02 高中生物选修一 制备牛肉膏蛋白胨培养基、接种微生物 Jesse
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（三）制备牛肉膏蛋白胨培养基
（1）计算
根据牛肉膏蛋白胨培养基配方的比例，计算配制100 mL的培养基 时，各种成分的用量。
（2）称量
准确地称取各种成分。
（3）溶化
将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，
加热。
当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒取出称量纸。
往烧杯中加入称量好的蛋白胨和氯化钠，用玻棒搅拌，使其
3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 答：既可以使培养基表面的水更好地挥发，又可以防止 皿盖上水珠落入培养基，造成污染。 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖 与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？ 为什么？ 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上 滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。
溶解。
加入琼脂，加热使其熔化。在此过程中，不断用玻棒搅拌，
Biblioteka Baidu
防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。
当琼脂完全熔化后，补加蒸馏水至100 mL。
（4）灭菌 将配制好的培养基转移至锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，
并用皮筋勒紧，在放入高压灭菌锅，在压力为100 kPa、温度为
121 ℃条件下，灭菌15 ~ 30分钟。
搁置斜面操作（P课本10）
待试管冷却至50 ℃左右
斜面长度不超过试管总长的1/2
（四）接种微生物（P9） 接种：在无菌条件下将微生物接入培养基的操作过程。
接种工具：玻璃涂布器、接种针、接种环。
接种方法
穿刺接种 （固体、半固体培养基） 斜面接种（可用于菌种转移、扩大培养、短期保存）
平板划线接种 （纯化） 涂布平板接种 （纯化、计数）
将培养皿用几层旧报纸包紧，5 ~ 8套培养皿作一包，包好后
放入干热灭菌箱内，在160 ~ 170 ℃下灭菌2 h。
（5）倒平板（或搁置斜面） 倒平板操作 待培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。
问题讨论 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来 倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶 的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。
（1）计算
根据牛肉膏蛋白胨培养基配方的比例，计算配制100 mL的培养基 时，各种成分的用量。
（2）称量
准确地称取各种成分。
（3）溶化
将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，
加热。
当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒取出称量纸。
往烧杯中加入称量好的蛋白胨和氯化钠，用玻棒搅拌，使其
3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 答：既可以使培养基表面的水更好地挥发，又可以防止 皿盖上水珠落入培养基，造成污染。 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖 与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？ 为什么？ 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上 滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。
溶解。
加入琼脂，加热使其熔化。在此过程中，不断用玻棒搅拌，
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防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。
当琼脂完全熔化后，补加蒸馏水至100 mL。
（4）灭菌 将配制好的培养基转移至锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，
并用皮筋勒紧，在放入高压灭菌锅，在压力为100 kPa、温度为
121 ℃条件下，灭菌15 ~ 30分钟。
搁置斜面操作（P课本10）
待试管冷却至50 ℃左右
斜面长度不超过试管总长的1/2
（四）接种微生物（P9） 接种：在无菌条件下将微生物接入培养基的操作过程。
接种工具：玻璃涂布器、接种针、接种环。
接种方法
穿刺接种 （固体、半固体培养基） 斜面接种（可用于菌种转移、扩大培养、短期保存）
平板划线接种 （纯化） 涂布平板接种 （纯化、计数）
将培养皿用几层旧报纸包紧，5 ~ 8套培养皿作一包，包好后
放入干热灭菌箱内，在160 ~ 170 ℃下灭菌2 h。
（5）倒平板（或搁置斜面） 倒平板操作 待培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。
问题讨论 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来 倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶 的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。