胶原-透明质酸支架

结论
胶原-透明质酸复合材料具有一定的弹性和 韧性及抗张强度，且与其他天然生物材料相 比，力学性能更优。 胶原-透明质酸在体内，体外均可以维持一 定的结构稳定，并可以逐渐降解，具有良 好的生物相容性，且降解速度快。
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L/O/G/O
谢谢大家~！
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胶原-透明质酸支架 ——体内降解测试
采用兔皮下包埋实验
6周：胶原-透明质酸膜材料仍保持基本的结构 存在，但已出现材料液化，质地不清的现象 8周：材料的基本结构破坏，基本降解 12周：材料包裹块也消失，无肉眼可见的剩余组 织存在
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有聚乳酸(PLA)；聚羟基乙酸(PGA)；两 者的聚合物(P㈣LA)；聚13羟基 丁酯(PHB)；聚乳酸一己内酯的共聚物(P LC)等 在去细胞同种或异种 血管上种植细胞以构建TEBV。
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胶原-透明质酸支架 ——制备方法
用0．5M醋酸配制 0．6％(w／v)的胶原 溶液(PH=3．0)
在冰浴中按比例均匀混合
用超纯水配制0．6％ (w／v)的透明质酸溶 液
将得到的胶原／透明质 酸混合液液注入48孔培 养板中
胶原／透明质酸复合 多孔支架材料。
于一20℃冷冻后，经冷冻干燥/ 10Pa，121℃真空千热交联/ 及含40mM EDC，20raM NHS的 95％乙醇5％水混合溶液室温交 联
形貌特征：
胶原／透明质酸膜外观成白色，表面有细孔状结构， 质地柔软 支架材料具有均匀的单相组成，透明质酸与胶原混合 均匀，并经过交联反应成为一个整体。 支架内部孔分布均匀，孔径分布在100～200¨m之间 ，孔与孔之间有相互贯穿连接的小孔 随着支架中透明质酸含量的增加，材料的孔结构不规 则度比纯胶原支架有所增加，没有对材料的多孔结构 造成太大影响。
材料仍结构清晰，有更多的细胞进入材 胶原材料已出现结构不清，浸润细胞完 料中央部位，以单核细胞为主 全进入材抖与之夹杂在一起，出现新生 的组织纤维与材料混杂，浸润细胞逐渐 www.themegallery.com 减少
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胶原-透明质酸支架 ——体内降解测试
HE染色观察结果
图4，胶原-透明质酸膜皮下包埋8周
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胶原-透明质酸支架 ——体内降解测试
HE染色观察结果
图1，胶原-透明质酸膜皮下包埋2周
种植材料结构仍清晰，包被组织疏松， 周围可以见到大量浸润细胞
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胶原-透明质酸支架 ——体内降解测试
HE染色观察结果
图2，胶原-透明质酸膜皮下包埋4周
图3，胶原-透明质酸膜皮下包埋6周
采用兔皮下包埋实验 皮下包埋实验是将生物材料埋入动物皮下， 观察材料在组织体内的反应情况，可以评价材料 在体内的降解性和生物相容
大体观察：实验动物存活，手术切口愈合良 好，未见急性炎症和局部积液、积脓改变。 2周：局部形成纤维组织包裹，剖开包裹组织， 见胶原／透明质酸膜仍成形，与组织易分离，
4周：组织快包裹体积减小，包裹块呈透明样， 透过组织块依稀可见生物材料，胶原／透明质 酸膜仍较完整，局部出现软化现象
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胶原-透明质酸支架
——在组织工程学中的应用
主要内容
1 组织工程材料的简介及分类
2 胶原-透明质酸支架的制备及形貌
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在组织工程血管支架中的应用
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组织工程の初印象
• 组织工程——是指利用生物科学和工程学原理，将体外培养扩
增的组织细胞种植于生物相容性好，并可最终降解的生物材料上 ，形成细胞一生物材料复合体，植入体内与宿主组织融合生长， 以达到对宿主局部结构修复和功能重建。 • 组织工程研究主要有四个方面：： (1)种子细胞性质的研究
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组织工程血管の背景
• 在当今世界，心血管疾病己日益成为威胁人类生命的主要 疾患之一，临床治疗血管疾病如动脉粥样硬化，冠心病 等的主要手段是“血管移植” 。
美国医院成功完成人造仿生血管植入手术
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组织工程血管の背景
类别 自体血管 特点 被认为是迄今为止理想的血管替代物， 来源有限且供区牺牲较大，存在再次狭窄的可 能 来源丰富 异体血管由于自身退行性变，受到宿主的免疫 排斥反应以及术后狭窄，动脉瘤形成等不良反 应影响限制了它的应用 使用在大口径的血管移植中取得了较好的效果， 但在小口径血管，由于高张力，低血流的特殊 状态，容易发生血栓导致血管狭窄，移植后失 败率较高。
同种异体血管
人工材料血管
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胶原-透明质酸血管支架
组织工程血管都要具备如下条件：
•具有或模拟体内血管壁三层结构 •具有高度生物相容性， •不易产生血栓， •不易发生免疫排斥反应； •具有生物学特性； •具有血管的力学特性，即有粘弹性并能承受一定的 压力
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材料已基本降解，新生的组织纤维 增多，浸润细胞更少
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图5，胶原-透明质酸膜皮下包埋12周
种植材料已降解，代以新生的胶原纤维 ，排列较规则，内有较多的新生血管
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胶原-透明质酸支架 ——性质分析
胶原-透明质酸支架，具有一定的多微孔 结构，良好的亲水性，为种子细胞的粘 附提供了结构基础。
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胶原-透明质酸支架 ——体外降解测试
体外降解实验
分别配置去离子水，胶原蛋白酶液，溶菌酶 液为溶解液。将胶原-透明质酸膜分别置于 三种溶解液中，一定时间间隔内计算材料质 量丢失率
胶原-透明质酸膜胶原酶降解最多，去离了
水降解最少
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胶原-透明质酸支架 ——体内降解测试
胶原-透明质酸支架 ——力学性能
力学性能测试
材料的力学性能主要衡量指标为材料的 韧性指标和抗张强度
干态下：胶原-透明质酸膜的韧性和抗张强度均 好于明胶／壳聚糖膜和明胶海绵 湿态下：各种材料的力学性能均有不同程度 的下降，但胶原／透明质酸膜的韧性和抗张 强度仍好于明胶／壳聚糖膜和明胶海绵
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(2)细胞外基质替代物的研究 (3)组织工程化组织对各种病 损组织替代的研究。 (4)体外细胞三维培养
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组织工程材料的分类
类别 实例
天然生物材料
壳聚糖基生物材料，胶原基生物材料， 明胶基生物材料，透明质酸基生物材料， 天然珊瑚焦材料，蚕丝材料
合成高分子材料 细胞的粘附率较高， 无炎症反应和毒性 反应 多种材料复合交联 对材料进行变性可 去细胞生物源性支架 以增强韧性以获得 更满意的效果。
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胶 1 原-透明质酸支架 ——形貌表征
胶原支架 胶原／透明 质酸40：1
胶原／透明 质酸20：1 胶原／透明 质酸10：1 F.g.不同比例的胶原／透明质酸复合支架材料的断面扫描电镜影像
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胶原-透明质酸支架 ——形貌特征