磁珠法血液DNA提取试剂盒-说明书
基因组DNA提取试剂盒 说明书
基因组DNA 提取试剂盒使用说明书此说明书仅适用于此说明书仅适用于基因组基因组DNA 提取试剂盒提取试剂盒,,使用前请务必仔细阅读说明书有关内容使用前请务必仔细阅读说明书有关内容,,若有任何疑问若有任何疑问,,欢迎致电厦门欢迎致电厦门致致善生物科技有限公司生物科技有限公司((4006618810*************)进行咨询进行咨询,,您也可以登录我们公司的网站您也可以登录我们公司的网站(( )了解相关信息或者通过E-mail ( ****************) 与我们进行沟通与我们进行沟通。
一 产品简介基因组DNA 提取试剂盒采用本公司自行研制的磁珠,用于从抗凝全血、新鲜或冻存组织、培养细胞、石蜡包埋组织、唾液、培养细菌等一系列不同样品中分离、纯化高质量的基因组DNA。
我们根据磁珠的独特分离作用,提供了一个极其简便的操作程序:样品裂解、磁珠吸附、洗涤以及洗脱。
在最适的试剂及操作条件下,可获得高质量DNA。
该方法具有简便、快捷、高效等特点,整个提取过程无须使用苯酚、氯仿等有机溶剂。
品名规格 货号 基因组DNA 提取试剂盒100T 4hk001裂解液DL 120ml ×2 磁粒 40ml 洗涤液 50ml ×5 洗脱液 45ml 缓冲液HTL 20ml ×1 二硫苏糖醇(DTT ) 10管,0.18g/管 说明书 1份储存条件储存条件::本试剂盒所有试剂(除DTT 外)均可以室温保存,应避免阳光直射。
当室温低于15℃时,裂解液中可能有结晶析出,38℃水浴加热几分钟,恢复澄清后即可使用,提取效率不受影响。
DTT 需要于冰箱4℃保存。
本试剂盒有效期为12个月, 请于有效期内使用。
安全信息:试剂中含刺激性化合物,操作时应小心,避免沾染皮肤,眼睛和衣服,若沾染皮肤、眼睛时,要立即用大量清水或生理盐水冲洗,必要时寻求医疗咨询。
三 使用者自配试剂DTT 溶液使用浓度为1mol/L 。
磁珠法小量全血DNA提取试剂盒简介
MagDNA TM小量全血DNA提取试剂盒( 磁珠F型)适合:100-200µl新鲜全血Cat. # 145101(50 preps)145102(100 preps)145103(200 preps)Note: for laboratory research use only.MagDNA TM小量全血DNA提取试剂盒( 磁珠F型)适用范围:适用于手动快速提取各种抗凝全血基因组DNA,无需蛋白酶消化,也适用于SPRI-TE;雅培m2000;MagNA Pure LC 2.0 System;BioRobot MDx Workstation;King Fisher(ml);King Fisher 96 process等系列核酸提取仪,适合大规模提取!试剂盒组成、储存、稳定性:试剂盒组成保存50次100次200次10 x ErythrocyteLysis Buffer 室温10ml 20 ml 40 mlLysis Buffer A 室温16ml 35 ml 65 ml Solution AB 室温6ml 12ml 24 ml Binding Buffer PQ 室温20 ml 40 ml 80 mlWash Buffer B 室温10 ml 20ml 35ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇(2倍)Wash Buffer C 室温10 ml 20ml 30ml第一次使用前按说明加指定量乙醇(3倍)Wash Buffer D 室温10 ml 20ml 30ml 第一次使用前按说明加指定量乙醇(3倍)Elution Buffer E 室温10ml 15ml 25ml MagDNA磁珠室温 1.2ml 1.2ml X 2 1.2ml X 4本试剂盒在室温储存12个月不影响使用效果。
储存事项:1.Lysis Buffer A或者Wash Buffer B低温时可能出现析出和沉淀,可以在37℃水浴几分钟帮助重新溶解,恢复澄清透明后冷却到室温即可使用。
磁珠法血液基因组DNA小量提取试剂盒(便捷·预装版)说明书
磁珠法血液基因组DNA小量提取试剂盒(便捷·预装版)MagBeads Blood DNA Extraction Mini Kit (Smart & Pre-loading Version)【目录号】NBDE-P-5001【运输条件】2~25℃;【保存条件】主试剂板2~8℃,蛋白酶K -20℃;【试剂盒组成】【注意事项】1. 试剂板严禁反复冻融,以免磁珠受到损害;2. 试剂板中6/12号孔位洗脱液预加入量为100μL,如需要可用配套洗脱液自行增加用量;3. 蛋白酶K长期不使用,请置于-20℃保存,融化后4℃保存,并尽快使用;4. 本操作指南经本公司反复验证,使用前请仔细阅读并按照操作指南建议操作。
【产品简介】本试剂盒适用于从新鲜或冷冻抗凝血中提取基因组DNA。
跟常规磁珠法血液基因组DNA提取试剂盒相比,本试剂盒将“血液裂解”和“DNA结合”两步操作简化为一步进行操作,不需要预先单独对血液样本进行裂解,然后再进行DNA结合,过程简便、高效。
在裂解液(NBDE Buffer ML)环境中,基因组DNA特异性的结合于磁珠表面,经清洗和洗脱等步骤之后,可得到高纯度的基因组DNA产物,OD260/280比值在1.7~1.9之间,OD260/230比值大于1.8,完整性好,可直接用于PCR反应、杂交、测序、酶切等下游分子生物学实验。
本试剂盒提前将试剂组分预分装入96孔板,节省实验操作者加液时间,提高工作效率。
试剂盒需配合磁棒法核酸提取仪使用。
【试剂盒说明】【自备仪器】1. 英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪(或其它品牌磁棒法核酸提取仪);2. 核酸提取仪配套用磁棒套;3. 甩板离心机。
【操作步骤】本指南以英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪为例,同步可完成32份样本提取工作。
1.试剂板准备1) 从试剂盒中取出独立包装预封装试剂板,颠倒数次使磁珠重悬均匀;2) 用甩板机离心(500rpm, 1min)使试剂及磁珠集中到孔板底部;3) 小心撕去铝箔封口膜,避免孔板振动,防止液体溅出。
A DNext 血液 DNA 试剂盒(磁珠法)说明书 (仪器配套使用)
产品储存产品可室温运输,收到后请于2~8℃贮存。
技术支持艾德科技(北京)有限公司研发部:e-mail: 电话:。
产品介绍本产品专为磁珠法核酸自动提取仪设计,适合从200 µl新鲜的或者是冷冻贮藏的抗凝全血中分离纯化总DNA。
试剂盒提供的试剂可预先分装到2.2 ml的96深孔板,配合磁珠法核酸自动化提取仪,只需在装有Buffer SL的孔中加入血样,即可由仪器自动化完成血液DNA 释放、吸附、洗涤及洗脱等一系列过程,最后获得的DNA溶解在Buffer TE中,并可立即用于各种分子生物学实验。
用户需自备的试剂与物品1.96深孔板(2.2 ml),如果用户需要预分装好试剂的96深孔板及磁力套,请另购产品序号为A-3012096的预分装磁珠法血液DNA试剂盒2.移液器吸头(为避免样品间的污染,请选用含有滤芯的移液器吸头)3.一次性手套及防护用品和纸巾4.磁珠法核酸自动化提取仪使用前准备1.在96深孔板第1列和第7列每孔加入600 µl Buffer SL;2.在96深孔板第2列和第8列每孔加入800 µl Buffer WA;3.在96深孔板第3列和第9列每孔加入900 µl Buffer WB;4.在96深孔板第4列和第10列每孔加入900 µl Buffer WC;5.在96深孔板第5列和第11列每孔加入900 µl Buffer MG;6.在96深孔板第6列和第12列每孔加入100 µl Buffer TE;操作步骤1.在已分装好试剂的96深孔板中的第1列和第7列各孔中加入200 µl抗凝全血,将96深孔板放入核酸自动化提取仪中。
2.按以下步骤设置核酸自动纯化仪中的程序:1)磁力棒深入到磁力套中,再插入第5列和第11列吸取磁珠,将磁珠转移到第1列和第7列各孔中,移出磁力棒。
2)用磁力套在第1列和第7列持续中速和快速间隔拍打混匀10分钟。
磁珠法拭子基因组DNA提取试剂盒
磁珠法拭子基因组DNA提取试剂盒MagBeads Swab DNA Extraction Kit【目录号】SDE-5010、SDE-5030、SDE-5100【运输条件】2~25℃;【保存条件】磁珠悬浮液2~8℃;蛋白酶K -20℃;其它组分室温;【试剂盒组成】【注意事项】1. 磁珠悬浮液严禁反复冻融和离心,以免磁珠受到损害。
使用前务必充分混匀;2. 首次使用试剂盒,请按清洗液2标签提示加入无水乙醇,稀释备用;3. 蛋白酶K请于-20℃长期保存,避免反复冻融;融化后4℃保存,并尽快使用;4. 为了达到最佳效果,建议使用新鲜拭子样本,或者4℃存放少于3天的样本,样本反复冻融将导致核酸得量严重降低;5. 如需去除RNA请自备RNase A溶液(100mg/mL,分散液:10mM Tris-HCl、1mMEDTA、pH值8.0);6. 请务必仔细阅读本试剂盒操作说明书,并严格按照操作步骤完成操作。
磁珠法·自动化:为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案【产品简介】本试剂盒适用于从口腔拭子、宫颈拭子等样本中提取基因组DNA或病毒DNA。
试剂盒采用独特分离作用的磁珠和缓冲液系统,磁珠表面修饰有特殊化学基团,在一定条件下对DNA具有极强的特异性亲和力,而当条件改变时,磁珠可逆的释放DNA,从而达到快速分离纯化DNA的目的,并可最大限度的去除蛋白质及其它杂质,从而保证提取DNA 的纯度。
所得基因组DNA产物OD260/280比值在1.7~1.9之间,可直接用于酶切、PCR、荧光定量PCR、测序、文库构建等下游实验。
本试剂盒可在EP管中进行手动操作,亦可配合核酸提取仪使用,实现高通量操作。
【试剂盒说明】【自备仪器、耗材和试剂】仪器自动版英芮诚ETP-300型全自动核酸提取仪、核酸提取仪配套用磁棒套、水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、96孔方孔圆底板、无水乙醇、异丙醇。
手动版水浴锅或金属浴、涡旋振荡仪、真空干燥箱、无水乙醇、异丙醇、2.0mL EP管、EP管配套用磁力架。
磁珠法孕周血样提取
孕周血浆DNA提取
实验目的:孕周血浆样本cfDNA提取。
实验:
一. 实验材料
实验仪器:金属浴
实验试剂:人和未来血浆游离DNA提取试剂盒
二. 实验方法
实验步骤:
1、向无核酸管中加入2ml Lysis buffer、120ulproteinaseK、15ul助沉剂、30ul磁珠及1m样
本,颠倒混匀20min;
2、将1.5ml Ep管置于磁力架上,将样本转移至Ep管中,静置至磁珠吸附至磁铁一端后吸
去废液;
3、重复步骤2至所有样品均转移至Ep管内;
4、将Ep管从磁力架上取下,加入500ul Wash BufferⅠ充分颠倒混匀使磁珠重悬,将Ep管
置于磁力架上,静置至磁珠吸附至磁铁一端后吸去废液;
5、将Ep管从磁力架上取下,加入500ul Wash BufferⅡ充分颠倒混匀使磁珠重悬,将Ep管
置于磁力架上,静置至磁珠吸附至磁铁一端后吸去废液;
6、保持Ep管置于磁力架上,加入550ul Wash Buffer Ⅲ(小心不要冲散磁珠),静置1min
后吸去废液;
7、将Ep管从磁力架上取下,加入30ul Elution Buffer,充分吸打使磁珠混匀,置于55℃金
属浴10min,每隔1-2min将Ep管取出使磁珠混匀;
8、将Ep管置于磁力架上,静置至磁珠吸附至磁铁一端后吸出溶液待建库;
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磁珠法质粒DNA小量抽提试剂盒说明书
磁珠法质粒DNA小量抽提试剂盒MagBeads Plasmid DNA Mini Extraction Kit【目录号】PDE-5005、PDE-5010、PDE-5030、PDE-5100【运输条件】2~25℃;【保存条件】组分①、③、④于2~8℃保存;组分⑦于-20℃保存;其它组分室温保存;【试剂盒组成】1. 使用前将RNase A溶液(组分⑦)全部加入菌体悬浮液(组分①)中,4℃保存备用;2. 使用前检查菌体裂解液(组分②)是否出现浑浊,如有请置于37℃水浴中温浴至澄清;3. 实验前质粒复性液(组分③)需提前置于4℃冷却充分;4. 菌体裂解液(组分②)和质粒复性液(组分③)使用后应请立即盖紧盖子;5. 磁珠悬浮液(组分④)严禁冻融和离心,以免磁珠受到损害,使用前务必充分混匀;6. 所有离心步骤均为室温下进行,其中加入质粒复性液(组分③)后低温离心效果更佳;7. RNase A溶液(组分⑦)长期不使用于-20℃保存,融化后4℃保存,并尽快使用;8. 质粒DNA抽提得量与细菌的培养浓度、宿主菌、质粒拷贝数等因素有关;9. 本操作指南经公司反复验证,使用前请仔细阅读并按指南建议操作。
磁珠法·自动化:为生命科学提供自动化磁纳米捕获方案【产品简介】本试剂盒可应用于对小量菌液进行质粒DNA抽提。
试剂盒采用高性能纳米磁珠和特殊缓冲液系统。
磁珠表面修饰有特殊化学基团,在一定条件下对质粒DNA具有极强的亲和力,当条件改变时可以可逆的释放质粒DNA,从而达到分离纯化质粒DNA的效果。
整个操作过程简便、快速。
本产品可最大限度的去除蛋白质等杂质,保证提取所得质粒DNA的纯度,所得质粒DNA产物可直接应用于酶切、测序、文库筛选、连接和转化等各种下游分子生物学实验。
本试剂盒可在EP管中进行手动法操作、在96孔圆孔板中实现手动法高通量操作(单人同时操作1~6块96孔板,可同步实现96~576份样本抽提工作)、或者与各种自动化核酸提取仪配合使用实现自动化高通量操作。
磁珠法组织与血液DNA提取操作规程
磁珠法组织与血液DNA提取操作规程(仅供科研使用)操作程序1.打开恒温培养振荡器,设置温度为50℃;打开恒温水浴锅,设置温度70℃;(试剂盒说明书是55-56℃,因恒温培养振荡器温度达不到55℃,实际操作时取50℃)2.配制Proteinase K溶液:每管粉末蛋白酶K中加入4.5ml Protease Dissolve Buffer并充分溶解(现配现用,未用完的Proteinase K置4℃保存短期使用);3.按每人份200ul ATL与20ul Proteinase K溶液混合,轻轻摇匀(混合液要求现配现用);4.在放有血片的浅孔96孔板内加入200ulATL与Proteinase K的混合液,用封口胶密封;(试剂盒说明书上要求每孔加入220ul ATL & Proteinase K混合液,实际操作时加入200ul)5.50℃恒温培养振荡器中250rpm洗脱1小时;(实际操作时50℃振荡洗脱45min)6.洗脱完后每孔加入200ul AL,振荡2-3min混匀,封口胶密封,70℃水浴15min;7.在深孔96孔板内每孔加入20ul磁珠和400ul Binding Buffer,振荡2-3min混匀,将水浴后浅孔96孔板内上清液加入对应的深孔96孔板中;(磁珠用前要充分混匀,上清液在前面加热过程会有所损失)8.在振荡器上1300rpm,10min,放置磁力板上5-7min,倒掉上清液;9.每孔加入600ul GW1,1300rpm,5min,放置磁力板上5min,倒掉上清液;10.每孔加入600ul GW2,1300rpm,5min,放置磁力板上5min,倒掉上清液;(磁力吸附时间依据磁珠聚集在底部,上清液澄清即可)11.重复步骤10一次;12.倒扣96孔板于吸水纸上,静置3min,放加热器上50℃,5min,观察若没水痕,则挥发干净;13.每孔加入50ul Elution Buffer,1300rpm,70℃,20min,恢复室温测定样品DNA浓度;14.取用DNA前将96孔板放置磁力板上3min再取样。
血液基因组DNA 提取试剂盒 说明书
广州东盛生物科技有限公司 电话:020-87791356
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核酸纯化系列
操作步骤-------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------------1 取血液样本,每 400 μl 血液加入到一只 1.5 ml 离心管中。加入 2 倍体积的红细胞裂解液 RS。漩涡振荡或上下来回颠倒混匀。 5,000 rpm 离心 3min,弃上清,收集白色或淡红色沉淀。
血液基因组 DNA 提取试剂盒(硅胶膜离心柱法)
核酸纯化系列
产品组分
组分
红细胞裂解液 RS 消化缓冲液 DS 裂解液 MS 蛋白酶 K 去蛋白液 PS 漂洗液 PE 纯化液 TE DNA 纯化柱 说明书
N1121
80 ml 15 ml 20 ml 1 ml 30 ml 15 ml 5 ml 50 个 1份
液氮,并在样品未完全解冻前加入含有抑制核酸酶作用的螯合剂的裂解液。
问:提取的基因组 DNA 生物活性差,为什么?
答:1 提取的基因组 DNA 盐浓度过高,沿管壁四周加入漂洗液 PE,这样有利于提高清洗效果;
2 DNA 中含有乙醇,严格按第 8 步的离心速度和时间操作;
3 进行 DNA 洗脱时请一定在膜的中央加入纯化液,尽量不要沾染管壁。
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磁珠法游离DNA 提取试剂盒
磁珠法游离DNA 提取试剂盒(血清/血浆/脊髓液/淋巴液/尿液)操作步骤1. 裂解结合:在血清、血浆、脊髓液、淋巴液、尿液、无细胞体液等生物样品中(eg.100 μL)加入5倍体积BufferPGL(eg.500 μL),室温放置5-10min,再加入5倍体积的异丙醇(eg.500 μL)和30ul磁珠悬浮液(MB) (使用前充分重悬),颠倒混匀,室温放置5 min(期间不时颠倒混匀);将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体。
3. 漂洗:(1)将离心管从磁力架上取下,向离心管中加入500 μl Buffer PGW 0,涡旋振荡5s,重悬磁珠,将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体,重复该步骤1次。
(2)将离心管从磁力架上取下,向离心管中加入500 μl Buffer PGW I,涡旋振荡5s,重悬磁珠,将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体。
重复该步骤一次,待磁珠完全吸附后吸弃液体(液体一定要弃尽,不然残留会影响下游实验),晾干2min。
4.洗脱:将离心管从磁力架上取下加入50-100 μl Buffer EB ,涡旋振荡结合移液器吹打,充分吹散磁珠(一定要完全吹散磁珠,若未充分重悬会影响DNA得率),56°C放置5min(每隔2min振荡混匀重悬磁珠),置于磁力架上,将上清DNA转移至一新的离心管中,放入-20 °C保存备用,保质期为2 年。
操作步骤1. 裂解结合:在血清、血浆、脊髓液、淋巴液、尿液、无细胞体液等生物样品中(eg.100 μL)加入5倍体积BufferPGL(eg.500 μL),室温放置5-10min,再加入5倍体积的异丙醇(eg.500 μL)和30ul磁珠悬浮液(MB) (使用前充分重悬),颠倒混匀,室温放置5 min(期间不时颠倒混匀);将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体。
3. 漂洗:(1)将离心管从磁力架上取下,向离心管中加入500 μl Buffer PGW 0,涡旋振荡5s,重悬磁珠,将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体,重复该步骤1次。
磁珠法基因组DNA 提取试剂盒 (细胞)
磁珠法基因组DNA 提取试剂盒(细胞)样本前处理:细胞用PBS洗两次后,6000rpm/min 离心3min,弃上清,加入500ul Buffer CGP重悬沉淀,12000rpm/min离心1min,弃上清,取沉淀备用。
2.裂解结合:在细胞沉淀中,加入500μLBuffer CGL,室温放置5-10min,再加入500μl异丙醇和30ul磁珠悬浮液(MB) (使用前充分重悬),颠倒混匀,室温放置5min(期间不时颠倒混匀);将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体。
3.漂洗:(1)将离心管从磁力架上取下,向离心管中加入500 μl Buffer CGW 0,涡旋振荡5s,重悬磁珠,将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体,重复该步骤1次。
(2)将离心管从磁力架上取下,向离心管中加入500 μl Buffer CGW I,涡旋振荡5s,重悬磁珠,将离心管放置于磁力架上,待磁珠完全吸附后吸弃液体。
重复该步骤一次,待磁珠完全吸附后吸弃液体(液体一定要弃尽,不然残留会影响下游实验),晾干2min。
实验准备56°C加热源磁珠用前一定要充分混匀;使用前需在Buffer CGW I中加入相应体积的无水乙醇。
4.洗脱:将离心管从磁力架上取下加入50-100μl Buffer EB ,涡旋振荡结合移液器吹打,充分吹散磁珠(一定要完全吹散磁珠,若未充分重悬会影响DNA 得率),56°C 放置5min(每隔2min振荡混匀重悬磁珠),置于磁力架上,将上清DNA转移至一新的离心管中,放入-20 °C保存备用,保质期为2 年。
纯度效果评价通过测定洗脱液中DNA的A260来确定RNA产量,通常情况下A260值在0.1~1.0之间数据比较可信。
如果不在此范围内,请稀释或浓缩样品调整;通过测定洗脱液中RNA的A280和A230来确定DNA纯度,A260/A280比值在1.8-2.0之间,小于1.8表示可能有蛋白质污染。
磁珠法血液DNA提取试剂盒-说明书
.血液DNA提取试剂盒(磁珠法)【简介】血液DNA提取试剂盒(磁珠法)适用血液的基因组DNA提取,尤其适用于人类以及哺乳动物的血液基因组DNA提取。
配合核酸自动纯化仪(GNT-SI系列),可实现一键式、自动化操作【参数】名血液基因DN提取试剂GNT-B02货号100T 规格2℃—储存条件30℃360保质期天【组分】100T 规格30ml Buffer LB120mg Buffer LB21ml Magnetic Beads80ml Buffer WB I30ml Buffer WB II11mlElution Buffer【血液DNA提取试剂盒(磁珠法)操作说明】(以实际说明书为准)1、取抗凝全血到离心管中,加入Buffer LB1、Buffer LB2,混合均匀后,将离心管置于水浴锅中,水浴30min2、将离心管取出,加入异丙醇,Magnetic Beads。
颠倒混匀数次(期间应静置数秒后继续颠倒混匀),将离心管置于磁力架,磁分离,吸弃废液3、将离心管从磁力架上取下,加入Buffer WB I。
颠倒混匀数次(期间应静置数秒后继续颠倒混匀),将离心管置于磁力架,磁分离,吸弃废液4、将离心管从磁力架上取下,加入Buffer WB II,颠倒混匀数次(期间应静置数秒后继续颠倒混匀),将离心管置于磁力架,磁分离,吸弃废液5、重复步骤5一次,并将废液完全吸弃干净6、将离心管从磁力架上取下,室温下开盖静置5min7、加入Elution Buffer,磁珠完全混匀后,置于水浴锅中,水浴10min8、将离心管置于磁力架,磁分离,小心吸取上清至新的离心管中,进行下游实验【特点】1、得率高:200ul人类抗凝全血的普遍产量可达3-8ug2、纯度高:OD260/280稳定在1.8左右,OD260/230稳定在1.8以上3、操作简便:手工提取过程无需离心4、自动化:具有成熟的自动化方案,可配合核酸自动纯化仪,实现一键式操作【提取效果】1 / 2.2 / 2。
游离DNA提取试剂盒(磁珠法)说明书
游离DNA提取试剂盒(磁珠法)说明书【产品名称】通用名称:核酸提取或纯化试剂商品名称:游离DNA 提取试剂盒(磁珠法)英文名称:Magbind CFDNA Kit 该试剂盒提供了一种简单、快速、高效的游离DNA (Free circulating / Cell-free DNA)提取方法,适用于从血清、血浆、淋巴液、尿液等无细胞体液中提取游离DNA 。
纯化得到的离DNA 质量稳定、可靠,可用于下游常规实验。
该试剂盒可与转移液体法的核酸提取仪配套使用,简单、快速地进行大规模提取,大大降低了实验者的工作量和实验中的人为误差。
【预期用途】 样品裂解后,在高盐存在时,DNA 结合于硅基包被的磁珠表面,漂洗后,高纯度DNA 被洗脱于洗脱缓冲液或去离子水中。
DNA 得率与样品的类型、储存条件、时间以及个体间差异有很大关系。
【检验原理】50次/盒;400次/盒【包装规格】版本号:11/2020【样本要求】1.适用标本类型:新鲜或冷冻的全血(用柠檬酸盐、EDTA 或肝素等抗凝剂处理过的血液样品)、血浆、血清、淋巴细胞、无细胞体液等样本。
2.标本处理与保存:血清及血浆样本按常规方法制备,新鲜样本应尽快处理或分装后于-70℃冻存,避免反复冻融。
3.样本运输:应采用冰壶或者泡沫箱加冰或干冰密封运输。
【检验方法】实验前准备:向蛋白酶K 中加入指定用量的蛋白酶K 保存液使其溶解,终浓度为20 mg/ml ,-20℃保存。
1.向1.5 ml 离心管中加入20 μl 蛋白酶K 溶液。
2.向上一步的离心管中加入200 μl 血清/血浆样品。
注意:冻存样品需提前在4℃冰箱中放置使其溶化。
溶化过程中反复颠倒样品储存管使其混匀。
3.向上一步的离心管中加入200 μl 裂解缓冲液,涡旋振荡5秒钟使其充分混匀后将离心管放于56℃、1300 rpm 的Thermomixer 上振荡裂解10分钟。
注意:1)如无Thermomixer ,需将离心管放于56℃水浴锅或金属浴中孵育10分钟,期间每隔2分钟涡旋振荡5秒钟。
MycoSHENTEK 支原体 DNA 提取纯化试剂盒(2G)(磁珠法)说明书
MycoSHENTEK®支原体DNA提取纯化试剂盒(2G)(磁珠法)说明书货号:1509840在实验前请完整阅读本说明书,务必重视注意点和常见问题!版本:A/2仅供研究用湖州申科生物技术股份有限公司⏹试剂盒简介MycoSHENTEK®支原体DNA提取纯化试剂盒(2G)(磁珠法)用于提取纯化生物样品中的微量支原体DNA,包括主细胞库、工作细胞库、病毒种子批等,同时对高浓度细胞(不大于107个)、高浓度质粒、5%人血白蛋白等复杂基质生物制品均适用,与MycoSHENTEK®支原体检测试剂盒(2G)(PCR-荧光探针法)配套使用,参照EP2.6.7和JP XVIII支原体检测相关要求进行验证,检测限可达10CFU/mL。
对于样品体积小于400μL的样品,可以直接使用本试剂盒进行提取;对于超过此体积的,可通过离心将样品浓缩至终体积为约400μL,再使用本试剂盒进行支原体DNA 提取纯化。
本试剂盒可以手动操作,也可以通过rHCDpurify®实现样品的自动化处理。
⏹试剂盒组分表1.试剂盒组分序号组分产品号装量储存条件I 洗涤液A NND01515mL×1瓶室温结合液NND01710mL×1瓶室温洗脱液NND0195mL×1瓶室温稀释液NND0225mL×1瓶室温裂解液NND0285mL×1瓶室温II 样品处理液NND002 1.25mL×4管2~8℃磁珠NND033750μL×2管2~8℃5M NaCl NND040500μL×1管2~8℃III助沉剂ⅠNND00325μL×1管-18℃及以下助沉剂ⅡNND004500μL×1管-18℃及以下蛋白酶K NND023500μL×2管-18℃及以下⏹规格50Extractions。
⏹有效期规定储存条件下24个月,具体详见试剂盒标签。
磁珠法DNA提取纯化试剂盒检测通则-编制说明
国家标准《磁珠法DNA提取试剂盒检测通则》编制说明(一)工作简况,包括任务来源、协作单位、主要工作过程、国家标准主要起草人及其所做的工作等;1、任务来源本标准根据国标委公布的2018 年第四批国家标准计划项目(国标委综合83 号),本项目计划编号为20184465-T-469 ,名称为磁珠法DNA提取试剂盒检测通则。
本标准由全国生化检测标准化技术委员会(SAC/TC 387)提出并归口。
本标准由联合起草。
2、目的和意义为适应高灵敏度、自动化操作的发展需求,磁珠法核酸提取由此诞生。
磁珠为拥有超顺磁性,表面经过了功能化修饰,在磁场中能够迅速聚集,离开磁场后又能够快速分散,能实现磁分离的均匀分散的一种磁性纳米级或者微米级球状或无定形颗粒物,其表面修饰有丰富的活性基团,可以和核酸分子在一定的缓冲条件下进行可逆地结合。
与传统的分离方法相比,磁珠用于生化样品复杂组分的分离,能够实现分离和富集的同时,有效地提高了分离速度和富集效率,同时也使分析检测的灵敏度大大提升。
磁珠与核酸的特异性结合使得提取的核酸纯度高,浓度大,样本需求量低,不需要苯酚和氯仿等毒性大的有机溶剂,提取步骤简单,不需离心,不仅可以满足大量规模提取的要求,还能实现自动化操作,具有传统核酸提取无法比拟的优势,是目前核酸制备的一个重要方向。
磁珠法核酸提取是一项将生物分子技术与纳米材料科学相结合的新型技术,是DNA提取纯化领域的一项重大突破,能从血液,动、植物组织,食品,土壤,粪便,唾液等样本中分离纯化DNA,已广泛应用于食品,法医,医疗等领域。
现国内磁珠法核酸提取产品厂家层出不穷,如海狸医学、英芮诚、惠尔纳米、新百基等,产品五花八门,质量参差不齐,市场较混乱。
且随着二代测序的兴起对自动化的需求越来越高,磁珠法核酸提取领域并没有相应的标准,加上,如动植物核酸提取、回收和小量血液基因组提取试剂盒的要求也都差异很大。
为规范磁珠法核酸提取试剂盒的质量,迫切需要建立其质量表征指标,规范其技术要求和测试方法。
磁珠法组织与血液DNA提取操作规程
磁珠法组织与血液DNA提取操作规程磁珠法组织与血液DNA提取操作规程(仅供科研使用)操作程序1.打开恒温培养振荡器,设置温度为50℃;打开恒温水浴锅,设置温度70℃;(试剂盒说明书是55-56℃,因恒温培养振荡器温度达不到55℃,实际操作时取50℃)2.配制Proteinase K溶液:每管粉末蛋白酶K中加入4.5ml Protease Dissolve Buffer并充分溶解(现配现用,未用完的Proteinase K置4℃保存短期使用);3.按每人份200ul ATL与20ul Proteinase K溶液混合,轻轻摇匀(混合液要求现配现用);4.在放有血片的浅孔96孔板内加入200ulATL与Proteinase K的混合液,用封口胶密封;(试剂盒说明书上要求每孔加入220ul ATL & Proteinase K 混合液,实际操作时加入200ul)5.50℃恒温培养振荡器中250rpm洗脱1小时;(实际操作时50℃振荡洗脱45min)6.洗脱完后每孔加入200ul AL,振荡2-3min混匀,封口胶密封,70℃水浴15min;7.在深孔96孔板内每孔加入20ul磁珠和400ul Binding Buffer,振荡2-3min混匀,将水浴后浅孔96孔板内上清液加入对应的深孔96孔板中;(磁珠用前要充分混匀,上清液在前面加热过程会有所损失)8.在振荡器上1300rpm,10min,放置磁力板上5-7min,倒掉上清液;9.每孔加入600ul GW1,1300rpm,5min,放置磁力板上5min,倒掉上清液;10.每孔加入600ul GW2,1300rpm,5min,放置磁力板上5min,倒掉上清液;(磁力吸附时间依据磁珠聚集在底部,上清液澄清即可)11.重复步骤10一次;12.倒扣96孔板于吸水纸上,静置3min,放加热器上50℃,5min,观察若没水痕,则挥发干净;13.每孔加入50ul Elution Buffer,1300rpm,70℃,20min,恢复室温测定样品DNA浓度;14.取用DNA前将96孔板放置磁力板上3min再取样。
磁珠法病毒DNARNA提取试剂盒使用说明书原理及用途
磁珠法病毒DNA/RNA提取试剂盒使用说明书原理及用途本试剂盒利用磁珠的特殊分离作用,采用独特的缓冲液系统,从组织研磨液、血清、血浆、淋巴液、无细胞体液、细胞培养上清液、尿液或各种病毒保存液中分离纯化高质量病毒DNA或RNA。
特殊包埋的磁珠,在一定条件下对核酸具有很强的亲和力,而当条件改变时,磁珠释放吸附的核酸,能够达到快速分离纯化核酸的目的。
提取的病毒DNA/RNA得率高、纯度高、质量稳定可靠。
使用本试剂盒纯化的核酸可适用于各种常规操作,包括反转录、PCR、RT-PCR、荧光定量PCR、荧光定量RT-PCR等各种下游实验。
试剂盒组成储存条件1. 所有缓冲液在室在温条件下(15–25℃)保存。
2. 在原始状态下,Carrier RNA冻干粉可在室温条件下储存至有效期;已配好的工作液时必须按照“Carrier RNA工作液的配制”要求进行配制、储存、使用。
3. 有效期:1年样品处理1.组织样品处理:每份组织分别从三个不同的位置称取样品约1g,用手术剪剪碎混匀后取0.05 g于研磨器中研磨,加入1.5 mL生理盐水继续研磨,待匀浆后转至1.5mL灭菌离心管中,8000rpm离心2min,取上清液用于检测。
2.排泄物样品处理:取约0.05g排泄物于1.5 mL灭菌离心管中,加入1mL生理盐水涡旋振荡,8000 rpm离心2 min,取上清液用于检测。
3.其它液体样品:直接取上清液用于检测注意事项(请务必在使用本试剂盒之前仔细阅读)1.样品应避免反复冻融,否则会导致提取的核酸片段较小且提取量降低。
2.若缓冲液RLCK中有沉淀,可于37℃水浴重新溶解,摇匀后使用。
3.需要用户自行准备的试剂:生理盐水、异丙醇、无水乙醇。
4.实验前应仔细阅读说明书,在提取核酸时提前配制缓冲液RLCK、Carrier RNA工作液、漂洗液PWI和漂洗液PWII工作液。
缓冲液的配制1.缓冲液RLCK使用前应加入5 mL异丙醇,并在瓶签上勾选已配制标识,以方便操作时确认。
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血液DNA提取试剂盒(磁珠法)
【简介】
血液DNA提取试剂盒(磁珠法)适用血液的基因组DNA提取,尤其适用于人类以及哺乳动物的血液基因组DNA提取。
配合核酸自动纯化仪(GNT-SI系列),可实现一键式、自动化操作
【组分】
【血液DNA提取试剂盒(磁珠法)操作说明】(以实际说明书为准)
1、取抗凝全血到离心管中,加入Buffer LB1、Buffer LB2,混合均匀后,将离心管置于水
浴锅中,水浴30min
2、将离心管取出,加入异丙醇,Magnetic Beads。
颠倒混匀数次(期间应静置数秒后继续
颠倒混匀),将离心管置于磁力架,磁分离,吸弃废液
3、将离心管从磁力架上取下,加入Buffer WB I。
颠倒混匀数次(期间应静置数秒后继续颠
倒混匀),将离心管置于磁力架,磁分离,吸弃废液
4、将离心管从磁力架上取下,加入Buffer WB II,颠倒混匀数次(期间应静置数秒后继续
颠倒混匀),将离心管置于磁力架,磁分离,吸弃废液
5、重复步骤5一次,并将废液完全吸弃干净
6、将离心管从磁力架上取下,室温下开盖静置5min
7、加入Elution Buffer,磁珠完全混匀后,置于水浴锅中,水浴10min
8、将离心管置于磁力架,磁分离,小心吸取上清至新的离心管中,进行下游实验
【特点】
1、得率高:200ul人类抗凝全血的普遍产量可达3-8ug
2、纯度高:OD260/280稳定在1.8左右,OD260/230稳定在1.8以上
3、操作简便:手工提取过程无需离心
4、自动化:具有成熟的自动化方案,可配合核酸自动纯化仪,实现一键式操作
【提取效果】。