人源重组骨形态发生蛋白

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人源重组骨形态发生蛋白

人源重组骨形态发生蛋白

人源重组骨形态发生蛋白
人源重组骨形态发生蛋白(Human Recombinant Bone Morphogenetic Protein,简称rhBMP)是一种在骨组织工程中广泛应用的生物活性物质。

它是一种生长因子,能够刺激骨组织的形成和修复,常用于骨折、骨不连等骨疾病的临床治疗。

人源重组骨形态发生蛋白是在实验室中通过基因工程技术生产的,与天然骨形态发生蛋白在结构和功能上非常相似。

这种蛋白具有强烈的骨诱导活性,能够诱导未分化的间充质细胞向骨细胞分化,促进骨组织的形成和修复。

人源重组骨形态发生蛋白在临床上的应用主要有两个方面。

一方面是局部注射治疗骨折、骨不连等骨疾病。

这种治疗方法可以刺激局部的骨组织快速形成和修复,加速骨折的愈合,提高治疗效果。

另一方面是将人源重组骨形态发生蛋白与生物材料相结合,制作成骨形态发生蛋白复合物,用于骨组织工程中的种子细胞诱导和骨组织再生。

这种复合物可以促进骨组织的形成和修复,提高骨组织的生物力学性能和耐久性。

虽然人源重组骨形态发生蛋白在临床治疗中取得了很好的效果,但也存在一些问题。

其中最主要的问题是它的生产成本较高,导致价格昂贵,限制了其在临床上的广泛应用。

此外,对于人源重组骨形态发生蛋白的安全性和长期使用效果等方面还需要进一步的研究和探讨。

总之,人源重组骨形态发生蛋白是一种具有重要临床应用价值的生物活性物质。

它能够刺激骨组织的形成和修复,用于治疗骨折、骨不连等骨疾病。

虽然存在一些问题需要解决,但随着科学技术的发展和应用研究的深入,相信其应用前景将会越来越广阔。

骨形态发生蛋白2(bmp-2)正常值

骨形态发生蛋白2(bmp-2)正常值

骨形态发生蛋白2(bmp-2)正常值全文共四篇示例,供读者参考第一篇示例:骨形态发生蛋白2(BMP-2)是一种重要的细胞生长因子,在骨骼形成和修复过程中起着关键作用。

BMP-2的正常值对于维持正常的骨骼结构和功能至关重要。

本文将探讨BMP-2的正常值范围及其在骨骼生物学中的作用。

BMP-2的正常值范围因人而异,一般在血液中的浓度为5-100ng/ml。

这个范围是在健康的人群中观察到的平均水平,但在个体之间会有一定的波动。

在实际临床检测中,医生会根据患者的具体情况来判断BMP-2的正常值是否在理想范围内。

BMP-2的异常水平可能会导致一系列骨骼问题,如骨质疏松、骨折愈合不良等。

过高或过低的BMP-2水平都会对骨骼健康造成影响。

定期监测BMP-2的水平对于预防和治疗骨骼疾病是非常重要的。

除了血液中的浓度外,BMP-2在组织工程和生物医学领域也有广泛的应用。

它被广泛用于骨骼修复和再生的研究中,可以通过基因工程技术将其植入到缺损部位来促进骨细胞的增殖和分化。

BMP-2在促进骨骼生长和修复方面具有巨大的潜力,为骨科医生提供了新的治疗选择。

BMP-2是一种重要的细胞生长因子,在骨骼生物学中扮演着关键的角色。

了解BMP-2的正常值范围以及其在骨骼发育和修复中的作用对于保持骨骼健康至关重要。

通过定期监测BMP-2的水平并加以调节,可以预防和治疗骨骼疾病,提高患者的生活质量。

希望未来能够进一步深入研究BMP-2的功能和应用,为骨科疾病的治疗带来新的突破。

【字数:409】第二篇示例:骨形态发生蛋白2(Bone Morphogenetic Protein-2,简称BMP-2)是一种重要的生长因子,对骨骼发育和修复起着关键作用。

BMP-2在细胞信号传导过程中发挥着重要作用,通过调控肌肉细胞、软组织细胞和干细胞的增殖和分化,促进骨骼细胞的增生和分化,从而促进骨骼生长和修复。

BMP-2的正常值是指在健康人群中,BMP-2的含量在正常范围内。

手术讲解模板:重组骨形态形成蛋白植入术

手术讲解模板:重组骨形态形成蛋白植入术

手术资料:重组骨形态形成蛋白植入术
手术步骤:
3、取自体髂骨外板松质骨,连同人工骨 (本组应用DBM或NOVOBone)混合,逐层 压紧。股骨头颈开窗处用原切下的骨板回 植覆盖,一枚可吸收螺钉固定。第一组患 者加入rhBMP2 4mg,第二组患者未加BMP2。
手术资料:重组骨形态形成蛋白植入术
注意事项: 稳定患者患者。
手术资料:重组骨形态形成蛋白植入术
手术步骤:
2、切开、清除炎性滑膜。在股骨头颈交 界处开窗(2.0~2.5cm长,1.5~2.0cm宽), 在C型臂X线透视监测下,用高速磨钻及刮 匙等交替清除位于股骨头前外上侧的坏死 骨,保留5mm厚软骨下骨板,硬化骨用 3.0mm钻头多处钻孔,直至创面有活跃新 鲜血渗出。
并发症: 手术部位的骨头疼痛。异物感。
手术资料:重组骨形态形成蛋白植入术
术后护理: 留院观察,适当康复训练,配合膳食。
谢谢!
手术资料:重组骨形态形成蛋白植入术
概述:
与胚胎骨骼形成有关的蛋白质,在骨形成 的数个阶段均起作用,由形态发生的早期 阶段开始,并延续至出生后。在中枢神经 的发生中也起着关键作用。
手术资料:重组骨形态形成蛋白植入术
适应证: 目前该手术还处于临床研究发展当中,相 关适应症资料不全。
手术资料:重组骨形态形成蛋白植入术
手术禁忌: 目前该手术还处于临床研究发展当中,相 关禁忌症资料不全。
手术资料:重组骨形态形成蛋白植入术
术前准备: 对患者的蛋白质及相关组织样本进行化验, 手术器械准备,医疗器械匹配。
手术资料:重组骨形态形成蛋白植入术
手术步骤:
1、仰卧位,患髋垫高呈45°~60°,髋关 节前方改良Watson-Jone切口约5~7cm,自 阔筋膜张肌与臀中小肌间隙进入,显露前 外侧关节囊。

骨形态发生蛋白BMP和骨形成的研究进展

骨形态发生蛋白BMP和骨形成的研究进展

骨形态发生蛋白BMP与骨形成的研究进展1陈于东2陈锦平1义乌市中医院2浙江省人民医院1965年,Urist等人将脱钙牛骨基质植入皮下和肌内后发现能够诱导新骨形成,他们认为脱钙骨基质中存在能诱导骨生长的未知物质,称之为BMPs。

其后的研究表明BMPs是一组复合物,迄今为止,人们己经成功分离出了40余种这类蛋白质,而且通过DNA重组技术,人的9种不同的BMP (1-9)己经得到了清楚的解释。

Wozney等曾详细报道了BMP1、BMP2、BMP3的分子克隆和分子结构与活性的关系。

BMPs是一个重要的骨相关细胞因子家族,除BMP-1外均属于TGF-B超家族,可由间充质细胞、成骨细胞及软骨细胞产生。

BMPs家族的成员通过结合I型和II型丝氨酸2苏氨酸激酶受体发挥作用,BMPs是目前发现的唯一能在体内异位诱导化骨与软骨的细胞因子,能诱导未分化的间充质细胞分化为骨软骨母细胞并产生骨软骨基质,还能刺激成骨细胞和软骨细胞分化,在骨和软骨的生长和发育中起重要作用。

1 BMP-2的理化性质人类成熟的BMP-2是一种可溶的、低分子跨膜糖蛋白,分子量约为32Kd,包括N端疏水性分泌性引导序列、中间区域的前肽和C端成熟区。

具有活性的BMP-2分子是由两个相同亚基形成的二聚体,两个亚基之间以二硫键相连,它的C-端拥有七个高度同源性的半胱氨酸残基片段,其中六个半胱氨酸残基在多肽链内形成二硫键,依赖半胱氨酸二硫键维持特定构象并保持一定的生理活性,N-端的10个碱基序列是肝素的结合位点,与细胞外的肝素特异性结合,可影响BMP-2受体激活,并调节其生物活性。

Tabas等利用体细胞杂交株,用cDNA探针杂交技术确定了BMP-2基因定位于20p-12p。

2 内源性BMP来源BMP分布于各种动物的硬组织,且骨皮质含量高于骨松质,其它组织含量甚少,但内源性BMP 确切来源目前没有完整的结论,原位杂交分析和免疫组化研究发现BMP-2的mRNA可在骨组织和多种间充质组织中表达,如肢芽、心脏、和颌骨滤泡等,但BMP-2的mRNA在骨组织中表达水平比在其它组织高40倍。

骨形态发生蛋白研究进展及其骨科应用

骨形态发生蛋白研究进展及其骨科应用

一、引言骨形态发生蛋白(BMP)是一类对骨细胞有特殊生物学活性和调节作用的生长因子蛋白质。

自从这一类蛋白质被发现以来,其在骨科领域的应用就备受关注。

随着科学技术的发展,对BMP的研究也在不断深入。

本文将介绍骨形态发生蛋白研究进展及其骨科应用,并探讨其在未来的发展方向。

二、骨形态发生蛋白研究进展1. BMP的发现和结构特点BMP最早是在对于骨再生和骨形态发生的研究中被发现的,其对于骨细胞的分化和增殖有着重要的作用。

BMP具有多肽链结构,在不同类型的细胞中表现出不同的生物学活性。

2. BMP对骨细胞的影响研究显示,BMP可以促进成骨细胞的增殖和分化,从而促进骨组织的再生。

在骨折愈合和骨缺损修复中,BMP的应用具有显著的效果。

3. BMP的生物合成和分泌途径BMP的生物合成和分泌途径对于其在骨科领域的应用起着重要的作用。

了解BMP的合成和分泌途径,有助于更好地利用BMP来促进骨组织的再生和修复。

4. BMP与骨质疏松症的关系随着对BMP的研究不断深入,人们发现BMP与骨质疏松症之间存在着关联。

对于BMP在骨质疏松症治疗中的应用也是研究的热点之一。

三、骨形态发生蛋白在骨科应用的研究及进展1. BMP在骨折愈合中的应用BMP在促进骨折愈合方面具有显著的效果,临床研究和应用也在不断推进。

2. BMP在骨缺损修复中的应用对于骨缺损的修复,BMP的应用是一种有效的手段。

骨缺损修复领域也是BMP研究的重点。

3. BMP在骨质疏松症治疗中的应用随着对BMP与骨质疏松症关系的深入研究,BMP在骨质疏松症治疗中的应用也引起了人们的极大关注。

四、对骨形态发生蛋白研究的个人观点和理解在我看来,BMP在骨科应用中具有巨大的潜力。

随着对BMP的深入研究,我们对骨组织的再生和修复也有了更深入的理解。

未来,我相信BMP在骨科应用中将会有更多的突破和进展,为骨科领域带来更多的创新和变革。

五、总结与展望骨形态发生蛋白的研究进展及其在骨科应用中的地位是非常重要的。

重组人骨形态发生蛋白2对兔椎间盘成骨作用的诱导

重组人骨形态发生蛋白2对兔椎间盘成骨作用的诱导

重组人骨形态发生蛋白2对兔椎间盘成骨作用的诱导郝正科;李同华;白林;郑英刚;李利;吴新力;徐东;季爱玉;蓝守福;谢云亭;魏霞【期刊名称】《中国组织工程研究》【年(卷),期】2008(012)050【摘要】BACKGROUND: Recombinant human bone morphogenetic protein-2 (rhBMP-2) has been widely used on clinic; however, there are still few reports addressing rhBMP-2-induced osteogenesis in intervertebral disc.OBJECTIVE: To verify the effect of rhBMP-2 to induce interbody fusion in rabbits.DESIGN, TIME AND SETTING: Randomized controlled animal study and multi-level evaluation, which was performed in Affiliated Hospital of Medical College of Qingdao University from February to July 2007.MATERIALS: 24 adult New-Zealand rabbits weighing 3.5-4.5 kg were used to expose L4-5 and L5-6 intervertebral disc; rhBMP-2 (1 mg/ampoule, purity≥95%) was provided by Beijing Bail ingke Biological Products Co., Ltd.METHODS: 24 rabbits were randomly divided into experimental group and control group with 12 rabbits for each. In the experimental group, saline (20 μL, containing 200 μg rhBMP-2) was injected into nucleus pulposus of L4-5 intervertebral disc; equivalent saline was inserted into nucleus pulposus of L5-6 intervertebral disc as controls. Rabbits in the control group were injected with saline (20 μL) into nucleus pulposus ofL4-5 intervertebral disc.MAIN OUTCOME MEASURES: Morphological changes of injected segments were observed by hand-feeling checktogether with histological and imaging tests at 10, 30, 60, and 90 days postoperatively.RESULTS: 24 rabbits were included in the final analysis. ①In the experimental group, the motion range of L4-5 segment was not limited at 10 days postoperatively, and lightly limited at 30 days, but severely limited at 60 days postoperatively; L4-5 segment was fixed tightly at 90 days postoperatively. Moreover, motion range of L5-6,segment and articular motion range in the control group were not changed remarkably.② L4-5 interbedy space was narrowed at 10 days or even disappeared at90 days postoperatively, and then osteogenesis fusion was formed. Transmittance of intervertebral space in the L5-6 segment and in the control group was not changed obviously. ③ Nucleus pulposus was gradually shrunk at 10 days postoperatively; partial cartilage endplate transformed into mature woven bone, and collagen fiber structure of annulus fibrosus gradually disappeared at 90 days postoperatively. A lot of mesenchymal cells were aggregated surrounding annulus fibrosus at 10 and 30 days postoperatively. Moreover, mature woven bone was formed in annulus fibrosus near to cartilage endplate at 90 days postoperatively. However, histological and morphological changes were not found in the control group at those four time points.CONCLUSION: rhBMP-2 can induce intervertebral disc osteogenesis so as to achieve interbody fusion.%背景: 重组人骨形态发生蛋白2作为一种新约已应用于临床.但在椎间盘内诱导成骨的研究报道很少.目的: 通过动物实验,观察重组人骨形态发生蛋白2埘兔椎体间融合的影响.设计、时间及地点: 随机对照动物实验多水平评估,于2003-02/07在肯岛大学医学院附属医院完成.材料: 24只纯种成年新西兰大白兔,体质量3.5-4.5 kg,分离暴露L4-5、L5-6椎间盘;重组人骨形态发生蛋白2,1 mg/支,纯度≥95%,无菌包装,购自北京市百灵克生物制品有限公司.方法: 24只大白兔随机投币法分为实验组和对照组,每组12只.实验组向L4-5椎间盘的髓核中产射含200 μg重组人骨形态发生蛋白2的生理盐水溶液20uL;向L5-6的髓核中注射等量的生理盐水作为自身对照;对照组动物L4-5椎间盘的髓核中注射生理盐水20 μL.主要观察指标: 术后10,30,60,90 d应用手法检杏、组织学和影像学观察注射节段的形态变化.结果: 纳入新西兰大白兔24只,均进入结果分析.①实验组10 d L4-5节段活动范围无明显变化;30 d活动范围轻度受限:60 d活动范围明显受限:90 d L4-5节段皆固定.作为自身对照的L5-6节段及对照组关节活动范围无明显变化.②实验组10 d L4-5椎体间隙变窄:90dL4-5椎间隙消失,椎体间形成骨性融合.对照组及作为自身对照的L5-6节段椎间隙透光度无明显改变.③实验组10 d髓核细胞逐渐变小,90 d部分软骨终板已转化为成熟的编织骨:纤维环的胶原纤维结构逐渐消失,10 d和30 d均可见大量间充质细胞在纤维环外围聚集;90 d纤维环靠近软骨终板处已形成成熟的编织骨.对照组各时间点组织学形态无明显变化.结论: 重组人骨形态发生蛋白2可诱导椎间盘成骨,达到椎体间融合的目的.【总页数】5页(P9831-9835)【作者】郝正科;李同华;白林;郑英刚;李利;吴新力;徐东;季爱玉;蓝守福;谢云亭;魏霞【作者单位】曹县人民医院骨科,山东省菏泽市,274400;曾县人民医院,放射科,山东省菏泽市,274400;曾县人民医院,放射科,山东省菏泽市,274400;青岛大学医学院附属医院骨科,山东省青岛市,266003;曾县人民医院,病理科,山东省菏泽市,274400;曾县人民医院,放射科,山东省菏泽市,274400;曹县人民医院骨科,山东省菏泽市,274400;青岛大学医学院附属医院骨科,山东省青岛市,266003;曹县人民医院骨科,山东省菏泽市,274400;曾县人民医院,病理科,山东省菏泽市,274400;曾县人民医院,病理科,山东省菏泽市,274400【正文语种】中文【中图分类】R681【相关文献】1.成骨诱导后的脐血间充质干细胞与β-磷酸三钙复合植骨材料对兔颅骨缺损的修复作用 [J], 郑德宇;刘建生;杨依勇;秦书俭;包翠芬;姚素艳2.外源性人骨形态发生蛋白-2基因在兔骨髓基质细胞中的稳定表达及其诱导成骨作用 [J], 秦书俭;刘学;郑德宇;梅晰凡;谷学静3.生长分化因子-5及碱性成纤维细胞生长因子诱导家兔椎间盘髓核细胞成骨作用的研究 [J], 张长春;陆泉秀;周新社;鲍正齐;胡建国;丁海;许刚;周建生4.低氧诱导因子-1α对兔骨髓间充质干细胞成骨作用的实验研究 [J], 张劲娥; 王淑红; 黄远亮5.兔椎间盘成骨作用中的转基因人骨形态发生蛋白7 [J], 赵疆;胡雅斌;王振斌;楚戈;陈继征;卡哈尔.艾肯木;项泽文因版权原因,仅展示原文概要,查看原文内容请购买。

人骨形态发生蛋白技术路线

人骨形态发生蛋白技术路线

人骨形态发生蛋白技术路线
1.采集骨骼样本
首先需要从古人类遗址或者现代人体标本中采集到骨骼样本。

采集后需要对样本进行编号、记录和保管。

2.提取样本DNA
将采集到的骨骼样本送往实验室,针对骨样品的DNA坏死情况,选择不同的提取方案来获取样本DNA。

3.测序并分析DNA
对提取的骨骼样本DNA进行测序,并分析不同基因位点上的遗传变异。

此步骤可以通过杂交捕获或PCR扩增等方法进行。

4.筛选潜在骨形态基因
根据测序结果,筛选出可能影响骨形态的基因。

这些基因可以与现代人体中常见的骨形态相关基因进行比对。

5.克隆、表达和纯化目标蛋白
将确定的骨形态基因克隆至载体中,并在合适的表达系统中表达和纯化目标蛋白。

6.检测蛋白解剖学和生化活性
对纯化后的目标蛋白进行解剖学和生化活性检测,确保提取的蛋白质可以用于后续的功能研究。

7.鉴定蛋白质结构
通过晶体学或NMR等技术鉴定蛋白质结构,帮助解析蛋白质的功能和生物学机制。

8.研究功能和生物学机制
根据前面的研究结果,可以深入研究蛋白质的功能和生物学机制,为进一步探讨人类进化和生物遗传学提供重要的基础数据。

重组人骨形态发生蛋白-2原核表达及单克隆抗体制备

重组人骨形态发生蛋白-2原核表达及单克隆抗体制备

重组人骨形态发生蛋白-2原核表达及单克隆抗体制备王婧;张杰;张颖;马宁宁;谢良志【摘要】目的利用原核表达系统(E.coli)表达纯化重组人骨形态发生蛋白-2成熟肽(rhBMP-2m),并制备rh-BMP-2m的单克隆抗体.方法将工程菌株进行常规发酵,自诱导表达,裂菌离心分离包涵体,包涵体变性后经阳离子交换色谱分离纯化.纯化后的变性rhBMP-2m经稀释复性,获得具有生物学活性的rhBMP-2m.并以此作为抗原,免疫Balb/c小鼠制备单克隆抗体.结果获得还原SDS-PAGE下95%以上纯度的rhBMP-2m.细胞活性结果分析显示,所获得的rhBMP-2m具有较强的生物学活性.免疫小鼠最终获得两株稳定分泌抗rhBMP-2m抗体的杂交瘤细胞株.结论成功制备了具有生物学活性的rhBMP-2m及其单克隆抗体,为rhBMP-2未来的研究和制备奠定良好的基础.%Objective To express and purify the recombinant human bone morphogenetic protein-2 mature peptide (rhBMP-2m) in prokaryotic system and to develop highly-specific monoclonal antibodies. Methods An engineered E. Coli strain expressing rhBMP-2m was fermented. The bacterial cells were firstly lysed and then the rhBMP-2m inclusion bodies were isolated by centrifugation. After the inclusion bodies had been solubi-lized by high-concentration denaturing agents, denatured rhBMP-2m was purified by cantion ion-exchange chro-matography. Biologically active rhBMP-2m was obtained by refolding of purified denatured rhBMP-2m through direct dilution. The refolded rhBMP-2m was used to immunize Balb/c mice to develop anti-rhBMP-2m monoclonal antibodies using classic hybridoma technique. Results rhBMP-2m with a purity greater than 95% was obtained on reduced SDS-PAGE. The refoldedrhBMP-2m was measured to be bioactive by the induction of alkaline phos-phatase activity in MC3T3-E1 cells. Two hybridoma cell lines that stably secreted anti-rhBMP-2m antibody were developed from the immunized mice. Conclusion Bioactive rhBMP-2m protein and its monocloncal antibodieswere successfully prepared, which will provides a solid base for future studies on rhBMP-2.【期刊名称】《中国医学科学院学报》【年(卷),期】2011(033)005【总页数】6页(P543-548)【关键词】重组人骨形态发生蛋白-2成熟肽;蛋白复性;单克隆抗体【作者】王婧;张杰;张颖;马宁宁;谢良志【作者单位】中国医学科学院北京协和医学院细胞工程中心,北京 100005;神州细胞工程有限公司,北京 100176;神州细胞工程有限公司,北京 100176;中国医学科学院北京协和医学院细胞工程中心,北京 100005;中国医学科学院北京协和医学院细胞工程中心,北京 100005【正文语种】中文【中图分类】Q861骨形态发生蛋白 (bone morphogenetic protein,BMP)是转化生长因子β超家族的成员,是广泛分布于动物骨组织的酸性蛋白质,在修复骨质缺损和促进骨折愈合、造血系统分化、神经发育和修复等方面发挥重要作用[1]。

骨形态发生蛋白2信号对肿瘤组织中调节性T细胞分化和浸润的作用

骨形态发生蛋白2信号对肿瘤组织中调节性T细胞分化和浸润的作用

中国医学科学院学报ACTAACADEMIAEMEDICINAESINICAE 897 基金项目:福建省科技创新联合资金(2018Y9086)SupportedbyJointFundsfortheInnovationofScienceandTechnology,FujianProvince(2018Y9086)·论 著·骨形态发生蛋白2信号对肿瘤组织中调节性T细胞分化和浸润的作用黄 菲1,王 海2,陈尧清2,吴 贵2福建医科大学附属第一医院 1中心实验室 2骨科,福建福州350005通信作者:吴 贵 电话:0591 87982105,电子邮件:wugui_1985@sina com摘要:目的 明确骨形态发生蛋白2(BMP2)信号是否通过增强髓样抑制性细胞(MDSC)分泌转化生长因子β(TGF β)诱导肿瘤组织调节性T淋巴细胞(Treg)的分化和浸润。

方法 通过实时荧光定量PCR检测BMP2信号诱导MDSC的TGF βmRNA表达水平,应用酶联免疫吸附实验检测BMP2信号诱导MDSC分泌的TGF β蛋白水平。

应用流式细胞术检测BMP2信号诱导MDSC分泌的TGF β对Treg分化的影响。

将人源重组骨形态发生蛋白2(rhBMP2)材料埋植于荷瘤小鼠体内以检测生物体内BMP2通过诱导MDSC分泌TGF β对Treg细胞活化的作用,应用酶联免疫吸附实验检测外周血和肿瘤组织中的TGF β蛋白水平,应用免疫荧光检测Treg细胞在肿瘤组织中的浸润情况。

结果 BMP2在体外可以促进MDSCTGF βmRNA和蛋白水平表达升高,BMP2信号诱导MDSC分泌的TGF β可于体外诱导Treg细胞分化。

rhBMP2的局部埋植可以促进小鼠外周血和肿瘤组织TGF β蛋白水平的升高,且可促进Treg细胞浸润肿瘤组织。

结论 BMP2信号通过促进MDSC分泌TGF β诱导Treg的分化,并诱导肿瘤组织Treg细胞的浸润。

重组人骨形态发生蛋白-2的制备及成骨活性表征

重组人骨形态发生蛋白-2的制备及成骨活性表征

重组人骨形态发生蛋白-2的制备及成骨活性表征李贵龙;王靖;刘昌胜【摘要】Bone morphogenetic protein-2 (BMP-2), one of the important osteoinductive growth factors, is an effective and crucial cytokine for clinic bone regeneration as well as bioactivity improvement of bone substitute. However, extraction of BMP-2 from animals can hardly meet the clinic requirements due to its very low content. This work studied the preparation of BMP-2 to meet the clinical needs, and evaluated its biological activity. Firstly, DNA sequence of optimized hBMP-2 gene was obtained to prepare rhBMP-2 strains ofE.coli using codon optimization method with further replacement of the partial nucleotide coding. Then, through fermentation and process optimization the BMP inclusion body was acquired. After separation, purification and renaturation, rhBMP-2 of high purity was prepared.In vitro cell experiments, the activity of alkaline phosphatase (ALP) in C2C12 cells was measured to characterize the osteogenic activity of haploid and diploid BMP-2. It was observed that the osteogenic activity of diploid rhBMP-2 was significantly higher than that of haploid rhBMP-2, and the activity of alkaline phosphatase increased with the increase of the BMP-2 concentration.In vivo ectopic bone experiment, after rhBMP-2 was implanted into the muscle of mice for 3 weeks, the ectopic bone granules were bright and fresh, and the bone structure was complete. HE and Masson’s trichrome stainings showed good ectopic bone formation. It can be concluded that the rhBMP-2 preparedusing this method can well induce osteogenic differentiation, and can be used for bone tissue repair to meet the clinical needs.%骨形态发生蛋白-2(BMP-2)是重要的骨诱导生长因子,是提高骨修复材料活性和临床骨修复效果的有效手段和关键物质。

骨形态发生蛋白

骨形态发生蛋白
已报道BMP2,4,6,7和9诱导人MSC的体外软 骨形成。
在人类骨髓来源(BM)MSCs中,BMP2(在 TGF-β3存在下)是软骨形成最有效的诱导物, 与BMP4和BMP6相比,更能诱导富含蛋白多糖 的软骨的产生,而在滑膜外植体中,BMP7是比 BMP2更有效地引起软骨细胞分化。
最新的研究证明BMP4和7诱发人类MSC的体外显 著反应,表明这些因子在体内的使用促进软骨的 损伤修复。
BMP / Smad信号通路也可以被一组细胞外蛋白拮抗 剂严格调节,它们作为BMP信号传导中的拮抗剂 的基本作用通过在缺乏这些蛋白之一的实验动物中 发生的许多严重或致死缺陷来证明。
BMPS在骨形成
在脊椎动物中,骨形成可以通过成膜细胞在 膜性骨化中的直接分化来实现,或者在软 骨内骨化中从软骨细胞的分化开始。这两 个过程由BMPs控制,BMP2和BMP4作为 成骨细胞和软骨细胞表型的主分化诱导, 导致骨和软骨形成。
3D培养和伴随的TGF-β的存在是获得真正的软骨 细胞表型所必需的条件。
有研究探讨使用封装在骨诱导支架或形态生物材 料中的MSCs以增强骨和软骨在体内的自然愈合 过程。结果表明这些多能细胞似乎都能够在支架 内区分自身以及吸引邻近自体祖细胞的因子。这 种行为可以更快地完成骨折愈合,并且所得新骨 的质量优于单独使用的骨诱导或软骨形成的骨架。 因此,这些结果促使进一步研究,探索伴随使用 MSC和BMP家族的最有希望的成员。即,嵌入 合适的支架或载体中的BMP2和7已经用于治疗 实验动物模型中的几种软骨缺陷和骨折,有希望 很快被应用于临床。
因此,MSC在用于软骨修复有良好的研究前景。 如已经提到的,BMP2和BMP7都具有大量被证明 的增强体内软骨修复的能力以及促进在体外在适 当的诱导培养基中培养的MSC的软骨形成分化的 能力。

骨形态发生蛋白2(bmp-2)正常值

骨形态发生蛋白2(bmp-2)正常值

骨形态发生蛋白2(bmp-2)正常值骨形态发生蛋白2(BMP-2)是一种重要的信号分子,在骨骼发育和修复过程中起着关键作用。

它参与了骨骼的形成、骨折愈合和骨再生等生物学过程。

BMP-2的正常值因人而异,但在正常健康人群中,其浓度通常在合理范围内。

BMP-2是一种由人体细胞产生的蛋白质,它通过与细胞表面受体结合,激活复杂的信号转导通路,进而调控骨细胞的增殖、分化和成熟过程。

这些过程对于骨骼的发育和修复至关重要。

BMP-2的正常范围可以根据不同人群的研究结果得出。

例如,一项针对健康成年人的研究表明,BMP-2的正常范围在X-XX ng/mL之间。

然而,这个范围并不是绝对的,因为不同实验室使用的测量方法和试剂可能会导致结果的差异。

BMP-2的浓度可以通过血液样本或其他体液样本进行测定。

这需要使用特定的实验方法和设备来准确测量BMP-2的含量。

这些方法通常包括酶联免疫吸附试验(ELISA)和质谱等技术。

与BMP-2相关的异常浓度可能会导致一系列骨骼疾病。

例如,BMP-2过度表达可能导致骨骼过度增生和骨质肥厚症等疾病。

相反地,BMP-2缺乏或缺失可能导致骨骼发育不良和骨折愈合障碍等问题。

为了保持BMP-2的正常水平,人们应该注重骨骼健康的维护。

这包括良好的饮食习惯,摄入足够的钙、维生素D和其他必需的营养物质,以及适度的运动和锻炼。

此外,避免吸烟和过度饮酒也是维持骨骼健康的重要因素。

BMP-2是骨骼发育和修复过程中的重要信号分子。

其正常范围因人而异,但在正常健康人群中,其浓度通常在合理范围内。

保持骨骼健康对于维持适当的BMP-2水平至关重要,这需要良好的饮食习惯、适度的运动和生活方式的调整。

通过维持适当的BMP-2水平,我们可以促进骨骼的健康发育和修复,提高生活质量。

骨形态发生蛋白5_对肝癌细胞生物学行为的影响及机制

骨形态发生蛋白5_对肝癌细胞生物学行为的影响及机制

骨形态发生蛋白5对肝癌细胞生物学行为的影响及机制马东玥1,臧艳1,任俏慧1,朱欣悦1,王莲子1,吕伟1,姚骏骁1,周心怡1,余莉2,李涛11 安徽医科大学第一附属医院检验科,合肥 230022;2 病原生物学安徽省重点实验室摘要:目的 探究骨形态发生蛋白5(BMP5)对人肝癌细胞生物学行为的影响及机制。

方法 将正常人肝细胞系L02与人肝癌细胞系Hep3B 、Huh7置于37 ℃、5%CO 2细胞培养箱中培养,采用RT -qPCR 法检测正常人肝细胞系L02与人肝癌细胞系Hep3B 、Huh7中BMP5 mRNA 表达。

将肝癌细胞系Hep3B 、Huh7分为对照(NC )组及低、中、高剂量组,低、中、高剂量组分别用1、10、100 ng /mL 浓度的重组人骨形态发生蛋白5(rh -BMP5)处理细胞,通过CCK -8法检测细胞增殖,Annexin -V /PI 流式细胞术检测细胞凋亡,划痕实验检测细胞迁移,Western blotting 法检测增殖细胞核抗原PCNA 和SMAD 通路关键蛋白及其磷酸化(SMAD3、p -SMAD3)表达。

结果 与正常肝细胞系L02相比,BMP5在肝癌细胞系Hep3B 、Huh7中表达升高(P 均<0.05)。

与NC 组相比,中、高剂量组rh -BMP5可促进Hep3B 、Huh7细胞增殖和PCNA 表达上调(P 均<0.05),高剂量组100 ng /mL 的rh -BMP5处理肝癌细胞24及48 h 细胞凋亡率降低、迁移率增高(P 均<0.05)。

高剂量组与NC 组相比,p -SMAD3表达升高(P <0.05)。

结论 BMP5在肝癌细胞系中高表达,可能通过增强SMAD3活化促进肝癌细胞Hep3B 、Huh7的增殖、迁移并抑制凋亡。

关键词:肝癌;骨形态发生蛋白5;细胞增殖;SMAD 同源物3doi :10.3969/j.issn.1002-266X.2024.10.001中图分类号:R735.7 文献标志码:A 文章编号:1002-266X (2024)10-0001-05Effect of BMP5 on biological behaviors of liver cancer cells and its mechanismMA Dongyue 1, ZANG Yan , REN Qiaohui , ZHU Xinyue , WANG Lianzi , LYU Wei , YAO Junxiao , ZHOU Xinyi , YU Li , LI Tao1 Department of Clinical Laboratory , The First Affiliated Hospital of Anhui Medical University , Hefei 230022, ChinaAbstract : Objective To investigate the effect and mechanism of bone morphogenetic protein 5 (BMP5) on the bio‑logical behaviors of human liver cancer cells. Methods Normal human liver cell line L02 and human liver cancer celllines Hep3B and Huh7 were cultured in the incubator at 37℃ with 5% CO 2. The expression of BMP5 mRNA in these cellswas detected by real time -quantitive PCR (RT -qPCR ). Human liver cancer cells Hep3B and Huh7 were divided into thecontrol group (NC group ), low -dose group , medium -dose group and high -dose group. Cells in the low -, medium - and high -dose groups were treated with recombinant human bone morphogenetic protein 5 (rh -BMP5) at concentrations of 1, 10 and 100 ng /mL , respectively. Cell proliferation was detected by CCK -8 assay and apoptosis was detected by Annexin -V /PI flow cytometry. Scratch assay was used to detect cell migration. Western blotting was performed to detect the expres‑sion of proliferating cell nuclear antigen (PCNA ) and key molecules in SMAD pathway (SMAD3) and its phosphorylation (p -SMAD3). Results The expression levels of BMP5 in Hep3B and Huh7 cells significantly increased in comparison with that in L02 cells (both P <0.05). Compared with NC group , rh -BMP5 promoted the proliferation of Hep3B and Huh7 cells and up -regulated the expression of PCNA in the medium -dose and high -dose groups (all P <0.05). After the high -dose (100 ng /mL ) rh -BMP5 treatment , Hep3B and Huh7 cells showed decreased apoptosis rate and increased migrationrate at 24 h and 48 h in comparison with those of the NC group (both P <0.05). The high -dose rh -BMP5 group had higher p -SMAD3 level than the NC group (P <0.05). Conclusions The expression of BMP5 increases in liver cancer cell lines. BMP5 promotes proliferation and migration and inhibits apoptosis of Hep3B and Huh7 cells , which may be mediated· 论著 ·基金项目:安徽省转化医学研究院科研基金项目(2023zhyx -C24);安徽医科大学开放研究基金重点项目(KFJJ -2021-04);安徽省学术和技术带头人及后备人选科研活动经费资助项目(2022H291)。

【BMP 2】重组人骨形态发生蛋白-2研究工具

【BMP 2】重组人骨形态发生蛋白-2研究工具

【BMP 2】重组人骨形态发生蛋白-2研究工具骨形态发生蛋白(bone morphogenetic protein,BMP)又称骨形成蛋白,是一组具有类似结构的高度保守的功能蛋白,属于TGF-β家族。

BMP能刺激DNA的合成和细胞的复制,从而促进间充质细胞定向分化为成骨细胞。

它还是体内诱导骨和软骨形成的主要因子,并在肢体生长、软骨内骨化、骨折早期、软骨修复时表达,对骨骼的胚胎发育和再生修复起重要作用。

如今BMP家族已有43个成员,广泛地存在于猪、牛、羊、兔、鼠及人的胚胎、血细胞、肾和脾脏等组织中,且在不同种属间有较高的同源性。

BMP不仅参与骨骼的调节,而且对脂肪、肾脏、肝脏、骨骼及神经系统发育也起到一定作用。

BMP分泌后既能与细胞外基质及可溶性拮抗剂结合,还能与多种细胞膜表面的蛋白受体相互作用。

它不仅具有区别于其他骨生长因子的独特结构和理化性质,而且其家族中不同成员的基因定位及成骨机制等也不尽相同。

BMP主要通过依赖Smad途径和p38 -MAPK途径两条信号通路发挥作用,且信号转导过程受细胞外拮抗剂、膜受体、细胞质微环境和转录水平4个层次的调节控制。

在治疗上,BMP不仅能单独介导促成骨作用,而且还能与其他骨生长因子混合,从而增强其恢复疾病的疗效。

骨生长因子共同存在的一个缺陷即为其半衰期短,在体内易降解,因此多采取缓释技术局部用药,延缓其衰解。

骨形态发生蛋白-2(bone morphogenetic protein-2,BMP-2)是转化生长因子B超家族成员之一,具有诱导未分化间充质干细胞向成软骨细胞和成骨细胞定向分化与增殖能力,促进成骨细胞分化成熟,参与骨和软骨生长发育及其重建过程,进而加速骨缺损修复.BMP-2在体内以前体形式合成,经蛋白酶切去除信号肽和前肽,得到由114个氨基酸残基组成成熟肽.成熟肽通过7对二硫键将其保守结构正确折叠.成熟肽同源或异源二聚体才具有生物活性.ProSpec人骨形态发生蛋白-2(BMP 2)#CYT-261为过滤灭菌的白色冻干粉末;该冻干粉末是从含1mg/ml人骨形态发生蛋白-2(BMP 2)的20mM NaAc(pH 4)溶液中过滤灭菌并冻干产生的.建议加无菌的20mM AcOH(乙酸)以配制工作储存液到不低于100ug/ml,后继实验过程中可根据实验要求进一步稀释.此人骨形态发生蛋白-2(BMP 2)冻干粉末在室温可保存3周,或置于-18℃冻存用于长期保存.重新溶解后可以在4℃冷藏保存至少2-7天以上;如果想延长保存时间,建议分装(加载体蛋白如0.1% HSA或BSA)后置于-18℃冻存.请避免反复冻融.。

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人源重组骨形态发生蛋白
人源重组骨形态发生蛋白(BMP)是一种重要的生物活性蛋白质,
对骨骼生长、愈合和再生具有重要的作用。

BMP最早是从动物骨细胞的培养上分离出来的,后经过基因重组技术,可以在大肠杆菌、哺乳动
物细胞等生物系统中大规模表达。

BMP作为一种多功能性生长因子,对于促进成骨细胞的增殖和分化,以及在骨骼生长、愈合过程中的相关信号传导起着关键作用。

BMP不仅在骨骼组织中具有重要的生物学功能,而且还能够促进软骨、齿、肌
肉以及神经组织的形态生成和修复,因此在医学领域有着广泛的应用
前景。

BMP通过与细胞表面的受体结合,激活细胞内信号通路,促进转录因子的激活,进而调控相关基因的表达,从而影响细胞增殖、分化
和骨基质的沉积。

在临床上,BMP已经被广泛应用于骨科领域,用于骨折愈合、骨缺损修复,以及脊柱融合手术等方面。

通过外源性的BMP,可以促进骨细胞的增殖和分化,加速骨折的愈合,减少骨折的愈合时间,同时也可
以用于治疗骨缺损和进行脊柱融合手术。

这些临床应用有效地提高了
骨骼组织的再生和修复能力,使得一些原本难以治愈的骨科疾病得到
了有效的治疗,对于患者的康复具有重要的意义。

此外,BMP还被广泛应用于组织工程和再生医学领域。

在组织工程中,通过载体材料载体等途径将BMP导入到受损组织中,可以促进受
损组织的修复和再生,为组织工程的应用提供了有力的支持。

在再生
医学领域,BMP可以用于促进肌骨组织的再生和修复,为一些临床难题提供新的治疗思路。

同时,BMP也为器官移植、皮肤再生、血管再生等领域提供了新的可能性和方法。

不过,尽管BMP在临床和研究中有着广泛的应用前景,但是其在
临床应用中也存在一些问题。

一方面,目前尚缺乏对BMP临床应用的
有效标准和规范,导致一些不规范的使用,容易出现不当使用和副作
用等问题。

另一方面,在大规模生产BMP的过程中,也存在成本高、
纯度低、活性不稳定等问题,限制了其在临床中的应用。

因此,未来
需要加强对BMP的研究和开发,提高其纯度和活性,建立有效的临床
应用标准和规范,以便更好地发挥其在医学领域的作用。

总之,人源重组骨形态发生蛋白是一种重要的生长因子,在骨科、组织工程和再生医学领域具有广泛的应用前景,对于促进骨骼组织的
再生和修复有着重要的意义。

未来需要加强对BMP的研究和开发,提高其纯度和活性,建立有效的临床应用标准和规范,以便更好地发挥其在医学领域的作用。

BMP的研究与应用将会为医学领域带来更多的可能性和希望。

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