2020年牛肉膏蛋白胨培养基配方(课件)

2020年牛肉膏蛋白胨培养基配

方（课件）

牛肉膏蛋白胨培养基配方：

牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。它含有牛肉膏、蛋白胨和NａCl。其中牛肉膏为微生物提供碳源和能源,磷酸盐、蛋白胨主要提供氮源，而NaＣｌ提供无机盐.在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂。琼脂在常用浓度下96℃时溶化，一般实际应用时在沸水浴中或下面垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。琼脂在４０℃时凝固,通常不被微生物分解利用。固体培养基中琼脂的含量根据琼脂的质量和气温的不同而有所不同。

由于这种培养基多用于培养细菌（荤食）,因此,要用稀酸或稀碱将其pH调至中性或微碱性，以利于细菌的生长繁殖.

牛肉膏蛋白胨培养基的配方如下：

牛肉膏３g、蛋白胨 10ｇ、NaCl 5ｇ、琼脂１5-

20g、水１0０0ml、pH 7．4—７.6（７。0—8。0）

三、器材

牛肉膏,蛋白胨, NaCｌ,琼脂；１mol/L NaＯH, 1moｌ/L HＣl；

试管,三角烧瓶，烧杯,量筒,玻棒,培养基分装器，扭力天平,牛角匙，高压蒸汽灭菌锅，pＨ试纸( pH 5．５-9。0),棉花,牛皮纸，记号笔，麻绳，纱布等。

四、操作步骤

１．称量

按培养基配方比例依次准确地称取牛肉膏、蛋白胨、NaＣｌ放入烧杯中。牛肉膏常用玻棒挑取,放在小烧杯或表面皿中称量，用热水溶化后倒入烧杯.也可放在称量纸上，称量后直接放入水中，这时如稍微加热,牛肉膏便会与称量纸分离,然后立即取出纸片.蛋白胨很易吸潮，在称取时动作要迅速。另外，称药品时严防药品混杂，一把牛角匙用于一种药品，或称取一种药品后,洗净、擦干,再称取另一药品，瓶盖也不要盖错。......感谢聆听

2。溶化

在上述烧杯中可先加入少于所需要的水量,用玻棒搅匀,然后，在石棉网上加热使其溶解。待药品完全溶解后,补充水分到所需的总体积。如果配制固体培养基,将称好的琼脂放入已溶化的药品中，再加热溶化，在琼脂溶化的过程中，需不断搅拌，以防琼脂糊底使烧杯破裂。最后补足所失的水分。......感谢聆听

3。调ｐH

在未调pH前，先用精密pH试纸测量培养基的原始ｐH值，如果pH偏酸，用滴管向培养基中逐滴加入１mol/Ｌ NaOH,边加边搅拌,并随时用pH试纸测其pH值，直至pＨ达7。6。反之，则用1mol／L HCl进行调节。注意pH值不要调过头，以避免回调，否则，将会影响培养基内各离子的浓度。......感谢聆听

对于有些要求ｐH值较精确的微生物,其pＨ的调节可用酸度计进行(使用方法,可参考有关说明书）。

4．过滤

趁热用滤纸或多层纱布过滤，以利结果的观察。一般无特殊要求的情况下，这一步可以省去(本实验无需过滤）。5．分装

按实验要求，可将配制的培养基分装入试管内或三角烧瓶内。分装装置见图Ⅴ－1.

分装过程中注意不要使培养基沾在管口或瓶口上,以免沾污棉塞而引起污染。

(1）液体分装分装高度以试管高度的1/4左右为宜。

(2）固体分装分装试管,其装量不超过管高的１／5，灭菌后制成斜面，如图Ⅴ—２.分装三角烧瓶的量以不超过三角烧瓶容积的一半为宜。

（3)半固体分装试管一般以试管高度的1/3为宜,灭菌后垂直待凝.

6.加塞

培养基分装完毕后,在试管口或三角烧瓶口上塞上棉塞，以阻止外界微生物进入培养基内而造成污染,并保证有良好的通气性能（棉塞制作方法附本实验后面）。

7．包扎

加塞后，将全部试管用麻绳捆扎好,再在棉塞外包一层牛皮纸，以防止灭菌时冷凝水润湿棉塞,其外再用一道麻绳扎好.用记号笔注明培养基名称、组别、日期。三角烧瓶加塞

后，外包牛皮纸，用麻绳以活结形式扎好,使用时容易解开，同样用记号笔注明培养基名称、组别、日期。......感谢聆听

８．灭菌

将上述培养基以1．05ｋg／ｃｍ２(15磅/英寸2),１２１．3℃，２０分钟高压蒸汽灭菌。如因特殊情况不能及

时灭菌,则应放入冰箱内暂存。

9．搁置斜面

将灭菌的试管培养基冷至5０℃左右，将试管棉塞端搁在玻棒上，搁置的斜面长度以不超过试管总长的一半为宜。

１0。无菌检查

将灭菌的培养基放入37℃的温室中培养24-４8小时,以检

查灭菌是否彻底.

PＤＡ培养基配方:

特点及用途

PDA培养基是人们对马铃薯葡萄糖琼脂培养基的简称，即Ｐｏtａto Deｘtrose Aｇar （Ｍeｄium）,依次对应马铃薯、葡萄糖、琼脂的英文.

一种常用的培养基,宜培养酵母菌、霉菌、蘑菇等真菌(素食)。酵母菌PH（3.８~6．0)，霉菌（4．0~5．8）等。按物理性状划分:固体培养基，按培养基成分划分：半合成培养基

配方

马铃薯 2００克葡萄糖 20克琼脂１5~２0克自来水100０毫升自然PＨ

配制步骤

其做法是称取200ｇ马铃薯,洗净去皮切成小块,加水煮烂（煮沸20～3０分钟,能被玻璃棒戳破即可），用四层纱布过滤,再据实际实验需要加葡萄糖和琼脂,继续加热搅拌混匀,稍冷却后再补足水分至１０００毫升,分装试管,加塞、包扎，（１２1℃）灭菌20分钟左右后取出试管摆斜面，冷却后贮存备用。......感谢聆听

其他事项

1.培养基经灭菌后，必须放在37C温箱培养24h，无菌生长者方可使用。

2。PＤA培养基一般不需要调ｐH。对于要调节ｐH的培养

基，一般用pＨ试纸测定其pＨ。如果培养基偏酸或偏碱时,可用lmol/LNaOH或lmｏl／LＨCL溶液进行调节.调节时应逐滴加入NaOH或HCl溶液,防止局部过酸或过碱破坏培养基成分。

3。培养基在使用时也可以做成不含琼脂的液体培养基，用于菌类的震荡培养.

4.培养基也可以加入氯霉素或土霉素，加入量为０.1ｇ／L培养基，主要是为了抑制细菌的生长，减少干扰性

高氏1号培养及配方：

培养放线菌用 ,改良的高氏

可溶性淀粉2g ,ＫＮO３０。1g ，K２HＰO4 0．05ｇ，MgSO４•７H2O ０。０5g ,ＮaCl 0.05g ,FeＳ

O4• 7H2O 0.０01ｇ (母液），琼脂 2g ，自来水 1０

0mL ，pH 7．2～7。4 ，灭菌 1。05ｋｇ／cm２,2０mｉn ......感谢聆听

配制时,先用少量冷水，将淀粉调成糊状,倒入少于所需水量的沸水中,在火上加热，边搅拌边依次逐一溶化其他成分，溶化后，补足水分到100ml,调ｐH，12１℃灭菌20ｍin。

高温灭菌后，倒平皿前加入１0%酚２滴至100ml培养基中混匀，将培养基倒入平皿内约15ml/皿。

高氏１号：