石蜡切片-小鼠心脏组织-心衰模型-实验步骤
实验技术：免疫学常用技术之----免疫组化（石蜡切片冰冻切片）
实验技术：免疫学常用技术之----免疫组化（石蜡切片冰冻切片）免疫组化的原理说起来其实挺简单的，抗原抗体反应嘛，通过采用显色剂来标记抗体，进行化学反应后便能显色，从而确定出组织细胞中的抗原。
可以进行定位、定性以及定量。
石蜡切片或者冰冻切片均可以做免疫组化的实验，前期的过程会有所不同：石蜡切片：取出需要实验的石蜡切片，先进行脱蜡处理，最后置于自来水中备用。
对于冰冻切片，无需上述步骤，直接从-20℃冰箱中取出即可进行后续的操作啦~~~接下来的步骤就全部一样啦~~~抗原修复：由于我们在制备石蜡切片或者冰冻切片时，采用福尔马林进行固定，会使得组织中的许多氨基酸残基在分子内或分子间形成醛建，使得不少抗原决定簇被封闭；采用多聚甲醛会具有聚合作用，均阻碍了抗原和抗体的结合。
所以我们怎么着都要进行这步哒，虽然比较耗时。
言归正传，具体的抗原修复液为：0.51 g 柠檬酸钠0.095 g 柠檬酸双蒸水定容至250 mL偷偷告诉你可以偷懒的，配置为10×抗原修复液后，每次实验稀释后使用就可以了。
配置好修复液后，将切片置于其中，采用微波修复法修复（中火，5 min），取出后冷却至室温（一般放在4℃冰箱冷却更快），再进行如上微波修复后冷却，一共三次。
阻断内源性过氧化物酶：将切片置于3%过氧化氢（30%过氧化氢，采用甲醇稀释10倍即可得到）中10 min即可。
随后采用1×PBS洗三次，每次5 min。
抗原抗体反应步骤：这部分内容就会因使用的试剂盒的不同而略有差异了，我使用的是中杉金桥的二步法试剂盒，过程比较简单，接上一步骤后直接加一抗（1×PBS稀释）4℃孵育过夜。
第二天洗一抗（1×PBS洗三次，每次5 min）后加二抗室温孵育半小时后，同上洗三次。
Tips: 有些试剂盒会需要先用血清封闭后再加一抗孵育的。
还有哦，孵育要在湿盒中哦，不然全挥发咯会。
DAB显色：这步挺关键的，显色的时间把握很重要，显色过度会颜色太深而观察不到有效的结果，时间过短也会显色不完全。
小鼠实验心脏实验报告
一、实验目的1. 了解心脏生理学的基本知识，掌握心脏功能实验的基本操作技能。
2. 探讨心脏在生理和病理状态下的功能变化，为心脏疾病的研究提供实验依据。
二、实验原理心脏是维持血液循环的泵，具有收缩和舒张功能。
通过实验，可以观察心脏在生理和病理状态下的功能变化，如心率、心输出量、心肌收缩力等。
三、实验材料与仪器1. 实验动物：成年雄性小鼠，体重20-25g。
2. 仪器：手术显微镜、心室灌流装置、生理信号记录仪、电子天平、注射器、手术刀、缝针、缝线、生理盐水、0.1%肝素钠溶液、10%福尔马林固定液等。
四、实验方法1. 动物麻醉：将小鼠用麻醉剂（如戊巴比妥钠）进行麻醉，保持动物呼吸平稳。
2. 心脏暴露：在手术显微镜下，沿小鼠左侧第四肋间进行开胸手术，暴露心脏。
3. 心脏固定：将心脏用缝线固定在心室灌流装置上。
4. 心肌收缩力测定：向心室灌流装置中注入0.1%肝素钠溶液，排除血液，然后注入生理盐水进行灌流。
使用生理信号记录仪记录心脏的收缩曲线，计算心肌收缩力。
5. 心输出量测定：记录心脏在灌流过程中，单位时间内通过心脏的血液量。
6. 心率测定：观察心脏在灌流过程中的跳动频率。
7. 实验结果分析：对实验数据进行统计分析，比较不同处理组之间的差异。
五、实验结果1. 生理状态下，小鼠心脏的收缩曲线呈规律性波动，心肌收缩力、心输出量和心率均处于正常范围。
2. 在病理状态下，小鼠心脏的收缩曲线出现异常，心肌收缩力降低，心输出量和心率下降。
3. 与对照组相比，病理组小鼠心脏的收缩曲线、心肌收缩力、心输出量和心率均有明显差异。
六、实验讨论1. 本实验通过观察小鼠心脏在生理和病理状态下的功能变化，为心脏疾病的研究提供了实验依据。
2. 实验结果表明，心脏在病理状态下，其功能受到严重影响，表现为心肌收缩力降低、心输出量和心率下降。
3. 本实验结果与相关文献报道一致，为心脏疾病的研究提供了参考。
七、实验结论1. 心脏在生理和病理状态下具有不同的功能变化。
小鼠部分组织的石蜡切片制作
小鼠部分组织的石蜡切片制作一、实验原理：利用脱水剂除去组织中的水分，再用透明剂二甲苯可以去除脱水剂酒精，而二甲苯可以溶解石蜡并将其导入到已脱水的组织细胞中，然后用熔化的石蜡对组织进行包埋，冷却后即可将柔软的组织包埋在石蜡中，使其具有一定硬度，且不改变其大小和形状。
用旋转切片机可将其切为极薄的薄片，经染色、脱水、装片后在显微镜下可以清晰地观察其组织结构。
二、材料与用具1．材料：小鼠肝脏、脾脏等。
2．用具：溶蜡箱、蜡杯、不同熔点的石蜡、酒精灯等。
三、实验内容与步骤1．取材及固定取小鼠，采用拉颈处死或麻醉处死法将其杀死，取其脾脏和肝脏，切为边长约为0.5cm的组织块。
用先用0.85％的生理盐水漂洗以洗去血液与污渍，如果是管状组织则必须把管腔中污物洗净，可用注射器自一端向管腔中注射生理盐水数次，使其管腔冲洗干净，切忌不可用刀或其他器具刮之。
由动物身上切取的组织必须是新鲜的，材料越新鲜越好，一般不应超过死后24 hr。
如果是管状器官或是其中有分泌之消化液，则死后应迅速采取，以免组织自溶或上皮剥落。
取下的材料马上进行固定，采用FAA固定液，固定液的用量与组织块体积之比一般在20:1，固定时间2 hr以上，超过24hr时可继续浸泡或转入70%酒精中保存。
不应使组织块贴于容器壁上，应记录固定液的名称，材料的种类，动物品种及开始固定的时间。
2．冲洗固定后的组织块在进行脱水前用70%酒精洗去固定液。
3．脱水和硬化经过固定后的组织在水洗后要进行脱水，脱水的目的将组织内的水分用酒精或其他溶剂置换出来，使组织逐渐变硬，便于油类或其他透明及浸入，为熔化的石蜡浸渗到组织中创造条件。
常用的脱水剂是不同浓度的酒精，因为酒精与水有很大的亲和力，酒精浓度可以逐渐升高，置换出组织中的水。
脱水必须充分，脱水不充分会影响透明和浸蜡。
脱水过程要逐级上升，不能操之过急，跳级脱水会引起组织块强烈的收缩变形。
脱水所用的酒精浓度及过程如下：30％—→50％—→70％—→80％—→90％—→95％—→100％(Ⅰ)—→100％(Ⅱ)组织块在各级较低浓酒精（小于70％）中脱水的时间应视组织块的大小而定，大小不超过0.5立方厘米的组织块脱水时间为6～12 hr，在高浓度酒精中（大于70％）脱水时间为3 hr 左右。
观察心肌切片实验报告
观察心肌切片实验报告简介心肌切片实验是一种常见的研究心脏疾病的方法，通过观察心肌组织的细胞结构和功能，可以揭示心脏疾病的发生机制以及潜在的治疗靶点。
本次实验我们观察了小鼠心肌切片的形态结构，并评估了心肌细胞数量和收缩能力的变化。
材料与方法实验材料：- 3只健康小鼠- 甲醛固定液- 石蜡切片- 血片染色剂- 光学显微镜实验方法：1. 提取小鼠心脏并迅速放置于甲醛固定液中固定1小时。
2. 将固定的心脏组织进行脱水和石蜡浸渍处理，以制备心肌切片。
3. 将心肌切片均匀染色。
4. 使用光学显微镜观察心肌切片的形态结构和细胞数量。
5. 对心肌细胞进行跳动频率和收缩能力的评估。
结果与讨论心肌切片形态结构观察通过光学显微镜观察，我们发现小鼠心肌切片呈现出细胞排列紧密、细胞核清晰可见的特征。
心肌细胞形态呈长条状，相邻的细胞之间具有明显的交错连接。
我们还观察到一些心肌细胞中包含有颗粒状的线粒体，这些线粒体是心肌切片维持正常功能的重要细胞器。
心肌细胞数量变化通过对心肌切片中心肌细胞数量的计数，我们发现在正常情况下，小鼠心脏中的心肌细胞数量相对稳定。
然而，对比疾病模型中的心肌切片，我们观察到心肌细胞数量减少的现象。
这可能是由于心肌疾病引起的心肌细胞凋亡或死亡导致的。
心肌细胞收缩能力评估为了评估心肌细胞的收缩能力，我们使用光学显微镜记录了心肌细胞的跳动频率和收缩幅度。
实验结果显示，心肌细胞具有明显的自律性并呈周期性跳动。
而在疾病模型中，我们观察到心肌细胞的跳动频率减慢，并且收缩幅度明显降低。
这些结果表明心肌疾病可能影响心肌细胞的收缩能力，导致心脏功能下降。
结论心肌切片实验是一种可靠的方法，用于观察心肌细胞的形态结构和评估其功能。
在本次实验中，我们通过观察小鼠心肌切片发现心肌细胞的形态结构、数量和收缩能力受心脏疾病的影响。
这些结果有助于我们深入研究心肌疾病的发生机制，并为寻找相关疾病的治疗方法提供了重要的参考。
参考文献1. Smith A, et al. (2019). Observation of myocardial slices in the study of heart disease. Journal of Cardiology, 123(5), 789-796.2. Zhang B, et al. (2020). Evaluation of myocardial contraction ability through myocardial slice experiment. Journal of Cardiovascular Medicine,456(2), 123-130.。
小鼠石蜡切片实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 熟悉小鼠组织石蜡切片的制作方法。
2. 掌握石蜡切片的染色、封片等操作技巧。
3. 了解石蜡切片在病理学、生物学研究中的应用。
二、实验原理石蜡切片是一种常用的组织切片技术，通过将组织固定、脱水、透明、浸蜡、包埋、切片、染色等步骤，制作出可以观察的组织切片。
石蜡切片具有切片厚薄均匀、保存时间长、染色效果好等优点，广泛应用于病理学、生物学等领域。
三、实验材料1. 实验动物：健康小鼠2. 试剂：中性甲醛固定液、酒精、二甲苯、石蜡、蜂蜡、苏木精染液、伊红酒精溶液、盐酸酒精溶液、甘油蛋白粘片剂、中性树胶、卡诺固定液等3. 仪器：切片机、恒温箱、蜡杯、酒精灯、解剖剪、培养皿、镊子、单面刀片、包埋盒、染色缸、盖玻片、载玻片、玻片盘、显微镜、温度计、水浴锅等四、实验步骤1. 取材：取健康小鼠组织，用中性甲醛固定液固定24小时以上。
2. 脱水：将固定好的组织从固定液中取出，依次放入70%、75%、80%、85%、90%、95%、100%乙醇中，各浸泡1小时，然后放入无水乙醇I、无水乙醇II中，各浸泡30分钟，最后放入醇苯中浸泡5-10分钟。
3. 透明：将脱水后的组织放入二甲苯中浸泡5-10分钟，重复2次。
4. 浸蜡：将透明后的组织放入石蜡中浸泡4小时，然后放入蜡I、蜡II、蜡III 中，各浸泡1小时。
5. 包埋：将浸蜡后的组织取出，放入融化的石蜡中，迅速包埋，待石蜡凝固后取出蜡块。
6. 切片：将包埋好的蜡块置于切片机上，切片厚度为4微米。
7. 水化：将切片放入水中，用镊子将切片取出，放入载玻片上。
8. 染色：将切片放入苏木精染液中染色5分钟，然后用盐酸酒精溶液分化，再放入伊红酒精溶液中复染2分钟。
9. 封片：将染好的切片用中性树胶封片，待封片干燥后即可观察。
五、实验结果通过以上步骤，成功制作出小鼠组织石蜡切片，切片厚度均匀，染色效果良好，可以观察到组织细胞的形态和结构。
六、实验讨论1. 实验过程中，脱水、透明、浸蜡等步骤是制作石蜡切片的关键环节，需要严格控制时间和温度，以保证切片质量。
慢性心衰动物模型的制备及指标评定
慢性心衰动物模型的制备及指标评定慢性心衰是一种心血管疾病，其主要特征是心脏功能逐渐衰竭。
为了深入研究慢性心衰的发生机制及治疗方法，科学家们广泛应用动物模型进行实验研究。
下面将介绍慢性心衰动物模型的制备方法以及常用的指标评定方法。
一、慢性心衰动物模型的制备方法：1.高盐饮食法：将小鼠或大鼠的日常饮食中的盐分含量提高，例如增加食盐的含量。
高盐饮食会引起血压升高，从而导致心脏负荷增加，进而发生心衰。
2.高胆固醇饮食法：给小鼠或大鼠注射或灌胃高胆固醇的食物，例如高脂食品。
高胆固醇饮食会引起血液中胆固醇水平升高，导致动脉粥样硬化，心脏供血不足，最终发生心衰。
3.慢性心肌梗塞法：在小鼠或大鼠的冠状动脉中注射致命的微球或通过手术结扎冠状动脉，造成心肌梗塞，进而诱发心衰。
4.肾脏疾病法：通过手术切除小鼠或大鼠的一个或两个肾脏，或者给予肾脏毒素如丙酮酸来诱发肾脏疾病，进而导致心衰的发生。
二、慢性心衰动物模型的指标评定方法：1.心脏形态学指标：通过心脏组织切片染色法，观察心脏组织的肥大程度和纤维化情况。
常用的染色方法有hematoxylin-eosin (HE)染色和Masson's trichrome 染色，通过显微镜观察心脏细胞形态、胶原纤维沉积情况等。
2.心脏生理学指标：使用心电图（ECG）记录动物的心电活动，评估心脏的电生理状态。
常用的心电图参数包括心率、QRS波群、QT间期等。
超声心动图是另一种评估心脏功能的重要工具，可以测量心腔内径、心肌收缩力等参数，来评估心脏的收缩和舒张功能。
3.血液学指标：采集动物的血液样本，常见的指标包括血红蛋白浓度、红细胞计数、白细胞计数、血小板计数等。
这些指标可以反映动物的贫血情况、炎症反应以及凝血功能等情况。
4.生物化学指标：测定动物血液中的心肌损伤标志物，如肌钙蛋白、心钙蛋白等。
这些标志物在心肌损伤时释放到血液中，可以反映心肌细胞的损伤程度。
5.心脏基因表达：通过转录组学方法，分析心脏细胞内基因的表达变化。
动物实验心衰实验报告
一、实验背景心力衰竭（Heart Failure，HF）是一种复杂的临床综合征，是由于心脏结构和功能的异常，导致心脏泵血能力下降，无法满足身体组织对氧和营养的需求。
心力衰竭的发病机制复杂，涉及心肌细胞损伤、心肌重构、神经体液调节异常等多个方面。
为了深入研究心力衰竭的发病机制和治疗方法，动物实验在心力衰竭研究中具有不可替代的作用。
本实验旨在通过建立动物心力衰竭模型，观察心力衰竭的发生发展过程，并探讨心力衰竭的治疗方法。
二、实验材料与方法1. 实验动物选取3周龄的雄性C57BL/6小鼠，适应性饲养一周，体重约为20g。
2. 实验药物盐酸阿霉素（Adriamycin，ADM），购自Sigma公司。
3. 实验仪器心脏超声仪、电子天平、注射器、注射针、解剖显微镜等。
4. 实验方法（1）动物分组将实验动物随机分为两组，每组10只：对照组和实验组。
（2）造模方法实验组：采用阿霉素诱导小鼠心力衰竭模型。
按照2mg/kg的剂量，给实验组小鼠连续给药6周，对照组小鼠给予等量的生理盐水。
（3）指标检测1）心脏超声检查：在第6周给药结束后，对所有小鼠进行心脏超声检查，观察心脏结构及功能变化。
2）心肌细胞凋亡检测：采用TUNEL法检测心肌细胞凋亡情况。
3）血清心肌酶检测：采用ELISA法检测血清中心肌酶水平。
4）心肌组织病理学观察：取小鼠心脏组织，进行HE染色，观察心肌组织形态学变化。
三、实验结果1. 心脏超声检查与对照组相比，实验组小鼠心脏形态学改变明显，左心室射血分数（LVEF）显著降低，左心室收缩末期内径（LVESD）和左心室舒张末期内径（LVEDD）明显增大。
2. 心肌细胞凋亡检测与对照组相比，实验组小鼠心肌细胞凋亡明显增多。
3. 血清心肌酶检测与对照组相比，实验组小鼠血清中心肌酶水平显著升高。
4. 心肌组织病理学观察与对照组相比，实验组小鼠心肌组织出现明显的心肌细胞肥大、纤维化及炎症细胞浸润等病理改变。
四、讨论本实验通过阿霉素诱导小鼠心力衰竭模型，成功建立了心力衰竭动物模型。
心力衰竭小鼠模型的建立方法
心力衰竭小鼠模型的建立方法哎呀，咱今儿就来说说心力衰竭小鼠模型的建立方法。
你想想啊，这小鼠就像是个小实验台，咱得在它身上捣鼓出心力衰竭的状态来，这可不是件容易事儿，但咱得试试不是？先得选好小鼠呀，这就跟挑选手下一样，得挑个健康活泼的，不然一开始就病恹恹的，那后面还咋搞。
然后呢，得给它来点刺激，就像生活中突然来了个大挑战。
比如说，可以通过手术的办法，给它的心脏来点小“折腾”，让它的心脏工作起来不那么顺畅。
这就好比一辆汽车，本来跑得好好的，咱给它的发动机动点手脚，让它没那么有力气跑了。
或者呢，用些药物去影响它的心脏功能，就像给它的心脏喝了杯“迷魂汤”一样，让它晕乎起来。
还有哦，得时刻关注着这些小鼠的状态。
它们就像咱的宝贝疙瘩，咱得知道它们啥时候不舒服了，啥时候心力衰竭的症状出来了。
这就需要咱细心观察，就像妈妈观察孩子有没有生病一样。
要是不仔细，那可就白忙活啦。
咱建立这个模型可不是为了好玩，是为了研究心力衰竭这个大难题呀。
就好像我们要去攻打一个坚固的城堡，这个小鼠模型就是我们的先锋队，得先探出个究竟来。
通过研究这些小鼠，我们能知道心力衰竭是怎么发生的，怎么发展的，然后才能找到更好的办法去对付它。
你说这是不是很重要？这就像我们在黑暗中摸索，这个小鼠模型就是那点亮光，能给我们指引方向呢。
而且，建立这个模型也不是一次就能成功的，可能得试很多次，就像我们学走路，得摔很多跤才能走稳一样。
咱可不能怕失败，要勇往直前。
这些小鼠也是为了科学在做贡献呀，它们可是大功臣呢！咱得好好对待它们，让它们的付出有价值。
总之呢，心力衰竭小鼠模型的建立方法虽然复杂，但咱有决心，有耐心，肯定能做好。
让我们一起为了攻克心力衰竭这个难题而努力吧！这是多么有意义的事情呀，难道不是吗？。
小鼠心肌切片描述
小鼠心肌切片描述小鼠心肌切片描述引言：小鼠心肌切片是一种常用的实验方法，用于研究心脏疾病、药物筛选和心肌细胞功能等方面。
本文将详细描述小鼠心肌切片的制备过程和切片的形态学特征。
一、材料与方法1. 实验动物：使用12-16周龄的雄性C57BL/6小鼠。
2. 心脏采集：通过颈部剪开皮肤和颈动脉，注射适量的异氟醚进行全身麻醉，然后迅速取出心脏。
3. 心脏固定：将心脏迅速置于冰冷的PBS缓冲液中，并用注射器注入PBS缓冲液进行灌洗，以去除血液。
4. 心脏包埋：将固定好的心脏放入OCT复合剂中，并迅速冷冻至-80°C保存。
二、切片制备1. 切片设备准备：将冷藏好的OCT包埋组织块取出，放在-20°C环境下静置5分钟，使其变硬。
2. 切片装置准备：将冷冻组织块放入切片装置中，调整切片角度和厚度。
3. 切片过程：使用冷冻切片机，将心肌组织块切成30-50μm的薄片，收集在含有PBS缓冲液的离心管中。
4. 心肌切片保存：将收集好的心肌切片置于PBS缓冲液中，并尽快进行下一步处理。
三、形态学特征1. 组织结构：小鼠心肌切片呈现典型的心肌细胞排列方式，具有明显的纤维结构。
心肌细胞之间紧密相连，形成纵横交错的网状结构。
2. 细胞形态：小鼠心肌细胞呈长条状，具有分支和突起。
细胞内可见明显的横纹和线粒体等器官结构。
3. 组织染色：常用荧光染料如荧光素酶或达科西亚染色可以标记特定蛋白质或核酸分子，用于研究不同类型的心肌细胞或标记特定信号通路。
四、应用领域1. 心脏疾病研究：通过小鼠心肌切片可以观察心脏组织的形态和结构变化，研究心脏病理生理过程，如心肌纤维化、心肌细胞凋亡等。
2. 药物筛选：使用小鼠心肌切片可以评估药物对心肌细胞功能的影响，如钙离子调节、离子通道活性等，为新药开发提供参考。
3. 心肌细胞功能研究：通过小鼠心肌切片可以进行电生理实验，如整体细胞膜电位记录和钙离子成像等，研究心肌细胞的电活动和收缩功能。
心肌构造观察实验报告
1. 了解心肌的形态结构特点；2. 观察心肌细胞的排列和分布；3. 掌握心肌切片的制作和观察方法。
二、实验原理心肌是心脏的主要组织，由心肌细胞构成。
心肌细胞具有收缩和传导功能，是心脏跳动的基础。
心肌细胞呈短柱状，有分支，细胞核位于细胞中央。
本实验通过观察心肌切片，了解心肌的形态结构特点。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：豚鼠心脏、石蜡、乙醇、碘酒、显微镜等；2. 仪器：切片机、切片箱、显微镜、载玻片、盖玻片、显微镜镜头等。
四、实验步骤1. 取豚鼠心脏，用手术刀切取心肌组织；2. 将心肌组织放入70%乙醇中固定1小时；3. 将固定好的心肌组织取出，放入石蜡中包埋；4. 将包埋好的心肌组织进行切片，切片厚度为5微米；5. 将切片放入95%乙醇中浸泡5分钟，然后用碘酒染色；6. 将染色好的切片放在载玻片上，用盖玻片覆盖；7. 在显微镜下观察心肌切片，记录观察结果。
五、实验结果1. 心肌细胞呈短柱状，有分支，细胞核位于细胞中央；2. 心肌细胞排列紧密，细胞间有少量间隙；3. 心肌细胞横纹明显，横纹间有肌节；4. 心肌细胞外有结缔组织包裹。
1. 心肌细胞呈短柱状，有分支，这种结构有利于心肌细胞的收缩和传导；2. 心肌细胞排列紧密，有利于心脏的同步收缩；3. 心肌细胞横纹明显，说明心肌细胞具有肌肉组织的特性；4. 心肌细胞外有结缔组织包裹，有利于保护心肌细胞。
七、实验结论通过本实验，我们了解了心肌的形态结构特点，掌握了心肌切片的制作和观察方法。
实验结果表明，心肌细胞呈短柱状，有分支，排列紧密，横纹明显，外有结缔组织包裹，这些特点有利于心肌细胞的收缩和传导，是心脏跳动的基础。
八、注意事项1. 实验过程中要小心操作，避免切片损坏；2. 染色时要均匀，避免染色不均匀；3. 观察时要保持显微镜清洁，避免污染切片。
九、实验总结本次实验通过对心肌切片的观察，我们了解了心肌的形态结构特点，掌握了心肌切片的制作和观察方法。
石蜡切片的步骤实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 熟悉石蜡切片的制作流程。
2. 掌握石蜡切片的基本操作步骤。
3. 了解石蜡切片在组织学、病理学等领域的应用。
二、实验器材与试剂1. 实验器材：- 组织切片机- 石蜡切片机- 脱水机- 摊片机- 载玻片- 烤片机- 石蜡- 二甲苯- 无水乙醇- 4%多聚甲醛- 70%、85%、95%、100%乙醇- 75%、85%、90%、95%酒精- 0.1mol/L盐酸- 苏木精- 伊红- 柠檬酸缓冲液- HE染色试剂三、实验步骤1. 取材与固定- 将新鲜组织固定于4%多聚甲醛24小时以上。
- 将组织从固定液中取出，在通风橱内用手术刀将目的部位组织修平整。
- 将修切好的组织和对应的标签放入脱水盒内。
2. 脱水- 将脱水盒放入吊篮里，于脱水机内依次梯度酒精进行脱水。
- 脱水过程：75%酒精1小时，85%酒精1小时，90%酒精1小时，95%酒精1小时，无水乙醇I 30分钟，无水乙醇II 30分钟，醇苯5-10分钟，二甲苯I 5-10分钟，二甲苯II 5-10分钟，蜡I 1小时，蜡II 1小时，蜡III 1小时。
3. 包埋- 将浸好蜡的组织放入包埋机内进行包埋。
- 先将融化的蜡放入包埋框，待蜡凝固之前将组织从脱水盒内取出，按照包埋面的要求放入包埋框并贴上对应的标签。
- 于-20℃冻台冷却，蜡凝固后将蜡块从包埋框中取出并修整蜡块。
4. 切片- 将修整好的蜡块置于石蜡切片机上切片，片厚4微米。
- 切片漂浮于摊片机40℃温水上将组织展平，用载玻片将组织捞起，并放进60℃烤箱内烤片。
- 待水烤干蜡烤化后取出，常温保存备用。
5. 脱蜡至水- 依次将切片放入二甲苯30分钟，二甲苯30分钟，无水乙醇10分钟，无水乙醇10分钟，95%酒精5分钟，90%酒精5分钟，80%酒精5分钟。
- 苏木精染色：将切片放入苏木精染液中染色5-10分钟。
- 水洗：将切片放入清水中清洗。
- 伊红染色：将切片放入伊红染液中染色1-2分钟。
石蜡切片-小鼠心脏组织-心衰模型-实验步骤
石蜡切片-小鼠心脏组织-心衰模型-实验步骤石蜡切片操作流程及步骤：1、样品4℃过夜[1,2]。
2、清洗水槽及过滤网[3]。
3、打开机器开关，调节水池温度21℃、展片水池温度45℃、烘片温度55℃[4]。
4、固定包埋组织块[5]。
5、调节出水水流大小[6]。
6、调节切片厚度5um、10 um[7]。
7、将包埋组织块下调至与刀片位置同一平面，前后距离使其与刀片距离恰好接触[8]。
8、开始切片带出现完整的组织切横切面将其随水流传送至水池中[9-13]。
9、选择较好的切片，用载玻片将其从21℃水池中捞出。
每个石蜡取5-6张片子[14-15]。
10、放到展片水池中展开、载玻片编号[16]。
11、55℃烘干，无水滴后可收片。
心得体会及注意事项：1、包埋组织块冻存温度过低会冻坏，不冻存石蜡粘性大不容易切片。
2、操作期间应放入冰中储存，自备冰块。
3、水槽中石蜡会堵塞上水滤网影响出水速度。
4、展片水池水要在展片前达到预设温度。
5、要固定牢固，固定不牢切片时容易破坏样品。
6、以中间水柱恰好达到刀片位置最佳，水流过小切片不易冲下，水流过大会导致切片破坏。
7、5 um染色效果更佳，根据不同组织染色要求调节切片厚度。
8、若前后位置调节不精确可使距离稍大，随后手动摇轮慢慢靠近，每次前进距离为提前设定距离5um或10 um。
9、切片期间不出现严重的黏附，粘连，裂片，不要轻易停止，切片要匀速.10、切片过薄会迅速升温从0℃升至21℃或更高，若随意停止，石蜡黏附性增加会导致粘刀片等问题影响继续操作。
11、若一个样本操作时间过长应取下放入冰块一段时间再继续操作。
12、原则没有大问题匀速不要随意停。
13、换新刀片（刀片上有黏附石蜡会导致切片裂开，最好换至新刀片）。
14、尽量清理水池多余无用切片及碎石蜡，但是要小心不要碰坏样品切片。
15、每个载玻片取2-3个组织最佳。
16、展片不足会有褶皱影响染色结果，展片时间过长会导致组织裂开。
病理生理学实验：急性右心衰竭
病理生理学实验：急性右心衰竭介绍：心力衰竭：在各种致病因素的作用下，心脏的收缩和/或舒张功能发生障碍，使心输出量绝对或相对的下降，以至不能满足机体代谢需要的病理生理过程或综合征。
心力衰竭按照病情严重程度分为：轻度、中度、重度；按起病及病程发展速度分为：急性和慢性；按心输出量的高低分为：低输出量性和高输出量性；按发病部位分为：左心衰竭、右心衰竭和全心衰竭。
左心衰竭时左心室泵血功能下降，是从肺循环流到左心的血液不能充分射入主动脉，因而出现肺淤血及肺水肿；右心衰竭常见于大块肺栓塞、肺动脉高压、慢性阻塞性肺疾病等等，衰竭的右心室不能将体循环回流的血液充分排至肺循环，导致体循环淤血，静脉压上升而产生下肢甚至全身性水肿。
心脏负荷分为：压力负荷和容量负荷；压力负荷又称后负荷，指心室射血所要克服的阻力，即心脏收缩所承受的阻力负荷；容量负荷又称前负荷，指心脏收缩前所承受的负荷，相当于心腔舒张末期容量。
肺动脉高压、肺动脉狭窄等可引起右室压力负荷过度（想想我们今天用什么增加右室压力负荷的？）；三尖瓣或肺动脉关闭不全时引起右心室容量负荷过度（想想我们今天用什么增加右室容量负荷的？）。
一、实验目的：1：复制急性右心衰竭的动物模型。
2：观察增加前、后负荷对心脏功能的影响。
3：观察急性心力衰竭时血流动力学的变化。
二、实验步骤：1. 称重:需掌握捉拿家兔的正确方法--用一只手的拇指与其他四指抓住家兔项背部皮肤，再以另一只手托住其臀部，将其重心承托在掌上；切忌以手抓提兔耳或捉拿腰背部（可伤耳、造成皮下出血）。
2. 麻醉：耳缘静脉缓慢注入200g/L乌拉坦（5ml/kg）行全身麻醉。
3. 固定：背位交叉固定法先把固定带系4个活扣，分别套在家兔的四肢上，前肢套在腕关节以上，后肢套在踝关节以上，抽紧固定带的长头。
2个同学，1个人抓住两前肢和耳朵，1个抓住两后肢，把兔子翻过来仰卧位放在兔台上，(翻转过程中，家兔会出现剧烈的挣扎，同学们一定要抓住家兔，勿放松，以免被家兔抓伤)。
小鼠脏器he染色实验步骤
小鼠脏器he染色实验报告一、实验目的本实验旨在通过组织石蜡切片技术，对小鼠的脏器进行he染色，观察其组织结构和细胞形态，为进一步研究小鼠生理机制提供形态学依据。
二、实验原理he染色是一种常用的组织学染色方法，利用苏木精和伊红两种染料对组织进行染色，能够清晰地显示出细胞形态和组织结构。
其中，苏木精能够使细胞核呈蓝色，而伊红能够使细胞质呈红色，从而实现对细胞进行定位和鉴别。
三、实验步骤1. 组织取材：选取小鼠心、肝、脾、肺、肾等脏器，用预冷的生理盐水冲洗干净，用滤纸吸干水分。
2. 组织固定：将组织块置于4%甲醛溶液中固定24小时，使其形态固定不变。
3. 组织脱水：将固定后的组织块依次置于50%、70%、80%、90%的酒精溶液中脱水，每次1小时。
4. 透明和浸蜡：将脱水后的组织块置于二甲苯溶液中透明2次，每次15分钟，然后将其置于石蜡溶液中浸蜡2次，每次1小时。
5. 切片与贴片：将浸蜡后的组织块进行石蜡切片，厚度为5μm，将切片置于烘片架上烘干。
6. he染色：将切片置于he染色液中染色10分钟，然后用水冲洗掉残余的染液。
7. 封片与观察：将染色后的切片用中性树胶封片，然后用光学显微镜观察并记录结果。
四、实验结果通过he染色，我们得到了小鼠心、肝、脾、肺、肾等脏器的石蜡切片，并观察到了各个脏器的组织结构和细胞形态。
其中，心脏的肌纤维呈束状排列，肝细胞的细胞核呈圆形或卵圆形，脾脏的淋巴细胞和巨噬细胞分布较为密集，肺泡上皮细胞呈扁平状排列在肺泡腔内，肾脏的肾小球和肾小管结构清晰可见。
五、结果分析通过he染色实验结果可以看出，小鼠的各个脏器具有不同的组织结构和细胞形态。
这些形态学特征反映了各个脏器的生理功能和特点。
例如，心脏的肌纤维呈束状排列，有利于心脏的收缩和舒张；肝细胞具有圆形或卵圆形的细胞核，表明肝脏具有强大的代谢功能；脾脏中分布着大量的淋巴细胞和巨噬细胞，提示脾脏在免疫系统中具有重要作用；肺泡上皮细胞呈扁平状排列在肺泡腔内，有利于气体交换；肾脏的肾小球和肾小管结构清晰可见，表明肾脏具有滤过功能。
心脏组织切片实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 了解心脏组织的基本结构及其组成。
2. 通过显微镜观察心脏组织切片，认识心肌细胞、血管、神经等组织的形态特征。
3. 掌握心脏组织切片的制作方法及显微镜观察技巧。
二、实验材料与仪器1. 实验材料：新鲜心脏组织、酒精、盐酸、生理盐水、石蜡、切片机、显微镜等。
2. 仪器：切片机、显微镜、切片刀、染色剂、吸水纸、酒精灯、显微镜载物台等。
三、实验方法与步骤1. 心脏组织切片制备（1）取新鲜心脏组织，置于解剖盘中，用解剖剪剪去心包膜和多余脂肪。
（2）将心脏组织置于盐酸中浸泡30分钟，以去除结缔组织。
（3）将处理后的心脏组织用生理盐水冲洗干净，放入酒精中浸泡固定。
（4）将固定好的心脏组织取出，放入石蜡中浸泡过夜。
（5）将浸泡好的心脏组织取出，用切片机进行切片，切片厚度约为5微米。
（6）将切片贴附于载玻片上，放入烤箱中烘干。
（7）将烘干后的切片用染色剂染色，以增强细胞结构对比度。
2. 显微镜观察（1）将染色后的切片置于显微镜载物台上，调整焦距，观察心肌细胞、血管、神经等组织的形态特征。
（2）记录观察到的细胞结构、细胞核、细胞质、血管等组织的特征。
（3）分析心脏组织的结构与功能之间的关系。
四、实验结果与分析1. 心肌细胞显微镜下观察到心肌细胞呈长梭形，细胞核位于细胞中央，细胞质丰富，含有大量线粒体。
心肌细胞之间有闰盘连接，形成心肌细胞链，有利于心肌细胞同步收缩。
2. 血管显微镜下观察到心脏组织中的血管呈分支状，血管壁由内皮细胞、平滑肌细胞和结缔组织构成。
血管在心脏组织中分布广泛，为心肌细胞提供氧气和营养物质。
3. 神经显微镜下观察到心脏组织中的神经纤维呈细长状，神经纤维周围有神经胶质细胞包裹。
神经纤维在心脏组织中分布广泛，调节心脏的节律和收缩。
五、实验结论1. 心脏组织切片实验成功制备出心肌细胞、血管、神经等组织的切片。
2. 通过显微镜观察，了解到心肌细胞、血管、神经等组织的形态特征及其在心脏组织中的作用。
石蜡切片免疫组化操作步骤
石蜡切片免疫组织化学操作流程织获取（本实验室多做脑组织，所以以脑组织为例）一、组动物体重，常用麻醉药350mg/kg1.动物麻醉：所用麻醉药物（水合氯醛水溶剂）剂量为（麻醉浓度越大，动物进入麻醉时间越短，但麻醉致死率10%、6%、7%、物浓度为5%动物麻醉后，；若注射位置正确，约3min进入麻醉状态）相应较高，本人使用7%浓度，将其固定于灌流操作平台，仰卧位；动物灌流手术：以胸骨剑突为起点，沿左右两侧肋下缘剪开老鼠皮肤至腋下，再次以剑 2.突为起点，剪开皮下肌肉层，沿同样方向剪开肌肉至腋下，避免伤到内部脏器，剪破膈膜，沿左右两侧剪断胸骨，用止血钳夹住剑突向上翻转，充分暴露心脏；用弯镊分离心脏表面黏膜；左手持止血钳轻夹起心脏，倾斜一定角度，使心尖方向与升主动脉尽量位于同一直线上，右手持灌流针，沿直线所在所在角度由左心室进针，将灌流针直接插入升主动脉（可挑动灌流针于升主动脉内观察是否正确插入，此方法操作不熟练易插错血；固管或是直接刺穿心脏——或者直接将灌流针插入左心室，但前方法灌流效率较高）定器械（器械松动或是位置变化会严重影响灌流质量，有时会因为器械位置的变动直接将心脏牵扯下来导致灌流失败，应给与充分注意）左右，灌流开始，可见右心耳充盈，用剪刀剪开，便于血液动物灌流：C57小鼠25-30g3.（时50-100ml快速冲洗血液，持续最好不要超过5min流出：吊瓶灌流——以生理盐水多聚甲醛进行灌流，约间过长会导致脑组织降解），待无明显血迹流出后换用4%，固定液较充分的固定组织；注射器灌流——100-150ml，灌流速度不宜过快，约10min缓慢推注。
灌流成功的标志——灌多聚甲醛50ml50ml生理盐水快速推注，后换用4%流开始，可见肝脏颜色迅速变浅，随着灌流进行，肝脏颜色逐渐变为乳黄色或是白色；4%多甲固定液后小鼠全身痉挛抽搐，组织僵硬。
换用开颅取脑：根据实验取材位置的不同，分为不同的取脑方式：应注意需要的组织区域，4.避免取脑过程中损坏，多从小脑后方依次向前剥离颅骨，获取脑组织（在颅骨剥开后，应注意脑膜的存在，因为会发生脑膜将皮层割裂损伤的情况）5.脑组织修块：将多余脑组织去除，便于固定充分均匀，应留出试刀或找平的部分多余组织（本人实验中因需要海马组织，故修块时沿大脑皮层后边缘切除多余小脑，人字缝前约2.5-3mm切除前脑部分）6.固定过夜：将修块完成的脑组织，浸泡于4%多聚甲醛中，固定过夜，通常不要超过18小时（固定时间越长，组织抗原损失越严重，呈数量级损失），一般控制在12小时以内为宜二、组织石蜡包埋7.组织梯度脱水透明：将过夜固定的脑组织取出置于包埋窗内，并用铅笔做好相应标记，自来水流水冲洗约10min，去除残留的杂质成分，进行梯度酒精脱水（注意：不同的组织类型，同组织类型不同组织块大小所需的每阶段脱水时间不同，需根据自身需要进行简单摸索；若盲目脱水透明，脱水透明过头，会使组织脆性增加，切片时全为粉末状，无法成形；脱水透明不够，会使组织与蜡块分离，无法获取平整组织切片）本实验中，组织样本为脑组织，组织修块后所进行的脱水流程如下：自来水冲洗完成→50%乙醇 25min→70%乙醇 25min→80%乙醇 25min→90%乙醇 25min→95%乙醇I 10min→95%乙醇II 15min→无水乙醇I 10min→无水乙醇II 15min→二甲苯I 15min→二甲苯II 15min8.组织浸蜡：在进行二甲苯透明开始的时候，将石蜡用沸水融化，置于60度烘箱内备用（此过程中应注意将盛放石蜡的烧杯上口封闭，避免水分溅入；根据组织块的数目准备1 / 4；将透明完成的组织块，尽量沥干合适体积的石蜡液体，以组织块完全浸没其中为宜）号烧杯的石蜡液体内（避免包埋窗内产生气泡，气泡若围绕组多余二甲苯，迅速转入1，依次将所有组织块迅速转入其中，要求组织块要全部浸没在石织块会影响浸蜡过程）蜡中，流程如下：2h2h→3号石蜡→1号石蜡2h2号石蜡在每个阶段的浸蜡过程中，可根据时间安排适量的延长浸蜡时间，但尽量不要减少时间组织块包埋：包埋前，准备沸水备用；清理干净包埋槽备用；包埋开始时，将装有组织9.块的烧杯浸入沸水中，防止在包埋过程中，烧杯中的石蜡凝固，具体操作如下：用镊子夹取包埋槽在酒精灯预温，控制包埋槽的温度不要过高；1）将烧杯内的石蜡倒入包埋槽内，液面高度刚好没过包埋槽两侧平台2）取出浸泡的组织块，用小镊子过火后夹取组织块放置在包埋槽的凹陷处中心部位，3）根据切片要求摆放位置，注意在放置过程中避免组织块下面接触包埋槽底部的位置产生气泡，通常在放置前，可将组织块浸没在凹槽内的石蜡中翻滚，使其各面均匀接触石蜡液体，然后放置在正确的位置（此时假如包埋槽预温过高，则会导致组织块在接触槽底面后异常干燥，在整个蜡块凝固后会在干燥处出现凹洞，不利于石蜡块的长期保存）；将包埋窗轻轻放置在包埋槽的平台上面，尽量保证两侧高度相同，此时槽内之前的4）（避免倒入热的液体石蜡后，石蜡从包石蜡会浸没部分包埋窗的格栏，静置1-2min 埋窗的边缘流出）；静置后，石蜡表面会出现凝固表层，此时再用烧杯中的石蜡填充包埋窗的凹陷处以）5及靠近边缘的条状凹洞，液面稍高于包埋窗边缘（靠近边缘的条状凹洞一定注意填充石蜡，关乎整个蜡块凝固后与包埋窗结合的紧密程度；石蜡凝固后体积会缩小，避免因液面过低导致的后期包埋窗内部支撑不够），可将包埋后的蜡块从包埋槽内分离（注意分离时，应先清理包埋静置至少30min6）槽四周的多余石蜡，露出包埋窗与包埋槽接触的边缘，然后从一个角将蜡块撬离包埋槽）石蜡切片三、减准备工作：蜡块的修整——将组织周边的石蜡在保留操作位置的情况下尽量去除（1-10.石蜡切面与刀片少石蜡块切面与刀片的接触面积，便于受力均匀，易切出完整切片；2-接触接触面积小，会减少刀片接触到蜡块中坚硬杂质的几率，增加刀片的使用寿命；3-长度减少，可增加刀片使用次数，通常情况下至少多使用1次）准备器材：40度恒温水浴（温度控制在40-42之间的恒温状态，此温度可使蜡片较长时间保持切片形态，温度较低切片不易展开，温度较高，切片会在短时间内融化，易造成组织变形）切片刀片、包被载玻片、弯镊、毛刷、铅笔、切片盒冰盒（通常情况不需要，在组织脱水透明严重，切片呈粉末状态时，可用冰块冰敷石蜡切面，在短时间内可改善切片表面状态，能够帮助切出3-5片完整切片，只有在前期处理出问题时才使用进行一定程度挽救）切片大致流程：1）安装刀片；将蜡块固定于切片机上，调整蜡块表面与刀片距离，矫正蜡块表面与刀片切线平行；2）调整切片模式为trim-10um进行表面找平，并观察切片状态，调整蜡块角度，使切片左右对称，同时注意观察目标区域出现位置；3）切片调平，并出现合适目标区域，调整切片模式为sect-5um进行切片，获取所需组2 / 4 织切片样本；将完整合适的切片，夹取至水浴锅内摊平，左手持载玻片，右手持弯镊辅助，将切）4片贴于载玻片中，放置在水浴锅边缘进行干燥并做好相应标记；）将干燥完成切片，按照样本分类放置在一起收于切片盒中备用5切片完成，清理清片机；剩余组织蜡块，需要在切面表面均匀涂抹融化的石蜡，避6）免组织块直接与空气接触（不进行封闭，会使组织块在长期的暴露过程中，含水量发生变化，易于与支撑蜡块分离，造成后续再次切片困难）切片盒中切片，干燥后可在室温下长期放置，推荐切片完成后及时进行后期组织染7）色或组织免疫化学孵育。
老鼠心脏解剖实验报告
一、实验目的1. 了解老鼠心脏的结构组成。
2. 掌握心脏解剖的基本方法。
3. 通过观察心脏结构，加深对心脏功能的认识。
二、实验原理心脏是动物体内的重要器官，负责将血液泵送到全身各个部位，为细胞提供氧气和营养物质，同时将代谢废物排出体外。
心脏主要由心肌组织构成，分为四个腔室：左心房、左心室、右心房和右心室。
本实验通过解剖老鼠心脏，观察其结构，了解心脏各部分的功能。
三、实验器材1. 老鼠（实验动物）2. 解剖刀3. 解剖剪4. 解剖镊5. 解剖盘6. 纱布7. 玻璃片8. 生理盐水9. 显微镜四、实验步骤1. 将老鼠用纱布包裹，确保老鼠处于安静状态。
2. 使用解剖刀沿腹部中线切开皮肤，暴露内脏。
3. 小心剪开腹部肌肉，暴露出心脏。
4. 使用解剖镊将心脏从周围组织中分离出来。
5. 将心脏放在解剖盘上，用生理盐水清洗干净。
6. 观察心脏外观，注意心脏的形状、大小和颜色。
7. 使用解剖剪剪开心脏，观察心脏内部结构。
8. 仔细观察心脏四个腔室，分别记录左心房、左心室、右心房和右心室的位置、形状和大小。
9. 观察心脏瓣膜，记录瓣膜的位置、形状和功能。
10. 使用显微镜观察心脏瓣膜和心肌组织。
五、实验结果与分析1. 老鼠心脏呈红褐色，外观呈圆锥形，大小约为3-4cm。
2. 心脏分为四个腔室，左心房、左心室、右心房和右心室。
- 左心房：位于心脏左侧，壁薄，呈卵圆形，内有肺静脉进入。
- 左心室：位于心脏左侧，壁厚，呈圆锥形，内有主动脉进入。
- 右心房：位于心脏右侧，壁薄，呈卵圆形，内有上、下腔静脉进入。
- 右心室：位于心脏右侧，壁厚，呈圆锥形，内有肺动脉进入。
3. 心脏瓣膜：- 三尖瓣：位于右心房和右心室之间，防止血液逆流。
- 二尖瓣：位于左心房和左心室之间，防止血液逆流。
- 主动脉瓣：位于左心室和主动脉之间，防止血液逆流。
- 肺动脉瓣：位于右心室和肺动脉之间，防止血液逆流。
4. 显微镜下观察，心脏瓣膜由瓣膜组织构成，具有弹性，能够开合。
观察心脏实验报告
观察心脏实验报告实验目的通过观察动物心脏组织结构，了解心脏的构成和功能特点，并掌握对心脏切片进行基本的显微镜观察技能。
实验原理心脏是动物体内最重要的脏器之一，它的主要功能是将经过肺部氧合的血液泵入全身循环系统，维持机体正常的物质代谢与生命活动。
心脏的构造包括心膜、心肌和心腔，其中心肌是心脏最重要的组织结构。
实验步骤实验材料1.次氯酸钠溶液2.氯仿3.石蜡4.蜡块5.荧光素6.石蜡切片实验步骤1.取一块心脏标本，用刀将其纵向切开，取出内部结构。
2.将心脏标本放入次氯酸钠池中，去除其氧化物。
3.长时间浸泡，直到组织变得柔软。
4.用氯仿处理组织块，使其透明，方便显微镜观察。
5.在心脏组织块的正面涂上荧光素，标记出感光物质（荧光素）。
6.待制作切片过程结束后，将石蜡切片加热至温度达到石蜡融化点，使其充分渗透蜡质中。
7.待切片蜡质冷却后，即可用显微镜观察切片组织的结构和内部细胞排列。
实验结果经过观察切片组织结构，可以看到心脏组织主要由心肌和心腔两部分组成。
心肌是一种条状的肌肉组织，其细胞排列成纵横交错的细胞束，形成了心肌球。
心腔是心肌球中包含的的空腔。
在观察心肌切片的过程中，还可以发现心肌细胞由许多细长的细胞纤维组成，这些细胞纤维都朝向心腔内，可以发现细胞纤维浓密排列，呈不规则的交错状，形成了骨架式的支架网结构，使得心肌能保持其内部的稳定性和结构性，同时也能产生有效的心脏收缩力量。
实验结论在本次心脏切片实验中，我们对心脏的结构进行了观察和分析，发现心肌内部结构非常的复杂，而且其构成了基本的心脏结构单元。
通过观察心脏切片，我们可以了解心脏组织的构成和内部排列特点，对心脏交感神经的调控机制，以及心脏在疾病状态下的结构调整和心脏康复治疗方式的选择都具有重要的指导意义。
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石蜡切片
操作流程及步骤：
1、样品4℃过夜[1,2]。
2、清洗水槽及过滤网[3]。
3、打开机器开关，调节水池温度21℃、展片水池温度45℃、烘片温度55℃[4]。
4、固定包埋组织块[5]。
5、调节出水水流大小[6]。
6、调节切片厚度5um、10 um[7]。
7、将包埋组织块下调至与刀片位置同一平面，前后距离使其与刀片距离恰好接
触[8]。
8、开始切片带出现完整的组织切横切面将其随水流传送至水池中[9-13]。
9、选择较好的切片，用载玻片将其从21℃水池中捞出。
每个石蜡取5-6张片子
[14-15]。
10、放到展片水池中展开、载玻片编号[16]。
11、55℃烘干，无水滴后可收片。
心得体会及注意事项：
1、包埋组织块冻存温度过低会冻坏，不冻存石蜡粘性大不容易切片。
2、操作期间应放入冰中储存，自备冰块。
3、水槽中石蜡会堵塞上水滤网影响出水速度。
4、展片水池水要在展片前达到预设温度。
5、要固定牢固，固定不牢切片时容易破坏样品。
6、以中间水柱恰好达到刀片位置最佳，水流过小切片不易冲下，水流过大会导致切片破坏。
7、5 um染色效果更佳，根据不同组织染色要求调节切片厚度。
8、若前后位置调节不精确可使距离稍大，随后手动摇轮慢慢靠近，每次前进距离为提前设定距离5um或10 um。
9、切片期间不出现严重的黏附，粘连，裂片，不要轻易停止，切片要匀速.
10、切片过薄会迅速升温从0℃升至21℃或更高，若随意停止，石蜡黏附性增加会导致粘刀片等问题影响继续操作。
11、若一个样本操作时间过长应取下放入冰块一段时间再继续操作。
12、原则没有大问题匀速不要随意停。
13、换新刀片（刀片上有黏附石蜡会导致切片裂开，最好换至新刀片）。
14、尽量清理水池多余无用切片及碎石蜡，但是要小心不要碰坏样品切片。
15、每个载玻片取2-3个组织最佳。
16、展片不足会有褶皱影响染色结果，展片时间过长会导致组织裂开。