倒平板、划平板、涂布操作步骤

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平板涂布法操作过程

平板涂布法操作过程

平板涂布法操作过程一、引言平板涂布法是一种常见的涂布工艺,广泛应用于化学、材料、纺织等领域。

本文将详细介绍平板涂布法的操作过程。

二、准备工作1. 准备涂布液:根据实际需要选择合适的涂布液,确保其浓度、粘度等参数符合要求。

2. 准备基材:选择合适的基材,如玻璃、金属板等,确保其表面清洁平整。

3. 准备涂布设备:包括涂布机、刮刀、涂布槽等,确保设备干净、正常工作。

三、涂布操作1. 调整涂布机参数:根据涂布液的性质和要求,调整涂布机的转速、压力等参数,以保证涂布均匀。

2. 将涂布液倒入涂布槽:用量要适中,不宜过多或过少,以免影响涂布效果。

3. 启动涂布机:将基材放置在涂布机的工作台上,启动涂布机,使其开始运转。

4. 涂布操作:将涂布机的刮刀轻轻地放置在涂布槽中,使其与涂布液接触,然后缓慢地向前推动刮刀,使涂布液均匀地覆盖在基材表5. 涂布次数和速度:根据需要,可以进行多次涂布,每次涂布之间要注意等待涂布液干燥,涂布速度要适中,不可过快或过慢。

6. 检查涂布效果:每次涂布完成后,可以用光源照射基材表面,观察涂布液的均匀性和质量,如有需要,可以进行调整或重新涂布。

四、涂布后处理1. 干燥:涂布完成后,将基材放置在通风良好的地方,使其自然干燥。

也可以使用烘干设备进行加速干燥,但要注意温度控制,避免基材变形或涂布液受热破坏。

2. 检查质量:干燥后,仔细检查涂布质量,包括涂布厚度、均匀性、无气泡或颗粒等。

3. 存储和包装:根据实际需要,将涂布完成的基材进行存储和包装,以防止灰尘、潮气等的侵入。

五、注意事项1. 操作环境要整洁干净,以免杂质污染涂布液或基材。

2. 涂布液的配制要准确,避免浓度、粘度等参数不合适。

3. 涂布机的调整要仔细,确保刮刀与涂布液的接触均匀。

4. 涂布过程中要保持涂布液的稳定性,避免出现分层或凝固现象。

5. 涂布速度要适中,过快可能导致涂布液溅出,过慢可能导致涂布不均匀。

6. 涂布完成后要及时清洁涂布机和刮刀,以免涂布液残留影响下次六、结论通过平板涂布法的操作过程,可以实现对基材的均匀涂布。

稀释倒平板法和涂布平板法的基本操作流程

稀释倒平板法和涂布平板法的基本操作流程

稀释倒平板法和涂布平板法是微生物学领域实验室中常用的两种分菌方法。

它们在微生物菌落计数和分离纯种中起着至关重要的作用。

下面将介绍这两种基本操作流程。

一、稀释倒平板法的基本操作流程1.准备物品和培养基:首先要准备好所需的物品和培养基,包括试管、移液管、稀释液、平板培养基等。

培养基的选择应根据具体实验目的而定。

2.制备系列稀释液:将含有大量微生物的培养液加入到一系列含有无菌蒸馏水的试管中,使细菌的浓度逐渐减少。

一般采取稀2、稀4、稀6等倍数的稀释方法,以便后续操作。

3.取1ml细菌溶液:接种前述制备好的系列稀释液中,取出1ml的细菌溶液,并均匀涂布在含有固体培养基的平板上。

4.均匀涂布:用棉签将1ml的细菌溶液均匀涂布在平板表面,确保每一块培养基上都有细菌涂布。

5.培养:将涂布好的平板培养基在恒定的温度下进行培养,待菌落生长后进行计数和鉴定。

二、涂布平板法的基本操作流程1.准备物品和培养基:同样需要准备试管、移液管、液体培养基、平板培养基等。

培养基的选择也应根据实验目的做出合适的选择。

2.取适量细菌溶液:取出适量的细菌溶液,一般取0.1ml左右的细菌溶液即可。

3.均匀涂布:用棉签或者涂布器将细菌溶液均匀涂布在含有固体培养基的平板上,同样要确保每一块培养基上都有细菌涂布。

4.培养:将涂布好的平板培养基在适宜的温度下进行培养,待菌落生长后进行计数和鉴定。

通过以上内容的介绍,我们可以看到,稀释倒平板法和涂布平板法在操作流程上有着一定的相似性。

它们都需要准备物品和培养基、取适量的细菌溶液、进行均匀涂布,并最终在适宜的温度下进行培养。

然而,两种方法的区别在于稀释倒平板法是先稀释后倒平板再均匀涂布,而涂布平板法是直接涂布在平板上进行培养。

在进行微生物实验时,选择合适的分菌方法对于后续的实验结果具有重要意义。

通过掌握这两种分菌方法的基本操作流程,可以更加准确地进行微生物的定量分离,为微生物学实验研究提供有力支持。

微生物接种技术-PPT

微生物接种技术-PPT
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大家有疑问的,可以询问和交流
可以互相讨论下,但要小声点
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(1)斜面接平板 a.划线法:见平板划线分离法。 b.点种法:一般用于观察霉菌和酵母细 胞,轻轻点在平板的表面即可。
(2)平板接斜面:一般是将经 平板分散培养得到的单菌落接 种到斜面,以便作鉴定或扩大 培养、保存之用。
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(3)平板涂布法
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1.斜面接种:
从已长好微生物移接到另一斜面管的 方法。此法用于好气性微生物的接种。
左手持菌种管和斜面管,使斜面向上, 并尽量放平。用右手先将塞拧转松动, 再拿接种环,用右手的小指、无名指和 手掌拨下塞并夹紧,同时将管口在火焰 上燃烧一圈,接种环灼烧灭菌后插入管 内,冷却、挑菌,立即转入斜面管底部, 沿斜面划曲线或直线。
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试管斜面接种
1.两支试管呈“V”字形 3.火焰上微烧一周 5.接种、划线
2.拔下试管塞 4.接种环灼烧、冷却 6.塞上塞子,灼烧接种环 6
2.液体接种:
将菌接种到液体培养基(试管、三角瓶等)中的 方法。
操作与上法基本一致,只是在将接种 环送入液体培养基中时使环在液体与 管壁接触的地方轻轻磨擦,使菌体分 散,然后塞上棉塞,再轻轻摇动均匀, 即可培养。 如果菌种是培养在液体培 养基中时,一般用移液管或接种环接 种。
• 倒培养基,制成平板。 • 凝固后,另取一支吸管吸取相应的菌液0.2mL放
至平板上。 •用无菌三角玻棒将稀释液在平板表面涂 抹均匀。倒置于37℃条件下培养1~2d, 观察菌落形态及计数菌落。
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凝 固 后
37℃ 培养
涂布法流程图
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思考题 (1)用接种环接种时有哪些注意事项 (2)涂布棒消毒方法有哪些?各应注意什 么?

稀释倒平板法和涂布平板法的基本操作流程 -回复

稀释倒平板法和涂布平板法的基本操作流程 -回复

稀释倒平板法和涂布平板法的基本操作流程-回复稀释倒平板法和涂布平板法是微生物学中常用的细菌计数方法。

这两种方法都是在琼脂培养基上进行操作,通过细菌的生长形成可见的菌落,从而实现对细菌数量的估计。

下面将分别介绍这两种方法的基本操作流程。

稀释倒平板法的基本操作流程如下:1. 准备培养基:根据实验需要选择适当的琼脂培养基,如普通琼脂(TSA)或营养琼脂(NA)。

根据琼脂培养基的要求,熔化琼脂并冷却到40-45摄氏度。

2. 稀释样品:将待测样品适当稀释。

通常使用稀释液(如生理盐水或液体培养基)进行逐级稀释。

在每一级稀释后,需要充分混合,以确保细菌的均匀分布。

3. 倒平板:在无菌条件下,取适量琼脂培养基,并将稀释好的样品逐滴倒入琼脂上。

倒稀释液的手法需要快速并且均匀,以确保每一滴样品都能充分混合。

4. 震荡与凝固:倒完样品后,轻轻旋转平板,使样品均匀分布在琼脂上。

然后将平板放置于水平位置,使琼脂均匀凝固。

当的温度和时间,使菌落能够在琼脂上生长。

6. 计数:在孵育结束后,使用计数器或显微镜对菌落进行计数。

通常,呈现出可区分的菌落形态(如大小、形状、颜色等)的菌落视为一个菌落单位(CFU)。

涂布平板法的基本操作流程如下:1. 准备琼脂平板:选择适当的琼脂培养基,并熔化并冷却至40-45摄氏度。

2. 稀释样品:将待测样品适当稀释。

与稀释倒平板法相同,使用逐级稀释的方法,确保细菌的均匀分布。

3. 取样液:取少量稀释液,待用于涂布。

4. 涂布:在无菌条件下,取一片琼脂平板,然后将取出的稀释液均匀涂布在平板上。

涂布应保持均匀和有序,避免涂布不均而导致菌落的重叠。

5. 平板凝固:将涂布好的琼脂平板放置在水平位置,使琼脂均匀凝固。

择适当的温度和时间。

7. 计数:孵育结束后,对菌落进行计数。

与稀释倒平板法相同,采用计数器或显微镜,将菌落的可区分形态视为一个菌落单位(CFU)。

需要指出的是,稀释倒平板法和涂布平板法都有其适用范围。

实验1微生物培养-画线-涂布解析

实验1微生物培养-画线-涂布解析
实验1 大肠杆菌的培养和分离
配制培养基
实验流程
包器材
菌种扩增
灭菌
倒平板 接种、划线
培养 观察记录
配制培养基
实验流程
包器材
菌种扩增
灭菌
倒平
市场常见琼脂条
LB固体培养基
配制培养基
实验流程
包器材
菌种扩增
灭菌
倒平板 接种、划线
培养 观察记录
包器材
包器材
配制培养基
涂布分离
涂布前后三角刮刀需要灼烧吗?
37℃倒置培养
按浓度捆成一摞
恒温37℃培养
10-4 、 10-3,、 10-2
培养基的配制、培养皿包裹
↓ 灭菌
↙↘
混合无菌尿素与培养基
制备土壤菌悬液


倒平板
梯度稀释1000μL


涂布分离100μL
↓ 培养
提醒学生养成实验好习惯!
• 要回收物品: 枪头、牛皮纸、封口膜、橡皮筋
培养 观察记录
倒平板
配制培养基
实验流程
包器材
菌种扩增
灭菌
倒平板 接种、划线
培养 观察记录
接种、划线
• 灼烧接种环→ • 取菌液→ • 划线分离→
烧至暗红
接种、划线
• 灼烧接种环→ • 取菌液→ • 划线分离→
菌液膜
接种、划线
• 灼烧接种环→ • 取菌液→ • 划线分离→
接种、划线
划线分离
体培养基) • 培养皿 • 接种环 • 酒精棉 • 酒精灯 • 镊子、火柴、记号笔
配制培养基
实验流程
包器材
菌种扩增
灭菌
倒平板 接种、划线

倒平板

倒平板

关于微生物培养悬赏分:0 - 解决时间:2010-2-5 13:24高中微生物培养过程倒平板中有一步骤平板冷凝时要倒置,目的是为了防止皿盖上的冷凝水污染培养基但是制作培养基后要灭菌那么灭菌过程中培养基溶液融化,又和冷凝水接触,既然最终冷凝水都会和培养基接触原先倒置的操作不是没意义了么给我解释下吧...拜托了问题补充:微生物培养过程有个步骤将平板倒置放入培养箱中培养为什么这里又要倒置了??一楼但是你在接种的时候也要把培养基倒过来啊那样液滴还是照样掉下来提问者:血薇whale - 二级最佳答案1、配制培养基,配好之后灭菌。

在这个过程中,配好的培养基一般是在锥形瓶中的,在锥形瓶中进行灭菌,灭完之后也是先放在锥形瓶中,等待分装,灭完菌之后放入无菌室或通风厨待用。

2、培养皿灭菌(空的!)。

培养皿的灭菌是在没有培养基的情况下进行的,不存在你所说的那种放置问题,一般是用专门灭培养皿的金属筒,或者用牛皮纸、报纸打包灭菌。

3、灭完菌之后,培养皿放入无菌室或通风厨待用(不打开灭菌前的“包装”,从灭菌设备中拿出直接进无菌室或通风厨),在降至室温才使用。

4、分装。

一般在培养基温度降至50-60摄氏度的时候开始分装。

若是提前准备好的,已经凝固在锥形瓶中的,用前先水浴加热熔化。

在液态的情况下向培养皿中分装。

5、待培养皿中的培养基凝固后(很快,分装完基本上就凝固个差不多了),此时才将培养皿倒置,防止皿盖上的冷凝水污染培养基(此时皿盖在下,培养基中蒸发出的水蒸气是向上走的,还是凝结于培养基上,就不会有在皿盖上形成水滴后再滴落的情况了,如此防止污染的)。

6、接种培养。

接种后,也是倒置培养(原因同5 所说)倒置后还可以防止培养基水分蒸过快发,培养基变干,无机盐析出,营养成分浓度变大,不能使用,不利于微生物的生长。

不过,分装后的培养皿应尽快使用,放长了还容易感染杂菌。

稀释倒平板法稀释倒平板法先将待分离的材料用无菌水作一系列的稀释(如 1 ∶10 、1 ∶100 、1 ∶1000 、1 ∶10000 …),然后分别取不同稀释液少许,与已溶化并冷却至45 ℃左右的琼脂培养基混合,摇匀后,倾入灭过菌的培养皿中,待琼脂凝固后,制成可能含菌的琼脂平板,保温培养一定时间即可出出菌落。

高中生物选修一生物技术实践知识点总结

高中生物选修一生物技术实践知识点总结

高中生物选修一生物技术实践知识点总结1、发酵:通过微生物技术的培养来生产大量代谢产物的过程。

2、有氧发酵:醋酸发酵谷氨酸发酵·无氧发酵:酒精发酵乳酸发酵3、酵母菌是兼性厌氧菌型微生物真菌·酵母菌的生殖方式:出芽生殖(主要) 分裂生殖孢子生殖4、在有氧条件下,酵母菌实行有氧呼吸,大量繁殖。

C6H12O6+6O2→6CO2+6H2O5、在无氧条件下,酵母菌能实行酒精发酵。

C6H12O6→2C2H5OH+6CO26、20℃左右最适宜酵母菌繁殖酒精发酵时一般将温度控制在18℃-25℃7、在葡萄酒自然发酵的过程中,起主要作用的是附着在葡萄皮表面的野生型酵母菌.在发酵过程中,随着酒精浓度的提升,红葡萄皮的色素也进入发酵液,使葡萄酒表现深红色.在缺氧呈酸性的发酵液中,酵母菌能够生长繁殖,而绝绝大局部其他微生物都因无法适合这个环境而受到制约。

8、醋酸菌是单细胞细菌(原核生物),代谢类型是异养需氧型,生殖方式为二分裂9、当氧气、糖源都充足时,醋酸菌将葡萄汁中的糖分解成醋酸;当缺少糖源时,醋酸菌将乙醇变为乙醛,再将乙醛变为醋酸。

C2H5OH+O2→CH3COOH+H2O10、控制发酵条件的作用①醋酸菌对氧气的含量特别敏感,当实行深层发酵时,即使仅仅短时间中断通入氧气,也会引起醋酸菌死亡。

②醋酸菌最适生长温度为30~35℃,控制好发酵温度,使发酵时间缩短,又减少杂菌污染的机会。

③有两条途径生成醋酸:直接氧化和以酒精为底物的氧化。

11、实验流程:挑选葡萄→冲洗→榨汁→酒精发酵→果酒(→醋酸发酵→果醋)12、酒精检验:果汁发酵后是否有酒精产生,能够用重铬酸钾来检验。

在酸性条件下,重铬酸钾与酒精反应表现灰绿色。

先在试管中加入发酵液2mL,再滴入物质的量浓度为3mol/L的H2SO43滴,振荡混匀,最后滴加常温下饱和的重铬酸钾溶液3滴,振荡试管,观察颜色13、充气口是在醋酸发酵时连接充气泵实行充气用的;排气口是在酒精发酵时用来排出二氧化碳的;出料口是用来取样的。

涂布棒涂平板操作方法

涂布棒涂平板操作方法

涂布棒涂平板操作方法
使用涂布棒涂平板的操作方法如下:
1. 准备工作:先将平板擦拭干净,确保表面没有灰尘或杂质,以免影响涂布效果。

2. 将所需涂料倒在一个容器中,用搅拌棒搅拌均匀,以确保涂料质地均匀。

3. 将涂布棒蘸取适量涂料,涂布棒的一侧要均匀覆盖涂料,确保不会过多或过少。

4. 从平板的一个角度开始涂布,利用涂布棒将涂料均匀涂抹在平板表面上。

通常会使用来回移动的手势,确保涂料分布均匀。

5. 在涂布过程中,涂布棒需要与平板的表面保持一定的角度,通常为15度到30度,这个角度可以保证涂料均匀地分布在平板上。

6. 当需要涂布另一侧时,可以将涂布棒翻转过来,再次蘸取适量涂料,并按照同样的步骤来涂布平板的另一侧。

7. 涂布完成后,可以用细长的刷子来涂平板的边缘和角落,以确保涂料覆盖完整。

8. 涂布完成后,等待涂料干燥,根据涂料的要求可以在干燥过程中进行二次涂布以增强涂层效果。

9. 在使用完涂布棒后,要将其清洗干净,以便下次使用。

以上就是使用涂布棒涂平板的操作方法,希望对你有帮助。

稀释倒平板法和涂布平板法的基本操作流程

稀释倒平板法和涂布平板法的基本操作流程

稀释倒平板法和涂布平板法的基本操作流程稀释倒平板法和涂布平板法是常用于微生物种类和数量分析的实验操作方法。

它们是为了在培养基上培养微生物并计数其菌落形成单位(CFU)而设计的。

下面将分别对稀释倒平板法和涂布平板法的基本操作流程进行详细介绍。

一、稀释倒平板法的基本操作流程:1. 准备培养基:选择适当的培养基,按照生产厂家的说明书配制好培养基,并进行必要的灭菌。

2. 对待测样品进行稀释:将待测样品根据需要的稀释倍数,取相应体积的样品加入到已经准备好的无菌试管中。

使用无菌移液器和无菌试管,确保样品的无菌性。

3. 摇匀样品:使用无菌的摇瓶或涡旋仪等设备,将试管中的样品充分摇匀,确保菌体均匀分散。

4. 取适当体积的稀释液进行平板接种:将摇匀的样品取出一定的体积,均匀地倒入无菌平板中,并轻轻旋转平板使样品均匀分布。

5. 等待培养:将装满样品的平板盖好,置于适当的培养条件下,如温度、湿度等,并在预定时间内培养。

6. 菌落计数:在培养适宜的条件下,待菌落生长到适当大小后,使用放大镜或计数盘进行菌落计数。

根据每个平板上的菌落数量和稀释倍数计算出实际样品中的菌落形成单位(CFU)。

7. 计算结果:根据菌落计数的结果和稀释倍数的关系,推算出原始样品的微生物数量。

二、涂布平板法的基本操作流程:1. 准备培养基:选择适当的培养基,按照生产厂家的说明书配制好培养基,并进行必要的灭菌。

2. 涂布工具的准备:准备好需要使用的细菌涂布棒或铂丝环,并通过高温炙烤或灭菌液消毒处理。

3. 取适量的培养基:在无菌工作台上取适当量的培养基,将其倒入无菌平板中,并轻轻旋转平板使培养基均匀分布。

4. 涂布样品:将涂布棒或铂丝环浸入待测样品中,然后均匀地在培养基表面上来回涂布样品。

确保样品均匀分布。

5. 平板培养:将装有样品的平板盖好,置于适当的培养条件下,如温度、湿度等,并在预定时间内培养。

6. 菌落计数:在培养适宜的条件下,待菌落生长到适当大小后,使用放大镜或计数盘进行菌落计数。

常用的微生物分离纯化方法

常用的微生物分离纯化方法

(一) 常用的微生物分离纯化方法菌种分离纯化的方法有:稀释混合倒平板法、稀释涂布平板法、平板划线分离法、稀释摇管法、液体培养基分离法、单细胞分离法、选择培养分离法等。

其中前三种方法最为常用,不需要特殊的仪器设备, 分离纯化效果好, 现分别简述如下1、稀释混合倒平板法平板就是指经熔化的固体培养基倒入无菌培养皿中, 冷却凝固而成的盛有固体培养基的平皿。

该法就是先将待分离的含菌样品, 用无菌生理盐水作一系列的稀释(常用十倍稀释法, 稀释倍数要适当), 然后分别取不同稀释液少许(0、5-1、0ml)于无菌培养皿中, 倾入已熔化并冷却至50℃左右的琼脂培养基, 迅速旋摇, 充分混匀。

待琼脂凝固后, 即成为可能含菌的琼脂平板。

于恒温箱中倒置培养一定时间后, 在琼脂平板表面或培养基中即可出现分散的单个菌落。

每个菌落可能就是由一个细胞繁殖形成的。

挑取单一个菌落, 一般再重复该法1-2次, 结合显微镜检测个体形态特征,便可得到真正的纯培养物。

若样品稀释时能充分混匀,取样量与稀释倍数准确,则该法还可用于活菌数测定。

图 4 混合倒平板操作法示意图图 5 涂布平板操作法示意图2、稀释涂布平板法采用上述稀释混合倒平板法有两个缺点,一就是会使一些严格好氧菌因被固定在琼脂中间,缺乏溶氧而生长受影响,形成的菌落微小难于挑取;一就是在倾入熔化琼脂培养基时,若温度控制过高,易烫死某些热敏感菌,过低则会引起琼脂太快凝固, 不能充分混匀。

在微生物学研究中, 更常用的纯种分离方法就是稀释涂布平板法。

该法就是将已熔化并冷却至约50℃(减少冷凝水)的琼脂培养基, 先倒入无菌培养皿中, 制成无菌平板。

待充分冷却凝固后,将一定量(约0、1 ml)的某一稀释度的样品悬液滴加在平板表面, 再用三角形无菌玻璃涂棒涂布,使菌液均匀分散在整个平板表面, 倒置温箱培养后挑取单个菌落。

另一种简单快速有效的涂布平板法, 可省去含菌样品悬液的稀释, 直接吸取经振荡分散的样品悬浮液l滴加入1号琼脂平板上, 用一支三角形无菌玻璃涂棒均匀涂布, 用此涂棒再连续涂布2号、3号、4号平板(连续涂布起逐渐稀释作用,涂布平板数视样品浓度而定), 翻转此涂棒再涂布5号、6号平板, 经适温倒置培养后挑取单个菌落。

涂布平板无菌操作流程

涂布平板无菌操作流程

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高考生物考前梳理选择性必修3生物技术与工程实验3酵母菌的纯培养(含答案)

高考生物考前梳理选择性必修3生物技术与工程实验3酵母菌的纯培养(含答案)

高考生物考前梳理:3.酵母菌的纯培养分散的微生物在适宜的固体培养基表面或内部可以繁殖形成肉眼可见的、有一定形态结构的子细胞群体,这就是菌落。

采用平板划线法和稀释涂布平板法能将单个微生物分散在固体培养基上,之后经培养得到的单菌落一般是由单个微生物繁殖形成的纯培养物。

下面,我们尝试在马铃薯琼脂培养基上进行酵母菌的纯培养。

目的要求1.学会配制培养酵母菌的培养基并倒平板。

2.学会进行无菌操作。

3.尝试通过平板划线操作来获得纯化的酵母菌菌落。

材料用具酵母菌培养液、马铃薯、葡萄糖(或蔗糖)、琼脂、蒸馏水、天平、小刀、纱布、烧杯、锥形瓶、棉塞、牛皮纸(或报纸)、皮筋、培养皿、接种环、酒精灯、超净工作台、高压蒸汽灭菌锅、干热灭菌箱和恒温培养箱等。

方法步骤1.制备培养基配制培养基称取去皮的马铃薯200 g,切成小块,加水1000 mL,加热煮沸至马铃薯软烂,用纱布过滤。

向滤液中加入20 g葡萄糖(也可用蔗糖代替),15~20 g琼脂,用蒸馏水定容至1000 mL。

灭菌将配制好的培养基转移到锥形瓶中,加棉塞,包上牛皮纸,并用皮筋勒紧,再放入高压蒸汽灭菌锅中,在压力为100 KPa、温度为121℃的条件下,灭菌1~30 min。

将5~8套培养皿包成一包,用几层牛皮纸包紧,放入干热灭菌箱内,在160~170 ℃灭菌2h。

倒平板 待培养基冷却至50℃左右时,在酒精灯火焰附近倒平板。

倒平板的具体操作步骤如下。

2.接种和分离酵母菌通过接种环在固体培养基表面连续划线的操作,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。

经数次划线后培养,可以分离得到单菌落。

平板划线的具体操作见下面的流程图。

问1.培养基灭菌后,需要冷却到50℃左右时,才能用来倒平板。

你用什么办法来估计培养基的温度?提示:可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶,感觉温度下降到刚刚不烫手即可。

问2.在倒平板的过程中,如果不小心将培养基溅在皿盖与皿底之间的部位,这个平板还能用来培养微生物吗?为什么?提示:最好不要用这个平板培养微生物。

平板涂布法操作过程

平板涂布法操作过程

平板涂布法操作过程平板涂布法是一种常用的涂布工艺,广泛应用于纺织、印刷、电子等行业。

本文将详细介绍平板涂布法的操作过程。

一、准备工作在进行平板涂布之前,需要准备好以下工具和材料:平板涂布机、涂布刀、涂布材料、基材、溶剂、清洁布等。

首先,将平板涂布机放在水平台面上,确保机器稳定。

然后,将涂布刀装在涂布机上,并调整刀片与平板的接触压力。

二、调试涂布机在进行涂布操作之前,需要对涂布机进行调试。

首先,将涂布材料倒入涂布机的涂布槽中,并调整涂布槽的涂布量。

然后,将涂布机的涂布速度调至适当的值,通常根据涂布材料的要求进行调整。

最后,开启涂布机,观察涂布材料是否均匀流动,调整涂布机的涂布厚度,以达到所需的涂布效果。

三、准备基材在进行平板涂布之前,需要准备好基材。

首先,将基材放在平板上,并用夹具固定好。

然后,用清洁布将基材表面擦拭干净,以确保涂布效果的质量。

四、进行涂布操作在准备工作完成后,即可开始进行平板涂布操作。

首先,将涂布机的刀片轻轻放在基材上,然后以适当的速度将涂布机沿着基材的方向移动。

在涂布的过程中,要保持刀片与基材的接触压力稳定,以确保涂布的均匀性。

同时,要根据需要进行多次涂布,以增加涂布的厚度。

五、检查涂布效果在涂布操作完成后,需要对涂布效果进行检查。

首先,使用目测方法观察涂布的均匀性和质量,检查是否有漏涂或厚度不均的情况。

然后,使用相应的仪器对涂布的厚度、粘度等进行测试,以确保涂布效果符合要求。

六、涂布后处理在涂布操作完成后,需要对涂布后的基材进行处理。

首先,将涂布后的基材取下,并进行干燥处理,使其完全干燥。

然后,根据需要进行后续加工,如切割、折叠、包装等。

总结:平板涂布法是一种常用的涂布工艺,通过调试涂布机、准备基材、进行涂布操作、检查涂布效果和涂布后处理等步骤,可以实现对基材的均匀涂布。

在实际操作中,需要注意操作的规范性和细节的处理,以确保涂布效果的质量和稳定性。

同时,根据不同的涂布要求和材料特性,可以进行相应的调整和优化,以满足不同行业的需求。

2023年新教材高中生物微生物的基本培养技术讲义(无答案)新人教版选择性必修3

2023年新教材高中生物微生物的基本培养技术讲义(无答案)新人教版选择性必修3

1.2.1 微生物的基本培养技术微生物:难以用___________观察的微小生物的统称。

包括以下类群:病毒(无细胞结构生物):SARS 病毒、新冠病毒等____________病毒;T 2噬菌体等____________病毒。

细菌(原核生物):蓝细菌、大肠杆菌、乳酸菌等;放线菌:衣氏放线菌等。

真菌(真核生物):酵母菌、毛霉等;原生生物:草履虫、变形虫等。

防止____________,获得纯净的微生物培养物是研究和应用微生物的前提,也是酵工程的重要基础。

实验室培养微生物的条件:①要为人们需要的微生物提供合适的____________和____________条件;②要确保____________无法混入,并将____________分离出来。

一、培养基的配置 1.培养基的概念和类型(1)概念:人们按照微生物对____________的不同需求,配制出供其____________的营养基质,即培养基。

(2)培养基的作用:用以____________、____________、____________、____________微生物或____________其代谢物。

(3)培养基的类型2.培养基的配制(1)基本成分:水、碳源、氮源、无机盐。

①碳源:a.无机碳源:CO2、CO32-、HCO3-→____________微生物;b.有机碳源:葡萄糖、牛肉膏、蛋白胨等→____________微生物。

②氮源:a.无机氮源:NH4+、NO3-、NH3等。

b.有机氮源:牛肉膏、蛋白胨、____________、氨基酸等。

注意:含C、H、O、N的有机物是____________微生物的碳源、氮源、能源。

如____________等。

(2)特殊需求:某些微生物对______、特殊营养物质以及_______的需求。

特殊营养物质:____________、氨基酸、嘌呤、嘧啶等。

(牛肉膏、酵母膏、蛋白胨中含有)①培养乳酸杆菌时,需要在培养基中添加____________;②培养霉菌时,需要将培养基调至____________;③培养细菌时,需要将培养基调至____________或____________;④培养厌氧微生物时,需要提供____________的条件。

基础生物学实验(微生物学部分)_ 微生物基本实验操作技术篇_ 无菌操作技术_

基础生物学实验(微生物学部分)_  微生物基本实验操作技术篇_  无菌操作技术_

基础生物学实验微生物学部分1 倒平板技术宦海霞原理倒平板就是火焰旁,将三角瓶中已融化的琼脂培养基倒入无菌培养皿中,然后置水平位置待凝,凝固后即成无菌培养基平板(简称平板),完成此操作的过程称为倒平板。

实验目的及原理*010203培养基其他:酒精灯,打火机,标签纸,记号笔等。

无菌培养皿若干套实验材料1右手持瓶,保持瓶口处于酒精灯火焰旁的无菌操作区域内并面向火焰。

迅速倒出瓶内融化的培养基液至无菌培养皿内。

一般倒入量为12~15ml 。

融化培养基,可用微波炉融化,也可用沸水浴融化或压力锅融化等左手取培养皿,用食指和拇指开启培养皿成一缝,恰好能让三角瓶口伸入。

倒无菌平板⏹持皿法倒无菌平板 ⏹叠皿法清洁桌面,正式倒平板前须清理与清洁台面,以减少台面尘埃,降低平板污染的概率。

盖上培养皿盖,置水平位置冷凝42方法和步骤567注意事项用于倒平板的培养基一定要彻底融化,否则会再所倒的平板培养基表面出现未融化的琼脂块。

倒平板时的培养基温度不能过高(50~60℃为宜),否则会在皿盖内侧或凝固的平板表面形成许多冷凝水,不利于单菌落的形成。

在无菌操作倒平板过程中,切忌用手抓、握三角瓶的瓶口处,以防灼热的瓶口烫伤手指,同时,手指上的微生物也会污染瓶口,进而严重污染培养基。

谢谢您的观看基础生物学实验微生物学部分2 平板划线技术张曈实验原理实验原理1 平板划线法是指把杂菌样品通过在平板表面划线稀释而获得单菌落的方法。

一般是将混杂在一起的不同种微生物戒同种微生物群体中的不同细胞,通过在分区的平板表面上作多次划线稀释,形成较多的独立分布的单个细胞,经培养而繁殖成相互独立的多个单菌落。

通常认为这种单菌落就是某微生物的“纯种”。

在实验中,我们将平板分成A、B、C、D 4个面积不同的小区进行划线,A区面积最小,作为待分离菌的菌源区,B和C区为经初步划线稀释的过渡区,D区则是关键的单菌落收获区,它的面积最大,出现单菌落的概率也最高。

因此,这4个区的面积安排应做到D>C>B>A。

平板涂布正确操作方法

平板涂布正确操作方法

平板涂布正确操作方法
涂布是一种将涂料均匀地涂布在基材上的工艺,平板涂布则是指在平板上进行涂布。

以下是平板涂布的正确操作方法:
1. 准备工作:确定涂布的基材和涂料,准备好涂布辊、涂布盆、刮板等工具,将涂料搅拌均匀。

2. 准备平板:将平板清洗干净,用风枪或毛巾将表面的杂质和水分清除干净。

3. 测量涂布量:用涂布辊在平板上涂布一层涂料,然后用刮板将多余涂料刮走,用厚度计测量涂料的厚度,根据要求确定涂布量。

4. 涂布:将涂料倒入涂布盆中,用涂布辊将涂料均匀地涂布在平板上,涂布时要控制涂布量和涂布速度,保持均匀的涂布。

5. 检查:涂布完成后,用光源照射平板,检查涂料表面是否有坑洞、气泡或不均匀涂布现象,如有问题需要修复。

6. 烘干:涂布完成后,需要将平板置于适宜的温度下烘干,使涂料干燥固化。

以上是平板涂布的正确操作方法,涂布时需要控制好涂布量和涂布速度,并严格按照要求进行检查和修复。

微生物的实验室培养生物选修一知识点考点

微生物的实验室培养生物选修一知识点考点

微生物的实验室培养生物选修一知识点考点培养基:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质,是进行微生物培养的物质基础。

下面是小偏整理的微生物的实验室培养生物选修一知识点考点,感谢您的每一次阅读。

微生物的实验室培养生物选修一知识点考点培养基:人们按照微生物对营养物质的不同需求,配制出供其生长繁殖的营养基质,是进行微生物培养的物质基础。

培养基按照物理性质可分为液体培养基、半固体培养基和固体培养基。

在液体培养基中加入凝固剂琼脂(是从红藻中提取的一种多糖,在配制培养基中用作凝固剂)后,制成琼脂固体培养基。

微生物在固体培养基表面生长,可以形成肉眼可见的菌落。

根据菌落的特征可以判断是哪一种菌。

液体培养基应用于工业或生活生产,固体培养基应用于微生物的分离和鉴定,半固体培养基则常用于观察微生物的运动及菌种保藏等。

按照成分培养基可分为人工合成培养基和天然培养基。

合成培养基是用成分已知的化学物质配制而成,其中成分的种类比例明确,常用于微生物的分离鉴定。

天然培养基是用化学成分不明的天然物质配制而成,常用于实际工业生产。

按照培养基的用途,可将培养基分为选择培养基和鉴定培养基。

选择培养基是指在培养基中加入某种化学物质,以抑制不需要的微生物生长,促进所需要的微生物的生长。

鉴别培养基是根据微生物的特点,在培养基中加入某种指示剂或化学药品配制而成的,用以鉴别不同类别的微生物。

培养基的化学成分包括水、无机盐、碳源、氮源、生长因子等。

碳源:能为微生物的代谢提供碳元素的物质。

如CO2、NaHCO3等无机碳源;糖类、石油、花生粉饼等有机碳源。

异养微生物只能利用有机碳源。

单质碳不能作为碳源。

氮源:能为微生物的代谢提供氮元素的物质。

如N2、NH3、NO3-、NH4+(无机氮源)蛋白质、氨基酸、尿素、牛肉膏、蛋白胨(有机氮源)等。

只有固氮微生物才能利用N2。

培养基还要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及氧气的要求。

例如,培养乳酸杆菌时需要在培养基中添加维生素,培养霉菌时须将培养基的pH调至酸性,培养细菌是需要将pH调至中性或微碱性,培养厌氧型微生物是则需要提供无氧的条件。

倒平板、划平板、涂布操作步骤

倒平板、划平板、涂布操作步骤

倒平板、划平板、涂布操作步骤一、无菌准备:1、提前1个小时打开无菌室紫外灯消毒灭菌1、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒;2、将用于微生物培养的器皿、接种的用具和培养基等进行灭菌;3、所有无菌操作都需在酒精灯旁操作。

二、培养基配置:1、LB肉汤:肉汤粉330g、5g葡萄糖、1000ml蒸馏水;2、营养琼脂培养基:琼脂培养基粉300g、5g葡萄糖、1000ml 蒸馏水。

三、倒平板操作:1、将灭菌过的培养皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞.右手拿锥形瓶,使瓶口迅速通过火焰;2、用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥形瓶中的培养基(约10~20ml)倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖,轻轻摇匀。

3、等待平板冷却凝固(大约需5~10min)后,将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上.四、平板划线操作:1、将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红;2、在火焰旁冷却接种环,并打开盛有菌液的试管的棉塞;3、将试管口通过火焰;将已冷却的接种环伸入菌液中,沾取一环菌液;将试管口通过火焰,并塞上棉塞;4、左手将皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖。

注意不要划破培养基.5、灼烧接种环,待其冷却后,从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。

重复以上操作,在三区域内划线。

注意不要将最后一区域的划线与第一区相连。

6、将平板倒置,放入培养箱中培养。

五、涂布平板操作:1、将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中;2、取少量菌液(不超过0.1ml),滴加到培养基表面;3、将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却8~10s;4、用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。

涂布时可转动培养皿,使涂布均匀。

注意:1、将涂布器末端浸在盛有体积分数为70%的酒精的烧杯中.取出时,要让多余的酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃.2、操作中一定要注意防火!不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中,以免引燃其中的酒精。

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倒平板、划平板、涂布操作步骤
一、无菌准备:
1、提前1个小时打开无菌室紫外灯消毒灭菌
1、操作者的衣着和手,进行清洁和消毒;
2、将用于微生物培养的器皿、接种的用具和培养基等进行灭菌;
3、所有无菌操作都需在酒精灯旁操作。

二、培养基配置:
1、LB肉汤:肉汤粉330g、5g葡萄糖、1000ml蒸馏水;
2、营养琼脂培养基:琼脂培养基粉300g、5g葡萄糖、1000ml 蒸馏水。

三、倒平板操作:
1、将灭菌过的培养皿放在火焰旁的桌面上,右手拿装有培养基的锥形瓶,左手拔出棉塞。

右手拿锥形瓶,使瓶口迅速通过火焰;
2、用左手将培养皿打开一条稍大于瓶口的缝隙,右手将锥
形瓶中的培养基(约10~20ml)倒入培养皿,左手立即盖上培养皿的皿盖,轻轻摇匀。

3、等待平板冷却凝固(大约需5~10min)后,将平板倒过来放置,使皿盖在下,皿底在上。

四、平板划线操作:
1、将接种环放在火焰上灼烧,直到接种环烧红;
2、在火焰旁冷却接种环,并打开盛有菌液的试管的棉塞;
3、将试管口通过火焰;将已冷却的接种环伸入菌液中,沾取一环菌液;将试管口通过火焰,并塞上棉塞;
4、左手将皿盖打开一条缝隙,右手将沾有菌种的接种环迅速伸入平板内,划三至五条平行线,盖上皿盖。

注意不要划破培养基。

5、灼烧接种环,待其冷却后,从第一区域划线的末端开始往第二区域内划线。

重复以上操作,在三区域内划线。

注意不要将最后一区域的划线与第一区相连。

6、将平板倒置,放入培养箱中培养。

五、涂布平板操作:
1、将涂布器浸在盛有酒精的烧杯中;
2、取少量菌液(不超过0.1ml),滴加到培养基表面;
3、将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃,待酒精燃尽后,冷却8~10s;
4、用涂布器将菌液均匀地涂布在培养基表面。

涂布时可转动培养皿,使涂布均匀。

注意:1、将涂布器末端浸在盛有体积分数为70%的酒精的烧杯中。

取出时,要让多余的酒精在烧杯中滴尽,然后将沾有少量酒精的涂布器在火焰上引燃。

2、操作中一定要注意防火!不要将过热的涂布器放在盛放酒精的烧杯中,以免引燃其中的酒精。

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