四种测序对比(四代测序比较)

原理应用

一代测序DNA双脱氧核苷酸末端终止法，即在

测序过程中掺入四种不同的ddNTP，

由于ddNTP末端没有羟基，所以双链

无法继续延伸，DNA合成终止。这样

合成的终产物包括了很多长短不一的

片段，利用电泳分离该混合物，依据

电泳条带即可读出片段序列。

第一次人类全基因组测序

二代测序边合成边测序，即将待测序列变性后

锚定与于固相表面，在每一个待测序

簇进行延伸互补时，每加入一个被荧

光标记的dNTP就会释放出对应的荧

光，通过对荧光信号进行捕捉来转换

成测序峰图，继而得到待测片段的序

列信息，通过生物信息学工具将可以

将片段信息进行组合，得到整个基因

中国大熊猫种群测序，大规模基因组

测序，宏观了解基因组和基因组学相

关信息

三代测序基于纳米孔相关技术的单分子测序技

术，或可称为直接测序技术。首先建

立纳米级别的孔径，使DNA分子单独

通过孔径，由于碱基化学组成不同，

其电导率也不同，根据电导率可以直

接读出相应的碱基序列。

某些罕见病的低突变率位点鉴定

基因芯片基因芯片技术基于DNA杂交原理，通

过将数以万记的寡核苷酸探针固定于

面积很小的固相上制成阵列，将待测

序列用荧光进行标记，待测序列与核

酸探针互补，洗脱后确定荧光强度最

强的位置，获得该组探针的序列，通

过生物信息学工具重组靶核苷酸全部

序列。

农作物筛选和代谢酶相关基因检测

测序方法比较

优势劣势

技术原理简单，成本低基于PCR技术，对DNA合成质量要求很高。每次只能读取一条序列。测序长度有严格的限制。

快速，操作简便，成本较低基于PCR技术，对DNA合成质量要求很高。测序长度有严格的限制。后续结果处理需要大量生物信息学支持。

不涉及PCR，测序精

确，快速，大批量样本易降低成本，可以连续检测较长的DNA序列。后续结果处理需要大量生物信息学支持。

高通量检测，容易实现自动化。寡核苷酸探针组成复杂，条件不易统一，进而造成假阳性和假阴性，对重复序列还没有很好的解决方法。