色谱柱使用规程AS11复习课程
色谱柱设备安全操作规定
色谱柱设备安全操作规定前言色谱柱是常见的科学实验仪器，广泛应用于许多实验室。
正确使用色谱柱的方法对于准确和可重复的实验结果至关重要，但在使用色谱柱的过程中也存在一些潜在的安全风险。
为了确保实验室人员的安全和实验结果的准确性，制定一份色谱柱设备安全操作规定是非常必要的。
一、设备安全检查在使用色谱柱前，应当进行设备安全检查。
这些检查包括：1.色谱柱的外观检查，确保没有磨损或损坏；2.色谱柱的连接部位检查，确保连接处无渗漏；3.活塞密封检查，确保活塞完整且没有磨损；4.下柱座密封检查，确保下柱座紧密并正确放置；5.流量检查，确保流量没有异常；6.平衡检查，确保使用正确的样品和溶液进行平衡处理。
在进行安全检查时，应当使用安全检查清单，以确保每个检查项都得到充分考虑。
二、安全操作方法在使用色谱柱时，应当遵循以下安全操作方法：1.运输和搬运时，应当注意轻拿轻放，以避免冲撞造成损坏；2.安装和拆卸时，应当按照正确的步骤进行，以免发生意外；3.操作时，应当根据实验要求进行预热、平衡、样品注入和稀释等操作，并按照正确的顺序进行；4.操作过程中应当及时观察色谱柱的运行状态，并注意是否有异常情况发生；5.遇到任何异常情况时，应当立即停止实验，检查其他设备，如溶液盛器、针头等，以确定是否造成了异常；6.操作结束后，应当拆卸色谱柱并进行清洗，保持设备干净整洁。
三、应急处理措施在操作过程中，可能会发生柱裂、弹出样品、溶液外泄等紧急情况。
为应对这些情况，制定一份应急处理措施是十分必要的。
应急处理措施包括：1.柱裂：立即停止实验，将柱子包裹好并用胶带缠绕紧密，以防洒落样品；2.弹出样品：停止实验，用纸巾或吸水棉吸收样品，并进行药品废液处理；3.溶液外泄：立即关闭柱底阀门，用棉纸或吸水棉清理溶液，在地上铺上防滑垫，并进行药品废液处理。
应急处理时，一定要佩戴防护手套、口罩及护目镜等个人防护设备。
四、结论色谱柱是实验室中常见的仪器，而正确的操作方法和应急处理措施则是确保实验人员安全和获得准确可靠结果的关键。
常用液相色谱柱的规范化使用与保养标准操作规程完整
常用液相色谱柱的规范化使用与保养标准操作规程完整.目的：规范液相色谱柱的使用与管理；液相色谱柱标准化老化与再生；剖析液相色谱柱常见问题与解决办法。
延长色谱柱使用寿命，降低色谱柱使用成本。
提高分析人员液相色谱柱使用与维护水平。
范围：适用于使用高效液相色谱仪的仪器分析操作人员及相关管理人员。
责任：设备员、液相操作人员、质控主管、质量管理部经理、质量受权人。
内容：1.定义1.1 液相色谱柱：指用于液相色谱分离的柱形固定相，由柱管、压帽/卡套、筛板（滤片）、填料、接头等组合而成，可用于液相色谱分析与制备。
1.2 色谱柱再生：指色谱柱在非正常情况下，针对异常现象及原因采取的一系列修复补救措施，以提高色谱柱柱效和延长其使用寿命的处理过程。
1.3 运载溶剂：指色谱柱生产厂商在柱出厂测试合格后饱和于色谱柱内的合适溶剂，以利于运输保存，多与保存溶剂相同。
1.4 保存条件：指色谱柱生产厂商根据不同柱类型及其色谱柱填料的制备、键合、装填、高压定型、净化干燥等工艺条件的不同要求而特别制定的色谱柱保存前净化饱和的处理程序与储存条件，包括净化程序、净化溶剂和保存溶剂、保存条件。
1.5 保存溶剂：用于保存色谱柱并指定了溶剂组成与比例的溶液。
1.6 反相色谱柱：以键合非极性基团的载体为填充剂填充而成的色谱柱。
常见的载体有硅胶、聚合物复合硅胶和聚合物等。
常用的填充剂有十八烷基硅烷键合硅胶、辛基硅烷键合硅胶和苯基键合硅胶等。
1.7正相色谱柱：用硅胶填充剂，或键合极性基团的硅胶填充而成的色谱柱，常见的填充剂有硅胶、氨基键合硅胶和氰基键合硅胶等。
1.8氨基柱（-NH2）：可以同时用于正相条件和反相条件，但多用于正相色谱条件。
使用时需注意，正相反相交替使用时必需用异丙醇过度，保证柱保存溶剂与流动相互溶。
[氨基柱出厂保存溶剂多用正相溶剂，例如：正己烷-乙腈（99：1）]。
2.液相色谱柱的使用及保养.2.1普通C8及C8反相色谱柱的老化处理与使用保养程序新购色谱柱出厂前均采用适合的运载溶剂饱和，密封，由于运输过程周期较长，柱床容易干涸，所以新柱使用前需重新饱和与老化。
as11hc离子色谱柱说明书
as11hc离子色谱柱说明书
标题：AS11HC离子色谱柱使用说明书
尊敬的用户，
感谢您选择我们的AS11HC离子色谱柱。
为了帮助您更好地理解和使用这款产品，我们编写了这份详细的使用说明书。
一、产品简介
AS11HC离子色谱柱是一款专为高浓度样品设计的高效离子色谱柱，适用于各种类型的离子分析，包括环境样品、食品、饮料等。
其出色的耐压性能和稳定性，使得它在高浓度样品分析中具有显著优势。
二、产品特性
1. 高容量：AS11HC离子色谱柱具有高容量的特点，能有效处理高浓度样品。
2. 稳定性好：即使在长时间的连续运行下，也能保持稳定的分离效果。
3. 耐压性强：能在高压环境下稳定工作，适应各种复杂样品的分析。
三、使用方法
1. 安装：请按照正常的安装步骤将色谱柱安装到色谱系统上，注意避免强烈的震动和冲击。
2. 校准：在使用前，请先进行仪器的校准，确保结果的准确性。
3. 运行：根据您的实验需求，设定适当的运行条件，如流速、温度等。
4. 维护：每次使用后，请用合适的溶剂进行清洗，并妥善保存。
四、注意事项
1. 请勿在极端的温度和湿度条件下使用或存储本产品。
2. 请勿使色谱柱接触强酸、强碱或其他有害物质。
3. 如有任何问题，请及时联系我们的客服人员。
五、售后服务
我们提供全面的售后服务和技术支持。
如果您在使用过程中遇到任何问题，或者对我们的产品有其他建议和意见，欢迎随时与我们联系。
再次感谢您选择我们的AS11HC离子色谱柱。
我们将一如既往地为您提供优质的产品和服务。
顺祝商祺，
[公司名称]。
色谱柱的使用和维护方法及操作规程
色谱柱的使用和维护方法及操作规程色谱是一种分别分析手段，分别是核心，因此担负分别作用的色谱柱是色谱系统的心脏。
对色谱柱的要求是柱效高、选择性好，分析速度快等。
当然，色谱柱的正确使用和维护特别紧要，稍有不慎就会降低柱效、缩短使用寿命甚至损坏。
在色谱操作过程中，需要注意下列问题，以维护色谱柱。
1、避开压力和温度的急剧变化及任何机械震动。
温度的蓦地变化或者使色谱柱从高处掉下都会影响柱内的填充情形；柱压的蓦地上升或降低也会冲动柱内填料，因此在调整流速时应当缓慢进行，在阀进样时阀的转动不能过缓。
2、应渐渐更改溶剂的构成，特别是反相色谱中，不应直接从有机溶剂更改为全部是水，反之亦然，流动相使用前必需经脱气和过滤处理。
3、一般说来色谱柱不能反冲，只有生产者指明该柱可以反冲时，才可以反冲除去留在柱头的杂质。
否则反冲会快速降低柱效。
4、选择使用适合的流动相（尤其是pH），以避开固定相被破坏。
有时可以在进样器前面连接一预柱，分析柱是键合硅胶时，预柱为硅胶，可使流动相在进入分析柱之前预先被硅胶“饱和”，避开分析柱中的硅胶基质被溶解，压力上升是需要更换预柱的信号。
5、避开将基质多而杂的样品尤其是生物样品直接注入柱内，需要对样品进行预处理或者在进样器和色谱柱之间连接一保护柱。
保护柱一般是填有相像固定相的短柱。
保护柱可以而且应当常常更换。
6、常常用强溶剂冲洗色谱柱，清除保留在柱内的杂质。
在进行清洗时，对流路系统中流动相的置换应以相混溶的溶剂渐渐过渡，每种流动相的体积应是柱体积的20倍左右，即常规分析需要50～75ml。
7、避开使用高粘度的溶剂作为流动相；假如使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，应在试验完毕柱子冲洗干净。
8、进样样品要提纯。
9、严格掌控进样量，不要超载。
10、每天分析测定结束后，都要用适当的溶剂来清洗柱，好用洗脱本领强的洗脱液冲洗，例如ODS柱宜用甲醇冲洗至基线平衡。
当接受盐缓冲溶液作流动相时，使用完后应用无盐流动相冲洗。
色谱柱使用规程AS
含有机溶剂的两种淋洗液混合时会形成高粘度的混合区。
当不好选择清洗方法时，请缩短清洗步骤，减少淋洗液中溶剂含量至5%以下，离子强度需≤50mM，可避免产生高压区。
A．浓碱性溶液如10倍淋洗液浓度的碱性溶液，可去除低价态亲水性残留。
B．浓酸性溶液如1~3MHCl，可通过离子抑制原理去除高价态亲水性离子
并可以去除氯离子。可去除大多金属残留，如果处理后依然有金属残留，建议用多价酸，如0.2M草酸处理。
C．有机溶剂如果仅含有疏水性和非电离的污染物，可以单独使用有机溶剂进行清洗。有机溶剂极性的选择极性应随着杂质的疏水性增强而减小，并且是AS11允许使用的有机溶剂范围内（见表1）。
C．设置流速为1.0mL/min。
D．用去离子水过渡色谱柱10min。
E．用清洗液冲洗柱子色谱柱至少60min。
短期和长期储存都用100mM硼酸钠作储存液，用储存液冲洗柱子至少10分钟，用柱子自带的堵头封住两端。
分三种方案：除酸性可溶物、碱性可溶物和有机污染物，可合并为一个梯度方法，但应注意：
清洗过程中淋洗液的交替，要避免造成局部高压区，不可逆破坏色谱柱性能。
局部高压区可能由以下几种操作造成：
用泵相继抽取不易互溶的淋洗液至色谱柱中，造成淋洗液中某一组分在另一淋洗液中沉淀析出；
注意：
不要过度清洗或除气含溶剂的淋洗液。
除气和贮存含溶剂淋洗液应在氦气保护的塑料贮器中操作，不可用氮气。
使用含乙腈的碱性淋洗液时，应将乙腈与碱性淋洗液分开存放，以免淋洗液被乙腈的水解产物污染，使用时再用梯度泵按适度比例泵入淋洗液中。
安全事项：
不可将乙腈直接加入含碱性碳酸盐或氢氧化物淋洗液贮器中。
色谱柱使用规程AS11
含有机溶剂的两种淋洗液混合时会形成高粘度的混合区。
当不好选择清洗方法时，请缩短清洗步骤，减少淋洗液中溶剂含量至5%以下，离子强度需≤50mM，可避免产生高压区。
A．浓碱性溶液如10倍淋洗液浓度的碱性溶液，可去除低价态亲水性残留。
标题
正文
1．领取色谱柱
2.常规运行条件
3.色谱柱使用限度
4.淋洗液化学纯度的要求
5.淋洗液的配制
5.1配制氢氧化钠淋洗液
5.2含有机溶剂淋洗液的配制
6.含有机溶剂淋洗液使用要求
7.色谱柱的保养
7.1推荐最大运行压力
7.2色谱柱的启用
7.3色谱柱的储存
7.4色谱柱的清洗
7.4.1清洗液的选择
7.4.2色谱柱的清洗步骤
C．设置流速为1.0mL/min。
D．用去离子水过渡色谱柱10min。
E．用清洗液冲洗柱子色谱柱至少60min。
F．再次用去离子水过渡色谱柱10min。
G．用淋洗液平衡色谱柱至少60min，然后可进行正常色谱操作。
H．接回抑制器，将保护柱放回进样阀与分析柱之间。
色谱柱最大流速：3.0mL/min
系统压力限度：200～3000 Psi
应尽可能应用最高纯度的化学试剂、溶剂和去离子水来配制淋洗液
无机化学药品：优级纯（符合或高于美国化学学会ACS标准，可参见药品标签）
去离子水：Ⅰ型试剂级纯度（电阻率18.2 MΩ·cm，应无离子杂质、有机物和大于0.2μm的颗粒性物质）。瓶装色谱纯的水不可应用（Burdick&Jackson试剂除外）。
有机溶剂种类、浓度和淋洗液离子强度及流速会影响色谱柱回压，应用时AS11实际回压应不超过4000psi（27.57Mpa）
色谱柱 操作规程
色谱柱操作规程色谱柱操作规程一、前言色谱技术是一种常用的物质分离和分析方法，它广泛应用于化学、生物、药物等各个领域中。
而色谱柱是色谱仪中的核心部件，它的正确操作和维护对于保证色谱仪的正常工作和分离效果具有重要意义。
本文将详细介绍色谱柱的操作规程，包括色谱柱装载、保养与维护、柱床效果评价等方面的内容。
二、色谱柱装载1. 准备工作a. 核对色谱柱和柱头的型号和规格是否与实验要求相符。
b. 检查色谱柱是否损坏，如有损坏应及时更换。
c. 检查柱头和柱床是否干净，如有污染应进行清洗。
2. 装载色谱柱a. 将色谱柱轴向对准色谱仪的柱座，适当加压使柱床与柱座牢固连接。
b. 使用合适的扳手或扳手套装紧柱母，使之完全密封，避免泄漏。
c. 连接色谱柱的进口和出口管路，确保连接紧密，不漏气。
三、色谱柱保养与维护1. 柱床校正a. 开始柱床校正前，应先将柱温箱升温至实验温度。
b. 使用校正溶液冲洗色谱柱，根据溶液反应曲线和标定方法进行柱床校正。
c. 记录校正结果，并进行后续分析前的柱床效果评价。
2. 清洗色谱柱a. 每次使用完色谱柱后，应进行彻底的清洗，避免发生样品交叉污染。
b. 使用合适的清洗液进行柱头和柱床的清洗，如甲醇、氯仿或醋酸乙酯等。
c. 经过清洗后，使用溶剂进行流程调整，以保证色谱柱在下一次使用时能够正常工作。
3. 柱床效果评价a. 柱床效果评价可通过柱效参数（如效应归一化高度、平衡时间等）进行衡量。
b. 柱床效果较差时，可考虑更换或重生柱床。
c. 定期对色谱柱进行柱床效果评价，发现问题及时解决，以确保色谱仪的正常运行。
四、色谱柱的储存1. 柱床保护a. 暂时不使用的色谱柱，应将柱床用干燥剂包裹起来，防止湿气对柱床的损害。
b. 长期不使用的色谱柱，应进行柱床保护和封存，可使用柱保护剂进行覆盖。
2. 色谱柱存放环境a. 色谱柱应存放在干燥、通风良好的环境中，避免受潮和高温。
b. 避免色谱柱受到冷热环境的影响，避免柱床受到热胀冷缩的损害。
色谱柱使用管理规程
色谱柱使用管理规程1.引言色谱柱是一种常用于分离和分析样品的设备，使用良好的色谱柱能够提高实验结果的准确性和精确性。
为了保证色谱柱的正常运行和延长其使用寿命，制定色谱柱使用管理规程是非常必要的。
2.色谱柱使用前的准备工作2.1.质检在使用新的色谱柱之前，首先需要进行质检。
检查色谱柱的外观是否正常，是否有损坏或污染。
然后进行准确测量长度和内径，以确保记录准确的柱容。
最后进行背压测试，检查色谱柱是否存在堵塞或压力异常情况。
2.2.管理与标识2.3.储存条件未使用的色谱柱应储存在干燥、低温和避光的环境中，以防止色谱柱受潮、变质或因受热而损坏。
应将色谱柱储存在其原来的包装中，避免与有机溶剂、水或其他化学物质接触。
3.色谱柱的使用3.1.选择合适的色谱柱根据实验需要选择合适的色谱柱。
考虑样品特性、分离要求、工作温度和流动相等因素，选用适合的色谱柱。
同时，在综合考虑性能指标和经济性的基础上，选择质优价廉的色谱柱。
3.2.样品准备在进行色谱柱分析之前，需要对样品进行适当的前处理。
避免样品中存在杂质、固体残留物和颗粒物等可能对色谱柱造成损害的成分。
如果需要，可以通过过滤、稀释、萃取或其他方法预处理样品。
3.3.柱前准备在首次使用色谱柱之前，需要进行柱前准备工作。
这包括填充柱床、进行平衡和去除气泡等步骤。
根据色谱柱的要求和分析方法的要求，执行具体的操作步骤。
3.4.柱后维护在使用色谱柱的过程中，应根据需要进行柱后维护。
如果发现色谱柱的分离效果下降、背压升高或峰形变得异常，应及时执行柱后清洗和再生操作。
在使用过程中，应定期检查色谱柱的状态并记录相关数据。
4.色谱柱的更替色谱柱是一个易损耗的部件，具有一定的使用寿命。
当色谱柱无法达到预期的分离效果或背压过高时，需要进行更替。
更替色谱柱时，应根据实验要求选择新的色谱柱，并进行详细记录。
5.事故处理如果在使用色谱柱的过程中发生意外事故，应第一时间停止实验并采取相应的措施。
色谱柱使用及维护ppt课件
认识到了贫困户贫困的根本原因，才 能开始 对症下 药，然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视， 已经展 开了“ 精准扶 贫”项 目
硅胶填料的特性
优点
优良的物理特性 可控的成熟工艺 理想的表面活性 优良的溶剂兼容性（不存在不溶胀）
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实验室常用色谱柱：C8柱、C18柱、氰基柱、苯基柱、 氨基柱、手性柱、离子交换柱
不同色谱柱的选择依据 色谱柱的结构 良好的色谱柱使用习惯及维护 建立方法时应注意的事项 色谱柱失效的特征指示
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认识到了贫困户贫困的根本原因，才 能开始 对症下 药，然 后药到 病除。 近年来 国家对 扶贫工 作高度 重视， 已经展 开了“ 精准扶 贫”ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ 目
可能原因： a)填料丢失，多见于酸性物质 ，换柱 b) 溶剂效应，采用流动相溶解样品
解决方法： 换柱 采用流动相溶解 增加缓冲盐的浓度，抑制次保留效应 提高柱温，加快传质速率
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产生次保留效应的因素--离子交换效应 离子交换效应：质子化的碱性分子与离子化的硅羟
基发生离子交换产生次级保留效应
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色谱柱相关知识培训课件
有利于分析中性及碱性化合物 降低溶剂损耗
2/3/2021
色谱柱相关知识
6
不同色谱柱的含碳量
色谱柱
C%
Symmetry C18 19
Zorbax ODS
17
LiChrosorb RP-18 15
Symmetry C8
12
Resolve C-18
12
Ultrasphere ODS 11
Partisil ODS-3
2/3/2021
色谱柱相关知识
8
残基处理的效果
① 抗坏血酸 ② 烟酰胺 ③ 对氨基苯甲酸 ④ 哌咯西叮 ⑤ 核黄素 ⑥ 苯酚 ⑦ 盐酸硫胺
NovaPak C18
未封口 C18
2/3/2021
色谱柱相关知识
9
对HPLC柱填料的了解（六）
硅胶的活性
主要影响碱性化合物的保留行为：k' 生产硅胶时处理温度不同，硅胶活性也不同 是选择性差异的主要来源
对HPLC柱填料的了解
平均颗粒度，颗粒度分布
颗粒度(dp)
颗粒度越小：柱效越高(传质好，涡流扩散小) 柱压越高(渗透性差)
颗粒分布
颗粒分布越宽∶柱效低(渗透性差)
颗粒形状
2/3/2021
球型∶柱效高、重现性好、柱床结构均匀
无定型：柱床结构不均匀
流动相线性速度不均匀
谱带扩展
色谱柱相关知识
1
对HPLC柱填料的了解（二）
O O
Si OO
Si
O O
Si O
O
O
Si O
O
CH2 Si CH3H3C
H
CH2
Si CH3 H3C H
CH3 Si CH3
(完整word版)实验室色谱柱管理规程
1目的为了规范实验室内色谱柱的使用。
确保操作人员能正确规范地使用色谱柱，以保证色谱柱的使用寿命，制定本规程。
2范围本规程适用于实验室内所有分析用色谱柱的管理。
3职货QC人员对本规程的实施负责。
4程序4.1色谱柱的采购4.1.1分析人员视实验室内的欲检验样品情况及现有的色谱柱使用情况，提出色谱柱的采购申请，报相关负责人审核后交采购人员采购。
4.1.2分析人员提交申请时应仔细说明欲采购色谱柱的型号、规格和数量及购买期限。
4.2色谱柱的使用4.2.1对新购进的色谱柱，应检查色谱柱的外表面、封口情况，随柱色谱图、柱效、分离度、拖尾因子测定，说明书等，不符合要求的应退货，符合要求的应在SOP-QC020-01-R1 ”色谱柱登记表”上进行登记，注明领用U期和开始使用日期，并且进行统一的编号。
4.2.2色谱柱编号规则QC-L 12- XX XX►表示色谱柱的流水号►表示购入的月份►表示购入的年份►表示液相色谱柱►表示分析部门423液相色谱柱1.13.1液相色谱柱的使用前注意事项色谱柱的储存液若无特殊说明，均为有机溶剂，反相柱常用甲醇、乙盾或者高比例的甲醇/乙揩-水溶液，正相柱常用脱水处理后的纯正己烷。
使用前，一定要注意色谱柱的储存液与待分析样品的流动相之间是否互溶。
在反相色谱中，如果流动相中缓冲盐的浓度较高（必须先用低浓度的甲醇/乙靖-水溶液（10〜20%）冲洗10〜20mln, 否则缓冲盐在高浓度的有机相中很容易析出，从而使色谱柱堵塞，无法恢复。
1.2液相色谱柱使用方向装色谱柱时应使流动相流路的方向与色谱柱标签上箭头所示方向一致。
除另有规定外，不宜反向使用，否则会导致色谱柱柱效明显降低，无法恢复。
1.3液相色谱柱的评价（必要时自己做，没其它要求时以出厂报告为准）流动相：反相柱（C18）一般用甲醇：水=85： 15 （V/V）或乙廊水=60： 40（V/V）. 样品物质：可用预订用途的供试品代替。
除另有规定外，色谱柱的理论板数应不小于1500、分离度应不小于1.5、重复进样间的RSD不超过2.0%。
正相色谱柱的使用ppt课件
可编辑课件
9
氨基柱柱效检测
流动相：10％乙酸乙酯＋90％正己烷 流速：1.0mL·min-1 标准溶液：乙苯（或甲苯）＋苯甲酸甲酯 检测波长：254nm 参考(标准JB5226-91)液相色谱仪测试用标准色谱 柱
此方法同时适用氰基 柱、硅胶柱
可编辑课件
10
氨基柱使用后冲洗
正相条件适用后： 首先50倍柱体积异丙醇（注意低流速） 其次50倍柱体积甲醇 最后异丙醇过渡到正相流动相条件
色谱柱再生
方案2：清洗时依次用10倍柱体积的下列溶液冲 洗：95％水/5％乙腈 THF四氢呋喃 95％乙腈/5 ％水 再走流动相即可
若反相使用后柱效下降再生冲洗方法同上过程，并保 持95％乙腈/5％水继续冲洗，以低流速0.2-0.5mL/min 过夜冲洗
可编辑课件
13
色谱柱再生（除水再生）
诸如保留时间漂移等选择性改变的一些色谱症状，可以归 因除于水方固案定：相用的含改2变.5，%但二是甲填氧料基可丙能烷还（是di完me好th的ox。yp这ro是pa因ne 为参）正数和相，2色.5大%谱部固冰分定醋溶相酸剂的的都水正内分己含含烷有量冲小常洗部常色分是谱的个柱溶影3解0响个水选柱分择体性，积的柱，关子可键在以 长去期除使色用谱后柱吸中附水的分水并分恢使复柱色效谱下柱降原，来此或时所应需除要水的使选柱择效性恢 复。
正相液相色谱柱的使用与维护
色谱柱分类 正相色谱柱活化
色谱柱冲洗与再生
可编辑课件
1
分离模式的选择
分子量<2000 样品
溶于有机溶剂 溶于水
溶于正己烷 溶于甲醇或甲醇/水 或乙腈或乙腈/水
溶于四氢呋喃
非离子化
离子化
分子量>2000
色谱柱的维护和使用规范 色谱柱解决方案
色谱柱的维护和使用规范色谱柱解决方案色谱柱的维护 1、使用保护柱 2、大多数柱的PH稳定范围是2—7.5，尽可能在此范围内使用 3、避开流动相构成及极性有猛烈变化 4、流动相使用前必需经脱气和过滤处理 5、假如使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，要在试验完毕将柱子冲洗干净 6、压力上升时更换保护柱HPLC色谱柱的良好使用规范 1.每次使用前,用0.45um/0.22um 的膜过滤流动相 2.运输中或长期保存过程中变干的色谱柱需要用甲醇/乙腈完全润湿 3.样品分别时确定要考虑溶剂对样品的溶解性及分别的影响 4.对样品要依据性质进行预处理 5.处理好PH,温度,等因素对柱子的影响 6.尽可能的使用现配的流动相,注意防止流动相长菌等不良现象发生7.定期的用合适溶剂,合适程序对柱子进行再生8.储存色谱柱时，应将缓冲盐置换干净，并用高比例的有机溶剂饱和色谱柱（乙腈/甲醇）9、避开外力损伤色谱柱：弯曲、跌落或强力震动色谱柱的柱效能是评价色谱性能的一项紧要指标，混合物能否在色谱柱中得到分别，除取决于选择合适的固定相外，还与色谱操作条件及色谱柱的装填情形等因素有关。
那么，如何有效地提高色谱柱的柱效呢？在确定的色谱操作条件下，色谱柱的柱效可用理论塔板数或理论塔板高度来衡量。
一般说来塔板数愈多，或塔板高度愈小，色谱柱的分别效能愈好。
如何提高HPLC柱效？要提高液相色谱的效率可从以下几方面入手。
以下介绍了几种国际上流行的测量和计算柱效值的方法。
1、提高液相色谱柱柱效的方法要提高液相色谱的效率可从以下几方面入手。
（1）降低移动相的流速,但会使分析时间延长。
（2）削减固定相的量,但色谱柱中样品的负载量也随之减小。
（3）减小固定相的颗粒度,但不能过分,过分后色谱柱的渗透率也会减小。
（4）选用低粘度的移动相,以利于快速传质,但却不利于多组份分析。
（5）适当提高柱温,可降低移动相的粘度,但柱效和分别度也随之降低。
（6）尽量减小停滞移动相的体积,但却加快了移动相的流速。
色谱柱使用操作规程
【分享】色谱柱使用操作规程-sop1.目的：建立色谱柱使用操作规程.2.范围：适用于仪器分析（HPLC、GC）前对检测条件适用性的确认和HPLC分析结束后对的色谱柱的清洗。
3.责任：QC检验员对本标准实施负责.4.内容：4.1. 系统适用性试验的定义：按SOP项下要求对仪器进行适用性试验，即用规定的对照品对仪器进行试验和调整，应达到规定的要求；或规定分析状态下色谱柱的最小理论板数、分离度、重复性和拖尾因子。
4.1.1.色谱柱的理论板数（n）:n=5.54(tR/Wh/2)2TR—保留时间，min；Wh/2—半峰宽高度。
4.1.2.分离度：tR2—为相邻两峰中后一峰的保留时间；tR1—为相邻两峰中前一峰的保留时间；W2及W1—为此相邻两峰的峰宽。
4.1.3.重复性：取各品种项下的对照溶液，连续进样5次，除另有规定外，其峰面积测量值的相对标准偏差应不大于2.0％。
4.1.4.拖尾因子：W0.05h--为0.05峰高处的峰宽；d1—为峰极大至峰前沿之间的距离；除另有规定外，T应在0.95—1.05之间。
4.2步骤：4.2.1.按具体分析方法操作，用流动相走基线约40分钟（正常流速），待基线平稳。
4.1.5.基线平稳后，按要求进系统适用性溶液或对照溶液分析，记录色谱图，进行评估，符合要求后，待测样品。
4.1.6.进样品溶液，记录结果。
4.1.7.测试完毕后，清洗约30min，一般流速为正常测样流速的1至1.5倍，冲洗约40min。
走空白，按1000积分无任何杂质显示。
当所测样品杂质在30min后出峰时，走空白时间约为60min。
如果有杂质显示，继续清洗至合格为至，并作相应记录。
4.2.5.色谱柱的贮存：4.2.5.1.防止缓冲溶液和三次水溶液流动相产生微生物，应做到流动相用多少配进多少。
含三次水流动相的有效期为3天，不含三次水的流动相的有效期为7天.4.2.5.2.尽可能将色谱柱贮存于100％有机溶剂中（如：最好用乙腈，其次甲醇），避免在缓冲溶液中保存。
液相色谱仪色谱柱的使用及保养(PPT课件)
除HP外，不同公司产品，其接头不同。处理 不当时，会造成：
色谱峰展宽（死体积）使柱效下降、或渗漏
解决办法：
自制相应的转换接头
使用“通用”型接头（锥箍及螺母）
这种锥箍在不锈钢管上是活动的，因此可以换接不同
的色谱系统及色谱柱。从Phase Separations公司能得 到一些PEEK工程塑料的接头，可用在所有类型的色谱 柱上的。
柱效低
为什么柱效低
色谱柱被污染 过滤片部分堵塞 样品、流动相或密封垫的细小颗粒造成的堵塞 色谱柱内的死体积 流动相pH值及组成不合适造成固定相流失 流速急剧变化造成固定相物理损坏 机械震动造成固定相产生裂缝 柱床收缩或干枯
重复性差、回收率低
实验的重复性差
色谱柱被污染 流动相pH值及组成不合适造成键合相流失 样品溶剂不同或样品本身不稳定
样品稳定性不好
方法的开发不好 缓冲液的pH值不合适 缓冲液的缓冲能力不足
液相色谱实用技 术（二）
流动相及样品的预处理
液相色谱对流动相的要求
除色谱柱对流动相对的要求外，还有∶
与检测器匹配 脱气 避免卤素离子（不锈钢系统） 溶剂的粘度
流动相的脱气
流动相脱气的目的
使色谱泵的输液准确 输液均匀准确，并且脉动减小 保留时间及色谱峰面积的重现性提高 提高检测的性能 防止气泡引起的尖峰 基线稳定，信噪比增加 溶剂的紫外吸收本底降低 保护色谱柱 减少死体积 防止填料的氧化
可更换的消耗品
更换滤芯，
更换垫圈，
保护柱
可避免化学污染。多数保护柱影响到整个色 谱柱的柱效，特别是在用微柱时 保护柱的种类
色谱柱使用规程AS
色谱柱使用规程AS一、概述色谱柱是用于气相色谱分离分析的关键部件，其中AS11是一种用于高效离子色谱分析的色谱柱。
本文主要介绍AS11色谱柱的使用规程。
二、色谱柱的检查和准备1.检查色谱柱是否完整，无明显损坏或污染。
2.检查色谱柱是否符合所需分析的要求。
3.检查色谱柱是否充满，如充满气体，则需要进行重新退柱。
三、色谱柱的安装1.将色谱柱与色谱仪连接。
保持连接处的密封性。
2.在连接处使用适当的连接剂，确保连接牢固，无泄漏。
四、色谱柱条件的优化1.首次使用时，进行初步条件的优化。
根据分析目标选择适当的流速、温度和检测器参数等。
2.初次使用前，用纯溶剂进行条件的优化，并注射标准样品进行系统等效性测试。
3.根据实际情况进行条件的微调和优化。
五、样品的制备与注射1.样品的制备应选择合适的溶剂，并保证样品的纯度和稳定性。
2.样品注射前，应充分混匀并过滤除杂质。
3.根据所需分析的目标和样品特点，选择合适的注射量。
六、监测和记录色谱图1.在色谱分析过程中，应密切观察色谱图的变化。
如发现异常，应及时排除故障并调整条件。
2.及时记录色谱图并进行保存，以备分析和比对。
七、色谱柱的保养与储存1.在使用结束后，应及时冲洗色谱柱，去除样品和溶剂残留，并保证柱内干燥。
2.对于长时间不使用的色谱柱，应按照指定的方法进行保养与储存，防止柱内堵塞或损坏。
八、注意事项1.色谱柱需要在适当的温度下操作，避免高温或低温对柱的损坏。
2.避免使用不适宜的溶剂和样品，以免对色谱柱造成损害。
3.避免使用过高的流速，以免产生过大的压力对色谱柱造成损害。
4.注意色谱柱的保养和储存，定期检查柱的状态和性能，及时更换老化的色谱柱。
总结：色谱柱使用规程AS11的主要内容包括：检查和准备、安装、条件优化、样品制备与注射、监测和记录色谱图、保养与储存以及注意事项等。
严格按照规程进行操作，可以保证色谱柱的稳定性和分析结果的准确性，提高实验效率。
色谱柱的维护和使用规范
色谱柱的维护和使用规范
色谱柱的维护
1、使用保护柱
2、大多数柱的PH稳定范围是2-7.5，尽可能在此范围内使用
3、避免流动相组成及极性有剧烈变化
4、流动相使用前必须经脱气和过滤处理
5、如果使用极性或离子性的缓冲溶液作流动相，要在实验完毕将柱子冲洗干净
6、压力升高时更换保护柱
HPLC色谱柱的良好使用规范
1.每次使用前,用0.45um/0.22um的膜过滤流动相
2.运输中或长期保存过程中变干的色谱柱需要用甲醇/乙腈完全润湿
3.样品分离时一定要考虑溶剂对样品的溶解性及分离的影响
4.对样品要依据性质进行预处理
5.处理好PH,温度,等因素对柱子的影响
6.尽可能的使用现配的流动相,注意防止流动相长菌等不良现象发生
7.定期的用合适溶剂,合适程序对柱子进行再生
8.储存色谱柱时，应将缓冲盐置换干净，并用高比例的有机溶剂饱和色谱柱（乙腈/甲醇）
9、避免外力损伤色谱柱：弯曲、跌落或强力震动。
(完整版)色谱柱使用维护保养操作规程
目的：建立色谱柱使用维护保养操作规程，规范色谱柱的使用、维护行为。
范围：适用于色谱柱的使用、维护和保养。
依据：责任：药分部内容:1. 操作规程一般要求是一根柱子用于同一个系列的产品，稳定性试验用专用柱。
1.1. 新色谱柱在使用之前，首先应查看说明书，检查柱子的pH 值范围是否与待验产品的要求相一致，确认柱子和仪器的接头以及管路是否相匹配，并注意柱子上标示的流向箭头，一切确认无误后，编上编号，在《色谱柱启用、报废台帐》上登记开始使用时间、生产厂家、型号规格等。
1.2. 使用时，应按各色谱柱的要求进行色谱柱的维护保养，并在色谱柱使用登记表中登记使用日期、所测产品的名称及批次、使用前后维护保养的具体内容；1.3 使用后，及时填写《色谱柱使用台帐》。
2. 维护规程2.1. 液相色谱柱的维护2.1.1. 色谱柱使用时，确认柱子的编号、型号规格与待验产品的要求相一致，流动相的pH 值应与柱子说明书上规定的pH 值相适应，然后旋开两端的封头，接到高效液相色谱仪上，使色谱柱的箭头指向与流动相流向一致。
2.1.2. 流动相应经过0.45um 滤膜过滤并脱气后使用，柱压不要超过300bar (3000psig )，最高操作温度不得超过60 C。
2.1.3. 流动相如果是非盐类的，用流动相冲洗约30min，按《高效液相色谱仪操作规程》进行操作，然后进行样品的检验。
如果是盐类的，用有机相：水=10：90的溶液冲洗约10min，再换上相对应的流动相，按《高效液相色谱仪操作规程》进行操作，然后进行样品的检验。
2.1.4. 检验完毕，如流动相中含有盐类物质，应先用有机相：水=10：90 的溶液以1ml/min 的流速冲洗约40min，然后用HPLC级的乙腈或甲醇以1ml/min的流速冲洗约30min，关闭液相色谱仪，取下色谱柱，在柱两端旋上封头，以防止柱内的有机溶剂流失而使柱内填料发干变松，柱效下降。
不用的色谱柱放入液相色谱分析室的专用贮存柜中。
离子色谱柱柱安全操作及保养规程
离子色谱柱柱安全操作及保养规程离子色谱是一种用于分离和分析离子化合物的技术，通常被应用于水质检测、食品检测、生化分析等领域。
离子色谱柱是离子色谱仪的核心部件，其精度和耐用性对仪器的分析精度和稳定性至关重要。
因此，掌握离子色谱柱的安全操作和保养规程非常重要。
本文将从以下几个方面介绍离子色谱柱的安全操作和保养规程。
1. 离子色谱柱的安全操作离子色谱柱的安全操作包括准备工作、使用过程中的注意事项和使用后的处理。
准备工作在操作离子色谱柱之前，需要做好以下准备工作：•确保实验室环境干燥、无风；•检查离子色谱仪的系统状态，并进行必要的峰平衡和背景峰扫描；•检查离子色谱柱的运输包装是否完好，查看柱体是否有裂纹或明显磨损；•配置柱头、柱尾、连接管和仪器的接口，并用压缩空气将所有连接器和管道吹干净。
注意事项在离子色谱柱的使用过程中需要注意以下几个方面：在进行样品分析之前，需要检查离子色谱柱的运行状况，包括流量、压力、温度等参数是否稳定，背景峰和峰扫描是否正常；另外，在替换新柱时，需要将离子色谱柱和仪器进行匹配和调试。
2）样品准备在使用离子色谱柱进行样品分析前，需要进行样品的准备工作。
样品应该经过过滤和调整 pH 值，以保证分析结果的准确性和精度。
另外，某些样品需要进行前处理，例如某些固体和粘稠的样品需要进行样品溶解。
3）样品注入在离子色谱柱中注入样品时，需要注意以下几点：•严格按照指定的注入量注入样品，避免“超载”和“少量”注入；•在注入样品前要进行柱洗净，保证准确性；•在注入样品后，需要冲洗注射器和管道，防止污物留下。
4）操作过程中的注意事项在离子色谱柱的使用过程中，需要注意以下几个方面：•离子色谱柱的压强不应超过标准值；•离子色谱柱的温度应该稳定在标准值，否则将会影响峰形；•避免在过程中产生泡沫，以免影响分析结果。
在进行离子色谱柱的操作后，需要做好如下的处理工作：•切断仪器的电源，并清洗柱体，以便进行下一次实验；•清洗使用过的注射器和管道，以避免受到污染；•严格管理离子色谱柱的储存和使用，防止损坏柱体。
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含有机溶剂的两种淋洗液混合时会形成高粘度的混合区。
当不好选择清洗方法时，请缩短清洗步骤，减少淋洗液中溶剂含量至5%以下，离子强度需≤50mM，可避免产生高压区。
A．浓碱性溶液如10倍淋洗液浓度的碱性溶液，可去除低价态亲水性残留。
注意：
不要过度清洗或除气含溶剂的淋洗液。
除气和贮存含溶剂淋洗液应在氦气保护的塑料贮器中操作，不可用氮气。
使用含乙腈的碱性淋洗液时，应将乙腈与碱性淋洗液分开存放，以免淋洗液被乙腈的水解产物污染，使用时再用梯度泵按适度比例泵入淋洗液中。
安全事项：
不可将乙腈直接加入含碱性碳酸盐或氢氧化物淋洗液贮器中。
表1用于IonPac AS11的色谱溶剂
溶剂
最大浓度
乙腈
100%
甲醇
100%
2-丙醇
100%
四氢呋喃
20%
例如：
配制1L12mMNaOH淋洗液，量取
50%NaOH体积=
由于NaOH淋洗液易吸收CO2，故建议用注射器量取溶液，有利于防止碳酸盐的污染，非要用称量皿称取时，不要倾倒。
表2 50%（w/w）NaOH配制AS11淋洗液的量取标准
50%NaOHg(mL)
D．200mMHCl与80%乙腈混合液，去除高价态亲水离子及疏水性污染物。必须随用随配以防乙腈在酸中降解。
无论使用何种清洗溶剂，请遵循以下步骤清洗AG11和AS11。
A．配制500mL适当的清洗液
B．拆除抑制器，反转保护柱与分析柱的连接次序，再次检查分析柱与保护住柱标签上标明的流路方向与淋洗液流动方向一致，确保清洗液先通过分析柱再过保护柱。如果不确定，请分开清洗每根柱子。
有机溶剂：尽可能应用纯度级别高的溶剂（如Burdick&Jackson超高纯度溶剂、Fisher科技Optima，有关有机溶剂的详细要求参见条目5）。
按表1，取所需量50%NaOH溶液，用除气去离子水（电阻率18.2 MΩ·cm）定容至1000mL容量瓶中，得到对应浓度NaOH淋洗液。
避免向50%NaOH或去离子水中引入空气中的CO2，切勿振摇50%NaOH，且不要在溶液顶部吸取溶液。
淋洗液中NaOH浓度（mM）
0.08(0.0525)
1
0.40(0.262)
5
0.96(0.63)
12
8.00(5.25)
100
16.00(10.5)
200
AS11可适用通常的色谱溶剂（浓度范围0～100%）
有机溶剂与水应提前混合
保证所有的无机化学药品在高浓度有机溶剂淋洗液中可溶
应用纯度级别尽可能高的溶剂
B．浓酸性溶液如1~3MHCl，可通过离子抑制原理去除高价态亲水性离子
并可以去除氯离子。可去除大多金属残留，如果处理后依然有金属残留，建议用多价酸，如0.2M草酸处理。
C．有机溶剂如果仅含有疏水性和非电离的污染物，可以单独使用有机溶剂进行清洗。有机溶剂极性的选择极性应随着杂质的疏水性增强而减小，并且是AS11允许使用的有机溶剂范围内（见表1）。
标题
正文
1．领取色谱柱
2.常规运行条件
3.色谱柱使用限度
4.淋洗液化学纯度的要求
5.淋洗液的配制
5.1配制氢氧化钠淋洗液
5.2含有机溶剂淋洗液的配制
6.含有机溶剂淋洗液使用要求
7.色谱柱的保养
7.1推荐最大运行压力
7.2色谱柱的启用
7.3色谱柱的储存
7.4色谱柱的清洗
7.4.1清洗液的选择
7.4.2色谱柱的清洗步骤
C．设置流速为1.0mL/min。
D．用去离子水过渡色谱柱10min。
E．用清洗液冲洗柱子色谱柱至少60min。
淋洗液：12mMNaOH
抑制器：阴离子自再生抑制器(ASRS ULTRA)
抑制器循环模式：抑制再循环模式
预期背景电导：≤8μS
标准流速：1.0 mL/min
标准压力：≤1 000psi（7.58MPa）
存储液：100mM硼酸钠
注意：淋洗液必须过滤并除气，样品必须过滤！
淋洗液pH范围：0～14
样品pH范围：0～14
建议采取称量质量法来取NaOH溶液，例如：
配制1L12mMNaOH淋洗液，称取
50%NaOH质量= 稀释至1L
也可以量取一定体积的NaOH溶液，如下公式：
g=dvρ
g:所需NaOH质量
d：NaOH浓缩液的密度
v：量取NaOH浓缩液体积
ρ：NaOH浓缩液的纯度（%）
应按体积比混合配制，如下例：
配制含乙腈90%淋洗液，先向淋洗液贮器中加入900mL乙腈，然后加入100mL去离子水。
1.1根据从事的分析研究项目的实际要求，领取色谱柱后，进行登记。
1.2仔细阅读说明书，熟悉该柱的类型、使用范围，性能以及使用、保存、再生方法等内容
1.3根据说明书的规定方法，对领取色谱柱进行柱效测试。
取样容积：定量环25μL +进样阀死体积0.8μL
色谱柱：AS114mm分析柱+ AG114mm保护住
色谱柱最大流速：3.0mL/min
系统压力限度：200～3000 Psi
应尽可能应用最高纯度的化学试剂、溶剂和去离子水来配制淋洗液
无机化学药品：优级纯（符合或高于美国化学学会ACS标准，可参见药品标签）
去离子水：Ⅰ型试剂级纯度（电阻率18.2 MΩ·cm，应无离子杂质、有机物和大于0.2μm的颗粒性物质）。瓶装色谱纯的水不可应用（Bur机溶剂种类、浓度和淋洗液离子强度及流速会影响色谱柱回压，应用时AS11实际回压应不超过4000psi（27.57Mpa）
注意：
应用含有机溶剂的淋洗液时，抑制器要在自动抑制外部水模式下工作。
≤3000psi
色谱柱封存的淋洗液为色谱柱测试时使用的淋洗液。
将色谱柱安装到仪器色谱模块上，按照色谱测试指明的条件下配制淋洗液，并测试色谱柱的性能，连续进行被测标准品的测试，直到色谱保留时间能够重现。当色谱保留时间能够连续的重现时，说明色谱柱已经平衡好。
短期和长期储存都用100mM硼酸钠作储存液，用储存液冲洗柱子至少10分钟，用柱子自带的堵头封住两端。
分三种方案：除酸性可溶物、碱性可溶物和有机污染物，可合并为一个梯度方法，但应注意：
清洗过程中淋洗液的交替，要避免造成局部高压区，不可逆破坏色谱柱性能。
局部高压区可能由以下几种操作造成：
用泵相继抽取不易互溶的淋洗液至色谱柱中，造成淋洗液中某一组分在另一淋洗液中沉淀析出；