茶叶中咖啡因的提取分离和鉴定

《天然药物化学》实验教学大纲

(供四年制药学本科药物制剂、药品检验专业使用)

Ⅰ前言

《天然药物化学实验》是天然药物化学课程的重要组成部分。其主要目的是：通过实验，检验在课堂上所学的理论知识。使学生对理性知识的理解更加深入，掌握得更加牢固。通过实验，训练学生的基本操作技能，培养学生分析问题和解决问题的能力，使学生获得从事天然药物化学科研工作的基本训练。在实验中，重点是要加强对学生基本操作技能的训练。天然药物化学实验要求学生掌握以下技能：（一）提取分离方面：要求掌握常用的经典方法的原理及操作。其中包括液-固提取法（浸渍、渗漉、回流提取等）、液-液萃取法（简单萃取法、梯度萃取法、反流分布法）、重结晶法等。掌握纸色谱、薄层色谱的原理和基本操作。（二）鉴定方面（化学方法）：①掌握一般定性反应在鉴定中的用，②掌握重要衍生物（乙酰化物等）的制备方法及其在结构鉴定中的应用。本大纲适用于四年制本科药物制剂、药品检验专业使用。

现将大纲使用中有关问题说明如下:

一为了使教师和学生更好地掌握教材,大纲每一章节均由教学目的、教学要求和教学内容三部分组成。教学目的注明教学目标，教学要求分掌握、熟悉和了解,教学内容与教学要求对应,并统一标示(核心内容即知识点以下划实线,重点内容以下划虚线,一般内容不标示)便于学生重点学习。

二教师在保证大纲核心内容的前提下,可根据不同教学手段,讲授重点内容和介绍一般内容。三总教学参考学时为36学时。

四使用教材：《天然药物化学实验指导》，人民卫生出版社，裴月湖主编，第一版，2006年。

II 正文

实验一芦丁的提取、分离与鉴定

一教学目的

学习碱提酸沉法提取黄酮类化合物的原理及方法；掌握化学鉴别、苷的水解；了解其衍生物制备和薄层层析、纸色谱等方法手段在苷类结构鉴定上的作用；了解光谱法在黄酮类化合物结构鉴定中的作用。

二教学要求：

（一）掌握碱提酸沉法提取黄酮类化合物的方法原理。

（二）掌握化学方法鉴别苷元、苷及糖；苷的水解。

（三）了解衍生物制备和薄层层析等方法手段在苷类结构鉴定上的作用。

（四）了解光谱法在黄酮类化合物结构鉴定中的作用。

三教学内容

（一）称取槐花米粗粉20g，置于500ml烧杯中，加入沸水250ml及硼砂1g，在搅拌下加石灰乳调至pH8~9保持微沸30分钟，不断补充蒸发掉的水分，以保持pH8~9，趁热用尼龙布拧挤过滤，滤渣再加100ml沸水，再提取一次。合并滤液，在60℃~70℃用浓盐酸调pH4~5，放置过夜，抽滤，沉淀用水洗至中性，置空气中晾干得粗品芦丁。

（二）槐花米中芦丁成分的预试：取芦丁3~4mg，加乙醇5~6ml使其溶解，分成三份作下述试验：

1. 盐酸-镁粉反应。

2. ZroCl2/柠檬酸反应。

3. Molish反应。

（三）芦丁的水解、乙酰化及糖与苷元的鉴定。

实验二粉防己生物碱的提取分离与鉴定

一教学目的

通过对汉防己中几种生物碱的提取、分离、纯化和鉴定，要求掌握一定的提取分离和鉴定的知识和技能，巩固已有知识。

二教学要求

（一）掌握生物碱的一般提取方法和鉴定方法。

（二）掌握生物碱的分离、纯化的一般方法。

（三）熟悉连续回流操作，注意低沸点乙醚的使用安全。

三教学内容

（一）预试汉防己中的生物碱成分。

（二）亲酯性叔胺生物碱的提取（渗滤法），将渗滤液用新鲜的石灰乳调至pH9～10，充分静置，小心倾掉部分上清液后，抽滤得泥黄色固体。将此固体与净沙拌和均匀，烘干置连续提取器中，以乙酸乙酯为溶剂进行提取。

（三）精制：初提物用95%的乙醇加热回流溶解、制成饱和溶液，将其倾入水溶液中，使其沉淀。抽滤得亲酯性叔胺总碱。

（四）（冷甲苯法）：将亲酯性叔胺总碱称量后，置25ml锥形瓶中，加五倍量的甲苯，搅拌促溶至不溶物量不再减少，过滤，用少量甲苯洗涤不溶物后，合并甲苯溶液，并蒸馏浓缩至干，残留物用丙酮重结晶，得细棒状晶体Ⅰ，甲苯不溶物用丙酮重结晶后，得颗粒状晶体Ⅱ。

（五）鉴定：①测定熔点②薄层色谱

实验三茶叶中咖啡因的提取

一教学目的

结合理论教材，复习、巩固生物碱的理化性质，熟悉从植物中提取生物碱的一般原理和方法。初步学会利用文献资料设计科研项目的具体实施方案。通过对茶叶中咖啡因的提取掌握升华法的基本操作。

二教学要求

（一）掌握生物碱的一般提取、分离以及鉴定的方法。

（二）掌握升华法的基本操作。

（三）初步学会利用文献资料设计科研项目的具体实施方案。

三教学内容

（一）批阅学生设计的实验方案。归纳总结出简便合理、易行的方案。

（二）预试茶叶的生物碱成分。

（三）提取（方法一）：在250ml烧杯中放10g茶叶和150ml热水，煮沸20min，，滤出茶渣，茶汁于蒸发皿中浓缩至5ml，拌入石灰粉，干燥。盖上一张刺有小孔的滤纸，罩上玻璃漏斗，在电热套上小心加热使咖啡因升华，当滤纸上出现白色毛状结晶时，停止加热，收集滤纸上及漏斗内壁的咖啡因。

（四）鉴定：①测定熔点②薄层色谱

Ⅲ教学组织与方法

一实施机构：由药学系药物化学教研室执行。

二组织内容：教案讲义审核、集体教学备课、教学方法研究、教学手段应用。三教学方法：

1．实验教学：实验分组(16~20人/实验室)，学生每1~2人/组协作完成操作。

2．辅导形式：重点演示，互动提问。

3．老师指导、学生操作。

Ⅳ教学时数分配表