列等，以确保其与所保藏的菌种一致。
2.表型特征：观察菌种的表型特征，如形态、大小、颜色、运动性等，以确保其与所保藏的菌种一致。
四、质量控制为了确保ATCC 0代菌种的质量和稳定性，需要进行质量控制。
质量控制包括定期进行菌种鉴定、培养条件检测、基因型和表型特征观察等。
在质量控制方面，ATCC 0代菌种的标准包括：1.菌种鉴定：定期进行微生物分类学鉴定，以确保菌种的纯度和身份。
菌种活化的操作方法
菌种活化的操作方法
菌种活化的操作方法包括以下几个步骤：
1. 选择合适的培养基：根据菌种的特性选择适合它生长和繁殖的培养基，例如普通营养琼脂培养基、选择性琼脂培养基等。
2. 预处理培养基：将培养基加热至融化状态后，待其降温至大约45-50摄氏度时，加入适量的菌种悬浮液。
3. 均匀混合：用铁线或玻璃棒将菌液和培养基充分混合均匀。
4. 倒入培养器：将混合后的培养基倒入培养器（如琼脂培养皿或试管）中，使其均匀覆盖整个培养器底部。
5. 固化培养基：让培养器中的培养基自然凝固，或者将其放置在恒温箱中以加速凝固。
6. 培养：将已固化的培养基置于适当的环境中，如温度、湿度等适宜的条件下培养。
7. 观察生长情况：根据菌种的特性和培养的要求，定期观察并记录菌种的生长情况，如菌落形态、颜色等。
需要注意的是，不同的菌种可能有不同的活化方法，因此在操作前最好查阅相关的文献资料，或者咨询专业人员的建议。
此外，操作时要保持清洁，避免外界微生物的污染。
分享你需要知道的标准菌株的活化方法！
分享你需要知道的标准菌株的活化方法！食品实验室服务实验室必须保存有满足试验需要的标准菌种/菌株，除检测方法（如药物敏感试验、抗菌性能测试）中规定的菌株外，还应包括应用于培养基（试剂）验收/质量控制、方法确认/证实、阳性对照、阴性对照、人员培训考核和结果质量的保证等所需的菌株。
并且标准菌种必须从认可的菌种或标本收集途径获得。
▲CNAS-CL09-2013《检测和校准实验室能力认可准则在微生物检测领域的应用说明》常用标准菌种来源美国菌种保藏中心ATCC英国国家典型菌株保藏中心NCTC中国医学细菌保藏管理中心CMCC中国工业微生物菌种保藏管理中心CICC▲ ATCC和CICC标准菌种的常见包装形式接下来一起了解下标准菌株的活化方法ATCC标准菌种KWIK-STIK TM产品的活化说明将KWIK-STIKTM产品平衡至室温，撕开袋子。
取出菌种管，揭下标签上可撕取部分，贴于原始培养皿或QC记录本上。
捏碎管帽处的安瓿，使其释放出液体，将管子直立以使液体流入管底。
挤压管底的菌球，使之与液体混合，以形成均匀的菌悬液。
将棉签浸于菌悬液中，并于培养皿约三分之一范围内轻轻挤压并旋转涂抹。
使用无菌接种环进行三区或四区划线，以尽可能分离出单菌落。
随即在适合的温度和条件下倒置培养已接种的原始培养皿。
按照适宜的生物危害品处置方法（如121℃高压30 min），丢弃菌种管。
▲ ATCC标准菌株KWIK-STIK TM产品操作说明CICC标准菌种的操作说明使用酒精棉球擦拭冻干菌种管表面进行消毒。
将冻干管顶端置于酒精灯火焰上均匀加热约1~2分钟。
立即滴2~3滴无菌水于加热部位，使管壁破裂。
使用镊子或剪刀敲击裂痕处，将管顶端敲落。
吸取约0.5mL液体培养基于冻干管中，将冻干菌粉充分溶解。
取0.2mL菌悬液转移至装有5mL~8mL液体培养基的试管中混匀，并取0.1mL菌悬液转移至平板培养基上，进行划线分离。
将液体培养基和平板培养基置于合适条件下培养。
如何复苏ATCC的菌株
如何复苏ATCC的菌株之前我们为大家介绍过如何复苏ATCC细胞，这次该轮到菌株了。
ATCC的菌株有冻干粉和冰冻两种形式。
千里之行始于足下，如何正确的复苏就是成功的关键，小编今天就和你仔细唠一唠。
复苏冰冻的细菌1.先准备好细菌培养的无菌试管，及产品说明书推荐的相应细菌培养基。
在试管中装入适量配好的培养基，并置于培育箱以平衡温度和pH值。
2.将冻存管置于水浴中并轻微的搅拌以帮助解冻。
水浴温度设定与该细菌的培养温度一致。
解冻过程应该尽快，大约2分钟或待最后一块小冰晶体刚融化，就应将细菌冻存管取出水浴。
3.在从水浴中取出的冻存管表面喷洒70%乙醇配制的消毒剂，用无菌纸巾或纱布试干。
之后的操作步骤都应该遵循在无菌条件下严格操作。
4.小心拧开冻存管的顶部，将管内容物用移液枪转移到含适量培养基的无菌培养试管。
可制备额外的培养试管。
从第一个培养接种管中取0.5毫升混匀的培养物，转移到其他备好的培养试管。
5.在产品说明书推荐的适当温度和条件下进行细菌培养。
6.在产品说明书推荐的培养时间下观察细菌的生长状况。
不同细菌菌株的具体培养时间会有不同，请依照产品说明书列出的细菌培养条件和时间。
(请参阅:*注1)复苏冻干的细菌1.使用吸管或移液枪,在无菌冻干物中加入0.5毫升备好的产品说明书所推荐的生长培养基，并进行混匀。
2.将全部混合物转移到装有5到6毫升培养基的无菌培养试管中。
此外，滴入几滴混合物到琼脂培养皿斜面作培养。
3.可制备额外的培养试管。
从第一个培养接种管中取0.5毫升混匀的培养物，转移到其他备好的培养试管。
在产品说明书推荐的适当温度和空气条件进行细菌培养。
4.在产品说明推荐书的培养时间下观察细菌的生长状况。
不同细菌菌株的具体培养时间会有不同，请依照产品说明书列出的细菌培养条件和时间。
大部分细菌在几天内会从冻干状态复苏生长。
(请参阅:*注1)*注1:从冷冻或冻干状态恢复，某些细菌菌株可能会出现较长时间的迟滞期。
这些菌株可能需要延长培养时间。
atcc标准菌株
atcc标准菌株ATCC标准菌株。
ATCC（American Type Culture Collection）是世界上最大的生物资源中心之一，其收藏了大量的细菌、真菌、细胞系和病毒等生物资源。
ATCC标准菌株是指经过ATCC认证并且具有标准化特性的菌株，被广泛应用于科研、医学、工业生产等领域。
本文将介绍ATCC标准菌株的特点、应用及其在科研和生产中的重要性。
ATCC标准菌株的特点。
ATCC标准菌株具有以下特点，首先，具有明确定义的鉴定特性，包括形态学特征、生理生化特性、遗传特性等，可以确保菌株的可追溯性和可重复性。
其次，经过严格的质量控制和检测，确保了菌株的纯度和稳定性。
再次，ATCC标准菌株的来源信息齐全，包括菌株的来源、分离和鉴定方法等，为用户提供了可靠的参考依据。
最后，ATCC标准菌株的保存条件和使用方法均经过标准化处理，便于用户在科研和生产中的应用。
ATCC标准菌株的应用。
ATCC标准菌株在科研和生产中具有广泛的应用价值。
在科研领域，ATCC标准菌株被广泛应用于微生物学、生物学、医学等领域的基础研究。
例如，研究人员可以利用ATCC标准菌株进行微生物的分类鉴定、生物活性物质的筛选和鉴定、疾病模型的建立等研究工作。
在生产领域，ATCC标准菌株也被广泛应用于药品、食品、化妆品等产品的研发和生产过程中。
例如，制药企业可以利用ATCC标准菌株进行药物的药效学评价、微生物发酵生产等工作。
ATCC标准菌株在科研和生产中的重要性。
ATCC标准菌株在科研和生产中具有重要的意义。
首先，ATCC标准菌株的标准化特性和质量保证，为科研和生产提供了可靠的工具和保障。
其次，ATCC标准菌株的广泛应用，促进了不同领域之间的交叉和融合，推动了科研和生产的进步和发展。
再次，ATCC标准菌株的共享和交流，有利于加强国际间的合作和交流，促进了全球生物资源的共享和可持续利用。
最后，ATCC标准菌株的应用，为新药研发、食品安全、环境保护等领域提供了重要的支持和保障。
巴氏芽孢杆菌 ATCC11859
菌种说明
一菌种简介
菌种名称巴氏芽孢杆菌
编号ATCC11859
规格冻干粉
菌种主要应用
二保存条件
斜面、穿刺菌和冻干粉应在4-10度保存，甘油菌在-80度保存。
三培养条件
培养基CASO AGAR+尿素（20g/L）
培养温度28-30度
培养时间1-2天
培养条件需氧培养
四活化步骤
冻干粉首次活化，将菌粉甩至底部，将尖头一侧用酒精消毒后敲开，取0.2-0.3ml溶解液加入至菌种管中，轻轻弹至菌粉混合均匀，用无菌吸头全部吸出溶解液，全部接种至2支斜面上培养。
注意真空菌种管一旦敲开里面的冻干粉就必须全部被用掉，留着也没用。
五注意事项1 微生物菌种应保存于低温、清洁和干燥的地方，室温放置时间过长会导致菌种衰退；
2 菌种操作在无菌条件下进行，接种完毕应该灭菌再做丢弃处理；
3 斜面菌种和穿刺菌种保存时间通常为3-6个月，应根据菌种状况及时结转；冻干粉保存时间通常是2-25年；甘油菌保存时间为2-5年。
CASO AGAR+尿素（20g/L）：
Pepton from casein 15g
Pepton from soymeal 5g
NaCl 5g
Agar 20g
ddH2O 900mL
用1 M的氢氧化钠调节pH至7.3.
121度灭菌15min后加入过滤灭菌的20%尿素溶液100ml.
注意：因尿素不可高压灭菌，需灭菌后加入培养基中。
尿素配置成20%浓度，经过滤灭菌，待上述培养基灭菌后温度降至60度左右后加入100ml 20%尿素混匀。
关于菌种活化知识点总结
一、菌种活化的原理和方法1.原理菌种活化的原理是通过特定的方法对微生物菌株进行处理，改善其生长环境和代谢活动，提高其生理功能和应用性能。
菌种活化的关键是创造一个有利于微生物生长和活性的环境，促进微生物的代谢活动和生长繁殖。
2.方法菌种活化的方法主要包括以下几种：(1) 培养基优化：改良培养基的配方，提供适宜的营养物质、微量元素和pH值，创造一个有利于菌株生长和代谢的环境；(2) 激活培养：通过操作改变培养条件，如温度、氧气含量、光照等，刺激微生物的生理活性和代谢活动；(3) 生物激素处理：利用一定的生物激素或生长因子来刺激微生物的生长和代谢活动；(4) 培养基添加：在培养基中添加一些特定的辅助物质，如细胞因子、氨基酸等，促进微生物的生长和代谢活动；(5) 抗生素处理：在一定的浓度范围内添加抗生素，抑制一些有害细菌的生长，保护有益微生物的生长环境；(6) 培养温度控制：控制培养温度，促进微生物的生长和代谢活动。
二、菌种活化的应用菌种活化技术具有广泛的应用价值，主要体现在以下几个方面：1. 环境保护和修复：菌种活化技术可用于土壤修复、水体净化、废水处理等环境保护和修复工作，促进有益微生物的生长和活性，加速污染物的降解和清除；2. 生物农药和生物肥料：菌种活化技术可用于生产高效、低毒的生物农药和生物肥料，提高其杀菌、杀虫活性和利用率，减少对环境和人体的危害；3. 食品加工和酿造：菌种活化技术可用于食品发酵和酿造工艺中，提高微生物的代谢产物质量和产量，改善产品口感和品质；4. 医药和保健品：菌种活化技术可用于生产保健品和药物中，提高药物的活性和利用率，加快药效，降低副作用。
随着现代科学技术的不断发展，菌种活化技术也将会有更广阔的发展空间和应用前景，主要体现在以下几个方面：1. 专业化和精细化：菌种活化技术将更加专业化和精细化，针对不同的微生物菌株和应用领域，开发出更加精准和有效的活化方法和配方；2. 生物工程技术：菌种活化将会与生物工程技术相结合，通过改造菌株的基因、调控代谢途径、提高酶活性等方法，实现微生物的高效利用和生产；3. 微生物资源开发：菌种活化技术将会成为开发和利用微生物资源的重要手段，通过菌株的活化和增殖，实现对微生物资源的高效开发和利用；4. 产业化应用：菌种活化技术将会逐步应用到相关产业领域，如环境保护、农业生产、食品加工和医药制造中，推动相关产业的快速发展和升级。
ATCC菌株操作说明
T I B . 0 8 1
或营养琼脂，只是需要额外培养 24 小时 方法 21 � 添加了 15%去纤维蛋白羊血的巧克力琼脂或 Bordet Gengou 琼 脂 --35℃ 正 常 环 境 —2 天 到 一 周 . B.pertussis,MBL ﹟100,和 B.pertussis, MBL ﹟0843 培养基使用添加了 15% 去纤维蛋白羊血的 Bordet Gengou 琼脂 各类菌株的推荐培养方法见下页。
MBL 技术资料
TIB.081
KWIK-STIKTM 操作流程
撕掉标签上的拉片， 将其贴于 从凹口处撕开产品包装 初级培养平板或 QC 记录上
捏管帽处安瓿瓶中部(仅一次)， 使其释放水合液体
立即将拭 子浸于水 合悬液中 垂直握住试管并 轻拍之， 使液体流 入含小球的管底 通过挤捏压碎 小球，使其与 液体混合
Alcaligenes sp. Alicyclobacillus sp. Aggregatibacter sp.
请严格按照操作流程操作流程操作流程操作流程推荐生长条件推荐生长条件推荐生长条件推荐生长条件和和和和推荐培养方法推荐培养方法推荐培养方法推荐培养方法活化标准菌株活化标准菌株活化标准菌株活化标准菌株不建议使用实验室自己的方法及文献方法活化标准菌不建议使用实验室自己的方法及文献方法活化标准菌不建议使用实验室自己的方法及文献方法活化标准菌不建议使用实验室自己的方法及文献方法活化标准菌株否则菌种供应商不保证菌株的质量且不提供相应的售后服务
M.fortuitum subsp. fortuitum, M.peregrinum 和 M.smegmatis 也可以选用胰蛋白胨大豆琼脂 (TSA) 和 Lowenstein Jensen 琼脂或 Middlebrook 琼脂一样， 只是需 额外培养一些时间。
Thermo ATCC粪肠球菌标准菌株使用说明书(译)
ATCC粪肠球菌质控菌株使用说明书（英译中）使用本品可以直接使用，一次性接种环里包含稳定的活性微生物，一次性接种环可以应用于培养基、诊断试剂盒及试剂的性能验证、细菌盲种及方法学验证。
描述每个包装内含5个接种环，每个接种环独立包装。
保存保存于2-8度。
随用随取，保质期内，接种环内微生物特性稳定。
打开在包装标签指示处，剪开。
变质保持干燥，潮湿后停止使用。
操作每个接种环上的标本均为明胶干燥而成，须在保温保湿的环境下复溶。
直接在选择性培养基上接种可能会导致生长缓慢，若需接种在选择性培养基上，需先在非选择性培养基上培养，如血琼脂平板，等有可见菌落形成后再转种。
以下两种方法可以用于接种培养，根据不同的微生物选择正确的方法。
直接划线接种该方法适用于无特殊营养要求的微生物培养。
1.把平板温浴到35-37度；2.拿掉接种环上的保护套；3.把接种环插入或平放于培养基表面，使接种环表面充分湿润，保持10-15S使之充分吸收水分。
4.使用最常用的方法划线接种，每个接种环可以划5块板。
5.将平板放置于最佳的空气和温度环境进行培养。
间接（肉汤）培养法该方法适用于对培养基有特殊营养要求的细菌。
1.拿掉接种环保护套。
2.使用无菌剪刀剪下接种环，放置于含有0.5-1.0ml液体培养基的瓶子中，液体培养基包括以下成分：a.胰蛋白胨大豆琼脂或新鲜无菌的硫代硫酸盐用于细菌培养；b.灭菌生理盐水用于真菌培养。
3.将瓶子放于35-37度使接种环上的标本膜充分溶解，轻轻摇动瓶子使细菌分散开来。
4.使用无菌吸头，在培养基上滴加几滴标本，划线接种。
5.将接种好的培养基放置于最佳的气体和温度环境中培养。
合适条件下，大多数细菌均能在24-48h内培养出来，少数细菌会有明显的生长滞后，需追加培养24h。
注释：接种环上的微生物为ATCC原代培养物。
参考文献........接种环商标解释权归 Remel Inc.,Remel Inc.属于 Themo Fisher 科技公司的子公司。
菌种活化传代
菌种活化与传代一、菌种活化下列步骤请在无菌环境下操作：1、把冻干菌种管、灭菌1ml 滴管、双碟、镊子、营养肉汤培养基、营养琼脂斜面数支，移入接种室或净化工作台。
2、先用砂轮将冻干菌种安瓶颈部挫出刻痕,再将冻干菌种管外壁用75%乙醇擦洗消毒、稍干，用75% 乙醇棉擦净，放在灭菌双碟内，待干。
点燃酒精灯，将菌种管的封口一端在火焰上，烧灼红热，用灭菌滴管吸取营养肉汤培养基，滴在灼热的菌种管封口一端，使骤冷而炸裂。
（有些商品化的产品打开更方便）3、取灭菌镊子，在火焰旁，将炸裂的管口打开，放入灭菌双碟内，另取1支灭菌滴管，在火焰旁吸取营养肉汤少许（无菌水也可），加至菌种管底部，将冻干菌搅动促使溶解，随即吸出管内菌液，分别接种至营养琼脂斜面及普通肉汤内，并将滴管及菌种管投入消毒液内，将已接种的营养肉汤及营养琼脂斜面进行培养。
( a ) 适用细菌用无菌吸管，吸取0.3-0.5 ml指定之液体培养基或无菌水，滴入内管内，并轻微震荡（可用该吸管协助），直到均匀悬浮。
( b ) 适用霉菌、酵母菌用无菌吸管，吸取0.3-0.5 ml无菌水，滴入内管内，待干燥粉末溶解后，以无菌吸管吸取并滴入约含有5ml无菌水之试管内，轻微震荡使其均匀后，静置30至60分钟。
4、某些菌种经过冷冻干燥保存后，迟滞期较长，必须等培养二倍时间后才能长出，且再经过一、二次继代培养才能正常生长。
经过以上的努力后仍培养失败，才视为不能活化。
二、菌种传代1、培养基应新鲜制备，如斜面已无冷凝水者，不宜再使用。
标签上写上菌名及接种日期。
至冰箱取出的菌种斜面，应在室温放置约30分钟，待温度平衡后再移入接种室或超净工作台。
2、点燃酒精灯，用左手握住菌种斜面，将管口靠进火焰旁，右手拿接种棒后端，将接种环烧红30秒，随后将全部接种棒金属部分在火焰上烧灼，往返通过3次。
左手将管口在火焰上旋转烧灼，右手用无名指、小指及掌部夹住棉塞，拨开棉塞，将接种环伸人管内先在近壁的琼脂斜面上靠一下，稍冷却再移至菌苔上，刮去少量菌苔，随即取出接种棒，并将菌种管口移至火焰旁。
菌种活化_操作方法
低温保存管（【2 】cryotube）中之一般菌种暂时存放及活化A. 低温保存管之暂时存放及解冻1. 低温保存管（cryotube）应存放于－20℃ ~ －80℃之低温前提下.2. 预备37℃之 70﹪（V/V）酒精浴槽（只能在电气水浴槽中改放酒精,不可以火加温,以免安全;若以37℃水浴代替,应避免水中微生物污染）,个中事先安放小试管架（可放置 cryotube 之大小）,液面不可高达管塞.3. 将 cryotube 从低温保存前提中掏出,置于37℃浴槽之小试管架上.4. 不断稍微动摇 cryotube,液面不可高至管塞,直至结冰完整消融（约需 2 分钟）.B. 菌株活化: 在无菌操作下1. 用无菌微量吸管,从已消融之 cryotube 汲取 50 ?l（或 1 ~ 2 滴）之菌液,滴入固态指定造就基(造就基编号及温度示于菌株订购单)某一边缘邻近,以划线法接种于造就基.2. 将接种好的造就基置于指定温度的造就箱中造就.C. 划线法1. 手持金属接种环,用酒精灯将接种环（共约 5 公分）烧至火红,并不断往返烧烤金属固定杆之前约 10 公分,等待约 10 秒钟,将接种环前端轻触造就基边缘凝胶（无菌体部份）,待接种环完整冷却后,以环沾黏菌滴,由造就基边缘向中心轻轻横划紧接的并行线,直到涵盖 1/3 造就基为止（I 区）.2. 灼烧接种环,待数秒冷却后,扭转造就基自 I 区涂布的边缘再横划数条线到未接种的区域（II 区）.3. 反复 2. 的动作完成 III 区与 IV 区.4. 灼烧接种环,将接种环归位.D. 图示（1）金属接种环（2）平板划线法冷冻湿润管之开管解释下列步骤请在无菌情况下操作：1.以沾有70%酒精的棉花,擦拭外管,在火焰上加热外管之尖端.2.滴数滴无菌水于加热处,使外管决裂,再以硬棒敲破尖端.3.掏出隔热纤维纸和内管,以灭菌过的镊子掏出内管之棉塞.4.( a ) 实用于细菌用无菌吸管,汲取0.3-0.5 ml指定之液体造就基,滴入内管内,并稍微震动（可用该吸管协助）,直到平均悬浮.( b ) 实用于霉菌.酵母菌用无菌吸管,汲取0.3-0.5 ml无菌水,滴入内管内,待湿润粉末消融后,以无菌吸管汲取并滴入约含有5ml无菌水之试管内,稍微震动使其平均后,静置30至60分钟.5.取0.1-0.2 ml之菌体悬浮液于指定的平板造就基上,做划线分别造就或做成一系列之稀释,用无菌L型玻棒平均涂抹,以磨练菌种之纯度及活化情况,而残剩的菌体则全体移入指定的液体造就基内,并依指定的温度造就之.6.某些菌种经由冷冻湿润保存后,迟滞期 ( lag period ) 较长,必须等造就二倍时光后才能长出,且再经由一.二次继代造就 (Subculture) 后才能正常发展.经由以上的尽力后仍造就掉败,才视为不能活化.7.若菌种未能活化,或活化之菌落有疑问时,请于收到菌种之一个月内,以问题菌株反响单传真至本中间,即进行处理.8．未开封之冷冻湿润管,请冷藏于4℃冰箱,切勿冷冻保存.双歧杆菌的活化请问列位双歧杆菌的冻干粉怎么活化？活化造就基是什么？活化时光？活化时须要特殊留意什么？感谢！--------------------------------------------------------------------------------脱脂乳7份+豆奶3份混均,加2%的酵母浸出液,2%的酪蛋白胨,0.1%的抗坏血酸,葡萄糖2%,混溶分装试管,应用间歇灭菌法(同上)灭菌,冷却,低温保存,备用.双歧杆菌为厌氧菌,需进行厌氧造就.在无氧前提下,打开湿润菌种菌管,用接菌环取冻干菌种于双歧杆菌活化造就基内,38℃恒温厌氧造就24ｈ,取深层活化菌种传入下一代造就基中深层造就,重回生化传至第5代,每代均为38℃及24ｈ.--------------------------------------------------------------------------------一般传两代今后,才能正常应用！常用活化造就基液体造就基有PYG固体有TPY活化办法,ATCC推举：1.冻干粉菌开封今后,用心理盐水,消融！接种于液体造就基上！造就为正常发展时光的二倍,36±1℃ 2.然后将其离心集菌,接种于平板上,养为正常发展时光的二倍,36±1℃自我感到,液体造就基活化不好用！我的活化办法：冻干粉菌开封今后,用小牛血清消融！接种于TPY固体造就基上！造就为72H,36±1℃ ,然后挑菌,接种于平板上,造就为72H,36±1℃即可。