高效液相操作规程

A-10 高效液相色谱仪操作规程

1、准备：

流动相：按方法要求配制流动相(水相、有机相、柱塞密封垫清洗液、洗针液)，经0.45 m 微孔滤膜过滤，并超声波脱气。

样品溶液：按方法要求配制样品溶液，并以过滤或高速离心方式除去溶液中的固体微粒。

2、开机及平衡系统：

2.1 打开仪器电源，仪器自检；

2.25分钟；

2.31-2次；

2.4打开真空脫气机，执行灌注：当溶剂的管路是空时候，或不小心走干溶剂的时候，执行

2.5设定流动相条件平衡色谱柱；

2.6

3、进样：

3.1装载样品盘，准备进样；

3.2打开计算机，运行Empower软件：编辑仪器方法和方法组，建立方法；进入平衡系统/

监视基线界面，选择相应的仪器方法，点击

进入进样参数编辑界面，输入样品名称、功能、方法组等存放数据文件的Project，运行Run Samples。

4、数据处理及打印：

在Empower软件中运行Channels表中打开数据，建立处理方法；用建立好的处理方法处理数据；

在Result表中选择要打印的结果，选择打印格式，打印数据。

5、关机：

实验结束后，退出Run sample界面，退出Empower软件，关闭检测器电源；先用5：95乙腈清洗色谱柱约30min，然后用纯乙腈清洗色谱柱约60min。

清洗灌注柱塞密封1min。

清洗灌注针头2次。

冲洗进样器。

降低流速至0，待系统压力回零后，关闭2695电源。关闭计算机及显示器电源。

6、仪器维护：

正常使用时：流动相新鲜配置，使用缓冲盐溶液必须经0.45 m微孔滤膜过滤，置换流动相时要考虑前后两种流动相可以互溶，如：甲醇——水——缓冲盐——水——甲醇，不可直接甲醇/乙腈置换到缓冲盐。

长期不使用时：各管路充满甲醇或者乙腈，防止管路内和过滤头长菌。

每月开机一次至少半个小时，查看仪器自检及各种功能是否正常。

色谱柱使用后用说明书指定的流动相冲洗至少十倍柱体积，每半年至少冲洗一次。