荧光分光光度计操作规程

日本日立F-7000荧光分光光度计基本操作规程

1、开机顺序

（1）开启计算机。（按图中圆圈按钮）

（2）开启仪器主机电源。按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮（POWER）。（按下图中圆圈按钮）

（3）观察主机正面面板右侧的Xe LAMP 和RUN指示灯依次亮起来，

都显示黄绿色。Xe LAMP灯先亮，RUN灯后亮。

2、打开运行软件。

（1）双击桌面图标（FL Solution 2.1 for F-7000）。主机自行初始化，扫描界面自动进入。

（2）初始化结束后，须预热15-20分钟(若要进行定量分析，须预热

30分钟以上，按界面提示选择操作方式。

3.点击右上角Method,进行方法设置。

若要预扫描，可选择3-D scan（如下图）.设置好方法后（见下图），再点击右上角Pre Scan（如上图），

在Instrument Monitor菜单(见下图)的Data mode中选择Fluorescence, 在EX Start WL中输入激发波长200，EX End WL中输入激发波长500,在EM Start WL中输入发射波长210(有利于保护检测器)，在EM End WL中输入700(nm)，为节约扫描时间，扫描速度Scan speed可设置为30000。点击update,可知扫描需要多少时间。EX slit和EM slit一般选择5.0（若荧光强度太弱，可提高该数值，若强度太高，可降低该数值），PMT Voltage （电压）中可选择700

（若荧光强度太弱，可提高该数值，若强度太高，可降低该数值），PMT Voltage 0-1000v前面的方框打勾后，可在上面的PMT Voltage 中随意填写电压值。在Response 中选择Auto。

在Processing菜单中(见下图)的 Y Axis中的Max中填5000或

10000，Min中填0。Contour中填写10，在open data processing window after data acquisitior前打勾。

再点击右上角Pre Scan（如下图），进行预扫描。

然后选择图谱中颜色最浓、最深、纵坐标最高的漩涡中心点，点击这个中心点，即可出现最佳激发波长、最佳发射波长及强度。

若中心点太密，看不出（如上图），可点击右键，选择scale，将contour 由10.00改为100。再点击确定。

即可出现下图情况：

点击纵坐标最高的漩涡中心，如上图和下图，在左上角即可出现最佳激发波长（EX）、最佳发射波长(EM)及强度。

待预扫描结束后，可再次点击Method, 进行重新设置，在General

菜单的Measurement中选择Wavelength scan（如下图）；

在Instrument Monitor菜单(见下图)的scan mode中选择Emission, Data中选择Fluorescence, 在EX WL中输入预扫描中得到的最佳激发波长，在EM Start WL中输入比最佳激发波长大10nm的数据(有利于保护检测器)，在EM End WL中输入700(nm)，Scan speed中选择240或1200，EX slit和EM slit一般选择5.0（若荧光强度太弱，可提高该数值，若强度太高，可降低该数值），PMT Voltage （电压）

中可选择700（若荧光强度太弱，可提高该数值，若强度太高，可降低该数值），PMT Voltage 0-1000v前面的方框打勾后，可在上面的PMT Voltage中随意填写电压值。在Response 中选择Auto, 在Replicates中选择1，在Cycle time中填0。

在Processing菜单中(见下图)的 Y Axis中的Max中填1000或2000或10000（可根据预扫描结果的荧光强度值填写Y轴荧光强度的最大值），Min中填0。Contour中填写10，在open data processing window

after data acquisitior前打勾。

4.点击右上角Sample ABC,进行数据存储模式及途径设置（见下图）。

5.点击上图右上角Measure,即可对样品进行测试，测试完后在图谱右上角点击report，再点击文件菜单“另存为”，可将图谱数据另存为excel格式。

6. 96微孔板的操作，先安装相关装置，安装后（见下图）图中画圆圈的支架突出部分要压住它边上按钮。

开机后在空白图谱上面可见MPR菜单(见下图)，点击该按钮。

出现下图情景

点击Data save,可设置数据格式及存储路线（如下图）。

点击上图中的Exchange position，放微孔板的支架会跳出来，然后可放入装有样品的微孔板，左下角为A1位置（见下图）。

选择图中有样品的比色皿，如下图，点击Sample set,可出现黄色背景，若点击Reset,可取消设置，黄色背景消失。可选择某一个样品进行预扫描（设置方法同上面叙述过的方法一样），根据预扫描结果，再对方法进行设置（设置方法同上面叙述过的方法一样），对批量样

品进行测试。

7、关机顺序（逆开机顺序实施操作）：

（1）关闭运行软件FL Solution 2.1 for F-7000。（2）关闭仪器主机电源。

（3）关闭计算机。

注意事项

（1）注意开机顺序。步骤1-（2）若是未先开主机，则程序会抓取不到主机讯号。

（2）注意关机顺序。

（3）为延长仪器使用寿命，扫描速度、负高压、狭缝的设置一般不宜选在高档。

（4）关机后必须半小时（等氙灯温度降下）方可重新开机。

F-7000荧光分光光度计使用操作步骤

1、开机：

（1）开启计算机。

（2）开启仪器主机电源。按下仪器主机左侧面板下方的黑色按钮（POWER）。同时，观察主机正面面板右侧的Xe LAMP 和RUN指示灯依次亮起来，都显示绿色。

2、计算机进入Windows XP视窗后，打开运行软件（如图1）。

（1）双击桌面图标（FL Solution 2.1 for F-7000）。主机自行初始化，扫描界面自动进入。

（2）初始化结束后，须预热15-20分钟，按界面提示选择操作方式。