2型糖尿病大鼠前额叶皮质及海马神经元形态的改变研究钟泽清

［摘要］ 目的 探讨 2 型糖尿病大鼠前额叶皮质及海马神经元形态的改变及其意义。方法
利用链脲佐菌素加高脂喂养制作 2 型糖尿病大鼠模型，利用 Golgi － cox 染色观察模型大鼠前
额叶皮质及海马 CA1 区神经元树突形态及树突棘密度。结果 与对照组比较，糖尿病组大
鼠额叶皮质及海马 CA1 区神经元出现树突减少，树突棘密度降低。结论 额叶皮质及海马
［作者简介］ 钟泽清（ 1ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ75—） ，女，主管护师，主要从事内科护 理和老年病护理及干部保健工作。
［通信作 者］ 谢 丹 丹，主 管 护 师，E － mail： m15907281100 @ 163. com，Tel： 15909281110
的柠檬酸钠缓冲溶液； Golgi － cox 溶液的配制［3］： 将重铬 酸 钾、铬酸钾、氯化汞用双蒸水配制成 5% 溶液，单独储存； 浸泡 标 本 前 将 配 制 的 重 铬 酸 钾 、铬 酸 钾 、氯 化 汞 溶 液 ，双 蒸 水 按 5∶ 4∶ 5∶ 10 混合配制（ 使用深色玻璃瓶储存，现配现用） 。 1. 3 造模方法 参考文献［4 － 5］制作 2 型糖尿病模型，15 只大鼠给予高脂饲料喂养 3 周后，随机分成模型组 10 只和对 照组 5 只。造模前 1 d 禁食 12 h，不禁水； 将 STZ 用 pH 4． 2 的 柠檬酸钠缓冲溶液配制成浓度为 2% 的溶液（ 即配即用） ，按 25 mg / kg 腹腔注射每天 1 次，连续 2 d。对照组给予相同容量 的柠檬酸钠缓冲溶液注射。注射 2 周后，大鼠测空腹血糖（ 测 试前禁食 12 h） ，以血糖 ＞ 16． 7 mmol / L 为模型成功标准，造模 成功 7 只。2 组大鼠均高脂饲料喂养 2 周后取材。 1. 4 Golgi-Cox 染色方法［6］ 大鼠在过量 10% 水合氯醛腹腔 麻醉后，4 ℃ 生理盐水 200 mL、200 mL 4% 多聚甲醛心内灌注 后断头取脑，以前囟为基准做冠状切面，取前囟前后各 4 mm 2 个组织块，用 Golgi-cox 溶液冲洗后，放置在棕色玻璃瓶中， 密封，置于 37． 1 ℃ 的温箱中 48 h。组织取出后用双蒸水冲 洗，洗净 Golgi-cox 溶液，用 3% 琼脂糖包裹脑组织，放置在振 动切片机上 （ 太和医院病理教研室） ，做 200 μm 冠状切片。 切片漂浮在双蒸水中。使用漂片法，按下述步骤操作： ①双蒸
Key words： type 2 diabetes mellitus； rat； prefrontal lobe cortex； hippocampus； neurons
糖尿病是由遗传和环境因素共同作用而引起的一组以糖 代谢紊乱为主要表现得临床综合征，高血糖可以导致视网膜、 心脏、微循环血管、周围神经、中枢神经系统功能障碍［1］。这 种代谢综合征被认为是产生认知功能障碍甚至痴呆的危险因 素［2］，然而糖尿病 患 者 中 枢 神 经 系 统 形 态 学 改 变 并 不 清 楚 。 为此，笔者利用 Golgi － cox 染色方法分析慢性糖尿病大鼠模 型前额叶皮质、海马神经元形态的改变，期望发现高血糖对认 知功能相关脑区的形态学影响。 1 实验资料 1. 1 实验动物 SPF 级 SD 雄性大鼠 15 只，体质量 （ 220 ± 10） g，由湖北医药学院动物中心提供。每笼 5 只，实验期间均 自由进食、水。饲养于自然昼夜照明，室温 22 ～ 24 ℃ ，相对湿 度 50% ～ 80% 的动物中心。 1. 2 实验试剂 链脲佐菌素粉针剂（ streptozocin，STZ，Sigmag 公司） ； 0． 1 mol / L 柠檬酸溶液、0． 1 mol / L 柠檬酸钠、重铬酸 钾、铬酸钾、氯化汞（ 太和医院生命科学研究所） ，配制 pH 4． 2
神经元形态的改变是导致糖尿病患者出现神经系统功能障碍的形态学基础。
［关键词］ 乙型糖尿病; 大鼠; 前额叶皮质; 海马; 神经元
［中图分类号］ R － 32
［文 献 标 识 码］ A
［文 章 编 号］ 1008 － 8849
（ 2013） 06 － 0597 － 03
Study on changes of neurons in prefrontal lobe cortex and hippocampus of rats
cox staining． Results Compared with control group，the amount of dendrites was markedly grown downwards and density of den-
dritic spine was markedly decreased in prefronatal lobe cortex and hippocampus of rats in diabetes mellitus group． Conclusion
现代中西医结合杂志 Modern Journal of Integrated Traditional Chinese and Western Medicine 2013 Feb，22（ 6）
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2 型糖尿病大鼠前额叶皮质及海马神经元 形态的改变研究
钟泽清，谢丹丹 ( 湖北医药学院附属太和医院，湖北 十堰 442000)
and its significance． Methods The rat model of type 2 diabetes mellitus was made by streptozotocin and high fat diet，than the
modality of dendrites and density of dendritic spine in prefronatal lobe cortex and hippocampus of rats were observed by Golgi-
The changes of neurons modality in prefrontal lobe cortex and hippocampus are the morphology groundwork of Neurological
function； Nervous system function in patients of diabetes mellitus．
Zhong Zeqing，Xie Dandan
（ Taihe Hospital of Hubei Medicine University，Shiyan 442000，Hubei，China）
Abstract： Objective It is to approach the Changes of neurons modality in prefrontal lobe cortex and hippocampus of rats