石蜡切片-小鼠心脏组织-心衰模型-实验步骤

石蜡切片
操作流程及步骤：
1、样品4℃过夜[1,2]。

2、清洗水槽及过滤网[3]。

3、打开机器开关，调节水池温度21℃、展片水池温度45℃、烘片温度55℃[4]。

4、固定包埋组织块[5]。

5、调节出水水流大小[6]。

6、调节切片厚度5um、10 um[7]。

7、将包埋组织块下调至与刀片位置同一平面，前后距离使其与刀片距离恰好接
触[8]。

8、开始切片带出现完整的组织切横切面将其随水流传送至水池中[9-13]。

9、选择较好的切片，用载玻片将其从21℃水池中捞出。

每个石蜡取5-6张片子
[14-15]。

10、放到展片水池中展开、载玻片编号[16]。

11、55℃烘干，无水滴后可收片。

心得体会及注意事项：
1、包埋组织块冻存温度过低会冻坏，不冻存石蜡粘性大不容易切片。

2、操作期间应放入冰中储存，自备冰块。

3、水槽中石蜡会堵塞上水滤网影响出水速度。

4、展片水池水要在展片前达到预设温度。

5、要固定牢固，固定不牢切片时容易破坏样品。

6、以中间水柱恰好达到刀片位置最佳，水流过小切片不易冲下，水流过大会导致切片破坏。

7、5 um染色效果更佳，根据不同组织染色要求调节切片厚度。

8、若前后位置调节不精确可使距离稍大，随后手动摇轮慢慢靠近，每次前进距离为提前设定距离5um或10 um。

9、切片期间不出现严重的黏附，粘连，裂片，不要轻易停止，切片要匀速.
10、切片过薄会迅速升温从0℃升至21℃或更高，若随意停止，石蜡黏附性增加会导致粘刀片等问题影响继续操作。

11、若一个样本操作时间过长应取下放入冰块一段时间再继续操作。

12、原则没有大问题匀速不要随意停。

13、换新刀片（刀片上有黏附石蜡会导致切片裂开，最好换至新刀片）。

14、尽量清理水池多余无用切片及碎石蜡，但是要小心不要碰坏样品切片。

15、每个载玻片取2-3个组织最佳。

16、展片不足会有褶皱影响染色结果，展片时间过长会导致组织裂开。