分光光度计使用注意事项讲解

合集下载

分光光度计注意事项有哪些

分光光度计注意事项有哪些

分光光度计注意事项有哪些
一、样品处理。

样品应该进行充分的处理,确保样品的均一性和纯度。

对于溶液样品,应该通过稀释或水解等方法进行前处理,保证光学测量结果的准确性。

二、纯净水的使用。

三、避免光源干扰。

光源的干扰会影响分光光度计的精确度,因此需要注意避免干扰。


测量之前,需要检查灯泡、发光二极管等光源的工作状态和亮度,确保它
们正常工作。

此外,应该避免测量对象对光源造成的干扰,例如,测量样
品应该在折射率匹配的背景下进行。

四、避免光路污染。

分光光度计的光路十分精密,因此需要注意避免光路污染。

在使用前,需要仔细检查光学元件和光路,如果发现污染或损坏,需要进行清洁和更换。

此外,分光光度计需要放置在干燥、清洁的环境中,以避免灰尘和湿
气对光学元件和光路的污染。

五、测量原理的理解。

综上所述,使用分光光度计需要进行充分的样品处理和仔细的光学元
件维护,同时需要避免光源和光路的干扰,理解测量原理,以保证光学分
析的准确性。

分光光度计注意事项

分光光度计注意事项

分光光度计注意事项一、什么是分光光度计分光光度计是一种用于测量物质吸光度的仪器。

它利用光的吸收特性来测定物质的浓度或含量。

分光光度计可以广泛应用于化学、生物、环境等领域,是科学研究和实验室分析中常用的工具。

二、使用分光光度计的注意事项1. 清洁和保养•定期清洁仪器表面,避免灰尘、污垢等对测量结果的干扰。

•注意手指和其他物体的接触,避免留下指纹或污渍。

•不要使用有腐蚀性的溶剂或化学品清洁仪器,以免损坏。

2. 校准和调零•在进行实验前,应先进行校准。

校准可以提高结果的准确性和可靠性。

•定期对分光光度计进行调零操作,以确保基线为零,避免误差积累。

3. 参数设置和测量条件•对于每个实验或样品,应选择适当的参数设置,包括波长范围、光强度等。

•保持常温和恒定的湿度,避免温度和湿度变化对测量结果的影响。

4. 样品处理和操作技巧•样品的准备和处理应符合实验要求,确保在测量过程中不产生干扰。

•小心操作,避免样品的溢出或外部物质的污染。

三、分光光度计的正确使用步骤1. 准备工作1.确保分光光度计处于正常工作状态,检查仪器是否正常通电和开机。

2.清洁仪器表面,确保没有灰尘、污垢等影响测量的物质。

2. 校准仪器1.根据仪器的使用说明书,进行校准操作。

2.使用标准溶液进行校准,确保仪器的准确性和可靠性。

3. 设置测量参数1.根据实验要求,选择适当的波长范围。

2.调整光强度,以确保在仪器的线性范围内测量。

4. 准备样品1.根据实验要求,准备样品溶液。

2.将样品转移到适当的试管或比色皿中。

5. 进行测量1.放入准备好的样品,确保样品完全浸入光束中。

2.记录测量结果,包括吸光度值和浓度等数据。

6. 清洁和关闭1.清洁使用的试管或比色皿,避免样品的交叉污染。

2.关闭分光光度计,注意仪器的保养和存储。

四、分光光度计的常见问题及解决方法1. 波长漂移•问题:在测量过程中,波长数值出现了偏移,导致结果不准确。

•解决方法:进行波长校准,检查仪器的波长设置是否正确。

分光光度计的注意事项

分光光度计的注意事项

分光光度计的注意事项使用分光光度计时,需要注意以下事项:1. 实验前要对仪器进行检查和校准,确保仪器状态良好。

检查光源、光栅、检测器等部件是否正常工作,调整仪器的灵敏度和线性范围。

2. 在进行测量前,要将分光光度计进行预热,通常预热时间为10-15分钟。

预热有助于使仪器的测量结果更加准确和稳定。

3. 在进行样品测量时,要注意将样品溶液和标准溶液倒入光洁的石英比色皿或玻璃比色皿中。

避免在使用过程中产生气泡或污染物影响测量结果。

4. 样品溶液的吸光度应在仪器的检测范围内,避免溶液吸光度过低或过高。

可适当稀释样品溶液以使其吸光度适合测量。

5. 在选择波长时,要根据待测物的吸收峰波长进行选择。

一般来说,选择吸收峰处波长可以提高测量的准确性。

6. 测量过程中要注意避免强光直射样品溶液,以免光子能量过高影响测量结果。

可以使用黑色比色皿或遮挡仪器部分光线以避免这种情况发生。

7. 清洗比色皿时要使用纯净水或溶液进行清洗,避免使用有机溶剂或酸碱溶液。

清洗后要用纯净水进行两次以上的漂洗,避免残留物对后续测量的影响。

8. 每次完成测量后要及时关闭仪器,避免长时间的无效运行。

同时要将仪器进行清洁,并注意保护仪器免受外界的震动、湿气等影响。

9. 在仪器的日常使用和维护过程中,应严格遵守仪器使用说明书和操作规程,及时处理仪器中出现的异常及故障现象。

总之,使用分光光度计时要注意仪器的校准、预热和清洁,选择合适的波长,避免样品吸光度过低或过高,避免强光直射样品,正确清洗比色皿,并遵守仪器的使用规程。

只有正确使用并注意上述事项,才能获得准确可靠的测量结果。

分光光度计使用时的注意事项

分光光度计使用时的注意事项

分光光度计使用时的注意事项分光光度计是利用物质对光的选择性吸取的特性,以较纯的单色光作为入射光,测定物质对光的吸取,从而对物质进行定性或定量分析的仪器,是基于物质对光(对光的波长)的吸取具有选择性,不同的物质都有各自的吸取光带,所以,当光色散后的光谱通过某一溶液时,其中某些波长的光线就会被溶液吸取。

在确定的波长下,溶液中物质的浓度与光能量减弱的程度有确定的比例关系,即符合比尔定律。

一、分光光度计日常使用注意事项①连续使用仪器的时间不应超过2小时,可以是间歇0.5小时后,再连续使用。

②比色皿每次使用完毕后,要用去离子水洗净并倒置晾干后,存放在比色皿盒内。

在日常使用中应注意保护比色皿的透光面,使其不受损坏或产生划痕,以免影响透光率。

③仪器不能受潮。

在日常使用中,应常常注意单色器上的防潮硅胶(在仪器的底部)是否变色,如硅胶的颜色已变红,应立刻取出烘干或更换。

④在托运或移动仪器时,应注意当心轻放。

二、分光光度计误差紧要是由4个原因导致1、复色光对比耳定律的偏离比耳定律成立的前提条件是人射光是单色光,但是精度再高的仪器,即使是双单色器的分光光度计,也只能获得近乎单色的光,无法获得纯单色光,它仍旧含有狭窄光通带,具有复色光的性质。

而复色光会导致比耳定律的正或负偏离。

固定狭缝的紫外分光光度计光谱带宽一般为1nm或2nm,可调狭缝的可以做到0、1nm;可见分光光度计带宽6nm、snm,甚至十几纳米。

光谱带宽应当是越小越好,但是,随着光谱辨别率的提高,仪器的灵敏度降低,所以,选择仪器时要综合考虑各种条件的影响。

当溶液浓度较小且单色光较纯时,可貌似认为符合比耳定律。

2、杂散光的影响杂散光是指进人检测器的处于待测波长光谱带宽范围外的其他波长组分,它是光谱测量中误差的紧要来源。

产生原因有:分光光度计的色散元件、反射镜、透镜及单色器内壁灰尘等。

在分光光度计工作波段边缘波优点,由于单色器透光率、光源辐射强度、检测器灵敏度都较低,杂散光的影响更为显着。

分光光度计注意事项

分光光度计注意事项

分光光度计注意事项第一,仪器操作。

在使用分光光度计之前,需要先熟悉操作步骤和仪器的使用方法。

首先,需要将样品注入较宽的比色皿中,然后将比色皿放入样品室中。

接下来,打开仪器电源并调整仪器零位,即将读数器归零。

调节仪器的光程以及选择合适的波长,然后进行测量。

在操作过程中,需要注意不要用力拧紧比色皿,以免破坏皿底的结构。

第二,选择合适的光源和滤光片。

分光光度计使用的光源有白炽灯、汞灯、钠灯等。

不同的光源在波长范围和光强上有所不同,所以在进行测量前需要根据实际需要选择合适的光源。

同时,还需要根据被测物质的波长选择相应的滤光片,以保证测量的准确性。

第三,消除底线和漂移。

底线是仪器在没有样品时的读数,而漂移是指仪器在测量过程中读数不稳定的现象。

为了消除底线和漂移的影响,需要在使用分光光度计之前进行零位调整和漂移校正。

零位调整是将读数器归零,而漂移校正是在测量过程中定期进行的校正操作。

此外,还可以在测量前采取双光束方式,即同时测量样品和参比物质,以减小底线和漂移的干扰。

第四,正确选择比色皿。

比色皿的质量和光透过性会影响测量结果的准确性。

因此,在进行测量前,需要选择质量好、光透过性好的比色皿,并且在使用前要确保比色皿的清洁度,避免杂质对测量结果的干扰。

第五,注意温度和湿度的影响。

温度和湿度会影响到样品的测量结果,所以在使用分光光度计时,需要注意环境的温湿度,并在测量时进行相应的温度和湿度校正。

综上所述,使用分光光度计时需要注意仪器操作、选择合适的光源和滤光片、消除底线和漂移、正确选择比色皿以及注意温度和湿度的影响。

只有在注意这些方面的同时,才能保证分光光度计的测量结果的准确性和可靠性。

分光光度计使用注意事项

分光光度计使用注意事项

分光光度计使用注意事项分光光度计是一种常用的实验仪器,广泛应用于化学、生物、医药等领域。

使用分光光度计时需要注意以下几个方面:一、仪器的使用1. 仪器的环境要求:分光光度计对环境的稳定性要求较高,应放置在温度、湿度稳定的实验室内,并避免阳光直射。

2. 仪器的接线:在使用之前,要检查仪器的电源线和信号线是否连接稳定,以确保数据的准确性。

3. 仪器的预热:分光光度计在使用之前需要预热一段时间,一般预热时间为15-30分钟,避免因温度变化而影响测量结果。

4. 仪器的光源和检测器:定期检查光源和检测器的工作状态,确保其正常运转。

二、样品的处理1. 样品的浓度选择:在进行测量之前,需要根据样品的特性和目的选择适当的浓度。

过高或过低的浓度都可能会造成测量结果的不准确。

2. 样品的准备:样品的处理应严格按照实验要求,避免污染和混杂,以免影响测量结果的准确性。

3. 样品的容器选择:选择适合的样品容器,避免样品与容器之间的化学反应或光学吸收,影响测量结果的准确性。

三、测量的操作1. 选择适当的波长:在进行测量之前,需要根据样品的特性和目的,选择合适的波长进行测量。

不同的波长具有不同的敏感度和选择性。

2. 仪器的调零:在每次测量之前,需要对仪器进行调零操作,即以纯溶剂或空白样品进行测量,确保测量结果的准确性。

3. 多次重复测量:为了减小随机误差的影响,建议进行多次重复测量,并计算平均值,提高测量结果的可靠性。

4. 避免光路污染:使用分光光度计时,要避免光路污染,如灰尘、污渍等,可定期清洁光路和样品舱,保持仪器的正常工作状态。

四、数据处理1. 数据的记录:在进行测量时,要准确记录每次测量所用的参数和条件,方便后续数据分析和结果确认。

2. 数据的分析:在测量结束后,要对测量得到的数据进行合理的统计和分析,包括计算平均值、标准偏差等,以评价数据的可靠性和结果的准确性。

3. 结果的解释:在得到测量结果后,要根据实验的目的和要求,对结果进行解释和分析,结合实验背景和知识,提出合理的结论。

简述分光光度计的使用注意事项

简述分光光度计的使用注意事项

简述分光光度计的使用注意事项
1、在使用分光光度计时,应按照说明书的要求操作,零位校准等,以免出现操作失误,可能造成误差。

2、光照计记录需要注意保证光度计前部分没有杂质或者产生变色,尤其注意自动校正操作后注意归零,以免夹具造成不准确的记录。

3、噪音的干扰是影响测量准确的另一个因素,故应保持测量环境的安静。

4、使用分光光度计前,应注意检查光度计夹具,检查线性度是否正常,它的夹具的温度是否恒定,夹具的触发部位是否有杂质,以免影响测量准确度。

5、根据实验要求,使用分光光度计时应按照预定范围调整滤光片,或者调整滤光片去符合要求,即可满足实验需求。

6、使用分光光度计时,应放置在室内,防止过大的温度对光度计造成影响。

此外,要留意电源、漏率器等电磁元件,以免光線被强磁场影响造成灵敏度降低。

7、试管的测定应控制在允许的温度范围内,在测过程中应保持光源的恒定。

8、在使用分光光度计时应注意安全,不要让小孩和没有使用经验的人使用,以免造成安全事故。

9、注意分光光度计的护理,应将光度计存放在经过处理的环境,确保材料的清洁,如:探头、镜头、玻璃管采取防尘等方式,以保证夹具完好,维护准确度等。

分光光度计使用注意事项剖析

分光光度计使用注意事项剖析

分光光度计使用注意事项剖析1.校准仪器:在开始使用分光光度计之前,必须进行校准。

校准仪器可以通过使用已知浓度的标准溶液来完成。

校准过程通常包括设置参考光强度为零,调整元件以确保光线正确传输。

2.选择合适的波长:分光光度计可以使用不同波长的光进行测量。

选择适当的波长对于物质的吸光度测量至关重要。

通常,选择使物质吸收峰最大的波长进行测量。

3.准备样品:在测量之前,必须适当准备样品。

溶液应根据实验要求进行稀释或浓缩。

确保样品中没有杂质或颗粒,并且在可测量范围内。

4.处理样品污染:如果样品被污染,可能会导致测量结果不准确。

因此,在测量前应尽量减少样品污染的可能性。

使用清洁的容器和装备,并确保操作区域清洁。

5.透过率测量:在进行透过率测量时,必须注意调整仪器以使光线穿过样品与参考溶液之间的厚度相等。

此外,还需要进行空白测量,以消除样品中的其他物质对测量结果的影响。

6.吸光度测量:在吸光度测量中,需要注意参考溶液的选择。

使用适当的参考溶液可以提高测量结果的准确性。

7.温度控制:在进行测量时,应尽量控制样品和仪器的温度。

温度的变化可能会影响测量结果。

如果需要进行测量的溶液温度较高或较低,可以使用恒温槽或冷却系统进行控制。

8.数据记录和分析:在测量完成后,需要准确记录测量结果,并对数据进行适当的分析。

可以使用适当的公式或标准曲线来计算物质的浓度。

总之,分光光度计的使用需要注意校准仪器、选择合适波长、准备样品、处理样品污染、透过率测量、吸光度测量、温度控制以及数据记录和分析。

遵循这些注意事项可以确保测量结果的准确性和可靠性。

实验室紫外分光光度计使用说明及注意事项

实验室紫外分光光度计使用说明及注意事项

实验室紫外分光光度计使用说明及注意事项一、紫外分光光度计的使用方法及注意事项1.1 准备工作我们需要准备好紫外分光光度计。

在购买时,要选择一款性能稳定、精度高的仪器。

在使用前,还需要对仪器进行校准,以确保测量结果的准确性。

我们还需要准备一些标准溶液,用于后续的实验操作。

1.2 实验操作步骤(1)打开紫外分光光度计的电源,等待仪器自检完成。

(2)根据实验需求,选择合适的波长范围。

通常情况下,我们会选择一个较小的范围,如200-400nm,以便更好地观察样品的变化。

(3)将标准溶液倒入比色皿中,然后将比色皿放入紫外分光光度计的样品室中。

注意不要让比色皿中的溶液溢出。

(4)调整仪器的参数,如增益、狭缝宽度等,以获得最佳的测量结果。

(5)等待仪器显示稳定的读数后,记录下测量值。

这个数值就是样品在该波长下的吸光度。

(6)重复上述操作,分别测量不同波长的吸光度值。

根据实验需求,计算出样品的总吸光度。

1.3 注意事项(1)在使用紫外分光光度计时,要注意保护眼睛。

因为该仪器会产生较强的紫外线辐射,长时间直接观察可能会对眼睛造成伤害。

因此,在操作过程中,要佩戴防护眼镜。

(2)在测量过程中,要确保比色皿中的溶液不会溢出。

如果发现溶液有溢出的现象,要及时停止实验,避免影响测量结果和仪器的使用寿命。

(3)在调整仪器参数时,要根据实际需求进行调整。

不同的样品可能需要不同的参数设置才能获得准确的测量结果。

因此,在操作过程中,要灵活运用各种参数设置方法,以便更好地满足实验需求。

二、紫外分光光度计的应用领域及发展前景紫外分光光度计作为一种重要的分析仪器,广泛应用于生物化学、环境监测、食品检测等领域。

随着科学技术的发展,紫外分光光度计在更多领域的应用也将得到拓展。

例如,在药物研发过程中,紫外分光光度计可以用于测定药物的吸收光谱,从而为药物的设计提供重要依据;在新材料研究中,紫外分光光度计可以帮助研究人员了解材料的电子结构和能带结构等信息。

分光光度计使用注意事项讲解

分光光度计使用注意事项讲解

分光光度计使用注意事项讲解一、前言分光光度计是化学分析实验室中常用的仪器,对于分析人员来说,使用分光光度计需要注意的细节非常多。

本文将重点介绍分光光度计使用的注意事项,以便更好地保证分析实验的准确性和可靠性。

二、使用前准备1. 分光光度计使用前需要校准:分光光度计的准确性直接影响到分析结果的正确性。

使用前需要进行仪器的自检,校准波长测试及样品测试等步骤,确保仪器处于正常的工作状态。

2. 样品的制备:样品的制备是分析的前提条件,正确的样品制备可以提高分析的准确性。

分光光度计样品的制备包括:溶液的配制、调节溶解度、滤液等处理。

3. 储备溶液:根据实际分析需要,准备好所需的储备溶液,以便添加到样品中进行分析。

三、正确使用方法1. 波长选择:在进行分析前,应选择合适的波长,并安装相应的滤光片。

波长选择要根据样品吸收的特征波长来选择,以提高测量的准确性。

2. 操作步骤:在样品加入分光光度计前,需要将仪器温度调节至适宜的实验室温度。

加入样品前,需要先清洗样品皿,并使用适当的方法避免空气污染。

在进行试验时,需要按照操作程序和配制的溶液比例严格进行操作。

3. 操作环境:分光光度计对环境的影响非常敏感,正确的使用方法应在暗室内操作。

同时,需要注意电磁干扰和振动等因素对实验的影响。

4. 样品存储:完成实验后,应及时清洗样品皿,清除使用的溶液。

对于需要再次使用的样品,存储时需要滴加一定的抗氧化剂,以避免样品的变质。

四、常见问题及解决方法1. 如何解决背景信号过高的问题?可以考虑使用更为纯净的溶剂或更换新的滤光片。

可能是因为偏移或者进行样品时移动导致的。

可以通过重新校准和重新下一组样品得到更为准确的结果。

3. 如何进行质量控制?可以定期对标准溶液或样品进行测试,以确保分析结果的准确性。

五、总结分光光度计在化学分析中发挥着重要的作用,准确使用分光光度计需要注意许多细节,校准、准备样品、操作步骤、操作环境以及样品的储存都需要非常谨慎。

可见分光光度计使用注意事项

可见分光光度计使用注意事项

可见分光光度计使用注意事项可见分光光度计使用注意事项一、前言可见分光光度计是一种常用的实验室仪器,广泛应用于生物化学、环境监测、食品检测等领域。

然而,在使用可见分光光度计时,需要注意一些细节问题,以确保实验结果的准确性和仪器的安全性。

本文将详细介绍可见分光光度计的使用注意事项。

二、安全操作1. 仪器放置:在操作可见分光光度计时,应将其放置在平稳的台面上,并且保持干燥和清洁。

2. 电源连接:在连接电源时,应先检查电源线是否完好无损,并确认电压是否与仪器要求相符。

3. 充电:如有需要,应在规定时间内对仪器进行充电,并避免过度放电。

4. 清洗:在进行样品测试前,必须彻底清洗样品室和配件。

同时,在使用过程中也要经常清洗样品室和配件。

5. 防护措施:在操作过程中,应戴上手套和口罩等防护用具以避免化学药品对身体造成伤害。

同时,在不使用时,也要将仪器关闭并拔掉电源。

三、样品处理1. 样品准备:在进行样品测试前,应先准备好样品,并严格按照操作手册中的要求进行样品处理。

同时,在进行不同样品测试时,应更换不同的比色皿和配件。

2. 样品浓度:在进行样品测试时,应根据实验要求调整好样品浓度,并保证每个比色皿中的样品浓度相同。

3. 样品体积:在进行可见分光光度计测试时,应确保每个比色皿中的样品体积相同,并避免出现泡沫和气泡等情况。

4. 操作顺序:在进行多个不同测试时,应按照操作手册中规定的顺序依次进行,以避免污染和误差。

四、仪器操作1. 仪器开机:在开机前,应检查所有配件是否安装正确,并确认所有参数设置是否正确。

同时,在开机后,也要及时检查仪器状态并做好记录。

2. 光谱扫描:在进行光谱扫描前,应先根据实验要求设置好参数,并确认所有配件是否安装正确。

同时,在扫描过程中也要注意记录扫描时间和结果。

3. 数据处理:在进行数据处理时,应根据实验要求选择合适的方法,并确保数据的准确性和可靠性。

4. 仪器维护:在使用完成后,应对仪器进行彻底清洗和消毒,并及时更换配件和耗材。

分光光度计使用注意事项讲解

分光光度计使用注意事项讲解

分光光度计的使用一.使用及维护1.安装环境1.1温度要求:装在不受阳光直接曝晒的房间;最好装空调,使室温维持在(20±2℃);仪器附近不应有高温的暖气管或其它电热器具;仪器后面板与墙之间应留一定空间。

1.2湿度要求:水蒸气在(1 350~1 450)nm和(1 800~1 950)nm两个波长区域内有光吸收,会严重干扰测定。

潮湿会导致分光器反射膜层斑剥、脱落等。

故相对湿度最好保持在(40~75)%。

高档紫外-可见-近红外分光光度计要用高纯氮气冲洗。

干燥筒内的变色硅胶应及时更换。

1.3防震、防尘、防腐和防电磁干扰:2.光源灯2.1拿灯时不要碰窗口,以免手上的油污经紫外照射后,形成结痕难以去掉.倘若不小心而碰触,应及时用无水乙醇抹擦干净。

2.2 灯有寿命,要节约使用.但工作间歇时间短,不要关灯和停机.2.3 在灯虽然能点亮,但不稳定或强度大大减弱而影响测量时,就应更换新灯.2.4应待灯冷却后,再重新启动.启动后预热15-30min才能读数.2.5不要用眼睛直视灯,因为紫外辐射会损伤人的眼睛。

3. 单色器3.1单色器是仪器的心脏部分.不要轻易装、拆,也不要去摸触镜面.3.2 平时要保持内部干燥,及时更换干燥剂,以防止色散元件和反射镜受潮而发霉,测定挥发样品必须使用密封吸收池,以免样品蒸气进入单色器,腐蚀反射镜、透镜及色散元件的镜面.3.3 如果选定波长和狭缝宽度是用旋钮,则要按说明书规定的方向转动到欲测的位置,切勿来回转动,以防回衡误差.4. 样品室4.1 样品室是存放吸收池的地方,防止样品的交叉污染,决不可将样品留在样品室中过夜.4.2 吸收池的光学面一定要维护好,不能用刷子刷.否则光学面发毛会增加散射而影响测定准确度.保护吸收池最重要的一条是使用后及时清洗,否则留下液痕,日后再洗,事倍功半.用完的吸收池可放在中性肥皂水中(将十二烷基硫酸钠用蒸馏水配制成透明的稀溶液),或放在8 mol/l盐酸加45%乙醇的等量混合液中浸泡,然后用自来水冲洗,再用蒸馏水洗净,放在无灰尘的地方凉干备用.如果急于使用,可在真空中抽干.但不要用热吹风吹干。

分光光度计的使用有哪些注意事项

分光光度计的使用有哪些注意事项

分光光度计的使用有哪些注意事项分光光度计是一种用于测量物质溶液中吸收光的仪器。

它广泛应用于化学、生物、药学等领域中的定量分析和质量控制实验。

在使用分光光度计时,需要注意以下几个方面:1. 校准仪器:在开始使用分光光度计之前,应该首先校准仪器。

校准可以保证仪器的准确性和稳定性。

通常,校准过程涉及使用标准溶液进行测量,并根据测量结果调整仪器的设置。

校准应该定期进行,以确保测量结果的准确性。

2. 选择合适的波长:分光光度计可以在不同的波长下进行测量。

在选择波长时,需要根据待测物质的吸收峰位选择合适的波长。

如果不清楚待测物质的吸收峰位,可以通过扫描整个波长范围来确定最佳测量波长。

3. 控制样品的浓度:样品的浓度对于测量结果的准确性至关重要。

如果样品浓度过高或过低,可能会导致测量结果超出仪器的线性范围,从而影响测量的准确性。

因此,在进行测量之前,应该根据待测物质的浓度范围选择合适的稀释倍数,以确保测量结果在仪器的线性范围内。

4. 使用适当的比色皿:分光光度计通常使用玻璃或塑料比色皿来容纳样品。

在选择比色皿时,需要考虑样品的性质和测量要求。

对于有机物或有色样品,应该选择透明的玻璃比色皿;对于无机物或无色样品,可以选择塑料比色皿。

此外,比色皿应该干净,没有污渍或划痕,以免影响测量结果。

5. 避免干扰物质:在测量过程中,可能会存在其他物质的干扰。

例如,溶剂的吸收、杂质的干扰等。

为了减小这些干扰,可以采取一些措施,如选择合适的背景溶液、对比样品和参比样品等。

6. 温度控制:温度对于某些化学反应的速率和物质的吸收性质有很大影响。

因此,在进行测量时,应尽量控制样品的温度稳定。

可以使用恒温槽或温度控制装置来控制样品的温度。

7. 注意光路的清洁:光度计的光路应该保持干净和清洁,以避免灰尘、污渍或其他杂质的干扰。

在测量之前,应该检查并清洁光路,确保光线的传输和接收的准确性。

8. 合理处理数据:在测量结束后,应该合理处理测量数据。

分光光度计注意事项有哪些

分光光度计注意事项有哪些

分光光度计注意事项有哪些1.仪器的校准:在使用分光光度计之前,必须确保仪器已经进行了校准。

仪器的校准通常包括波长校准和零点校准。

波长校准是通过使用已知浓度的标准溶液对不同波长下的吸光度进行校正。

零点校准是将光级挡光器设置为零点,以保证仪器测量的准确性。

2.样品的制备:在进行吸光度测量前,需要将样品制备成透明、一致性的溶液。

样品的制备过程中需要注意溶液的稳定性,避免在溶解过程中产生气泡或颗粒物。

3.波长选择:分光光度计可以使用不同波长的光进行测量。

选择合适的波长可以提高测量的准确性。

通常情况下,选择样品吸光度较高的波长进行测量可以获得较好的结果。

4.样品浓度的选择:样品的浓度选择也会对测量结果产生影响。

如果样品的吸光度过低,可能无法准确测量;如果吸光度过高,可能会超出仪器的检测范围。

在选择样品浓度时,需要根据具体的实验要求和仪器的测量范围进行调整。

5.噪声控制:分光光度计测量过程中可能会产生各种噪声,如电子噪声、背景噪声等。

为了提高测量结果的准确性,需要在测量前检查和排除噪声源,并使用适当的滤光器或背景校正技术来降低噪声。

6.注意灵敏度:分光光度计的灵敏度通常由仪器的检测限确定。

在进行测量时,需要根据样品的吸光度选择合适的光程和光级挡光器,以确保测量结果在仪器的检测限范围内。

7.操作规范:使用分光光度计时需要按照仪器的操作手册进行操作,并遵守相关的安全规定。

在操作过程中需要注意正确控制仪器的开关、旋钮和按钮,避免对仪器造成损坏。

8.数据记录和结果分析:在进行测量时,需要及时记录测量数据,并进行适当的结果分析。

可以使用适当的软件工具进行数据记录和分析,以提高分析结果的准确性和可靠性。

9.仪器的维护保养:使用分光光度计后应及时对仪器进行清洁和维护。

保持仪器的清洁可以提高仪器的使用寿命和测量的准确性。

总之,使用分光光度计需要仔细操作,并遵循仪器的使用说明和相关的实验规范。

合理使用分光光度计可以确保实验结果的准确性和可靠性,进一步提高实验的效率和质量。

分光光度计的注意事项

分光光度计的注意事项

分光光度计的注意事项1.仪器操作前,应先查看仪器的使用说明书,了解仪器的基本原理、操作步骤和注意事项。

2.在使用前应检查仪器的电源是否正常,仪器的线缆是否连接牢固,以免因电源或连接不良导致仪器无法正常工作。

3.在操作时,应使用干净的实验台和操作环境,以避免灰尘、污染物等杂质对实验结果的影响。

4.分光光度计通常使用紫外光、可见光或红外光进行测量,因此在操作时应避免直接接触光源,以免对眼睛造成损伤。

在调节光源强度时,应逐渐增加或减小,避免突然的强光刺激。

5.在进行测量时,应选择合适的光束直径,以确保样品被均匀照射。

需要注意的是,不同光束直径下的吸光度值可能会有所不同,因此在不同实验条件下进行比较时应进行校正。

6.在选择滤光片时,应根据不同实验需要选择合适的波长范围和透过率。

在更换滤光片时,应用干净的纸张或手套来避免指纹或灰尘等附着在滤光片上。

7.在进行测量之前,应先进行基准校准操作。

对于可见光测量,常常会使用一块透明样品或试剂作为参比。

校准操作可以使仪器进行零点校正,提高测量的准确性。

8. 在进行样品测量时,应注意样品的 placement。

样品应放置在光束完全穿过的位置,避免遮挡或杂质对测量结果的影响。

同时,样品的形态和波长的选择也会影响测量结果,应根据实验需要选择合适的条件。

9.在测量过程中,应保持样品室的温度和湿度稳定,以避免环境条件的变化对测量结果的影响。

尤其是对于温度敏感的样品,应控制好样品和仪器所处的温度。

10.测量完毕后,应按照仪器的要求进行仪器的关闭和清洁。

尽量避免使用有腐蚀性的溶剂来清洗仪器,以免对仪器造成损坏。

总之,使用分光光度计时,需要了解仪器的工作原理和操作步骤,保持仪器的干净和稳定的环境,注意样品的放置和波长的选择,进行基准校准和仪器关闭与清洁。

只有正确操作和维护仪器,才能获得准确可靠的测量结果。

分光光度计的正确使用方法和注意事项

分光光度计的正确使用方法和注意事项

分光光度计的正确使用方法和注意事项
分光光度计是用于测定物质浓度的一种仪器,以下是正确使用方
法和注意事项:
1. 确保光谱仪处于正确的工作状态。

检查其光源和检测器,确
保它们都正常工作。

检查设备是否校准和校准是否最近发生。

校准可
以在安装新设备或改变覆盖物后进行。

2. 根据设备的说明书,准确设置测量参数。

这包括所用的波长,时间常数,范围和分辨率。

确保所有设置均与分析所需的数据相匹配。

3. 使用适当的载体将测试样品溶解,并用毛细管将其放入样品室。

注意,花了很多时间将样品处理干净,否则可能会破坏设备。

4. 可以根据需要将样品与其他试剂(如缓冲剂)混合。

确保将混
合物与设备校准曲线匹配,并且可以准确测量浓度。

5. 启动光谱仪并开始数据采集。

确保正确设置起始条件和停止
条件。

多次记录数据以确定其准确性和一致性。

6. 分析数据并报告结果。

注意事项:
1. 使用前了解设备,仔细阅读仪器的操作手册。

2. 在使用前反复清洗仪器,以确保测试结果的准确性和一致性。

避免任何外部环境的干扰。

3. 避免在非正常环境下使用仪器,例如在温度或湿度极高或极
低的地方。

4. 对于特定的分析项目,需要从校准曲线等数据中确定合适的
范围、分辨率等参数。

5. 确保使用具有高纯度的标准溶液以获得准确、可重复的分析
结果。

分光光度计的使用方法以及注意事项

分光光度计的使用方法以及注意事项

分光光度计的使用方法以及注意事项使用方法:1.准备样品:将需要测量的溶液或物质准备好,确保它是均匀的并无悬浮物质。

如果必要,可以通过过滤或离心的方式去除悬浮物。

2.校准仪器:打开分光光度计并进行校准。

这可以通过校准溶剂或标准物质进行,从而获得正确的基准值。

3.设置光程:根据实验目的,选择合适的光程。

光程是指光通过样品的距离,通常以毫米为单位。

4.设置波长:选择想要测量的波长。

分光光度计可以在可见光至紫外光范围内进行测量,根据样品需要选择适当的波长。

5.测量样品:将样品放置在光程区域,并将光源通过样品。

记录下通过样品的光的强度数据,可以使用显示器或计算机进行记录。

6.分析数据:使用测量得到的数据进行进一步的分析。

可以根据数据计算出物质的浓度或进行光谱扫描。

注意事项:1.保持仪器干净:分光光度计是非常精密的仪器,所以需要保持它的干净和整洁。

使用柔软的纸巾或净化棉轻轻擦拭仪器的外表,并避免使用粉尘较多的环境中进行操作。

2.维护波长校准:定期校准分光光度计的波长,以保证测量结果的准确度。

校准可以使用标准物质或校准溶剂进行,按照仪器操作手册中的方法进行校准。

3.避免反射和散射:在测量样品时,避免外部光源的反射和样品本身的散射对结果产生干扰。

可以使用黑色容器或覆盖物来最小化这些干扰。

4.注意样品浓度:在测量样品时,确保样品的浓度在仪器量程内。

如果样品过于稀释或过于浓缩,可能会导致无法准确测量或出现非线性响应。

5.光程保持稳定:对于相同的实验,保持相同的光程以保证结果的可比性。

使用恒温仪器或室温范围内进行测量可以避免由于温度变化引起的光程变化。

分光光度计使用的注意事项

分光光度计使用的注意事项

分光光度计使用的注意事项
使用分光光度计时,需要注意以下几点:
1. 校准:在开始使用前,确保对分光光度计进行正确的校准。

校准可以通过使用标准溶液进行比较测量来完成。

2. 设置波长:根据需要测量的样品的特性,选择合适的波长进行测量。

确保所选波长与样品特性相匹配。

3. 样品准备:根据测量要求,准备适当的样品。

样品应该被放置在适当的试管或样品池中,以确保正确位置。

4. 混合液注意事项:如果你在测量过程中需要使用混合液,请仔细读取说明书并按照正确的比例混合。

错误的混合比例可能会导致测量结果不准确。

5. 尽量避免干扰:避免使用与样品相反的波长。

确保光路中没有杂质或干扰物质。

6. 光切断:在不使用分光光度计时,要将它的光源切断,以延长灯泡的使用寿命。

7. 数据记录:当完成测量后,要准确记录测量结果。

这样可以方便后续的比较和分析。

8. 仔细清洁:使用后,要正确清洁分光光度计以防止样品残留。

请按照生产商的清洁指南进行操作。

最后,使用分光光度计时,要仔细阅读分光光度计的操作手册,并根据说明进行操作。

如果有任何疑问,最好咨询相关专业人士的建议。

分光光度计使用注意事项

分光光度计使用注意事项

分光光度计使用注意事项
1.做样前应先开机预热15min。

2.使用前检查波长是否在710nm处,校正好仪器在进行做样
3.在使用比色皿做样时,需用被测溶液清洗三次,将溶液倒至比色皿3∕4处,
方可做样
4.比色皿必须保持清洁,避免用手触碰透光面,比色皿置于分光光度计前应用
镜头纸擦拭干净以免造成零点漂移及腐蚀仪器
5.清洗比色皿时应用10%的稀硫酸浸泡一会,切忌用去污粉或洗衣粉清洗
6.为确保仪器稳定工作,在电源电压波动较大的地方,建议用户使用交流稳定
电源
7.当仪器停止工作时,应关闭电源开关,切断电源
8.每次使用结束后,应仔细检查样品室内是否有溶液溢出,必须随时用滤纸吸

9.停止工作时,请用防尘罩罩住仪器,并在罩内放置防潮剂,以免仪器积灰,
沾污和受潮清洁仪器前,应先切断电源,拔去电源线使用沾水的软布擦拭仪器外壳,切勿用有机溶剂
10.经常检查仪器背部散热孔,保持空气通畅
11.钨卤灯有使用寿命,使用较长时间后,会变暗,烧毁,必须更换
12.如需更换钨卤灯,需专业人员更换并调试。

分光光度计使用注意事项有哪些

分光光度计使用注意事项有哪些

分光光度计使用注意事项有哪些以分光光度计使用注意事项为题,我们将详细介绍分光光度计的使用注意事项,帮助读者正确操作和维护分光光度计。

一、仪器的使用前准备在使用分光光度计之前,首先需要检查仪器的状态是否正常。

包括检查光源、光栅、检测器等部件是否完好,并确保仪器的电源供应稳定。

另外,还需要检查分光光度计的配件和耗材是否齐全,如比色皿、试剂、标准曲线等。

二、仪器的操作步骤1. 打开仪器电源并预热在打开仪器电源后,需要进行预热操作。

根据仪器的型号和要求,一般预热时间为15-30分钟。

预热完成后,可以开始进行后续的操作。

2. 设置测量参数根据实际需要,设置好测量参数,包括波长范围、波长间隔、积分时间等。

不同的样品和实验要求会有不同的参数设置,需要根据具体情况进行调整。

3. 校准仪器为了确保测量结果的准确性,需要定期对分光光度计进行校准。

校准可以包括零点校准和波长校准。

零点校准是将样品槽中的试剂或溶剂作为零点,调整光强。

波长校准是调整仪器的波长刻度,使其与标准波长一致。

4. 放入样品将待测样品放入比色皿中,并将比色皿放入样品槽中。

注意避免比色皿的污染和损坏,以及样品的溢出。

5. 开始测量根据设置好的测量参数,点击开始测量按钮,仪器会自动进行测量。

在测量过程中,可以观察到光谱曲线的变化,并记录下相应的吸光度数值。

6. 数据处理根据实验的需要,可以通过仪器自带的软件或其他数据处理软件对测量结果进行处理和分析。

常见的数据处理包括绘制标准曲线、计算样品浓度等。

三、仪器的日常维护1. 清洁仪器定期清洁仪器的外部和内部部件,避免灰尘、污染物等对仪器造成影响。

可以使用干净的软布擦拭仪器表面,避免使用有腐蚀性的溶剂。

2. 定期校准定期对分光光度计进行校准,以确保测量结果的准确性和稳定性。

校准的频率可以根据仪器的使用情况和要求进行调整。

3. 保养光源光源是分光光度计的核心部件,需要定期进行保养和更换。

特别是氙灯等易损耗的光源,应根据使用寿命进行更换,避免影响测量结果。

  1. 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
  2. 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
  3. 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。

分光光度计的使用一.使用及维护1.安装环境1.1温度要求:装在不受阳光直接曝晒的房间;最好装空调,使室温维持在(20±2℃);仪器附近不应有高温的暖气管或其它电热器具;仪器后面板与墙之间应留一定空间。

1.2湿度要求:水蒸气在(1 350~1 450)nm和(1 800~1 950)nm两个波长区域内有光吸收,会严重干扰测定。

潮湿会导致分光器反射膜层斑剥、脱落等。

故相对湿度最好保持在(40~75)%。

高档紫外-可见-近红外分光光度计要用高纯氮气冲洗。

干燥筒内的变色硅胶应及时更换。

1.3防震、防尘、防腐和防电磁干扰:2.光源灯2.1拿灯时不要碰窗口,以免手上的油污经紫外照射后,形成结痕难以去掉.倘若不小心而碰触,应及时用无水乙醇抹擦干净。

2.2 灯有寿命,要节约使用.但工作间歇时间短,不要关灯和停机.2.3 在灯虽然能点亮,但不稳定或强度大大减弱而影响测量时,就应更换新灯.2.4应待灯冷却后,再重新启动.启动后预热15-30min才能读数.2.5不要用眼睛直视灯,因为紫外辐射会损伤人的眼睛。

3. 单色器3.1单色器是仪器的心脏部分.不要轻易装、拆,也不要去摸触镜面.3.2 平时要保持内部干燥,及时更换干燥剂,以防止色散元件和反射镜受潮而发霉,测定挥发样品必须使用密封吸收池,以免样品蒸气进入单色器,腐蚀反射镜、透镜及色散元件的镜面.3.3 如果选定波长和狭缝宽度是用旋钮,则要按说明书规定的方向转动到欲测的位置,切勿来回转动,以防回衡误差.4. 样品室4.1 样品室是存放吸收池的地方,防止样品的交叉污染,决不可将样品留在样品室中过夜.4.2 吸收池的光学面一定要维护好,不能用刷子刷.否则光学面发毛会增加散射而影响测定准确度.保护吸收池最重要的一条是使用后及时清洗,否则留下液痕,日后再洗,事倍功半.用完的吸收池可放在中性肥皂水中(将十二烷基硫酸钠用蒸馏水配制成透明的稀溶液),或放在8 mol/l盐酸加45%乙醇的等量混合液中浸泡,然后用自来水冲洗,再用蒸馏水洗净,放在无灰尘的地方凉干备用.如果急于使用,可在真空中抽干.但不要用热吹风吹干。

4.3 对于盛过蛋白质和核酸的样品池最好不要用市售的烷基磺化型的清洗剂,因为它们有类似蛋白质的吸收光谱,清洗不慎会引入误差,所以此时最好使用非离子型清洗剂(如triton)浸泡.如果吸收池实在太脏,质量好的吸收池可放在洗液中稍加处理,但要随即取出冲洗,不宜浸泡过长的时间。

洗液必须冲洗干净,因为它也有类似蛋白质和核酸的吸收光谱。

4.4 为了精确的定量测定,吸收池应事先进行校正.校正的办法是在池中加入欲测浓度的溶液,读出各吸收池的吸光度.以一个池为标准读出其他各池的吸光度.然后在读取样品吸光度后,再予校正.市售常规光径(10mm)的吸收池一般匹配到0.Olmm.为了某种工作的需要(如差示光谱测定)必须寻找匹配池时,可在池中装入高吸收的样品,读数后加以挑选。

一台仪器上的比色皿不得与其它仪器上的比色皿单个调换。

比色皿每次用完后应立即用蒸馏水洗净,用软布或擦镜纸擦干,放于比色皿盒内。

5. 倾注溶液时要小心,不要弄湿外壁.如不慎弄湿,可用滤纸轻轻吸干后,再用绸布或擦镜纸擦净(最好用白绸,擦镜纸常有纸毛)。

6. 检测器:检测器室要保持干燥,以保证绝缘良好.在使用光电倍增管时,最重要的一点是通电后避免不必要的曝光。

在仪器的光电倍增管的前面(通常在样品室的上方)常有暗闸(微动开关),这是光电倍增管的保护装置,用来保护其在开启样品室盖时,不受日光照射.否则通电后的光电倍增管,受强光照射,会造成永久性的损坏,或至少因“疲劳"而降低灵敏度。

7.硫化铅光电池忌受紫外线照射,否则会降低其灵敏度。

8.仪器用完后应用罩布盖好,以防落入灰尘。

9.仪器应每半年左右或搬动后应检查波长精度等,以确保仪器性能正常。

二.分光光度计的性能检查1.波长范围指分光光度计上限波长和下限波长之间的工作范围,在这个范围内的所有波长应具有足够的能量进行工作.这种检测波长极限是与光源、单色器及检测器的光谱响应特性有关的.如波长范围为190-900nm的紫外-可见分光光度计必须具备氘灯和碘钨灯两个光源,而只有碘钨灯的分光光度计的工作范围,在短波侧不能低于340nm.有时在说明书规定的工作波长范围的两端由于缺乏足够的能量,不能正常工作.如在两端表现为100%T 或A设定困难,或基线在两端不平直等,就需要检查可能发生的原因,如光源位置需要调整、光源需要更换、样品室窗口有溶液污染、光路需要调试、检测器疲劳等等。

2.波长准确度波长准确度(有时被误称为波长精度)是指仪器波长指示器上所指示的波长值与仪器给出的实际波长值之间的符合程度,可用二者之差(即波长误差)来衡量其准确性.如某分光光度计的波长准确度为±1.Onm,那么测定253.65nm汞灯辉线的最大能量应落在252.65nm和254.65nm之间.波长准确度对分光光度测定是有很大影响的,因为任何分光光度定量分析工作都是依靠在一定波长下测量吸光度值 (此波长大都选在样品的吸收峰位)来完成的.如波长有误差,则由于峰两旁陡坡处吸光度值随波长的变化极为迅速,会造成明显的吸光度误差.如在定性分析时单纯依靠样品的吸收峰来确定波长,可能会造成错误的判断.在有机物质的结构分析中,需要研究吸收峰波长位置与物质结构的关系.如仪器的波长误差较大,显然会影响结构分析的正确性.波长准确度对于窄带分析是非常重要的,但对于宽吸收带则影响不大.常用的检查方法如下:2.1.用氘灯(或氢灯)的辉线检查氘灯(或氢灯)为紫外-可见分光光度计必备的光源,因此用它来标定波长最为方便.氘灯虽然在紫外区发射连续光谐,但在可见区有一条辉线,656.1nm(氢灯有两条:656.3nm和486.1nm).待仪器和氘灯稳定后,选择合适的测定条件:单光束、纵坐标用能量表示、狭缝尽可能小、响应尽可能快、扫描速度慢、图纸速度快.在上述波长附近扫描,或按说明书规定的波长旋转方向慢慢旋转波长钮,读出结果显示最大能量的波长.如果超出允许波长误差,就需进行校正.2.2 用汞灯的辉线检查上述用氘灯检查波长只能在少数波长点进行,但对仪器作精密的波长校正,应在整个波长范围的不同区域进行.在紫外-可见区,理想的波长校正基准工具是低压汞灯.低压汞灯发射不连续光谐(线光谐).在紫外-可见区有很多辉线可供仪器波长校正.方法与用氘灯检查相同.作为紫外-可见分光光度计任选附件的汞笔灯是进行波长准确度检查的最合适的工具.汞笔灯体积小,携带方便,便于在分光光度计中安放. 2.3 用标准玻璃滤光片检查对于低档分光光度计(谱带半宽度在10nm左右)只需用标准玻璃滤光片来检查.如钕滤光片,它的最大吸收峰在585nm.只要把滤光片放在样品室中,按操作程序扫描吸收光谱即可.如果用氧化钬滤光片来检查,则效果会更好.氧化钬滤光片最大吸收波长241.5nm、360.8nm、536.4nm.2.4 用样品溶液的吸收光谱检查-些样品的吸收光谐,如氯化钬溶液(最大吸收波长为241.1nm、333.4nm、361.5nm)、硫酸钴、硫酸铜、铬酸钾、重铬酸钾溶液都可用作波长校正的参比.但用样品溶液校正不及用光源的谱线校正精确.仪器引起波长误差的原因大致如下:工作环境温度变化太大、单色器受震后引起色散元件移位、波长扫描系统机械零件磨损、仪器积尘太多使转动受阻、光谱记录纸受潮伸缩变形等.3. 波长重复性波长重复性是定性分析的重要因素,由于波长位置不能准确重复,就不能准确判定吸收峰的位置,甚至引起判断错误.用一个已知样品吸收峰或灯的辉线作标准,在相同条件下多次重复读取峰位.计算每次观察的波长对平均值的偏差,这些偏差的平均值就是此分光光度计的波长重复性.引起波长重复性下降的原因与引起波长误差的原因相似,当然电子系统工作不稳定也是原因之-。

4. 谱带半宽度谱带半宽度又称有效带宽,这里是指离开单色器的出射狭缝的辐射光谱的峰高的一半处的谱带宽度.光源辉线或锐的吸收光谱都可用于分光光度计谱带半宽度的检查.谱带半宽度这个性能指标直接影响样品测量的准确度.使用2nm谱带半宽度的检测效果显然要比20nm好得多.如使用微量池,必须使用谱带半宽度小的分光光度计,否则从出射狭缝来的光斑会超过样品池的宽度,而给测定带来误差.分光光度计谱带半宽度不符合性能指标常常是由于单色器中狭缝系统或狭缝伺服系统的故障,应请专业人员协助修理。

5. 杂散光杂散光是指由检测器接收到的任何由仪器单色器分离的光谱范围以外的辐射.杂散光可以分成两种形式,一种是杂散光波长与测定波长相同.它是由于测定波长因种种原因偏离正常光路,在不通过样品的情况下,直接射到检测器上.引起这种杂散光的原因是由于光学、机械零件(包括吸收池或样品本身)的反射和散射所引起的.这种杂散光可以通过一个不透明的样品来检查.当发现放在样品池中的不透明样品的透光度不为零时,说明仪器中有上述杂散光存在.但必须注意不要与光度刻尺的零位误差混淆.第二种杂散光是指测定波长以外的偏离正常光路到达检测器的光线,通常由光学系统中的缺陷所引起,如不必要的反射面、光束孔径不匹配、灰尘的散射、光学元件表面被擦伤、不均匀色散等都会降低光线的单色性,使杂散光增加.仪器光学系统设计不良、零件加工不良、位置错移等也是造成杂散光的原因.通常指的是第二种杂散光.杂散光的影响使测量结果偏离比尔定律.当杂散光被样品吸收时,偏离是正的,即观察值大于真实值.当杂散光不被吸收时,偏离是负的、观察值小于真实值.杂散光对吸光度的影响是在吸光度愈大时愈明显.如1%的杂散光强度可以使吸光度从1.000降到O.9629,但可使吸光度从3降到1.963.由于杂散光强度在边缘波段比较大,因此在波长小于220nm进行光谱扫描时,必须小心有无“假吸收峰"出现.原来样品随波长变短而吸收增大,可是由于杂散光在短波时急剧增大,因而使原来逐渐增大的吸光度反而变小,就会出现不应有的“假吸收峰".当被测定的波长的能量降低时,杂散光比例就相应增加.对仪器输出的边缘波长来说,单色器的透光度、光源强度和检测器的灵敏度都是比较低的,这时杂散光影响就更为明显.所以在紫外-可见分光光度计中应该先检查200-220nm、340nm处的杂散光.简便的杂散光测试方法是测定在规定波长下几乎完全不透明的溶液或滤光片的透光度.选择一种材料,它对于边缘波长的光能是完全吸收的,而对中间波长的透光度却相当高.测定这种材料在边缘波长的透光度,直接就反映了杂散光的强度.这种材料称为长、短波截止材料.截止材料的截止性能应尽可能尖锐,溶液截止的尖锐程度比固体好.在测定杂散光时,注意不要把试样室的漏光与仪器的杂散光相混淆.由于漏光而引起的杂光将会随着狭缝宽度的增加而迅速下降.而仪器本身的杂散光并不会因为狭缝的开闭而产生明显的变化.6.分辨率分辨率是指仪器对于紧密相邻的峰可分辨的最小波长间隔,是衡量分光光度计性能的重要指标之一.单色器输出的单色光的光谱纯度、强度及检测器的光谱灵敏度等是影响仪器分辨率的主要因素.分辨率的实际测试方法有许多种,这些方法的原理都是观察可分辨的最小波长间隔,在不同波长范围使用的材料及方法皆不同.造成分辨率下降的原因可能有如下-些。

相关文档
最新文档