革兰氏阴性球菌.ppt
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养及菌落特点？ • 5、如何从脓液中检出乙型溶血性链球菌？ • 6、简述下列细菌的形态特征、首选培养基及主要菌落特
点？肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌、铜绿假单胞菌。
列，凹面相对； 病人脑脊液（CSF）
中典型，多位于中性 粒细胞内； 无鞭毛和芽胞；新分 离株具有荚膜和菌毛
Taizhou University
培养特性与生化反应
培养特性
专性需氧。营养要求高。最常用的培养基是巧 克力色培养基
生化反应
可产生自溶酶，人工培养时若不及时移种，数 日后菌体自溶
Taizhou University
抗原构造、抵抗力
Taizhou University
致病性与免疫性
致病物质
荚膜 菌毛 内毒素
所致疾病
流行性脑膜炎（简称流脑）
人类是唯一的易感宿主
免疫性
6月～2岁年龄组婴儿免疫力最低，是易感人群
Taizhou University
脑膜炎奈瑟菌
鼻咽腔繁殖 繁殖入血
菌/败血症
中枢神经系统
• 生物学特性
– 形态染色：与脑膜炎奈瑟菌相似， G—，双球菌，咖啡豆 状，有荚膜和菌毛，无芽胞，无鞭毛 脓汁标本中 急性病人：细菌位于中性粒细胞内 慢性病人：细菌位于细胞外
– 培养特性：与脑膜炎奈瑟菌相似，营养要求更高，只能在 巧克力平板及专用培养基上生长，形成灰白色细小S型菌 落
– 生化反应：氧化酶（+），只分解葡萄糖，不分解麦芽糖 （脑膜炎奈瑟菌分解麦芽糖）等其它糖类
革兰氏阴性球菌.ppt
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第七章 革兰阴性球菌
奈瑟菌属
Neisseria
医学检验系
Taizhou University
脑膜炎奈瑟菌
N. meningitis meningococcus
Taizhou University
奈瑟菌属 （Neisseria）
脑 膜 炎 双 球 菌
➢奈瑟氏菌属是一群革兰阴性球菌，常成双排列，无鞭毛，无芽胞，有菌 毛
革兰阴性双球菌,肾形或豆形
Taizhou University
脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis)
生物学性状
生化反应：氧化酶及触酶（+），分解葡萄糖 和麦芽糖
抗原和分类：根据荚膜多糖群特异性抗原的不 同可分为13个血清群，根据膜蛋白不同，各血 清群又可分为若干血清型
抵抗力：很弱，对热、冷、干燥和消毒剂极度 敏感
主要侵犯蛛网膜
暴发型脑膜炎
微循环衰竭、内毒素休克、DIC
儿童和成人的脑膜炎症状
Taizhou University
脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis)
微生物学检查法
标本 直接涂片镜检
如镜下见到中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌，即 可作出初步诊断
分离培养与鉴定
巧克力色血琼脂平板
快速诊断法
Taizhou University
氧化酶试验 阳性：紫红色
阴性：无色
Taizhou University
脑膜炎奈瑟菌的鉴定
生化鉴定（光滑露珠样菌落）
氧化酶：
+
DNA酶：
-
营养琼脂生长： -
葡萄糖：
+
麦芽糖：
+
Taizhou University
防治原则
综合性预防措施
隔离病人、检查带菌者、预防性投药，室内通风 流脑疫苗：
男性慢性淋病患者尿道分泌物涂片（革兰染色）
Taizhou Uity
女性急性淋病患者阴道分泌物涂片（革兰染色）
Taizhou University
培养特性 生化反应
培养特性
需氧，营养要求高。常用的培养基为巧克力色 血液琼脂平板
生化反应
除葡萄糖外，不分解其它糖类
– 抗原及分类：以外膜蛋白抗原分16个血清型 – 抵抗力：极弱（与脑膜炎奈瑟菌相似）
淋病奈瑟菌鉴定依据：
➢ 1. 涂片染色为革兰阴 性双球菌；
➢ 2. 巧克力平板上为半 透明、灰白色、凸 起滴露状菌落；
➢ 3. 氧化酶及触酶均阳 性；
➢ 4. 只分解葡萄糖，产 酸不产气；
➢ 5. 血清学试验阳性。
对流免疫电泳 SPA协同凝集试验
Taizhou University
脑膜炎奈瑟菌（N.meningit生idi物s) 学性状
形态染色： G- ，呈肾型，成双排列（凹面相对，凸面相 背），有荚膜及菌毛
培养特性 • 营养要求较高，血平板或巧克力平板或卵黄双抗平板， 形成光滑透明“露滴样”菌落 •专性需氧，5~10%CO2，35-37℃（＞40 ℃ ＜ 30℃均不生 长）pH7.4~7.6 •易产生自溶酶
1.痰涂片（肺炎链球菌镜下）:
2.原始培养物18h后菌落（肺炎链球菌菌落）:
2.原始培养物18h后菌落（肺炎链球菌菌落）:
3.传代后的纯培养物:
3.传代后的纯培养物:
传代后的菌落直径较首代有些缩小了,菌落湿润程度也有些降低,但
4.Optochin抑制试验:
抑菌环中也微弱的生长了些菌落,但经过涂片发现是口腔球菌.可 能是做该试验的同事挑菌落的时候,没把握好.把杂菌带进去了.尽 管如此,抑菌环还是非常明显而宽大(22mm).
脓汁或 喉拭子
涂片、革兰染色、镜检
血琼脂平板
37℃ 24h 观察菌落特征
及溶血情况
生化反应、致病力试验及药敏试验
葡萄球菌鉴别
金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌
色素
金黄色 白色
α-溶血素
+
血浆凝固酶试验 +
耐热DNA酶试验 +
甘露醇发酵试验 +
致病力
强
-
弱或无
脓汁标本
找出两种菌落
Gram染色 甘露醇发酵试验
5.生化反应:
用的就是普通微量管,在接种前滴加小牛血清1 滴.5%CO2,35℃培养18~24h后读取并记录结果.
6.肺炎链球菌乳胶凝集试验：左边是测试，右边是 阴性对照：
7.药敏试验（K-B法）：
7.药敏试验（K-B法）：
思考题
一、填空题：
一、填空题：
二、是非题：
三、选择题：
三、选择题：
staphylococcus
Streptococcus
S. pneumoniae
N.meningitidis N. gonorrhoeae
病原性球菌的鉴别
• 由脑脊液标本中发现中性粒细胞内外有G-双球菌，可初步诊 断为脑膜炎球菌
• 由泌尿、生殖系统来源的标本中分离出的G-双球菌，可初步 诊断为淋球菌
系统疾病（淋）。 感染部位不同，标本取材部位不同
Taizhou University
形态与染色
革兰染色阴性，0.6-0.8μm 肾形、成双排列 有菌毛，无芽胞和鞭毛，新分离株有荚膜
Taizhou University
男性急性淋病患者尿道分泌物涂片（革兰染色）
Taizhou University
• 菌落小、半透明 、 表面光滑、边缘整齐
完全溶血 不溶血
乙型链球菌 丙型链球菌
• G+ 、链状
草绿色不完全溶血环
甲型链球菌 肺炎链球菌
菊糖发酵试验 胆汁溶菌试验
-（紫色） -（混浊）
+（黄色） +（澄清）
喉拭子标本 找出两种菌落
Gram染色
微生物检验
痰培养肺炎链球菌检验全程报道
姚军
1.痰涂片（肺炎链球菌镜下）:
6个月-2岁接种两次，间隔1月 A群脑膜炎球菌多糖抗原。制备疫苗
青霉素、磺胺大剂量治疗
脑膜炎接种
Taizhou University
淋病奈瑟菌，淋球菌
Gonococcus
Taizhou University
脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌
两者关系
相似点：
生物学性状
差异：
荚膜：有荚膜（脑），分离初期有荚膜（淋） 质粒：很少有质粒（脑），有质粒（淋）； 所致疾病：引起脑膜炎（脑），引起泌尿生殖
PII：吸附易感细菌的蛋白
Taizhou University
致病物质
菌毛 脂多糖（内毒素） IgA1蛋白酶
Taizhou University
所致疾病
淋病
人类是淋球菌唯一的天然宿主 成人淋病绝大多数通过性接触感染，是重要的
性传播疾病（sexually transmitted disease， STD）
➢人类为奈瑟氏菌属的自然宿主，对人致病的只有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈 瑟菌，两种细菌DNA序列有70％的同源性
➢主要区别点为，淋病奈瑟菌寄居于尿道黏膜，引起泌尿生殖系统疾病；
而脑膜炎奈瑟菌和其他奈瑟菌和其他奈瑟菌均存在于鼻咽腔黏膜。脑膜炎
奈瑟菌有多糖成分
Taizhou University
形态与染色
G- ，0.6-0.8µm 肾形或豆形，成双排
新生儿淋球菌性结膜炎
“脓漏眼”
Taizhou University
Taizhou University
微生物学检查法
标本
保暖（运送时35ºC保温）、保湿、立即送检
直接涂片镜检 分离培养与鉴定
巧克力色培养基快速诊断法 ELISA法、核酸杂交、PCR技术
Taizhou University
淋病奈瑟菌
三、选择题：
三、选择题：
四、名词解释：
• 1、血浆凝固酶 • 2、葡萄球菌A蛋白
问答题
• 1、如何从脓汁标本中检出金黄色葡萄球菌，请写出检验 程序，鉴定依据？
• 2、肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌的主要区别有那些？ • 3、简述下列细菌的形态特征、首选培养基及主要菌落特
点？金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌、霍乱弧菌。 • 4、流脑患者脑脊液革兰氏染色的镜下特征，如何分离培
Taizhou University
与脑膜炎奈瑟菌相似，营养要求更高，只能在巧 克力平板及专用培养基上生长，形成灰白色细小S 型呈滴露样菌落
主要菌体表面抗原构造
菌毛
与粘附有关，免疫原性不强
脂多糖抗原
经常变异，相应抗体不能防止再感染
外膜蛋白
PI：主要外膜蛋白，将淋病奈瑟菌分为18个血清型
防治原则
预防淋病应取缔娼妓、防止不正当的两性 关系
新生儿1%硝酸银滴眼，或红霉素、四环素 眼药膏
药物首选青霉素，但多有耐药性，应用新 型青霉素族抗生素
Taizhou University
脑膜炎奈瑟菌与淋病奈瑟菌比较
小结
化脓性球菌
• 革兰阳性菌：葡萄球菌，链球菌，肺炎链 球菌
• 革兰阴性菌：脑膜炎奈瑟菌， 淋病奈瑟菌
点？肺炎链球菌、脑膜炎奈瑟菌、铜绿假单胞菌。
列，凹面相对； 病人脑脊液（CSF）
中典型，多位于中性 粒细胞内； 无鞭毛和芽胞；新分 离株具有荚膜和菌毛
Taizhou University
培养特性与生化反应
培养特性
专性需氧。营养要求高。最常用的培养基是巧 克力色培养基
生化反应
可产生自溶酶，人工培养时若不及时移种，数 日后菌体自溶
Taizhou University
抗原构造、抵抗力
Taizhou University
致病性与免疫性
致病物质
荚膜 菌毛 内毒素
所致疾病
流行性脑膜炎（简称流脑）
人类是唯一的易感宿主
免疫性
6月～2岁年龄组婴儿免疫力最低，是易感人群
Taizhou University
脑膜炎奈瑟菌
鼻咽腔繁殖 繁殖入血
菌/败血症
中枢神经系统
• 生物学特性
– 形态染色：与脑膜炎奈瑟菌相似， G—，双球菌，咖啡豆 状，有荚膜和菌毛，无芽胞，无鞭毛 脓汁标本中 急性病人：细菌位于中性粒细胞内 慢性病人：细菌位于细胞外
– 培养特性：与脑膜炎奈瑟菌相似，营养要求更高，只能在 巧克力平板及专用培养基上生长，形成灰白色细小S型菌 落
– 生化反应：氧化酶（+），只分解葡萄糖，不分解麦芽糖 （脑膜炎奈瑟菌分解麦芽糖）等其它糖类
革兰氏阴性球菌.ppt
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第七章 革兰阴性球菌
奈瑟菌属
Neisseria
医学检验系
Taizhou University
脑膜炎奈瑟菌
N. meningitis meningococcus
Taizhou University
奈瑟菌属 （Neisseria）
脑 膜 炎 双 球 菌
➢奈瑟氏菌属是一群革兰阴性球菌，常成双排列，无鞭毛，无芽胞，有菌 毛
革兰阴性双球菌,肾形或豆形
Taizhou University
脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis)
生物学性状
生化反应：氧化酶及触酶（+），分解葡萄糖 和麦芽糖
抗原和分类：根据荚膜多糖群特异性抗原的不 同可分为13个血清群，根据膜蛋白不同，各血 清群又可分为若干血清型
抵抗力：很弱，对热、冷、干燥和消毒剂极度 敏感
主要侵犯蛛网膜
暴发型脑膜炎
微循环衰竭、内毒素休克、DIC
儿童和成人的脑膜炎症状
Taizhou University
脑膜炎奈瑟菌（N.meningitidis)
微生物学检查法
标本 直接涂片镜检
如镜下见到中性粒细胞内、外有革兰阴性双球菌，即 可作出初步诊断
分离培养与鉴定
巧克力色血琼脂平板
快速诊断法
Taizhou University
氧化酶试验 阳性：紫红色
阴性：无色
Taizhou University
脑膜炎奈瑟菌的鉴定
生化鉴定（光滑露珠样菌落）
氧化酶：
+
DNA酶：
-
营养琼脂生长： -
葡萄糖：
+
麦芽糖：
+
Taizhou University
防治原则
综合性预防措施
隔离病人、检查带菌者、预防性投药，室内通风 流脑疫苗：
男性慢性淋病患者尿道分泌物涂片（革兰染色）
Taizhou Uity
女性急性淋病患者阴道分泌物涂片（革兰染色）
Taizhou University
培养特性 生化反应
培养特性
需氧，营养要求高。常用的培养基为巧克力色 血液琼脂平板
生化反应
除葡萄糖外，不分解其它糖类
– 抗原及分类：以外膜蛋白抗原分16个血清型 – 抵抗力：极弱（与脑膜炎奈瑟菌相似）
淋病奈瑟菌鉴定依据：
➢ 1. 涂片染色为革兰阴 性双球菌；
➢ 2. 巧克力平板上为半 透明、灰白色、凸 起滴露状菌落；
➢ 3. 氧化酶及触酶均阳 性；
➢ 4. 只分解葡萄糖，产 酸不产气；
➢ 5. 血清学试验阳性。
对流免疫电泳 SPA协同凝集试验
Taizhou University
脑膜炎奈瑟菌（N.meningit生idi物s) 学性状
形态染色： G- ，呈肾型，成双排列（凹面相对，凸面相 背），有荚膜及菌毛
培养特性 • 营养要求较高，血平板或巧克力平板或卵黄双抗平板， 形成光滑透明“露滴样”菌落 •专性需氧，5~10%CO2，35-37℃（＞40 ℃ ＜ 30℃均不生 长）pH7.4~7.6 •易产生自溶酶
1.痰涂片（肺炎链球菌镜下）:
2.原始培养物18h后菌落（肺炎链球菌菌落）:
2.原始培养物18h后菌落（肺炎链球菌菌落）:
3.传代后的纯培养物:
3.传代后的纯培养物:
传代后的菌落直径较首代有些缩小了,菌落湿润程度也有些降低,但
4.Optochin抑制试验:
抑菌环中也微弱的生长了些菌落,但经过涂片发现是口腔球菌.可 能是做该试验的同事挑菌落的时候,没把握好.把杂菌带进去了.尽 管如此,抑菌环还是非常明显而宽大(22mm).
脓汁或 喉拭子
涂片、革兰染色、镜检
血琼脂平板
37℃ 24h 观察菌落特征
及溶血情况
生化反应、致病力试验及药敏试验
葡萄球菌鉴别
金黄色葡萄球菌 表皮葡萄球菌
色素
金黄色 白色
α-溶血素
+
血浆凝固酶试验 +
耐热DNA酶试验 +
甘露醇发酵试验 +
致病力
强
-
弱或无
脓汁标本
找出两种菌落
Gram染色 甘露醇发酵试验
5.生化反应:
用的就是普通微量管,在接种前滴加小牛血清1 滴.5%CO2,35℃培养18~24h后读取并记录结果.
6.肺炎链球菌乳胶凝集试验：左边是测试，右边是 阴性对照：
7.药敏试验（K-B法）：
7.药敏试验（K-B法）：
思考题
一、填空题：
一、填空题：
二、是非题：
三、选择题：
三、选择题：
staphylococcus
Streptococcus
S. pneumoniae
N.meningitidis N. gonorrhoeae
病原性球菌的鉴别
• 由脑脊液标本中发现中性粒细胞内外有G-双球菌，可初步诊 断为脑膜炎球菌
• 由泌尿、生殖系统来源的标本中分离出的G-双球菌，可初步 诊断为淋球菌
系统疾病（淋）。 感染部位不同，标本取材部位不同
Taizhou University
形态与染色
革兰染色阴性，0.6-0.8μm 肾形、成双排列 有菌毛，无芽胞和鞭毛，新分离株有荚膜
Taizhou University
男性急性淋病患者尿道分泌物涂片（革兰染色）
Taizhou University
• 菌落小、半透明 、 表面光滑、边缘整齐
完全溶血 不溶血
乙型链球菌 丙型链球菌
• G+ 、链状
草绿色不完全溶血环
甲型链球菌 肺炎链球菌
菊糖发酵试验 胆汁溶菌试验
-（紫色） -（混浊）
+（黄色） +（澄清）
喉拭子标本 找出两种菌落
Gram染色
微生物检验
痰培养肺炎链球菌检验全程报道
姚军
1.痰涂片（肺炎链球菌镜下）:
6个月-2岁接种两次，间隔1月 A群脑膜炎球菌多糖抗原。制备疫苗
青霉素、磺胺大剂量治疗
脑膜炎接种
Taizhou University
淋病奈瑟菌，淋球菌
Gonococcus
Taizhou University
脑膜炎奈瑟菌 淋病奈瑟菌
两者关系
相似点：
生物学性状
差异：
荚膜：有荚膜（脑），分离初期有荚膜（淋） 质粒：很少有质粒（脑），有质粒（淋）； 所致疾病：引起脑膜炎（脑），引起泌尿生殖
PII：吸附易感细菌的蛋白
Taizhou University
致病物质
菌毛 脂多糖（内毒素） IgA1蛋白酶
Taizhou University
所致疾病
淋病
人类是淋球菌唯一的天然宿主 成人淋病绝大多数通过性接触感染，是重要的
性传播疾病（sexually transmitted disease， STD）
➢人类为奈瑟氏菌属的自然宿主，对人致病的只有脑膜炎奈瑟菌和淋病奈 瑟菌，两种细菌DNA序列有70％的同源性
➢主要区别点为，淋病奈瑟菌寄居于尿道黏膜，引起泌尿生殖系统疾病；
而脑膜炎奈瑟菌和其他奈瑟菌和其他奈瑟菌均存在于鼻咽腔黏膜。脑膜炎
奈瑟菌有多糖成分
Taizhou University
形态与染色
G- ，0.6-0.8µm 肾形或豆形，成双排
新生儿淋球菌性结膜炎
“脓漏眼”
Taizhou University
Taizhou University
微生物学检查法
标本
保暖（运送时35ºC保温）、保湿、立即送检
直接涂片镜检 分离培养与鉴定
巧克力色培养基快速诊断法 ELISA法、核酸杂交、PCR技术
Taizhou University
淋病奈瑟菌
三、选择题：
三、选择题：
四、名词解释：
• 1、血浆凝固酶 • 2、葡萄球菌A蛋白
问答题
• 1、如何从脓汁标本中检出金黄色葡萄球菌，请写出检验 程序，鉴定依据？
• 2、肺炎链球菌与甲型溶血性链球菌的主要区别有那些？ • 3、简述下列细菌的形态特征、首选培养基及主要菌落特
点？金黄色葡萄球菌、伤寒沙门菌、霍乱弧菌。 • 4、流脑患者脑脊液革兰氏染色的镜下特征，如何分离培
Taizhou University
与脑膜炎奈瑟菌相似，营养要求更高，只能在巧 克力平板及专用培养基上生长，形成灰白色细小S 型呈滴露样菌落
主要菌体表面抗原构造
菌毛
与粘附有关，免疫原性不强
脂多糖抗原
经常变异，相应抗体不能防止再感染
外膜蛋白
PI：主要外膜蛋白，将淋病奈瑟菌分为18个血清型
防治原则
预防淋病应取缔娼妓、防止不正当的两性 关系
新生儿1%硝酸银滴眼，或红霉素、四环素 眼药膏
药物首选青霉素，但多有耐药性，应用新 型青霉素族抗生素
Taizhou University
脑膜炎奈瑟菌与淋病奈瑟菌比较
小结
化脓性球菌
• 革兰阳性菌：葡萄球菌，链球菌，肺炎链 球菌
• 革兰阴性菌：脑膜炎奈瑟菌， 淋病奈瑟菌