实验十细菌生化实验微生物实验
微生物实验第10次实验
注意： 1.本实验以大组为单位 2、接种时菌种要摇匀 3.测定时要摇匀，倒入 比色杯中尽快测定 4、如OD600超过1.5,需 用相应培养基进行稀释 5、每个pH重复取样3次 测定，计算平均值。
37度，180rpm 震荡培养24小时， 测定光吸收值（OD600)
通过离心或过滤分离出来,洗涤
后，烘干至恒重(干燥温度可采 用105℃、100℃或80℃)、称重。
pH对微生物生长影响的一般规律
最适生 长pH
最低 生长 pH
生长pH范围
最高 生长 pH
不同pH对大肠杆菌生长的影响
配制牛肉膏蛋白胨液体培养基
上述培养基pH分别调到5,6,7， 8,9,11相应的装入6个三角瓶 （60mL/瓶）和对应的6支试管 （10ml/支）。
实验项目 2.细菌的生理生化实验
生理生化反应（试验）：利用一些肉眼可见的现象或 反应（如加入显色剂、指示剂等后的颜色变化）来直接 检测微生物细胞能否发生某种（类）生化反应（如能否 利用某种物质进行生长、能否产生某种代谢产物等）的 实验。
可以了解微生物的代谢特点和生长特性 生理生化反应是微生物分类鉴定的重要指标之一
注意： 1.贴好标签（菌种名称、实验名称、组号） 2. 严格无菌操作 3. 让菌种在培养基中分散
下次实验
显微镜直接计数法（实验19-1）测定干酵母中酵母菌的数 量（个/g）
混 合 酸 发 酵
思考：浊度法测定微生物生长的原理和注意事项。
原理：在一定范围内，菌悬液
中的细胞浓度与光吸收值 (OD)成正比，菌数越多， OD越大。因此，借助于分光 光度计，在一定波长下测定菌 悬液的OD ，就可反应出菌液 的浓度。
实验十生防细菌的鉴定及抗菌能力测定
01
02
03
细菌形态观察
通过显微镜观察细菌的形 态、大小、排列方式等特 征。
革兰氏染色
利用革兰氏染色法将细菌 分为革兰氏阳性菌和革兰 氏阴性菌两大类。
特殊结构观察
观察细菌的芽孢、鞭毛、 荚膜等特殊结构，以辅助 鉴定。
生理生化鉴定
生长特性测定
测定细菌的生长曲线、最 适生长温度、pH值等指标。
碳源利用试验
谢谢
THANKS
06 结论与展望
CHAPTER
结论
01
生防细菌种类鉴定
通过形态学观察、生理生化特性测定以及16S rRNA基因序列分析，成
功鉴定出实验中的生防细菌属于芽孢杆菌属（Bacillus）。
02 03
抗菌能力测定
采用琼脂扩散法和液体培养法，对生防细菌的抗菌能力进行了测定。结 果显示，该生防细菌对多种植物病原菌具有显著的抑制作用，如大肠杆 菌、金黄色葡萄球菌、枯萎病菌等。
采用牛津杯法测定生防细菌对病原菌的抑菌能力，结果显示抑菌圈直径大于15mm，表明生防细菌具有较强的抑 菌能力。
最低抑菌浓度（MIC）
通过二倍稀释法测定生防细菌对病原菌的最低抑菌浓度，结果显示MIC值为10^5 CFU/mL，表明生防细菌在较 低浓度下即可抑制病原菌的生长。
结果分析与讨论
• 生防细菌种类与数量分析：本次实验鉴定出的生防细菌属于芽孢杆菌属，该属 细菌在土壤中广泛存在且数量较多。实验结果表明，生防细菌在土壤中的数量 较高，这为其在土壤中的定殖和发挥生防作用提供了有利条件。
安全性评价
通过急性毒性试验和亚慢性毒性试验，评估了生防细菌对哺乳动物的安 全性。结果表明，该生防细菌在推荐使用剂量下对哺乳动物无明显毒性 作用。
微生物学实验9 微生物生理生化实验的结果观察及放线菌、酵母菌和霉菌的培养
南京大学生物技术系实验报告题目微生物生理生化实验的结果观察及放线菌、酵母菌和霉菌的培养姓名年05 月17 日【一、实验目的】1、了解反应原理和细菌的生理生化特性。
2、正确掌握测定的方法并用作鉴别细菌的重要依据。
【二、实验原理、步骤和结果】一、细菌生理生化实验1、过氧化氢试验取一干净的载玻片，在上面滴一滴H2O2溶液，挑取一环菌苔，在H2O2溶液中涂抹，若产生气泡(氧气)为过氧化氢阳性反应，不产生气泡为阴性反应，本次实验用E.Coli和苏云金芽孢杆菌。
实验结果：两种细菌都产生了气泡(O2)，但E.Coli产生的气泡比苏云金芽孢杆菌更剧烈也更多。
实验证明E.Coli含有较多的过氧化氢酶。
2、淀粉水解试验(最后做，先每4人转接其中的菌种于斜面，然后做实验)淀粉是一种多糖，不能透过细菌细胞，但有的细菌能产生胞外的淀粉酶，将淀粉水解成麦芽糖后入细胞，淀粉遇碘呈蓝紫色。
取一瓶淀粉肉膏培养基熔化，每人倒一皿。
冷却，把平板划分成两部分，一边接种E.Coli，一边接种枯草杆菌。
用碘液淹没平板观察现象。
实验结果：E.Coli边缘呈蓝色，中间呈黄；而枯草芽孢杆菌则不变色。
3、甲基红(M.R.)试验有些细菌在降解葡萄糖过程中产生大量的酸，使培养基的pH显著下降。
甲基红指示剂可检测之，它在中性时呈黄色，酸性时呈红色。
将E.Coli及假单胞杆菌各接种2支葡萄糖蛋白水培养基。
另有1支不接种对照。
37℃培养7天。
每支试管加5滴甲基红试剂观察颜色变化。
实验结果：对照组呈黄色，E.Coli呈红色证明有酸的产生；而假单胞杆菌的2支都变黄色。
4、乙酰甲基甲醇(V.P.)试验第 1 页共3 页有些细菌能将糖代谢过程中产生的丙酮酸脱羧形成乙酰甲基甲醇、乙酰甲基甲醇在碱性条件下被空气中氧气氧化成二乙酰。
二乙酰与蛋白胨中精氨酸所含的胍基超作用，生成红色化合物，为V.P.试验阳性。
接种、培养同甲基红试验。
每ml培养液中加入0.6ml α－萘酚和0.2ml KOH溶液，充分振荡，静止15min后观察。
细菌的生理生化实验
1 目的1.1 了解细菌鉴定中常用的生理生化试验反应原理1.2 掌握测定细菌生理生化反应的技术和方法2 原理各种微生物在代谢类型上表现了很大的差异。
由于细菌特有的单细胞原核生物的特性，这种差异就表现的更加明显。
不同细菌分解、利用糖类、脂肪类和蛋白类物质的能力不同，所以其发酵的类型和产物也不相同，也就是说，不同微生物具有不同的酶系统。
即使在分子生物学技术和手段不断发展的今天，细菌的生理生化反应在菌株的分类鉴定中仍有很大作用。
3 材料3.1 菌种大肠埃希氏菌（Escherichia coli）、产气肠杆菌（Enterobacter aerogenes）、普通变形杆菌（Proteus vulgaris）、枯草芽孢杆菌（Bacillus subtilis）的斜面菌种3.2 培养基葡萄糖蛋白胨水培养基、蛋白胨水培养基、糖发酵培养基（葡萄糖、乳糖或蔗糖）3.3 试剂40％NaOH溶液、肌酸、甲基红试剂、吲哚试剂、乙醚、1.6%溴甲基酚紫指示剂。
3.4 器具超净工作台、恒温培养箱、高压灭菌锅、试管、移液管、杜氏小套管。
4 流程糖发酵试验→V-P试验→甲基红试验→吲哚试验5 步骤(一) 糖类发酵试验1 目的了解不同细菌分解利用糖的能力及实验原理，并掌握其操作方法．2 原理可根据细菌分解利用糖能力的差异表现出是否产酸产气作为鉴定菌种的依据。
是否产酸，可在糖发酵培养基中加入指示剂溴甲酚紫（即B.C.P指示剂，其pH在5.2以下呈黄色，pH在6.8以上呈紫色），经培养后根据指示剂的颜色变化来判断。
是否产气，可在发酵培养基中放入倒置杜氏小管观察。
3 材料3.2菌种大肠埃希氏菌（Escherichia coli）、产气肠杆菌（Enterobacter aerogenes）、普通变形杆菌（Proteus vulgaris）的斜面菌种3.３培养基葡萄糖、蔗糖和乳糖发酵培养液试管４流程发酵液试管→标记→接种→培养→观察→记录5 步骤5.1 试管标记图9-1 糖发酵产气取分别装有葡萄糖、蔗糖和乳糖发酵培养液试管各Ａ不产气；Ｂ产气4支，每种糖发酵试管中均分别标记大肠杆菌、产气肠杆菌、普通变形菌和空白对照。
实验十 微生物鉴定中常用的生理生化试验
实验十微生物鉴定中常用的生理生化试验摘要本次实验包括大分子水解试验、糖发酵试验和IMViC试验（吲哚、甲基红试验）三类试验，根据要求本实验使用六种培养基分别对所需菌种组合进行了大约24h的培养，之后按照实验要求进行各个试验。
最后观察到了实验现象，了解了所用菌种鉴别的方法和原则。
关键词微生物鉴定；生理生化试验；大分子水解试验；糖发酵试验；IMViC试验前言类的微生物有着不同的代谢类型，例如对一些物质的分解能力及分解代谢的产物的不同反映出他们不同的生理特征，这些特征可以用来对不同种类微生物进行鉴定和分类。
因此可以对微生物的不同生化反应进行试验，以此证明微生物生理特征的多样性，证明微生物分类鉴别的依据。
生理生化试验相比其他鉴别方法而言相对简便、快捷、经济实用，在一般的实验室中都可以进行，因此在微生物种类的初步鉴别中被广泛使用。
一、实验目的1、大分子水解试验证明不同微生物对各种有机大分子物质的水解能力不同，从而说明不同微生物有着不同的酶系统，掌握进行微生物大分子物质水解试验的原理和方法。
2、糖发酵试验了解糖发酵的原理和在肠细菌鉴定中的重要作用，掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。
3、IMViC试验了解IMViC的原理及其在肠道细菌鉴定中的意义和方法。
二、实验原理在所有生活细胞中存在的全部生物化学反应称之为代谢。
代谢过程主要是酶促反应过程。
具有酶功能的蛋白质多数在细胞内，称为胞内酶（endoenzymes）.许多细菌产生胞外酶(exoenzymes)，这些酶从细胞中释放出来，以催化细胞外的化学反应。
各种微生物具有不同的酶系统，所以它们能利用的底物不同，或虽利用相同的底物但产生的代谢产物却不同，因此可以利用各种生理生化反应来鉴别不同的细菌，尤其是在肠杆菌科细菌的鉴定中，生理生化试验占有重要的地位。
具体的原理如下：1、大分子水解试验：微生物对大分子如淀粉、蛋白质和油脂不能直接利用，必须依靠产生的胞外酶将大分子物质分解后才能被微生物吸收利用。
生物细菌的实验报告(3篇)
第1篇一、实验目的1. 学习微生物学的基本实验操作技能。
2. 掌握细菌的分离纯化方法。
3. 了解细菌的形态学和生理学特征，进行初步鉴定。
二、实验原理细菌是单细胞微生物，广泛分布于自然界。
本实验通过平板划线法或稀释涂布平板法分离纯化细菌，观察其形态学特征，并利用生理生化实验对其进行初步鉴定。
三、实验材料与仪器1. 材料：土壤、无菌生理盐水、牛肉膏蛋白胨琼脂平板、细菌培养箱、显微镜、酒精灯、接种环等。
2. 仪器：高压蒸汽灭菌器、无菌操作台、恒温培养箱、移液器、试管、烧杯等。
四、实验步骤1. 土壤样品的处理（1）取土壤样品10g，加入90ml无菌生理盐水，振荡混匀。
（2）用无菌纱布过滤，收集滤液。
2. 细菌的分离纯化（1）取滤液1ml，加入9ml无菌生理盐水，制成10^-1稀释液。
（2）取10^-1稀释液0.1ml，涂布于牛肉膏蛋白胨琼脂平板上。
（3）重复步骤（2），制作10^-2、10^-3稀释液的涂布平板，共计3个。
（4）将平板倒置，放入细菌培养箱，37℃培养24小时。
3. 细菌的形态学观察（1）将长出的菌落挑取少量，制作临时玻片。
（2）在显微镜下观察菌落的形态、大小、颜色等特征。
4. 细菌的生理生化实验（1）将长出的菌落分别接种于下列培养基：a. 硫酸铜琼脂培养基：用于检测硫化氢产生。
b. 硝酸盐还原培养基：用于检测硝酸盐还原。
c. 氧化酶试验培养基：用于检测氧化酶活性。
（2）将接种后的培养基放入细菌培养箱，37℃培养24小时。
（3）观察并记录实验结果。
五、实验结果与分析1. 细菌的分离纯化通过平板划线法，成功分离出细菌纯培养。
2. 细菌的形态学观察在显微镜下观察到菌落呈圆形、表面光滑、边缘整齐、颜色为白色。
3. 细菌的生理生化实验a. 硫化氢产生实验：菌落周围出现黑色沉淀圈，说明该菌能产生硫化氢。
b. 硝酸盐还原实验：菌落周围出现红色沉淀圈，说明该菌能还原硝酸盐。
c. 氧化酶活性实验：菌落周围出现蓝色，说明该菌具有氧化酶活性。
微生物鉴定之生化实验大全
(一）碳水化合物代谢实验糖(醇、苷）类发酵实验（1)原理：细菌分解糖得能力与该菌就是否含有分解某种糖得酶密切相关,故分解糖得能力各不相同，细菌分解糖类后得终产物亦不一致，在含糖培养基中加入指示剂，若细菌分解糖则产酸或产酸产气,使培养基颜色改变，从而判断细菌就是否分解某种糖或其她碳水化合物。
（2)基本培养基：在培养基中加入0、5％-1％得糖类(单糖、双糖、或者多糖）、醇类（甘露醇、肌醇）苷类(水杨苷、菊糖等）、培养基可为液体、半固体、固体或微量生化管几种类型.（3)实验方法：取某一种细菌得２4h纯培养物分别接种到葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖等培养基内,37℃培养2４h，观察结果并记录.（4)结果判定：如果接种进去得细菌可以发酵某种糖或醇,则可产酸,使培养基由紫色变成黄色,如果不发酵,则仍保持紫色。
如发酵得同时又产生气体,则在微量发酵管顶部积有气泡。
（5)应用:就是鉴定细菌最主要最基本得实验,特别就是对肠杆菌科细菌得鉴定尤为重要。
氧化型与发酵型（Ｏ/F）得测定（1）原理:细菌在分解葡萄糖得过程中，必需有氧得参加，称为氧化型(O),细菌在分解葡萄糖过程中可以进行无氧降解得,称为发酵型(F）。
发酵型细菌无论在有氧无氧得环境中都能分解葡萄糖。
不分解葡萄糖得细菌称为产碱型（-)。
这在区别微球菌与葡萄球菌、肠杆菌科成员中尤其有意义.（2）培养基：培养基蛋白胨2g，氯化钠5ｇ,磷酸氢二钾0、３g,葡萄糖10g,琼脂3g，1％溴麝香草酚蓝3mL，蒸馏水10００mL。
将蛋白胨、盐、琼脂与水混合,加热溶解，校正PH至7、2，然后加葡萄糖与指示剂，加热溶解,分装试管，３-4ｍL/管；115℃,高压蒸汽灭菌20m ｉn,取出冷却成琼脂柱。
（3）试验方法：挑取18—2４h得幼龄斜面培养物,穿刺接种,每种细菌接种两管，于其中一管覆盖1ｍL液体石蜡，3７℃培养２4h或更长时间。
（4）结果判定:(５)应用:O／F试验主要适用于G—肠道杆菌得鉴别。
细菌的生化实验报告
细菌的生化实验报告细菌的生化实验报告细菌是微生物界中最为常见的一类生物，它们以其微小的身躯和巨大的生物活动而闻名。
在本次实验中，我们旨在探索细菌的生化特性和其在环境中的作用。
通过实验，我们对细菌的生长、代谢和适应能力有了更深入的了解。
实验一：细菌的生长曲线在这个实验中，我们选择了大肠杆菌作为研究对象。
我们将大肠杆菌接种在培养基上，并在一定时间间隔内记录细菌的生长情况。
通过测量培养液中的细菌数量，我们绘制了细菌的生长曲线。
结果显示，细菌的生长曲线呈现出典型的“S”形曲线。
在实验初期，细菌数量增长较为缓慢，这是由于适应期的存在。
随着时间的推移，细菌进入了指数增长期，细菌数量迅速增加。
然而，随着培养基中营养物质的消耗和代谢产物的积累，细菌的生长速率逐渐减缓，进入了平台期。
这是由于细菌的生长受到了环境条件的限制。
实验二：细菌的代谢特性在这个实验中，我们研究了细菌的代谢特性，特别是其对碳源的利用能力。
我们选择了葡萄糖、乳糖和蔗糖作为碳源，通过测量细菌在不同碳源下的生长情况，评估了细菌对不同碳源的利用能力。
结果显示，大肠杆菌对葡萄糖的利用能力最强，其次是乳糖，而对蔗糖的利用能力较弱。
这表明细菌对碳源的利用能力存在差异，可能与其代谢途径和酶的分布有关。
此外，我们还观察到在不同碳源条件下，细菌的生长速率和产生的代谢产物也有所不同。
这提示我们，在实际应用中，选择合适的碳源可以促进细菌的生长和代谢活性。
实验三：细菌的适应能力在这个实验中，我们研究了细菌的适应能力，特别是其对环境压力的响应。
我们将大肠杆菌分别接种在不同的培养基中，其中一组培养基中添加了抗生素，另一组培养基中添加了高温。
结果显示，添加抗生素的培养基中，细菌的生长受到了明显的抑制。
抗生素通过抑制细菌的代谢活性和细胞分裂，从而阻碍了细菌的生长。
而在高温条件下，细菌的生长速率明显减慢，部分细菌甚至无法生存。
这表明细菌对环境压力的适应能力有限，过高的温度和抗生素的存在可能对细菌产生不可逆的影响。
微生物鉴定之生化实验大全
微生物鉴定之生化实验大全Company number：【0089WT-8898YT-W8CCB-BUUT-202108】（一）碳水化合物代谢实验糖（醇、苷）类发酵实验（1)原理：细菌分解糖的能力与该菌是否含有分解某种糖的酶密切相关，故分解糖的能力各不相同，细菌分解糖类后的终产物亦不一致，在含糖培养基中加入指示剂，若细菌分解糖则产酸或产酸产气，使培养基颜色改变，从而判断细菌是否分解某种糖或其他碳水化合物。
（2)基本培养基：在培养基中加入%-1%的糖类（单糖、双糖、或者多糖）、醇类（甘露醇、肌醇）苷类（水杨苷、菊糖等).培养基可为液体、半固体、固体或微量生化管几种类型。
（3)实验方法：取某一种细菌的24h纯培养物分别接种到葡萄糖、乳糖、麦芽糖、甘露醇、蔗糖等培养基内，37℃培养24h，观察结果并记录。
（4)结果判定：如果接种进去的细菌可以发酵某种糖或醇，则可产酸，使培养基由紫色变成黄色，如果不发酵，则仍保持紫色。
如发酵的同时又产生气体，则在微量发酵管顶部积有气泡。
（5)应用：是鉴定细菌最主要最基本的实验，特别是对肠杆菌科细菌的鉴定尤为重要。
氧化型与发酵型（O/F)的测定（1）原理：细菌在分解葡萄糖的过程中，必需有氧的参加，称为氧化型（O），细菌在分解葡萄糖过程中可以进行无氧降解的，称为发酵型(F)。
发酵型细菌无论在有氧无氧的环境中都能分解葡萄糖。
不分解葡萄糖的细菌称为产碱型(-)。
这在区别微球菌与葡萄球菌、肠杆菌科成员中尤其有意义。
（2）培养基：培养基蛋白胨2g，氯化钠5g，磷酸氢二钾，葡萄糖10g，琼脂3g，1%溴麝香草酚蓝3mL，蒸馏水1000mL。
将蛋白胨、盐、琼脂和水混合，加热溶解，校正PH至，然后加葡萄糖和指示剂，加热溶解，分装试管，3-4mL/管；115℃，高压蒸汽灭菌20min，取出冷却成琼脂柱。
（3）试验方法：挑取18-24h的幼龄斜面培养物，穿刺接种，每种细菌接种两管，于其中一管覆盖1mL液体石蜡，37℃培养24h或更长时间。
细菌生理生化实验
细菌生理生化试验—小木虫微生物生理生化反应就是指用化学反应来测定微生物得代谢产物,生理生化反应常用来鉴别一些在形态与其它方面不易区分得微生物。
因此微生物生理生化反应就是微生物分类鉴定中得重要依据之一,微生物鉴定中常用得生理生化反应如下所示:(一)糖、醇发酵试验原理:不同微生物分解利用糖类得能力有很大差异,或能利用或不能利用,能利用者,或产气或不产气。
可用指示剂及发酵管检验、有些细菌分解某些糖(醇、苷)产酸(符号:＋)、产气(符号:○),培养基由紫(蓝)变黄(指示剂溴甲酚紫或溴百里酚蓝由紫或蓝遇酸变黄得结果),并有气泡;有些产酸,仅培养基变黄;有些不分解糖类(符号:－),培养基仍为紫(蓝)色、培养基配制:一般细菌常用休与李夫森二氏培养基:蛋白胨:2g,Ｋ2ＨPO4 :0.2ｇ,NaCl:5g,糖(醇、糖苷):1％,水洗琼脂:5～６g,蒸馏水:1０0０mL,PＨ:6、８～７.0,溴百里酚蓝:1％水溶液３mL(先用少量得9５％乙醇溶解后,再加水配成1％水溶液)。
先调PH后再加指示剂。
芽孢杆菌培养基配制:(NH４)2ＨＰO4:１g ,ＭｇＳO4:０.2g ,KCl:0。
２ｇ,酵母膏:０.２g ,糖(醇、糖苷):1％水洗琼脂:5～6g ,蒸馏水:100０mL ,溴甲酚紫:0、４％乙醇液2mL,ＰH:６、8~7。
0。
先调PH后再加指示剂。
将以上培养基分装试管,培养基高度约为４～5cｍ,115℃灭菌20min、测定得糖(醇、糖苷)类可以包括:葡萄糖、蔗糖、甘露糖、乳糖(１、5%)、半乳糖(１.５％)、D—山梨醇、果糖、阿拉伯糖、麦芽糖、纤维二糖、木糖、水杨苷等。
注意:以上亦可用液体培养基。
接种与观察结果:用18～２4h得幼龄菌种,用穿刺针接种于培养基中,适温培养1d,３d,5d后观察,颜色变黄为阳性,不变为阴性;有气泡产生为产气。
结果记录:产酸:+,产气:○,不产酸长气:- 。
(二)淀粉水解试验原理:某些细菌可以产生分解淀粉得酶,把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。
微生物生理生化反应实验报告
微生物的生理生化反应一、实验目的1.掌握细菌鉴定中常用生理生化反应的测定方法。
2.了解细菌代谢类型的多样性。
3.了解细菌生长现象及代谢产物在鉴别中的意义。
4.学习接种技术。
二、实验原理在所有生活细胞中存在的全部生物化学反应称之为代谢，代谢过程主要是酶促反应过程，由于各种微生物具有不同的酶系统，所以他们能利用的底物不同，或虽利用相同的底物但产生的代谢产物却不同，因此可以利用各种生理生化反应来鉴别不同的细菌。
1.糖发酵试验：糖发酵试验是常用的鉴别微生物的生化反应,绝大多数细菌都能利用糖类作为碳源和能源,但是它们在分解糖类物质的能力上有很大的差异.有些细菌能分解某种糖产生有机酸(如乳酸,醋酸,丙酸等)和气体(如氢气,甲烷,二氧化碳等);有些细菌只产酸不产气.例如大肠杆菌能分解乳糖和葡萄糖产酸并产气。
产酸后再加入溴甲酚紫指示剂后会使溶液呈黄色，且杜氏小管中会收集到一部分气体。
若细菌不能使糖产酸产气，则最后溶液为指示剂的紫色，且杜氏小管中无气体。
2.甲基红试验（MR）：某些细菌在糖代谢过程中分解葡萄糖生成丙酮酸，后者进而被分解产生甲酸，乙酸和乳酸等多种有机酸，培养基就会变酸，使加入培养基中的甲基红指示剂由橙黄色转变为红色，即甲基红反应。
大肠杆菌为阳性，产气肠杆菌为阴性。
3.伏-普试验（VP）：某些细菌在糖代谢过程中分解葡萄糖生成非酸性或中性末端产物，某些细菌产生丙酮酸，再将丙酮酸缩合脱羧成乙酰甲基甲醇，在碱性条件下被氧化成二乙酰，二乙酰与胍基作用，生成红色化合物，为阳性。
4.靛基质（吲哚）试验：是用来检测吲哚的产生，在蛋白胨培养基中，若细菌能产生色氨酸酶，则可将蛋白胨中的色氨酸分解为丙酮酸和吲哚，吲哚与对二甲基苯甲醛反应生成玫瑰色的玫瑰吲哚。
但并非所有的微生物都具有分解色氨酸产生吲哚的能力，所以吲哚实验可以作为一个生物化学检测的指标。
大肠杆菌吲哚反应阳性，产气肠杆菌为阴性。
5.硫化氢实验：某些细菌分解含硫的氨基酸，产生硫化氢，硫酸铵亚铁等铁盐可与硫化氢反应生成不溶性硫化亚铁之黑色沉淀，为硫化氢实验阳性。
微生物生化实验报告
微生物生化实验报告微生物生化实验报告引言微生物是一类极小的生物体，包括细菌、真菌和病毒等。
微生物在生态系统中扮演着重要的角色，对环境和人类健康具有深远影响。
为了更好地了解微生物的生化特性，我们进行了一系列的实验研究。
实验一：细菌的酸碱耐受性在这个实验中，我们选择了常见的大肠杆菌和乳酸菌作为研究对象，通过调整培养基的酸碱度来观察它们的生长情况。
实验结果显示，大肠杆菌对酸性环境更为耐受，而乳酸菌则更适应碱性环境。
这与它们在人体内的定位有关，大肠杆菌主要寄生在肠道中，而乳酸菌则主要存在于酸性环境中，如乳制品中。
实验二：真菌的产酶能力真菌是一类重要的微生物，它们具有丰富的酶系统。
我们选择了常见的曲霉菌和酵母菌进行实验，通过培养在含有特定底物的琼脂平板上，观察它们的酶活性。
实验结果显示，曲霉菌具有较高的纤维素酶和淀粉酶活性，而酵母菌则表现出较高的蛋白酶活性。
这些酶的产生对于真菌的生存和环境适应具有重要意义。
实验三：病毒的感染机制病毒是一种非常特殊的微生物，它无法独立生存，必须寄生在宿主细胞内。
我们选择了常见的流感病毒和艾滋病病毒进行实验，通过观察它们与宿主细胞的相互作用来了解感染机制。
实验结果显示，流感病毒通过与宿主细胞表面的受体结合，进入细胞内部并复制自身。
而艾滋病病毒则通过感染免疫细胞破坏宿主免疫系统。
这些研究有助于我们更好地了解病毒的传播和防治方法。
实验四：微生物的代谢途径微生物的代谢途径对其生存和环境适应至关重要。
我们选择了常见的厌氧菌和好氧菌进行实验，通过观察它们在不同环境条件下的代谢途径来了解其能量来源。
实验结果显示，厌氧菌主要通过无氧呼吸产生能量，而好氧菌则通过有氧呼吸产生能量。
这种代谢途径的差异使得它们在不同环境中具有不同的竞争优势。
结论通过以上实验，我们对微生物的生化特性有了更深入的了解。
不同微生物在酸碱耐受性、产酶能力、感染机制和代谢途径等方面表现出差异，这与它们在不同环境中的生存和适应有关。
实验十细菌生化实验-微生物实验
2、记录大肠杆菌及普通变形杆菌对葡萄糖和乳糖的 发酵试验结果。以“+”表示产酸或产气，“－” 表示不产酸或不产气。
3、记录大肠杆菌和产气杆菌的吲哚试验、甲基红试 验、伏-普试验、柠檬酸盐试验及硫化氢试验结果， 以“+”表示阳性反应。“－”表示阴性反应。
4、不利用碘液，你怎样证明淀粉水解的存在？
五、实验报告
一马当先，全员举绩，梅开二度，业 绩保底 。20.12. 1720.1 2.1708: 2308:23 :3808:2 3:38Dec-20
牢记安全之责，善谋安全之策，力务 安全之 实。202 0年12 月17日 星期四8 时23分 38秒T hursday, December 17, 2020
相信相信得力量。20.12.172020年12月 17日星 期四8 时23分3 8秒20. 12.17
试验名称
培养基名称
菌种名称 接种 接种 方式 管数
吲哚试验
蛋白胨水培养基 大肠杆菌和 液体 1
甲基红试验 葡萄糖蛋白胨培养基 产气肠杆菌 液体 1
伏普试验 葡萄糖蛋白胨培养基
液体 1
柠檬酸盐试验 柠檬酸盐培养基
斜面 1
五、实验报告
1、分别记录试验菌种对淀粉水解、脂肪水解、明胶 液化、石蕊牛奶及尿素试验的结果。以“＋”表示 阳性，“－”表示阴性。
微生物学检验细菌的生物化学实验
检测对象：特异性抗原
方法：直接凝集试验（玻片法）、荚膜肿
胀伤寒试杆验菌诊断血清 + 待检测细菌
（含抗伤寒杆菌抗体）
细菌凝集
玻片凝集试验：阳性
报告：检出伤寒杆菌
血清学诊断
试剂：含已知抗原 应用：检测待检者血清中有无相应的抗 体以及抗体的效价
球菌
种类: 革兰阳性 葡萄球菌属、链球菌属（链球菌、肺炎 链球菌）、肠球菌属、微球菌属等 革兰阴性 奈瑟菌属、布兰汉菌属
四种革兰阳性菌的比较
葡萄球菌属 微球属 链球菌属 气球菌属
排列方式 葡萄串状、 四联或成对 链状 成双或四联
触酶试验
+
+
-
弱+
氧化/发 酵
厌氧生长
发酵 +氧化 源自生长发酵 +发酵 弱
葡萄球菌属
最常见的化脓性球菌 医务人员的葡萄球菌带菌率高 革兰阳性、葡萄串状排列 产生不同的脂溶性色素 触酶试验阳性 发酵葡萄糖 金黄色葡萄球菌是主要致病菌
培养基不变色： － 应用：是肠道杆菌常用的生化反应试验， 主要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌
伏－普试验（V-P试验）
原理：细菌发酵葡萄糖，产生丙酮酸，丙酮 酸脱羧生成乙酰甲基甲醇，在碱性环境中乙 酰甲基甲醇被氧化为二乙酰，二乙酰与蛋白 胨中的精氨酸所含的胍基结合，生成红色化 合物。
培养基：葡萄糖蛋白胨水
结果：加入试剂后，培养基呈现红色：+ 培养基不变色： －
应用：是肠道杆菌常用的生化反应试验，主 要用于区别大肠肝菌和产气肠杆菌
葡萄糖
甲基红试验
丙酮酸 大量混合酸
pH降至4.4以下
甲基红试剂
培养基变红
葡萄糖
V－P试验
细菌生化反应实验报告
细菌生化反应实验报告细菌生化反应实验报告引言：细菌是微生物界中最常见的生物之一，它们在自然界中广泛存在。
通过深入研究细菌的生化反应，我们可以更好地了解它们的生存机制和对环境的影响。
本实验旨在探究细菌的生化反应过程，并分析其对环境的影响。
实验材料与方法：1. 细菌培养基：含有适当营养成分的培养基，提供细菌生长所需的营养物质。
2. 培养皿：用于培养细菌的容器。
3. 细菌菌株：选择常见的大肠杆菌作为实验菌株。
4. 实验仪器：包括离心机、显微镜等。
5. 实验步骤：包括细菌培养、取样、离心、显微镜观察等。
实验结果与讨论：1. 细菌生长曲线：在培养基中培养细菌，我们观察到细菌的生长呈现出典型的生长曲线，即潜伏期、指数增长期、平台期和死亡期。
这表明细菌的生长过程受到多种因素的调控，包括营养物质的可利用性、环境条件等。
2. 细菌代谢产物：通过分析培养基中的代谢产物，我们发现细菌在生长过程中会产生一系列的代谢产物，如有机酸、氨气等。
这些代谢产物不仅反映了细菌的生化反应过程，还对环境产生一定的影响。
例如，有机酸的产生可能导致培养基的酸碱度变化，从而影响到其他微生物的生长。
3. 细菌形态和结构：通过显微镜观察，我们可以看到细菌的形态和结构。
大肠杆菌呈现出长条状的形态，表面覆盖着细菌鞭毛和菌毛。
这些结构对细菌的运动和附着起着重要作用，使其能够更好地适应不同的环境。
实验结论：通过本次实验，我们深入了解了细菌的生化反应过程。
细菌的生长曲线、代谢产物以及形态结构都反映了细菌的生存机制和对环境的影响。
进一步研究细菌的生化反应有助于我们更好地理解微生物界的生态系统，并为环境保护与微生物应用领域提供理论依据。
未来展望：在今后的研究中，我们可以进一步探究细菌的生化反应机制，包括细菌的代谢途径、酶的作用机制等。
此外，我们还可以研究不同菌株在不同环境条件下的生化反应差异，以及细菌与其他微生物之间的相互作用。
这些研究将有助于揭示微生物界的奥秘，为生物技术和环境保护提供更多的可能性。
细菌生理生化实验
细菌生理生化试验—小木虫微生物生理生化反应是指用化学反应来测定微生物的代谢产物，生理生化反应常用来鉴别一些在形态和其它方面不易区分的微生物。
因此微生物生理生化反应是微生物分类鉴定中的重要依据之一,微生物鉴定中常用的生理生化反应如下所示：(一) 糖、醇发酵试验原理：不同微生物分解利用糖类的能力有很大差异，或能利用或不能利用，能利用者，或产气或不产气。
可用指示剂及发酵管检验。
有些细菌分解某些糖（醇、苷）产酸（符号：+）、产气（符号：○），培养基由紫（蓝）变黄（指示剂溴甲酚紫或溴百里酚蓝由紫或蓝遇酸变黄的结果），并有气泡；有些产酸，仅培养基变黄；有些不分解糖类（符号：－），培养基仍为紫（蓝）色。
培养基配制：一般细菌常用休和李夫森二氏培养基：蛋白胨：2g ，K2HPO4 :0.2g ，NaCl:5g ，糖（醇、糖苷）：1% ，水洗琼脂：5～6g，蒸馏水：1000mL，PH:6.8～7.0，溴百里酚蓝：1%水溶液3mL(先用少量的95%乙醇溶解后，再加水配成1%水溶液)。
先调PH后再加指示剂。
芽孢杆菌培养基配制：(NH4)2HPO4:1g ，MgSO4:0.2g ，KCl:0.2g ，酵母膏：0.2g ，糖（醇、糖苷）：1%水洗琼脂：5～6g ，蒸馏水：1000mL ，溴甲酚紫：0.4%乙醇液2mL，PH:6.8～7.0。
先调PH后再加指示剂。
将以上培养基分装试管，培养基高度约为4～5cm ，115℃灭菌20min。
测定的糖（醇、糖苷）类可以包括：葡萄糖、蔗糖、甘露糖、乳糖（1.5%）、半乳糖（1.5%）、D-山梨醇、果糖、阿拉伯糖、麦芽糖、纤维二糖、木糖、水杨苷等。
注意：以上亦可用液体培养基。
接种和观察结果：用18～24h的幼龄菌种，用穿刺针接种于培养基中，适温培养1d，3d，5d后观察，颜色变黄为阳性，不变为阴性；有气泡产生为产气。
结果记录：产酸：+，产气：○，不产酸长气：-。
(二) 淀粉水解试验原理：某些细菌可以产生分解淀粉的酶，把淀粉水解为麦芽糖或葡萄糖。
微生物实验报告细菌
微生物实验报告题目脓汁和粪便标本中病原菌的检测年级专业2013级临床医学八年制实验者学号小组成员指导老师一、实验目的1.了解细菌生长的基本营养条件，熟悉培养基的类型，学习并掌握培养基的原则与方法。
2.掌握无菌操作技术，掌握病原菌的分离与培养方法。
3.了解并比较细菌在固体、半固体和液体培养基的生长特征。
4.学习并掌握空气及人体细菌检测学方法。
5.掌握细菌涂片标本的制备以及革兰染色法，熟悉不同类型细菌的基本形态。
6.掌握糖发酵实验、抗菌素敏感性实验和血浆凝固酶实验的原理与方法。
7.从脓汁和粪便标本中分离培养和检测出病原体。
二、实验器材1.培养基的制备：干粉培养基、天平、蒸馏水、称量皿、药勺、锥形瓶、量筒、电炉、试管、洗耳球、试管筐、移液管、棉塞、牛皮纸、橡皮筋、手套、石棉网2.空气与人体体表细菌学检查：琼脂培养基、酒精、碘酒3.细菌的分离培养：脓汁标本、粪便标本、伊红美蓝平板、营养琼脂平板、接种环、酒精灯、打火机4.细菌的纯培养：接种环、酒精灯、打火机、中性笔、斜面培养基5.细菌的形态学检测：斜面培养物、营养肉汤、生理盐水、镜油瓶、拭镜纸、吸水纸、载玻片、显微镜、接种环、酒精灯、打火机、中性笔、革兰染色试剂、液体培养基6.细菌的生化试验：葡萄糖发酵管、乳糖发酵管、接种针、酒精灯、打火机、中性笔、菌液、营养琼脂平板、接种环、药物纸片（青霉素、庆大霉素、头孢曲松）、玻片、兔血浆、生理盐水7.细菌的血清学试验：玻片、福氏志贺菌诊断血清、生理盐水、接种环、酒精灯三、实验方法与步骤1.培养基的制备称量琼脂粉→蒸馏水→加热溶化→分装→集中放在试管筐里→罩上硫酸纸、牛皮纸→用橡皮筋扎好→放入讲台边的灭菌桶或灭菌筐内→送到高压蒸汽灭菌室（洗刷室）→灭菌2.空气与人体体表细菌学检查2.1空气的细菌学检查每组1个营养琼脂平板，选择实验楼女厕所→将平板盖打开，盖朝下放置在平板旁边→平板暴露于空气中15分钟→平板倒扣盖上→作标记→37℃温箱培养24小时→观察结果。
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甲➢色基氨红酸试酶验：（色M氨.R.酸试→验吲）哚：＋对二甲基氨基苯甲醛→ 伏玫➢产-瑰普酸吲试能哚验力（（：红乙强色酰，）甲甲基基甲红醇变试红验；）弱：：甲基红不变色 柠➢葡檬➢萄酸大糖盐肠→试杆丙验菌酮：：酸阳→性乙酰甲基甲醇→2,3-丁二醇
➢乙能➢否酰产利甲气用基肠柠甲杆檬醇菌酸→：作O阴H为性－碳→源二乙酰＋精氨酸的胍基→红 色化➢合大物肠杆菌：阴性
3、溶液或试剂：革兰氏染色用卢氏碘液（Lugol’s iodine solution），甲基红指示剂，40% KOH，5% α-萘酚，乙醚， 吲哚试剂等。
4、仪器或其他用具：无菌平板，无菌试管，接种环，接种针， 试管架。
四、实验步骤
1、细菌水解大分子物质试验
淀粉水解试验 油➢脂培水养解基试：验淀粉培养基平板 明➢➢胶菌 培液种 养化： 基试：大验肠 油杆脂菌培和养枯基草平芽板孢杆菌 石➢➢➢蕊方 菌 培牛法种 养乳： 基：试：平 大肠 试板验上杆管划菌明和胶“金培十黄养”色基字葡接萄种球菌
清洁：维持前3S的成果，制度化，规 范化。1 3:49:29 13:49:2 913:49 11/8/2 020 1:49:29 PM
创造有魅力的质量，造就忠实顾客群 体。20. 11.813: 49:2913 :49Nov -208-N ov-20
多看一眼，安全保险；多防一步，少 出事故 。13:49: 2913:4 9:2913: 49Sund ay, November 08, 2020
没有措施的管理是空谈的管理，没有 检查和 计划的 管理是 空洞的 管理。2 0.11.82 0.11.81 3:4913: 49:291 3:49:29 Nov-20
四、实验步骤
1、细菌水解大分子物质试验 2、糖发酵试验
➢培养基：葡萄糖发酵培养基和乳糖发酵培养基 （内装杜氏小管）（各3支） ➢菌种：大肠杆菌和产气肠杆菌 ➢方法：分别接种于葡萄糖发酵培养基和乳糖发 酵培养基
四、实验步骤 1、细菌水解大分子物质试验 2、糖发酵试验 3、IMViC试验
IMViC试验
试验名称
培养基名称
菌种名称 接种 接种 方式 管数
吲哚试验
蛋白胨水培养基 大肠杆菌和 液体 1
甲基红试验 葡萄糖蛋白胨培养基 产气肠杆菌 液体 1
伏普试验 葡萄糖蛋白胨培养基
液体 1
柠檬酸盐试验 柠檬酸盐培养基
斜面 1
五、实验报告
1、分别记录试验菌种对淀粉水解、脂肪水解、明胶 液化、石蕊牛奶及尿素试验的结果。以“＋”2020 年11月 下午1时 49分20 .11.813 :49Nov ember 8, 2020
参加灭火工作是每一个成年公民的应 尽义务 。2020 年11月8 日星期 日1时4 9分29 秒13:49: 298 November 2020
品质你我做得好，顾客留住不会跑。 下午1时 49分29 秒下午 1时49 分13:49: 2920.1 1.8
➢大 产肠气肠杆杆菌菌：阳：阳性性 ➢产气肠杆菌：阴性
三、实验材料
1、菌种：枯草芽孢杆菌，大肠杆菌，金黄色葡萄球菌，铜绿 假单胞菌（Pseudomonas aeruginosa），普通变形杆菌（Proteus vularis），产气肠杆菌。
2、培养基：固体油脂培养基，固体淀粉培养基，明胶培养基 试管，石蕊牛奶试管，尿素琼脂试管、葡萄糖发酵培养基试 管和乳糖发酵培养基试管各3支，普通变形杆菌（内装有倒 置的德汉氏小管） ，蛋白胨水培养基，葡萄糖蛋白胨水培 养基，柠檬酸盐斜面培养基，醋酸铅培养基。
5、假如某种微生物可以有氧代谢葡萄糖，发酵试验 应该出现什么结果？
6、为什么大肠杆菌的甲基红反应阳性，而产气肠杆 菌为阴性？这个试验与伏－普试验最初底物与最终 产物有何异同之处？
7、说明在硫化氢试验中醋酸铅的作用，可以用哪种 化合物代替醋酸铅？
千里之堤溃于蚁穴，小洞不补大洞难 堵。20. 11.820. 11.8Sun day, November 08, 2020
义和方法。
二、实验原理
1、微生物对生物大分子的分解利用 2、➢糖淀发粉酵水试解验：淀粉酶 3、➢I油产M脂酸Vi水：C试解溴验：甲脂酚肪紫酶指示剂
➢明➢胶大液肠化杆：菌蛋：白酶 ➢石➢蕊产牛气乳肠试杆验菌：：产酸、产碱、胨化、酸凝固等。 ➢产气：杜氏小管检测
➢大肠杆菌： ➢产气肠杆菌：
IMViC试验
预防保养及时做，生产顺畅不会错。2 0.11.82 0.11.81 3:49:29 13:49:2 9November 8, 2020
安全生产常抓不懈，抓而不紧，等于 不抓。2 020年1 1月8日 下午1 时49分2 0.11.82 0.11.8
传播安全知识，践行社会使命。2020 年11月8 日星期 日下午 1时49 分29秒1 3:49:29 20.11.8
➢大 ➢➢➢➢➢➢注 方 注 菌 方 培 菌 方种意 法 意 法 法种 养： ： ： ： ：：： 基接 平 接 穿 粘 斜：大种 板 种 刺 面乳肠试产前上前接划杆管碱在划在种线菌石平折平接菌或蕊板线板种或牛产底接底铜乳气部种部绿培肠作作假养杆记记单基菌号 号胞（；菌2支“）十”字不要太 ➢➢注 注意意：：观20察℃结培构养注意牛乳产酸、产碱、凝固、 胨化现象是连续出现的。
实验十 细菌生化实验
一、实验目的 1、证明不同微生物对各种有机大分子的水解能力不同，从而
说明不同微生物有着不同的酶系统。 2、掌握进行微生物大分子水解试验的原理和方法。 3、了解糖发酵的原理和在肠道细菌鉴定中的重要作用。 4、掌握通过糖发酵鉴别不同微生物的方法。 5、了解IMViC与硫化氢反应的原理及其在肠道菌鉴定中的意
2、记录大肠杆菌及普通变形杆菌对葡萄糖和乳糖的 发酵试验结果。以“+”表示产酸或产气，“－” 表示不产酸或不产气。
3、记录大肠杆菌和产气杆菌的吲哚试验、甲基红试 验、伏-普试验、柠檬酸盐试验及硫化氢试验结果， 以“+”表示阳性反应。“－”表示阴性反应。
4、不利用碘液，你怎样证明淀粉水解的存在？
五、实验报告