马铃薯葡萄糖琼脂(PDA)培养基配制共25页

锅
原种培养基 。
2）、3）一般在菌种场或研究所应用。
优点：省时、省燃料、 效果好
灭菌设备
Ⅰ高压蒸气灭菌锅
三、菌种生产常用的设备和用具
2、灭菌设备
Ⅱ 常压灭菌锅
目前农村生产栽培种的必备设备，实际上 是一种大型蒸笼式煮灶。底部为铸铁大锅， 上部为圆形木桶，桶内装数层供放培养基的 格架。桶盖装有活络搭及密闭的橡皮圈，由 于锅内温度最高是100℃，所以灭菌时间需维 持10~12h，才能达到灭菌效果。
菌种瓶
三、菌种生产常用的设备和用具
5、接种工具
移植菌种于培养基上的工具称接种工 具，主要有以下几种：
接种针、环、刀、钩、铲、锄、枪等；
三、菌种生产常用的设备和用具 6、常用的消毒药品
⑴ 70%酒精：一般用于手、种菇表面消毒；
⑵ 0.1%升汞：常用于玻璃器皿、非金属器械 及种菇表面消毒；
⑶ 0.1%KMnO4：一般用于用具、器皿消毒；
实验一 马铃薯葡萄糖琼脂（PDA）培养基配制
一、食用菌菌种种类
人工培育的菌种有母种、原种和栽培种之分。
1）母种（一级菌种）：用孢子分离或组织分 离等培育的菌丝体称为母种。
2）原种（二级菌种）：把母种扩大到木屑、 棉籽壳等为主的培养料上的菌种称为原种。
3）栽培种（三级菌种）：由原种扩大培养成 为生产上使用的菌种称为栽培种。
4）菌种：实质上就是经过人工培养并进一步 繁殖的食用菌的纯菌丝体。
二、食用菌的制种程序
种菇
孢子分离 组织分离
接种→母种（一级） 接种→培养→原种（二级）
培养
接种→→栽培种（三级）
经过这样三级培养，食用菌菌丝数量大大增加。
一般1支试管菌种可繁殖4~6瓶原种，每瓶原种又 可扩大繁殖60~100瓶栽培种。
三、菌种生产常用的设备和用具
3、培养设备 ⑴ 培养室 ⑵ 生化培养箱
三、菌种生产常用的设备和用具
4、培养菌种的容器
母 种 ： 试 管 ， 常 用 规 格 20×180~200mm ， 18×180mm等。
菌种瓶：盐水瓶、罐头瓶
原种、栽培种 菌种袋
聚丙稀袋 聚乙稀袋
规格有：12~15×30~35 cm， 17×35~45 cm
四、母种生产技术
②综合马铃薯培养基
马 铃 薯 200g 、 葡 萄 糖 （ 或 蔗 糖 ） 20g 、 KH2PO4 2g、MgSO4 0.5g、维生素B1 10mg、 琼脂20g、H2O 1000ml、pH自然。 适合培养草菇、猴头菌、灵芝及各种食用菌菌 种分离、保藏。
四、母种生产技术
③胡萝卜葡萄糖琼脂培养基 胡萝卜2ຫໍສະໝຸດ Baidu0g、葡萄糖（或蔗糖）18~20g、
琼脂20g、H2O 1000ml、pH自然。
⑵ PDA培养基配制方法
马铃薯（去皮、去芽眼）→切成片（玉米大小）→ 称取200g＋1000mL H2O→煮沸15-20min →双层纱布 过滤→取滤液并补足1000mL＋琼脂→熔化＋其它营 养物质→调节pH（用HCl或NaOH）→分装试管→塞 上棉塞→捆扎→灭菌（高压蒸气灭菌15-30min）→制 成斜面→检查灭菌效果（即28~30℃培养2~3d）
（3） 作业
（1）每人制5支试管斜面。 （2）什么叫食用菌菌种？它又有哪些类型？ （3）食用菌菌种生产常用的设备和用具有哪些？ （4）写出食用菌的制种程序。 （5）常用的消毒药品有哪些？
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母种
原种和 栽培种
三、菌种生产常用的设备和用具 1、接种设备 ⑴ 接种室 ⑵ 接种箱 ⑶ 超净工作台
超净工作台
三、菌种生产常用的设备和用具
2、灭菌设备
Ⅰ
1）手提式：容量小，适于斜面试
高
管及玻璃器皿等；
压 蒸
2）立式： 容量大，投资大；
气 灭
3）卧式：容量大，投资大；
菌
4）家用24或26 cm压力锅：母种、
三、菌种生产常用的设备和用具 6、常用的消毒药品
⑷ 5%石炭酸：喷洒墙壁、地面及擦洗桌面等，也 可用来苏尔代替；
⑸ 2%来苏尔、新洁尔灭：用法同上；
⑹甲醛（福尔马林）：用于菇房和接种箱等空气消 毒；
方法：关闭门窗消毒，自行气化；
用量：10ml甲醛＋5g KMnO4／立方米。
四、母种生产技术
食用菌母种培养基的种类繁多，由于不同营养 类型的食用菌对营养物质的要求不同，所以，在 培养不同食用菌母种时，应选择适宜该菌种的培 养基。
母种培养基要求营养丰富、完全、氮源、维生 素的比例应高。
现将食用菌常用的母种培养基列举如下 ：
四、母种生产技术
（一）母种培养基 ①马铃薯葡萄糖琼脂培养基（PDA）
马铃薯200g、葡萄糖（或蔗糖）20g、琼 脂20g、H2O 1000 mL、pH 6.5。
适用于一般食用菌母种分离与培养，但草 菇、猴头菌等在此培养基上生长不良。