实验一,水稻种子活力的快速测定、发芽特性观察

实验一，水稻种子活力的快速测定、发芽特性观察

一、实验目的：

1、学习和掌握水稻种子活力的快速测定方法。

2、观察不同温度和水分（氧气）条件下稻种的发芽情况。

3、了解水稻种子的发芽特性及其与外界环境条件的关系。

二、实验内容：

（1）T.T.C法快速鉴定种子生活力

原理：凡是有生命活力的种子胚，在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生命活力的种子胚则没有此反应。当TTC（氯化三苯基四氮唑）深入种子胚的活细胞内时，被种胚中的脱氢辅酶还原成不溶性的红色稳定不扩散的TTF（三苯甲腙）。

（2）红墨水法快速测定种子生活力

原理：凡是有活力的种子胚细胞的原生质膜具有半透性，选择性吸收物质的能力，一般染料不能进入细胞内，胚部不染色。而丧失活力的种子，其胚部细胞原生质膜会丧失选择吸收能力，于是染料便能自由进入死细胞内而染色，所以可根据种子胚部是否被染色来判断种子的活力。

（3）具备有发芽能力的水稻种子在一定水分、温度和氧气条件下，即能萌发生长。种子吸收水分以后，在30－35℃条件下发芽较快，但根芽生长受氧气供应程度的影响较大。氧气充足时，先长根，而水分充足氧气缺乏时，则芽鞘先伸长。因此，掌握适宜的温度，水分（氧气）条件进行催芽，才能达到芽齐、芽壮，为培育壮秧打好基础。

三、实验仪器、设备:

1.籼（A种，B种）、粳型水稻种子（C种，D种），恒温箱，冰箱，培养皿9cm（12套）及15cm(36套)，定性滤纸15cm（一盒），烧杯250ml (12个)，刀片，游标卡尺，温度计，放大镜，镊子等。红墨水一瓶，红四氮唑（TTC）一瓶。

2.直尺、天平、游标卡尺、干燥箱、网筛（装秧洗土）、剪刀。

四、实验要求：

每5人为1组，全班分为6组。

1.水稻种子活力的测定

1.1 T.T.C法快速鉴定种子生活力

①预先浸种：每组取待测粳、籼稻种子各20粒预浸，籼稻种子浸6-8小时，粳稻种子浸24小时。之后取出部分浸泡过的粳稻种子和籼稻种子于80℃的高温环境下煮10-15分钟并将其编号籼（A种，B种）和粳型水稻种子（C种，D种）。其中A，B两种有一种为煮过的，另一种为没有煮过的，相应的C,D种也是同样的情况。水稻种子应剥除谷壳，并保持浸种温度在30-35℃，以增强种胚的呼吸强度，加速种子吸水，使得染色更加迅速。

②染色：将浸好的水稻种子，剥去种皮，用刀片沿水稻种胚的中心线纵切为两半（测定的一半一定要带胚），取其中的一半置于培养皿中，培养皿要编号。在培养皿中加入适量的0.1%T.T.C（氯化三苯基四氮唑）溶液，以覆盖种子为度，然后置于40℃恒温箱中约0.5-1小时。

③观察结果：可用肉眼或在解剖镜下观察，根据种子胚部是否产生红色反应以鉴定其生活力。

1.2 红墨水法快速测定种子生活力

①浸种：同上述TTC法。

②染色：每组取上述浸泡过的粳、籼稻种子各20粒，沿胚的中心线纵切为两半，将一半置于培养皿中，加入少量5%的红墨水（以淹没种子为度），染色10-15分钟（如果温度高可短些）。染色后取出洗净，至冲洗液无色为止。

③观察：检查种子的死活，凡种胚不着色或着色很浅者为活种子；凡种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。（不论是活种子或死种子的胚乳均染成红色）1.3不同温度条件下稻种的发芽观察

利用种子活力的测定方法筛选出有活力稻种进行发芽观察实验。

将经过选种（风选或溶液选）后的种子事先浸种2-3天让其充分吸收水分。实验时，数籼、粳种子各两份，每份50粒，放入4个垫有三层吸水纸的培养皿中，分别置于15℃、30℃的恒温箱中，以后每天观察记载一次发芽粒数，计算发芽率，并填入表一。发芽时间为5天，发芽结束时，对不同温度处理分别测量10粒发芽种子的根、芽长度，求其平均值，并将数据记入表二。

1.4 不同水分、氧气对根、芽生长的影响

将籼、粳种子事先破胸（高温催芽就是在30－32℃下，经1-2天内破胸露白，破胸露白后，温度降至25－28℃左右），取上述种子各50粒，分别置于烧杯内，灌水8－10cm深；另取籼、粳破胸谷50粒，放入垫有吸水纸的培养皿中，加水保持湿润，然后将上述处理的种子，同置入30℃或35℃的恒温箱中发芽，2天后观察根、芽生长情况，4天后，取各种处理稻谷10粒，分别量根、芽长度，求出平均数，将数据记入表三。

表一不同时间水稻的发芽率

表二不同温度条件下种子发芽情况

注：破胸，即高温催芽，就是在30~32℃下，经1~2天内破胸露白。破胸露白后，温度降至25~28℃左右，即所谓适温。

表三不同水分、氧气对根、芽生长的影响

五、作业

1.判断籼稻A，B两种以及粳稻C，D两种中种子活力。

2.分析不同温度条件下的发芽速度和根、芽比例，比较籼、粳稻的差异，并说明其原因。在催芽过程中如何运用这种特性？指出氧气和水分在发芽中的影响。