实验动物质量监测报告(ppt 69页)

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五、染色体带型监测
可以利用染色体分带技术，鉴别C带和Q带作 为染色体标记，用来区分大、小鼠的近交系， 在多数大、小鼠的近交系中，所有中期染色 体都存在C带材料，同源染色体的C带区域大 小相同；不同的近交系，C带材料大小不同， 是品系特异的，是一种很有价值的检测亚系 变异和混杂来源的方法。
为了保存实验动物品种品系特性。使实验动物
使用者在动物实验中能得到正确的、可重复的
科学数据，实验动物生产者在严格遵守品系繁
育技术路线的同时，还必须努力做好实验动物
遗传质量的严格监测，以防止实验动物遗传上
的污染和变异。 09.08.2020
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如：
❖BALB/c对放射线比其他品系更为敏感。 ❖C57BL/6肿瘤发生率低，A系高。 ❖BALB/c和C3H小鼠对鼠伤寒沙门氏菌的敏
LEW/M a ACI b
a a dbab c a b abbb a
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四、骨骼形态特征监测
常采用“下颌骨分析法”来鉴别和检测大小鼠
的亚系变异。
将年龄、性别、体重相当的大鼠或小鼠处死后， 分辨右下颌骨，加以标记，在直角坐标系上测 量出多个形态特征参考点距离。
将所有测量的平均数作统计分析，利用判别函 数确定下颌骨形状。如果测量值集中，则表明 被测亚系间无显著的遗传变异。
实验动物质量监测的意义
生物学实验研究的四个基本条件
Animal，Equipment，Information，Reagent ，
简称AEIR四要素
这4个要素在整个实验研究中具有同等重 要的地位，不能忽略或偏废。事实上，实验 动物质量往往成为制约性要素，影响整个实 验的质量和水平
实验动物质量监测是实验动物科学的重要
用供体的均质淋巴器官，如骨髓、脾、淋 巴结、胸腺或胚胎肝脏制备出单细胞悬液。 然后将适量活细胞通过静脉或腹腔注射到 受体动物体内，组织相容性由受体中存活 者及脾增大者来确定，也可以用放射学方 法。根据移植细胞的存活数测定。
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三、生化标记监测
通过多种形式的电泳和电聚集。可检定生 化标记即同工酶或蛋白质，常用的电泳介 质有乙酸纤维素膜、淀粉凝胶、聚丙烯酰 胺凝胶。每一种标记系统做特异性染色， 最后将得到的带型与公布的生化遗传图式 进行比较。如中华人民共和国国家标准GB； T14923-2001公布9种常用近交系大鼠生化 位点标记基因(表5-2)。
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六、现代分子生物学技术
传统的遗传监测方法来源于过去研究者对 哺乳动物进行遗传分析时采用的研究手段。 随着分子生物学技术的发展，分子生物学 技术有可能取代传统的遗传监测方法，其 优点是多态性高，位点丰富，实验技术成 熟，直接涉及生物的遗传基础，DNA样品容 易保存和运输等等。
感性存在显著差异
❖SHR为自发性高血压大鼠，心血管疾病发 生率高
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一、群体管理
管理上人为的粗心最易引起遗传上的混杂，所以
对育种群进行恰当的管理是保证遗传质量的最有 效方法。 每一个实验动物育种机构都应当认真执行良好的 育种制度，完善地保持育种记录，基础群应有系 谱记录。要做到以上要求，最重要的因素就是要 有训练有素、经验丰富的技术人员。
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1．限制性片断长度多态(RFLP)技术
当 动 物 基 因 组 DNA 被 限 制 性 内 切 酶 消 化 时，酶能够识别双链DNA链上的特定核苷 酸序列，并在每条DNA链上切割产生一个 切口，使DNA裂解为片断。这些片断的长 度在动物群体中存在变异，造成多态现 象。通过DNA电泳和DNA探针分子杂交技 术，即可观察到不同带型。
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例 如 ： 位 于 小 鼠 第 2 号 染 色 体 补 体 -5 （complement-5）位点(He)的pC5探针，当 用HindⅢ消化小鼠DNA时，C3H品系将产生 一条2.7kb的带型，而AKP品系将产生6.0kb 和4.6kb两条带型。从而可以在He位点上区 别这两个品系。目前所报道的RFLP位点已 多达1098个，给遗传学研究带来许多便利 条件。
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表5-2 常用近交系大鼠生化位点标记基因
Strain Akp1 Cs2 Es1 Es3 Es4 Es6 Es8 Es9
F344/N a a a a b a b a
LOU/C a a a a b b b a SHR a b a b a a b a
ห้องสมุดไป่ตู้
WKY b b a d b a a c
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3、实验结果准确性、规律性、重复 性的保证
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实验动物质量监测主要包括以下几个方面： 遗传质量 微生物与寄生虫质量 饲料质量 环境质量监测。
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第一节 遗传质量监测
实验动物的遗传背景与反应特性，是影响实验
结果的重要因素。
不同遗传背景与反应特性的实验动物，对同一 刺激有时可引起不同质和量的反应。
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二、免疫学标记监测
（一）皮肤移植法
这是目前最常用和最灵敏的检测亚系内或亚 系间组织相容性基因差异的方法。在小鼠和 大鼠中普遍采用的是尾部或背部皮肤移植法。 皮肤移植法灵敏度高。易掌握，经济。不需 昂贵设备，易对植皮成活情况进行观察和判 断。能有效地测出新发生的、造成亚系变异 的遗传混杂和突变。
内容，是确保实验动物质量的必要手段。
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1、实验工作人员的健康和生命的保证
常见的人畜共患病： 流行性出血热、狂犬 病、猴B病毒、淋巴 细胞脉络丛脑膜炎病 毒、利什曼原虫等
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2、动物生产和繁殖的保证
动物一旦染上传染 病，则种群难以净 化，一些烈性传染 病如鼠痘、兔病毒 性出血症等可致动 物全军覆没，造成 巨大经济损失。
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（二）混合淋巴细胞反应
混合淋巴细胞反应的原理为：异源动物 或遗传上有差异个体的淋巴细胞混合培 养一定时间后，这些细胞会增殖，甚至 进一步裂解。此反应结果可在7～9天获 得，定期地从群体中抽取足够量的动物 进行监测能够维护实验动物的品质。
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（三）淋巴组织移植