金黄色葡萄球菌(牛肉膏蛋白胨培养基)
抑菌实验实训报告
一、实验目的1. 了解抑菌实验的基本原理和方法。
2. 掌握常用抑菌剂的抑菌效果。
3. 培养实验操作技能，提高对微生物学实验的实践能力。
二、实验原理抑菌实验是通过测定抑菌剂对微生物的生长抑制情况，来评价其抑菌效果的方法。
实验中，抑菌剂与微生物接触，通过干扰微生物的代谢过程或破坏其细胞结构，从而抑制其生长。
三、实验材料1. 菌株：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等。
2. 抑菌剂：苯酚、酒精、氯霉素等。
3. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基。
4. 实验仪器：无菌培养皿、无菌移液器、无菌接种环、酒精灯等。
四、实验方法1. 将金黄色葡萄球菌、大肠杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，37℃培养24小时，制成菌悬液。
2. 取无菌培养皿若干，分别加入适量的牛肉膏蛋白胨培养基。
3. 在每个培养皿中央加入适量的抑菌剂，用无菌移液器均匀涂抹。
4. 将菌悬液用无菌接种环取适量，均匀涂布于每个培养皿的抑菌剂周围。
5. 将培养皿倒置，37℃培养24小时。
6. 观察并记录抑菌圈的大小。
五、实验结果1. 苯酚：金黄色葡萄球菌抑菌圈直径约为1.5cm，大肠杆菌抑菌圈直径约为2.0cm。
2. 酒精：金黄色葡萄球菌抑菌圈直径约为1.0cm，大肠杆菌抑菌圈直径约为1.5cm。
3. 氯霉素：金黄色葡萄球菌抑菌圈直径约为2.5cm，大肠杆菌抑菌圈直径约为3.0cm。
六、实验分析1. 苯酚对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有一定的抑制作用，但效果不如氯霉素。
2. 酒精对金黄色葡萄球菌的抑制作用较弱，而对大肠杆菌的抑制作用较好。
3. 氯霉素对金黄色葡萄球菌和大肠杆菌均有较强的抑制作用。
七、实验讨论1. 抑菌实验是微生物学实验中的重要内容，通过实验可以了解不同抑菌剂的抑菌效果，为临床用药和食品加工等提供参考。
2. 实验过程中，无菌操作至关重要，否则会导致实验结果不准确。
3. 本实验结果表明，氯霉素是一种高效的抑菌剂，在临床用药和食品加工等领域具有广泛的应用前景。
八、实验总结本次抑菌实验实训，使我对抑菌实验的基本原理和方法有了更深入的了解，提高了我的实验操作技能。
细菌斜面接种实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握细菌斜面接种的基本操作方法。
2. 熟悉斜面培养基的制作和保存方法。
3. 学习通过斜面接种法分离纯化细菌。
4. 了解细菌在不同培养基上的生长特性。
二、实验原理斜面接种法是一种常用的微生物接种方法，通过将细菌接种到含有营养成分的斜面培养基上，使细菌在适宜的环境中繁殖生长。
斜面培养基通常由琼脂、蛋白胨、牛肉膏等成分组成，提供细菌生长所需的碳源、氮源、生长因子等。
三、实验材料1. 细菌样品：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等。
2. 斜面培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂斜面。
3. 实验器材：接种环、酒精灯、无菌试管、无菌培养皿、无菌水、记号笔等。
四、实验步骤1. 斜面培养基制备- 称取25g牛肉膏蛋白胨琼脂，加入100ml蒸馏水，加热溶解。
- 将溶液煮沸10分钟，以去除杂菌。
- 待溶液冷却至50-60℃时，加入无菌水调整pH至7.0-7.2。
- 将溶液分装至无菌试管中，每管10ml。
- 将试管置于高压蒸汽灭菌锅中，121℃灭菌15分钟。
- 灭菌后，待培养基冷却至45-50℃时，将试管倾斜45°，使培养基沿试管壁流下，形成斜面。
- 待培养基凝固后，将试管倒置，置于无菌环境中保存。
2. 斜面接种- 将待接种的细菌样品接种环在酒精灯上灼烧灭菌。
- 待接种环冷却后，挑取适量细菌样品，沿斜面培养基壁涂抹。
- 重复上述步骤，接种第二管斜面培养基。
3. 培养- 将接种后的斜面培养基放入恒温培养箱中，37℃培养24小时。
4. 观察与记录- 观察斜面培养基上的细菌生长情况，记录菌落形态、颜色等特征。
五、实验结果与分析1. 金黄色葡萄球菌在牛肉膏蛋白胨琼脂斜面上生长良好，形成金黄色、表面光滑、边缘整齐的菌落。
2. 大肠杆菌在牛肉膏蛋白胨琼脂斜面上生长良好，形成白色、表面光滑、边缘整齐的菌落。
六、实验讨论1. 斜面接种法是一种常用的微生物接种方法，适用于分离纯化细菌。
2. 在斜面接种过程中，无菌操作至关重要，避免杂菌污染。
抑菌圈实验实验报告
一、实验目的本实验旨在通过抑菌圈实验，观察不同抗生素对特定细菌的抑菌效果，了解抗生素的抗菌活性，并学习如何通过抑菌圈的大小判断细菌对抗生素的敏感性。
二、实验原理抑菌圈实验是微生物学中常用的方法之一，用于检测抗生素对细菌的抑制作用。
实验原理基于抗生素对细菌生长的抑制作用，当抗生素与细菌接触时，细菌的生长会受到抑制，从而在含有抗生素的培养基上形成一个无细菌生长的区域，即抑菌圈。
抑菌圈的大小可以反映抗生素的抗菌活性，通常抑菌圈越大，说明抗生素的抗菌活性越强。
三、实验材料与仪器1. 材料：- 细菌菌株：金黄色葡萄球菌（Staphylococcus aureus）- 抗生素：青霉素、红霉素、庆大霉素、链霉素- 琼脂培养基- 牛肉膏蛋白胨培养基- 水浴箱- 滴管- 铅笔- 玻璃板2. 仪器：- 培养箱- 电子天平- 灭菌器四、实验步骤1. 制备培养基：- 称取牛肉膏蛋白胨培养基，加入适量的蒸馏水，溶解后用电子天平称量，使培养基浓度为10g/L。
- 将溶解后的培养基分装至锥形瓶中，每瓶100mL，121℃高压灭菌15分钟。
- 待培养基冷却至50℃左右，加入琼脂粉，充分搅拌均匀。
- 将琼脂培养基倒入培养皿中，待其凝固。
2. 接种细菌：- 将金黄色葡萄球菌接种至牛肉膏蛋白胨培养基中，37℃培养24小时。
3. 制备抗生素纸片：- 将抗生素粉末用生理盐水溶解，配制成一定浓度的溶液。
- 用滴管将溶液滴加到无菌滤纸上，使滤纸充分浸润。
- 将滤纸晾干，制成抗生素纸片。
4. 抑菌圈实验：- 将制备好的琼脂培养基上的细菌菌落刮去，并用无菌镊子将抗生素纸片贴在培养基表面。
- 将培养皿倒置放入培养箱中，37℃培养24小时。
5. 观察与记录：- 观察培养皿中抗生素纸片周围是否形成抑菌圈，并记录抑菌圈的大小。
五、实验结果与分析1. 实验结果：- 青霉素：抑菌圈直径为15mm- 红霉素：抑菌圈直径为10mm- 庆大霉素：抑菌圈直径为20mm- 链霉素：抑菌圈直径为8mm2. 结果分析：- 根据抑菌圈的大小，可以判断金黄色葡萄球菌对不同抗生素的敏感性。
细菌氮源利用实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 掌握细菌氮源利用实验的基本原理和方法。
2. 熟悉不同氮源对细菌生长的影响。
3. 通过实验，了解细菌对氮源的适应性和代谢特点。
二、实验原理氮是细菌生长繁殖的重要营养元素，不同细菌对氮源的需求和利用能力存在差异。
本实验通过比较不同氮源对细菌生长的影响，研究细菌对氮源的利用情况。
三、实验材料与试剂1. 实验材料：大肠杆菌、枯草芽孢杆菌、金黄色葡萄球菌等细菌菌株。
2. 实验试剂：牛肉膏蛋白胨培养基、葡萄糖蛋白胨培养基、硝酸盐培养基、尿素培养基、硫酸铵培养基等。
四、实验方法1. 菌株活化：将菌株从菌种保藏管中取出，接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，37℃恒温培养18-24小时。
2. 培养基制备：分别配制牛肉膏蛋白胨培养基、葡萄糖蛋白胨培养基、硝酸盐培养基、尿素培养基、硫酸铵培养基等。
3. 接种与培养：将活化后的菌株接种于不同氮源培养基中，每个培养基接种3个平行样，37℃恒温培养18-24小时。
4. 观察与记录：观察并记录不同氮源培养基中细菌的生长情况，包括菌落形态、颜色、大小等。
五、实验结果与分析1. 牛肉膏蛋白胨培养基：细菌在该培养基上生长良好，菌落呈白色，圆形，边缘整齐。
2. 葡萄糖蛋白胨培养基：细菌在该培养基上生长较好，菌落呈白色，圆形，边缘整齐。
3. 硝酸盐培养基：细菌在该培养基上生长较差，菌落呈白色，圆形，边缘不整齐。
4. 尿素培养基：细菌在该培养基上生长良好，菌落呈白色，圆形，边缘整齐。
5. 硫酸铵培养基：细菌在该培养基上生长较好，菌落呈白色，圆形，边缘整齐。
通过实验结果可以看出，不同细菌对氮源的利用存在差异。
大肠杆菌和枯草芽孢杆菌在牛肉膏蛋白胨培养基和葡萄糖蛋白胨培养基上生长良好，说明这两种菌株对碳源和氮源的需求较高。
金黄色葡萄球菌在硝酸盐培养基和尿素培养基上生长较好，说明该菌株具有较强的硝酸盐还原和脲酶活性，能够利用硝酸盐和尿素作为氮源。
硫酸铵培养基对细菌生长的影响介于上述培养基之间。
金黄色葡萄球菌的耐药性研究
金黄色葡萄球菌的耐药性研究一、金黄色葡萄球菌的分离及培养称取10g土样，在无菌条件下，放入无菌的三角瓶中，加入90ml的蒸馏水，再加入0.2mg复方磺胺甲恶唑振荡10min，使土样充分混合，利用金黄色葡萄球菌对磺胺类药物敏感性低的特性，杀死其他细菌。
从三角瓶中取1ml上清液放入一支无菌试管（15*150mm）中按10倍梯度稀释成10-5的土壤稀释液后，分别取200μL涂布于牛肉膏蛋白胨培养基上，置于37℃培养箱中恒温培养24h。
利用高盐培养基抑制其它细菌的生长，从而分离得到金黄色葡萄球菌。
二、金黄色葡萄球菌的鉴定1.菌落形态：菌落较小，圆形，直径1-2mm，较湿，较透明，边缘整齐，隆起，略带淡绿色。
2.染色观察：从平板上挑取可疑性菌落进行革兰氏染色，金黄色葡萄球菌为革兰氏阴性菌，显微镜下呈单个或葡萄状排列，无芽孢、荚膜，单个菌体直径为0.5-1μm。
革兰氏染色：1.涂片：取灭过菌的载玻片于实验台上，用移液枪吸取10μL待检样品滴在载玻片的中央，用烧红冷却后的接种环将液滴涂步成一均匀的薄层，涂布面不宜过大。
2.干燥：将标本面向上，手持载玻片一端的两侧，小心地在酒精灯上高处微微加热，使水分蒸发，但切勿紧靠火焰或加热时间过长，以防标本烧枯而变形。
3.固定：固定常常利用高温，手持载玻片的一端，标本向上，在酒精灯火焰处尽快的来回通过2-3次，共约2-3秒钟，并不时以载玻片背面加热触及皮肤，不觉得烫为宜（不超过60℃），放置待冷后，进行染色。
4.初染：在涂片薄膜上滴加草酸铵结晶紫1-2滴，使染色液覆盖涂片，染色约为1min。
5.水洗：斜置载玻片，在自来水龙头下用小股水流冲洗，直至洗下的水呈无色为止。
6.媒染：用100-1000μL移液枪吸取300μL碘液滴在涂片薄膜上，使染色液覆盖涂片，染色约1min。
7.水洗：重复步骤5。
8.脱色：斜置载玻片，滴加95％的乙醇脱色，至流出的乙醇不显紫色为止，大约需时20-30s，随即水洗。
观察细菌实验报告结果
一、实验目的1. 学习细菌培养的基本方法。
2. 观察细菌在不同培养基上的生长情况。
3. 分析细菌的生长特征。
二、实验材料1. 细菌样品：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌等。
2. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、LB培养基、麦芽糖培养基等。
3. 培养箱：恒温培养箱。
4. 实验器材：接种环、培养皿、显微镜、酒精灯、无菌操作台等。
三、实验方法1. 细菌接种：将细菌样品用无菌操作台上的接种环取适量，分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基、LB培养基、麦芽糖培养基等。
2. 培养与观察：将接种好的培养基放入恒温培养箱中，分别于37℃、25℃、30℃等不同温度下培养，每隔一定时间观察细菌的生长情况。
3. 显微镜观察：将培养好的细菌用无菌操作台上的接种环取适量，滴在载玻片上，用显微镜观察细菌的形态、大小、颜色等特征。
四、实验结果1. 大肠杆菌培养结果：（1）牛肉膏蛋白胨培养基：在37℃培养24小时后，培养基表面出现白色菌落，菌落周围有透明圈。
（2）LB培养基：在37℃培养24小时后，培养基表面出现白色菌落，菌落周围有透明圈。
（3）麦芽糖培养基：在37℃培养24小时后，培养基表面出现白色菌落，菌落周围有透明圈。
2. 金黄色葡萄球菌培养结果：（1）牛肉膏蛋白胨培养基：在37℃培养24小时后，培养基表面出现黄色菌落，菌落周围有透明圈。
（2）LB培养基：在37℃培养24小时后，培养基表面出现黄色菌落，菌落周围有透明圈。
（3）麦芽糖培养基：在37℃培养24小时后，培养基表面出现黄色菌落，菌落周围有透明圈。
3. 枯草芽孢杆菌培养结果：（1）牛肉膏蛋白胨培养基：在25℃培养48小时后，培养基表面出现绿色菌落，菌落周围有透明圈。
（2）LB培养基：在25℃培养48小时后，培养基表面出现绿色菌落，菌落周围有透明圈。
（3）麦芽糖培养基：在25℃培养48小时后，培养基表面出现绿色菌落，菌落周围有透明圈。
五、实验分析1. 大肠杆菌在不同培养基上的生长情况基本一致，说明其生长条件较为宽松。
细菌接种_实验报告
一、实验目的1. 掌握细菌接种的基本操作方法。
2. 熟悉无菌操作技术。
3. 观察细菌在不同培养基上的生长现象。
二、实验原理细菌接种是将纯培养的细菌转移到新的培养基上，使其在适宜的环境中进行繁殖。
无菌操作技术是保证实验结果准确性的关键。
通过观察细菌在不同培养基上的生长现象，可以了解细菌的生长特征和代谢产物。
三、实验材料1. 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽胞杆菌等。
2. 培养基：牛肉膏蛋白胨固体培养基、营养肉汤培养基、糖发酵培养基等。
3. 实验器材：接种环、接种针、酒精灯、无菌棉签、培养皿、试管、显微镜等。
四、实验步骤1. 准备工作（1）将菌种从保藏瓶中取出，置于37℃恒温箱中复苏。
（2）制备牛肉膏蛋白胨固体培养基、营养肉汤培养基、糖发酵培养基等。
2. 无菌操作（1）点燃酒精灯，用无菌棉签蘸取少量酒精，在火焰上方烧灼，待棉签干燥后，用于点燃接种环。
（2）用接种环从复苏的菌种中取出一环细菌，置于培养基表面。
（3）用接种环轻轻划线，使细菌均匀分布在培养基表面。
3. 观察生长现象（1）将接种后的培养基置于37℃恒温箱中培养24小时。
（2）观察细菌在不同培养基上的生长现象，包括菌落形态、颜色、大小等。
（3）用显微镜观察细菌的菌体形态和排列。
4. 结果分析（1）牛肉膏蛋白胨固体培养基上的菌落为白色、圆形、光滑、湿润。
（2）营养肉汤培养基中的细菌生长旺盛，菌液浑浊。
（3）糖发酵培养基上的细菌在糖类周围形成透明圈，表明细菌能够发酵糖类。
五、实验结果1. 大肠杆菌在牛肉膏蛋白胨固体培养基上形成白色、圆形、光滑、湿润的菌落。
2. 金黄色葡萄球菌在牛肉膏蛋白胨固体培养基上形成金黄色、圆形、凸起、不透明的菌落。
3. 枯草芽胞杆菌在牛肉膏蛋白胨固体培养基上形成白色、圆形、凸起、不透明的菌落。
4. 营养肉汤培养基中的细菌生长旺盛，菌液浑浊。
5. 糖发酵培养基上的细菌在糖类周围形成透明圈。
六、实验结论1. 通过细菌接种实验，掌握了无菌操作技术，确保了实验结果的准确性。
牛肉膏蛋白胨培养基 接种等
实验一培养基的制备一、目的与要求（一）学习制备培养基的基本技术。
（二）制备牛肉膏蛋白琼脂培养基。
二、原理牛肉膏蛋白培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌培养基，这种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质，可供作繁殖之用，制作固体培养基时须加2%琼脂，培养细菌时，应用稀酸或稀碱将PH调至中性或微碱性。
牛肉膏蛋白培养基的配方：牛肉膏0.5%，蛋白胨1%，NaCl0.5%，pH7.4～7.6。
三、材料与仪器（一）试剂牛肉膏，蛋白胨、NaCl、琼脂、1mol/L NaOH、1mol/L HCl。
(二)其他试管，三角烧瓶，烧杯，量筒，漏斗，乳胶管，弹簧夹，纱布，棉花，牛皮纸，线绳，pH试纸，电炉，台称。
四、操作步骤（一）称量根据用量按比例依次称取成分，牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯，蛋白胨易吸湿，称量时要迅速。
（二）溶解在烧杯中加入少于所需要的水量，加热，ZHU一加入各成分，使其溶解，琼脂在溶液煮沸后加入，融化过程需不断搅拌。
加热时应注意火力，勿使培养基烧焦或溢出。
溶好后，补足所需水分。
（三）调PH 用1mol/L NaOH或1mol/L HCl把PH调至所需范围。
（四）过滤趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利于某些实验结果的观察，如无特殊要求时可省去此步骤。
（五）分装按实验要求，可将配制的培养基分装入试管内或三解瓶内，分装装置如实验图8所示；分装时注意，勿使培养基沾染在容器口上，以免沾染棉塞引起污染。
1．液体分装分装高度以试管高度的1/4左右为宜，分装三角瓶的量则根据需要而定，一般以不超过三角瓶容积的1/2为宜。
2．固体分装分装试管，其装量不超过管高的1/5，灭菌后制成斜面，斜面长度不超过管长的1/2。
分装三解瓶，以不超过容积的1/2为宜。
3．半固体分装装置以试管高度的1/3为宜，灭菌后垂直待凝。
（六）加棉塞分装完毕后，在试管口或三解瓶口塞上棉塞（或泡沫塑料塞及试管帽等，以阻止外界微生物进入培养基而造成污染，并保证有良好的通气性能。
细菌的繁殖实验报告
一、实验目的1. 了解细菌繁殖的基本原理和方法；2. 掌握细菌繁殖实验的操作步骤；3. 观察细菌繁殖过程中的形态变化和生长曲线；4. 分析细菌繁殖速率与生长环境的关系。
二、实验材料与试剂1. 实验材料：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂糖、生理盐水、无菌水、无菌棉签、无菌试管、酒精灯、显微镜等；2. 试剂：盐酸、氢氧化钠、酚红指示剂、葡萄糖、乳糖、淀粉等。
三、实验原理细菌繁殖主要通过二分裂方式进行，即一个细菌细胞分裂成两个细胞。
细菌繁殖速率受多种因素影响，如温度、pH值、营养物质等。
本实验通过观察金黄色葡萄球菌和大肠杆菌在不同条件下繁殖的情况，分析细菌繁殖速率与生长环境的关系。
四、实验步骤1. 配制培养基：按照牛肉膏蛋白胨培养基的配方，称取牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、琼脂糖等试剂，加入适量蒸馏水，加热溶解，冷却至60℃左右，加入酚红指示剂，调节pH值至7.0-7.2，分装至无菌试管中，灭菌后备用；2. 接种：将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌分别接种至牛肉膏蛋白胨培养基中，37℃恒温培养；3. 观察细菌繁殖：分别于接种后1小时、4小时、8小时、12小时、24小时、48小时观察细菌在培养基上的生长情况，记录菌落数量和形态；4. 计算繁殖速率：根据观察到的菌落数量，计算细菌繁殖速率；5. 分析细菌繁殖速率与生长环境的关系：改变培养基中的葡萄糖、乳糖、淀粉等营养物质，观察细菌繁殖情况，分析细菌繁殖速率与生长环境的关系。
五、实验结果与分析1. 金黄色葡萄球菌和大肠杆菌在牛肉膏蛋白胨培养基上均能良好生长，菌落呈圆形、隆起、金黄色（金黄色葡萄球菌）或白色（大肠杆菌）；2. 随着培养时间的延长，金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的菌落数量逐渐增加，繁殖速率逐渐加快；3. 在葡萄糖、乳糖、淀粉等营养物质存在的情况下，金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的繁殖速率均有所提高；4. 通过改变培养基的pH值、温度等条件，观察到细菌繁殖速率与生长环境的关系。
金黄色葡萄球菌自主实验方案
金黄色葡萄球菌的分离和鉴定一、实验目的金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。
因而食品受其污染的机会很多。
近年来美国疾病控制中心报告由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位仅次于大肠杆菌。
金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生难题在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的 3 3 % 加拿大则更多占到4 5 % 我国每年发生的此类中毒事件也非常多。
为控制金黄色葡萄球菌的对人的危害我们要分离出它们并研究。
二、实验原理典型的金黄色葡萄球菌为球型直径0 . 8 u m 左右显微镜下排列成葡萄串状。
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛大多数无荚膜革兰氏染色阳性。
金黄色葡萄球菌营养要求不高在普通培养基上生长良好需氧或兼性厌氧最适生长温度3 7 ° C 最适生长p H 7 . 4 , 干燥环境下可存活数周。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起直径 1 — 2 m m。
血平板菌落周围形成透明的溶血环。
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性可在 1 0 — 1 5 % N a C l 肉汤中生长。
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖产酸不产气。
甲基红反应阳性V — P 反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸水解尿素还原硝酸盐液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力对磺胺类药物敏感性低但对青霉素、红霉素等高度敏感。
对碱性染料敏感十万分之一的龙胆紫液即可抑制其生长。
三、实验材料和设备1 .培养基:牛肉膏蛋白胨培养基(13% NaCl):牛肉膏5g,蛋白胨1 0 g 氯化钠1 3 0 g 琼脂1 5 g 蒸馏水1 0 0 0 m l 1 2 1 ℃灭菌2 0 m i n 后倒平板。
肉汤培养基酵母膏5 g 蛋白胨1 0 g 氯化钠1 0 g 蒸馏水1 0 0 0 m l 1 2 1 ℃灭菌2 0 m i n 。
甲苯胺兰- D N A 平板2 . 试剂磺胺类药物、革兰氏染液3 . 仪器和设备显微镜、超净工作台、水浴锅、培养皿、锥形瓶、移液器、灭菌锅、培养箱、试管、载玻片、接菌环。
细菌培养细菌实验报告
一、实验目的1. 掌握细菌培养的基本原理和方法。
2. 学习细菌接种和纯化技术。
3. 了解细菌在不同培养基上的生长情况。
二、实验原理细菌培养是微生物学的基本实验技术之一，通过在人工配制的培养基上培养细菌，可以观察细菌的生长和代谢特征，进而对细菌进行鉴定和分类。
实验中，我们采用平板划线法将细菌接种到琼脂平板上，通过观察菌落的特征，对细菌进行分离和纯化。
三、实验材料与试剂1. 菌种：大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草芽孢杆菌2. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基3. 试剂：无菌生理盐水、无菌水、无菌滤纸、无菌接种环、无菌培养皿、酒精灯、火焰灯4. 仪器：恒温培养箱、高压蒸汽灭菌器、无菌操作台四、实验步骤1. 准备工作：将菌种从冰箱取出，恢复至室温。
将无菌生理盐水、无菌水、无菌滤纸、无菌接种环、无菌培养皿、酒精灯、火焰灯等实验器材准备好。
2. 培养基制备：按照培养基配方，将牛肉膏蛋白胨培养基和营养肉汤培养基分别称量，加入适量蒸馏水，搅拌均匀，分装到无菌培养皿中。
3. 灭菌：将培养皿放入高压蒸汽灭菌器中，121℃灭菌15分钟，取出待冷却。
4. 接种：将菌种从冰箱取出，恢复至室温。
用无菌接种环挑取少量菌种，分别接种到牛肉膏蛋白胨培养基和营养肉汤培养基中。
5. 培养：将接种后的培养皿放入恒温培养箱中，37℃培养24小时。
6. 观察与记录：观察菌落的特征，包括菌落的大小、形状、颜色、边缘、表面等。
记录菌落的特征，并对菌种进行鉴定。
五、实验结果与分析1. 大肠杆菌在牛肉膏蛋白胨培养基上生长良好，菌落呈圆形、光滑、湿润、白色、边缘整齐。
2. 金黄色葡萄球菌在牛肉膏蛋白胨培养基上生长良好，菌落呈圆形、凸起、光滑、金黄色、边缘整齐。
3. 枯草芽孢杆菌在牛肉膏蛋白胨培养基上生长良好，菌落呈圆形、粗糙、干燥、灰白色、边缘不规则。
六、实验总结通过本次实验，我们掌握了细菌培养的基本原理和方法，学会了细菌接种和纯化技术。
同时，通过观察不同菌种在不同培养基上的生长情况，加深了对细菌生长特征的认识。
玻片细菌培养实验报告
一、实验目的1. 学习细菌的培养技术。
2. 掌握玻片培养的基本方法。
3. 观察细菌的生长特征，了解细菌的生长周期。
二、实验原理细菌培养是微生物学的基础实验之一，通过在适宜的培养基上培养细菌，可以观察其生长特征，了解其生理特性。
玻片培养是一种简便的细菌培养方法，适用于观察细菌的生长过程。
三、实验材料1. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、琼脂平板培养基。
2. 实验器具：无菌玻片、接种环、酒精灯、无菌试管、无菌棉签、镊子、培养箱等。
3. 菌种：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等。
四、实验步骤1. 准备培养基（1）牛肉膏蛋白胨培养基：称取牛肉膏10g、蛋白胨10g、氯化钠5g，加蒸馏水1000ml，加热溶解后，调节pH值为7.0-7.2，过滤后分装于无菌试管中，每管10ml，高压灭菌15分钟。
（2）琼脂平板培养基：称取琼脂20g，加蒸馏水1000ml，加热溶解后，加入牛肉膏蛋白胨培养基（灭菌后的），加热溶解，待冷却至50-60℃时，倒入无菌平板中，凝固后备用。
2. 接种（1）将金黄色葡萄球菌和大肠杆菌分别接种于牛肉膏蛋白胨培养基中，培养24小时。
（2）用无菌接种环挑取少量菌液，涂布于琼脂平板培养基上，分别标记为金黄色葡萄球菌和大肠杆菌。
3. 玻片培养（1）将无菌玻片放在培养箱中预热至37℃。
（2）用无菌镊子夹取接种好的琼脂平板培养基，将菌落轻轻转移至玻片上。
（3）将玻片放在培养箱中，37℃培养24小时。
4. 观察与记录（1）观察细菌的生长情况，记录菌落形态、颜色、大小等特征。
（2）比较金黄色葡萄球菌和大肠杆菌的生长差异。
五、实验结果与分析1. 金黄色葡萄球菌在牛肉膏蛋白胨培养基上培养24小时后，菌落呈黄色，表面光滑、湿润、隆起，边缘整齐。
2. 大肠杆菌在牛肉膏蛋白胨培养基上培养24小时后，菌落呈白色，表面光滑、湿润、隆起，边缘整齐。
3. 观察到金黄色葡萄球菌和大肠杆菌在琼脂平板培养基上的生长形态与牛肉膏蛋白胨培养基上的生长形态基本一致。
金黄色葡萄球菌（牛肉膏蛋白胨培养基）
⾦黄⾊葡萄球菌（⽜⾁膏蛋⽩胨培养基）⾦黄⾊葡萄球菌（⽜⾁膏蛋⽩胨培养基）⼀、⽣物学特性典型的⾦黄⾊葡萄球菌为球型，直径0.8 ^m左右，显微镜下排列成葡萄串状。
⾦黄⾊葡萄球菌⽆芽胞、鞭⽑，⼤多数⽆荚膜，⾰兰⽒染⾊阳性。
⾦黄⾊葡萄球菌营养要求不⾼，在普通培养基上⽣长良好，需氧或兼性厌氧，最适⽣长温度37。
C，最适⽣长pH7.4。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1-2mm。
⾎平板菌落周围形成透明的溶⾎环。
⾦黄⾊葡萄球菌有⾼度的耐盐性，可在10-15% NaCI⾁汤中⽣长。
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产⽓。
甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸，⽔解尿素, 还原硝酸盐，液化明胶。
⾦黄⾊葡萄球菌具有较强的抵抗⼒，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等⾼度敏感。
⼆?流⾏病学⾦黄⾊葡萄球菌在⾃然界中⽆处不在，空⽓、⽔、灰尘及⼈和动物的排泄物中都可找到。
因⽽，⾷品受其污染的机会很多。
近年来，美国疾病控制中⼼报告，由⾦黄⾊葡萄球菌引起的感染占第⼆位，仅次于⼤肠杆菌。
⾦黄⾊葡萄球菌肠毒素是个世界性卫⽣问题，在美国由⾦黄⾊葡萄球菌肠毒素引起的⾷物中毒占整个细菌性⾷物中毒的33%，加拿⼤则更多，占4 5% ,我国每年发⽣的此类中毒事件也⾮常多。
⾦黄⾊葡萄球菌的流⾏病学⼀般有如下特点：季节分布，多见于春夏季；中毒⾷品种类多，如奶、⾁、蛋、鱼及其制品。
此外，剩饭、油煎蛋、糯⽶糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。
上呼吸道感染患者⿐腔带菌率83% ,所以⼈畜化脓性感染部位常成为污染源。
⼀般说，⾦黄⾊葡萄球菌可通过以下途径污染⾷品：⾷品加⼯⼈员、炊事员或销售⼈员带菌，造成⾷品污染；⾷品在加⼯前本⾝带菌，或在加⼯过程中受到了污染，产⽣了肠毒素，引起⾷物中毒；熟⾷制品包装不严，运输过程受到污染；奶⽜患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对⾁体其他部位的污染。
肠毒素形成条件：存放温度，在37°C内，温度越⾼，产毒时间越短；存放地点，通风不良氧分压低易形成肠毒素；⾷物种类，含蛋⽩质丰富，⽔分多，同时含⼀定量淀粉的⾷物，肠毒素易⽣成。
细菌纯培养实验报告
一、实验目的1. 掌握无菌技术操作，建立无菌观念。
2. 熟悉细菌纯培养的基本原理和操作步骤。
3. 学习观察和描述细菌菌落特征。
4. 了解培养基的制备和灭菌方法。
二、实验原理细菌纯培养是微生物学实验中的基本技术，通过无菌操作将单一细菌从混杂的微生物群体中分离出来，以获得纯种细菌。
实验原理主要包括以下几个方面：1. 无菌技术：通过一系列的无菌操作，防止微生物污染。
2. 培养基：提供细菌生长所需的营养物质。
3. 纯培养：通过稀释涂布平板法、平板划线法等手段，分离单一细菌。
三、实验材料与试剂1. 材料：金黄色葡萄球菌、牛肉膏蛋白胨培养基、无菌水、无菌棉签、无菌培养皿、酒精灯、接种环等。
2. 试剂：75%酒精、10%氯化钠溶液、无菌生理盐水等。
四、实验步骤1. 培养基制备：- 称取牛肉膏蛋白胨培养基粉末，加入适量无菌水，搅拌均匀。
- 灭菌：将培养基倒入无菌培养皿中，待冷却至50℃左右，用无菌镊子取出培养皿，轻轻晃动使培养基均匀分布。
- 灭菌：将培养皿放入高压灭菌器中，121℃灭菌20分钟。
2. 无菌操作：- 将无菌棉签用75%酒精消毒后，待酒精挥发。
- 用无菌棉签取少量金黄色葡萄球菌，在牛肉膏蛋白胨培养基平板上划线。
3. 纯培养：- 将划线后的培养皿倒置，放入恒温培养箱中培养24小时。
- 观察菌落特征，挑取单菌落进行纯培养。
4. 菌落特征观察：- 观察菌落的大小、形状、颜色、边缘、表面等特征。
- 将菌落特征与金黄色葡萄球菌的标准特征进行对比。
五、实验结果与分析1. 无菌操作：在实验过程中，严格遵循无菌操作原则，确保实验结果的准确性。
2. 培养基制备：培养基制备过程中，注意无菌操作，确保培养基的质量。
3. 纯培养：通过观察菌落特征，成功分离出金黄色葡萄球菌纯种。
4. 菌落特征：金黄色葡萄球菌菌落呈金黄色，圆形，表面光滑，边缘整齐。
六、实验结论通过本次实验，成功掌握了无菌技术操作、培养基制备、细菌纯培养等基本技能。
斜面的接种实验报告
一、实验目的1. 熟悉斜面培养基的基本特性及其在微生物培养中的应用。
2. 掌握斜面接种法的操作步骤，提高无菌操作技能。
3. 通过实验，学习微生物的纯培养方法。
二、实验原理斜面培养基是一种在微生物学实验中常用的培养基，其特点是培养基的琼脂含量较高，凝固后形成斜面，有利于微生物的生长和观察。
斜面接种法是一种将微生物从一种培养基接种到另一种培养基上的方法，通过无菌操作，确保接种过程的无菌性，从而获得纯培养。
三、实验材料1. 菌种：金黄色葡萄球菌2. 斜面培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂3. 接种工具：接种环、酒精灯、无菌操作台4. 其他：无菌生理盐水、无菌棉塞、无菌培养皿等四、实验步骤1. 无菌操作台的准备在无菌操作台内，将实验材料、接种工具等放置在无菌操作台上，确保实验环境的无菌性。
2. 菌种复苏将保存的菌种接种到牛肉膏蛋白胨琼脂斜面培养基上，在37℃恒温培养箱中培养24小时，待菌落生长后，用无菌生理盐水洗下菌苔，制成菌悬液。
3. 斜面接种将菌悬液用接种环取少量，在酒精灯火焰上灼烧，待接种环冷却后，蘸取菌悬液，在斜面培养基上划线接种。
4. 无菌操作在接种过程中，严格遵循无菌操作原则，确保接种过程的无菌性。
5. 培养与观察将接种后的斜面培养基在37℃恒温培养箱中培养24小时，观察菌落生长情况。
五、实验结果接种后的斜面培养基上，金黄色葡萄球菌菌落生长良好，菌落呈金黄色，形态规则，边缘整齐。
六、实验分析1. 斜面培养基的琼脂含量较高，凝固后形成斜面，有利于微生物的生长和观察。
2. 斜面接种法是一种将微生物从一种培养基接种到另一种培养基上的方法，通过无菌操作，确保接种过程的无菌性，从而获得纯培养。
3. 在实验过程中，严格遵循无菌操作原则，是获得纯培养的关键。
七、实验总结本次实验成功完成了斜面接种操作，掌握了斜面培养基的基本特性及其在微生物培养中的应用，提高了无菌操作技能。
在实验过程中，应严格遵守无菌操作原则，确保实验结果的准确性。
体外抑菌实验报告
为了评估不同抗生素药物的抗菌能力，本实验通过体外抑菌实验，观察并记录抗生素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌等常见细菌的抑菌效果，以期为临床合理用药提供参考。
二、实验材料1. 菌株：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌等。
2. 药物：头孢克洛、氨苄西林、阿莫西林、庆大霉素、红霉素等。
3. 培养基：牛肉膏蛋白胨琼脂培养基、M-H肉汤培养基。
4. 实验器材：培养皿、移液器、无菌试管、锥形瓶、酒精灯、高压蒸汽灭菌器等。
三、实验方法1. 菌株培养：将菌株接种于牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，37℃培养24小时。
2. 药物制备：将抗生素药物溶解于M-H肉汤培养基中，制成不同浓度的药物溶液。
3. 抑菌实验：将培养好的菌株接种于牛肉膏蛋白胨琼脂培养基，制成平板。
将不同浓度的药物溶液滴加于平板上，37℃培养24小时，观察抑菌圈直径。
4. 数据记录：记录不同浓度药物溶液的抑菌圈直径，计算抑菌率。
四、实验结果1. 头孢克洛对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌的抑菌效果较好，抑菌圈直径分别为18mm、15mm、13mm。
2. 氨苄西林对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌效果较好，对铜绿假单胞菌的抑菌效果较差，抑菌圈直径分别为12mm、10mm、5mm。
3. 阿莫西林对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌效果较好，对铜绿假单胞菌的抑菌效果较差，抑菌圈直径分别为10mm、8mm、4mm。
4. 庆大霉素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌的抑菌效果较好，抑菌圈直径分别为20mm、18mm、16mm。
5. 红霉素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌效果较好，对铜绿假单胞菌的抑菌效果较差，抑菌圈直径分别为14mm、12mm、6mm。
1. 头孢克洛、庆大霉素等抗生素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、铜绿假单胞菌具有较强的抑菌效果，可作为临床治疗此类细菌感染的首选药物。
2. 氨苄西林、阿莫西林等抗生素对金黄色葡萄球菌、大肠杆菌的抑菌效果较好，但对铜绿假单胞菌的抑菌效果较差，临床应用时需注意。
培养菌实验报告
一、实验目的1. 学习微生物培养的基本原理和操作技术。
2. 掌握配制培养基、接种、培养、观察和记录微生物生长情况的方法。
3. 了解微生物在不同培养基上的生长特点。
二、实验原理微生物培养是研究微生物的重要手段之一，通过人工配制含有微生物生长所需营养物质的培养基，为微生物提供适宜的生长环境，使其在体外大量繁殖。
微生物培养过程中，需要掌握培养基的配制、接种、培养和观察等基本操作。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：- 菌种：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌、枯草芽孢杆菌- 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、葡萄糖酵母膏培养基、琼脂糖培养基- 蒸馏水、酒精、无菌水、接种环、试管、三角瓶、培养皿、恒温培养箱、显微镜等2. 实验仪器：- 电子天平、高压蒸汽灭菌锅、酒精灯、接种针、接种环、无菌操作台、无菌试管、无菌培养皿等四、实验步骤1. 培养基制备- 称取牛肉膏蛋白胨10g、葡萄糖20g、酵母膏5g，加入1000ml蒸馏水，溶解后用无菌滤纸过滤。
- 将过滤后的培养基分装至无菌试管中，每管20ml，塞紧试管口。
- 将装有培养基的试管放入高压蒸汽灭菌锅中，121℃灭菌20分钟。
- 灭菌完成后，将试管取出，待培养基冷却至50℃左右时，加入琼脂糖15g，充分搅拌溶解。
2. 接种- 将灭菌后的培养基倒入无菌培养皿中，凝固后制成平板。
- 使用接种环从菌种培养皿中取出少量菌种，在平板上划线或点种。
- 将接种后的平板放入恒温培养箱中，37℃培养24小时。
3. 观察与记录- 观察不同菌种在不同培养基上的生长情况，记录菌落形态、颜色、大小等特征。
- 使用显微镜观察菌落，观察菌丝、芽孢等特征。
4. 数据分析- 对实验数据进行统计分析，比较不同菌种在不同培养基上的生长差异。
五、实验结果与分析1. 金黄色葡萄球菌在牛肉膏蛋白胨培养基上生长良好，菌落呈金黄色，圆形，表面光滑，边缘整齐。
2. 大肠杆菌在葡萄糖酵母膏培养基上生长良好，菌落呈红色，圆形，表面光滑，边缘整齐。
药厂细菌培养实验报告
1. 学习并掌握细菌培养的基本原理和方法。
2. 了解培养基的制备、灭菌及接种技术。
3. 观察并记录细菌的生长现象，分析细菌的代谢产物。
二、实验原理细菌培养是微生物学实验中的一项基本技术，通过提供适宜的营养和环境条件，使细菌生长繁殖，以便进行观察、分离、鉴定和研究。
实验中常用的培养基包括牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基等，其成分主要为碳源、氮源、水、无机盐和生长因子。
三、实验材料与试剂1. 菌种：金黄色葡萄球菌、大肠杆菌等。
2. 培养基：牛肉膏蛋白胨培养基、营养肉汤培养基等。
3. 试剂：无菌生理盐水、无菌接种环、无菌棉签、无菌培养皿、酒精灯、高压蒸汽灭菌器等。
四、实验步骤1. 培养基制备：称取牛肉膏、蛋白胨、氯化钠等试剂，加入适量蒸馏水，溶解后调整pH值至7.6，分装于锥形瓶中，121℃高压蒸汽灭菌20分钟。
2. 接种：用无菌接种环取少量金黄色葡萄球菌，接种于牛肉膏蛋白胨培养基平板上，37℃恒温培养24小时。
3. 观察与记录：观察菌落形态、颜色、大小等特征，并记录生长情况。
4. 细菌代谢产物检测：取培养24小时的菌液，进行生化实验，如葡萄糖发酵试验、乳糖发酵试验等。
五、实验结果与分析1. 菌落观察：金黄色葡萄球菌在牛肉膏蛋白胨培养基平板上生长良好，形成圆形、光滑、凸起、金黄色菌落。
2. 生化实验：金黄色葡萄球菌对葡萄糖、乳糖等均能发酵，产生酸和气体。
1. 细菌培养过程中，培养基的制备、灭菌及接种技术至关重要，直接影响到实验结果。
2. 生化实验有助于鉴定细菌的种类，为后续研究提供依据。
3. 本实验中，金黄色葡萄球菌生长良好，表明培养基配制合理，灭菌彻底。
七、实验结论1. 本实验成功培养了金黄色葡萄球菌，并进行了生化实验，验证了其代谢特性。
2. 通过本实验，掌握了细菌培养的基本原理和方法，为进一步研究微生物学奠定了基础。
八、注意事项1. 实验过程中应严格遵守无菌操作规程，避免污染。
2. 培养基制备、灭菌及接种过程中，注意观察并记录相关数据。
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金黄色葡萄球菌（牛肉膏蛋白胨培养基）一、生物学特性典型的金黄色葡萄球菌为球型，直径0.8 ^m左右，显微镜下排列成葡萄串状。
金黄色葡萄球菌无芽胞、鞭毛，大多数无荚膜，革兰氏染色阳性。
金黄色葡萄球菌营养要求不高，在普通培养基上生长良好，需氧或兼性厌氧，最适生长温度37。
C，最适生长pH7.4。
平板上菌落厚、有光泽、圆形凸起，直径1-2mm。
血平板菌落周围形成透明的溶血环。
金黄色葡萄球菌有高度的耐盐性，可在10-15% NaCI肉汤中生长。
可分解葡萄糖、麦芽糖、乳糖、蔗糖，产酸不产气。
甲基红反应阳性，VP反应弱阳性。
许多菌株可分解精氨酸，水解尿素, 还原硝酸盐，液化明胶。
金黄色葡萄球菌具有较强的抵抗力，对磺胺类药物敏感性低，但对青霉素、红霉素等高度敏感。
二•流行病学金黄色葡萄球菌在自然界中无处不在，空气、水、灰尘及人和动物的排泄物中都可找到。
因而，食品受其污染的机会很多。
近年来，美国疾病控制中心报告，由金黄色葡萄球菌引起的感染占第二位，仅次于大肠杆菌。
金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占4 5% ,我国每年发生的此类中毒事件也非常多。
金黄色葡萄球菌的流行病学一般有如下特点：季节分布，多见于春夏季；中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。
此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。
上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83% ,所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。
一般说，金黄色葡萄球菌可通过以下途径污染食品：食品加工人员、炊事员或销售人员带菌，造成食品污染；食品在加工前本身带菌，或在加工过程中受到了污染，产生了肠毒素，引起食物中毒；熟食制品包装不严，运输过程受到污染；奶牛患化脓性乳腺炎或禽畜局部化脓时，对肉体其他部位的污染。
肠毒素形成条件：存放温度，在37°C内，温度越高，产毒时间越短；存放地点，通风不良氧分压低易形成肠毒素；食物种类，含蛋白质丰富，水分多，同时含一定量淀粉的食物，肠毒素易生成。
三•致病性金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。
金黄色葡萄球菌的致病力强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶： a.溶血毒素：外毒素，分a B、Y 3四种，能损伤血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死； b.杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞；c.血浆凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。
葡萄球菌形成的感染易局部化与此酶有关； d.脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌；e.肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为A、B、C、D、E及F五种血清型。
肠毒素可耐受100° C煮沸30分钟而不被破坏。
它引起的食物中毒症状是呕吐和腹泻。
此外，金黄色葡萄球菌还产生溶表皮素、明胶酶、蛋白酶、脂肪酶、肽酶等。
四.检验和控制1•金黄色葡萄球菌的检验样品处理：无菌取25g或25mL食品样品，放入225mL灭菌生理盐水中均质，制成 1 0-1稀释液。
增菌培养：将10-1稀释液接入7.5%NaCI肉汤或胰蛋白胨肉汤中，37° C培养24小时。
分离培养：将上述稀释液或培养液分别划线血平板和Baird-Parker平板，置37° C培养24-48小时。
金黄色葡萄球菌在血平板上呈金黄或白色菌落，大而凸起，表面光滑，周围有溶血圈。
在Baird-Parker平板上菌落为圆形，直径2-3mm，颜色灰或黑色，周围有一浑浊带。
染色观察：从平板上挑取可疑性菌落进行革兰氏染色，金黄色葡萄球菌为革兰氏阳性，显微镜下呈葡萄状排列无芽胞、荚膜，直径0.5-1 ^m o血浆凝固酶试验：吸取0.5mL兔血浆与0.5mL金黄色葡萄球菌肉浸液肉汤24小时培养物充分混匀，置36±1°C培养，每隔半小时观察一次，连续观察6小时，出现凝固，即将小试管倾斜或倒置时，内容物不流动，判为阳性。
同时做阴阳性对照。
耐热核酸酶试验：将24小时肉汤培养物沸水浴处理 15min ，用接种环划线刺种于甲苯胺兰-DNA 平板，36±1°C 培养24小时，在刺种线周围出现淡粉色者为阳性。
本试验金黄色 葡萄球菌为阳性。
2 •金黄色葡萄球菌肠毒素检测金黄色葡萄球菌肠毒素的检测主要有动物试验、血清学试验、免疫荧光试验及酶联免疫吸附等方法，在此就不一一赘述。
3 •金黄色葡萄球菌的控制主要包括：1 ）防止金黄色葡萄球菌污染食品防止带菌人群对各种食物的污染： 定期对生产加工人员进行健康检查， 患局部化脓性感冷藏或通风阴凉地方也不应超过6小时，并且食用前要彻底加热。
牛肉膏蛋白胨培养基配方： 牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基，有时又称为普通培养基。
它含有牛肉膏、蛋白胨和NaCI 。
其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源，磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源，而NaCI 提供 无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。
琼脂在常用浓度下96 'C 时溶化，一般实际应 用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化，以免琼脂烧焦。
琼脂在40 C 时凝固，通常不被微生物分解利用。
固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。
由于这种培养基多用于培养细菌，因此，要用稀酸或稀碱将其 繁殖。
染（如疥疮、手指化脓等）、上呼吸道感染（如要暂时停止其工作或调换岗位。
防止金黄色葡萄球菌对奶及其制品的污染：患化脓性乳腺炎的牛奶；奶挤出后，要迅速冷至制品要以消毒牛奶为原料，注意低温保存。
对肉制品加工厂，患局部化脓感染的禽、式处理后进行加工生产。
2）防止金黄色葡萄球菌肠毒素的生成应在低温和通风良好的条件下贮藏食物，鼻窦炎、化脓性肺炎、口腔疾病等）的人员 如牛奶厂要定期检查奶牛的乳房，不能挤用 -10 C 以下，以防毒素生成、 细菌繁殖。
奶畜尸体应除去病变部位，经高温或其他适当方以防肠毒素形成；在气温高的春夏季， 食物置pH 调至中性或微碱性，以利于细菌的生长牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下：牛肉膏3g蛋白胨10gNaCl 5g琼脂15 —20g水1000mlpH 7 ．4—7．6三、器材牛肉膏，蛋白胨，NaCl ，琼脂；1mol/L NaOH ，1mol/L HCl ；试管，三角烧瓶，烧杯，量筒，玻棒，培养基分装器，扭力天平，牛角匙，高压蒸汽灭菌锅，pH 试纸（pH 5．5—9．0），棉花，牛皮纸，记号笔，麻绳，纱布等。
四、操作步骤1．称量按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaCl 放入烧杯中。
牛肉膏常用玻棒挑取，放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯。
也可放在称量纸上，称量后直接放入水中，这时如稍微加热，牛肉膏便会与称量纸分离，然后立即取出纸片。
蛋白胨很易吸潮，在称取时动作要迅速。
另外，称药品时严防药品混杂，一把牛角匙用于一种药品，或称取一种药品后，洗净、擦干，再称取另一药品，瓶盖也不要盖错。
2．溶化在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量，用玻棒搅匀，然后，在石棉网上加热使其溶解。
待药品完全溶解后，补充水分到所需的总体积。
如果配制固体培养基，将称好的琼脂放入已溶化的药品中，再加热溶化，在琼脂溶化的过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底使烧杯破裂。
最后补足所失的水分。
3．调pH在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始pH值，如果pH偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入1mol/L NaOH ，边加边搅拌，并随时用pH 试纸测其pH 值，直至pH 达7．6。
反之，则用1mol/L HCl 进行调节。
注意pH 值不要调过头，以避免回调，否则，将会影响培养基内各离子的浓度。
对于有些要求pH 值较精确的微生物，其pH 的调节可用酸度计进行（使用方法，可参考有关说明书）4．过滤趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利结果的观察。
一般无特殊要求的情况下，这一步可以省去（本实验无需过滤）。
5．分装按实验要求，可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。
分装装置见图V -1。
分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上，以免沾污棉塞而引起污染。
（1）液体分装分装高度以试管高度的1/4 左右为宜。
（2）固体分装分装试管，其装量不超过管高的1/5，灭菌后制成斜面，如图V -2。
分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。
（3）半固体分装试管一般以试管高度的1/3 为宜，灭菌后垂直待凝。
6．加塞培养基分装完毕后，在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞，以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染，并保证有良好的通气性能（棉塞制作方法附本实验后面）。
7．包扎加塞后，将全部试管用麻绳捆扎好，再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞，其外再用一道麻绳扎好。
用记号笔注明培养基名称、组别、日期。
三角烧瓶加塞后，外包牛皮纸，用麻绳以活结形式扎好，使用时容易解开，同样用记号笔注明培养基名称、组别、日期。
8．灭菌将上述培养基以1. 05kg/cm2 （15磅/英寸2），121 . 3°C，20分钟高压蒸汽灭菌。
如因特殊情况不能及时灭菌，则应放入冰箱内暂存。
9.搁置斜面将灭菌的试管培养基冷至50 C左右，将试管棉塞端搁在玻棒上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。
10 .无菌检查将灭菌的培养基放入37 C的温室中培养24 —48小时，以检查灭菌是否彻底枯草芽孢杆菌枯草芽孢杆菌常用培养基配方：1L 蒸馏水+20g 葡萄糖+15g 蛋白胨+5g 氯化钠+0.5g 牛肉膏+20g 琼脂PH 为7 即可，温度30 度到37 度皆可——条件不是很苛刻，比较容易培养。
或者选用Nutrient Agar （营养肉汁琼脂）Pepton （蛋白胨） 5g Beef extract （牛肉膏） 30gNaCl 5g Agar （琼脂） 15gDistilled water （蒸馏水） Adjust （调） pH to 7.0-7.2[Note] ：When cultivation of Bacillus ，5mg of to MnSO4.H2O may be added .It is favorable to promote spore formation . 适用范围：产气气杆菌、粪产碱杆菌、蜡状芽孢杆菌、蜡状芽孢杆菌蕈状变种、地衣形芽孢杆菌、巨大芽孢杆菌、多粘芽孢杆菌、尘埃芽孢杆菌、短小芽孢杆菌、嗜热脂肪芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌、枯草芽孢杆菌深黑变种、苏云金芽孢杆菌、苏云金芽孢杆菌蜡螟亚种（青虫菌）、苏云金芽孢杆菌戈尔斯德变种、苏云金芽孢杆菌猝倒亚种、产氨短杆菌、黄色短杆菌、谷氨酸棒状杆菌、北京棒杆菌、大肠埃希氏菌（大肠杆菌）、铜绿假单胞菌（绿脓杆菌）、凸形假单胞杆菌、荧光假单胞菌、弯曲假单胞菌、恶臭假单胞菌、假单胞杆菌、藤黄八叠球菌、亚黄八叠球菌、尿素八叠球菌、金黄色葡萄球菌、运动发酵单孢菌大肠埃希杆菌俗称大肠杆菌牛肉膏琼脂培养基：牛肉膏0.3 克，蛋白胨1.0 克，氯化钠0.5 克，琼脂1.5 克，水100 毫升在烧杯内加水100 毫升，放入牛肉膏、蛋白胨和氯化钠，用蜡笔在烧杯外作上记号后，放在火上加热。