生化实验技术课程 学习指南
生化检验的一般知识与技能
授课对象:06级检验1-5 班课时:2 学时生化检验的一般知识与技能目标: 1.掌握生化实验室规则,注意事项及应急处理2. 掌握常用容量玻璃仪器的规格和使用规则3. 了解常用清洗液的种类和应用4. 学会使用可调微量加样器实验用品:刻度吸管(1、2 ml、5 ml、10 ml)、容量瓶(各种规格)、微量加样器、洗耳球、试管架、试管(5ml )等内容:一、实验室规则预习实验、明确目标、准备实验充分有序遵守纪律、听从指导、认真操作、深入思考爱护公物、厉行节约、注意安全、杜绝事故清理环境、保持整洁、及时上交实验报告二、实验室的安全及意外事故的处理实验室的安全,除要求实验人员严格遵守安全制度外,还应该在认真重视安全的基础上,养成一种安全工作的作风,必须具备预防事故发生的措施和对事故的现场处理等方面的基础知识及自救能力。
(一)实验室的安全:防火防爆防化学性危害防生物源性的危害废物的处理(二)事故的应急处理玻璃割伤的处理:(略)药品灼伤的处理:酸灼伤:皮肤---立即用大量自来水冲洗,然后用0.6mol/LNaHCO3 液洗涤眼睛---立即用蒸馏水和洗眼杯冲洗,然后用0.12mol/LNaHCO3液洗涤碱灼伤:皮肤---立即用大量自来水冲洗,然后用饱和硼酸溶液洗涤眼睛---立即用蒸馏水和洗眼杯冲洗,再用0.16mol/L 硼酸溶液洗涤溴灼伤:应立即用乙醇洗涤,再涂上甘油,用力按摩,使甘油渗入毛孔中毒处理:溅入口中尚未咽下的应立即吐出来,用大量请水漱口。
如吞下时,应根据毒物的性质给予解毒剂。
触电处理一旦发生触电事故,首先应立即切断电源,若一时找不到电闸,可用干木棍等绝缘物把导电物与触电者分开,然后进行抢救。
如触电者已停止呼吸,应立即施行人工呼吸。
以上仅是实验室的应急处理,对于重者症应及时送医院急诊处理。
三、用玻璃仪器的清洗(一)几种洗涤液的配制及应用1. 合成洗涤剂:市售,使用方便,去污力强,应用范围广,是常用的洗涤剂。
生化实验基本操作 ppt课件
5.废弃液体(强酸强碱溶液必须先用水稀释) 可倒入水槽内,同时放水冲走。废纸及其他 固体废物和带有渣滓沉淀的废液都应倒入指 定的垃圾筐内,不得倒入水槽或到处乱扔。
生化实验基本操作
6.对实验的内容和安排不合理的地方可提 出改进意见。对实验中出现的一切反常现象 应进行讨论,并大胆提出自己的看法,做到 生动、活泼、主动地学习。
生化实验基本操作
7.使用电器设备(如恒温水浴、离心机、电 炉等)时,严防触电;绝不可用湿手或在眼 睛旁视时开关电闸和电器开关。检查电器设 备是否漏电应用试电笔或手背触及仪器表面。 凡是漏电的仪器一律不能使用。
生化实验基本操作
8.可燃物,特别是易燃物(如乙醚、丙酮、 乙醇、苯等)时,应特别小心。不要大量放 在桌上,更不应放在近火焰处。低沸点的有 机溶剂不准在火焰上直接加热,只能在水浴 上利用回流冷凝管加热或蒸馏。
生化实验基本操作
9.使用浓酸、浓碱,必须极为小心地操作, 防止溅失。用吸量管取这些试剂时,必须使 用橡皮球,绝对不能用口吸。若不慎溅在实 验台或地面,必须及时用湿抹布擦洗干净。 如果触及皮肤,应立即治疗。
生化实验基本操作
10.如果不慎倾出了相当量的易燃液体,则 应按下法处理:(1)立即关闭室内所有的火 源和电加热器。(2)关门,开启小窗及窗户。 (3)用毛巾或抹布擦拭洒出的液体,并将液 体拧到大的容器中,然后再倒入带塞的玻璃 瓶。
生化实验基本操作
3.注意保持实验室的整洁。实验完毕,须 将药品试剂排列整齐,仪器要放好,将实验 台面抹拭干净。使用后的玻璃仪器要清洗干 净放好。
生化实验基本操作
4.要爱护实验仪器,节约使用各种试剂、 物品。使用仪器时,应小心仔细,防止损坏 仪器。使用贵重精密仪器时,应严格遵守操 作规程,发现故障立即报告教师,不要自己 动手检修。仪器损坏时,应如实向教师报告。
《生化工程》学习指南
《生化工程》学习指南一、课程性质生化工程,也称生物反应工程,是化学工程与生物技术的交叉学科,也是应用化学工程的原理与方法将生物技术的实验室成果进行工业开发的一门学科,是生物工程专业的一门核心课程。
该研究主要采用化学动力学、传递过程原理、设备工程学、过程动态学及最优化原理等化学工程学原理,也涉及到生物化学、微生物学、微生物生理学和遗传学等许多学科领域。
二、学习方法《生化工程》是一门理论与工程实践相结合的应用基础课程。
它重点研究了酶反应动力学、细胞反应动力学、理想反应器模型、传质与传递过程以及反应器的选择、设计与放大,这些内容都是相互关联,有机结合的。
在学习过程中,要理解各种理想数学模型的原理和推导过程,重点考察物料平衡,注意培养逻辑推理能力,多想、多看,理解并记住一些经典理论方程。
另外,以工程放大的角度,从点到面,系统思考一个生物过程体系的方方面面。
三、各章学习指南本课程是学习如何将实验室的研究成果进行工业化开发的一门学科,是工程放大的基础。
本课程的模式和公式比较多,有些必须要记住,有些可以推导或了解一下。
第一章绪论主要内容:从青霉素、链霉素的发现及其工业化生产中引出现代发酵工程及产业,生化工程的研究进展重点:生化工程的定义,生物反应过程的特点难点:了解生化工程与化学工程之间的差别与共同点。
第二章均相酶催化反应动力学主要内容:包括酶反应的特征,可逆酶反应的动力学,影响酶反应的因素重点:酶促反应的影响因素,米氏方程表达式,Km的含义,L-B双倒数法测定参数,别构酶的Hill方程,pH的对酶动力学的影响及pK-pH关系。
难点:反应级数判定和计算理解快速平衡学说与稳态学说之间的区别,会用两种学说进行反应动力学推导掌握几种不同可逆抑制的原理及动力学推导,包括竞争性抑制、非竞争性抑制和反竞争抑制第三章固定化酶反应动力学主要内容:包括固定化酶反应动力学的特征,外扩散限制反应,内扩散限制反应。
重点:固定化酶的定义、优缺点,几种固定化酶的方法,外扩散限制下的酶反应速率与传质关系,内扩散限制条件下的φ(Thile)西勒模数的意义,如何减少内扩散限制的对酶动力学的影响。
生化技术实验指导书(20学时)
生化技术实验指导书湖北工业大学生物工程学院二0一0年三月修订实验一酵母RNA的提取及其组分的鉴定一、实验目的1.了解稀碱法提取RNA及提取物组分鉴定的基本原理;2. 掌握稀碱法提取RNA及提取物组分鉴定的具体操作方法。
二、实验原理酵母中RNA的含量比较丰富(2.67%~10%),而DNA的含量相对地较少(据资料报道,酵母DNA的含量低于RNA的20%),因此从酵母中提取RNA比较方便。
RNA溶于碱性溶液,碱性溶液使蛋白质带负电荷,促进RNA(带负电荷)与蛋白质的分离,碱性溶液可使酵母细胞壁变性,同时进行加热,可增加细胞壁的通透性,使核酸从细胞内释放出来。
因此,酵母粉用稀碱液加热抽提时,可将其中的RNA抽提出来。
当碱性抽提液中和后,加入2倍体积的95%乙醇时,可以使抽提物沉淀出来。
抽提物的主要成分是RNA的钠盐,并带有少量的蛋白质。
用碱抽提时,RNA会有不同程度的降解。
地衣酚(3,5-二羟基甲苯)是比较灵敏的测定戊糖的试剂,常用于测定RNA。
核糖与地衣酚试剂反应呈现鲜绿色。
地衣酚试剂反应灵敏,也易被其他物质干扰。
DNA中的脱氧核糖也可与地衣酚反应,因此,单靠地衣酚显色实验不能作为RNA 与DNA鉴别依据。
二苯胺试剂是常用于测定DNA中脱氧核糖的试剂,脱氧核糖与二苯胺试剂反应产生蓝色物质,而RNA中的核糖一般不与苯胺起反应。
嘌呤碱可与硝酸银反应生成白色的嘌呤银化合物的沉淀。
双缩脲反应是检验蛋白质常用的颜色反应。
双缩脲或含有两个以上肽键的化合物(蛋白质、肽等)在碱性条件下与硫酸铜反应生成紫红色的配合物。
如果蛋白质含量很低时,此颜色反应不易观察到。
三、试剂与器材1. 试剂:(1)酵母粉(药用);(2)0.5%NaOH溶液;(3)乙酸;(4)10%硫酸溶液;(5)氨水;(6)5%硝酸银溶液;(7)95%乙醇;(8)地衣酚试剂(硫酸铁铵1.35g,地衣酚2g,用蒸馏水配成50mL作为母液,保存于冰箱中。
使用前,取母液2.5mL,加浓盐酸41.5mL再加蒸馏水60mL);(9)二苯胺试剂(1.5g二苯胺溶于100mL高纯度的冰醋酸中,再加1.5mL浓硫酸);(10)10%氢氧化钠溶液;(11)1%硫酸铜溶液。
《生化技术》课程实习实验指导书新格式(1)精品].doc
望的工程专地《生化技术》课程实习指导书张如新、任光云编著邵阳学院生物与化学工程系2012年10月实习项目一、超临界CO2萃取山茱萸中有效成分熊果酸 (1)实习项目二、加携带剂超临界CO2萃取山茱萸有效成分熊果酸 (5)实习项冃三、HPLC法测定萃取物中有效成分熊果酸的含量 (7)实习项目一、山茱萸有效成分熊果酸的超临界CO2萃舟一、实验目的与要求1、掌握超临界CO2萃取的原理2、掌握超临界CO2萃取的操作3、掌握材料的处理与准备二、原理超临界CO2萃取是利用欲分离物质与杂质在超临界CO2中溶解度不同而达到分离的一种萃取技术。
超临界流体兼有气、液两者的特点,密度接近于液体,粘度和扩散系数接近于气体,它不仅具冇与液体溶剂相当的溶解能力,而且具冇优良的传质性能。
超临界流体CO2萃取技术就是利用这种超临界流体的特殊性质,在高压条件卜•与待分离的固体或液体混合物接触,有效成分能溶解在超临界流体co2,通过调节系统的操作压力和温度,可萃取所需要的物质。
随后通过降压或升温的方法,降低超临界流体CO2的密度, 使萃取物溶解度降低,使目的物与超临界流体分离,萃取得到有效成分即目的物。
三、材料与仪器1、材料:山茱萸2、CO2气体3、仪器:超临界CO?萃取装置4、植物样木粉碎机四、操作步骤1、材料的准备选择优质的山茱萸材料,把其中的杂质去掉,称取1公斤山茱萸在70-100 C烤箱中烘烤3〜4小时至完全干燥为止。
用粉碎机粉碎(过40目筛),粗粉要再次粉碎,直到能过40目筛。
2、萃取称取100 g粉碎的山茱萸装入萃取缸并把萃取缸安装好,在压力为30MPa、温度为40"C下萃取3〜4小时。
并按CO?超临界萃取装置使用说明书(见附页)开机进行萃取操作:(注意:一定要在熟练掌握原理和操作规则情况卜•才止式开机操作。
)3、收集萃取物在收集萃取物之前,应准备4个洗干净并烘干的250ml锥形瓶。
毎萃取1个小时收集一次,具体操作按说明帖。
生化分离技术项目学习指南汇编
生化分离技术项目学习指南目录项目一发酵液的预处理项目学习指南 (1)项目二有机物质的萃取项目学习指南 (3)项目三生物大分子的沉淀与结晶项目学习指南 (5)项目四膜分离项目学习指南 (7)项目五药物的高度纯化项目学习指南 (9)项目六药物的干燥项目学习指南 (11)项目七生化药物的提取分离项目学习指南 (13)项目一发酵液的预处理项目学习指南项目一发酵液的预处理起草人员起草时间教学学期第3学期参考学时理论6~10 实作6~8 教学条件:教室、实训室、计算机、视频演示片、试剂、原料、黑板、多媒体等。
学习过程计划学习项目描述通过微生物细胞破碎、发酵液的预处理、发酵液的液固分离三个任务的完成,要求学生熟知微生物细胞破碎、发酵液的预处理和固液初级分离这些常用基本分离技术的原理及特点;能根据所应用产品的特点选择合适的分离方法,并能准确地进行操作。
具体任务设计会使用组织破碎机、超声波细胞破碎机、离心机、板框压滤机、转筒真空过滤机等常用分离设备及装置。
能力目标1.常用微生物细胞破碎、发酵液的预处理和固液初级分离的具体方法;2.能够说明常用微生物细胞破碎、发酵液的预处理和固液初级分离的应用范围及注意事项;3.能够做到通过查阅资料,正确选择生产或检测中所涉及到微生物细胞破碎、发酵液的预处理和固液初级分离的具体方法;4.学生能够独立完成微生物细胞破碎、发酵液的预处理、固液初级分离的具体操作;5.熟知微生物细胞破碎和固液初级分离中所用设备的操作规程。
专业技术内容1.细胞破碎方法及选择依据;2.发酵液的预处理的方法;3.常用的超速离心方法;三足式离心机组织破碎机超声波细胞破碎机板框压滤机4.间歇式过滤与连续式过滤设备的特点。
教学方法建议1.项目导向教学;2.分组讨论;3.多媒体教学;4.教学做一体化。
学习小组行动阶段1.资讯学生从工作任务中,收集工作中必须信息,初步掌握微生物细胞破碎、发酵液的预处理、固液初级分离的特点,为将来工作时能正确选择合适的分离方法进行生化药品的生产打下基础。
检验科生化实验操作指南
检验科生化实验操作指南一、实验目的本实验操作指南旨在为检验科工作人员提供详细的生化实验操作指导,确保实验过程的准确和安全。
二、实验准备1. 准备所需实验材料和试剂。
2. 检查实验仪器和设备的完好性和正常工作状态。
3. 穿戴实验室个人防护装备,包括实验服、手套、口罩和护目镜。
三、实验步骤1. 将待测样本进行标识,并按照实验要求进行适当的处理和预处理。
2. 根据实验方案和操作要求,准确称取所需的试剂和溶液。
3. 按照实验要求,将试剂和样本进行混合或反应,注意搅拌均匀。
4. 使用实验仪器对混合液进行必要的测试和分析。
5. 记录实验数据和观察结果,保留实验样本和残留物。
6. 根据实验要求,对实验结果进行分析和解释。
四、实验注意事项1. 严格按照实验方案和操作要求进行操作,避免任意更改实验步骤。
2. 注意使用安全防护装备,保护自己和他人的安全。
3. 在实验过程中保持实验台面整洁,避免交叉污染。
4. 注意正确使用实验仪器和设备,避免人为破坏。
5. 注意实验材料和试剂的保存和管理,避免损坏和过期使用。
五、实验结果与分析根据实验数据和观察结果,结合实验要求和参考标准,对实验结果进行分析和解释。
目的是得出准确的结论并提供相关建议。
六、实验总结与改进根据实验过程和实验结果,总结实验的优点和不足之处,并提出改进的建议。
目的是提高实验的准确性和效率。
结束语此生化实验操作指南为检验科工作人员提供了详细的操作步骤和注意事项,帮助他们完成实验工作,确保实验结果的准确和可靠。
在实验过程中,工作人员要严格按照操作规程进行操作,并时刻关注实验安全。
通过实验结果的分析和总结,进一步优化实验方法,提高工作效率和准确性。
生物科学生化实验教学大纲
一、实验课程基本信息课程编号: 课程学时: 60 实验课程学分: 1 适用专业: 生物科学开课学期: 3 实验学时: 24 应做实验个数: 4-6 所属实验室: 生化与分子生物学二、实验教学目的及要求生物化学实验的方法和技术是生物科学以及其它相关研究领域中的一个非常重要的基础性实验课程。
通过生物化学实验这门课程的学习,能使学生掌握生物化学实验的基本操作及实验技术,掌握生物大分子的分离纯化﹑定性﹑定量﹑化学性质﹑生物活性的鉴定,掌握和了解组织代谢和能量释放转变和贮存与代谢调节过程中的代谢产物和中间产物的定性﹑定量分析鉴定实验,使学生分析问题和解决问题的能力及实验动手能力得到训练,并能熟练掌握各种生物化学实验仪器的使用以及准确详实记录实验现象和数据等各项实验技能。
本课程能培养学生严谨的科学态度和工作作风,为他们今后参加科研工作打下坚实的基础。
三、实验指导的基本要求为达到教学目的,实验指导教师对学生实验应进行的指导要求为:1、教师要求学生预习实验,指导学生注意将实验与理论课所学习的相应部分相结合,初步了解实验原理和反应过程,为更好的理解与掌握实验打基础。
2、指导教师应对实验的原理及实验操作中注意事项进行讲解并要求学生:实验操作做到规范﹑到位,及时观察并记录实验现象和数据,弄清每一步实验操作的设计依据,并特别要强调注意事项中设计的操作。
在实验过程中,指导教师应及时对学生进行指导、讲解。
3、实验报告方面:指导教师应指导学生并要求学生详细写出实验原理﹑操作步骤﹑实验现象﹑注意事项,并解答实验中要求完成的计算等题目,必要时要总结实验成功的收获或失败的经验教训。
四、考核形式及要求本课程的考核是以平时成绩为基础,期终采取笔试与实验操作相结合的考核。
五、实验教材及参考书目实验教材:王秀奇、秦淑媛、高天慧、颜卉君编著. 基础生物化学实验. 第二版. 北京:高等教育出版社,1999年参考书目:1、张龙翔、张庭芳、李令媛主编. 生化实验方法和技术. 第二版. 北京:高等教育出版社,1997年2、中山大学生物系生化微生物学教研室编. 生化技术导论. 北京:人民教育出版社,1978年六、实验教学计划表执笔人:倪明一、实验课程基本信息课程编号: 课程学时: 60 实验课程学分: 1 适用专业: 生物科学开课学期: 4 实验学时: 24 应做实验个数: 4-6 所属实验室: 生化与分子生物学二、实验教学目的及要求生物化学实验的方法和技术是生物科学以及其它相关研究领域中的一个非常重要的基础性实验课程。
生化技术实验指导书(20学时)
生化技术实验指导书湖北工业大学生物工程学院二0一0年三月修订实验一酵母RNA的提取及其组分的鉴定一、实验目的1.了解稀碱法提取RNA及提取物组分鉴定的基本原理;2. 掌握稀碱法提取RNA及提取物组分鉴定的具体操作方法。
二、实验原理酵母中RNA的含量比较丰富(2.67%~10%),而DNA的含量相对地较少(据资料报道,酵母DNA的含量低于RNA的20%),因此从酵母中提取RNA比较方便。
RNA溶于碱性溶液,碱性溶液使蛋白质带负电荷,促进RNA(带负电荷)与蛋白质的分离,碱性溶液可使酵母细胞壁变性,同时进行加热,可增加细胞壁的通透性,使核酸从细胞内释放出来。
因此,酵母粉用稀碱液加热抽提时,可将其中的RNA抽提出来。
当碱性抽提液中和后,加入2倍体积的95%乙醇时,可以使抽提物沉淀出来。
抽提物的主要成分是RNA的钠盐,并带有少量的蛋白质。
用碱抽提时,RNA会有不同程度的降解。
地衣酚(3,5-二羟基甲苯)是比较灵敏的测定戊糖的试剂,常用于测定RNA。
核糖与地衣酚试剂反应呈现鲜绿色。
地衣酚试剂反应灵敏,也易被其他物质干扰。
DNA中的脱氧核糖也可与地衣酚反应,因此,单靠地衣酚显色实验不能作为RNA 与DNA鉴别依据。
二苯胺试剂是常用于测定DNA中脱氧核糖的试剂,脱氧核糖与二苯胺试剂反应产生蓝色物质,而RNA中的核糖一般不与苯胺起反应。
嘌呤碱可与硝酸银反应生成白色的嘌呤银化合物的沉淀。
双缩脲反应是检验蛋白质常用的颜色反应。
双缩脲或含有两个以上肽键的化合物(蛋白质、肽等)在碱性条件下与硫酸铜反应生成紫红色的配合物。
如果蛋白质含量很低时,此颜色反应不易观察到。
三、试剂与器材1. 试剂:(1)酵母粉(药用);(2)0.5%NaOH溶液;(3)乙酸;(4)10%硫酸溶液;(5)氨水;(6)5%硝酸银溶液;(7)95%乙醇;(8)地衣酚试剂(硫酸铁铵1.35g,地衣酚2g,用蒸馏水配成50mL作为母液,保存于冰箱中。
使用前,取母液2.5mL,加浓盐酸41.5mL再加蒸馏水60mL);(9)二苯胺试剂(1.5g二苯胺溶于100mL高纯度的冰醋酸中,再加1.5mL浓硫酸);(10)10%氢氧化钠溶液;(11)1%硫酸铜溶液。
《生化实验基本操作》课件
掌握实验操作过程中需要注意的细节,确保实验结果准确可靠。
3 实验安全注意事项
学习实验过程中的安全操作规范和紧急事故应急预案,保障实验人员安全。
实验结果分析
展示实验结果的图像,分析并解释数据,介绍数据统计和分析方法。
1
实验结果的图像展示和解析
使用图像和图表向观众展示实验结果,并进行详细解析。
PCR扩增
使用聚合酶链反应(PCR)扩增DNA片段的基本操 作步骤。
Western blotting
了解Western blotting技术在蛋白质检测中的应用和 操作流程。
实验注意事项
掌握实验前准备工作、实验操作步骤注意事项以及实验安全注意事项,确保操作顺利进行。
1 实验前准备工作
了解实验前的材料准备、设备检查和实验环境准备等重要步骤。
《生化实验基本操作》 PPT课件
生化实验基本操作PPT课件
实验原理介绍
了解生物分子的基本组成、化学性质和特点,以及生化实验的实验原理。
生物分子的基本组成
探索DNA、Rቤተ መጻሕፍቲ ባይዱA、蛋白质等生物分子的基本组成和结构。
生物分子的化学性质和特点
研究生物分子的化学特性,如酶的催化作用和蛋白质的折叠。
生化实验的实验原理
生化实验的应用前景
介绍生化实验在医学、农业和环境保护等领域的广泛应用前景。
参考文献
推荐一些生化实验相关的书籍,以及在线可获取的生化实验资源。 • 生化实验教程 - 张三,ISBN 978-1234567890 • 实验技术手册 - 李四,ISBN 978-0987654321 • 生化实验资源网站
2
数据统计和分析方法
介绍常见的生化实验数据统计和分析方法,如t检验和方差分析。
生化实验指南.
生物化学检验技术课程学习指南(适用于医学检验专业专科使用)生物化学及检验教研室编一、课程简介《生物化学检验》(临床生物化学检验、临床生化检验、生化检验、生化检验学、临床生物化学和生物化学检验、临床生物化学及生物化学检验、临床生物化学、临床化学等)是对人体健康和患病时化学状态的研究以及用于诊断、治疗和预防疾病的化学试验方法的应用。
它的主要任务是研究人体器官、组织、体液的化学组成和进行着的生化过程,以及疾病、药物对这些过程的影响,为疾病诊断、病情监测、药物疗效、预后判断和疾病预防等各个方面提供信息和理论依据。
因此,《生物化学检验》既是一门研究人体健康和疾病时生理生化过程的医学基础理论学科,又是一门应用各种技术和方法分析机体健康和疾病时体液或组织样品中各种化学成分的医学应用技术学科,它在医学理论和医学实践中均具有相当重要的地位,是高等医学检验专业的一门主干学科和必修课程。
(一)课程目标通过本课程的学习,要求学生掌握生物化学检验的基础理论、基本知识和基本技能,能够从事检验医学的生化实验诊断操作、评价和应用,培养成为医学检验技术专业高级专门人才。
具体归纳为:1、掌握生物化学检验的基本理论、基本知识;2、具有娴熟的生物化学检验的操作技能;3、能够从事医学检验的生物化学实验诊断操作、评价和应用,具有独立的工作能力和解决实际问题的能力及创新意识;4、树立和培养学生良好的职业道德和从业素质。
根据《生物化学检验》课程在检验医学中的作用和地位,为便于学生对《生物化学检验》课程的学习,该该课程分为三个不同程度的要求:“掌握、熟悉和了解”。
“掌握”的内容,在授课时需要重点讲解,要求学生能全面理解,必须牢记并能融会贯通;“熟悉”的内容,要求学生能理解和记住概念与特点;“了解”的内容只扼要介绍有关知识概念或通过学生自学来认识和理解,有些则属于学科进展以及扩展知识面的内容。
在考试内容中,掌握的部分约占60%~70%,熟悉的部分约占20%~30%,了解的部分约占10%。
生物化学与分子生物学:生化实验基本操作技术
溶液的混匀技术
• 甩动混匀适用于试管内液量不多的溶液混匀。 • 弹打混匀适用于锥形离心管、小试管和小塑料离心管等内容物的混匀。 • 旋转混匀适用于未盛满溶液的锥形瓶、试管和小口容器等内容物的混匀。 • 倒转混匀适用于具塞容器,如容量瓶、具塞量筒和具塞离心管等内容物的混匀。 • 玻棒搅拌混匀适用于烧杯内容物的混匀。 • 吸管混匀适用于样品不同浓度等级稀释的混匀。 • 旋涡振荡器混匀适用于锥形离心管、小试管和小塑料离心管等内容物混匀。 • 电磁搅拌混匀适用于酸碱自动滴定、pH梯度滴定等。
洗涤、干燥原则与判断方法
玻璃器皿洗涤原则:
对不同玻璃器皿,采用不同的洗涤方法。根据器皿污 染源的不同选择合适的洗涤液。
玻璃器皿干燥原则:
量器自然凉干,容器烘干备用。
器皿清洁的判断方法:
洗涤后倒置容器,其内壁无挂珠;干燥后器壁内外干 净、无污物痕迹。
2012年秋季学期
生物化学与分子生物学实验教学中心
立即清洗→晾干→铬酸洗液浸泡4~6h→自来水冲洗→蒸馏水冲洗
比色杯洗涤
自来水冲洗→蒸馏水冲洗 (洗不净可用3.5mol/L HNO3溶液或(0.3~0.6)mol/L HCl冲洗,
禁用毛刷或强氧化剂或超声波洗涤)
干燥—自然干燥、烘烤干燥
量器自然凉干,容器烘干备用。
生物化学与分子生物学实验教学中心
新购置的玻璃器皿洗涤
2%盐酸浸泡数小时→自来水冲洗→常规洗涤
血清堵塞刻度吸管洗涤
7.5mol/L尿素清洗→常规洗涤
油污烧杯试管洗涤
去油脂→常规洗涤 (去油脂方法:将量器倒放于具有强吸水力的几层厚纸上,置 100℃烤箱中烘烤半小时,使油脂溶化由厚纸吸收,再置碱性溶 液中煮沸趁热洗刷,即可除去油脂)。
生物化学实验操作手册(生物科学专为业)
总论21世纪是生命科学的世纪,生物化学与分子生物学是当代生命科学领域中一门重要的基础学科,它涵盖的基础理论,基本知识,基本技术与医学研究各学科领域密切相关,其理论与技术的发展,推动了生命科学的发展,对人类的科技进步与文明产生巨大影响。
生物化学实验是医学院校学生必修的一门独立的基础实验技术课程,其研究技术的发展与应用是依据物理学、化学及生物学的基本理论和实验方法而建立起来的。
20世纪20年代微量分析的发展,30年代电子显微镜的出现,40年代层析技术和电泳技术的兴起,以及同位素示踪技术、各种光谱技术、核磁共振技术的应用,激光、超导等新技术的出现,电子计算机技术的突飞猛进,使生物化学实验手段提高到一个崭新的水平,掌握生物化学实验方法和研究技术,对医学院校学生来说是十分重要的。
本门课程主要侧重于给学生以基本的实验方法和技能的训练,让学生了解并掌握生物化学的四大基本实验方法,即:分光光度法、离心法、层析法和电泳法。
同时也注意引进一些新近发展起来的、重要的生物化学及分子生物学研究技术,作为学生学习其他专业课程和进入科学研究领域的准备。
一、实验要求1.实验前必须预习实验指导和有关理论,明确实验目的、原理、预期的结果,操作关键步骤及注意事项。
2.实验时要严肃认真专心进行操作,注意观察实验过程中出现的现象和结果,结果不良时,必须重做。
3.实验中,应及时将实验结果如实记录下来,并请老师当场审核。
根据实验结果进行科学分析,按时将实验报告交教师评阅。
二、实验时注意事项1.进实验室要穿好实验服,以免酸碱腐蚀衣服。
2.进实验室前准备好实验指导、课本、笔记、实验记录本、报告本、文具等。
3.要保持实验台整洁,试剂、仪器应整齐,按次序放置。
实验完毕要按各类仪器的清洗方法和要求将仪器清洗干净。
4.实验室是培养学生独立思考、独立工作能力及良好科学作风的重要场所,操作务必认真不得敷衍,室内应保持肃静,不得吸烟、玩闹,不得随地吐痰,乱丢纸屑。
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生化实验技术课程学习指南
1.课程内容:
生命科学作为二十一世纪发展最为迅速的学科之一,生物化学技术则是其任何研究进展的技术支撑,是现代生物技术的重要组成部分。
生化实验手段不仅推动了本学科的进展,而且被生物其他学科利用,促进了各学科的共同发展。
生化实验技术的学习已经成为理解近代生命科学的重要基础之一。
本课程学习分基础实验与综合设计两个渐进式技能训练模块进行,其中基础实验内容主要学习生物化学的基本实验技术,包括验证与分析生化物质的6大主要类型(蛋白质、酶、DNA、糖、脂类、维生素等)和生化代谢过程的基本技术方法。
内容涉及生化物质的定性、定量分析测定、电泳鉴定和代谢检测等,即课内完成8个实验项目的操作训练;同时鼓励学生自行设计实验内容,达到教学训练目标。
表1基础实验模块教学内容及技能点
综合设计实验模块内容为选取蛋白质、核酸两大类生化大分子物质提取制备和鉴定实验项目为载体,以生物化学理论为指导,设计综合贯穿生化分离检测实验的经典技术为主线的实验内容,学习生化材料预处理、沉淀技术、膜分离技术、层析技术(凝胶、离子交换、亲和析)、电泳技术、化学检测、光学检测等,以及生化产品分析鉴定的实验技术理论与操作方法。
教学课时内完成2个大主题方向的实验内容,即蛋白质分离纯化鉴定、基因组提取纯化与PCR 鉴定。
学生可自选各方向一个实验项目设计方案并完成操作训练,也鼓励学生选择大纲外感兴趣的实验项目,如多糖、酶等大分子物
质作为实验对象,同样设计并完成操作,达到教学要求的目标。
表2综合设计实验教学内容及技能、知识点
2.学习方法:
本课程基础实验教学采用全程参与、合作讨论、问题式、滚动式教学方法,实验教学改变书本——课堂——教师为中心的传统教学方法,建立以学生为主体、师生互动、全程参与、合作讨论式的教学形式。
基础实验整个过程对学生进行强化及严格训练,每个实验项目从查阅资料、实验准备、实验操作、结果分析等整个实验活
动都由学生来完成,整个实验活动的实施主体是学生,实验过程突出学生自我训练为主,全程参与式的实验教学方法。
每次课堂实验教师用半节课的时间分次讲解实验的知识要点、关键操作和注意事项。
教师作为出题者、组织者、裁判者、实验配合及指导者,引导学生完成整个实验过程,以充分培养学生独立分析问题、解决问题的能力和综合表达能力。
督促学生认真预习理解每一个实验内容、设计思路和实验关键,提高实验教学效果。
通过对实验结果与实验过程中出现问题的讨论,加深对实验原理与实验理论的理解及实验技能的掌握,提高学生学习能力、分析问题与解决问题能力,并强化实验基础操作能力。
在实验室教师根据教学大纲要求开设实验项目,每个项目配套相应几套实验器材及仪器,保证每组学生一套;同一个实验室同时开设2个实验项目(同一个主题),同一个课堂时间内学生各自进行实验,在学期内轮流完成大纲所规定的全部实验。
2个学生为一个小组(实验操作组),共同完成课堂实验操作过程;3-4个小组为1个大组(实验研讨组),共同完成课前试剂配制、课前研讨和课后研讨、汇报交流等内容;每个班级分为4个大组。
学期初在生化实验技术网站(/)的在线实验管理平台上发布实验项目→课外组织学生培训实验项目实施流程→学生分组(大组、小组)→实验项目安排→教师网上布置每个实验项目预习讨论思考题→学生查阅资料,项目内容预习→课前网上递交思考题作业→教师批阅→书写实验项目预习报告→学
生课前以大组为单位准备实验材料及试剂→进入实验室实验(教师抽查预习情况→介绍相关四个实验内容重点技术及难点→学生以小组组为单位进行不同的实验项目实验→学期内分段轮回完成大纲规定实验项目)→教师巡回指导、学生互助指导→完成实验报告→课后大组讨论→期中,期末两次全班课堂交流汇报总结。
具体见学习流程图1
图1基础实验模块课程教学组织实施流程
综合设计实验模块教学实验采用自主设计、研讨合作式的实验教
学模式,推行以学生自我训练为主、全程参与、科研式的实验教学法。
学生可以根据课外学习情况与兴趣自主选择实验内容,自主设计实验方案和选择实验时间,以学生合作完成实验内容为主的学习。
实验中从查阅资料、方案设计、实验准备到实验讲解、实验操作、结果分析等整个实验活动都由学生自行完成,整个实验活动的实施主体是学生,教师仅仅是出题者、组织者、指导者与裁判员,起到督促学生认真预习理解每一个实验内容、设计思路和实验关键,提高实验教学效果作用。
具体学习流程如图2所示。
图2 综合设计实验模块教学组织实施流程
3.课程学习要求:
1).课前预习:明确实验目的、原理、方法及操作中的注意事项,并写出实验预习报告。
完成预习思考题。
设计综合及应用设计部分实验学习前,务必对生化实验技术原理与方法部分做好学习,完成课前设疑内容,明确实验目标、查阅资料,写好实验设计方案。
2).实验过程:基础实验按照实验指导书所列步骤和要求实施实验操作,设计综合及应用设计实验项目,鼓励学生综合所学知识开拓创新,运用多种实验方法完成实验目标,也可根据指导书示例进行操作学习。
3).实验结果与分析:真实记录实验结果数据,对结果要认真分析,得出结论;异常的结果要分析并找出原因。
坚持实验的严肃性、严格性、严密性。
4).讨论与报告:对实验结果进行分析研讨,写出实验报告或小论文,并汇报交流实验收获和知识拓展情况。
5).注意事项:严格遵守大型精密仪器操作管理及生化实验室规则,防止各种事故发生。
4.课程学习评价:
本课程两模块学习评价采用过程式、多元素评价方式详见表3。
表3 生化实验技术课程成绩构成表
实验研讨成绩20% 15%
实验预习思考题10%
实验设计15%
实验报告10%
实验操作考试20% 15%
实验原理理论考试30% 15%
平时表现与出勤10% 10%
实验小论文30%
自主设计实验:符合学习要求、设计方法与结果具有创新,经审核
可获课程满分。
5.课程学习服务平台与资源:
生化实验技术课程两个模块教学具有国家精品课程网((/)平台支持,学习时所需求的资源丰富,每个项目实验都配套制作了实验教学PPT课件、网上学习资料、
实验操作动画演示等学习资源,并具有学生上网学习及提交作业、教师批改功等在线管理功能。
课程主要参考教材:钱国英主编,《生化实验技术与实施教程》浙江大学出版社;陈雅蕙、余瑞元等编写,《生物化学实验原理和方法》,北京大学版社。