实验六 大肠杆菌和沙门氏杆菌

增 菌 ：血清肉汤
运动性
不溶血
G-菌球杆
动物接种：小白鼠皮下接种 死亡检剖败血症 可疑菌落
脏器涂片镜检
分离培养
纯培养
沙门氏杆菌微生生学诊断程序
未污染病料
在肠道杆菌鉴别培 养基上划线分离
病料
革
兰
污染病料
氏
染
色
用肠道杆菌增菌
镜
培养基增菌
检
挑取疑似菌落分别接种TSI和尿素培养基
普 通
斜
TSI呈 K（A）/K 反应的，尿素分解阴性的STI培养菌
面
+(-), +(-)
纯
培
菌株鉴定
养
沙门菌生化鉴定
沙门菌A-F群多价 O血清平板凝集
血清型鉴定
报告鉴定结果
多杀性巴氏菌
革兰氏染色的肺组织中有 大量阴性球杆菌
多杀性巴氏杆菌（Ｐasteurelloa maltocida）
ຫໍສະໝຸດ Baidu
微生物学诊断
病料：（渗出液、心血、肝、脾、淋巴结、骨髓等）
涂片镜检：G-；瑞氏/美兰（新鲜病料）两极着染；球杆菌
培养 分离培养：血液/血清裂解血平板 菌落形状
E.Coli为兼性厌氧菌，在普通培养基上生长 良好，最适宜生长温度为37℃，最适合生 长pH为7.2～7.4。麦康凯琼脂上形成红色 菌落，在伊红美蓝琼脂上产生黑色带金属 闪光的菌落，在SS琼脂上一般不生长或者 生长较差，生长的菌落呈红色。
一些致病性菌株在绵羊血液平板上呈β 型溶血。在营养琼脂上生长24h，形成圆形、 隆起、光滑、湿润、半透明、灰白色菌落， 直径2～3mm。
实验六 大肠杆菌和沙门氏杆菌
目的要求：
1、掌握致病大肠杆菌、沙门氏杆菌的微生物学诊断方法。 2、熟悉致病大肠杆菌、沙门氏杆菌形态、培养特性。
实验内容：
一、观察致病大肠杆菌、沙门氏杆菌形态、培养特性。 二、接种大肠杆菌、沙门氏杆菌于鉴别培养基（远腾、SS、BTB），观察结果。 三、大肠杆菌、沙门氏杆菌的微生物学诊断程序。
大肠杆菌
大肠杆菌
大肠杆菌
麦康凯培养基上形成红色菌落； 伊红美蓝平板：黑色带有金属光泽菌 落； 远腾琼脂平板：红色带有光泽菌落
大肠杆菌
大肠杆菌
大肠杆菌（E．coli）
结果观察
大肠杆菌 葡乳麦甘蔗
⊕⊕⊕⊕⊕
沙门氏菌 葡乳麦甘蔗
+- + + -
动物致病性大肠杆菌分离鉴定程序
病料
粪便、肠内容物
血液、肠淋巴结
及肠黏膜刮取物
及其他病变组织
革
兰
麦康凯或伊红美
麦康凯或血琼脂
氏
兰平板划线分离
平板划线分离
染
色
镜
挑取疑似菌落5-10个分别接种TSI和普通琼脂斜面
检
TSI呈A（K）/A 反应的，其 STI
+（-） 生长物或普通琼脂斜面纯培养菌
生化试验鉴定 猪水肿病菌株 血清型鉴定
ETEC菌株毒力因子鉴定