微生物标本采集储存和转运——杨启文
微生物标本正确采集及运送
微生物标本正确采集及运送
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卫生部医政司《全国临床检验操作规程》
白细胞吞噬革兰阴性杆菌 / 革兰阳性球菌 未见白细胞吞噬
微生物标本正确采集及运送
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微生物标本正确采集及运送
女性
肥皂清洗尿道外围 以无菌纱布擦拭 用手分开大阴唇 先排出前段尿液，再以无 菌宽口容器搜集中段尿液
男性
肥皂清洗尿道外围 以无菌纱布擦拭 扶起茎阴翻上包皮 先排出前段尿液，再以无 宽口容器搜集中段尿液
微生物标本正确采集及运送
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尿标本采集注意事项
留取尿培养标本时需以无菌操作 注明是否使用抗生素 女患者月经期不宜留取尿标本 会阴部分泌物过多，应先清洁冲洗再搜集 4-8℃保留不可超出24小时 标本如不能马上送检，应存放于冰箱
微生物标本正确采集及运送
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血培养采集
双侧双瓶
微生物标本正确采集及运送
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影响血培养阳性率原因
微生物标本正确采集及运送
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血培养组合与检出率
微生物标本正确采集及运送
J Clin Microbiol. ; 45:3546-354第821页
致病菌和污染菌判别
真正菌血症：
➢ 分离有毒力菌株
检验前误差： 病人准备、标本采集、标本储存及运输不规范
微生物标本正确采集及运送
Clin Chem. Jul;53(7):1338-42. Epub May 24 Clin Chem Lab Med. ;44(6第)3:页750-9
细菌诊疗标本采集标准
微生物标本采集送检及处理原则
微生物标本采集送检及处理原则一、标本采集1.采集时机：采集标本应在疾病出现初期进行，避免开始使用抗生素治疗前采集。
2.采集部位选择：根据病情选择合适的部位进行采集，一般可根据症状、疾病类型和临床表现进行判断。
3.采集方法：采集标本时应采取无菌手法，使用无菌采样器材，避免污染和交叉感染。
4.标本储存条件：采集后的标本应立即送往实验室进行检测，若无法及时送达实验室，则应储存在合适的条件下，避免细菌的生长和繁殖。
二、标本送检1.标注采集信息：标本送检前应在标本瓶或容器上标注病人信息、采集时间和采集部位等必要的信息，确保标本的准确性和唯一性。
2.冷藏和运输：对于易变质的标本，如粪便、尿液等，应冷藏并尽早送达实验室；对于其他标本，应采取适当的保存和运输方式，避免温度过高或过低，影响细菌的生存和检测结果的准确性。
三、标本处理1.标本处理前的准备：在对标本进行处理前，必须进行准备工作，如标记标本编号、记录标本类型、检查标本的一致性和完整性等。
2.标本处理方法：根据标本类型的不同，采取相应的处理方法，如深部标本(如脑脊液、关节液等)应优先进行细菌涂片、培养等方法，浅部标本(如咽拭子、鼻拭子等)可直接进行细菌培养。
3.标本处理的时间：不同类型的标本处理时间有所不同，但一般应尽快进行处理，避免细菌在标本中的生长和污染。
四、标本保存1.标本封存：处理完的标本应在标本瓶或容器上进行标注，并进行封存，避免污染和交叉感染。
2.标本保存时间：保存标本的时间应根据实验室的需求和标本的特性来确定，如对于一些常见的标本，如尿液、粪便等，一般保存时间较短，而对于其他一些特殊标本，如组织标本等，可保存更长时间。
总之，微生物标本采集送检及处理原则的正确遵守可以确保实验结果的准确性和可靠性，为疾病的诊断和治疗提供有力的支持。
同时，医务人员在进行标本采集和处理过程中应加强无菌操作和个人防护，有效避免交叉感染的发生，保障自身和他人的健康安全。
微生物标本运送原则
微生物标本运送原则微生物标本的运送是微生物学研究中非常重要的一环，它直接关系到微生物学研究的准确性和可靠性。
因此，在微生物标本的运送过程中，需要遵循一些原则，以确保标本的完整性和准确性。
1. 标本采集标本采集是微生物学研究的第一步，它直接关系到后续研究的准确性和可靠性。
在采集标本时，需要注意以下几点：（1）采集标本的时间和地点应该尽可能的准确，以便后续的研究能够得到更加准确的结果。
（2）采集标本时需要使用无菌器具，以避免污染。
（3）采集标本时需要注意保护自己，避免被标本中的微生物感染。
2. 标本保存标本保存是微生物学研究的第二步，它直接关系到标本的完整性和准确性。
在保存标本时，需要注意以下几点：（1）标本需要保存在适当的温度和湿度下，以避免标本的变质和损坏。
（2）标本需要保存在无菌条件下，以避免污染。
（3）标本需要标注清楚采集时间、地点、采集者等信息，以便后续的研究能够得到更加准确的结果。
3. 标本运送标本运送是微生物学研究的第三步，它直接关系到标本的完整性和准确性。
在运送标本时，需要注意以下几点：（1）标本需要在规定的时间内运送到指定的实验室，以避免标本的变质和损坏。
（2）标本需要在适当的温度和湿度下运送，以避免标本的变质和损坏。
（3）标本需要在无菌条件下运送，以避免污染。
（4）标本需要标注清楚采集时间、地点、采集者等信息，并附上标本的相关资料，以便后续的研究能够得到更加准确的结果。
微生物标本的运送是微生物学研究中非常重要的一环，需要遵循一些原则，以确保标本的完整性和准确性。
只有这样，才能够得到更加准确和可靠的研究结果。
微生物标本的采集和运送基本原则
一、我院微生物标本的采集和运送基本原则1．发现医院感染应及时采集微生物标本作病原学检查，我院总的医院微生物标本送检率应不低于70％。
2．尽量在抗菌药物使用前采集标本。
3．标本采集时应严格执行无菌操作，减少或避免机体正常菌群及其他杂菌污染。
4．标本采集后立即送至实验室，床旁接种可提高病原菌检出率。
5．以棉拭子采集的标本如咽拭子、肛拭子或伤口拭子等，应标明标本种类，并立即送检。
6．盛标本容器须经灭菌处理，但不得使用消毒剂。
中段尿培养的标本应用专用的无菌尿标留取（在仓库领取）。
静脉导管、胸腹水，脑脊液等到细菌室取无菌试管留取。
7．送检标本应注明来源和检验目的，使实验室能正确选用相应的培养基和适宜的培养环境，必要时应注明选用何种抗菌药物。
二、常见医院微生物标本采集送检方法1．血液与骨髓①通常采血部位为肘静脉。
疑似细菌性心内膜炎时，以肘动脉或股动脉采血为宜。
切忌在静脉点滴抗菌药物的静脉处采取血标本。
②采血部位的局部皮肤应严格消毒。
将采集的血液注入血培养基前，应更换针头或过火消毒针头。
血培养瓶应在避光室温中保存，不必置冰箱保存。
③每次采血量成人5一10ml，婴幼儿l一5ml，培养基与血液之比以10：1-5：1为宜，以稀释血液中的抗菌药物、抗体等杀菌物质。
④怀疑菌血症应尽早采血，体温上升阶段采血可提高阳性率，但要防止因等待而延误时机。
对已用抗菌药物而又不能停药者，可在下次用药前采血。
⑤每例病人至少采血两次，间隔0.5-lh，以利于提高阳性率和区分感染菌与皮肤污染菌。
多次多部位采血可提高阳性率。
⑥对疑为细菌性骨髓炎或伤寒病人，在病灶部位或髂前(后)上棘处严格消毒后抽取骨髓lml 作增菌培养。
2．尿液①中段尿：女性采样前应先用肥皂水或0．1％高锰酸钾溶液冲洗外阴部及尿道口；男性须翻转包皮冲洗，用0.1％新洁尔灭消毒尿道口．灭菌纱布擦干后收集标本10ml，0.5小时内送检。
②导尿管导尿采样可减少污染。
对留置导尿者，可用碘酒消毒尿道口处的导尿管壁，用空针细针头斜穿管壁抽吸尿液。
临床微生物标本的选择、采集、运送及保存
临床微生物标本的选择、采集、运送及保存要发挥实验室的有效作用，选择正确生理部位和采集合适的标本及其正确运送等环节最为重要。
标本的采集和处理应该优先考虑，否则，实验室所做的工作几乎没有什么价值。
因此，所有与标本质量的各环节有关的医务工作者必须要了解在整个实验过程中保证标本质量的重要性和必要性。
实验室有责任提供相关信息资料，使之编入各科室的护理手册中。
包括详尽的安全标准，标本的选择、收集、运送、接收和填写及粘贴标签的标准。
在此手册中为您提供了临床微生物实验室的送检标本的正确采集和处理指南。
安全指南对于实验室工作人员最先考虑到的应是实验台的安全。
其他医务人员也许没在意在送往实验室的标本中潜在有病原体。
所以要制定安全规章制度以保护实验室人员和其他可能接触到病原体的人员。
大多数的微生物实验室的手册中都有实验室安全操作章节部分，实验室操作手册中还应该包括有关标本管理的安全操作的内容。
有关生物安全的参考资料对于每个微生物实验室都适用。
适用于实验室的安全参考资料应该包括有‘微生物实验室和生物实验室的生物安全指南，第三版’,以及实验室的生物安全指南：‘谨慎操作和处理传染性材料准则’。
直接有关标本的安全管理方针：1.所有采集标本的操作要戴手套，穿工作外套、口罩、甚至护目镜。
2.所有标本容器必须防漏，运送也应装入密封防漏的塑料袋中，袋上附有一表格用于填写日期、时间、姓名之用。
3.决不能将带有针头的注射器送到实验室。
应将注射器中的标本注入无菌试管中。
或采用防护手段取掉针头，再盖上注射器并放入密封防漏的塑料袋中送检。
4.不得将装有标本的破损容器送往实验室，也不能对其进一步处理。
应该及时向医生通报容器渗漏，解释如果留用标本，会带来的潜在危害性并要求重新送检。
如果新标本送来，则将泄漏的标本高温高压处理后再废弃掉。
标本的选择与采集采集送检标本前，必须有所选择标本的种类和采集部位并要反应有效病程。
如果不选择有效部位，再好的方法采集的标本，没有有效病原体也没多大临床价值。
微生物检验标本采集和运送原则
微生物检验标本采集和运送原则微生物检验标本采集和运送原则正确的标本采集和及时送检是保证细菌学检验质量的关键!其目的是要捕捉到与感染相关的病原菌并保持其活性，同时尽可能的减少其它与感染无关细菌的干扰。
下面是店铺为大家带来的关于微生物检验标本采集和运送原则的知识，欢迎阅读。
采样时机抗生素使用前(停用抗生素3至5天或下次用药前)采样采样方法采集无菌部位的标本应严格无菌操作，非无菌部位尽量减少正常菌群的污染，采样量足。
采样容器专用的无菌，防渗漏，有盖，无酸、碱、防腐剂及消毒剂污染。
送检尽快送检，一般不超过2小时。
若不能及时送检可于4-8℃保存，但对可疑淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌等对外界环境敏感的苛养菌感染的患者标本应室温保存。
当标本量小于1ml时应于15～30分钟内送检，防止挥发和干燥。
微生物检查的标本采集和运送原则1.发现感染应及时采集微生物标本作病原学检查。
2.尽量在抗菌药物使用前，或停药3至5天后采集标本，如不能停用抗菌药物，应于下次抗菌药物应用前采集。
应在感染的急性期或伤口局部治疗前采集标本。
3.选择正确的解剖部位，并以适当的技术、方法与容器收集足量的标本。
4.采样时应严格执行无菌操作，将污染可能降至最低。
5.收集真正感染的病灶处的标本，且避免邻近区域常居菌群的污染。
6.采用专用无菌容器收集标本。
容器须灭菌处理，防止渗漏，但不得使用消毒剂。
标本中不可添加防腐剂。
7.采样后应立即送检，最好在2h内。
如不能及时送检，应将标本置于适当的储存环境待送，但不超过24小时。
对可疑淋病奈瑟菌、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌等对外界环境敏感的苛养菌感染的患者标本应室温保存。
当标本量小于1ml时应于15～30分钟内送检，防止挥发和干燥。
8.尽量不要以一般棉花拭子收集标本，应使用专用的纤维拭子。
9.每份标本都应贴上标签并标明必要信息，在检验申请单上填写足够的有关临床资料。
(要标明病区、病人姓名、感染状况、近期抗菌药物使用情况、标本来源、检验目的、采集部位、采集及送检时间等)10.同一天同一检测目的、相同标本(血液标本除外)一般只需送检一次(份)。
临床微生物标本的采集,储存和转运
临床微生物标本的采集，储存和转运微生物检验的基本原则1.及时采集微生物标本作病原学检查2.在抗菌药物使用前采集标本3.采样时严格执行无菌操作4.采样后立即送检5.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂6.送检标本应注明来源和检验目的标本采集1.尽早采集2.无菌操作3.合适部位4.适量标本5.适当方法6.安全采集1-尽早采集标本“采集重在时效性”1.1最好是病程早期、急性期1.2尽量在抗生素使用之前采集1.3对已用抗生素又不能停药者，可在下次用药前采集2-合适部位“背景干扰”2.1无菌标本:注意局部及周围皮肤的消毒，严格进行无菌操作与外界相通的腔道:避开腔道口区标本，以免皮肤表面正常菌群的污染，造成混淆和误诊。
2.2正常菌群寄生部位：采集时应特别小心；应明确检查的目的菌在进行分离培养时，采用特殊选择性培养基2.3血标本采集:应避免输液的影响。
3-无菌操作采集标本时应尽量减少或避免感染部位附近皮肤或粘膜常居菌群污染和防止外源性细菌污染标本。
3.1.在采集血液、脑脊液、胸腔积液、关节液等无菌标本时，应注意对局部及周围皮肤的消毒，严格进行无菌操作；3.2.对于采集与外界相通的腔道标本时，如窦道标本，应从窦道底部取活组织检查，而非从窦道口取标本，以免受皮肤表面正常菌群的污染，造成混淆和误诊；3.3.采集的标本均应盛于无菌容器内送检。
盛装标本的容器须先经高压灭菌、煮沸、干热等物理方法灭菌，或使用一次性无菌容器，不能用消毒剂或酸类处理。
标本中也不得添加防腐剂，一面降低病原菌的分离率。
4-适量标本4.1标本采集应足量。
标本量过少，可能会导致假阴性结果。
4.1.1血液标本:通常成人采血量每瓶8-10ml,儿童每瓶1-5ml;脑脊液、骨髓、4.1.2脓肿、穿刺液、引流液、痰液等标本：三1ml尿液标本：＞3ml4.1.3粪标本：1-3g 或 1-3ml4.2结核标本采集量要求特殊：4.2.1痰、肺泡灌洗液或支气管冲洗液：>5ml;4.2.2清晨中段尿：5-10ml;4.2.3粪标本：>1g;4.2.4穿刺液(胸水、腹水、关节液等)：5- 10ml。
关于微生物检验标本采集和运送
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6.采用专用无菌容器收集标本。容器须灭菌处理，防止渗
漏，但不得使用消毒剂。标本中不可添加防腐剂。
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7.采样后应立即送检，最好在2h内。如不能及时送检，应将标
本置于适当的储存环境待送，但不超过24小时。对可疑淋病奈瑟菌
、脑膜炎奈瑟菌、流感嗜血杆菌、肺炎链球菌等对外界环境敏感的
苛养菌感染的患者标本应室温保存。当标本量小于1ml时应于15～
• 3.选择正确的解剖部位，并以适当的技术、方法与 容器收集足量的标本。
• 4.采样时应严格执行无菌操作，将污染可能降至最 低。
• 5.收集真正感染的病灶处的标本，且避免邻近区域 常居菌群的污染。
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• 注意事项：
• 采样时机
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抗生素使用前（停用抗生素3至5天或下次用药前）采样
• 采样方法
•
采集无菌部位的标本应严格无菌操作，非无菌部位尽量减少正
关于微Байду номын сангаас物检验标本 采集和运送原则
内容
• 1.微生物标本及常见致病菌 • 2.微生物检验标本采集和运送原则 • 3.图片展示：现场指导和培训
微生物标本及常见致病菌
• 1.血液标本血液标本的细菌培养是诊断菌血症 或败血病的基本方法。
• 正常人的血液是无菌的、如从患者血液中检出细 菌一般应视为病原菌(排除采集标本或具他操作 过程污染)，提示有菌血症或败血症，或心内膜 炎、心包炎、血源性骨髓炎。常见的病原菌主要 有金黄色或表皮葡萄球菌、链球菌(A、B群，肺 炎链球菌等)、肠球菌、产单核细胞李斯特菌、 脑膜炎奈瑟菌、伤寒及副伤寒沙门菌和厌氧菌等 。
• 2.骨髓标本正常人的骨髓是无菌的。
• 若从患者骨髓中检出细菌(排除污染)，提示细菌 性骨髓炎或菌血症、败血症。常见病原菌同血液
临床微生物标本的采集方法与运送图文
临床微生物标本的采集方法与运送图文在医学诊断中，微生物检测被广泛应用于诊断及治疗方案制定。
正确采集和运送微生物标本是确保检测结果准确的关键步骤之一。
本文将详细介绍临床微生物标本的采集方法及运送注意事项。
采集方法血液标本血液标本采集是常用的微生物检测方法之一。
常规采集方法包括静脉血采集、指尖穿刺采集和动脉血采集等。
1.静脉血采集静脉血采集通常用于需要采集大量样本的情况下，如血培养、真菌检测、病毒检测等。
采集前应先消毒采血部位，选定静脉进行穿刺，然后注入抗凝剂。
2.指尖穿刺采集指尖穿刺采集用于小儿或需要采集微量血液时。
采集前应消毒手指或手掌，然后用专用的采血器进行采集。
3.动脉血采集动脉血采集比较少用于微生物检测，但对于严重感染、危重患者或需要测定动脉血分析得出合理治疗方案的情况下，动脉血采集是必要的。
采集前应选择合适的部位和方法，如可以选择桡动脉或股动脉，用专用的采血器进行采集。
呼吸道标本呼吸道标本采集常用于肺炎、支气管炎等疾病的微生物检测。
常规采集方法包括咳痰、纤维支气管镜、气管切开等。
1.咳痰采集咳痰采集过程中患者需要深呼吸几次，准备好试管，让患者咳出一口痰，不能含有口沫、唾液或食物颗粒等，尽可能采集量充足，同时尽量避免污染。
2.纤维支气管镜纤维支气管镜是通过口腔或鼻腔插入支气管，然后利用摄像技术和采样器具进行采集的方法。
此方法是针对深部病菌感染的有效手段。
3.气管切开气管切开是一种采集深部呼吸道标本的方法，因为它可以避免口咽部的影响。
采集前应选择合适的气管穿刺部位、清洁穿刺部位、取下上管再采集等步骤。
尿液标本尿液标本的采集主要是为了检测尿路感染等微生物，采集前需要保持尿液清洁，防止细菌污染。
1.中段尿采集中段尿采集是指采集尿液的中部部分，采集前应积极清洗外阴，然后让患者将外阴分开并向前弯腰（女性可用专用的尿盆）。
取适量中段尿，例如5ml，尽量避免皮肤分泌物或洗浴用品污染。
2.空腹尿采集空腹尿采集是指清晨患者从自然排空开始（胆红素改变尿色）到第二个排尿前采集尿样，此时虽然尿液浓度高，但细菌数量少，采集丰富，适用于对尿细菌进行检测。
病原微生物标本的采集保存及运输
目录
• 引言 • 病原微生物标本的采集 • 病原微生物标本的保存 • 病原微生物标本的运输 • 病原微生物标本的管理和记录 • 总结
01
引言
目的和背景
病原微生物标本的采集、保存和 运输是疾病诊断、治疗和防控的
重要环节。
随着微生物学和医学技术的不断 发展，对病原微生物标本的采集、 保存和运输提出了更高的要求。
采集前应了解患者的 病史和用药情况，以 确定合适的采集方法 和时间。
采集的标本应具有代 表性，能够真实反映 患者的病情。
采集时应遵循无菌操 作原则，避免交叉感 染。
采集过程中的防护措施
采集人员应穿戴防护服、口罩、手套 等个人防护用品。
采集后的废弃物应进行正确的消毒和 处置，避免对环境和人员造成危害。
利用信息技术手段，如电子化表 格、数据库等，对病原微生物标
本进行信息化管理。
建立信息化管理系统，实现病原 微生物标本的采集、保存、运输
和管理的信息化和自动化。
通过信息化管理，提高病原微生 物标本的管理效率，降低人为错
误和疏漏的风险。
定期检查和销毁
对病原微生物标本进行定期检查，确保 其质量和有效性。
保存容器和标签
容器选择
选择密封性好、防漏、耐压、透 明的容器，以便观察标本的状态 。
标签信息
在容器上贴上标签，注明标本的 来源、种类、采集时间等信息， 以便识别和管理。
保存温度和湿度
温度控制
根据不同病原微生物的特性，选择适宜的保存温度，如冷藏 、冷冻等。
湿度要求
保持适当的湿度，以防止标本过度干燥或吸湿，影响微生物 的活性。
对过期或失效的病原微生物标本进行销 建立销毁记录，对销毁过程进行详细记
微生物标本的采集方法与运送
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微生物让人类步步为营
我们应该追求： “准确的病原学诊断” “针对性病原学治疗”
正确的微生物标本采集和运送，是准确的病原学 诊断的前提！
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基本原则
1.及时采集微生物标本作病原学检查（早期采集）
2.在抗菌药物使用前采集标本（早期采集）
3.采样时严格执行无菌操作（无菌采集） 4.标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂（无菌采集） 5.送检标本应注明来源和检验目的 6.采样后立即送检 7.做好防护（生物安全）
所以要最先采集血培养标本。 污染率的指标是 < 3% （100份标本里只能有不到3个标本出现污染。）
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———关于皮肤及培养瓶 消毒
“消毒的重点是足够量的消毒剂。”
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皮肤消毒程序
1.皮肤消毒程序 严格执行以下三步法: (1) 70%酒精擦拭静脉穿刺部位待30秒以上。 (2) 1%～2%碘酊作用60秒或10 %碘伏60～90秒， 从穿刺点 向外画圈消毒,至消毒区域直径达3cm以上。 (3) 70%酒精脱碘：对碘过敏的患者，用70%酒精消毒60秒 ，待酒精挥发干燥后采血。
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——— 关于采血量
“每瓶采集多少血液无特殊要求。”
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采血量(ml)与检出率的关系
100 90 80 70 60
% Relative Yield
50 40 30 20 10 0 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60
ml
Overall 血培养物每增加一毫升，真性菌血症 成年人微生物的检出率增加3％
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撼大摧坚，徐徐图之——记中国医学科学院北京协和医院检验科副主任杨启文
51撼大摧坚，徐徐图之——记中国医学科学院北京协和医院检验科副主任杨启文 王 芳 卫婷婷 标本于无声中蕴藏着丰富信息、对应着鲜活个体，面对它们时，中国医学科学院北京协和医院检验科副主任杨启文的内心总是格外安宁。
这份耐心与细致，是杨启文骨子里的品格，也是检验医学赋予他的责任。
化验是疾病诊断的关键一步，检验学科也是支撑着所有疾病类型的诊断和治疗，支持着其他医学专科发展的重要平台科室。
将科学研究、临床工作与转化医学相结合，环环相扣、相互促进，最终造福患者，是杨启文从业近20年来的重要心愿。
为此，他以临床重要致病细菌的耐药致病机制和遗传进化规律，以及病原微生物新型检测技术的研发和转化为工作的切入点，徐徐图之，着眼于解决一个个小问题，最终涓滴汇流、久久见功，构建了国际领先、国内一流的遏制细菌耐药研究体系，并组建了全国多中心临床病原菌耐药及分子流行病学监测平台等5个成熟的研究平台。
基于深厚的积淀，迄今为止，杨启文已经牵头发布卫生行业标准、指南和专家共识5部。
以主要完成人获省部级科技奖二等奖和三等奖各3项。
作为欧洲临床微生物和感染病学会华人药敏试验委员会的牵头组建人，以及世界卫生组织区域抗菌药物耐药监测指南非正式评审委员会委员，他在体外药敏研究领域完成了一系列开创性工作并得到了国内外同行的认可。
检验医学勤用功 微生物学显身手1999年，踩着20世纪的尾巴，杨启文迈入了中国医学检验的“摇篮”——四川大学华西医学院。
他说：“我既有志于医学事业，又性格比较安静，检验医学需要细致专注地对待每一份标本，很适合我。
”检验医学隶属于临床医学专业，学子除了要学习本专业的细分内容，还要学习临床医学、药学的大量基础专业知识，课业繁重，但杨启文勤奋刻苦，成绩常年名列前茅。
2003年，4年专业课程学习完毕，在最后一年实习期来临前，他幸运获得前往北京协和医院实习的机会。
“陈民钧教授是中国临床微生物检验学的奠基人之一，在她的领导下，中国的微生物学检验有了质的飞跃。
临床微生物标本采集和运送规范
脓液或伤口分泌物标本 采集运送标准
❖ 本卷须知 ❖ 迅速送往实验室，1小时内不能培养应将标本冷藏。 ❖ 皮肤消毒对培养结果至关重要。 ❖ 不要仅送检脓液。脓液不能代表伤口特点，应在病灶
活动区域或基底部采集标本。 ❖ 除非有渗出物，枯燥、结痂伤口一般不做培养 ❖ 标记：不要只写“伤口〞标记标本，应有专门的描述
5
二、临床各类标本的采集、 运送及保存标准
6
血培养的采集、运送标准
❖ 采集程序: ❖ 皮肤消毒程序：推荐三步法 〔酒精→碘伏→酒精〕 ❖ 培养瓶消毒程序：75%酒精消毒 ❖ 静脉穿刺和培养瓶接种程序
❖ 采血量：成人8-10ml，儿童1-3ml。 骨髓采集量1-2ml ❖ 采血时间和数量: ❖ 采血时间:在寒战或体温顶峰到来之前0.5-1h，或于寒战
储存 环境
标本来源
4℃冰 箱
痰、尿液、粪便、气管冲洗物、导尿管、静脉导管、脓液和伤口分泌物 细菌或真菌培养；无菌体液（胸腹水、心包液、关节液、鞘膜积液、胆 汁）真菌培养；支原体培养；衣原体检查；血清学检查（包括ASO、RF、 肥达反应）
室温 脑脊液、生殖道、眼、耳、鼻、喉、血培养、血管导管尖、活检组织细
❖ 注意：从静脉取血；不要与血气和血沉标本一起采血； 不推荐血入瓶前换针头；不推荐静脉血直接入瓶；不宜 在静脉导管或静脉留置口采血〔除非疑心导管相关性血 流感染〕。
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血培养的采血量
❖ 成人采血量5-10ml〔最好8-10ml〕，儿童采血量1-3ml 〔不超过总血量的1％〕。血液和肉汤之比为1：5~1： 10。骨髓采集量1-2ml。
❖ 应注明具体标本来源如眼标本注明是眼睑、结膜 还是角膜，并注明左眼还是右眼。
18
脓液或伤口分泌物标本 采集运送标准
如何解读微生物报告-杨启文
临床折点≤ 2 µg/ml
Percent of Isolates
大多数病人 见效
部分病人见效 大多数病人 治疗失败
25
S
20
I
R
15
10
5
0
<=0.5
1
2
4
8
>=16
MICA(µg/ml)
31
体外耐药标志对折点的影响
A
32
药敏试验折点的建立
A
33
结果解释
敏感（susceptible）：表示测试菌能被测定药物常规剂 量给药后在感染部位达到的药物浓度所抑制或杀灭，感染 被治愈。
Clin Infec Dis 2A4:584-602, 1997
7
PUMCH：ICU痰涂片染色镜检
A:氟康唑 B:万古霉素 C:亚胺培南 D:米诺环素 E:舒巴坦
A
8
孙XX ，肺组织活检
A:氟康唑 B:伏立康唑 C:伊曲康唑 D:卡泊分净 E:两性霉素B
A
9
肺泡盥洗液
A：亚胺培南+万古霉素
B: TMPCo C: 莫西沙星 D： 头孢哌酮-舒巴坦
A
4
Capelastegui A, et al. BMC Infect Dis. 2012,12:134.
药敏领域
SENTRY MYSTIC。。。。
Mohnarin CHINET SMART CARES。。。。。
各地区、各医院的药敏 监测网络。。。。
A
为临床医生提供最新 的药敏数据， 为经验用药提供导向
Cockrill2004年报告:163位非感染性心内膜炎病人,血培养
采血套数及血量 1套(20ml)
杨启文—临床微生物实验室质量指标
16
质量指标的建立和实施
• Data Collection：通过微生物LIS系统自动导出总套数，人工判定污染 套数，并记录统计。 • Data source：微生物LIS→导出阳性结果→人工识别污染 • Data Stratification： 提供全院率 • Acceptable limit/Target： Desirable ≤3% （CLSI M47-A）， unacceptable >5% • Data analysis and action plan： – 计算→每月全院总率录入“检验科质量汇总分析报告（月度）” 制表→判定是否接受（“低于预期”变浅红，提示关注）→与上 月比较（绿色箭头代表改进，红色箭头代表倒退） – 如总率>5%，需进行分单元率的计算，识别问题单元 – 年度汇总分析→绘制表格，比较污染菌种的12个月变化 • Corrective action – 总率>5%，质量负责人提请医务处及护理部全院通报并培训 – >5%的问题单元，专业组长与该单元护士长沟通，组织培训
2013-8-11 11:48
2013-8-4 12:38 2013-8-2 9:46 2013-8-26 15:42 2013-8-24 10:35 2013-8-4 11:45 2013-8-7 8:11 2013-8-21 9:19 2013-8-27 11:35 2013-8-30 16:10 2013-8-6 11:07 2013-8-13 13:56 2013-8-4 11:34 2013-8-9 17:32 2013-8-21 8:48 2013-8-2 14:44 2013-8-21 8:49 2013-8-8 17:21
5
质量指标的建立和实施
• Acceptable limit/Target： Optimum 100.0%, Desirable ≥98%, Minimum 95～98%, Unacceptable ＜95% （无参考，根据临床情况自 定义） • Data analysis and action plan： – 计算→每月全院总率录入“检验科质量汇总分析报告（月度）” 制表→判定是否接受（“低于预期”变浅红，提示关注；“未接 受”变红,需启动PDCA）→与上月比较（绿色箭头代表改进，红色 箭头代表倒退） – 分析“各采样单元记录采样时间率统计”表→判定是否接受（“ 低于预期”变浅红，提示关注；“未接受”变红,各采样单元需启 动PDCA） – 年度汇总分析→绘制柱图，观察12个月变化
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3
标本采集
4- 适 量 标 本
标本采集应足量。标本量过少，可能会导致假阴性结果。 血液标本：通常成人采血量每瓶 8-10ml，儿童每瓶 1-5ml； 脑脊液、骨髓、脓肿、穿刺液、引流液、痰液等标本：≥1ml 尿液标本：≥3ml 粪标本：1-3g 或 1-3ml 结核标本采集量要求特殊： 痰、肺泡灌洗液或支气管冲洗液：>5ml； 清晨中段尿：5-10ml； 粪标本：>1g； 穿刺液（胸水、腹水、关节液等）：5-10ml。 标本应具有代表性，同时有些标本还要注意在不同时间采集不同部位 标本。
正确的采集、运送、保存及处理微生物检验 标本，对于保证临床微生物检验工作质量至 关重要。为了准确检出病原菌，避免漏检及 误诊，临床医护人员及实验室工作人员应掌 握微生物检验标本采集、运送、保存及处理 的一般原则。
Murray PR,, et al. Manual of Clinical Microbiology, 9th Edition. 2007. 陈东科，孙长贵 著. 实用临床微生物学检验与图谱.人民卫生出版社 2011. P129.
…………….
标本采集--细菌性肺炎
痰液不是诊断细菌性肺炎的最佳标本，血培
养、支气管肺泡灌洗、气管吸取物能够提供 更可信的病原菌信息
-《临床微生物标本送检指南》
IDSA/ATS指南
CAP
HAP
陈东科，孙长贵 著. 实用临床微生物学检验与图谱.人民卫生出版社 2011. P130. 徐建国等译. 临床微生物学手册 （上册）. 科学出版社 2005. P48.
4
标本运送
1- 标本运送的时间要求
一般原则：标本采集后应立即送检，最好在2h内 送至实验室，否则会影响病原菌的检出。 一般性细菌培养标本延迟送检时，应置于4℃ 冰箱保存，且不得超过24h。
3
标本采集
2- 合 适 部 位
无菌标本： 注意局部及周围皮肤的消毒，严格进行无菌 操作 注意避免 与外界相通的腔道： “背景干扰” 避开腔道口取标本，以免皮肤表面正常菌群 的污染，造成混淆和误诊。 正常菌群寄生部位： 采集时应特别小心； 应明确检查的目的菌 在进行分离培养时，采用特殊选择性培养基 血标本采集：应避免输液的影响。
陈东科，孙长贵 著. 实用临床微生物学检验与图谱.人民卫生出版社 2011. P130. 周庭银，倪语星 著. 临床微生物检验标准化操作. 第2版. 2010. P52=57.
3
标本采集
5- 合 适 方 法
根据目的菌的特性用不同的方法采集：厌氧菌、需氧或兼 性厌氧菌，以及L型菌采用的方法不同。 用于厌氧菌培养的临床标本，应尽量用注射器采集抽吸 物，一般不要用拭子采集标本（除非是在床边采样并立 即接种） 采集到的厌氧标本应室温保存，不能冷藏或冷冻。 有些细菌引起的感染，应注意在同时间采集不同部位标本 。如伤寒患者，发病第1周应采集血液，第2周应采集粪便 和尿液。否则影响细菌的检出率。 以拭子采集的标本，如咽拭、肛拭或伤口拭子，易受正常 菌群污染，不可置于肉汤培养基内送检。
重视微生物检验标本的采集及运送
In terms of the effectiveness of the laboratory, nothing is more important than the appropriate selection, collection, and handling of a specimen for microbiologic diagnosis. ── Patrick R. Murray
3
标本采集
01
尽 早 采 集
02
合 适 部 位
03
无 菌 操 作
04
适 量 标 本
05
适 当 方 法
06
安 全 采 集
3
标本采集
1- 尽 早 采 集
最好是病程早期、急性期 尽量在抗生素使用之前采集 对已用抗生素又不能停药者，可在下次用药前采 集
标本采集重在时效性
陈东科，孙长贵 著. 实用临床微生物学检验与图谱.人民卫生出版社 2011. P129.
微生物检验的基本原则
及时采集微生物标本作病原学检查 在抗菌药物使用前采集标本 采样时严格执行无菌操作 采样后立即送检
1. 2. 3. 4.
5.
6.
标本容器须灭菌处理，但不得使用消毒剂
送检标本应注明来源和检验目的
1
检验申请
应重视检验申请单的填写
检验申请单
即
临床病史
美国微生物学会临床微生物标本送检指南 第2版 2013 P7
1
检验申请
检验申请单填写须规范
微生物检验申请单应包含以下信息： 患者信息：姓名、年龄、门诊号/住院号（床号）、临床诊断 申请人信息：申请科室、申请医生 (姓名、工号） 标本信息：标本种类、采集部位、采集时间（日期、时间）、 抗菌药物应用情况 申请信息：申请项目（一般涂片检查、特殊涂片检查、培养及 鉴定、药敏检测--定性 or 定量等）、特殊要求或标注（紧急处理 、疑似或明确含有非常危险病原体等）、特殊检测（PCR、rRND 检测等）
微生物标本的采集、储存和转运
杨启文 北京协和医院
目录
临床须重视微生物标本采集及送检
微生物标本采集送检基本原则 几种主要微生物标本的采集送检规范
卫计委强调提高临床微生物标本送检率
《2013年抗菌药物临床应用专项整治活动方案》明确规定了 住院患者抗菌药物使用前微生物检验样本送检率: 接受抗菌药物治疗者 不低于30% 接受限制使用级抗菌药物治疗者 不低于50% 接受特殊使用级抗菌药物治疗者 不低于80%
送检延迟（超过规定时间） 容器不合适或标本泄漏 标本运送条件不合适（如厌氧条件 送检的标本却用需氧条件送检） 同一天内同一检测条件的重复标本 （血除外） 标本污染 标本量不够
周庭银，倪语星 著. 临床微生物检验标准化操作. 第2版. 2010. P60.
标本采集细则
细菌性肺炎标本 血流感染标本 泌尿系感染标本 手术部位感染标本 腹泻标本
临床标本最佳的运送时间取决于采集的量
– 少量液体（<1ml）或组织（<1cm3）应在 15-30’内送至实验室，以免蒸发、干燥及暴 露于周围环境。 – 较多量的标本置于运送培养基中可放1224h。 – 厌氧培养标本原则上应在床边接种。如延 迟送检，需保存在厌氧运送培养基中，室 温保存，一般不超过24h。
陈东科，孙长贵 著. 实用临床微生物学检验与图谱.人民卫生出版社 2011. P130. 徐建国等译. 临床微生物学手册 （上册）. 科学出版社 2005. P48.
4
标本运送
2- 标本运送的保存要求
若疑似标本中有对周围环境敏感的微生物，包括淋病奈瑟 菌、脑膜炎奈瑟菌和流感嗜血杆菌（低温易死亡），应立 即运送和处理。通常血液、脑脊液、生殖道、眼或内耳标 本不要冷藏保存。 从一个实验室运至另一个实验室的临床标本及感染性物质 ，不论距离如何，均应严格注意标本的包装，且应注明注 意事项。在运送标本及感染物郭总中，应采取安全防护措 施。泳衣转运的交通工具上应有生物安全标志。
直接培养基培养
需氧运送培养基
徐建国等译. 临床微生物学手册 （上册）. 科学出版社 2005. P51.
常见微生物标本拒收原因及处理方式
拒绝原因
无标签
处理方式
• 非损伤方法获得的标本（如、痰、粪便等标本），重新送检 • 损伤方法获得的标本（如血、脑脊液或组织等），与取样医生协商 后，在处理标本，并在申请单上注明问题所在，记录所采取的措施 提示送检者拒收原因，并要求重新送检。患者申请单上注明“标本 送检延迟” 通知送检者，并要求重新送检。患者申请单上注明问题所在及所采 取的措施 与送检者联系，注明检测要求，指出不符合之处，并要求重新送检 通知送检者，指出重复标本，在申请单上注明问题所在 重新采样 重新采样
送 检 率
/yzygj/s3585u/201305/823b9d131ff4416ab7b41b2c4e1f0e83.shtml
临床微生物检验的具体步骤及分期
分析前
1 检验申请 2 患者准备 3 标本采集 4 标本运送
分析中
5 标本接收处理 6 标本检测分析 7 标本质控评价
陈东科，孙长贵 著. 实用临床微生物学检验与图谱.人民卫生出版社 2011. P130-1. 徐建国等译. 临床微生物学手册 （上册）. 科学出版社 2005. P48.-50
4
标本运送
3- 标本运送的保存条件
标本4℃保存 标本25℃保存
脑脊液（细菌检验）、滑膜液
保存或介质类型
非防腐
活检组织、支气管灌洗液、I.V. （静脉穿刺管）、脑脊液（病 毒检验）、肺活检、心包液、 痰、尿（全程）
分析后
8 检验数据处理 9 检验结果审核 10 检验结果报告
临床科室
11 检验报告解读
检 验 科
分析前标本的质量直接影响检验结果
研究显示，影响检验结果准确性的因素中分析前标本质量 好坏约占70%。
分析后 18.5%
分析中 13.3%
分析前 68.2%
合格的标本是获得准确检验结果的先决条件。不当的标本 可导致检验结果的假阴性、假阳性结果。
厌氧运送培养基
腹水、羊水、厌氧培养抽吸物、胆汁、盲肠标本、 深部损伤物、神队放线菌的宫内节育器（IUD）、 肺吸取物、胎盘（剖宫产取得）、窦道吸取物、组 织（手术）、经气管吸取物、尿（耻骨弓上穿刺） 角膜刮片、血培养物、针对博德特菌属用的RL平 板（Regan-Lowe培养基）或BG平板（博-金培养 基）、针对淋病奈瑟菌的JEMBEC平板、玻璃体液 烧伤活检组织、弯曲菌属、外 耳取材、志贺菌属、弧菌属、 耶尔森菌属 骨髓、上呼吸道标本、宫颈分泌物、关节液、结膜 拭子、内耳取材、生殖器标本、鼻咽标本、博德特 菌属、奈瑟菌属、沙门菌属、帮杆菌属