02 高中生物选修一 制备牛肉膏蛋白胨培养基、接种微生物 Jesse

（三）制备牛肉膏蛋白胨培养基
（1）计算
根据牛肉膏蛋白胨培养基配方的比例，计算配制100 mL的培养基 时，各种成分的用量。
（2）称量
准确地称取各种成分。
（3）溶化
将称好的牛肉膏连同称量纸一同放入烧杯，加入少量的水，
加热。
当牛肉膏溶化并与称量纸分离后，用玻棒取出称量纸。
往烧杯中加入称量好的蛋白胨和氯化钠，用玻棒搅拌，使其
3.平板冷凝后，为什么要将平板倒置？ 答：既可以使培养基表面的水更好地挥发，又可以防止 皿盖上水珠落入培养基，造成污染。 4.在倒平板的过程中，如果不小心将培养基溅在皿盖 与皿底之间的部位，这个平板还能用来培养微生物吗？ 为什么？ 答：空气中的微生物可能在皿盖与皿底之间的培养基上 滋生，因此最好不要用这个平板培养微生物。
溶解。
加入琼脂，加热使其熔化。在此过程中，不断用玻棒搅拌，
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防止琼脂糊底而导致烧杯破裂。
当琼脂完全熔化后，补加蒸馏水至100 mL。
（4）灭菌 将配制好的培养基转移至锥形瓶中，加棉塞，包上牛皮纸，
并用皮筋勒紧，在放入高压灭菌锅，在压力为100 kPa、温度为
121 ℃条件下，灭菌15 ~ 30分钟。
搁置斜面操作（P课本10）
待试管冷却至50 ℃左右
斜面长度不超过试管总长的1/2
（四）接种微生物（P9） 接种：在无菌条件下将微生物接入培养基的操作过程。
接种工具：玻璃涂布器、接种针、接种环。
接种方法
穿刺接种 （固体、半固体培养基） 斜面接种（可用于菌种转移、扩大培养、短期保存）
平板划线接种 （纯化） 涂布平板接种 （纯化、计数）
将培养皿用几层旧报纸包紧，5 ~ 8套培养皿作一包，包好后
放入干热灭菌箱内，在160 ~ 170 ℃下灭菌2 h。
（5）倒平板（或搁置斜面） 倒平板操作 待培养基冷却至50 ℃左右时，在酒精灯火焰附近倒平板。
问题讨论 1.培养基灭菌后，需要冷却到50 ℃左右时，才能用来 倒平板。你用什么办法来估计培养基的温度？ 答：可以用手触摸盛有培养基的锥形瓶，感觉锥形瓶 的温度下降到刚刚不烫手时，就可以进行倒平板了。 2.为什么需要使锥形瓶的瓶口通过火焰？ 答：通过灼烧灭菌，防止瓶口的微生物污染培养基。