培养基配制使用记录
控制菌检查培养基适用性检查记录表
德信诚培训网
更多免费资料下载请进:
好好学习社区
控制菌检查培养基适用性检查记录
一、 菌液制备(需要的菌种在□内划“√” ):
□(1)大肠埃希菌新鲜肉汤培养物1ml ,9ml0.9%无菌NaCl 溶液,10倍递增稀释; □(2)金黄色葡萄球菌新鲜肉汤培养物1ml ,9ml0.9%无菌NaCl 溶液,10倍递增稀释; □(3)乙型副伤寒沙门菌新鲜肉汤培养物1ml ,9ml0.9%无菌NaCl 溶液,10倍递增稀释; □(4)铜绿假单胞菌新鲜肉汤培养物1ml ,9ml0.9%无菌NaCl 溶液,10倍递增稀释; □(5)生孢梭菌新鲜硫乙醇酸盐流体培养物1ml ,9ml0.9%无菌NaCl 溶液,10倍递增稀释;
二、每ml 菌液含菌量的计数测定。
测定方法:取稀释后的菌液1ml (剩余的菌液冷藏保存),置直径90mm 的无菌平皿中,注入15-20ml 已经过适用性检查确正的温度不超过45℃的溶化的营养琼脂培养基(细菌类别计数选用该培养基)或玫瑰红钠琼脂培养基(霉菌、酵母菌类别计数选用该培养基),混匀,凝固,倒置培养。
每稀释级每种培养基至少制备2个平板。
细菌类别培养温度为30℃~35℃;霉菌、酵母菌类别培养温度为23℃~28℃。
细菌类别培养3天,霉菌、酵母菌类别培养5天。
培养基的制备实验报告
培养基的制备实验报告篇一:《培养基的制备与消毒灭菌》实验报告《培养基的制备与消毒灭菌》实验报告实验目的1.学习和掌握配制培养基(以牛肉膏蛋白胨培养基的配制为例)的一般方法和原理。
2.了解消毒和灭菌的原理,掌握常用灭菌方法的操作步骤。
实验原理培养基是人工配制的适合微生物生长繁殖或积累代谢产物的营养基质,用以培养、分离、鉴定、保存各种微生物或积累代谢产物。
在自然界中.微生物种类繁多,营养类型多样,加之实验和研究的目的不同,所以培养基的种类很多。
但是,不同种类的培养基中,一般应含有水分、碳源、氮源、能源、无机盐、生长因素等。
不同微生物对PH要求不一样.雷菌和酵母的培养基的pH一般是偏酸性的,而细菌和放线菌的培养基的pH一般为中性或微碱性的(嗜碱细菌和嗜酸细菌例外)。
所以配制培养基时,都要根据不同微生物的要求将培养基的pH调到合适的范围。
此外,由于配制培养的各类营养物质和容器等含有各种微生物,因此,已配制好的培养基必须立即灭菌.如果来不及灭菌,应暂存冰箱内,以防止其中的微生物生长繁殖而消耗养分和改变培养的酸碱度所带来不利的影响。
高压蒸气灭菌是将持灭菌的物品放在一个密闭的加压灭菌锅内,通过加热,使灭菌锅套间的水沸腾而产生蒸气。
待水蒸气急剧地将锅内的冷空气从排气阀中驱尽,然后关闭排气阀.继续加热,此时由于蒸气不能道出,而增加了灭菌器内的压力,从而使沸点增高,得到高于100℃的温度。
导致菌体蛋白质凝固变性而达到灭菌的目的。
牛肉膏蛋白胨培养基是一种应用最广泛和最普通的细菌基础培养基,有时又称为普通培养基。
由于这种培养基中含有一般细菌生长繁殖所需要的最基本的营养物质,所以可供作微生物生长繁殖之用。
基础培养基含有牛肉膏、蛋白胨和NaCl。
其中牛肉膏为微生物提供碳源、能源、磷酸盐和维生素,蛋白胨主要提供氮源和维生素,而NaCl提供无机盐。
在配制固体培养基时还要加入一定量琼脂作凝固剂,琼脂在常用浓度下96℃时溶化,实际应用时,一般在沸水浴中或下而垫以石棉网煮沸溶化,以免琼脂烧焦。
培养基的制备与细菌的接种的实验报告
培养基的制备与细菌的接种的实验报告篇一:细菌的分离纯化和接种实验环工综合实验细菌的分离纯化和接种实验实验报告环境科学与工程学院实验中心篇二:微生物实验报告细菌微生物实验报告题目年级专业实验者学号小组成员指导老师一、实验目的脓汁和粪便标本中病原菌的检测 2021级临床医学八年制1.了解细菌生长的基本营养条件,熟悉培养基的类型,学习并掌握培养基的原则与方法。
2.掌握无菌操作技术,掌握病原菌的分离与培养方法。
3.了解并比较细菌在固体、半固体和液体培养基的生长特征。
4.学习并掌握空气及人体细菌检测学方法。
5.掌握细菌涂片标本的制备以及革兰染色法,熟悉不同类型细菌的基本形态。
6.掌握糖发酵实验、抗菌素敏感性实验和血浆凝固酶实验的原理与方法。
7.从脓汁和粪便标本中分离培养和检测出病原体。
二、实验器材1.培养基的制备:干粉培养基、天平、蒸馏水、称量皿、药勺、锥形瓶、量筒、电炉、试管、洗耳球、试管筐、移液管、棉塞、牛皮纸、橡皮筋、手套、石棉网2.空气与人体体表细菌学检查:琼脂培养基、酒精、碘酒3.细菌的分离培养:脓汁标本、粪便标本、伊红美蓝平板、营养琼脂平板、接种环、酒精灯、打火机4.细菌的纯培养:接种环、酒精灯、打火机、中性笔、斜面培养基5.细菌的形态学检测:斜面培养物、营养肉汤、生理盐水、镜油瓶、拭镜纸、吸水纸、载玻片、显微镜、接种环、酒精灯、打火机、中性笔、革兰染色试剂、液体培养基6.细菌的生化试验:葡萄糖发酵管、乳糖发酵管、接种针、酒精灯、打火机、中性笔、菌液、营养琼脂平板、接种环、药物纸片(青霉素、庆大霉素、头孢曲松)、玻片、兔血浆、生理盐水7.细菌的血清学试验:玻片、福氏志贺菌诊断血清、生理盐水、接种环、酒精灯三、实验方法与步骤1.培养基的制备称量琼脂粉→蒸馏水→加热溶化→分装→集中放在试管筐里→罩上硫酸纸、牛皮纸→ 用橡皮筋扎好→放入讲台边的灭菌桶或灭菌筐内→送到高压蒸汽灭菌室(洗刷室)→灭菌2.空气与人体体表细菌学检查2.1空气的细菌学检查每组1个营养琼脂平板,选择实验楼女厕所→将平板盖打开,盖朝下放置在平板旁边→平板暴露于空气中15分钟→平板倒扣盖上→作标记→37℃温箱培养24小时→观察结果。
医疗器械的无菌和初始污染菌检验
培养基的适用性检查
灵敏度检查: 菌种 培养基灵敏度检查所用的菌株传代次数不得超过5
代(从菌种保存中心获得的冷冻干燥菌种为第0代),并 采用适宜的菌种保藏技术,以保证试验菌株的生物学特性。
金黄色葡萄球菌(Staphylococcus aureus)[CMCC(B) 26 003]
医疗器械无菌和初始污染菌 检验技术
医疗器械无菌检验技术
什么是无菌检查法?
用于检查要求无菌的医疗器械是否无菌的一种 方法。若供试品符合无菌检查法的规定,仅表明了 供试品在该检验条件下未发现微生物污染。
无菌试验的目的:将医疗器械或其浸提液接种于 培养基内,以检验供试品是否有细菌和真菌污染。
医疗器械无菌检验标准
种新鲜培养物 至相应培养基 中培养,将培 养物用0.9%无 菌氯化钠溶液
制成菌悬液 (浓度小于 100cfu/mL)
金葡、铜绿、枯 草、生孢各2支, 另一支不接种做 空白对照,培养 3天
改良马丁培养基 (9mL) 5支: 分别接种小于
逐日观察结果:
空白对照管应 无菌生长,若 加菌的培养基 管均生长良好, 则灵敏度符合
菌悬液在室温下放置应在2小时内使用,若保存在 (2~8)℃可在24小时内使用。黑曲霉孢子悬液可保存在
(2~8)℃,在验证过的贮存期内使用 。
培养基的适用性检查
平板划线法-斜线法:用接种环以无菌操作挑取菌悬液一 环,先在平板培养基的一边作第一次平行划线(3-4)条, 再转动培养皿70°角,并将接种环上剩余物烧掉,待冷却 后通过第一次划线部分作第二次平行划线,再用同法通过第 二次平行划线部分作第三次平行划线和第四次平行划线。
培养基的适用性检查
培养基的配制
一、实验所需的仪器设备和用具。
二、实验安排与要求:将全班若干小组(6-7人),每小组配制500 mlMS固体培养基,三、边示范边讲解实验方法和步骤1、计算并填写培养基成分单计算公式:∨母液=∨配制÷母液倍数∨激素=∨配制×培养基中所要求的激素浓度÷激素母液浓度2. 每组取500ml的烧杯一只,加300ml蒸馏水,用天平称4g琼脂放入蒸馏水中,在电炉上加热溶解。
称15g蔗糖放入溶解的琼脂中。
3. 按配方取出各种母液,放入到溶解后的琼脂和蔗糖溶液中,用玻璃棒搅动混合,并加蒸馏水定容至500ml。
4. 用1mol/L的NaOH或1mol/LHCL将PH值调至5.8,可用PH精密试纸或酸度计测定。
5. 用培养基分装用具将500ml的培养基分注于15个所选用的培养瓶中。
6. 用封口膜、棉塞或其它封口物包扎瓶口,并做好标记。
7. 把分装好的培养基及所需灭菌的各种用具、蒸馏水等,放入高压灭菌锅的消毒桶内,将外层锅内加水至水位线。
盖好锅盖,上好螺丝,接通电源升温。
待锅内温度达100。
C(0.05kgf/cm2或0.005MPa)左右时,打开排气阀排净锅内冷空气,然后关闭排气阀,继续加热至温度达到121。
C(1.05kgf/cm2或0.103MPa)时,维持20~30min即可切断电源,让锅内气压自然下降,当压力降到零点后,打开排气阀,排出剩余蒸汽,再打开锅盖取出培养基及灭菌物品。
8. 培养基及灭菌物品在室温下自然冷却后,存放于阴凉干燥洁净处待用。
四、总结高压蒸汽灭菌的原理和一般操作步骤实验试验一:培养基的配制学号:200730030120 班级专业:07茶学姓名:张晓菊联系电话:136****3981实验目的:1、了解培养基的组成,掌握培养基的配制原理和步骤。
2、了解影响培养基配制的因素。
3、了解灭菌基本操作。
4、为植物的离体培养创造营养条件。
实验原理:培养基的类别,依据培养基中是否加有固化剂可分为固体培养基和液体培养基,前者因加有固化剂如琼脂或卡拉胶而呈固体状态,后者不加固化剂,培养基为液体。
培养基配制使用记录
培养基配制使用记录一、实验目的1.学习培养基配制方法;2.掌握不同培养基的配制要点;3.了解培养基组分及其作用;4.建立完善的实验记录和文档系统。
二、实验材料与仪器1.实验室培养基配制卡;2.细菌培养基成分表;3.环境洁净工作台;4.称量纸;5.1L量瓶;6.加热板;7.高精度电子天平。
三、实验步骤1.根据需要配制的培养基名称查找该培养基的配制方案;2.准备培养基配制所需的实验器材和试剂;3.首先核对并准备所需的试剂、培养基成分,确保无误;4.根据培养基配制方案,依次将所需量的试剂称量到称量纸上;5.将称量好的试剂加入1L量瓶中;6.用蒸馏水将试剂溶解和稀释至相应的体积,搅拌均匀;7.关闭盖子,用色谱纸包裹量瓶口,并用胶带固定;8.摇晃培养基瓶,使溶液均匀混合;9.配制好的培养基经过高压蒸汽灭菌器蒸汽消毒;10.检查培养基瓶的密封性,记录培养基配制的日期、试剂批号等信息;11.将配制好的培养基存放在阴凉干燥处备用。
四、实验记录1.培养基配制方案记录:a.培养基名称:XXX培养基;b.培养基成分及所需量表;c.配制步骤。
2.培养基配制实验记录表:实验日期:XX年XX月XX日实验人员:姓名培养基名称:XXX培养基实验仪器:1L量瓶、高精度电子天平、加热板等实验试剂:详细列出所使用的试剂及批号实验步骤:a.按照配制方案,准备所需试剂;b.将试剂称量到称量纸上;c.加入量瓶中,并用蒸馏水溶解和稀释;d.摇晃培养基瓶使溶液混合均匀;e.检查密封性,记录配制日期等信息。
五、实验结果及分析1.各种培养基的配制实验按照方案进行,获得了透明均匀的培养基溶液;2.实验过程中注意了试剂的配比和溶解、稀释过程,确保培养基配制的准确性;3.实验中仔细记录了配制日期、试剂批号等信息,以便后续使用时追溯。
六、实验总结1.通过本次实验,我学习了培养基的配制方法和注意事项;2.了解了不同培养基的组分及其作用;3.实验过程中严格按照操作规范进行,确保培养基的质量;4.实验记录清晰、准确,为后续实验提供了参考。
培养基配制使用记录
本批灭菌培养基随机抽取5支15 ml置30-35℃培养14天( 月 日至 月 日)。结果 菌生长。
培养基制备记录 编 号:
培养基名称
营养琼脂培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培 养 基 制 备
1.取上述脱水培养基 g,加纯化水 ml,微温加热搅拌,使其完全溶解,搅均分装;
以121℃ 灭菌30分钟。
2.将上述培养基的批号定编为 ,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周内使用。
无菌检验用培养基需进行无菌性检查:
本批灭菌培养基随机抽取5支15 ml置23-28℃培养14天( 月 日至 月 日)。结果 菌生长。
培养基制备记录 编 号:
以121℃ 灭菌30分钟。
2.将上述培养基的批号定编为 ,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周内使用。
无菌检验用培养基需进行无菌性检查:
本批灭菌培养基随机抽取5支15 ml置30-35℃培养14天( 月 日至 月 日)。结果 菌生长。
培养基制备记录 编 号:
以121℃ 灭菌30分钟。
2.将上述培养基的批号定编为 ,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周内使用。
检验用培养基需进行无菌性检查:
本批灭菌培养基倾注15-20ml至一个不加样品的灭菌空平皿中作空白对照,置30-35℃培养3天( 月 日至 月 日)。结果 菌生长。
培养基制备记录 编 号:
培养基名称
培养基配制标准操作规程
培养基配制标准操作规程一、目的:规范培养基配制操作流程,确保培养基的质量符合要求。
二、适用范围:本规程适用于实验室培养基配制操作。
三、岗位责任(1)实验员:根据实验需要,按照配方准确称量试剂,按照标准操作流程进行配制,保证培养基的质量。
(2)实验室主任:对实验员所配制的培养基进行审核,对质量不符合要求的培养基要求实验员进行整改,并记录在实验室日志中。
四、基础设施和基本设备实验室应配备足够的天平、电子计时器、玻璃棒、玻璃瓶、蒸馏水机、高压灭菌器等基础设备及设施。
五、培养基配制操作流程(1)准备试剂应先仔细阅读所选培养基的配方,根据试剂名称和精确剂量,准备称量瓶、试剂架、天平等计量仪器。
配制时应避免手触、相沾等操作,避免交叉污染。
(2)称量试剂初次粗择试剂后,建议先将试剂转移到称量室中,配合现代科技的天平,便可精确计算配比比例。
所有试剂称重时必须使用内配计量,不能使用外配以避免误差增大影响试剂配比。
(3)配制溶液将所需试剂依照标准配比和数量先加入容器,再用分度水小心勾兑均匀,用方法如下:先将容器中整量标容量的水加入到标记线以下。
然后倒入试剂,如对称量试剂的总质量要求是1000 ml,而已注入200 ml水时,即将剩余的实验试剂灌入到950毫升,再次将液面加到1000毫升,如此反复操作完整。
(4)用自来水采样,并抽真空去泡水样的采集,我们应该在步入实验室后在首先采用自来水进行放置,保留水样大概20分钟后,用玻璃棒试管器分别进行抽取。
培养基液体所产生的泡沫和气泡需要用抽真空的方式去除,以确保培养基的质量。
(5)实验室水龙头口淋洗容器本次所述的辛勤劳累的操作一旦完成,容器内部的物质已经被彻底摧毁,真正变成了医学科学上可行的培养基,此时我们应该用干净的管子将洗涤水彻底排完,真正保障实验室完全无菌的标准。
(6)高压灭菌用高压灭菌锅进行消毒,根据不同的材质和设备使用说明,对耐高温不锈钢的容器用121度高压灭菌20分钟,可以保证彻底去除培养基中的细菌。
培养基管理规程
1.目的建立培养基的管理规程,确保产品的无菌及微生物限度检查结果真实可靠。
2.范围适用于实验室使用的培养基的管理。
3.职责3.1.实验员及实验室管理员负责对本制度实施。
3.2.QA负责监测本规程的执行。
4.规程4.1.种类和要求:本实验室无菌检查和微生物限度检查所使用的培养基均为脱水、干燥的商品培养基,商品培养基应有处方、使用说明和质量报告书。
培养基包括硫乙醇酸盐流体培养基、胰酪大豆胨液体培养基、胰酪大豆胨琼脂培养基、沙氏葡萄糖液体培养基、沙氏葡萄糖琼脂培养基等培养基,要求来源于正规的生产厂家。
4.2.培养基的购买:岗位实验员要根据培养基使用情况及剩余量及时向部门领导提出申购,经部门领导审批后方可购买。
应当从可靠的供应商处采购,生产厂家应尽量稳定,必要时应当对供应商进行评估;一次购入量不宜过多。
4.3.培养基的接收:培养基购进后,由岗位实验员负责接收,并及时填写《培养基接收登记表》(附件1),如培养基标签未标注效期,则应当在培养基的容器上标注接收日期。
4.4.培养基的保管4.4.1.培养基性状均为粉末,有特殊气味,容易受潮。
岗位实验员负责核对品名、数量后,按标签的要求于阴凉干燥处贮存,防止光照,潮湿。
4.4.2.储存期限:新购进未开瓶的干粉培养基按厂家说明书上的储存期限储存。
开口后的干粉培养基的储存条件和效期均按说明书上的规定执行。
4.4.3.开封后的干粉培养基使用后用3M封口膜缠绕密封。
4.5.培养基的使用4.5.1.在制备培养基时,应按使用说明上的要求操作配制,每次配制前应检查脱水培养基是否变质,如结块、变色、变味等,不得使用结块或颜色发生改变的脱水培养基。
每次使用需在需登记《培养基领用记录》(附件2)。
4.5.2.培养基配制时应准确称量脱水培养基,并做好记录,配制培养基所用容器和配套器具应洁净,配制培养基的溶剂为去离子水或纯化水。
脱水培养基应完全溶解于水中,再进行分装与灭菌。
配制时若需要加热助溶,应注意不要过度加热,以避免培养基炭化颜色变深。
微生物培养基配制实验报告(共5篇)
微生物培养基配制实验报告(共5篇) 培养基的制备与灭菌实验报告(详细)一、实验题目:培养基的制备与灭菌二、实验目的:1、明确培养基的配置原则,掌握配置方法。
2、了解灭菌的原理,学习掌握灭菌器的使用方法。
三、实验器材:1、药品:牛肉膏、蛋白胨、氯化钠、水、琼脂。
2、仪器:三角瓶、培养皿、试管、线绳、棉花、烧杯、报纸、移液管、试管架、铁针、量筒。
四、实验原理:1、培养基的制备包括一下几种成分:(1)水分:主要成分。
(2)N源:包括无机氮和有机氮。
(3)C源:主要是含碳有机物、碳氢化合物等。
(4)无机盐:如NaCl、KH2PO4等。
微量元素:Cu、K、Mg、S、P、Zn。
有些还需要添加“生长因子”,通常是维生素类、某些氨基酸或核酸等。
2、培养基配置的原则根据不同的培养对象及培养目的,选用不同的培养基,但有机物总量不得超过15%,盐类一般不超过1%。
培养基有以下分类:按成分:天然培养基、合成培养基、半合成培养基按状态:固体培养基、半固体培养基、液体培养基按用途:基础培养基、营养培养基、鉴别培养基、选择培养基培养基配好后应立即灭菌,防止营养物质中的微生物富集。
3、灭菌:用理化手段杀灭一切微生物的营养体,包括芽孢和孢子,在实验中应对所有仪器、操作场所、药品及培养基灭菌或消毒。
(1)高压蒸汽灭菌:将物品放入封闭的加压灭菌器,加热使灭菌锅套间的水沸腾产生蒸汽,将冷空气排尽,压力上升,使水沸点变高,导致菌体蛋白质变性,一般0.1MPa、121℃、15~30min 可以彻底灭菌,本次实验灭菌20min。
若是含糖培养基,110℃、30min。
(2)干热灭菌:微生物细胞内蛋白质因高温而凝固变性。
因高温,所以含水量小,不利于蛋白质受热变性,所以温度高,时间长。
(3)紫外灭菌:诱导胸腺嘧啶二聚体形成抑制DNA复制。
(4)过滤除菌:实验室中用微孔滤膜(孔径一般为0.22μm)。
除病菌需更小。
五、实验步骤:1、牛肉膏蛋白胨培养基的制备依次准确称取0.5g牛肉粉、1.0g蛋白胨、0.5gNaCl放入烧杯,加入100mL水,用玻璃棒搅匀溶解,移入三角瓶,并加入1.5g琼脂。
培养基制备
微生物的接种技术
微生物接种技术是进行微生物实验和相关研 究的基本操作技能。 无菌操作是微生物接种技术的关键。斜面接 种、液体接种、固体接种和穿刺接种操作均以获 得生长良好的纯种微生物为目的。 由于接种方法不同,采用的接种工具也有区 别,如固体斜面培养体转接时用接种环;穿刺接 种时用接种针,液体转接用移液管等。
试管拔塞后过火灭菌和取菌
8)塞管塞 取出接种环,灼烧试管口,并在火 塞管塞 取出接种环,灼烧试管口, 焰旁将管塞旋上。 不要用试管去迎棉塞, 焰旁将管塞旋上 。 不要用试管去迎棉塞 , 以免试管在移动时纳入不洁空气。 以免试管在移动时纳入不洁空气。 9)将接种环灼烧灭菌。放下接种环,再将棉 将接种环灼烧灭菌。 将接种环灼烧灭菌 放下接种环, 花塞旋紧。 花塞旋紧。
分装量的要求
• 琼脂平板: 脂平板: –先将灭菌琼脂融化后冷却至50℃左右,以无菌 先将灭菌琼脂融化后冷却至50℃左右, 先将灭菌琼脂融化后冷却至50℃左右 操作倾注于灭菌平皿内,水平旋转平皿, 操作倾注于灭菌平皿内,水平旋转平皿,待琼 脂凝固后将平皿翻转, 4℃保存备用。 脂凝固后将平皿翻转,置4℃保存备用。 保存备用
消毒和灭菌
采用强烈的理化因素使任何物体内外所有的微 生物永远丧失其生长繁殖能力的措施称之为灭菌。 生物永远丧失其生长繁殖能力的措施称之为灭菌 。 灭菌是要进行微生物纯培养的需要。 灭菌是要进行微生物纯培养的需要。 实验室最常用的灭菌方法是利用高温处理达到 杀菌效果。 杀菌效果 。 高温主要是使微生物的蛋白质和核酸等 重要生物大分子发生变性。 重要生物大分子发生变性 。 高温灭菌分为干热灭菌 和湿热灭菌两大类。 和湿热灭菌两大类 。 湿热灭菌的效果比优于干热灭 湿热下热量易于传递, 菌 。 湿热下热量易于传递 , 更容易破坏保持蛋白质 稳定性的氢键等结构, 加速其变性。 此外, 稳定性的氢键等结构 , 加速其变性 。 此外 , 过滤除 射线灭菌和消毒、 菌 、 射线灭菌和消毒 、 化学药物灭菌和消毒等也是 微生物学操作中不可缺少的常用方法。 微生物学操作中不可缺少的常用方法。
马铃薯培养基
马铃薯 20g 蔗糖 2g 自来水 100mL 琼脂 2g pH 自然(约6.0)灭菌 1.05kg/cm2,20min马铃薯处理方法:马铃薯去皮,切成块加水,煮沸30min(注意火力的控制,可适当补水),用纱布过滤,滤液加糖,补足水至100ml,装入三角瓶。
综合马铃薯培养基20%马铃薯煮汁1000 毫升磷酸二氢钾3克硫酸镁1.5克葡萄糖20克维生素10毫克琼脂18克先配制20%马铃薯煮汁,方法同上。
在煮汁中加入上述各种组分,加热溶解后补足水分,调整pH值到6。
分装,灭菌,备用。
该培养基用于培养和保存灵芝、平菇、香菇等食用菌菌种。
马铃薯糖琼脂培养基把马铃薯洗净去皮,取200克切成小块,加水1000毫升,煮沸半小时后,补足水分。
在滤液中加入10克琼脂,煮沸溶解后加糖20克(用于培养霉菌的加入蔗糖,用于培养酵母菌的加入葡萄糖),补足水分,分装,灭菌,备用。
把这培养基的pH值调到7.2~7.4,配方中的糖,如用葡萄糖还可用来培养放线菌和芽孢杆菌。
按所用原料不同,可分为两类:应用肉汤、马铃薯汁等天然成分配制的,称为天然培养基;应用化学药品配成并标明成分的,称为合成培养基或综合培养基。
马铃薯培养基就是天然培养基,综合马铃薯培养基就是人工合成的。
不同的生物需要不同培养基,注意配方的选取,称取要准确,误差不能太大对于特殊物品,不能灭菌的要用过滤方法除菌配好后高温高压灭菌,可以在室温下放置很久,如果打开使用过一次,请放置冰箱如果长时间不用,一定要重新配置,不能拿以前的用来培养,避免污染。
培养基的制备程序不同类型培养基制备的程序也不尽相同。
但一般培养基的程序主要可分为:配料、溶化、矫正pH、澄清过滤、分装、灭菌及检定等8个步骤。
(一)配料按培养基处方准确称取各种成分,先在三角烧瓶中加入少量蒸馏水,再加入各种成分,以防蛋白胨等粘附于瓶底,然后再以剩余的水冲洗瓶壁。
(二)溶化将各种成分混匀于水中,最好以流通蒸气溶化半小时,如在电炉上溶化应随时搅拌,如有琼脂成分时更应注意防止外溢。
D-SMP-001-01培养基配制标准操作规程
北京博康健基因科技有限公司培养基管理标准操作规程一、目的:本规程规范了微生物实验室培养基的申购、配制、培养基质量控制、储存、使用、废弃处理等。
二、范围:本规程适用于微生物实验室检验用的所有培养基。
三、责任:QC部质检员对本规程实施负责。
四、内容:1.操作依据:《中国药典》2010年版二部五、正文1.培养基(Media)是指人工配制的生物营养物质,即用人工方法将多种物质按各种微生物生长繁殖的需要配成的一种混合营养物。
通常指干粉培养基(Dehydrated Medium)和配制好的琼脂(Agar)、肉汤(Broths)、稀释液(Diluents)等等。
2.程序2.1.购买2.1.1.质量控制部提出采购计划,并填写《采购计划》,注明培养基名称、数量、质量要求、生产厂家等,由相关人员审核,交采购部采购。
2.1.2.培养基买回后,由使用部门填写领料单,由物流部发出。
2.1.3.领回后的干粉培养基,开瓶后应贴上《开启标签》,注明开口日期、有效期至、开口人、贮存条件,并且不得把原标签覆盖。
使用时填写《干粉培养基使用记录》。
2.1.4.检验人员必须依据培养基生产厂家的操作说明进行配制,并填写《培养基配制使用记录》,配制记录上注明所用培养基的批号;盛装配制好的培养基的容器外应贴《培养基标签》,标签应注明:名称、批号、配制人、配制日期、有效期至等信息。
批号定义为:同一批灭菌的培养基为一批,批号编号方式为年XX,月XX,日XX,流水号XX,例如:2010-05-01配制的培养基第一批灭菌的培养基批号为:10050101。
2.1.5.配制好的培养基应在一定时间内,按说明书规定时间进行灭菌,避免微生物滋生。
2.1.6.必要时,灭菌后的培养基在配制后必须进行pH值的测定以确保符合药典及生产厂家的规定。
2.2.培养基质量控制2.2.1.为了保证微生物检验的质量,在使用前,每批配制好的培养基在灭菌后用于供试品检验之前都应进行培养基质量控制检查。
培养基配制使用记录文本
以 121℃ 灭菌 30 分钟。
2.将上述培养基的批号定编为
,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周使用。
检验用培养基需进行无菌性检查:
本批灭菌培养基倾注 15-20ml 至一个不加样品的灭菌空平皿中作空白对照,置 30-35℃培养 3 天( 月 日
菌生长。
培养基名称
培养基制备PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1.取上述脱水培养基
g,加纯化水
ml,微温加热搅拌,使其完全溶解,搅均分装;
以 121℃ 灭菌 30 分钟。
2.将上述培养基的批号定编为
,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周使用。
菌生长。
培养基名称
培养基制备记录
营养肉汤培养基
生产批号
编 号: PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1.取上述脱水培养基
g,加纯化水
ml,微温加热搅拌,使其完全溶解,搅均分装;
以 121℃ 灭菌 30 分钟。
2.将上述培养基的批号定编为
,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周使用。
以 121℃ 灭菌 30 分钟。
2.将上述培养基的批号定编为
,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周使用。
无菌检验用培养基需进行无菌性检查: 本批灭菌培养基随机抽取 5 支 15 ml 置 23-28℃培养 14 天( 月 日至 月 日)。结果
培养基的配制标准操作规程
培养基的配制标准操作规程1.目的选取天然或纯化的营养物质及其相应的渗透压、酸碱度等理化条件,经过加工,制成不同的营养基质,藉以在人工条件下培养供检验用的微生物。
2.适用范围适用于培养基的配制操作。
3.责任者操作员。
4.仪器硅胶塞、试管、平皿、吸管、漏斗、高压锅、三角瓶、天平。
5. 内容5.1 准备5.1.1 玻璃器皿洗涤5.1.1.1 制备培养基所用吸管、试管,三角瓶和平皿等新玻璃器皿,因有灰尘和游离碱性物质,先用水冲洗干净。
然后置3%的盐酸中浸泡约12H。
取出后,用清水冲洗干净,再用纯化水冲洗1~2次,晾干后备用。
5.1.1.2 凡各种装量大而又不宜高压的含糖培养基,所用的玻璃器皿应事先灭菌,以免因一次性低压灭菌不彻底而染菌。
5.1.2 用具包装与灭菌5.1.2.1 硅胶塞:应用水冲洗干净,再以纯化水冲洗1~2次,烘干备用。
5.1.2.2 试管:各种试管最好先配上合适的硅胶塞,待高压灭菌后再分装培养基,可防止污染。
5.1.2.3 平皿:取洗净晾干的平皿,每7 套作一个包装,121℃ 30分钟灭菌后烘干备用;也可用160℃ 2小时干热灭菌后备用。
5.1.2.4 吸管:供染菌限度检验用的吸管,应防止堵塞,故选用红刻度粗下口的。
用前洗净烘干,上口塞进少许普通棉花,松紧适度,以防污染。
然后按其容量大小,分别放在用双层牛皮纸做成的纸袋或者金属盒内,包严经121℃ 30分钟灭菌后烘干备用。
5.2 操作5.2.1 根据用途选择培养基,按其用法进行准确称量和加纯化水,并填写配制记录如名称、配制量、配比、配制日期、配制者。
5.2.2 培养基完全溶解后,进行过滤和分装,液体培养基一般应澄清无沉淀,否则影响观察细菌生长结果。
过滤时可用滤纸或脱脂棉。
5.3 分装5.3.1 各种液体培养基分装试管时,每支应按试管大小及用途不同定量分装,可用吸管或注射器分装,也可用漏斗分装。
一般漏斗下口连接一段橡胶管,管口插一小段玻璃管,再加上一个弹簧夹控制流量,分装时将漏斗放在支架上,内装培养基,然后将下口插入试管中即可按量将培养基逐管分装,注意,不同品种的培养基用过漏斗,应充分洗净后再用,以防两种培养基互相混淆,影响使用效果。
培养基配制与使用记录
培养基配制与领用记录
培养基名称
批号
规 格
有效期至
年 月 日
编 号
开瓶日期
年 月 日
厂 家
称量设备编号:
称取前培养基重: g
称取后培养基重: g
配制方法:
称取本品________g,加纯化水____________ml,加热搅拌,使溶解均匀后 □分装( ),□加铝盖密封 ;□直接加塞,用牛皮纸包扎。
领用数量
领用用途
剩余数量
领用人
年 月 日
年 月 日
年 月 日
年 月 日
年 月 日
年 月 日
年 月 日
注:用途说明1代表限度计数;2大肠埃希菌检查;3金黄色葡萄球菌检查;4铜绿假单胞菌检查;5白色念珠菌检查;6生孢梭菌检查;7无菌检查;8过期销毁;9环境检测;10菌种纯化、传代;
配制批号:
配制总量:ml(共 瓶)
PH测定仪编号:
配制日期: 年 月 日
配制人:
灭菌前 pH值:
有效日期:年月日
复核人:
消毒方法:
□高压蒸汽灭菌□115℃15分钟□115℃20分钟□115℃30分钟□121℃15分钟□121℃20分钟
□煮沸灭菌
灭菌开始时间: 时 分
灭菌结束时间: 时 分
灭菌仪器编号:
灭菌压力:MPa
灭菌后pH值:
灭菌后贮存条件:
灭菌人: 日期: 年 月 日
复核人: 日期: 年 月 日
□无菌平皿(试管)的分装:
取经过灭菌处理的培养基( )至洁净检测室,在超净工作台上以无菌操作方式倾注平皿或试管。共分装 □平皿 □试管
操作人: 日期: 年 月 日
复核人: 日期: 年 月 日
领用日期
培养基配制与使用记录
培养基配制与使用记录一、培养基配制记录日期:XXXX年XX月XX日实验室:XXXX实验室实验人员:XXX实验目的:配制适用于细菌培养的LB培养基实验步骤:1.准备所需原料,包括:細菌葡萄糖培养基粉、酵母提取物粉、琼脂、NaCl及蒸馏水等。
2.按照配方比例将所需原料称量并加入500mL容量瓶中。
3.将容量瓶加入适量蒸馏水,使总体积达到500mL。
4.盖上瓶盖后反复摇动容量瓶,使各种原料充分溶解均匀。
5.将配制好的LB培养基液倒入100mL容量的培养皿中。
6.按需使用后,将剩余的LB培养基液存放在4℃冰箱中,避免细菌生长受到污染。
备注:1.本次配制的LB培养基比例为:細菌葡萄糖培养基粉10g,酵母提取物粉5g,琼脂15g,NaCl10g,蒸馏水500mL。
2.配制好的LB培养基液应无明显异味、颜色均匀。
3.配制好的LB培养基液需在使用前进行灭菌处理。
二、培养基使用记录日期:XXXX年XX月XX日实验室:XXXX实验室实验人员:XXX培养基类型:LB培养基培养菌株:XXX菌株实验步骤:1.根据需要,取适量的LB培养基液倒入装有菌落的平皿中。
2.将LB培养皿再次进行灭菌处理,确保培养皿表面无细菌。
3.将菌株转移到LB培养基上,使用无菌的铁鉗将菌株抹平均匀。
4.关上培养皿,并在培养皿底部标明日期、菌株信息等。
5.将装有菌落的培养皿倒置放入恒温培养箱中,设置适宜的温度和湿度进行培养。
6.每隔一定时间,观察菌落的生长情况和特征,并记录在培养基使用记录表格中。
7.使用后将未使用完的LB培养基液再次进行灭菌处理,并存放在4℃冰箱中。
备注:1.在培养过程中,要注意严格无菌操作,避免其他微生物的污染。
2.观察培养结果时,应注意菌落的形态、颜色、大小等特征,进一步判断菌株的生长状态和特性。
3.使用后的LB培养基液不可重复使用,避免污染和细菌产生抗药性。
以上为培养基配制与使用的记录,用于保证培养基的质量和培养结果的可靠性,同时也是实验室管理与记录的重要内容。
- 1、下载文档前请自行甄别文档内容的完整性,平台不提供额外的编辑、内容补充、找答案等附加服务。
- 2、"仅部分预览"的文档,不可在线预览部分如存在完整性等问题,可反馈申请退款(可完整预览的文档不适用该条件!)。
- 3、如文档侵犯您的权益,请联系客服反馈,我们会尽快为您处理(人工客服工作时间:9:00-18:30)。
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1.取上述脱水培养基g,加纯化水ml,微温加热搅拌,使其完全溶解,搅均分装;
以121℃灭菌30分钟。
2.将上述培养基的批号定编为,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周内使用。
无菌检验用培养基需进行无菌性检查:
培养基制备记录编号:
培养基名称
大豆酪蛋白琼脂培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1.取上述脱水培养基g,加纯化水ml,微温加热搅拌,使其完全溶解,搅均分装;
以121℃灭菌30分钟。
2.将上述培养基的批号定编为,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周内使用。
检验用培养基需进行无菌性检查:
本批灭菌培养基倾注15-20ml至一个不加样品的灭菌空平皿中作空白对照,置23-28℃培养5天(月日至月日)。结果菌生长。
培养基制备记录编号:
培养基名称
玫瑰红钠琼脂培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1.取上述脱水培养基g,加纯化水ml,微温加热搅拌,使其完全溶解,搅均分装;
以121℃灭菌30分钟。
2.将上述培养基的批号定编为,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周内使用。
检验用培养基需进行无菌性检查:
本批灭菌培养基倾注15-20ml至一个不加样品的灭菌空平皿中作空白对照,置30-35℃培养3天(月日至月日)。结果菌生长。
检验用培养基需进行无菌性检查:
本批灭菌培养基倾注15-20ml至一个不加样品的灭菌空平皿中作空白对照,置23-28℃培养5天(月日至月日)。结果菌生长。
培养基制备记录编号:
培养基名称
大豆酪蛋白琼脂培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1.取上述脱水培养基g,加纯化水ml,微温加热搅拌,使其完全溶解,搅均分装;
以121℃灭菌30分钟。
2.将上述培养基的批号定编为,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周内使用。
检验用培养基需进行无菌性检查:
本批灭菌培养基倾注15-20ml至一个不加样品的灭菌空平皿中作空白对照,置30-35℃培养2天(月日至月日)。结果菌生长。
培养基制备记录编号:
培养基名称
营养琼脂培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1.取上述脱水培养基g,加纯化水ml,微温加热搅拌,使其完全溶解,搅均分装;
以121℃灭菌30分钟。
2.将上述培养基的批号定编为,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周内使用。
培养基制备记录编号:
培养基名称
玫瑰红钠琼脂培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1.取上述脱水培养基g,加纯化水ml,微温加热搅拌,使其完全溶解,搅均分装;
以121℃灭菌30分钟。
2.将上述培养基的批号定编为,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周内使用。
2.将上述培养基的批号定编为,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周内使用。
无菌检验用培养基需进行无菌性检查:
本批灭菌培养基随机抽取5支15ml置23-28℃培养14天(月日至月日)。结果菌生长。
培养基制备记录编号:
培养基名称
改良马丁培养基
生产批号
本批灭菌培养基随机抽取5支15ml置23-28℃培养14天(月日至月日)。结果菌生长。
培养基制备记录编号:
培养基名称
硫乙醇酸盐流体培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1.取上述脱水培养基g,加纯化水ml,微温加热搅拌,使其完全溶解,搅均分装;
以121℃灭菌30分钟。
2.将上述培养基的批号定编为,贴上品名及批号标签。
以121℃灭菌30分钟。
2.将上述培养基的批号定编为,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周内使用。
检验用培养基需进行无菌性检查:
本批灭菌培养基倾注15-20ml至一个不加样品的灭菌空平皿中作空白对照,置30-35℃培养3天(月日至月日)。结果菌生长。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周内使用。
无菌检验用培养基需进行无菌性检查:
本批灭菌培养基随机抽取5支15ml置30-35℃培养14天(月日至月日)。结果菌生长。
培养基制备记录编号:
培养基名称
硫乙醇酸盐流体培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1.取上述脱水培养基g,加纯化水ml,微温加热搅拌,使其完全溶解,搅均分装;
以121℃灭菌30分钟。
2.将上述培养基的批号定编为,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周内使用。
无菌检验用培养基需进行无菌性检查:
本批灭菌培养基随机抽取5支15ml置30-35℃培养14天(月日至月日)。结果菌生长。
以121℃灭菌30分钟。
2.将上述培养基的批号定编为,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周内使用。
检验用培养基需进行无菌性检查:
本批灭菌培养基倾注15-20ml至一个不加样品的灭菌空平皿中作空白对照,置23-28℃培养5天(月日至月日)。结果菌生长。
培养基制备记录编号:
培养基名称
硫乙醇酸盐流体培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1.取上述脱水培养基g,加纯化水ml,微温加热搅拌,使其完全溶解,搅均分装;
以121℃灭菌30分钟。
2.将现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周内使用。
无菌检验用培养基需进行无菌性检查:
本批灭菌培养基随机抽取5支15ml置30-35℃培养14天(月日至月日)。结果菌生长。
培养基制备记录编号:
培养基名称
营养肉汤培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1.取上述脱水培养基g,加纯化水ml,微温加热搅拌,使其完全溶解,搅均分装;
以121℃灭菌30分钟。
本批灭菌培养基随机抽取5支15ml置30-35℃培养14天(月日至月日)。结果菌生长。
培养基制备记录编号:
培养基名称
营养肉汤培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1.取上述脱水培养基g,加纯化水ml,微温加热搅拌,使其完全溶解,搅均分装;
以121℃灭菌30分钟。
2.将上述培养基的批号定编为,贴上品名及批号标签。
检验用培养基需进行无菌性检查:
本批灭菌培养基倾注15-20ml至一个不加样品的灭菌空平皿中作空白对照,置30-35℃培养3天(月日至月日)。结果菌生长。
培养基制备记录编号:
培养基名称
营养琼脂培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1.取上述脱水培养基g,加纯化水ml,微温加热搅拌,使其完全溶解,搅均分装;
以121℃灭菌30分钟。
2.将上述培养基的批号定编为,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周内使用。
检验用培养基需进行无菌性检查:
本批灭菌培养基倾注15-20ml至一个不加样品的灭菌空平皿中作空白对照,置30-35℃培养2天(月日至月日)。结果菌生长。
培养基制备记录编号:
培养基名称
玫瑰红钠琼脂培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1.取上述脱水培养基g,加纯化水ml,微温加热搅拌,使其完全溶解,搅均分装;
以121℃灭菌30分钟。
2.将上述培养基的批号定编为,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周内使用。
2.将上述培养基的批号定编为,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周内使用。
无菌检验用培养基需进行无菌性检查:
本批灭菌培养基随机抽取5支15ml置30-35℃培养14天(月日至月日)。结果菌生长。
培养基制备记录编号:
培养基名称
营养肉汤培养基
生产批号
PH
制备日期
制备地点
化验室
制备人
培养基制备
1.取上述脱水培养基g,加纯化水ml,微温加热搅拌,使其完全溶解,搅均分装;
以121℃灭菌30分钟。
2.将上述培养基的批号定编为,贴上品名及批号标签。
3.上述培养基一般临用现配;或将制备好的培养基保存于非密闭容器中,一般在三周内使用。