防腐挑战性实验方法
化妆品防腐挑战测试 标准
化妆品防腐挑战测试标准化妆品是现代女性的必备品之一，它们不仅可以让我们的容貌更加美丽动人，还可以提升我们的自信心。
然而，随着人们对健康和安全的关注度不断提高，化妆品防腐挑战测试成为了一个重要的话题。
那么，什么是化妆品防腐挑战测试呢？化妆品防腐挑战测试是一种用来评估化妆品中防腐剂抗菌性能的测试方法。
防腐剂是为了防止化妆品受到细菌、霉菌和其他微生物的污染而添加的一种特殊成分。
它们的作用是抑制和杀灭这些微生物，从而延长化妆品的保质期，确保产品的安全性和稳定性。
化妆品防腐挑战测试的标准是一套规范，旨在确保化妆品在正常使用条件下对细菌和真菌的抗菌性能。
这些标准通常由国际标准化组织（ISO）和美国药典（USP）等机构制定和发布。
化妆品生产商在生产过程中应遵守这些标准，以确保产品的质量和安全性。
化妆品防腐挑战测试通常包括以下几个方面的内容：1. 抗菌活性测试：该测试用来评估化妆品中防腐剂对常见细菌和真菌的抗菌能力。
常用的测试方法包括菌落计数法、抑菌环法和滤膜法等。
2. 最大抗菌负荷测试：该测试用来确定化妆品中所添加的防腐剂对细菌和真菌的最大抗菌负荷。
通过在一定浓度的化妆品中接种一定数量的微生物，并观察其生长情况，来评估防腐剂的抗菌能力。
3. 防腐剂有效性测试：该测试用于评估化妆品中防腐剂的有效性和稳定性。
常见的测试方法包括加速老化试验、温度循环试验和抗压力试验等。
化妆品防腐挑战测试的目的是确保化妆品在正常使用条件下不会受到微生物污染。
微生物污染可能导致化妆品变质、产生异味、失去功效甚至引发皮肤过敏等问题。
因此，进行防腐挑战测试是确保化妆品质量和安全性的重要手段。
化妆品生产商应该重视化妆品防腐挑战测试，并按照相关标准要求进行测试。
只有通过了测试的化妆品才能上市销售，以保证消费者的健康和安全。
此外，化妆品消费者在购买化妆品时也应该关注产品的保质期和防腐性能，选择符合标准要求的产品。
化妆品防腐挑战测试是保证化妆品质量和安全性的重要手段。
(完整word版)微生物挑战性实验方法
微生物挑战性实验方法1.0目的新产品防腐效果的测试2.0 范围公司新产品3.0参考：4 材料与方法4. 1化妆品中常用的防腐体系[ 6]营养琼脂培养基、改良马丁琼脂培养基、营养肉汤培养基、0.9%氯化钠溶液、平皿、接种环、培养箱等4. 2微生物挑战性实验4. 2. 1受试用微生物测试用细菌和霉菌均由浙江省食品和药品检验所提供。
细菌包括: 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、巨大芽胞杆菌、绿脓杆菌。
霉菌包括: 黑曲霉、黄曲霉、变色曲霉、桔青霉、拟青霉、腊叶芽枝霉、球毛壳霉、绿色木霉。
实验前，将各菌种接种于合适的培养基中, 于37℃( 细菌) 或28℃( 霉菌) 下培养。
细菌培养在2天后, 霉菌培养在3-5 天后，挑选适量菌落于灭菌的生理盐水中，制成一定浓度的混合细菌( 1×108个/ ml) 或混合霉菌悬液( 1×107个/ ml) , 置于4℃贮放备用。
4. 2. 2一次加菌的28 天微生物挑战试验此方法参照美国药典( 第2 1 版) 上微生物挑战性试验检测防腐剂效果的方法。
称取各受试样品30g, 加入混合细菌或混合霉菌悬液, 每克受检膏霜最终含菌量分别为5×106个细菌和3 ×105个霉菌。
然后充分混匀, 置于28℃下。
在接菌的0、7、14、2 1 和28天取样分析: 准确称取3g样品, 加到含有玻璃小珠的灭菌锥形瓶内, 加入27ml灭菌生理盐水, 充分震荡混匀, 此悬液为1∶10稀释液；然后再用灭菌生理盐水按10倍依次稀释。
按平板倾注法计数受试品中含菌量, 细菌培养是37 ℃下24h～48h，霉菌培养为28℃下3～5 天。
此实验用以评判防腐剂的有效与否。
评判标准为: 当每克样品中一次接菌( 1×106细菌和1×105霉菌) 后, 在第14天存活菌量减少至不高于起始浓度的0. 1%, 以后逐渐减少, 在28 天为0 。
符合标准为防腐剂有效( 通过测试) , 不符合为防腐剂无效(不通过测试)。
化妆品防腐挑战测试 标准
化妆品防腐挑战测试标准摘要：1.化妆品防腐挑战测试的背景和意义2.化妆品防腐挑战测试的标准和方法3.化妆品防腐挑战测试的应用案例4.化妆品防腐挑战测试对保障消费者健康的重要性正文：一、化妆品防腐挑战测试的背景和意义化妆品作为日常生活中不可或缺的一部分，其质量和安全性备受关注。
在化妆品生产过程中，由于水分、营养物质等成分的存在，容易引发微生物污染，导致化妆品变质、失效，甚至对使用者的健康造成威胁。
因此，化妆品防腐挑战测试应运而生，其目的是评估化妆品中防腐剂的效果，以确保产品在保质期内不会发生微生物污染。
二、化妆品防腐挑战测试的标准和方法1.标准在我国，化妆品防腐挑战测试的标准主要参照国家药监局的相关规定。
例如，2020 年第141 号公告批准月桂酰精氨酸乙酯hcl 作为化妆品准用防腐剂；2021 年74 号公告将苄氯酚列为禁用防腐剂。
此外，欧盟和美国等国家也有相应的防腐挑战测试标准。
2.方法化妆品防腐挑战测试的方法主要包括以下两种：（1）一次加菌法：在受试样品中加入一定量的已知菌种，要求样品中的细菌初始加菌浓度达到10^5~10^6 cfu/g；酵母和霉菌初始加菌浓度达到10^4~10^5 cfu/g。
然后定期跟踪检测产品中微生物的消长情况，以评估防腐剂的效果。
（2）连续接种法：在化妆品中连续加入不同种类和浓度的微生物，观察化妆品中微生物的生长情况，以评估防腐剂的效果。
三、化妆品防腐挑战测试的应用案例某化妆品生产商在开发一款新的护肤品时，为了确保产品在保质期内不会发生微生物污染，需要进行防腐挑战测试。
测试过程中，分别采用一次加菌法和连续接种法，选取多种菌株进行测试。
测试结果显示，当防腐剂浓度为0.5% 时，产品中的微生物生长得到了有效抑制。
因此，该生产商决定在生产该护肤品时，添加0.5% 的防腐剂。
四、化妆品防腐挑战测试对保障消费者健康的重要性化妆品防腐挑战测试有助于确保化妆品在保质期内不会发生微生物污染，从而保障消费者的健康和安全。
化妆品防腐性能挑战性试验及评价标准
化妆品防腐性能挑战性试验及评价标准化妆品防腐挑战性试验及评价标准投产前对产品防腐体系的可靠性做效能测试是十分必要的，目前，国内外配方设计时普遍采用防腐挑战性试验评价防腐剂的有效性。
防腐挑战性试验更接近实际应用，该方法能够模拟化妆品生产和使用过程中受到高强度的微生物污染的潜在可能性和自然界中微生物生长的最适宜条件，从而避免由微生物污染造成的损失和为消费者健康提供可靠的保证。
1.CTFA推荐的一次加菌防腐挑战性试验及评价标准CTFA的方法初始的霉菌和细菌的接种量分别为10000cfu/g（ml）和1000000cfu/g （ml）（CFU为菌落单位），要求在第7天时霉菌降低90%，细菌降低99.9%，并且在28天内菌数持续下降。
美国在CTFA评价方法的基础上提出更为严格的标准，即，若单菌接种的三个平行试验中任何一种微生物数量的平均值，在第七天时下降到100 cfu/g （ml）以下，28天全部为0，则视为效果优良通过挑战试验；若第七天时下降到1000 cfu/g（ml）以下，则视为勉强通过；若单菌接种的任何一种微生物，任何一个平行样达不到上述标准，也达不到CTFA的要求，防腐体系则评定为无效。
2.国内参照CTFA加菌防腐挑战性试验及评价标准初始接种细菌量1000000 cfu/g（mL）（1）第28天时，样品中含细菌或霉菌＞1000cfu/g（mL）该样品不能通过微生物攻击的挑战试验，表明样品的防腐体系不能有效地志到抑制微生物的作用，产品在生产、贮藏和使用中很容易受到微生物的污染。
（2）第28天时，样品中含细菌或霉菌在100 cfu/g-1000 cfu/g（mL），该样品有条件地通过挑战试验，即当产品中蛋白质或其他动植物材料成分不是特别高，同时生产的卫生环境符合要求，包装物不易发生二次污染时，该防霉体系可以使用，否则不能。
防腐剂的防腐效力检测
防腐剂的防腐效力检测本研究结合美国药典（USP）、欧洲药典（EP）及中国药典（2010，防腐效力检测的指导原则）等对某防腐剂的防腐效力进行检测，从实验用菌种、实验方法等方面考察，建立某防腐剂的防腐效力的检测方法并评价相应防腐剂的防腐效力。
防腐剂一般是化学物质，经常会受环境因素的影响降解或失活。
为确保防腐剂效力的有效性，有必要对含防腐剂最终产品的防腐效力进行科学有效的评价。
防腐效力检测实验程序一、USP、EP防腐剂防腐效力检测实验方法介绍USP、EP对防腐效力检测均有具体规定，虽然内容特别是判定标准有所不同，但所用的实验方法和原理是一致的：取一定量挑战性微生物（challenge microorganisms），接种至一定量的被测样品中，在规定温度下培养接种试样。
在28 d的培养期内，于规定时间点取样，通过平皿菌落计数法（plate-count method）或其它方法测定接种样品中剩余的存活菌浓度，通过对比菌浓度下降值，判定样品是否符合规定。
二、检测用的微生物USP、EP及中国药典推荐用的挑战微生物挑战性微生物USP EP 中国药典白色念珠菌Candida albican ATCC 10231 ATCC10231 ,NCPF 3179, IP48.72CMCC(F)98001黑曲霉Aspergillus niger ATCC 16404 ATCC16404 , IMI149007, IP1431.83CMCC(F)98003大肠埃希菌Escherichia coli ATCC 8739 ATCC8739 ,NCIMB 8545,CIP53.126CMCC(B)44102铜绿假单胞杆菌Pseudomonas aeruginosa ATCC 9027 ATCC9027,NCIMB 8626,CIP82.118CMCC(B)10104金黄色葡萄球菌Staphylococcus aureus ATCC 6538 ATCC6538,NCIMB 9518,NCTC10788 CIP4.83CMCC(B)26003试验所用菌株传代次数不得超过5代。
微生物挑战性实验方法
微生物挑战性实验方法1.0目的新产品防腐效果的测试2.0 范围公司新产品3.0参考：4 材料与方法4. 1化妆品中常用的防腐体系[ 6]营养琼脂培养基、改良马丁琼脂培养基、营养肉汤培养基、0.9%氯化钠溶液、平皿、接种环、培养箱等4. 2微生物挑战性实验4. 2. 1受试用微生物测试用细菌和霉菌均由浙江省食品和药品检验所提供。
细菌包括: 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、巨大芽胞杆菌、绿脓杆菌。
霉菌包括: 黑曲霉、黄曲霉、变色曲霉、桔青霉、拟青霉、腊叶芽枝霉、球毛壳霉、绿色木霉。
实验前，将各菌种接种于合适的培养基中, 于37℃( 细菌) 或28℃( 霉菌) 下培养。
细菌培养在2天后, 霉菌培养在3-5 天后，挑选适量菌落于灭菌的生理盐水中，制成一定浓度的混合细菌( 1×108个/ ml) 或混合霉菌悬液( 1×107个/ ml) , 置于4℃贮放备用。
4. 2. 2一次加菌的28 天微生物挑战试验此方法参照美国药典( 第2 1 版) 上微生物挑战性试验检测防腐剂效果的方法。
称取各受试样品30g, 加入混合细菌或混合霉菌悬液, 每克受检膏霜最终含菌量分别为5×106个细菌和3 ×105个霉菌。
然后充分混匀, 置于28℃下。
在接菌的0、7、14、2 1 和28天取样分析: 准确称取3g样品, 加到含有玻璃小珠的灭菌锥形瓶内, 加入27ml灭菌生理盐水, 充分震荡混匀, 此悬液为1∶10稀释液；然后再用灭菌生理盐水按10倍依次稀释。
按平板倾注法计数受试品中含菌量, 细菌培养是37 ℃下24h～48h，霉菌培养为28℃下3～5 天。
此实验用以评判防腐剂的有效与否。
评判标准为: 当每克样品中一次接菌( 1×106细菌和1×105霉菌) 后, 在第14天存活菌量减少至不高于起始浓度的0. 1%, 以后逐渐减少, 在28 天为0 。
符合标准为防腐剂有效( 通过测试) , 不符合为防腐剂无效(不通过测试)。
建筑金属制品防腐蚀试验方法
建筑金属制品防腐蚀试验方法一、引言建筑金属制品在使用过程中容易受到腐蚀的影响，降低其使用寿命和安全性。
因此，为了保证建筑金属制品的品质和持久性，必须对其进行防腐蚀试验。
本文将介绍几种常用的建筑金属制品防腐蚀试验方法。
二、盐雾试验盐雾试验是一种常用的建筑金属制品防腐蚀试验方法。
该方法通过模拟海洋环境中的腐蚀条件，将试样放置在盐雾试验箱中，以盐水喷雾的形式进行试验。
通过观察试样表面的腐蚀情况，评估建筑金属制品的耐腐蚀性能。
三、湿热试验湿热试验是另一种常用的建筑金属制品防腐蚀试验方法。
该方法通过将试样置于高温高湿的环境中，模拟建筑金属制品在潮湿环境中的腐蚀情况。
试样经过一定时间后，观察其表面的腐蚀情况，评估建筑金属制品的耐潮湿性能。
四、电化学阻抗谱法电化学阻抗谱法是一种较为精确的建筑金属制品防腐蚀试验方法。
该方法通过测量建筑金属制品表面的电化学阻抗谱，分析建筑金属与腐蚀介质之间的电化学反应，评估建筑金属制品的耐腐蚀性能。
五、腐蚀试验箱试验腐蚀试验箱试验是一种常见的建筑金属制品防腐蚀试验方法。
该方法通过将试样置于腐蚀试验箱中，利用腐蚀试验液进行试验。
试样经过一定时间后，观察其表面的腐蚀情况，评估建筑金属制品的耐腐蚀性能。
六、电化学噪声法电化学噪声法是一种新兴的建筑金属制品防腐蚀试验方法。
该方法通过测量建筑金属制品表面的电化学噪声信号，分析建筑金属与腐蚀介质之间的电化学反应，评估建筑金属制品的耐腐蚀性能。
七、结论建筑金属制品防腐蚀试验是保证其品质和持久性的重要手段。
通过盐雾试验、湿热试验、电化学阻抗谱法、腐蚀试验箱试验和电化学噪声法等多种试验方法，可以全面评估建筑金属制品的耐腐蚀性能。
在实际生产和使用中，可以根据具体情况选择适合的试验方法进行防腐蚀性能的评估，以确保建筑金属制品在各种环境中都能够稳定可靠地使用。
细菌防腐剂挑战性实验
摘要：对建立化妆品防腐体系的各种要素进行了分析，就国内外有代表性的微生物挑战试验的评价方法进行了比较，提出了符合实践情况并适用于我国化妆品行业的化妆品防腐体系的效能测试方法的评价标准，还为化妆品防腐体系筛选过程的快速判定提供了经验依据。
关键词：化妆品；防腐剂；防腐体系；微生物挑战试验大多数化妆品富含微生物生长所需的养分，环境中的微生物一俟进入，即可迅速繁殖，破坏产品的感官品质，损害消费者的健康。
因此，一个良好的防腐体系，对于化妆品产品来说是必不可少的。
1 化妆品的防腐体系化妆品的防腐体系实际上是由若干种防腐剂（和助剂）按一定比例构建而成。
防腐体系的基本要素是防腐剂，但其效能大小又与其用量和使用对象的剂型（液态、粉状、乳状、膏霜状等）特性、组成（是否含碳水化合物、蛋白质、动植物抽提物等）、pH值、可能污染的微生物种类和数量等密切相关。
1.1化妆品防腐剂早期使用的防腐剂有：尼泊金脂类、苯甲醇、烷基二甲基苄基铵氯化物、对氯间二甲酚、苯氧基乙醇、布罗波尔（Bronopol，2-溴-2-硝基丙烷-1，3-丙二醇）、道维希尔200（Dowicil-200,六亚甲基四胺衍生物）、杰马-115(Germall-115，咪唑烷基脲)、脱氢醋酸、甲醛、山梨酸等。
这些防腐剂至今很多仍在使用。
近期推广商品化的化妆品防腐剂见表1。
至于复配而成的防腐剂商品更是数不胜数。
防腐剂对微生物的最低抑制浓度（cmc）是判断一种防腐剂效果的首先考虑的基本指标，MIC值越小，表明其效力越高。
表2是某些化妆品防腐剂对主要测试微生物的MIC。
表1一些化妆品防腐剂商品及化学成分商品名称化学成分Enxylk400 甲基二溴戊二腈和苯氧乙醇Biopure100 咪唑烷基脲Nipaguard DMDMH 二甲基二羟基乙内酰脲Nipaguard TCC N-（4-氯苯基-N-3，4-二氯苯基）脲Nipacide PX (PCMX) 对氯间二甲苯酚GERMALLⅡ双咪唑烷基脲GERMALL PLUS 双咪唑烷基脲和碘丙炔基氨基甲酸丁酯（IPBC）ALLANTOIN 乙醛双酰脲SUTTOCIDE A 羟甲基甘氨酸钠华科-98、凯松CG、2-甲基-4-异噻唑啉-3-酮和5-氯-2-2甲基-4-异JX-515、YN-H3 噻唑啉-3-酮GLYDANT 二甲基二羟基乙内酰脲GLYDANT PLUS DMDM和IPBCIRGASAN DP300（玉洁新DP-300）、2，4，4’-三氯-2’-羟基二苯醚Oletron1.2化妆品的防腐体系的构建1.2.1防腐剂的复配一种万能的防腐剂是不存在的。
iso11930 防腐挑战试验方法
（原创实用版5篇）编制人员:_______________审核人员:_______________审批人员:_______________编制单位:_______________编制时间:____年___月___日序言下面是本店铺为大家精心编写的5篇《iso11930 防腐挑战试验方法》，供大家借鉴与参考。
下载后，可根据实际需要进行调整和使用，希望能够帮助到大家，谢射!（5篇）《iso11930 防腐挑战试验方法》篇1ISO 11930是关于防腐挑战试验的标准，该标准规定了评估在腐蚀性介质中材料耐久性的方法。
ISO 11930提供了一种系统的方法，用于确定材料在各种腐蚀性环境中的耐久性，包括均匀腐蚀、局部腐蚀和其他类型的腐蚀。
ISO 11930包含以下主要部分：1. 第一部分：概述和试验原理2. 第二部分：试验方法3. 第三部分：结果评价ISO 11930标准已被许多国家所接受，并被许多国际组织所引用。
在中国，该标准由国家质量监督检验检疫总局于2004年5月17日发布，并于2004年12月1日开始实行。
《iso11930 防腐挑战试验方法》篇2ISO 11930是关于防腐挑战试验的标准，该标准规定了评估在腐蚀性环境中使用的防护等级和涂层在预期使用条件下防腐性能的标准试验方法。
ISO 11930通过模拟实际使用条件，如高温、低温、湿热、干湿交替等，来评估产品的防腐性能。
这些条件可以模拟海洋、河流、湖泊和河流等水环境中常见的腐蚀性条件。
在进行ISO 11930试验时，需要将样品暴露于这些条件下，然后观察其表面和内部的腐蚀情况。
根据观察结果，可以评估产品的防腐性能，并确定其是否符合标准。
《iso11930 防腐挑战试验方法》篇3ISO 11930是关于防腐挑战试验的国际标准，该标准由国际标准化组织于1999年发布。
该标准规定了用于评估材料在特定环境条件下耐腐蚀性能的试验方法。
ISO 11930提出了以下步骤来进行防腐挑战试验：1. 准备试样：选择适当的材料（如不锈钢、铝、铜等）制成试样。
几种防腐挑战常用方法的异同
几种防腐挑战常用方法的异同一、分享主题防腐挑战方法对比二、目的介绍几种防腐挑战常用方法的异同三、具体内容目前，国际上有多种防腐挑战的测试方法可供参考，但其在所使用的微生物种类、培养条件、接种方式和评价标准不完全相同。
下面比较了CTFA（美国化妆品、盥洗用品和香料协会）、USP法（美国药典）、EP(欧洲药典）、ISO11930、广东省日化商会团体标准5种方法的异同。
1、测试微生物5种不同防腐挑战测试方法所用的测试微生物见表1。
表15种不同防腐挑战测试方法所用的测试微生物从表1中可知，USP、EP、ISO11930、广东省日化商会团体标准中对于防腐挑战测试的微生物种属是相同的，只是在具体的菌种代码有所区别。
CTFA在选取挑战用菌时的余地最大，每一类型的微生物至少需要选择一种，还可以根据实验需求选择性地添加枯草芽孢杆菌和环境中分离的微生物作为测试微生物。
欧洲药典也可以选择性地增加可能污染产品的其他微生物进行测试。
2、菌种的传代次数为防止菌种因传代次数过多后转化为敏感性菌株，各方法对菌种的传代次数均有限定，USP、广东省日化商会团体标准规定不超过5代，ISO11930则不超过3代，EP是代数越少越好。
3、接种量各方法的微生物接种量均≤1%4、菌液终浓度CTFA、广东省日化商会团体标准中规定细菌菌液在样品中的最终浓度为106CFU/g(mL)，真菌菌液的最终浓度为105CFU/g(mL)，USP、EP中细菌和真菌的菌液终浓度均为105-106CFU/g(mL)，ISO11930则规定细菌菌液的终浓度为105-106CFU/g(mL)，真菌菌液的终浓度为104-105CFU/g(mL)。
5、取样时间不同方法的取样时间间隔不一样，其中CTFA的取样间隔最密，为0、7、14、21、28天；欧洲药典没有规定具体的取样时间点；USP为0、7、14、28天；ISO11930为7、14、28天；广东省日化商会团体标准则为7、14、21、28天。
微生物挑战性实验方法(最新整理)
微生物挑战性实验方法1.0目的新产品防腐效果的测试2.0 范围公司新产品3.0参考：4 材料与方法4. 1 化妆品中常用的防腐体系[ 6]营养琼脂培养基、改良马丁琼脂培养基、营养肉汤培养基、0.9%氯化钠溶液、平皿、接种环、培养箱等4. 2 微生物挑战性实验4. 2. 1 受试用微生物测试用细菌和霉菌均由浙江省食品和药品检验所提供。
细菌包括: 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、巨大芽胞杆菌、绿脓杆菌。
霉菌包括: 黑曲霉、黄曲霉、变色曲霉、桔青霉、拟青霉、腊叶芽枝霉、球毛壳霉、绿色木霉。
实验前，将各菌种接种于合适的培养基中, 于37℃( 细菌) 或28℃( 霉菌) 下培养。
细菌培养在2天后, 霉菌培养在3-5 天后，挑选适量菌落于灭菌的生理盐水中，制成一定浓度的混合细菌( 1×108个/ ml) 或混合霉菌悬液( 1×107个/ ml) , 置于4℃贮放备用。
4. 2. 2 一次加菌的28 天微生物挑战试验此方法参照美国药典( 第2 1 版) 上微生物挑战性试验检测防腐剂效果的方法。
称取各受试样品30g, 加入混合细菌或混合霉菌悬液, 每克受检膏霜最终含菌量分别为5×106个细菌和3 ×105个霉菌。
然后充分混匀, 置于28℃下。
在接菌的0、7、14、2 1 和28天取样分析: 准确称取3g样品, 加到含有玻璃小珠的灭菌锥形瓶内, 加入27ml灭菌生理盐水, 充分震荡混匀, 此悬液为1∶10稀释液；然后再用灭菌生理盐水按10倍依次稀释。
按平板倾注法计数受试品中含菌量, 细菌培养是37 ℃下24h～48h，霉菌培养为28℃下3～5 天。
此实验用以评判防腐剂的有效与否。
评判标准为: 当每克样品中一次接菌( 1×106细菌和1×105霉菌) 后, 在第14天存活菌量减少至不高于起始浓度的0. 1%, 以后逐渐减少, 在28 天为0 。
符合标准为防腐剂有效( 通过测试) , 不符合为防腐剂无效(不通过测试)。
防腐挑战：解析和实例201205
to 100 5.00 0.10 0.15
0.15
2.00 1.50
0.10 x ---------100.00%
--- euxyl® K350
120320
0
-
1
++M -
2
+++ B, Y, M -
3
+++ B, Y, M -
4
./. -
5
6
5
0.80 % euxyl® K350* 1.00 % euxyl® K350 0 = Sterility control B = Bacteria Y = Yeast M = Mould
ASTM E-640 Ps. aeruginosa Staph. Aureus E.areogenes C.albicans
Schülke KoKo test Enterobacter gergoviae Escherichia coli Klebsellia pneumoniae Ps. aeruginosa Ps. fluorescens Ps. putida Kocuria rhizophilia Staph. aureus Candida albicans Aspergillus niger Penecillium funiculosum
4
-
free of microbial growth slight growth moderate growth massive growth
5
*euxyl® K 220 *euxyl® PE 9010
+ +
--Ingredients Phase A Deionized water Glycerin Xanthan Gum Phase B DC200(350CST) DC1403 SEPINOV EMT10 Phase C LIPOMOIST 2013 CUCUMBER EXTRACT Marin Colagen Phase D Fragrance (#61301813) Phase E Preservatives %w/w
微生物挑战性实验方法
1.0目的新产品防腐效果的测试2.0 范围公司新产品3.0参考：4 材料与方法4. 1化妆品中常用的防腐体系[ 6]营养琼脂培养基、改良马丁琼脂培养基、营养肉汤培养基、0.9%氯化钠溶液、平皿、接种环、培养箱等4. 2微生物挑战性实验4. 2. 1受试用微生物测试用细菌和霉菌均由浙江省食品和药品检验所提供。
细菌包括: 大肠杆菌、金黄色葡萄球菌、枯草杆菌、巨大芽胞杆菌、绿脓杆菌。
霉菌包括: 黑曲霉、黄曲霉、变色曲霉、桔青霉、拟青霉、腊叶芽枝霉、球毛壳霉、绿色木霉。
实验前，将各菌种接种于合适的培养基中, 于37℃( 细菌) 或28℃( 霉菌) 下培养。
细菌培养在2天后, 霉菌培养在3-5 天后，挑选适量菌落于灭菌的生理盐水中，制成一定浓度的混合细菌( 1×108 个/ ml) 或混合霉菌悬液( 1×107个/ ml) , 置于4℃贮放备用。
4. 2. 2一次加菌的28 天微生物挑战试验此方法参照美国药典( 第2 1 版) 上微生物挑战性试验检测防腐剂效果的方法。
称取各受试样品30g, 加入混合细菌或混合霉菌悬液, 每克受检膏霜最终含菌量分别为5×106个细菌和3 ×105个霉菌。
然后充分混匀, 置于28℃下。
在接菌的0、7、14、2 1 和28天取样分析: 准确称取3g样品, 加到含有玻璃小珠的灭菌锥形瓶内, 加入27ml灭菌生理盐水, 充分震荡混匀, 此悬液为1∶10稀释液；然后再用灭菌生理盐水按10倍依次稀释。
按平板倾注法计数受试品中含菌量, 细菌培养是37 ℃下24h～48h，霉菌培养为28℃下3～5 天。
此实验用以评判防腐剂的有效与否。
评判标准为: 当每克样品中一次接菌( 1×106细菌和1×105霉菌) 后, 在第14天存活菌量减少至不高于起始浓度的0. 1%, 以后逐渐减少, 在28 天为0 。
符合标准为防腐剂有效( 通过测试) , 不符合为防腐剂无效(不通过测试)。
化妆品防腐挑战
1.2防腐剂的作用：
合理延长产品的保存期； 减少产品使用过程中的污染； 保障消费者的健康安全；
1 防腐剂的介绍
1.1 防腐剂种类： 《化妆品安全卫生技术规范》（2015版）第三章 化妆品准用组分 共51类
1 防腐剂的介绍
有机酸类 酯类
酚类
防腐剂 种类
<1
>5.61
符合标准I
3 防腐挑战实验及其评价
3.6.2 举例
RX =lgNO-lgNX
log值 RX
大肠在样品中的 初始浓度（N0） 4.1×106 CFU/mL
6.61
第7天大肠菌落数 （NX）
2.8×103 CFU/mL
3.45
3.16
第14天大肠菌落数 （NX）
3.3×103 CFU/mL
3.6.1 举例
RX =lgNO-lgNX
log值 RX
大肠在样品中的 初始浓度（N0） 4.1×106 CFU/mL
6.61
第7天大肠菌落数 （NX）
2.8×103 CFU/mL
3.45
3.16
第14天大肠菌落数 （NX）
1.2×102 CFU/mL
2.08
4.53
第28天大肠菌落数 （NX） <10
混合菌
单一菌
工作量较小，模拟自然界中微生物混生杂 居的特点，更符合污染时的实际情况
3 防腐挑战实验及其评价
白色假丝酵母 ATCC10231
金黄色葡萄球菌ATCC6ห้องสมุดไป่ตู้38
巴西曲霉 ATCC16404
PS：
菌株
菌株代数均不超过5代
可以使用加入世界菌种保藏联合会的菌种保藏机构
如何评价防腐剂的防腐抑菌能力
如何评价防腐剂的防腐抑菌能力近年来，化妆品工业使用的天然原料和各种功能性添加剂日趋增多，产品更容易被微生物所侵蚀，化妆品防腐问题越来越受到重视，防腐剂成为化妆品中必不可少的成分。
那么怎样选择一款合适的防腐剂？一款好的防腐剂应该具备良好的防腐抑菌能力。
国际上普遍使用三种方法去评价防腐抑菌性能：测定最小抑菌浓度（MIC ）、防腐挑战试验、线性回归法。
①最小抑菌浓度（MIC ）MIC 是最常用的一种防腐性能评价方式，测定方法包括肉汤稀释法和琼脂稀释法。
图1 微量肉汤稀释法所用的96孔板MIC 数值越小，抑菌能力越强。
效果好的防腐剂与效果差的MIC 值相差上百倍。
国外文献建议配方中的添加量一般是最大MIC 的2-4倍（视具体情况）。
常用的防腐剂和一些无添加防腐剂的MIC 数据如下表：表1 各种防腐剂和无添加防腐剂MIC注1%=10000ppm 注②：尼泊金甲酯、尼泊金丙酯、苯氧乙醇MIC 数据来源于《化妆品化学与工艺技术大全》；1,2-己二醇、1,2-戊二醇、对羟基苯乙酮MIC 数据来自德之馨(Symrise)；Atdf ®pf -95为己脒定二(羟乙基磺酸)盐， MIC数据来自巴斯夫(BASF)；Prese®WS-61为5%包合己脒定二(羟乙基磺酸)盐，MIC数据来源于微生物研究所报告；Esonal®OSM-303为对羟基苯乙酮的复配物，为欣浪生化防腐剂。
②防腐挑战实验在防腐剂样品中，加入定量的微生物（细菌、真菌混合液）。
在此后的0/7/14/21/28天，通过测量样品中微生物的含量来评价防腐性能，实验周期长达28天。
③线性回归法线性回归法与防腐挑战实验方法很类似，但其所花费的时间比较短，周期为一周。
线性回归法通过D值（配方中的微生物菌群90%失活所需要的时间）判断配方是否通过防腐实验。
标准为：致病微生物D值≤4h，非致病细菌、酵母菌和霉菌D值≤28h。
D值越小，防腐性能越好。
防腐体系效能挑战实验(两面针)
新厂家卡松防腐体系效能挑战实验1、试验原理和判定标准本次试验采用经典的为期28天的防腐单次挑战实验，是将防腐剂混入洗发露和沐浴露配方基质中，然后一次性接入多种、一定数量的微生物进行挑战，将样品暴露在空气中，室温条件下，每周定期抽样检测其中残存的微生物，并根据微生物的数量变化情况评价样品的抗菌效果。
判定标准：①第28天时，样品中含细菌>103cfu/g(ml)，该样品不能通过微生物攻击的挑战性实验，表明样品的防腐体系不能有效地起到抑制微生物的作用，产品在生产、贮藏和使用中很容易受到微生物的污染。
②第28天时，样品中含细菌在102cfu/g(ml)-103cfu/g(ml)，该样品有条件地通过挑战性实验，即当产品中蛋白质或其它动植物材料成分不是特别高，同时生产的卫生环境符合要求，包装物不易发生二次污染时，该防腐体系可以使用，否则不能。
③第28天，样品中含细菌在10cfu/g(ml)-102cfu/g(ml)，表明该样品的防腐体系对微生物有较强的抑杀效果，通过挑战试验，产品在生产、贮藏和使用时不容易受到微生物污染。
④从第7天起，样品中的细菌<10cfu/g(ml)，说明该样品的防腐体系对微生物有特强的抑杀作用，通过挑战试验，产品在生产、贮藏和使用时很不容易被微生物污染。
2、试验仪器恒温培养箱、灭菌平皿、高压灭菌锅、酒精灯、锥形烧瓶、灭菌刻度吸管、试管、接种环、电子称。
3、培养基和试剂生理盐水、卵磷脂、吐温80-营养培养基。
4、挑战用微生物提取菌珠：有储罐间空气细菌培养得出菌种。
菌种培养：实验前，将各菌种接种于营养琼脂平板培养基，于37℃（细菌）培养箱中培养。
细菌培养48小时，挑选典型的菌落于50g灭菌的生理盐水，制成一定浓度的细菌混合悬液，置于冰箱冷藏备用。
5、微生物挑战实验取细菌的混悬液2ml，加生理盐水至20g此悬液为1:10的细菌混悬液，再用生理盐水按1:10稀释，按平板倾注法计数细菌混悬液细菌量；称取洗发露和沐浴露基质样品各20克，加入灭菌的容器内，加入10ml混合细菌悬液，充分混匀,然后置于室温下。
欧盟防腐挑战测试方法
欧盟防腐挑战测试方法
1欧盟实施防腐挑战测试方法
防腐是一项全球性的问题，欧盟作为世界上最大的单一市场之一，一直在努力打击腐败行为，确保公共资源的合理使用。
为了更好地应对腐败问题，欧盟实施了防腐挑战测试方法来增强透明度和监督机制，捍卫公共利益。
2防腐挑战测试方法的作用
防腐挑战测试方法是一种年度性的自我评估机制，旨在帮助欧盟成员国建立有效的反腐败体系，了解防腐进展和存在的困难。
该测试方法也促进了成员国之间的经验和最佳实践交流。
这些数据有助于欧盟制定反腐败政策和措施，保护公共资源和对腐败行为从严惩处。
3防腐挑战测试方法的实施
实施防腐挑战测试方法需要成员国积极配合提供相关数据信息。
测试主要依据国际公约、经验和最佳实践等标准。
测试结果会通过Eurobarometer调查发布，在公众和机构中进行广泛讨论，并在欧洲议会中进行审议。
测试的主要内容包括公共采购、财务透明度、资产和利益披露、反腐败机构和涉及欧盟反腐败立法方面等数据。
4防腐挑战测试方法的展望
防腐挑战测试方法在欧盟成员国之间逐渐形成共识，对预防和打击腐败行为起到了积极的作用。
然而，测试方法还需持续改进，确保
测试的客观性和准确性，同时加强测试结果的应用和公众监督。
这将为欧盟反腐败体系的进一步完善提供有力支持。
防腐挑战测试方法在一定程度上刺激了欧盟成员国建立反腐败机制，推动了透明度和公共资源的合理使用。
它的公开和透明的特点具有一定的示范效应，希望未来能在全球范围内得到推广和应用，为全球反腐斗争作出积极贡献。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性，平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益，请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间：9:00-18:30)。
防腐挑战性实验规程
一、目的
本方法及标准摘自欧盟标准BP2002 XVIC EFFICAIY OF ANTIMICROBIAL PRESERVATION,测定化妆品抵抗微生物的能力。
二、材料及工具
1.待检样品600g（实际操作中常用300g以节约样品）；
2.电子秤1台、不锈钢勺子、200ml烧杯、10ml试管、150ml三角烧瓶、酒精灯1盏、1ml移液枪（100～1000μL）、1ml移液枪枪尖、灭菌培养皿、0.85%灭菌生理盐水；
3.适量普通营养琼脂培养基、虎红培养基；
4.金黄色葡萄球菌、铜绿假单胞菌、大肠艾希氏菌、黑曲霉、白色念珠霉菌的菌种各1支，其菌种传代次数<5代。
三、步骤
1.标准悬液的配制
1%硫酸9.9ml与1%氯化钡0.1ml，混合后配制成的悬液浓度为3×108cfu/ml，此悬液再做3倍稀释。
2.细菌菌悬液的配制
将已培养好的活性菌种，用灭菌生理盐水清洗到灭菌锥形瓶中，充分振荡摇匀。
用移液枪从锥形瓶中吸取菌液作稀释，浊度和标准悬液的浊度（3×108cfu/ml）相同为止；
此时的稀释菌液再做3倍稀释，即为所需的1×108cfu/ml的菌悬液，做细菌总数确定细菌数。
3.霉菌菌悬液的配制
将已培养好的活性菌种，用灭菌的生理盐水清洗到灭菌锥形瓶中，充分振荡摇匀；
用移液枪从锥形瓶中吸取菌液作依次的10倍稀释，每次的稀释用血球计数板计数，必须5个中格的霉菌总数在190～210，落在此范围内的菌悬液为我们
所需的1×108cfu/ml的霉菌菌悬液，做霉菌总数确定霉菌数。
4.分别称取待测样品100g，倒入5个烧杯中，分别标记大、金、绿、黑、白及日期。
5.分别在5个烧杯中，对应加入1ml浓度为1×107～1×108cfu/ml的细菌菌悬液及霉菌菌悬液，用干净的无菌勺子搅拌均匀后盖上保鲜膜，细菌在32.5±2.5℃的培养箱中培养，霉菌在22.5±2.5℃的培养箱中培养。
6.水溶性样品
10g加入90ml无菌生理盐水，稀释后取1ml样品液，加入9ml灭菌生理盐水中，做依次稀释，分别为10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7等稀释度；取三个合适稀释度的样液，分别吸取1ml样液加入已灭菌的平皿中，做菌落计数，并做两个平行。
7.油溶性样品
取10g样品，加入10ml无菌吐温-80和10ml无菌白矿油，再加70ml无菌生理盐水，用无菌玻棒充分混匀；
吸取1ml已稀释的样品液，加入9ml灭菌生理盐水中，做依次稀释，分别为10-1、10-2、10-3、10-4、10-5、10-6、10-7等稀释度；取三个合适稀释度的样液，分别吸取1ml加入已灭菌的平皿中，做菌落计数，并做两个平行。
8.培养
细菌放在32.5±2.5℃的培养箱中培养48h；
霉菌在22.5±2.5℃的培养箱中培养5天。
9.分别在2天、7天、14天、28天分离计算样品中活的细菌、霉菌；每次计算完细菌总数、霉菌总数后将平皿放回培养箱，以待下次观察用，观察中切勿打开平皿，以免燃菌而使下次无法观察。
10.菌落计数的标准方法
①先选取平均菌落数在30～300之间的平皿作为细菌菌落总数测定范围，选取平均菌落数在5～50之间的平皿作为霉菌菌落总数测定范围；
②有两个稀释度在30～300之间，求比值。
若比值≤2，报告平均数；若比值>2，以其中较小的稀释度计算细菌总数；
③所有稀释度都大于300，以稀释度最高的平均菌落数计算；
④所有稀释度都小于30，以稀释度最低的平均菌落数计算；
⑤所有稀释度均在30～300之外，其中一个大于300，而相邻的加一稀释度小于30，则以最接近30或300的平均菌落数计算；
⑥若平皿中有连成片状或花点样菌落蔓延生长时，不宜计算；
⑦若片状菌落不到平皿中的一半，而另一半中菌落均匀，则可将此平皿菌落计数后×2，以报告全皿菌落数。
例表1：
四、注意事项
1.由于细菌易吸附到玻璃器皿表面，所以菌液加入培养皿后，应尽快倒入熔化并冷却至45℃左右培养基，立即摇匀；
2.实验结束后，所有与菌接触之物品，必须在121℃灭菌45min后处理，人员用75%酒精消毒；
3.如遇停电，应将培养箱中培养皿放入冰箱，待情况正常后再放入培养箱，如出现上述情况没有及时处理则重新实验。
五、结果标准
将活的细菌和活的霉菌计数后取lg，检验标准如下：
注：①这里是以10为底的lg，而非以自然对数e=2.718为底的log；
② lg(ab)=lg(a)+lg(b)
lg (a/b)=lg(a)-lg(b) lg(a-b)≠lg(a)-lg(b)
lg(a b)=b *lg(a)
六、实例
1.合格的实验记录
2.不合格的实验记录
七、实验需求设备、器具清单
注：此配置为常规性配置，其他缺少之器具可于后期购置。