溶血性链球菌的试验方法
合集下载
相关主题
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
溶血性链球菌的测定方法
页次
生效日期
2020/01/02
察一次(一般10 min内可凝固)，待血浆凝固后继续观察并记录溶化时间。如2 h内不溶化，继续放置24 h观察，如凝块全部溶化为阳性，24 h仍不溶化为阴性。
杆菌肽敏感试验：将被检菌菌液涂于血平板上，用灭菌镊子取每片含0.04单位杆菌肽的纸片放在平板表面上，同时以已知阳性菌株作对照，在35℃±2℃下放置18～24 h，有抑菌带者为阳性。
9.5．净化工作台操作规程
10．相关记录
11.1. 生物性能检测记录。
编ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ：
日期：
审核：
日期：
批准：
日期：
有限公司
文件编号
WI-03-35
版号
A.0
溶血性链球菌的测定方法
页次
生效日期
2020/01/02
1．目的
制订溶血性链球菌的测定方法，对从事检测的操作人员进行培训指导，按测定方法操作。
2．适用范围:
本方法适用于溶血性链球菌的测定。
3. 职责
质检部对本测定方法实施负责。
4. 程序
4.1 仪器
电子天平、电热恒温鼓风干燥箱、净化工作台、手提式压力蒸汽消毒器、电热恒温水浴锅、生化培养箱 、显微镜
4.5 操作步骤
5操作步骤
取样液5 mL加入到50 mL葡萄糖肉汤，35℃±2℃培养24 h。
将培养物划线接种血琼脂平板，35℃±2℃培养24 h观察菌落特征。溶血性链球菌在血平板上为灰白色，半透明或不透明，针尖状突起，表面光滑，边缘整齐，周围有无色透明溶血圈。
挑取典型菌落作涂片革兰氏染色镜检，应为革兰氏阳性，呈链状排列的球菌。镜检符合上述情况，应进行下列试验：
4.2 器具
烧杯（250ml）、量筒（100ml）、三角烧瓶（250ml）、试管、硅胶塞、白金耳、酒精灯、培养皿（φ90mm）、刻度吸管（1ml,5ml，20ml）
4.3 培养基、菌种：
葡萄糖肉汤、血琼脂平板、草酸钾血浆、草酸钾、氯化钙、血平板、染色液（革兰氏染色用）
4.4 器具灭菌：
与样液接触的所有器具（刻度吸管、培养皿等）应按下述方法灭菌：包好后置手提式压力蒸汽消毒器内121℃20分钟高压灭菌，或置于电热恒温鼓风干燥箱内160℃2小时干热灭菌。
6结果报告
镜检革兰氏阳性链状排列球菌，血平板上呈现溶血圈，链激酶和杆菌肽试验阳性，可报告被检样品检出溶血性链球菌
7．记录保存：
7.1．品管部保管5年。
8．相关操作规程
9.1．电热鼓风干燥箱操作规程
9.2．HWS-12型电热恒温水浴锅操作规程
9.3．生化培养箱操作规程
9.4．YX手提式压力蒸汽消毒器操作规程
链激酶试验：吸取草酸钾血浆0.2 mL(0.01 g草酸钾加5 mL兔血浆混匀，经离心沉淀，吸取上清液)，加入0.8 mL灭菌生理盐水，混匀后再加入待检菌24 h肉汤培养物0.5 mL和0.25％氯化钙0.25 mL，混匀，放35℃±2℃水浴中，2 min观
有限公司
文件编号
WI-03-35
版号
A.0
页次
生效日期
2020/01/02
察一次(一般10 min内可凝固)，待血浆凝固后继续观察并记录溶化时间。如2 h内不溶化，继续放置24 h观察，如凝块全部溶化为阳性，24 h仍不溶化为阴性。
杆菌肽敏感试验：将被检菌菌液涂于血平板上，用灭菌镊子取每片含0.04单位杆菌肽的纸片放在平板表面上，同时以已知阳性菌株作对照，在35℃±2℃下放置18～24 h，有抑菌带者为阳性。
9.5．净化工作台操作规程
10．相关记录
11.1. 生物性能检测记录。
编ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ：
日期：
审核：
日期：
批准：
日期：
有限公司
文件编号
WI-03-35
版号
A.0
溶血性链球菌的测定方法
页次
生效日期
2020/01/02
1．目的
制订溶血性链球菌的测定方法，对从事检测的操作人员进行培训指导，按测定方法操作。
2．适用范围:
本方法适用于溶血性链球菌的测定。
3. 职责
质检部对本测定方法实施负责。
4. 程序
4.1 仪器
电子天平、电热恒温鼓风干燥箱、净化工作台、手提式压力蒸汽消毒器、电热恒温水浴锅、生化培养箱 、显微镜
4.5 操作步骤
5操作步骤
取样液5 mL加入到50 mL葡萄糖肉汤，35℃±2℃培养24 h。
将培养物划线接种血琼脂平板，35℃±2℃培养24 h观察菌落特征。溶血性链球菌在血平板上为灰白色，半透明或不透明，针尖状突起，表面光滑，边缘整齐，周围有无色透明溶血圈。
挑取典型菌落作涂片革兰氏染色镜检，应为革兰氏阳性，呈链状排列的球菌。镜检符合上述情况，应进行下列试验：
4.2 器具
烧杯（250ml）、量筒（100ml）、三角烧瓶（250ml）、试管、硅胶塞、白金耳、酒精灯、培养皿（φ90mm）、刻度吸管（1ml,5ml，20ml）
4.3 培养基、菌种：
葡萄糖肉汤、血琼脂平板、草酸钾血浆、草酸钾、氯化钙、血平板、染色液（革兰氏染色用）
4.4 器具灭菌：
与样液接触的所有器具（刻度吸管、培养皿等）应按下述方法灭菌：包好后置手提式压力蒸汽消毒器内121℃20分钟高压灭菌，或置于电热恒温鼓风干燥箱内160℃2小时干热灭菌。
6结果报告
镜检革兰氏阳性链状排列球菌，血平板上呈现溶血圈，链激酶和杆菌肽试验阳性，可报告被检样品检出溶血性链球菌
7．记录保存：
7.1．品管部保管5年。
8．相关操作规程
9.1．电热鼓风干燥箱操作规程
9.2．HWS-12型电热恒温水浴锅操作规程
9.3．生化培养箱操作规程
9.4．YX手提式压力蒸汽消毒器操作规程
链激酶试验：吸取草酸钾血浆0.2 mL(0.01 g草酸钾加5 mL兔血浆混匀，经离心沉淀，吸取上清液)，加入0.8 mL灭菌生理盐水，混匀后再加入待检菌24 h肉汤培养物0.5 mL和0.25％氯化钙0.25 mL，混匀，放35℃±2℃水浴中，2 min观
有限公司
文件编号
WI-03-35
版号
A.0