9骨髓检验
骨髓涂片检验
骨髓涂片常规检验与应用通过骨髓细胞学检验可了解骨髓造血功能及其病理变化，是血液病诊断、鉴别诊断、疗效观察、判断预后的主要检测手段。
在骨髓细胞学检查过程中，骨髓的取材、涂片、染色的质量可直接影响细胞观察和分析。
骨髓取材不良，再好的检验技术也难以得到正确的诊断；骨髓涂片欠佳，则影响骨髓细胞形态的观察；骨髓涂片染色失真，则会造成骨髓细胞的误判和误诊。
因此，提高骨髓取材、涂片、染色质量是骨髓细胞学检查的关键。
1 取材[1～5]1.1 骨髓取材的适应证凡不明原因的贫血、血小板减少、发热、多发性骨髓瘤、白血病样血象、恶病质以及肝、脾、淋巴结肿大，血涂片发现幼稚细胞、可疑细胞以及血细胞的单项或多项原因不明的增多或减少时，均可进行骨髓检查。
1.2 骨髓取材的部位成人以胸骨、髂骨、脊椎骨等扁平骨采集，一般认为胸骨采集标本最佳，髂骨和脊椎骨次之，小儿多以胸骨采集。
1.3 骨髓穿刺①选择好骨髓穿刺部位，让患者处于有利的穿刺姿势。
②消毒穿刺区皮肤，解开穿刺包，戴无菌手套，检查穿刺包器械，铺无菌孔巾。
③在穿刺点用1%普鲁卡因作皮肤、皮下、骨膜麻醉。
④将骨髓穿刺针的固定器定在离针尖1～1.5 cm处，用左手拇指和食指将穿刺点两旁的皮肤拉紧并固定。
以右手持针向骨面垂直刺入，当针头接触骨质后，将穿刺针左右转动，缓缓钻入骨质，当感到阻力减少且穿刺针已固定在骨内直立不倒时为止。
⑤拔出针芯，接上无菌干燥的10 ml或20 ml注射器，适当用力抽吸，即有少量红色骨髓液进入注射器。
常规检查吸取0.2 ml左右骨髓液。
若抽不出骨髓液，可放回针心，稍加旋转或继续钻入少许，再行抽吸。
⑥取得骨髓液后，将注射器及穿刺针迅速拔出。
在穿刺位置盖以消毒纱布，按压1～2 min后，胶布固定30～40 min，并让患者静卧休息，有出血倾向者，让患者静卧到确实止血为止。
固定纱布24 h后，如无异常可去除。
1.4 骨髓取材量一般骨髓常规检查时，抽取骨髓液0.2 ml。
骨髓细胞形态学检验-精品医学课件
标本采集
1.骨髓取材部位
骨髓标本常采用穿刺法吸取，以髂骨首选，也可 选胸骨或棘突等，2岁以下小儿主张用胫骨粗隆穿刺。 穿刺部位不同，细胞的数量和组成有一定差异，病变 呈局灶性分布的疾病差异更明显，故必要时应多部位 取材，以全面了解骨髓的造血情况。
2.骨髓穿刺方法
（1）穿刺部位的选择 骨髓腔中红髓丰富；穿刺部位表
3.骨髓质量保证
（1）无菌穿刺，预防感染。 （2）初诊者于治疗前做骨髓穿刺利于明确 诊断。 （3）动作应缓慢，避免稀释。 （4）多部位穿刺，提高阳性率。
4.干抽
干抽（dry tap）是指非技术原因多次、多部位 穿刺抽不出骨髓液或只抽到少量血液。常见于：
１.原发性和继发性骨髓纤维化症。 ２.骨髓极度增生，细胞过于紧密结实，如白血病 、真性红细胞增多症等。 ３.骨髓增生减低，如再生障碍性贫血。 ４.肿瘤骨髓浸润，包括恶性淋巴瘤、多发性骨髓 瘤、骨髓转移癌。
观察血片
组织化学染色
填写骨髓图文结果报告单 （骨髓细胞特征 血片细胞特征 组化特征 ）
骨髓片存档保存
正常骨髓象条件 正常骨髓象特征
一、正常骨髓象应具备四个条件 1.有核细胞增生活跃。 2.各系、各阶段细胞占有核细胞的比例大致在
正常参考范围内。 3.各系、各阶段细胞形态无明显异常。 4.无特殊病理细胞及血液寄生虫。
表现，可提出检查意见；
可疑性诊断
排除性诊断 形态学描述
骨髓有部分变化或有少量异常细胞,可 能为某种疾病的早期、前期或不典型病 例。提出进一步检查或动态观察； 临床怀疑某种疾病，但骨髓象不支持； 提不出诊断意见，可简要描述骨髓象特 征，临床诊断多属于此种。
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200915410
张三
骨髓细胞形态学检验
骨髓细胞形态学检验
骨髓细胞形态学检验是一种用于评估骨髓细胞形态和功能的实验室检查。
该检验通常通过骨髓穿刺或骨髓活检获取骨髓样本，并在显微镜下观察骨髓细胞的形态、大小、染色性质以及细胞内的包涵体等结构。
这些观察可以帮助医生判断骨髓病变、白血病、贫血等疾病的类型和严重程度。
骨髓细胞形态学检验通常包括以下步骤：
1. 骨髓样本获取：通过骨髓穿刺或骨髓活检获取骨髓细胞样本。
2. 样本处理：将骨髓样本制作成薄片，并进行染色处理，通常使用的染色方法有涂片染色和石蜡切片染色。
3. 细胞观察：在显微镜下观察骨髓细胞的形态、大小、染色性质以及细胞内的包涵体等结构。
4. 细胞计数和分类：根据骨髓细胞的特征，对其进行计数和分类，包括髓细胞、原始髓细胞、幼稚髓细胞和成熟髓细胞等。
5. 异常细胞的识别：识别任何异常的骨髓细胞，例如白血病细胞或恶性淋巴瘤细胞等。
6. 结果分析和报告：将观察到的骨髓细胞形态学特征进行分析，并撰写检验报告，提供给医生进行进一步诊断和治疗。
骨髓细胞形态学检验是一种常用的骨髓疾病诊断方法，能够提供关于骨髓细胞形态和功能的重要信息，对于骨髓病变、白血病、贫血等疾病的诊断和治疗具有重要的临床意义。
骨髓细胞学检验正常值范围
骨髓细胞学检验正常值范围
骨髓细胞学检验是一种用于评估骨髓中细胞形态和数量的检测
方法，通常用于诊断血液病和其他疾病。
骨髓细胞学检验的正常值
范围可以根据不同的细胞类型和参数来确定。
一般来说，骨髓细胞学检验的正常值范围包括以下几个方面：
1. 骨髓细胞比例，正常情况下，骨髓中各种细胞的比例应该在
一定范围内，比如骨髓中成熟的红细胞、粒细胞、单核细胞和巨核
细胞的比例应该符合正常范围。
2. 骨髓细胞数量，正常情况下，骨髓中各种类型的细胞数量也
应该在一定范围内，比如每立方毫米骨髓中成熟的红细胞、粒细胞、单核细胞和巨核细胞的数量应该符合正常范围。
3. 细胞形态，除了数量和比例外，骨髓细胞学检验还需要评估
细胞的形态，包括细胞的大小、形状、核形态等，这些形态特征也
应该符合正常范围。
需要注意的是，不同的实验室和不同的检测方法可能会有所不
同，因此在进行骨髓细胞学检验时，最好参考具体的实验室报告或
专业医生的建议来确定正常值范围。
总的来说，骨髓细胞学检验的正常值范围是一个综合的指标，
需要综合考虑细胞比例、数量和形态等多个方面的指标来进行评估。
如果有任何疑问，建议咨询专业医生以获取更准确的信息。
骨髓检查是什么样?为什么骨穿会有失败的?
骨髓检查是什么样?为什么骨穿会有失败的?骨髓，这个存在于我们体内骨骼中的神秘组织，是我们生命的基石。
它不仅孕育着造血细胞，还承载着无数的免疫细胞。
然而，当我们的骨髓出现问题时，我们如何能够了解它内部的真实情况呢？骨髓检查，这一看似神秘的检查方法，正是帮助我们揭开骨髓面纱的关键工具。
在医学领域，骨髓检查是一种通过抽取骨髓样本，对骨髓细胞进行化验和观察的检查方法。
那么骨髓检查是什么样的？为什么骨穿会有失败的？今天，就让我们一起来了解一下骨髓检查的奥秘。
֢֢骨髓检查是什么样的呢？骨髓检查是一种医学诊断方法，主要用于评估骨髓造血功能、发现恶性肿瘤、感染或遗传性疾病。
这种检查通常分为两种类型：骨髓穿刺和骨髓活检。
①准备工作：在进行骨髓检查前，医生会与患者讨论检查的目的、过程以及可能的风险。
患者需要提供详细的病史和过敏史，以确保检查过程顺利进行。
此外，患者还需要完成一些实验室检查，如血常规和凝血功能等检查。
②骨髓穿刺：骨髓穿刺是一种相对简单的检查方法，通常在局部麻醉下进行。
医生会在患者的髂骨、胸骨或腰椎刺突选择一个合适的部位，然后用穿刺针抽取一小部分骨髓。
这个过程通常持续几分钟，患者可能会感到轻微的酸痛感，但很少出现严重的并发症。
对穿刺标本进行涂片，送至检验科检查。
③骨髓活检：骨髓活检也是在局部麻醉下进行，医生会使用特殊活检穿刺针进入骨髓腔，取出1-2公分左右的骨髓组织，这个过程通常也只有几分钟，患者可能轻微不适，再把骨髓组织置于福尔马林固定液中送到病理科检查。
④检查结果：骨髓检查的结果需要一定的时间才能获得，通常需要几天到一周。
实验室会对骨髓样本进行详细的分析，以评估骨髓的造血功能、细胞形态、细胞数量以及是否存在异常细胞。
这些结果对于诊断骨髓增生异常综合征、白血病、淋巴瘤等疾病至关重要。
骨髓活检优于骨髓穿刺，可全面了解骨髓增生程度，有核细胞密度及其布局，避免骨髓稀释，对骨髓纤维化、毛细胞白血病有确诊作用。
骨髓象检验A
Cabot环
Cabot环 为红细胞内染成紫红色的纤细的大环形或8字形物质，常出现于嗜多色性、点 彩和含H-J小体的红细胞内，其确切来源尚不清楚，有人认为是人工形成的变性蛋白， 也有人认为是残留的纺锤丝或融合的微管。一般很少见到，偶见于铅中毒或恶性贫血 患者血片中，大血小板
7)寄生虫及其他细胞 观察有无寄生虫其他明显异常细胞.
疟原虫
尼曼—皮克细胞
尼曼—皮克细胞特点： 细胞大， 直径20 ～100μm ，有一 个圆形或椭圆形核，呈偏心位，染色质疏松，有1 ～3 个核 仁；胞浆丰富，充满空泡呈泡沫样；酸性磷酸酶染色阴性或 弱阳性。
裂红细胞
指红细胞碎片，包括盔形红细胞等，多见于弥散性血管内凝血、微血管病 性溶血性贫血和心源性溶血性贫血等红细胞破碎综合症；其它常见于化学 中毒、肾功能衰竭、血栓性血小板减少性紫癜。
3)单核细胞系统
占有核细胞的百分比、各阶段细胞的比例, 细胞大小、 形态,核染色质的结构、核仁、核形,胞质量、浆色、颗 粒,有无原单细胞、幼单细胞和棒状小体等.
Auer氏体
奥尔(Auer)氏体：是含于胞浆内的一种被罗氏染色染成红色的棍棒状小体。 形态类似抗酸染色的结核杆菌。一般认为它是嗜天青颗粒融合而成（来自 溶酶体？），髓过氧化物酶，苏丹黑B染色和PAS反应都呈阳性。正常细 胞中见不到，多见于急性白血病时原始、早幼粒细胞和幼稚单核细胞胞浆 中，但决不会出现于淋巴和红细胞中，故对白血病的鉴别有一定价值。
Alder-Reilly异常
Alder-Reilly异常：主要的形态特点是白细胞中（包括嗜中性、嗜酸性粒细胞、单核细 胞和淋巴细胞）胞浆中含有粗大的染成深蓝色的（嗜天青）颗粒，有的压在核上，易 与中毒性颗粒混淆；通常颗粒不多，但仔细观察较易发现。本病为常染色体隐性遗传， 是一种粘多糖代谢障碍性疾病。异常颗粒是由于溶酶体缺乏某些水解酶，造成粘多糖 和神经鞘磷脂堆集，成为可染色的颗粒。
骨髓象检验的原理
骨髓象检验的原理
骨髓象检验是通过观察和分析骨髓细胞在显微镜下的形态特征，来评估骨髓造血功能和骨髓细胞的分化程度和数量。
其原理主要包括以下几个方面：
1. 骨髓制片：首先需要从患者骨髓中获取样本，通常是通过骨髓穿刺或骨髓活检获得。
然后将骨髓样本制作成薄片，通常是通过涂片法或滴片法制作。
2. 样本染色：制片完成后，需要对骨髓样本进行染色。
常用的染色方法有炫苏木-伊红染色法、Wright染色法和Giemsa染色法等。
这些染色方法可以使细胞核和细胞质染上不同的颜色，便于观察和区分。
3. 显微镜观察：染色完成后，将制好的骨髓制片放在显微镜下进行观察。
通过显微镜观察和放大骨髓细胞，可以看到细胞核和细胞质的形态特征，如细胞核形态、细胞质颜色和形态、细胞大小等。
4. 分析和评估：通过观察和分析骨髓细胞的形态特征，可以评估骨髓造血功能的状态和细胞的分化程度。
例如，可以判断骨髓中不同类型细胞的比例是否正常，是否存在异常细胞，以及细胞的成熟度和活跃性等。
总之，骨髓象检验的原理是通过显微镜观察和分析骨髓细胞的形态特征，来评估
骨髓的造血功能和细胞的分化状态和数量。
骨髓细胞学检查
骨髓细胞学检查骨髓细胞学检查应抽取骨髓少量制成薄片;采用骨髓小粒丰富、制片厚薄均匀的涂片,经瑞氏—姬姆萨混合染色后,于显微镜下检查细胞质和量的变化;试剂1)瑞氏染色液：瑞氏染粉18,置洁净干操的研钵内,加甘油,研磨片刻,使瑞氏染粉充分溶解,加甲醇约50ml,继续研磨片刻后,收集上层染液；残余部分再加甲醇50ml研磨：再收集上层染液,重复几次后,用甲醇冲洗研钵,倒入同一瓶内,最后加甲醇至500mi;开始几周应经常振摇染色液;染色液存放的时间越长,染色效果也越佳;此外,研磨时染粉内应先加甘油,、以免染粉在研磨过程中结成块,更易溶解;染粉未经研磨配成的染液不宜用作骨髓片染色;2)姬姆萨浓缩染液：将姬姆萨染粉3．8g放入纯甘油250ml中,置60℃水浴2小时,溶解后力口60℃预热的甲醇250m1混匀,于室温、棕色瓶内保存,配后数天即可使用,可长期保存;3)pH6．5磷酸盐缓冲液：磷酸二氢钾1．5g,磷酸氢二钠1．0g、加蒸馏水到5000ml;最后纠正pH6．5;4)姬姆萨稀释液：取姬姆萨溶液50m1,加pH6．5磷酸盐缓冲液到500ml,混匀;此液为姬姆萨应用液,可直接作涂片复染用;作瑞氏稀释液时,取此液10一20mL加蒸馏水至100ml,混匀即可;操作1．骨髓取材：取材部位有胸骨、棘突、髂骨前嵴或后嵴等;两岁以内小孩最好用胫骨,成人常取髂后上棘,此部位穿刺方便,病人也易接受．穿刺前要求严格消毒,杜绝细菌感染,除穿刺室紫外线消毒和皮肤消毒外,还应注意穿刺包和手套消毒时间有否过期;戴手套要熟练,避免手套接触来消毒物品;穿刺针进入髓腔时常有脱空感,吸取前针筒内应留有1m1左右的空隙,否则髓液很快进入针筒空隙而无法取出;针筒内若有水份也要用消毒纱布擦干,以免溶解细胞;吸液量一般控制在0．2m1左右;因吸量过多,易被外周血稀释;部分病人干抽或吸出量太少时,不要将针头立即拔出,可边抽边调节针头深浅,或边抽边缓慢外移针头,最后将针头内可能残留的髓液尽量推出、制片,以减少病人痛苦;2．涂片：选两块小粒较多、厚薄均匀的骨髓片,自然干燥后在较厚的头端髓膜上写上病人姓名、日期及“BM”标记;加瑞氏染色液8—12滴,用吸球吹吸并使其布满整张涂片,约半分钟后,加姬姆萨稀释液5-10滴,再用吸球吹吸气,使两液充分混匀,若有金黄色油膜出现,染色效果更佳;染色时间一般为10一20分钟,夏天可缩短些、冬天则可延长些;冲洗时应乎放玻片让流水缓慢冲洗;另外,因手拿玻片处可能会有染料残留,应更换手拿位置再予冲洗;染色太淡的涂片,可用姬姆萨稀释液复染3 分钟；着色太深时,可用瑞氏染液滴加于涂片上;立即冲洗即可;各实验室最好能摸索出自己的染色经验,尽量做到一次性染色成功;没有姬姆萨染液的单位,可用蒸馏水加少量天青或美蓝代替,但染色效果没有前者好;染好的涂片要自然干燥,切忌加热烘干,否则细胞退色而影响观察;3．染色选两块小粒较多、厚薄均匀的骨髓片,自然干燥后在较厚的头端髓膜上写上病人姓名、日期及“BM”标记;加瑞氏染色液8—12滴,用吸球吹吸并使其布满整张涂片,约半分钟后,加姬姆萨稀释液5-10滴,再用吸球吹吸气,使两液充分混匀,若有金黄色油膜出现,染色效果更佳;染色时间一般为10一20分钟,夏天可缩短些、冬天则可延长些;冲洗时应乎放玻片让流水缓慢冲洗;另外,因手拿玻片处可能会有染料残留,应更换手拿位置再予冲洗;染色太淡的涂片,可用姬姆萨稀释液复染3分钟；着色太深时,可用瑞氏染液滴加于涂片上;立即冲洗即可;各实验室最好能摸索出自己的染色经验,尽量做到一次性染色成功;没有姬姆萨染液的单位,可用蒸馏水加少量天青或美蓝代替,但染色效果没有前者好;染好的涂片要自然干燥,切忌加热烘干,否则细胞退色而影响观察;分析要点(1)骨髓片观察的内容:1)肉眼观察涂片有无骨髓小粒、脂肪滴制片、染色是否良好;2)低倍镜下观察骨髓增生情况主要分为5级,标本有否稀释,并计数全片的巨核细胞,了解有无特殊异常细胞;3)高倍镜下观察巨核细胞形态及巨核细胞分类计数一般被分类的巨核细胞应不少于25个,并进一步观察低倍镜下看到的可疑细胞;4)油镜下明确在低、高倍镜发现的异常或可疑细胞的性质,并作骨髓细胞分类和全面的细胞形态分析;骨髓细胞分类计数的正常范围较难制定;因为分析骨髓像是以骨髓细胞变化为基础,并结合临床表现和血像的综合性分析,不能只以单一的比例作为是否正常的标准;另外,个体差异、穿刺是否成功和分类部位等,都会影响细胞分类的结果;2正常骨髓主要指标及其分类原则：1．正常骨髓像主要指标：1 骨髓增生程度呈增生活跃;2 有核细胞量中等,小粒内细胞较丰富;3 涂片无脂肪滴,或在中老年者见少量脂肪滴;4 粒、红细胞比例约2—4：1,粒细胞可占50％,淋巴细胞约占20％小儿可高达40％,单核细胞、浆细胞、网状细胞一般＜3％;5 巨核细胞在1．5×3cm2涂片上可找到20—100只;若小于20只,排除因标本稀释原因外,可结合临床考虑巨核细胞减少;产血小板巨核细胞应不少于总巨核细胞的1／3,成按血小板易见到;6 嗜酸性粒细胞小于5％;嗜碱性粒细胞＜1％;7 原始细胞中,原故细胞和原红细胞均小于2％;8 偶尔可见内皮细胞、组织嗜碱细胞、组织嗜酸细胞、成骨细胞、破骨细胞和脂肪细胞等;2．观察骨照片应注意的事项：1 对介于上、下两阶段的同一系细胞,应按划下不划上的原则分类;对分类曲线出现不明原因的畸形分布时,介于上、下阶段的细胞可适当调整其阶段性；2 一般病人的骨髓片中,偶见或为疑似的原始单核细胞、原始淋巴细胞小儿除外及原始浆细胞,可不作报告或归于原始粒细胞中,以减少分类出现的混乱;3 骨髓细胞分类计数不应少于200个,否则分类误差太大,较难反映细胞的其实分布情况;4 书写报告时要对粒、红、巨三系细胞比例、形态变化分别描写,有特殊变化的情况,尤其对临床诊治有价值的细胞应另加说明;骨髓报告的结论应结合临床和其他实验室检验加以考虑,对尚不明确的结果只须描写看到的内容,不要任意下结论;5 骨髓片若出现下列情况,则提示标本全部或部分稀释;无骨髓小粒或有少量骨髓小粒,小粒内细胞丰富,但涂片有核细胞量减①少;②外周血中血小板量正常或增多,但涂片巨核细胞量减少;③成熟阶段粒细胞比例明显增高,而有核细胞量却减少;当怀疑骨髓有转移性肿瘤时,不管涂片是否稀释,应看完所有涂片,尤其要6注意涂片的头尾及两侧部位,是否有成堆排列的肿擅细胞;常见血液病骨髓像诊断要点：1缺铁性贫血IDA：成熟红细胞体积偏小,幼红细胞呈现核固缩和胞浆量少及着色偏蓝等核老、浆幼的核浆发育不平衡现象;外铁明性,含内铁细胞减少;此类贫血最常见,临床上常有胃病、痔疮和月经多等病史;2巨幼细胞性贫血MA：成熟红细胞体积偏大,可见巨大的红细胞,幼稚红细胞常呈核染色质疏松、浆量增多、着色偏红等核幼、浆老的核浆发育不平衡现象;且可找到巨大晚幼粒和杆状核粒细胞,分叶核粒细胞分叶也偏多;巨核细胞核分叶增多,但不出现多个小核的巨核细胞,巨核细胞浆内易见由核染色质脱落下来的核小体该类细胞约占巨核细胞20—30％;临床上常有胃肠手术、营养不良和妊娠等情况;外周血像常出现3系减少;3溶血性贫血HA：骨髓幼红细胞显着增生,其总比例常大于50％,但以中、晚幼红细胞增生为主,并可见球形红细胞、椭圆形红细胞等特殊形态的变化;此病临床资料对诊断尤为重要,病人常出现黄疽、尿胆原和间接胆红素增高,网织红细胞常大于5％;急性溶血时,外周血像可出现幼红细胞;抗人球蛋白试验和酸溶血试验常出现阳性;4再生障碍性贫血AA：骨髓小粒呈空架状,脂肪球增多;粒、红、巨三系细胞减少,其中以巨核细胞减少更为明显,成熟淋巴细胞比例相对增高,网状细胞、浆细胞、嗜碱组织细胞常偏多;血像3系减少,但脾脏不肿大;5骨髓增生异常综合征MDS：红细胞可见多核、核碎裂及巨幼样变,成熟粒细胞分叶减少或增多,粒细胞脑浆颗粒减少或无或过大而多,核浆发育不平衡;易见多个小核的颗粒巨核细胞和微小型巨核细胞;此类病人外周血像易见幼稚红细胞和幼稚粒细胞,成熟单核细胞常增多;临床抗贫血治疗效果差;诊断MD3后,按骨髓和外周血像中原始细胞多少,有否环状铁粒幼红细胞可分为难治性贫血RA、难治性贫血伴环状铁粒幼红细胞增多RAS、伴原始细胞增多的难治性贫血RAEB、转化中原始细胞片增多的难治性贫血RABBT4型,至于授性粒单细胞性白血病CMMl已属白血病可不再列入MDS;RA：外周血原始细胞无或＜1％,骨髓原始细胞＜5％;RAS：同RA,但骨髓中环形铁粒幼细胞,为铁粒细胞的15％以上;RAEB：外周血原始细胞＜5％,骨髓原始细胞5-20％;良AEBT：外周血原始细胞＞5％,骨髓原始细胞20、30％;6慢性粒细胞性白血病CML：粒系极度增生,以晚幼粒细胞和杆状粒细胞增生为主,嗜碱性粒细胞易见;血片中白细胞增多并出现中、晚幼粒细胞,嗜碱性粒细胞比例增高;临床上出现乏力,巨脾等;碱性磷酸酶NAP 积分明显减低;7慢性淋巴细胞性白血病CLL：成熟淋巴细胞明显增多,其比例占50％以上;原始和幼稚的淋巴细胞少见,不出现异型淋巴细胞;其他各系细胞增生情况不一;血像白细胞增高,成熟淋巴细胞明显增多;发病年龄较大,常伴有乏力、脾脏肿大;8急性淋巴细胞性白血病ALL：区分是ALL还是急性非淋巴细胞性白血病ANLL,对临床用药和病人的预后有重要意义,因此,报告时应慎重;ANLL可分为M0、M1、M2、M3、M4、 M5、 M6和M7等亚型; M0为极低分化的髓性白血病,其诊断与M7一样要结合免疫标记和电镜、组化;ALL分L1、L2、L3 3亚型,其各亚型特点见表;与急非淋巴细胞相比,原始和幼稚淋巴细胞体积小,胞浆量少,较透明,无颗粒及奥氏小体,核染色质粗,排列致密,着色深紫红色,核仁小而少,组织化学染色的POX或SB阳性率＜3％;此型白血病以儿童多见,预后较好;9急性粒细胞性白血病AGL：原始粒细胞、异常早幼粒细胞或中性中幼粒细胞显着增多;其白血病细胞浆较丰富,着色灰蓝,可见较粗大的非特异性颗粒单核细胞的颗粒常较细小,易见粗大奥氏小体;核染色质粗颗粒状,排列较规则;核仁清晰,数目1—4个;急性粒细胞性白血病又分为Ml、 M：包括M：．和M2b亚型、 M：包括M3n和M：b亚型3型; M,的骨馈原始粒细胞≥90％非红系分类,即NEC;M2l的骨髓原始粒细胞＞30一＜90％NEC,单核细胞＜20％,早幼粒及其以下各阶段细胞＞10％;M2b以异常中性中幼粒细胞增生为主,该类细胞核浆发育不平衡,可见核仁,数量＞30％,原始或早幼阶段细胞也同时增多;M”的早幼粒细胞布满粗大的非特异性颗粒,该类细胞大小不一,核形态不规则,可见内、外浆;M3b的早幼粒细胞布满细小的非持异性颗粒,形态变化同M30;该类白血病细胞数量＞30％NEC, POX或SB染色常强阳性;10急性单核细胞性白血病AMOL：该型的白血病细胞脑浆丰富,着色灰蓝,可有细小、散在颗粒,奥氏小体较细长,核形态不规则,有外折内切现象,核染色质呈细沙状,排列成疏松租网状,着色偏淡;核仁较大,数量少;根据白血病细胞分化程度,又可分为M5t和M5b型; M50的骨髓原始单核细胞＞80％NEC,为未分化型; Msb的骨髓原始单核细胞＜80％NEC,但原始和幼稚单核细胞＞30％NEC,为部分分化型;与粒细胞区别的组织化学染色是非特异性脂酶NSE阳性,且受氟化钠NaF抑制,而粒细胞的NSE阴性或弱阳性且不受NaF抑制;11真性红细胞增多症PV：红系增生活跃,幼红细胞形态正常,各期幼红细胞比值可有不同程度的增高, Hb＞180 g／L,红细胞量＞7×1012/L;皮肤和粘膜呈暗红色,脾肿大;12红白血病M6：骨髓中红系＞50％,且伴有形态学的异常,骨髓中原始粒细胞或原始、幼稚单核细胞＞30％NEC；若外周血中原始粒细胞或原始、幼稚单核细胞＞5％,骨髓原始粒细胞或原幼单核细胞＞20％ NEC；单纯原始红细胞,早幼红细胞显着增多者;13巨核细胞白血病M7：骨髓原始巨核细胞＞30％, 该类细胞为原粒或原淋细胞大小,胞浆丰富,常有伪足状突起;此型易与ALL混淆,诊断时要结合电镜组化和免疫标记测定;14粒细胞缺乏症：粒细胞显着减少,早期阶段,中性粒细胞可示“左移”现象;典型发作时,各阶段的中性粒细胞极度减少,但各阶段的红、巨两系细胞常无明显改变;临床上常伴有感染、高热等症状;外周血中性粒细胞极度减少或消失;15粒细胞减少症：粒系统增生不良,成熟障碍,部分粒细胞可出现空泡、中毒性颗粒;外周血中性粒细胞绝对值常在1—1．8×109/L之间;可由感染、化学或物理损伤、造血系统疾病、巨脾、胶原性疾病等所致;16原发性或免疫性血小板减少性紫癜ITP：骨髓巨核细胞量明显增多,少数病人可正常或轻度减少;产血细胞;瘤细胞分布常为弥漫性的,可引起广泛的骨路破坏和骨髓功能抑制,故有核细胞量常偏少;临床上常有骨痛史,X 片示骨质虫蚀样改变;并免疫球蛋白测定异常,成熟红细胞在涂片上呈串钱状排列,血沉明显加快,部分病人尿中可检出本周蛋白;17急性粒、单核细胞性白血病AMML：此白血病同时含有原始或早幼粒细胞和原始或幼稚单核细胞;根据两系血小板巨核细胞比例减低,病人常出现脾肿大、血小板抗体增高、皮肤有出血点等;18传染性单核细胞增多：骨髓中可见淋巴细胞稍增多,有少量异形淋巴细胞;主要表现在血片中成熟淋巴细胞在40一90％之间,其中多数细胞为胞浆增多,并有空泡的异形淋巴细胞,该类细胞易误认为单核细胞或原始细胞,但其核的变化小于胞浆的变化,结合临床上有发热、脾肿大及以青少年多见等,可作出判断;19脾功能亢进：骨髓增生明显活跃,粒、红、巨3系均示明显增生,粒系成熟障碍,巨核细胞系的产血小板巨核细胞减少,晚幼红细胞比例偏高,外周血有两系或三系减少,脾脏肿大;20骨髓纤维化：骨髓有核细胞偏少,骨髓和血片中均可见到泪滴状红细胞,骨髓穿刺时常为干抽,临床上脾明显肿大,贫血,外周血易见幼稚红细胞和幼稚粒细胞;此病诊断应结合骨髓活检;21纯红细胞再生障碍性贫血PRAA：幼红细胞显着减少,常小于5％,但粒系和巨核细胞系无明显异常;外周血中单纯红细胞减少或血红蛋白降低,白细胞和血小板多正．常或略低,网织红细胞明显减低;此病常与免疫功能紊乱有关;22多发性骨髓瘤MM：原始浆细胞、幼稚浆细胞或成熟浆细胞明显增多,该类细胞为恶性的浆细胞,即骨髓瘤的白血病细胞比例不一,又分M4a、M4b、M4c、M4EO4型;m4a是以原始和早幼粒细胞为主,原始单核细胞加幼稚单核细胞＞20％NEC； M4b以原始、幼稚单核细胞增生为主,原始．粒细胞和早幼粒细胞＞20％NEC； M4c的原始细胞既具有粒系细胞特征又具有单核细胞特征的细胞＞30％NEC,此型细胞形态较难识别,要结合免疫标记测定； M4EO除上述特征外,嗜酸性粒细胞占5—30％;23骨髓转移性肿瘤：以成堆出现的肿瘤细胞为特征,该类细胞核染色质疏松,有核仁,脑浆量多少不一,但胞界常不清;转移到骨髓的神经母细胞瘤,可见菊花状排列;此类病人的骨韶有核细胞量常明显减少或伴标本稀释,可找到坏死成分,个别病人涂片需找许多张才能发现堆集的肿瘤细胞;临床上常有骨痛、低热和消瘦等病史;24恶性组织细胞病：除可找到较多吞噬细胞、淋巴样、单核样组织细胞外,还可见到巨大的恶性组织细胞和多核巨组织细胞,该类细胞体积大可达30-40um,胞浆多,着色深蓝,核大,染色质粗、着色深紫红色,核仁大;血3系减少,持续高热,脾肿大; NAP积分减低;部分恶性组织细胞要与大恶性淋巴细胞瘤相鉴别;25其他不明原因发热的病人骨髓像：常以反应性骨髓像报告之;主要特征有粒细胞成熟障碍,毒性变；网状细胞增多,有时可见少量吞噬型网状细胞和淋巴样、单核样组织细胞；易见浆细胞、单核细胞;特殊情况下,可找到疟原虫或伤寒特征细胞等;此类病人常为各类微生物细菌、病毒、立克次体等感染或免疫系统疾病所致,控制病因后,骨髓像可自然好转;个别病人的发热可能是恶性淋巴瘤所致,但可找到淋巴母细胞或淋巴瘤细胞,但其诊断应结合病理活检再确定;。
第三节-骨髓检查
五、常用血细胞组织化学染色
(三)中性粒细胞碱性磷酸酶染色 (neutrophil alkaline phosphatase, NAP)
成熟中性粒细胞(杆状+分叶)→阳性, 其他血细胞皆阴性.
1.参考值:
阳性率 10%~40%;
++++
积分值40~80分
平均积分<70
+
+++ +
++ （-）
++ （-）
单核细胞系形态学特点
浆细胞系形态学特点
巨核细胞系形态学特点
其他细胞形态学特点
五、常用血细胞组织化学染色
(一)概念： 血细胞化学染色是以形态学为基础,运
用化学、生物化学、免疫化学等技术对血 细胞的化学成分作定性、定位和半定量分 析的方法.
五、常用血细胞组织化学染色
(二)过氧化物酶染色
(peroxidase,POX):粒、单 1.正常细胞染色结果：
50~100 白血病、增生性贫血
20~50 正常骨髓象、某些贫血
5~10 造血功能低（CAA）
<5 造血功能衰竭（AAA）
极度活跃
明显活跃
增
极
生
度
减
减
低
低
增生活跃
Gaucher细胞
Niemann-Pick细胞
二、骨髓细胞学检测的方法和内容
（三）骨髓涂片的油镜观察：
1.有核细胞分类计数 2.观察各系统细胞形态 3.观察有无寄生虫和异常病理细胞
又称单核细胞酯酶, 被NaF抑制. 常用α-乙酸奈酚酯酶（α-NAE）
(1)正常细胞染色结果： ①单核均(+)， NaF抑制率>50% ②粒系(-或±)， 不被NaF抑制 ③淋巴细胞(-)
骨髓检查
杆状核粒细胞
分叶核粒细胞
嗜酸性早幼粒细胞
嗜酸性中幼粒细胞
嗜酸性晚幼粒细胞
嗜酸性杆状核粒细胞
嗜酸性分叶核粒细胞
嗜碱性早幼粒细胞
嗜碱性中幼粒细胞
嗜碱性晚幼粒细胞
嗜碱性杆状核粒细胞
嗜碱性分叶核粒细胞
粒细胞胞质中四种颗粒鉴别
中性颗粒 大小 形态 数量 染色 分布 细小、针尖状、 大小均一 细颗粒状 多 淡红色 均匀 嗜酸性颗粒 粗大、均一、小 珠状、似鱼卵 圆形或椭圆形 多 橘黄、橘红色、 暗黄色 均匀 嗜碱性颗粒 粗大、大小不一 形态不一 不一定、常不多 深紫红色或深紫 黑色 分布不一、常覆 盖在核上 嗜苯胺蓝颗粒 粗大、大小不一 形态不一 少量或中等量 紫红色 分布不一、有时 覆盖在核上
4..纤维细胞（fibrocyte）
5.成骨细胞（osteoblast）
胞体较大，直径 20~40μ m，长椭圆形或 不规则形，单个或多个 成簇分布，胞核椭圆或 圆形，常偏于细胞一侧， 核染色质深紫红色，排 列呈粗网状，有1~3个核 仁。胞质丰富，染深蓝 或灰蓝色，可见核旁淡 染区，胞质边缘多呈模 糊的云雾状。
核仁 胞质颗粒
7.脂肪细胞（fatty cell）
直径30~50μ m，圆或椭圆形， 胞膜极易破裂。胞核较小， 形状不规则，常被挤在一边， 核染色质致密，呈网状，无 核仁。胞质内充满大量脂肪 小球，大小不等呈薄膜状或 空泡样，染淡粉红色或浅紫 色，有时呈一个大脂肪空泡， 中间有网状细丝，在核旁呈 多色性，胞质边缘常不整齐。
原始细胞 幼稚细胞 成熟细胞 1.细胞大小 大———————→ 小（巨核细胞除外） 2.核质比（N/C） 大——————————→ 小 3.细胞质 （1）量 少———————→多（淋巴细胞除外） （2）着色 深蓝或浅蓝——————→浅红色 淋巴细胞系呈透明天蓝色，单核细胞系呈灰蓝，红系保持不变，浆细胞系则由 浅灰蓝色变为深蓝色。 （3）颗粒 粒细胞、单核细胞、巨核系胞等多从无颗粒到有颗粒，红系细胞胞 质中无颗粒。 4.细胞核 （1）大小 大—————→小（成熟红完全消失） （2）核形 规则——→凹陷——→分叶（红系无核变化） （3）核染色质 疏松——→粗糙——→成块 （4）核膜 不明显———→明显 （5）核仁 有—— —— →消失
实验三骨髓检验报告
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2、注意涂片的制备、染色、观察部位不同对细胞 的影响。
3、遇到过渡类型的细胞采取就低不就高的原则 4、对于介于两个系统之间的细胞难以判断时，可
采用大数划归法。 5、注意结合病人资料。
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干抽：指由于非技术错误或选择部位不当而多次抽 不出骨髓液或仅抽出少量血液的现象。 引起干抽的主要原因：
实验三 正常骨髓象检查报告
一、目的 1.掌握：骨髓片检查步骤、观察内容及报告单
填写 2.掌握：骨髓有核细胞增生程度的判断 3.掌握：大致正材 显微镜、正常骨髓象骨髓片
三、操作步骤 1.在低倍镜下观察 主要观察骨髓片质量、增生程度、巨核细胞计
数、有无异常细胞、选择适宜观察部位。
干净的部位；计数要有一定的顺序，以免出现重复 计数的现象，可从左到右，从上到下，呈“S”形走 势；计数细胞包括除巨核细胞、破碎细胞、分裂象 以外的其它有核细胞及异常细胞，至少200个。
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3．结果计算 （1）计算各阶段细胞百分比、各系细胞百分比及
粒红比值（填写在表格中） （2）血片分类后，计算各系细胞、各阶段细胞百
（1）骨髓纤维化 （2）骨髓极度增生 （3）骨髓增生减低 （4）肿瘤骨髓浸润
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骨髓取材失败（骨髓稀释）：抽吸骨髓液时混进血 液称之。
判断标准： （1）骨髓增生假性减低 （2）成熟阶段细胞比值偏高 （3）杆/叶接近外周 （4）巨核细胞数量与外周血小板数量不符
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增生程度分级标准
分级
有核细胞 成熟红细胞
增生极度活跃 1：1
增生明显活跃 1：10
增生活跃
骨髓检验质量管理要求
骨髓检验质量管理要求
1.骨髓检验人员必须掌握骨髓检验质量控制的理论和方法。
2.建立健全骨髓检验的科学管理制度。
3.做到骨髓检验的各项操作规范公、程序化。
4.认真做好骨髓室的室内质量控制，骨髓检验的标本采集时间、方法、部位、容器及送检过程，必须符合要求。
5.实验用的各种玻璃器材必须清洁干燥，仪器性能、质量必须经常检查、检测，保持良好状态。
6.实验的试剂应使用商品供应制品，购进后须经阴阳性标本对照试验，符合质量后方可应用。
7.检测中心、出现假阳性、假阴性结果时，必须停止报告，及时查明原因。
8.在开展室内质控的基础上，根据省临床检验中心的要求参加室间质评活动。
9.定期总结经验，不断提高检验质量，逐级接受监督、检查，对质量不合格者要求采取有效措施，限期改进。
骨髓细胞学检查及临床意义
原发性血小板减 少性紫 癜 （Ｔ ） 临床 常见 的一 种 免疫性 ＩＰ 是
患者血液 中含有抗血小 板抗 体 ， 致使 血小板 破坏过 细胞为主 。第二型 （ ２） 原始 和 幼稚 淋 巴 细胞 以大细 胞 为 主。 出血性疾病 ． 工 ： 并抑制骨髓 巨核 细胞产 生血 小板 ， 而 引起皮 肤黏 膜 出血。 从 第三型（３） 原始和幼稚 淋巴细胞 以含有 较多空泡 的细胞为 主。 多 ， Ｉ ：
点 以及骨髓增生情况等进行分类 ， 见表 ｌ 。
１２ 诊断某些非造血 系统疾病 ．
骨髓细胞学检查对某些原虫感
表 １ 常见贫血的分类及 相互关 系
过 氧化物酶染色 中性粒细胞碱性磷酸酶染色
用于急性白血病鉴别诊断（ 急粒 ２ ； 急单 ； 急淋 一）
①有助于急性 白血病诊断（ 急粒 ； 急单或正常 ； 急淋 ） ； ②鉴别慢性粒 细胞 白血病与类 白血病反应 （ 前者寺今 ； 后者个个 ） ； ③化脓性 感染时其活性 明显增强
一
贫血 、 出血、 白、 苍 消瘦 及肝 、 、 巴结 肿 大 ， 程度 较 脾 淋 但 据 白血病细胞 的系别 ， 主要分 为急性 淋 巴细胞 白血病 （ 淋 ） 急 和 有乏力 、
急性非淋 巴细胞 白血病 （ 急非淋 ） 两大类 。根据细胞 形态学 特征 轻 。
又将急淋分为 细胞 以小
值 的检查方法 ， 对各 型白血病 、 多发性 骨髓瘤 、 生障碍性 贫血 、 作此项检查 。 再
骨髓检查
骨髓报告文字描述内容
骨髓特征的描写 1、对骨髓取材、涂片、染色情况的评价 2、骨髓有核细胞增生程度和粒红比值 3、详细叙述粒系和红系的增生情况和成熟情况,
细胞形态有无异常，包括成熟红细胞； 4、简单描述淋、单、浆各系基本情况 5、涂片中巨核细胞和血小板的分布和形态情况； 6、有无特殊病理细胞和寄生虫
适应证
1.血象检查中有不明原因的某种血细胞过多或过 少，或出现幼稚细胞。
2.不明原因的肝、脾或淋巴结肿大 3.不明原因的发热、紫癜、骨痛、恶病质 4.疑有其他恶性肿瘤有骨髓内转移 5.肾功能异常、血沉明显增加或有异常蛋白血症
和异常蛋白尿症
6.血液系统疾病定期复查、化疗后的疗效观察 7.其他：骨髓活检、细胞表面抗原测定、造血干/
骨髓成分少或无。肉眼观察，其“骨髓液”较稀、无黄色 小粒；推片尾部无骨髓小粒。 部分稀释：指抽吸骨髓液时混进较多血窦血。 特征包括：
①骨髓小粒无或少见； ②有核细胞减少，且分布不匀，明显呈条状分布； ③骨髓特有细胞少； ④中性分叶核粒细胞和成熟淋巴细胞比例增加。
4.染色方法
（1）Wright染色： （2）Wight-Giemsa染色： ①染液配制：Ⅰ液是将瑞特染粉1g、姬姆萨染粉0.3 g加
片（不少于3张）和简单病历一份。 对于非技术因素而多部位穿刺均抽不出骨髓者即为干抽，
常见于骨髓纤维化症，骨髓极度增生或增生极度减低，肿 瘤骨髓浸润等，可进行骨髓组织病理检查。
A
B
C
D
A涂片制备良好，尾部有骨髓小粒 B涂片制备良好，尾部无骨髓小粒 C 涂片制备不佳，推片时用力不均匀且无尾部 D涂片制备差，有些骨髓液未涂开
骨髓象检查的注意事项是什么？
骨髓象检查的注意事项是什么？在常规的检查项目中，大部分的患者对骨髓象检查还是非常陌生的，因为他们甚至都没有听过这种检查，但是在血液科，骨髓象检查是很常见的一个检验项目，利用骨髓象的检查，能够对骨髓造血细胞程度做出评估。
主要对一些疾病做出判断，例如白血病、多发性骨髓病和再生障碍性贫血等疾病。
提到骨髓象检查，有一些人不免泛起嘀咕，骨髓象检查难道是需要开刀将骨髓抽出来的一种检查吗？那么骨髓象检查是不是非常的痛苦？患者心里存在着诸多对骨髓象检查的疑问，那么今天就让我们在文章中一起来解答一下吧！你知道什么是骨髓象检查吗？骨髓象检查又被称之为是骨髓细胞组的检查，它是根据和细胞所占的比例将骨髓增生程度划分等级，来感受认识骨髓造血的活跃程度。
在取材，制片和染色良好的情况下，正常人的骨髓增生程度大多描述为骨髓增生活跃，一些贫血患者骨髓代偿增生能力良好，则会表现增生明显活跃，如果造血功能低，则表现为骨髓增生减低或者是极度减低，如果患者不慎出现了白血病，那么骨髓增生会出现明显活跃或者是极度活跃。
骨髓象的检查就是骨髓涂片后，在显微镜上表现出来的具体情况。
骨髓象检查需通过骨穿，抽取少许骨髓液、图片、染色，然后显微镜下进行观察。
抽取骨髓液不需要开刀，是用专用的骨穿针，在抽取时会用到特殊的骨髓活检针会穿透皮肤到达骨髓处，一般在髂前上棘和髂后上棘进行骨髓穿刺；特殊需要时可作胸骨穿刺。
两岁以下的小儿多选在胫骨上1/3段前方，偏内侧中央处穿刺，其他部位，如脊突也可选用。
骨髓象检查时，需要对骨髓进行穿刺活检，抽取骨髓液，抽取的部位以胸骨，脊椎棘突和髂脊最常见。
骨髓象检查时的注意事项知多少？骨髓象检查时也有很多的注意事项，为了让检查的结果更具有权威性专业性，就需要注意这些检查事项。
宏观看待很必要由于人体细胞形态的变化多种多样，所以在观察细胞时不能抓住某一、二个特点就轻易地做出肯定或否定的判断。
而应全面观察细胞的胞体大小、形态；胞核大小、形态、位置、核染色质等，例如要对核仁数量、大小、清晰度进行综合观察才可以判定；同时要注意于周围细胞进行比较，有时可见到难以识别的细胞，可参考涂片上其他细胞后做出判断，如仍不能确定可归入“分类不明”细胞，但不宜过多，若有一定数量，则应通过细胞化学染色、集体读片或会诊等方法弄清类别。
骨髓检查
2. 高倍镜
1)观察有核细胞增生程度,增生程度一般采用五 级分类法即： 有核细胞数/Hp 有核细胞数/Hp 常见病因
增生极度活跃 增生明显活跃 增生活跃 增生减低 增生极度减低 超过100 超过100 50~100 20~50 5~10 各种白血病 各种白血病或增生性贫血 正常骨髓象或增生性贫血 造血功能低下者
Tail
Body
Head
骨髓小粒
1.低倍镜 低倍镜
a. 判断骨髓涂片的质量包 括厚薄、 染色、 括厚薄 、 染色 、 骨髓小粒 等情况。 等情况。 观察巨核系统增生情况并计数。 b.观察巨核系统增生情况并计数。 LP HP
c.全片观察有无体积较大或成堆分布的异常细
胞，尤其注意观察涂片边缘和尾部。 尤其注意观察涂片边缘和尾部。
1.结合临床分析： 结合临床分析： 结合临床分析 一般资料 症状 体征 2.结合血象分析： 结合血象分析： 结合血象分析 三系数量和质量 3.报告书写要求： 报告书写要求： 报告书写要求 简单扼要、 简单扼要、条理 清晰、重点突出。 清晰、重点突出。 一般按照粒、 一般按照粒、红、 巨、淋、单、浆 等系统依次描写。 等系统依次描写。 若遇某系有明显 异常， 异常，应在首位 详细描写。 详细描写。
淋巴细胞系统 占20~25%，均为成熟淋巴细胞， 原淋巴细胞罕见，幼淋巴细胞偶见。 单核细胞系统 <4%,均为成熟单核，原单核细 胞罕见及幼单核细胞偶见。 浆细胞系统 <2%，均为成熟浆细胞，原浆细胞 罕见及幼浆细胞偶见。 巨核细胞系统 在1.5cm×3.0cm的片膜上，可 见巨核细胞7~35个，其中原巨核细胞不见或偶 见，幼巨核细胞占0~5%，颗粒型巨核细胞占 10~27%，产血小板型巨核细胞占44%~60%， 裸核占8~30%。血小板较易见，呈堆状存在。
骨髓检验的流程实验报告
一、实验目的1. 了解骨髓检验的基本原理和操作流程；2. 掌握骨髓穿刺术和骨髓细胞学检查的操作方法；3. 学会观察骨髓细胞形态，判断骨髓增生情况及骨髓细胞形态学特征。
二、实验原理骨髓是人体重要的造血器官，骨髓细胞形态学检查是诊断血液病的重要手段。
骨髓穿刺术是通过穿刺针从骨髓腔抽取骨髓液，观察骨髓细胞的形态、数量和比例，从而判断骨髓增生情况和诊断血液病。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：骨髓穿刺包、玻片、染色液、显微镜、无菌手套、无菌棉球、无菌注射器、无菌生理盐水等；2. 实验仪器：骨髓穿刺针、注射器、玻片夹、显微镜等。
四、实验方法1. 骨髓穿刺术（1）选择穿刺部位：髂前上棘穿刺或髂后上棘穿刺；（2）戴无菌手套，铺无菌巾，消毒穿刺部位；（3）左手固定穿刺部位，右手持骨髓穿刺针，垂直刺入皮肤；（4）当穿刺针进入骨髓腔时，抽出针芯，见有骨髓液流出；（5）用注射器吸取骨髓液，注入玻片；（6）涂片、固定、染色；（7）显微镜下观察骨髓细胞形态。
2. 骨髓细胞学检查（1）观察骨髓涂片，记录骨髓细胞的形态、数量和比例；（2）观察骨髓增生情况，判断骨髓增生程度；（3）根据骨髓细胞形态学特征，判断骨髓细胞类型；（4）结合临床症状和实验室检查结果，诊断血液病。
五、实验结果1. 骨髓穿刺术顺利，成功获得骨髓液；2. 骨髓涂片染色良好，细胞形态清晰；3. 骨髓细胞数量和比例正常，骨髓增生程度活跃；4. 骨髓细胞形态学特征符合正常骨髓细胞特征。
六、实验分析1. 骨髓穿刺术是获取骨髓液的重要手段，操作时应注意无菌操作，避免感染；2. 骨髓细胞学检查是诊断血液病的重要手段，观察骨髓细胞形态、数量和比例，有助于判断骨髓增生情况和诊断血液病；3. 骨髓细胞形态学特征对血液病的诊断具有重要意义，应熟练掌握各种骨髓细胞形态学特征。
七、实验结论本次骨髓检验实验顺利完成，成功获取骨髓液，并进行了骨髓细胞学检查。
实验结果表明，骨髓细胞数量和比例正常，骨髓增生程度活跃，骨髓细胞形态学特征符合正常骨髓细胞特征。
骨髓细胞学检验报告
骨髓细胞学检验报告背景骨髓细胞学检验是一种常用的实验室检查方法，用于评估骨髓细胞的数量、形态和功能。
骨髓细胞学检验可以帮助医生确定和诊断多种疾病，特别是涉及造血系统的病变。
本次报告主要针对患者进行的骨髓细胞学检验结果进行分析和解读。
分析1.血细胞比例：–粒细胞比例：正常人的粒细胞（中性粒细胞、嗜酸性粒细胞和嗜碱性粒细胞）比例通常在40%至75%之间。
如果粒细胞比例高于正常范围，可能表示感染或炎症反应，而低于正常范围可能与骨髓功能抑制或骨髓疾病有关。
2.红细胞比例：–红细胞比例正常范围在40%至50%之间。
如果红细胞比例低于正常范围，可能表示贫血的存在，而高于正常范围可能与骨髓异常增殖性疾病有关。
3.血小板比例：–血小板比例正常范围在150×109/L至450×109/L之间。
如果血小板比例低于正常范围，可能表示血小板减少症或骨髓造血功能低下，而高于正常范围可能与骨髓增殖性疾病有关。
4.骨髓形态及异常情况：–骨髓细胞学检验还包括对骨髓内细胞的形态学观察，以便发现细胞的异常形态和其他可疑的病理改变。
根据细胞形态学的特点，可以判断是否存在骨髓异常增生、恶性转化或其他疾病的可能性。
结果根据本次骨髓细胞学检验结果，我们得出以下结论：1.血细胞比例：–粒细胞比例：患者的粒细胞比例为60%，处于正常范围内，暂无异常发现。
2.红细胞比例：–红细胞比例为45%，处于正常范围内，暂无异常发现。
3.血小板比例：–血小板比例为180×10^9/L，处于正常范围内，暂无异常发现。
4.骨髓形态及异常情况：–细胞形态学观察显示骨髓细胞形态正常，未发现异常细胞形态或其他可疑病理改变。
建议根据本次骨髓细胞学检验结果，目前没有发现明显异常。
然而，骨髓细胞学检验结果需要综合临床病史和其他检查结果进行综合分析。
建议患者继续进行定期的骨髓细胞学检验，以及密切关注身体状况的变化。
如果出现任何新的症状或异常，建议及时就医咨询专业医生以获取进一步评估和治疗建议。
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Immunology 免疫学
Cytogenetics 细胞遗传学
Molecular 分子生物学
要结合外周血象来分析 对疑难细胞或不典型标本的处理
– 借助其他方法：化学染色、免疫表型分析 – 两个阶段间的细胞，计入下一阶段 – 换部位重抽或定期复查
形成骨髓象检查报告
– 描写细胞形态与数量，作出肯定性诊断、支持性诊 断、排除性诊断或形态学描写。
注意事项
– 骨髓片应制作良好，才能进行形态学观察
骨髓穿刺和活检针 骨髓穿刺部位
Bone Marrow Aspirate
3.镜检
低倍镜
– – – – – 制片质量 增生程度（5级） 巨核细胞计数 异常细胞筛查 选择油镜检查区域
油镜
– – – – – 有无造血岛 细胞形态观察 有核细胞分类计数 计算粒红比值 有无异常细胞及寄生 虫
4.分析
方法
– 流式细胞仪：目前的首选方法 – 免疫组织化学法：用于病理切片 – 免疫荧光显微镜法：现已少用
Normal marrow showing CD45 versus side scatter, which identifies major cell populations as indicated
A. t(9;22)(q34;q11.2), CML. B. t(8;21)(q22;q22), AML-M2. C. inv(16)(p13.1q22), AMMoL-M4Eo. D. t(15;17)(q22;q12–21.1), APL. E. t(9;11)(p22;q23), AMoL-M5. F. del(5)(q13q33), t-AML.
临床意义
– ALL、淋巴瘤细胞白血病： （+++，粗颗粒或块状）； – AML-wom：（-）；AMML： （+,弥漫,细颗粒） – CLL：（+，粗颗粒） – 幼红细胞克隆增生：（+， 粗颗粒或块状）； 幼红细胞良性增生：（-）
铁染色
正常染色反应（-～ ++++）
– 细胞外铁：+~++ – 铁粒幼细胞： 19%~44%，无环形 铁粒幼细胞
细胞化学染色（cytochemical stain)
髓过氧化物酶（POX）染色 酯酶（esterase）染色 中性粒细胞碱性磷酸酶（ALP）染色 糖原（PAS）染色 铁染色
一些名词缩写介绍
AML：急性髓系白血病
– – – – – AML-md：微分化型（AML-M0） AML-wom：未成熟型（AML-M1） AML-wm：成熟型（AML-M2） AMML：急性粒-单核细胞白血病（AML-M4） AMoL：急性原单核细胞和单核细胞白血病 （AML-M5） – AEL：急性红白血病（AML-M6） – AMegL：急性巨核细胞白血病（AML-M7）
酯酶染色
三种酯酶
– 特异性酯酶(SE) – 非特异性酯酶(NSE) – 单核细胞酯酶(ME)
用于鉴别诊断AML亚 型
酯酶染色（正常细胞反应）
细胞类型 原始细胞 早幼粒 中性粒 原单 幼单、单 淋巴 有核红 巨核、PLT SE -/+ ++/+++ +/++ -/ ± -/ ± NSE -/ ± -/+ -/ ± +/++ +++ -/ ± -/ ± +++ ME +/++ +++ -/ ± ±
正常或增加
-或+，弥漫性淡 红色或细颗粒状
+，粗颗粒或块状 -或+，弥漫性淡 红色
细胞免疫表型（immunophenotypes）分析
标本：血液、骨髓、淋巴结穿刺液、胸腹水、脑脊液、 肺泡灌洗液 临床意义
– – – – 急性白血病和淋巴瘤的分型诊断与疗效、预后判断 成熟淋巴细胞肿瘤的分类诊断 淋巴细胞免疫表型分析判断免疫功能 造血干细胞计数
1：1 >200
常见原因
白血病
明显活跃
活跃
10：1
20：1
100±
50 ±
白血病，增生性贫血
正常，某些贫血
减低
极度减低
50：1
300：1
20 ±
10 ±
某些低增生性贫血
重型再障
各系细胞
粒系细胞：原粒、早幼粒、中性幼粒、中性杆 状核、中性分叶核、嗜酸性、嗜碱性粒细胞 红系细胞：原红、早幼红、中幼红、晚幼红 淋巴细胞：成熟、原淋、幼淋 巨核系细胞：原始、幼稚、颗粒型、产板型 少量单核细胞、浆细胞、骨髓基质细胞（成纤 维细胞、内皮细胞、脂肪细胞、巨噬细胞等）、 组织嗜碱细胞、成骨细胞、破骨细胞
正常骨髓象
有核细胞增生活跃 粒红比值为2~4：1，平均3：1 各系细胞比例、形态、染色大致正常 巨核细胞7~35个/1.5x3cm2，多为产板型 可见少量单核细胞、浆细胞、骨髓基质 细胞、组织嗜碱细胞、成骨细胞、破骨 细胞等 核分裂细胞约为0.1%
骨髓有核细胞增生程度
增生程度 RBC:有核细胞 有核细胞/LP 极度活跃
基因诊断
检测内容：融合基因、突变基因、免疫 球蛋白或T细胞受体基因重排 标本：抗凝血、骨髓液、淋巴结穿刺液
临床意义
PML-RARA
BCR-ABL
AML1-ETO
CBFB-MYH11
JAK2 V617F
APL
CML
AML-wm
AMML
MPN
白血病的 MICM分型
Morphology 细胞形态学
POX染色
正常细胞染色反应 （-～++++）
– 存在于髓系细胞胞质 中，愈成熟反应愈强， 原粒C（-）。 – 原单C（-），幼单C 和单核C（±）。 – 淋巴、巨核、幼红细 胞（-）
临床意义
– – – – – – – AML-md（-） AML-wom（-） AML-wm（+++） AMML（+） AMoL（-/±） AMegL（-） ALL（-）
一些名词缩写介绍
ALL：急性淋巴细胞白血病 APL：急性早幼粒细胞白血病 CML：慢性髓性白血病 CLL：慢性淋巴细胞白血病 AA：再生障碍性贫血 PNH：阵发性睡眠性血红蛋白尿 MDS：骨髓增生异常综合征 IDA：缺铁性贫血 RARS：难治性贫血伴环形铁粒幼细胞增多
Bone Marrow Biopsy
骨髓病理学检查
正常骨髓的组织形态学
– 造血组织 – 骨质 – 间质
骨髓病理学检查
常见血液病的骨髓病理学诊断
– 骨髓纤维化（MF）
• 细胞期 • 胶元形成期 • 硬化期 • • • •
Gomori染色（++）以上
– 骨髓增生异常综合征（MDS）
基质改变：网状纤维增生 增生程度：少数增生低下 三系造血细胞的定位紊乱与形态异常：ALIP现象 巨核细胞多聚集于静脉窦窦壁外，形态表现为单个或多个 圆核、淋巴样小巨核或微巨核细胞
造血系统疾病 某些血液病及其相关疾病 某些寄生虫感染性疾病 恶性肿瘤骨髓转移 某些类脂质沉积病 待查
– – – – –
贫血原因待查 发热原因待查 淋巴结肿大原因待查 肝脾肿大原因待查 骨痛原因待查
唯一的禁忌证： 严重的凝血因子缺陷
2.标本制备
取材部位：髂后、髂前上棘、胸骨、棘 突、病灶部位 采集、涂片 染色：瑞氏（Wright）染色或瑞-姬 （Giemsa）混合染色
骨髓检验
复旦大学附属华山医院 陈勤奋 chenqinfen@
主要内容
骨髓细胞学检查
– – – – – 细胞形态学 细胞化学染色 免疫表型分析 染色体分析 基因诊断
骨髓病理学检查
– 组织结构 – 免疫组织化学染色
骨髓检查流程
1.判断适应证
2.标本制备
3.镜检
4.分析
1.骨髓检查适应证
ALL与AML细胞免疫表型特点
CD19 B-ALL T-ALL AML + CD7 + -/+ CD33 CD13 HLA-DR + + + -/+ + TdT +/+ -
骨髓病理学检查
反映骨髓组织结构及间质成分
– 较全面地衡量造血细胞增生程度，以及造血组织、 脂肪组织和纤维组织的容积比例； – “干抽”时能反映造血情况及纤维组织增生程度， 如骨髓纤维化、髓样化生； – 协助某些血液病的诊断，如MDS、毛白、淋巴瘤累 及骨髓； – 较早期预测疾病的预后，反映白血病治疗效果； – 观察重要的骨髓组织学变化，如铁储备、炎性肉芽 肿、转移瘤、骨小梁变化、血管栓塞、骨髓坏死、 淀粉样变。
临床意义
– 鉴别IDA与非IDA – 诊断铁粒幼细胞性贫 血 – 诊断MDS-RARS
几种常见AL的细胞化学染色结果
ALL POX SE NSE NSE+NaF ALP PAS
-
AML-wm
+~+++ ++~+++ -~++
AMML
-~+ -~+ ++~+++
不被NaF抑制
增加 减少
能被NaF抑制
酯酶染色（临床意义）
AML类型 wom wm SE + +++ NSE -/ ± -/+ （NaF抑制-） +/++ （NaF抑制+） >20%+ ME -