奶牛性控冻精人工授精技术要点
奶牛性控冻精人工授精技术要点
doi：10.19369/ki.2095—9737.2020.09.035奶牛性控冻精人工授精技术要点常永义(黑龙江省大庆市林甸县国营苇场，黑龙江大庆166300)摘要：奶牛性控冻精人工授精技术是指根据公牛精液中含X染色体和Y染色体精子的DNA含量不同而有效的对这两种类型的精子进行分离，对含X染色体的精子经过分装冷冻处理后用于奶牛人工授精，从而导致母牛妊娠并产出母牛犊的一项技术。
通过对奶牛进行性控冻精人工授精技术，可使后代产母犊率超过90%,从而实现奶牛的快繁扩群，促使牛群遗传改良速度加快，有利于转变奶牛生产潜力，增加养牛业的经济效益。
关键词：奶牛；性控冻精人工授精；受配奶牛；发情鉴定；人工授精操作；妊娠检查中图分类号：S823.3+4文献标识码：B1选择体况良好的参配母牛为确保奶牛性控冻精人工授精的受胎率较高,最好选择年龄16〜18月龄、体重为350kg、体格健壮、生殖系统发育正常、营养状况良好、父母代也都是高产奶牛的育成母牛作为参配母牛。
如果选择经产母牛作为参配母牛，必须确保其身体健康，没有发生过生殖疾病或者难孕、胎衣不下以及其他有关疾病，且产后经过50天就能够正常发情的高产奶牛。
据报道，青年母牛情期受胎率相比于成年母牛要明显提高，因此受配母牛最好选择青年母牛。
2奶牛发情鉴定2.1发情观察只有准确发现奶牛发情时间才能够在性控冻精过程中适时进行配种。
一般来说，奶牛的发情活动呈规律性，大部分集中于凌晨、傍晚或者夜间发情。
要求饲养员在奶牛每天早晚放牧或者在运动场运动时进行30min以上的观察，并仔细记录骚动不安、对外阴红肿且爬跨其他牛或者接受其他牛爬跨的母牛的牛号；如果无法在放牧过程中或者在运动场运动时进行观察的奶牛，饲养员要在其采食、挤奶后，并处于静卧休息时，对其外阴部分泌物的颜色和黏性进行观察，并认真记录牛号。
对出现以上情况后记录的牛，要求在观察结束后立即查阅其繁殖记录，将产后时间不适宜、正处于繁殖疾病治疗阶段以及其他不适合进行配种的牛剔除。
牛人工授精技术培训
术 、 繁 殖 史 、 既 往 症 等 。 部，法式卡苏枪将枪体放入塑料外套至头部，固定紧备用。
(5)衰老性：绝情期13-15岁。 牛冷冻精液解冻注意事项
分钟甚至几分钟即可到达输卵管，精子在子宫内运行有助于精子 的获能。
(2) 子宫结构 子宫角向下弯曲，发情时子宫水肿和充血，
输精器插的太深容易损伤子宫内膜，影响了受胎。
(3) 准确输精 如果是左手在直肠内操作，输精器很容易进
入右侧子宫角内；如果是右手在直肠内操作，输精器容易进入左 侧子宫角。盲目将精液输的太深，可能使排卵侧无精子而使卵子 无法受精。
(4)有时输精管已到达子宫颈口，就是不 好插入，这可能是子宫颈开张不好，有炎 症、颈口有疤痕等，或许是已孕母牛假发 情，遇到这些情况要认真检查，诊断清楚， 妊娠牛强行深部输精会引起流产。 (5)操作时应主要靠直肠内的手调整子宫 的位置，不能靠持输精器的手硬戳。 (6)术者最好先将阴唇掰开(或由助手协 助)，把输精器插入阴道后再将操作手伸 入直肠，也可将伸入直肠的手臂往侧下压， 使阴门裂张开，这样输精器头部不会碰到的解冻和装枪
细管取出后首先在空气中停留几秒，然后 用32-38℃水浴升温 水浴时间0.25ml细管停留约15秒钟，
0.5ml装的细管停留约20秒钟。
精液溶解后，从水浴中取出，用较干的酒 精棉球或灭菌的棉花、卫生纸等擦干细管 外壁 ，再用专用细管剪刀将细管的封口端 垂直剪开，开口端朝前装入输精枪，钢芯 对准细管棉塞部，法式卡苏枪将枪体放入 塑料外套至头部，固定紧备用。日式金属 输精枪无外套，将头部与体部旋紧即可。
性控冻精进行人工授精的技术要点
的停 留时间。解冻方法：从液氮罐
中取冻 精 时 ，提 筒 中的冻 精不 可超
过液氮罐 口，如 １ 内还没有将冻 ０ Ｓ
精 取 出 ，应将 冻精 立 刻沉 入液氮 中
然后 再 提到 罐 口重复 操作 。单 支冻
动的牛 ，等到牛吃草挤奶后静卧休
息 时 ，观 察其 尾部 分 泌物 的黏液 和 颜色 ，记 录牛号 。
种动物疫病检测 、诊断芯片，在诊
断 各种 病毒 性疫 病 中取得 了实 质性
的突破 。生 物芯 片技 术对 病 原抗 原
结合微阵列技术 、 Ｃ 扩增技术和生 ＰＲ 物信息 学技术，同时并行榆 则 样品中 葡萄球菌 、 沙门氏菌、弧菌病 、 肠出
血型 大肠 杆菌 （ 引起肠 出血） 、利斯 特
ｌ 卞 圈
（ ）首 选育 成牛 。育 成 牛要求 ２ 在 １ ～１ 龄 ，体 重 达 到 ３ ０ｋ ６ ８月 ５ ｇ 用 性 控 冻 精 配 种 ，不 适 合 的用 常 规冻 精 配种 。并做 好 发情 时间 、 子 宫 情况 、卵巢情 况 、输 精 时 间 、 输精部 位等 内容 的详 细记 录。
完成 后立 即查 询繁 殖记 录 ，剔除 产 后时 间不 合适 、有 繁殖 疾病 和其 他
不适合 配种 的牛 只 。
器 ，输精 时要 保证 输精 器无 菌 ，与 输精器接触部位及器具的干净卫生。 （）输 精 时要 做到 “ 插 、慢 ４ 轻 推 、 出” 缓 ，严禁 在配种操作 中动作 粗暴 ，防止子 宫 内膜损 伤 。输精 一 般 在排 卵侧 子宫 角 ，或者 采用 子宫
排 卵侧 ，把输 精 器顺 利放 到排 卵侧 子 宫 角 ，就采 用子 宫 角输精 ，否则
采用子 宫体后拉法 输精 。
奶牛的人工授精
奶牛的人工授精核心提示：一、输精前准备（一）输精器的准备牛用玻璃或金属输精器，可用蒸汽、75%的酒精或放入高温干燥箱内消毒；输精胶管因不宜高温，可用酒精或蒸汽消毒。
输精器每头牛准备1～2支。
（二）精液准备1、精液剂型奶牛人工一、输精前准备（一）输精器的准备牛用玻璃或金属输精器，可用蒸汽、75%的酒精或放入高温干燥箱内消毒；输精胶管因不宜高温，可用酒精或蒸汽消毒。
输精器每头牛准备1～2支。
（二）精液准备1、精液剂型奶牛人工授精的精液剂型有：常温精液、颗粒精液和细管精液3种。
常温精液是将采集到的公牛精液通过稀释处理，分装保存在3～5℃冰箱内，不能超过4天，在取带过程中，应置放在有冰块的保温瓶内，避免震荡。
由于该型保存时间短，仅局限于在公牛站周围的奶牛场户使用。
颗粒精液是将稀释后的精液，在超低温条件下滴冻成黄豆粒大小，收集在专用的布袋中，贮存在液氮罐中。
由于该剂型在制作、保存、使用过程中易造成污染，在输精操作过程中又不方便，所以使用越来越少。
细管精液是将稀释后的精液，分装在特制的塑料细管内，再置入液氮罐内保存。
由于其有着与外界接触面小，在使用过程中又携带方便，易解冻，输精时受污染的可能性小等优点，所以使用方便。
2、精液质量检查（1）冷冻精液的解冻由于剂型不同，冷冻精液的解冻方法也有差别。
颗粒冻精解冻的稀释液应另配，细管冷冻精液不需要解冻稀释液。
颗粒精液的解冻：先配制解冻稀释液，一般常用的是2.9%柠檬酸溶液、维生素B12（0.5毫克/毫升）溶液、葡柠液（葡萄糖3%、二水柠檬酸钠1.4%）。
各种解冻液装于安瓿中，经灭菌后长期备用。
解冻时，先取1～1.5毫升解冻液放入小试管内，浸入40℃的热水中，经过2～3分钟后投入1～2粒精液颗粒。
待融化1/2～1/3时，在常温下轻轻摇动至完全解冻后，检查评定精子的活力，然后进行输精。
细管精液的解冻：由液氮罐内迅速取出1支细管冷冻精液，立即投入40℃的热水中，待精液基本溶化时，用灭菌小剪剪去细管的封口端，装入细管输精器中。
奶牛性别控制人工授精的操作要点
１ 性别控制冻精 的特点
性控 冻 精 的 精 子 密 度 显 著 的 低 于 常 规 冻 精 ， ０ ２ ．５ｍＬ细 管 冻 精 中 ， 控 冻 精 的精 子 数 为 ２０— 性 ０ ２０万个 ， ４ 常规冻 精 为 ２５０万 个 ； 控 冻 精 的精 子 ０ 性 存 活时 间相对 于 常规 冻 精 短 ； 分 离 过 程 中部 分 畸 在
形 和死精子被筛除 ， 因此性控冻精解冻后精子活力
比常规冻 精 要高 。
３ 熟练应用人工授精方法
３ １ 母牛 的选择 ．
与配母 牛应 营 养 良好 、 发育 正 常 、 情 中等 、 膘 健
２ 准确掌握发情鉴定技 术
奶 牛发情 可 以通 过观察 外 部表 现 、 殖道 变化 、 生
生 理 条件 下 ， 出的 卵子 在 输 卵管 内保 持 受 精 排 能 力 的时 间为 １ ０～１ ， 只有 排 卵后 ２— ２ｈ 但 ３ｈ内具 有 高受精 能 力 ， 卵子 在 输 卵管 壶 腹 部 具有 正 常 的 受 精 能力 ， 到达 狭 部后 逐 步 老 化 ， 精 能力 迅 速 丧 失 。 受 在 生产 实践 中 ， 须严 格掌 握配 种时 间 ， 必 确保 具有 受 精 能力 的精 子在 受精 部 位 等 待 卵 子 到来 ， 而 达 到 从 受 精 的 目的 ， 高受胎 率 。 提
爬跨或爬跨其它牛 １ ～ ６ｈ ， ２ １ 后 直肠触摸卵泡的发 育 变化 情况 ， 确定 卵泡 发育 阶段 ， 保证在 卵泡 成熟期
开 始输 精程 序 ， 比常规 冻精输 精 时间推 迟 ２ｈ 。如若 发 现生 殖道 疾病 等异 常情 况 ， 立 即转 入治 疗 阶段 ， 应 对 判定 模糊 不确 切者 可采用 常规 冻精 配种 。
简述牛人工授精的技术环节及技术要点
简述牛人工授精的技术环节及技术要点
牛人工授精是一种常见的人工繁殖技术，主要用于提高优良种牛的繁殖效果。
其技术环节
主要包括以下几个步骤：
1. 筛选种牛：选取品种纯正、遗传优良、繁殖能力强的种牛作为供体，确保后代具有优良遗传
性状。
2. 配制冻精：将种牛的精液收集后，进行筛选、稀释、添加冷冻保护剂，并进行冷冻保存，以
便长期储存和使用。
3. 动物选配：根据种牛和母牛的优良遗传特征，通过遗传分析和计算，选择最佳的配对组合，
以提高下一代的遗传品质。
4. 母牛发情检测：通过观察母牛的行为表现、阴道黏液变化等，确定母牛是否处于发情期，为
接下来的授精提供准确的时间窗口。
5. 授精：将冷冻精液通过人工授精枪注入母牛的子宫内，确保精子能够与卵子结合，从而实现
受孕。
6. 确认受孕：通过约21天左右的时间观察母牛是否有怀孕的迹象，如停止发情、腹部轻微增
大等，确认是否成功受孕。
在牛人工授精过程中，一些技术要点值得注意：
1. 牛精液的采集：科学且卫生的收集牛精液，尽量避免污染和损伤，确保精液质量。
2. 冷冻精液的保存：选择适宜的冷冻保护剂和冷冻条件，确保冷冻精液的质量和存活率，以便
长期储存和使用。
3. 母牛发情检测：细致观察母牛的行为和生理变化，准确判断发情期，确保在最佳时间进行授精。
4. 授精技术：掌握良好的人工授精技术，确保精液的正确注入子宫，并保证受精能够顺利进行。
5. 确认受孕：细致观察母牛是否受孕，提前做好相关记录和留样，以备后续分娩和繁殖管理。
牛人工授精技术的成功与否，除了技术环节的把握外，更需要持续的实践与经验积累。
奶牛性控冻精应用的要点
奶牛性控冻精应用的要点作者：王会恩来源：《现代畜牧科技》 2015年第5期王会恩�（黑龙江省杜尔伯特蒙古族自治县畜牧兽医局 166200）性别控制是指人为地干预雌性动物而繁殖出人们所需的性别后代的一种新的繁殖技术。
奶牛XY精子分离性别控制技术是根据精液中精子分别含有X染色体和Y染色体，使其DNA含量有所不同，从而使这两种类型的精子可以进行有效的分离，并将其中含有X染色体的精子进行分装冷冻，然后在牛人工授精中使用，最终使母牛所产后代为母牛犊，这就称为性控冻精。
�1 应用意义�奶牛母、公犊牛的价格一般相差1000元以上，母牛在相同的饲养管理成本和妊娠时间条件下，采用性控冻精进行配种，能够显著提高妊娠母牛的产犊效益。
奶牛进行性控冻精与常规冷冻精液配种相比，可以使其产出的后代是母犊牛，从而显著增加母牛数量和提高产奶量，最终提高生产效益。
此外，通过性控冻精可使母牛产出更多高产优质的母牛后代，从而加快整个牛群的淘汰速度，使生产效率得到提高。
�2 母牛的选择�使用对象要选择中、高产奶牛及其后代，选择的初配母牛最好是有两个以上发情周期为正常的母牛或者产胎次数在3胎以内的母牛，且其未患传染病和繁殖系统疾病，特别是未患布氏杆菌病的健壮青年母牛，同时膘情适中，泌乳性能良好，从未发生过流产、胎衣停滞和难产，产犊性能良好的奶牛。
�3 发情的观察与发情周期的把握�奶牛发情的行为变化表现出烦躁不安，步行数和活动量是未发情奶牛的5倍以上，并寻找其他发情母牛；下巴依托于其他奶牛臀部并进行摩擦，嗅闻其他母牛的外阴；压捏腰背部下陷；有的奶牛出现产奶量下降和食欲减退的现象；接受其他牛爬跨或爬跨其他牛，其中前者是奶牛发情鉴定重要特征。
�奶牛发情的身体变化表现出有时体表潮湿，有蒸腾状；阴户肿胀，阴道黏膜红润，外阴潮湿；外阴流出线状、透明的黏液，或于外阴周围黏附；尾根、臀部有接受他牛爬跨造成的秃毛斑或小伤痕。
�4 操作要点�保定与检查。
将发情母牛固定于保定栏内，将牛尾拉向一侧，先用清水清洗外阴部，之后用0.1%的新洁尔灭溶液进行冲洗，然后用灭菌温水将消毒液冲洗干净，最后用经过消毒的毛巾擦干外阴，注意每头母牛每次单独使用一条毛巾，或者可先用清水清洗外阴部，之后用浸有75%酒精的棉球反复擦洗，稍等挥发晾干即可进行检查。
牛冷冻精液人工授精技术要点
由青变黄白时表明桑果已经成熟，应及时于清晨采收，以防风吹脱落，同时可以延长货架期3～5 d。
分批成熟分批采摘，收获期一般在30～40 d。
桑果虽然营养价值较高，但不耐储藏和运输，在采收时最好轻摘轻放。
收获的桑果避免挤压和暴晒，注意轻拿轻放，不要碰破表皮。
经过人工选择分级后，先用小塑料盒包装，再装入纸箱，包装好后及时运往市场销售或进行加工处理。
收稿日期：2020-07-09牛冷冻精液人工授精技术要点欧阳仕春（西盟县农业综合执法大队，云南西盟 665700）牛冷冻精液人工授精技术是牛繁殖配种常用的成熟技术，人工输精人员技术水平是影响牛人工授精妊娠率的主要因素。
近年来，牛冷冻精液人工授精技术作为一项低成本、高效益的实用技术，在畜牧业生产中发挥着越来越重要的作用。
根据省、市畜禽改良工作要求，西盟县于2014年开始免费推广牛冷冻精液人工授精技术，目前该技术已普及到全县5镇2乡，受胎率在85%以上。
1 现 状1.1 基础生产情况截至2019年12月，西盟县建成牛场9个，牛存栏17 642头，出栏6395头，能繁母牛6554头，当年生仔畜3932头；建有冻精液供应站1个，乡（镇）建有牛冷冻精液人工授精输配点2个，培养人工授精技术骨干64人。
县级设有品种改良站1个，为乡（镇）人工授精输配点提供液氮、冻精库哲理人生路不好走，只有受得住委屈，才成得了大器；只有经得住考验，才赢得了尊严。
57房1间，配有整套人工授精所需器械。
1.2 牛冷冻精液人工授精成果西盟县辖5镇2乡36个村民委员会3个社区367个村民小组，2014年开始免费推广牛冷冻精液人工授精技术，主要推广西门塔尔、短角牛、云岭黄牛等优良品种。
目前该技术已普及到全县5镇2乡，共输配发情母牛2547头次，产杂交犊牛2280头，受胎率在85%以上。
2 冷冻精液的贮存和运输冷冻精液应保存在保温效果良好的液氮罐中，并保证所有精液浸在液氮中，每周检查1次液氮罐，如发现液氮消耗显著增加，或容器外壳挂霜，应及时更换容器。
应用性别控制牛冻精人工授精技术提高受胎率的要点
变化情况推测排卵时间，判断在 ８ 小时之 内排卵并适 合用性控冻精冷配的母牛立即进行配种 ，不适合的用
３ ３
畜禽 养 殖
常规冻精配种 。
４ 适时输精
ＣＯＥＵ Ｕ Ｕ ＡＹ Ｍ ＹＸ
５ 输精技术
２ｏ第 期 总 １期 草业 与畜牧 － ０年 ６ 第７ １ ５
输精器做好消毒工作 ，塑料外套最好使用一次性 的，母牛外阴部用高锰酸钾消毒 ，待输精器准确插入 排卵侧子宫角大弯处后，将精子全部输入。 ６ 利用外 源激素促进排 卵 对于排卵较慢或第一次输精后未排卵的牛 ，可适 当注射促 排 ２ 、３ １ ２ 或黄体酮 ｌ ２ 号 号 支 ０～ ０ｍｌ ，以 促 进排 卵 ，发现 卵泡囊肿 、排 卵障碍及其他 繁殖疾病 的母牛停止输精 ，并给予相应的治疗。如果对排卵时 间把握不准 的 ，采用 常规 冻精输精 。 ７ 重视早 期妊娠 检查 。注重 复配 母 牛配种后及 时进行 妊娠检查 ，对 已妊娠 的母 牛 加强饲养管理，防流产和保胎 ， 对未妊娠的母牛要查 出原 因 ，采 用相应 措施及 时补配 ，对于 已配两个情期 仍不怀孕的母牛 ，改用常规冻精进行复配。当一个健 康的适配母牛经过认真检查适时配种后 ， 仍不能受孕 或 整个牛群 的怀孕 率依然偏 低时 ，就要考虑 冻精 的因 素 ，及时检 查冻精 的活力 ，并从保 存 、解冻 等环节 人
手 ，综合分析 ，以便找出原 因 ，从而确保提高受胎率 。
母牛发情排卵情况一般受年龄、胎次 、营养状况 等因素而表现不同，一般营养 良 好的初配母牛排卵较 早 ，随着 年龄增 长及 营养状 况不 良的牛 ，排 卵时 间有
逐渐 向后 推迟 的趋 势 ，且母 牛发情 持续时 间短 ，排卵
业 与 畜 牧 ２１ 第 期 总 １ 期 ０ 年 ６ 第７ ０ ５
性控冻精参配牛的选择和使用要点
向、回抽、摆动滚动等操作技巧，使输精器前端
通过子宫颈。严禁以输精器硬戳的方法进入。
渲染出朦朦胧胧、轻快明亮的色调。天空是那样寥阔，湛蓝，大朵大朵白云像
四、直肠把握子宫颈输精的要领及程序
手臂涂以润滑剂，轻柔触摸肛门，使肛门肌 松弛；手臂进入直肠时，应避免与努责和直肠蠕
动相逆方向移动，分次掏出粪便；避免空气进入
质量：活力 0.4 以上、密度 200~230 万
渲染出朦朦胧胧、轻快明亮的色调。天空是那样寥阔，湛蓝，大朵大朵白云像
/0.25ml。精液的取出：冻精不可提到罐口以下
3.5cm 线之上，寻找冻精超过 10s，应将分装桶 放回液氮内然后再提起寻找，以保持冻精的冷 度；取出后置 37~38℃水浴，解冻细管冻精时必 须保证时间达到 1O~15s，过短或过长都不利于精 子存活。每头公牛精液应放置在同一分装桶内。 解冻、取出、用灭菌的棉花、卫生纸等擦干细管
菌病），身体健康膘情中等为宜。经产牛分娩在
60d 以上、进行第 1 次配种，产犊性能和泌乳性 能良好，无流产史、上胎无难产、胎衣不下的。
二、奶牛发情的观察与发情周期的把握
输精技术人员应掌握所管牛群的发情周期 和个体牛的发情规律。做到心中有数，按计划实 施牛群的繁殖。掌握奶牛发情行为变化，发情母 牛敏感燥动，寻找其他发情母牛，活动量、步行
直肠检查子宫和卵巢（泡）态势及把握子宫 颈输精是规范的人工输精技术。输精前做好母牛 外阴的消毒，输精中保持牛阴户周围的清洁及输 精器具的干燥与卫生（输精枪外应使用薄膜防护
套）。子宫创伤出血对精子与受精卵的存活不利，
应尽量避免创伤。在输精器接近子宫颈外口时， 正确的方法是用把握子宫颈的手拉向方，使之接 近输精器前端，而不是用力将输精器推向子宫 颈。要凭手指的感觉将输精器套入子宫颈。输精 器前端在通过子宫颈横行、不规则排列中褶时的 手法是输精的关键技术。可用改变输精器前进方
奶牛性控精液人工授精技术要点
奶牛性控精液人工授精技术要点黄 强１，于美娟２（１．黑龙江省龙江县家畜繁育指导站 １６１１００；２．黑龙江省龙江县奶业发展中心 １６１１００）摘要：随着性控冻精使用的日益广泛，通过传统的母牛繁育途径推广，不仅提高了生产母犊的几率，还对高产奶牛的推广、牛奶产量的提高、牛群结构的改善、牛群的饲养管理、胚胎移植技术的推广等都具有重要意义。
本文主要对发情鉴定、输精时间、输精部位等进行介绍，以期为广大奶牛养殖户提供帮助。
关键词：奶牛；性控冻精；人工授精；技术要点 奶牛的主要生产效益来自于牛奶，牛奶又来源于母牛，因此母牛所产生的经济效益显著高于公牛，因此多产母犊、少产公犊或不产公犊就成了奶牛饲养者的一个共同愿望，可是奶牛是单胎动物，繁殖期较长，而且产母犊的概率为５０％左右，按照自然繁殖的规律是实现不了这种愿望的，必须通过一定的技术手段。
自１９９９年利用冷冻的性控精液和人工授精技术获得世界首例性控犊牛以来，随着对该技术的一系列宣传以及试验的开展，人们逐渐掌握了性控繁育的知识，性控冻精人工授精技术的应用也越来越多［１］。
１ 应用母牛的选择由于奶牛性控冻精价格较高，慎重选择受配牛、提高情期受胎率非常重要。
根据性控冻精的特点，可以选择１６～１８月龄的体况均匀，体重在３５０ｋｇ以上的健康、营养状况良好且无生殖系统疾病的育成牛作为受体母牛；也可以选择体格健壮，营养状况良好、产道恢复正常、发情周期正常、无生殖疾病及胎衣不下病史和难孕史，产后５０天以上的经产母牛。
２ 发情鉴定准确的发情鉴定是确定适时输精的重要依据。
发情鉴定必须以直肠检查为主、外部症状判断为辅，来确定准确的输精时间。
由于大多数的母牛发情行为发生在傍晚、夜间或凌晨，所以必须注意傍晚和凌晨的观察，一般情况下，在１９时到次日７时之间，母牛相互间出现爬跨行为，发情母牛主要表现为兴奋不安，排尿次数增加、起卧不安、食欲减弱，待牛静卧休息时，可观察到母牛外阴处有清亮黏液流出，当母牛不接受爬跨时４～６小时可进行人工授精。
性控精液人工授精技术
性控精液人工授精技术北京奶牛中心自然情况下，奶牛繁殖过程中人为无法进行性别控制，公、母犊出生比率大约各占一半。
由于奶牛业以产奶为主，一半的后代没有饲养价值，造成资源的浪费和养殖者的经济损失还降低了良种奶牛种群的扩繁速度，无法满足快速发展的高产奶牛市场需求。
通过高新技术手段决定出生犊牛的性别，实现良种奶牛种群快速扩繁，降低生产成本满足市场需求，是当今奶牛养殖者的期盼，也是生殖生物学领域的重要研究课题。
利用性控精液进行人工授精，实现奶牛生殖的性别控制，是避免资源浪费、迅速扩大种群、实施品种改良较易普及和被市场接受的生物高新技术。
因此性别控制技术在全国有非常好的发展前景。
应用性控精液，大大加快了良种奶牛的培育步伐，在较短的时间内，大幅度扩大奶牛群的规模，增加良种奶牛的比例，加速提高整个奶牛群的产奶水平。
它是当今世界最先进性别控制技术的产物，代表了动物遗传育种的发展方向，可以说应用性控精液人工授精是奶牛繁育改良史上的又一次革命。
（1）性控精液的生产原理：根据X、Y精子其DNA含量的不同，由于X精子比Y精子含有较多的DNA，在用荧光染料染色时，X精子吸收的染料多，发出的荧光也强，就此可以分辨出X与Y精子，然后再利用计算机控制使荧光强的X精子带上正电荷，Y精子带上负电荷，在通过高压电场时便向不同的方向偏转，从而达到分离目的，分辨率可达90%以上。
分离后X精子的精液进行冻精各项指标检测，达标的精液封装冷冻保存；分离产生的Y精子精液和废精都弃掉不要（见图1）。
（2）牛分离精液的技术指标表1牛分离精液的技术指标指标常规精液分离精液精子活力0.3-0.50.3-0.4有效精子数2000万个/0.25ml200万个/0.25ml分离纯度--90%-95%存活时间20-24小时8-10小时情期受胎率55%-75%45%以上（3）性控精液的特点①可以使后代犊牛90%以上为母犊；②解冻后精子活率要比常规冷冻精液高，其主要原因是奶牛X性控精液在分离的过程中，除了保留X精子、筛除Y精子外，还将原精液中的死精子和部分畸形精子筛除掉；③有效精子数约为200万个/0.25m1,远低于常规精液的有效精子数。
性控冻精使用和操作的要点及注意事项
[2007/12/15] 性控冻精使用和操作的要点及注意事项[折叠]性别控制是指雌性动物通过人为地干预而繁殖出人们所期望性别后代的一种繁殖新技术。
奶牛XY 精子分离性别控制技术是指将牛的精液根据含X 染色体和Y 染色体精子的DNA 含量不同而把这两种类型的精子有效的进行分离后，将含X 染色体的精子分装冷冻后，用于牛的人工授精，而使母牛怀孕产母牛犊的技术；这种根据精子X 、Y 染色体的不同而分装冷冻的冻精就叫性控冻精；使用我公司的牛性控冻精产品对发情母牛进行配种可以使90% 以上的受配怀孕母牛产母牛犊。
一、奶牛性控冻精在生产中使用的重要意义（一）奶牛公、母犊牛的价格差一般在1000 元以上，母牛同样的饲养管理成本和怀孕时间，用性控冻精冷配，可以使怀孕母牛的产犊效益显著提高。
（二）使用性控冻精可以显著的提高母牛数和群体产奶量，这是因为与常规冷冻精液配种相比，使用性控冻精，可以大量的繁殖出母牛后代，最终使母牛数和产奶量都得到提高，从而提高生产效益。
（三）使用性控冻精可繁殖出大量的优质高产的母牛后代，可以加快牛群的淘汰速度，提高生产效率。
以上三点都说明在使用性控冻精后可以显著的提高奶牛产业的生产效益，同时与胚胎工程技术的结合可以使牛的品种改良一步到位。
二、性控冻精的特点（一）解冻后精子活力要比常规冷冻精液高，其原因是死精子和部分畸形精子在分选时被筛除；（二）性控冻精细管分装精子的密度显著地低于非性控冻精（性控：230 万个/0.25ml ，非性控：2500 万个/0.25ml ）；（三）奶牛含X 染色体性控冷冻精液的存活时间相对于常规冷冻精液要短。
三、使用性控冻精进行人工授精的母牛的选择按下列步骤和标准执行首先是品种的选择，选择中、高产奶牛及其后代做为使用对象；其次是年龄和胎次，首选初配母牛和生产三胎内母牛；最后是营养和健康，膘情适中健康无疾病和繁殖疾病史。
四、性控冻精输精技术的操作要点和注意事项（一）准确的发情观察（步骤）1. 每天早晚对放牧或在运动场运动牛群进行至少半小时的观察，记录接受爬跨的牛号；2. 不能放牧或不能在运动场运动的牛，等到牛吃草挤奶后静卧休息时，观察其尾部分泌物的粘性和颜色，记录牛号；3. 对外阴红肿爬跨其它牛只骚动不安的牛只记录牛号；4. 对上述三种情况记录的牛只在观察完成后立即查阅繁殖记录，剔除产后时间不合适、正在进行繁殖疾病治疗和其它不适合进行配种的牛只；5. 对观察到上述症状的适合冷配的空怀牛只，在10-12 小时后进行直肠检查，首先判断子宫的大小和质地，然后检查两侧卵巢是否正常，是否有排卵卵泡，如果有排卵卵泡，根据卵泡的大小和质地推测排卵时间，判断在8 小时之内排卵并适合进行冷配的牛只立即进行配种，对适合使用性控冻精的牛只（本手册第三条）用性控冻精配种，不适合的用常规冻精配；并做好包括子宫、卵巢情况和发情时间及输精时间和部位等内容的详细记录；（二）输精操作要点n1. 使用性控冻精配种时，配种时间尽量控制在排卵前6 小时之内或排卵后4 小时之内；使用性控冻精时，尽量缩短解冻与输精之间的时间，最好是解冻一支输一支；2. 解冻方法：从液氮罐中取冻精时，提漏中的冻精不可超过液氮罐口，如果10 秒钟内还没有将冻精取出，应将冻精立刻沉入液氮中然后再提到罐口重复操作；单支冻精取出后在空气中先停留 5 秒左右，然后放入38 -40 摄氏度清水中10 秒中后取出用干脱脂棉擦干后剪断封口，装入输精器准备输精；3. 输精器最好是使用一次性外套的，输精时要保证输精器的无菌和与输精器接触的部位及器具的干净卫生；输精部位一般在排卵侧子宫角或者是采用子宫体后拉法，也就是说，如果能够准确判断出排卵侧并能使输精器顺利的放到排卵侧子宫角就采用子宫角输精，否则，采用子宫体输精器后拉发法输精，保证两侧子宫角都能有精子进入和受精。
奶牛性控冻精使用技术操作要点及注意事项
奶牛性控冻精使用技术操作要点及注意事项性别控制是指雌性动物通过人为地干预而繁殖出人们所期望性别后代的一种繁殖新技术。
奶牛XY精子分离性别控制技术是指将牛的精液根据含X染色体和Y 染色体精子的DNA含量不同而把这两种类型的精子有效的进行分离后，将含X染色体的精子分装冷冻后，用于牛的人工授精，而使母牛怀孕产母牛犊的技术；这种根据精子X、Y染色体的不同而分装冷冻的冻精就叫性控冻精；使用我公司的牛性控冻精产品对发情母牛进行配种可以使90%以上的受配怀孕母牛产母牛犊。
一、奶牛性控冻精在生产中使用的重要意义（一）奶牛公、母犊牛的价格差一般在1000元以上，母牛同样的饲养管理成本和怀孕时间，用性控冻精冷配，可以使怀孕母牛的产犊效益显著提高。
（二）使用性控冻精可以显著的提高母牛数和群体产奶量，这是因为与常规冷冻精液配种相比，使用性控冻精，可以大量的繁殖出母牛后代，最终使母牛数和产奶量都得到提高，从而提高生产效益。
（三）使用性控冻精可繁殖出大量的优质高产的母牛后代，可以加快牛群的淘汰速度，提高生产效率。
以上三点都说明在使用性控冻精后可以显著的提高奶牛产业的生产效益，同时与胚胎工程技术的结合可以使牛的品种改良一步到位。
二、性控冻精的特点（一）解冻后精子活力要比常规冷冻精液高，其原因是死精子和部分畸形精子在分选时被筛除；（二）性控冻精细管分装精子的密度显著地低于非性控冻精（性控：230万个/0.25ml，非性控：2500万个/0.25ml）；（三）奶牛含X染色体性控冷冻精液的存活时间相对于常规冷冻精液要短。
三、使用性控冻精进行人工授精的母牛的选择按下列步骤和标准执行。
首先是品种的选择，选择中、高产奶牛及其后代做为使用对象；其次是年龄和胎次，首选初配母牛和生产三胎内母牛；最后是营养和健康，膘情适中健康无疾病和繁殖疾病史。
四、性控冻精输精技术的操作要点和注意事项（一）准确的发情观察（步骤）1、每天早晚对放牧或在运动场运动牛群进行至少半小时的观察，记录接受爬跨的牛号；2、不能放牧或不能在运动场运动的牛，等到牛吃草挤奶后静卧休息时，观察其尾部分泌物的粘性和颜色，记录牛号；3、对外阴红肿爬跨其它牛只骚动不安的牛只记录牛号；4、对上述三种情况记录的牛只在观察完成后立即查阅繁殖记录，剔除产后时间不合适、正在进行繁殖疾病治疗和其它不适合进行配种的牛只；5、对观察到上述症状的适合冷配的空怀牛只，在10-12小时后进行直肠检查，首先判断子宫的大小和质地，然后检查两侧卵巢是否正常，是否有排卵卵泡，如果有排卵卵泡，根据卵泡的大小和质地推测排卵时间，判断在8小时之内排卵并适合进行冷配的牛只立即进行配种，对适合使用性控冻精的牛只（本手册第三条）用性控冻精配种，不适合的用常规冻精配；并做好包括子宫、卵巢情况和发情时间及输精时间和部位等内容的详细记录；（二）输精操作要点1、使用性控冻精配种时，配种时间尽量控制在排卵前6小时之内或排卵后4小时之内；使用性控冻精时，尽量缩短解冻与输精之间的时间，最好是解冻一支输一支；2、解冻方法：从液氮罐中取冻精时，提漏中的冻精不可超过液氮罐口，如果10秒钟内还没有将冻精取出，应将冻精立刻沉入液氮中然后再提到罐口重复操作；单支冻精取出后在空气中先停留5秒左右，然后放入38-40摄氏度清水中10秒中后取出用干脱脂棉擦干后剪断封口，装入输精器准备输精；3、输精器最好是使用一次性外套的，输精时要保证输精器的无菌和与输精器接触的部位及器具的干净卫生；输精部位一般在排卵侧子宫角或者是采用子宫体后拉法，也就是说，如果能够准确判断出排卵侧并能使输精器顺利的放到排卵侧子宫角就采用子宫角输精，否则，采用子宫体输精器后拉发法输精，保证两侧子宫角都能有精子进入和受精。
奶牛性控冻精人工授精技术关键点
2021年第5期 吉林畜牧兽医59·草食动物·CaoShi DongWu奶牛性控冻精人工授精技术关键点艾斯卡尔•吾斯曼1 ，阿米娜•毛依冬21.新疆阿克苏地区温宿县畜禽品种改良站，新建温宿 843100；2.新疆阿克苏地区温宿县畜牧兽医站，新疆温宿 843100奶牛性控授精技术就是通过人为干预使母牛繁殖出人们所需要性别后代的繁殖技术。
具体就是将公牛精子分离，对包含X 染色体的精子分装并置于冷冻状态，后期通过人工授精使母牛生产出母犊牛的技术。
1 选择受配母牛受配母体应为高产奶牛、中产奶牛或其后代；初配母牛及三胎母牛为最佳，若选择初配母牛，其最佳月龄为16～18个月，体重超过成年母牛标准体重70%；选择膘情适中、发情正常、无传染性疾病及生殖道疾病、不存在流产史的母牛。
2 授配母牛发情鉴定2.1 外部观察发情初期，母牛兴奋不安、爬跨、追逐、敏感，一些母牛情绪低迷，此状态可持续半日。
早期发情后，母牛可接受其它牛爬跨，具体表现为体温略微升高、食欲不佳、持续低迷或兴奋不安、摇动耳朵、阴门血肿可见透明黏液、尾根毛乱、接受爬跨。
2.2 阴道黏液测试发情初期，母牛黏液量较少，可流动，偏酸性，呈稀薄透明状；发情中期，黏液呈半透明状并增多；发情后期，黏液黏稠并较少，偏碱性，牵缕性较强。
躺卧状态下，阴门流出大量透明黏液，体积可达300～500 mL，站立状态下黏液在阴门外悬吊，此时即可认定母牛发情。
因非发情期母牛及受孕母牛有时也可出现少量黏液，还需检测黏液pH 值。
2.3 直肠检查工作人员将手臂深入到直肠内，通过手触摸卵巢及卵泡。
若母牛处于发情期，触摸过程中卵泡明显波动，壁较薄，一触即破。
结合外部发情征兆可明确卵泡发育程度，确定排卵时间，进而判定配种时期。
3 输精操作技术要点3.1 保定及检查在保定栏内，采用清水清洗并用0.1%新洁尔灭冲洗外阴，接着冲去消毒液，用消毒毛巾擦净。
母牛发情时间一般为20～22 h。
奶牛人工授精的要点
奶牛人工授精的要点陆凤林(黑龙江省杜尔伯特蒙古族自治县动物卫生监督所 166200) 奶牛品种培育和改良过程中应用人工授精技术起到重要作用,是奶牛养殖中必不可少的关键技术之一。
奶牛通过良好的饲养管理,情期受胎率能够超过50%,年总受胎率能够达到85%~90%。
1 掌握发情规律为了能够适时配种,必须确保发情鉴定的准确性。
只有通过准确的发情鉴定,才能够正确判断母牛发情与否,发情正常与否,以及处于哪个发情阶段,最终才能够实现适时输精。
正常情况下,后备奶牛发情通常是发育到812月龄,逐渐发育成熟的卵泡壁细胞分泌产生雌性激素,并进入血液循环,从而促使母牛在生理和行为上表现出相应的变化。
奶牛发情时,在身体和行为方便均发生变化。
奶牛发情时,外阴潮湿,外阴周围黏附着从里面流出的线状、透明黏液,且拉丝性很强;阴户发生肿胀,阴道黏膜红润。
有的可见发情母牛阴道发生出血。
发情奶牛敏感燥动,产奶量降低和食欲不振,且找寻其他发情奶牛;嗅闻其他奶牛外阴,某些奶牛用下巴碰触其他牛只的臀部,并不断摩擦,在腰背部压捏出现下陷,高抬尾根;有时静立不动,并接受其他牛只爬跨,其中爬跨其他牛只是非常重要的发情鉴定表现。
2 冻精的处理储存冻精的液氮罐必须放置在整洁的地方,且避免阳光直接曝晒,设有添加液氮的记录,每年都要清点库存冻精的数量,并对液氮罐进行一次清洗。
液氮罐进行清洗时,先将准备好的另一个清洁液氮罐与之并列放置,将罐中的冻精快速转移,确保冻精在罐外的时间控制在5分钟以内。
精液一般储存在高真空保温的液氮罐内,并将其存放在干燥、清洁、通风的木质垫板上。
液氮罐中的液氮水平面必须高于18cm,当高度为16cm时,则要立即补充添加液氮。
当液氮罐外壳出现结霜或者夏天出现水珠时,要对其高度重视,需要时可换成另一个性能良好的液氮。
从液氮罐取出精液时,只能将本次需要取出的冻精提到罐口,其他冻精则必须放置在罐口以下3.5cm线之上,如果提取冻精时间超过10秒钟,则要将分装桶立即放回液氮内,之后再次将其提起,从而确保冻精的冷度。
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对 奶牛 人工 授精 可 以加快 低 产奶 牛 的 改 良步 伐 ， 应尽 量避 免创 伤 。可用 对精 子无 害 、 生殖 道 黏膜 而应 用奶 牛性 控冻 精进 行 人 工授精 ， 不仅 提 高 了生 无 刺激 的润滑 剂 。 产 母 牛 犊 的效 率 ，还 能 迅速 扩 繁 优 良高产 奶 牛 群 （ ）在 输精 器 接近 子 宫颈 外 口时 ，正确 的方 法 ５ 体 。为 了提 高奶 牛性 控冻 精人 工授 精 的受 胎 率 ，需 是用把 握 子 宫颈 的手 拉 向 阴道方 ， 使之 接近 输精 器 前 端 ，而不 是用 力将 输 精器 推 向子 宫颈 。要 凭手 指 要 适 时给发 情 母牛 进行 人 工授 精 。 １ 奶牛发情的观察与发情周期 的把握 的感觉 将 输精 器 套入 子 宫颈 。 １ 奶牛发 情行 为变化 输精技术人员应掌握所 ． １ （ ）输精 器 前端 在通 过 子 宫颈 横 行 、不 规则 排 ６ 管 牛群 的 发情 周期 天数 和个 体 牛 的发情 规律 。 到 列 中褶 时的手 法 是输 精 的关键 技术 。 用 改变输 精 做 可 心 中有 数 ，按 计划 实施 牛 群 的繁殖 。掌握 奶 牛发情 器 前进 方 向、回抽 、摆动 、滚 动 等操 作技 巧 ，使 输 行 为变 化 ： 感燥 动 ， 敏 寻找 其他 发情 母 牛 ， 动量 、 精 器前 端通 过 子 宫颈 。 禁 以输 精器 硬 戳 的方法 进 活 严 入 。 步 行数 大 于常牛 ５ 以上 ：嗅 闻其 他母 牛外 阴 ， 倍 下 （ ）直 肠 把握 子宫颈 输 精 的要 领及 程 序 。手 臂 ７ 巴依托 它牛 臀部 并摩 擦 ；压 捏腰 背 部下 陷 ，尾 根 高 抬 ；有 的食欲 减退 和 产 奶量 下 降 ；爬跨 它牛 或“ 静 涂 以润滑剂 ， 轻柔触摸肛门， 使肛 门肌松 弛；手臂 立” 受 它牛爬 跨 ，后 者是 重要 的发 情 鉴 定征 候 。 接 进入 直 肠 时 ， 应避 免 与努 责 与直肠 蠕 动相 逆方 向移 动 ，分 次掏 出粪便 ；避免 空气 进 入直肠 而 引起 直肠 １ 奶牛身体 变化 外阴潮湿 ，阴道粘膜红润 ， ． ２ 阴户 肿 胀 ； 时体表 潮湿 ， 有 有蒸 腾状 ； 阴有透 明、 膨胀 ； 手指 插入 子宫颈 的侧 面 ， 入 宫颈 之 下部 ， 外 用 伸 线状 粘 液流 出 ，或粘 于外 阴 周 围，有 强 的拉 丝性 。 然后 用 食 、中 、拇 指握 抓住 宫颈 ：输 精器 以 ３－ ５ ５－ － ４ 臀 部 、尾 根 有 接 受 爬 跨 造 成 的 小伤 痕或 秃 毛 斑 。 角度 向上进 入分 开 的 阴 门前 庭段 后 ， 向前下方 进 略 ６％左 右 的发情 母牛 可 见 阴道 出血 ，大 约在 发情 后 入 阴道 宫颈 段 ；把 握 宫颈 的整个 手 势要 柔和 ，在输 ０ ２ｄ出现 。这个 征候 可 帮助 确 定漏配 的发情 牛 ，为 精器 进入 宫颈 前 ，可将 宫颈 靠在 骨 盆边 上 ，并轻 轻 跟踪 下 次发情 日期或 调整 情期 提供 依 据 。 挤 压 宫颈 周 围 的阴道 壁 ， 使输 精器 只 能进入 子 宫颈 口，而 不会 误入 阴道 穹 隆 ；精 液 的注入 部位 是 子 宫 １ 发 情观 察 大 多数 的母 牛发 情 持 续 为 １～ ４ ． ３ ０ ２ ｈ （ ８ ｌ ）裸视 发情 观 察是 目前 最 实用 的方 法 ， 体 与 子 宫角 的结 合 部 。 １士 ２ ｈ 在确 定 注入 部位 无误 后注 入 对异 常发 情 、产后 ５ ０ ｄ未 见发 情 的牛 只 ，应及 时 精 液 ，在 技 术熟 练 的条 件下 ，可将 精液 注入 排 卵侧 检查 和采 取措施 ，使其 恢 复正 常发 情 。 的子 宫角 大弯 部 ，一 次一 剂 。 ２ 性 控 冻精 人工 授精 操作 要点 非一 次性 输 精用 具 ，在 每头 牛输 精 后清洗 、干 （ ）直肠 检 查子 宫和 卵 巢 （ ）态 势 及把 握 子 燥 消 毒后 备用 。 １ 泡 宫颈输 精 是规 范 的人工 输精 技术 。 （ ）精液 存 取 。精 液储 存 在 高真 空保 温 的液 氮 ８ （ ）触摸 卵泡 成 熟状 态 ，适 时 输精 。发现 母 牛 罐 内；液氮 罐应 放 置在 清洁 、干 燥 、通 风 的木质 垫 ２ 接 受爬 跨 或爬跨 其 他牛 ｌ～ ６ ２ １ ｈ后 （ 比普通 精 液 正 板上 ；液氮 水 平面 应保 持 在 １ ｃ 以上 ，至 １ ｃ ８ｍ ６ｍ 常 的输 精 时 间要 推 迟 ２ｈ ），经直 肠检 查 子 宫一切 时 ，即应添 加 液氮 ，可用 兰 红二 色安 瓶指 示 管或 固 正常 、卵 泡发 育成 熟 时输入 精液 ：或外 部 观察 时静 定 式 磅 称 判 别 液氮 水平 。 除本 次 需要 取 出的 冻精 立 、接 受爬 跨和 阴户 流 出透 明具有 强拉 丝性 粘液 ， 外 ，其 他冻 精 不 可提 到罐 口以下 ３５ｍ 线之 上 ，寻 ．ｃ 粘 丝提 拉可 达 ６ ８次 ，拉 ３ ５ｃ 长 ，是输 精 最佳 找冻 精 超过 １ ，应 将分 装桶 放 回液 氮 内 ，然 后 再 ￣ ～ ｍ ０Ｓ 时段 。通 常掌 握适 时一 次输 精 即可 。 有 当触 摸 卵 提起 寻 找 ，以保持 冻精 的冷度 ；取 出后 置 ３ － ０Ｃ 只 ８４ ＂ － 泡 诊断 延迟 排卵 时 ，才 需第 ２次输 精 。 水浴 ，５ Ｓ 时解 冻 ；每 一头 公 牛精 液应 放置 在 同 瞬 （ ）输 精前 做 好母 牛外 阴 的消毒 。输 精 中保 持 ３ 分 装桶 内， 并有分 装 清单 ，清 单 上包 括公 牛 号、 牛 阴户 周 围的清 洁及 输精 器 具 的干 燥 与卫 生 （ 精 数 量 和取 用记 录 ； 清 洗液 氮罐 时，预备好 的清洁 输 在 枪 外应 使用 薄膜 防护套 ） 。 液 氮 罐应 并列 放 置 ，快速 转 移 ，冻 精裸 露在 罐外 的 （ ） 宫创 伤 出血对 精 子与 受精 卵 的存 活不 利 ， 时 间不 能超过 ５ 。 ４子 Ｓ ‘
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２０ ０ ８年第 ７期 （ 总第 １８期） ３
１ 牧 生产 － 『
奶 牛 性 控 冻 精 人 工 授 精 技 术 要 点
袁文博 （ 省邹城市畜牧兽医工 山东 作站 ２３０ ） ７５０ 李永志 （ 山东省邹城市城郊畜牧兽医工作站）
中图分类号：￥ ２ ． ４ ８ ３３ 文献标识码：Ｂ 文章编 号：１ ０ ．７３２ ０ ）７０ １・２ ０ ７ １３ （０ ８０ ・０ ９０