实验报告2011.9

胸腺五肽缓释微囊的制备及释放性能研究

一综述

1.1引言

本实验目的研究以壳聚糖和海藻酸钠为基质材料，制备胸腺五肽缓释微囊。采用方法以微囊的药物包封率为制备工艺优化指标，利用复凝聚法，通过正交试验得出微囊的最佳制备工艺条件。

实验结果：微囊形态及稳定性较好，有良好的缓释效果

1.2胸腺五肽介绍

1.2.1胸腺五肽

胸腺分泌物的一种胸腺生成素Ⅱ的有效部分。胸腺生成素Ⅱ是从胸腺激素中分离出来的单一多肽化合物，由49个氨基酸组成，而其中由5个氨基酸组成的肽链片段，却有着与胸腺生成素II相同的全部生理功能，所以就把这个五肽片段称为胸腺五肽。

1.2.2胸腺五肽的理化性质

胸腺五肽由精氨酸、赖氨酸、天门冬氨酸、缬氨酸、酪氨酸五种氨基酸组成。其化学名称为N-〔N-〔N-〔NL-精氨酰-L-赖氨酰〕-L-α-天冬氨酰〕-L-缬氨酰〕-L-酪氨酸。分子式：C30H49N9O9 。分子量：679.77。

胸腺五肽是一多肽小分子蛋白质类药物，是用多肽固相合成法制备的，以特定的氨基酸组成的单一化学物质，只有确定的分子式及分子量，由两个碱性氨基酸、两个中性氨基酸及一个酸性氨基酸组成，故胸腺五肽成微碱性，溶于水及乙酸，不溶于乙醛及

乙酸乙酯等有机溶剂。通常用高效液相色谱法测定其含量，用紫外光谱，氨基酸组分分析和质谱确定其结构。

对于固相法合成所得的多肽，其结构的确证方法与合成方法所得到的有机化合物化学结构的确证方法不完全相同。国内和国际通常只采用紫外光谱，氨基酸组分分析和质谱，并不必须用红外光谱，核磁共振及氨基酸序列分析。

1.2.3胸腺五肽的作用及机理

胸腺五肽的作用之一是诱导T细胞分化。它可选择性地诱导Thy-1-的前胸腺细胞转化为Thy-1+的T细胞。其T细胞分化作用由胞内cAMP水平升高介导。胸腺五肽的另一基本作用是对成熟外周血T细胞的特异受体结合，使胞内cAMP水平上升，从而诱发一系列胞内反应，这也是它免疫调节功能的基础。在正常机体状态下胸腺五肽显现免疫刺激作用，能显著增高脾淋巴细胞的E玫瑰花结形成率及转化率，对免疫应答的初次或再次反应的不同阶段都有增强作用，能增多IgM类型和IgG或IgA类型的抗体形成细胞。胸腺五肽还可增强巨噬细胞的吞噬功能，增加多形核嗜中性白细胞的酶和吞噬功能，升高循环抗体含量，增强红细胞免疫功能。胸腺五肽能活化CD4和CD8阳性细胞，使专一的Tc细胞寿命维持更长时间，同时也可活化Th细胞，诱导Ts细胞的功能。胸腺五肽的抗感染力和治疗作用与它增进TC细胞活性相关。在抗感染免疫中适量胸腺五肽可明显增加干扰素的产生。诱导和促进T细胞分化成熟；调节T淋巴细胞亚群比例使CD4/CD8趋于正常；

增强巨噬细胞吞噬功能；增强红细胞免疫功能；提高自然杀伤细胞的活力；提高白介素-2的产生水平与受体表达水平；增强外周血单核细胞γ干扰素的产生；增强血清中SOD活性。

可用于恶性肿瘤病人经放化疗后，免疫功能损伤者；乙型肝炎的治疗；重大外科手术及严重感染；自身免疫性疾病，如类风湿性关节炎，红斑狼疮；Ⅱ型糖尿病、更年期综合征；年老体衰免疫功能低下者。

1.3微囊

1.3.1微囊的基本概念和发展前景

微囊系利用天然的或合成的高分子材料（统称为囊材）作为囊膜壁壳，将固态或液态药物包裹成为的药库型微型胶囊。微囊可以掩盖药物的不良气味及口味；还能够提高药物的稳定性；并会减少药物对胃的刺激；固化液态药物，以方便其使用；减少复方药物的配伍变化；应用最多的是通过微囊化方法形成缓控释制剂和靶向制剂；一些微囊还可以将活细胞或者生物活性物质包裹在内。

微囊的囊材要有无毒无刺激、化学性质稳定、具有适宜的释药性、有一定的强度、有合格的粘度等特性，常用的囊材主要有天然高分子囊材，如明胶、阿拉伯胶、琼脂、海藻酸及其盐、壳聚糖等；半合成高分子囊材，如羧甲基纤维素钠、醋酸纤维素碳酸酯、乙基纤维素、甲基纤维素、羟丙基纤维素；合成高分子囊材包括生物降解的聚碳酯、聚氨基酸、聚乳糖、丙交酯乙交酯共

聚物、聚乳酸-聚乙二醇嵌段共聚物，非生物降解的聚酰胺、硅橡胶等。

制备微囊的过程称为微囊化，常用的微囊化方法有物理化学方法、物理机械方法、化学法。

微囊技术发展至今，在许多领域中已经显示出优越的性能，并得到广大研究者的重视，但其适用度却不高。尤其在我国，微囊产品同潜在市场相比，仅仅是一小部分，今后此技术将在我国得到广泛的应用。

1.3.2微囊的功能

1 粉末化将不易加工贮存的气体、液体原料固体化,从而提高其溶解性、流动性和贮藏稳定性,如粉末香精、粉末食用油脂、粉末乙醇等。例如:将液体油脂作为心材,选择适当的壁材,运用微胶囊技术就可产生出固体粉末油脂,非常方便地添加于各种食品原料中。有报导说,在国外,目前约有数十种微胶囊产品的粉末油脂作为食品工业原料,应用于各类营养保健食品或功能型食品。

2 降低挥发性防止风味成分的挥发,减少风味损失。

3 降低毒性减少食品添加剂的毒理作用等，如硫酸亚铁阿司匹林等药物包裹后，可通过控制释放速度来减轻对肠胃副作用。对于制药工业来说，可采用微胶囊技术制造靶制剂，达到定向释放效果。

4 提高物质的稳定性(易氧化，易见光分解，易受温度或水分影响的物质) 许多食品添加剂制成微胶囊产品后,由于有壁材的

保护,能够防止其氧化,避免或降低紫外线、温度和湿度等方面的影响,确保营养成分不损失,特殊功能不丧失。

5 能使不相容成分均匀地混合运用微胶囊技术,将可能相互反应的组分分别制成微胶囊产品,使它们稳定在一个物系中,各种有效成份有序地释放,分别在相应时刻发生作用,以提高和增进食品产品的风味和营养。例如:有些粉状食品对酸味剂十分敏感。因为酸味剂吸潮会引起产品结块;并且酸味剂所在部位pH 值变化很大,导致周围色泽变化,使整包产品外观不雅。将酸味剂微胶囊化以后,可延缓对敏感成分的接触和延长食品保存期限

6 掩味某些营养物质具有令人不愉快的气味或滋味,这些味道可以用微胶囊技术加以掩蔽。这种微胶囊产品在口腔里不溶化,而在消化道中才溶解,释放出内容物,发挥营养作用

7 隔离活性成分能保持食品中微量营养素和生理活性物质对人体的活性作用

8 控制心材释放和作用的时间和数量微胶囊产品经由预先设计的溶解和释放的机理,可提供特殊的释放方式。

1.4囊材的介绍

1.4.1壳聚糖的介绍

甲壳素(Chitin)作为一种纯天然可再生的自然资源，在自

然界中是含量仅次于纤维素的第二大天然多糖类，具有良好的

生物相容性、生物可降解性、抗菌等优异生物特性，由甲壳素

脱乙酰制备的含有游离氨基的壳聚糖是壳聚糖是天然多糖中唯一的