猪瘟病毒微生物学检测技术研究进展

猪瘟病毒微生物学检测技术研究进展

作者：赵嘉宁

来源：《新一代》2018年第13期

摘要：关于猪瘟，主要是由猪瘟病毒所引起的具有高度接触性的传染病，且具有较高的死亡率，因而受到各国对该病毒的关注。而本文主要就针对猪瘟病毒微生物学检测技术进行重点探讨和分析，以期能够更好的保证有关猪瘟防控工作的有序进行。

关键词：猪瘟病毒；生物学；检测技术

因猪瘟是由该病毒所引发的高传染性疾病，且在流行范围较广，如果得不到及时的遏制，势必会给养猪业带来严重的影响。在这种形势下，则需要有关部门加强对相关检测技术的研究和应用，以此能够对该病毒做好相应的防控工作，减少病毒感染对社会经济发展所产生的影响

一、猪瘟病毒基因结构及功能

（一）猪瘟病毒的基本特征。结合相关调查表明，猪瘟病毒属于黄病毒科，还包含其它病毒，即，能牛病毒性腹泻病毒、羊边界病病毒[1]。因这三种病毒在各方面具有较为密切的联系，一旦感染其中一个病毒，则会在对其他病毒产生不同程度的交叉保护反应。另外，猪瘟病毒还可在多个细胞中生长繁殖，如猪胚、乳猪啤、肾等。

（二）猪瘟病毒基因组。在这方面，能够发现有关猪瘟病毒的基因组基本上是由三个部分所组成的，分别是5，非编码区（5，UTR）、编码区（TR）以及3，非编码区（3，UTR）。在这其中，基因组的5，没有甲基化帽状结构，且在3，也缺少Poly（A）结构。因而在翻译相关起始机制上与常见的真核生物中的mRNA是不同的。这就需要相关人员在猪瘟研究工作中注重这方面。

二、关于猪瘟病毒微生物学检测技术

（一）聚合酶链反应检测技术

1.反转录-聚合酶链反应。对于反转录-聚合酶链反应技术的出现，已经逐渐应用在猪瘟病毒的实验室检测中。该技术的使用，能够对猪病中所存在的多种病原进行有效区分，具体就有：口蹄疫病毒、猪细小病毒以及猪繁殖与呼吸综合征病毒等[2]。在过去所使用的PCR技术与常规实施诊断方法相比，虽然在方式上更为简单，但是在当前分子生物学检测技术的快速发展趋势下，该技术在应用过程中所存在的问题也开始凸显出来。

2.多重RT-PCR。通过对RT-PCR的改进和创新后，已经发展出多重RT-PCR。这种技术的应用，能够对猪体内中所带有的各种病原体予以快速检测。由此可见，多重RT-PCR作为快速且高速的实验室检测手段，只需要进行一次试验工作就能够对多种病毒进行有效检测，进而

为相关人员在病原检测上提供极大的便利。但是在实际应用过程中，这种方法对各方面的要求比较高，特别是对引物设计这方面的要求，十分严格。这是因病毒检测种类越多，则就需应用较多的引物设计，因而在此环节中，很容易出现失误，导致扩增片段的长度会受到不同程度的限制。在这种情况下，在这种方法应用上，最多可对2-3种病原进行检测，如果检测到4种及以上病原时，是会在一定程度上影响该方式检测的灵敏度。

3.套式RT-PCR。关于套式RT-PCR，又被称为巢式PCR。主要作用就是对猪瘟病毒进行检测以及对猪瘟病毒与其他病毒进行有效区别。另外，其所具有的敏感度要高于比较常见的PT-PCR，且所具有的特异性也相对较高。在该技术中，可通过对抗原-ELLSA和RT-nPCR 这几种实验室诊断技术进行深入比较，能够清楚的发现，RT-nPCR更加具有优越性。同时也是检测猪瘟病毒感染的最重要方法。

4.荧光定量RT-PCR技术。结合实际发现，当前所使用的水解探针模式中的Re-al-time RT–PCR，在检测猪瘟病毒中得到较好的应用。但是在使中所呈现出的假阴性结果，则会在内一定程度上凸显出其所存在的不足[3]。这种情况的出现，主要是因探针的结合点明显出现突变，进而会对接下来的检测造成干扰。在这种现象下，基于其他相关检测模式下，如引物探针能量转移等也会受到干扰。

综合来说，荧光定量PCR既能够对样品进行较好的定量检测，同时还具有较强的特异性，进而保障结果准确。

（二）DNA芯片技术。关于DNA芯片技术，作为现代化基因诊断技术，在实际应用中具有较多的优势，如高效、敏感以及自动化等。比如，在Gladue DP，则就可借助DNA芯片技术，来检测猪细胞中所出现的基因模式以及体外感染猪病毒强株后发生的反应，进而帮助相关人员对这些基因与先天免疫应答调节机制所存在的联系。另外，相关人员能够利用DNA芯片技术，进一步检测猪瘟病毒。以此能够在最大程度上保障检测结果的准确性。

综合上述，在生物学检测技术的不断发展下，极大的提高我国对猪瘟病毒分子生物学的检测技术水平。通过本文对猪瘟病毒微生物学检测技术深入分析后，现阶段所使用的猪瘟病毒分子生学物检测技术，除了传统的RT-PCR技术之外，还可根据实际需要，使用套式RT-PCR、反转录-聚合酶链反应、荧光定量RT-PCR技术、DNA芯片技术等。这些检测技术在应用上都具有自己的优缺点，因而相关人员在使用这些检测方法上，则可将这些方式进行适当的结合，以此能够达到取长补短的效果。随着近几年我国在分子生物学技术的快速发展，促使猪瘟病毒技术在实际应用中具有更高的灵敏度，推动相关部门对猪瘟监测工作的有序开展，满足当前社会发展对这方面的要求。

参考文献：

[1]褚建军.猪瘟病的防治新方法[J].吉林农业，2018（08）：72.

[2]陈景容.不同猪瘟病毒株在ST细胞上的增殖研究[J].福建畜牧兽医，2017，39（03）：

9-11.

[3]吴艳萍.当前猪瘟病的特点及免疫失败原因分析[J].中国动物保健，2016，18（12）：3-4.