第十一章脂质体
11药剂学习题
第十一章靶向制剂一、问答题1、何谓靶向制剂？有何特点？有哪些类型？2、常用靶向制剂载体有哪些？有什么要求？3、何谓被动靶向制剂和主动靶向制剂？试举例说明。
4、何谓前体药物制剂？有何特点？5、何谓脂质体？有何特点？何为相变温度与相分离？它们对脂质体的质量有何影响？6、常用脂质体包封材料有哪些？有何要求？7、试述脂质体一般的制备方法、脂质体的质量要求。
8、举例说明脂质体在药学上的应用。
9、何谓微球、磁性微球？分别试述其特点。
10、名词解释：（1） 靶向制剂（2）脂质体（3）微球（4）纳米粒（5）前体药物11. 从方法上讲，靶向制剂可分哪几类？12试述乳剂靶向性的特点。
13药物制剂靶向性的主要评价参数主要有哪些14简述被动靶向制剂的种类。
15简述主动靶向制剂的种类。
16简述物理化学靶向制剂的类型。
17常用的前体药物哪几类？18试述前体药物的基本条件有哪些？二、单选题1、以下不属于靶向制剂的是（）A、药物-抗体结合物B、纳米囊C、微球D、环糊精包合物E、脂质体2、以下属于主动靶向给药系统的是（）A、磁性微球B、乳剂C、药物-单克隆抗体结合物D、药物毫微粒E、pH敏感脂质体3、以下不能用于制备脂质体的方法是（）A、复凝聚法B、逆相蒸发法C、冷冻干燥法D、注入法E、薄膜分散法4、以下不是脂质体与细胞作用机制的是（）A、融合B、降解C、内吞D、吸附E、脂交换5、以下关于脂质体相变温度的叙述错误的为：( )A、在相变温度以上，升高温度脂质体膜的流动性减小B、在一定条件下，由不同磷脂组成的脂质体有可能存在不同的相C、与磷脂的种类有关D、在相变温度以上，升高温度脂质体双分子层中疏水链可从有序排列变为无序排列E、在相变温度以上，升高温度脂质体膜的厚度减小6、以下不用于制备纳米粒的有（）A、乳化聚合法B、天然高分子凝聚法C液中干燥法D、自动乳化法E、干膜超声法7、不是脂质体的特点的是（）A、能选择性地分布于某些组织和器官B、表面性质可改变C、现细胞膜结构相似D、延长药效E、毒性大，使用受限制三、多选题1、药物被包裹在脂质体内后有哪些优点：（）A、靶向性B、缓释性C、提高疗效D、降低毒性E、改变给药途径2、使被动靶向制剂成为主动靶向制剂的修饰方法有：（）A、配体修饰B、前体药物C、糖基修饰D、磁性修饰E、免疫修饰3、制备脂质体的材料包括：（）A、卵磷脂B、脑磷脂C、大豆磷脂D、合成磷脂E、胆固醇4、下列关于前体药物的叙述错误的为：（）A、前体药物在体内经化学反应或酶反应转化为活性的母体药物B、前体药物在体外为惰性物质C、前体药物在体内为惰性物质D、前体药物为被动靶向制剂E、母体药物在体内经化学反应或酶反应转化为活性的前体药物5、脂质体制备中的逆相蒸发法特别适合于包裹什么药物：（）A、水溶性B、脂溶性C、大分子生物活性物质D、小分子生物活性物质E、油类6、根据脂质体制剂的特点，其质量应在哪几方面进行控制：（）A、脂质体形态观察，粒径和粒度分布测量B、主药含量测定C体外释放度测定D、脂质体包封率的测定E、渗漏率的测定7、以下属于物理化学靶向的制剂为：（）A、栓塞靶向制剂B、热敏靶向制剂C、pH敏感靶向制剂D、磁性靶向制剂E、前体药物8、可用液中干燥法制备的制剂是：（）A、脂质体B、固体分散体C、微型胶囊D、微球E纳米囊答案：一、问答题1、何谓靶向制剂？有何特点？有哪些类型？答：靶向制剂一般是指经某种途径给药后，药物通过特殊载体的作用特异性的浓集于靶部位的给药系统。
药剂学--脂质体介绍
第二节 脂质体的组成、结构、理化性质与分类
一、脂质体的组成
磷酸骨架
亲水的头部
磷脂 脂质体
疏水的尾部
水溶性分子（胆碱、丝氨酸等）
两条脂肪酸链， （10-24个C原子，0-6个双键）
胆固醇
脂质体的组成
HO
磷脂示意图
胆固醇的结构图
脂质体的组成
磷脂酰胆碱（PC） 中性磷脂 磷脂酰乙醇胺（PE） 鞘磷脂（SM）
将薄膜-振荡分散法制备的较大粒径脂质体 较小粒径的脂质体。
脂质体的制备方法
二、逆相蒸发法
膜材
溶于有机溶剂（氯仿、乙醚） 加入待包封药物的水溶液* 短时超声 继续减压蒸发 充氮气至气味消失
工艺流程
脱落凝胶液
W/O型乳剂
减压蒸发有机溶剂
水性混悬液
超速离心 或凝胶色谱法 除去未包入的药物
胶态 滴加缓冲液
脂质体制备技术
药剂教研室 吴琳华
内容提要
脂质体的概念 脂质体的组成、结构、理化性质与分类 脂质体的制备方法 脂质体的质量研究 特殊性能脂质体 脂质体的作用机理 脂质体的特点
第一节
概述
脂质体(liposomes) 将药物包封于类脂质双分子 层内而形成的微型囊泡。
脂质体的研究进展
HO OH HO OH O
H
+
NH3
H O O P O O
O
C O
COO
HO
O
O
P O O
O
O
P O O
O
O
O O
O O
O
O O
R
R
R
R
R
R
磷脂酸 (phosphatidic acid,PA)
脂质体_精品文档
第四节 脂质体的制备技术
薄膜分散法 逆向蒸发法
Te注x入t 法
去污剂分散法 钙融合法 冻结融解法
脂质体
制备方法
主动包封法 冷冻干燥法
复乳法 离心法 前体脂质体法
………..
• 一、薄膜分散法: • 方法：将类脂溶于有机溶剂中,通入氮气或减压除去有机
溶剂,在容器壁上形成类脂薄膜，然后加入含有水溶性药 物的缓冲液，通过振摇使类脂膜吸水膨胀，弯曲封闭形成 脂质体（大多层脂质体）。 • 举例：三七总皂苷脂质体的制备 • 准确称取处方量的注射用大豆磷脂、胆固醇，加适量乙醚 使其溶解并转移至250ml茄形瓶中，置25℃恒温水浴减 压除去乙醚，使脂质体在瓶壁上成均匀薄膜，茄形瓶置真 空干燥箱内真空干燥过夜，瓶内加入含处方量三七总皂苷 的磷酸盐缓冲液适量以及2粒直径为0.8mm的搅拌子， 25 ℃恒温水浴旋转洗膜1小时，得乳白色混悬液。 • 通过干膜超声法、薄膜-振荡分散法、薄膜-匀化法、薄膜 -挤压法等使薄膜法制得的大多层脂质体分散成单层或大 单层脂质体。
积百分比。 • 药脂包封比：一定质量的类脂所包封药物的质量百分比。
• （１）毒性最低、无免疫原性、无致热原性、能正常代谢和消除。 • （２）脂质体的大小、成分、表面电荷等有很大的选择空间。 • （３）脂质体对亲水性和亲脂性的药物都能包裹。 • （４）制备简单 • （５）靶向分子能以最优结构与靶部位受体结合 • （６）为所包裹药物的靶向性提供新的可能性。 • （７）在载药脂质体表面结合不同的配基将药物递送到特定靶组织和靶细胞
粒径大小不均匀
体内动态 静脉给药后易被网 状内皮细胞捕获
静脉给药后可分 配进入实质细胞 ，静脉给药后血 中的半衰期长
静脉给药后易被 网状内皮细胞捕 获；体内稳定性 比MLV差
脂质体
脂质体的分类
• 按脂质体的结构和粒径分类
– 单室脂质体: 药物溶液仅仅被一层类脂双分子 层膜包裹。根据直径大小，单室脂质体又可以 分为小单室脂质体和大单室脂质体。 – 多室脂质体：又称多层脂质体是药物溶液被几 层脂质双分子层所隔开形成的不均匀聚集体。 – 多相脂质体：指的是以单室或者多室脂质体为 主，包含少量油包水或水包油型乳剂的多相分 散体系。
脂质体对皮肤有以下几种作用
1.吸附 吸附在细胞表面的脂质体仅在蛋白溶解酶的 作用下才能与细胞脱离, 吸附使细胞周围的包封物 的浓度升高, 这样包封物可慢慢渗透到细胞内部。 2.接触释放 脂质体与细胞接触引起脂质体通透性的增加, 脂质体包封物“ 接触释放” 。这样释放的包封物 在细胞膜附近形成高浓度。
3) 脂质体的电荷。 生理条件下细胞表面带负电荷, 因此脂 质体带正电有利于包封物存留于皮肤, 并且 当脂质膜表面电荷与包封物带电相反时, 包 封物与膜产生静电作用而紧密结合, 减少渗 漏。此外带电荷的脂质将增加脂质双层间 的阻力, 这样既可以得到较大的包封体积, 又能提高稳定性。
4) 载体。 由于脂质体的特性决定了其体外通常不 能直接给药, 须加入一定的添加剂, 即适当 的载体。一般是以高分子材料为主, 尤其是 亲水性凝胶材料, 如甲基纤维素(MC) 、丙 基甲基纤维素(HPMC) 、卡波姆(CP) 及其 衍生物制备的凝胶剂。
几种著名含脂质体化妆品
迪特伊雅索焕颜紧肤滋养乳
Mary Kay蓓丽香膏
清妃赋活更新晚霜（EsteeLauder）
欧莱雅 L‘Oreal 卡诗强化
Avene雅漾清爽倍护无香料防晒霜 雅漾清爽倍护无香料防晒霜SPF30+ 雅漾清爽倍护无香料防晒霜
• 按用途和给药途径分类 根据作用和给药途径，可以把脂质体分 成口服给药脂质体、静脉滴注脂质体、粘 膜给药脂质体等。
脂质体及其用于药物包装
DepoCyt
进展情况
已上市 已上市
已上市 已上市 已上市 已上市 临床II/III 临床II/III 已上市 已上市
Gilead
• Gilead 的脂质体技术主要来自Nexstar。 Nexstar 在被Gilead 收并之前，曾经开发了2 个 脂 质体产品，AmBisome.和DaunoXome.，即 两性霉素B 脂质体和柔红霉素脂质体。
• 能提高药物的稳定性——显然脂质体可可以增加 药物在体外的稳定性，同时也会增加药物在体内 的稳定性，这是由于药物在进入靶区前被包在脂 质体内，使药物免受机体酶等因素的分解。
制备脂质体的方法
• 对于脂溶性的、与磷脂膜亲和力高及水溶性较好的药物， 被动载药法较为适用。 薄膜分散法、冷冻干燥法、注入法、超声波分散法
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
Sopherion
• Myocet是一种脂质体包裹的阿霉素柠檬酸 盐复合物。改变了药物在人体的释放，从 而降低阿霉素的毒性。
ALZA
•
• ALZA 是一个专门从事药物传递系统（drug delivery systems，DDSs） 开发的公司。它的主要技术平台就是隐型脂质体（STEALTH. liposomes，实际上就是长循环脂质体）技术。
目前利用物理靶向性设计最成功的例子是温度敏感脂质体,这种 脂质体是使用具有一定的相变温度的脂质混合物作为膜材，在肿瘤局 部热疗机的作用下，当温度敏感脂质体进入肿瘤区的毛细血管床时， 脂质体达到相变温度，转变为液晶态，使脂质体中的药物迅速释放。
• 长效性（缓释性）——脂质体及包封的药物在血 循环中保留的时间，多数要比游离药物长得多.而 且可以根据需要, 设计具有不同半衰期的脂质体作 为长效的药物载体。这种药物载体, 使药物缓慢地 从脂质体中释放出来, 在细胞的生长周期中更好地 发挥作用, 从而提高治疗指数。
药剂学--脂质体介绍
多层脂质体
脂质体的制备方法（薄膜法）
1．干膜超声法 超声波仪（探针型和水浴型）超声处理 葡聚糖凝胶柱层析（分离除去未包入的药物） 脂质体混悬液 脂质体混悬液
2．薄膜-振荡分散法 干膜 加入缓冲溶液 脂质体 3．薄膜-匀化法
组织捣机或高压乳匀机匀化 此法较适合工业生产。
液体快速混合器振荡（25℃2min）
O
+
NH3 O
O
P O O
O
O O
R
R
六角相
磷脂酰乙醇胺（PE）
脂质体的组成（中性磷脂）
⑶鞘磷脂（sphingomyelin,SM）
CH3
+
CH3
N
CH3
特性：酰胺键和羟基基团之间形
成氢键相互作用，因此，比PC具 有更高秩序的胶相。
HO
O O P O NH O O
R
SM
脂质体的组成
2、负电荷磷脂（酸性磷脂）
脂质体的分类
正电荷脂质体 按荷电性分类 负电荷脂质体 中性脂质体
脂质体的分类
静脉给药脂质体
口服给药脂质体 肺部吸入给药脂质体
眼部用药脂质体
按给药途径分类 黏膜给药脂质体 外用脂质体和经皮给药脂质体 局部注射用脂质体（肌注、关节腔、脊髓腔、肿瘤内等） 免疫诊断用脂质体 基因工程和生物工程用脂质体
第三节 脂质体的制备方法
不能包裹物质
单室脂质体
多室脂质体
第二节
脂质体的组成、结构、理化性质与分类
三、脂质体的理化性质
相变温度 膜的通透性 理化性质
膜的流动性
脂质体荷电性
脂质体的理化性质（相变温度）
1、相变温度(phase transition temperature,
脂质体(Liposomes - 浙江大学药学院
脂质体的种类与特点
类型 多室 脂质体 小单室 脂质体 大单室 脂质体 (REV) 优点 缺点 体内动态
包封容积大，包 粒径大，不均匀，稳 静脉给药后易被 封率高，膜的性 定性差；不易包封蛋 网状内皮系统吞 质与细胞膜相似 白、核酸等大分子； 噬 向细胞内的输送困难。 粒径大小、形态 包封率和包封容积小， 静脉给药后可达 均匀 易发生脂质体融合。 到肝实质细胞， 给药后血中的半 衰期较长。 可包封蛋白质、 粒径大小不均匀 核酸等物质，包 封容积大，包封 率高 静脉给药后易被 网状内皮系统吞 噬，体内稳定性 比多室脂质体差。
方法：pH梯度法 制备： 1.以pH为4.0的枸橼酸缓冲液为水相，采用逆相蒸发 法或薄膜分散法制备空白脂质体。 2.用1mol/L的氢氧化钠或碳酸氢钠调节上述空白脂质 体悬液的pH为7.8。使脂质体膜内外形成H+梯度，内 部为酸性（ pH4.0），外部为碱性（ pH7.8）。 3.将多柔比星用pH7.8的Hepes缓冲液溶解，60 ℃与 空白脂质体悬液孵育10～15min，即得包封率高达90％ 以上的载药脂质体。
复乳法
将少量水相与较多量的磷脂油相进行乳化 （第一次），形成W/O乳剂，减压除去部分 有机溶剂（或不除去也可），然后加入较大 的水相进行第二次乳化，形成W/O/W型复 乳，减压蒸发除去有机溶剂，即得。 复乳法得到的脂质体为非同心多囊结构，更 适合包封水溶性药物，包封率高，并具有缓 释效果。
复乳法制备举例——甲氨蝶呤脂质体
脂质体的研究热点
亲水性侧链具有空间 稳定和长循环作用 磷脂
包封的药物
嫁接的配体具有 主动靶向功能
同时具有主动靶向和立体稳定的脂质体
磷
脂
药剂学--脂质体介绍
不能包裹物质
单室脂质体
多室脂质体
第二节
脂质体的组成、结构、理化性质与分类
三、脂质体的理化性质
相变温度 膜的通透性 理化性质
膜的流动性
脂质体荷电性
脂质体的理化性质（相变温度）
1、相变温度(phase transition temperature,
脂质体
升高温度
Tc)
脂质双分子层中酰基侧链排列改变
第二节
脂质体的组成、结构、理化性质与分类
二、脂质体的结构
双分子结构：磷脂分子的亲水端呈 弯曲的弧形，形似“手杖”，与 胆固醇分子的亲水基团相结合，形 成“U”形结构。两个“U”形结构相对 排列，则形成双分子结构。
卵磷脂与胆固醇在脂质体中的排列形式
脂质体的结构
脂质体的结构类似生物膜，在脂质体的水相和脂质双分 子层组成的膜内可以包裹多种物质。 包裹物质 脂溶性药物 定位于双分子层脂质膜间 水溶性药物 包裹在水相 两性化合物 定位在水相与膜内部交界磷脂上 在水相和有机溶剂中都不溶的物质 在两种介质中溶解性都非常好的物质
脂质体的组成（中性磷脂）
CH3
+
CH3
N
CH3
O O P O O O
(a)全饱和磷脂 （紧密排列）
(b)非饱和磷脂 （不能紧密列）
影响
R
R
磷脂酰胆碱(PC)
脂质体的组成（中性磷脂）
⑵ 磷脂酰乙醇胺 (phosphatid ethanolamine, PE) 特性; 头部基团小； 非饱和的PE容易形成非双层结构型 — 形成六角相（制备特殊脂质体）
HO OH HO OH O
H
+
NH3
H O O P O O
细胞生物学名词解释
细胞生物学名词解释第十一章膜的结构【脂双层】：由双层脂质分子以疏水性烃链的尾端相对，以极性头部朝向外表面形成的片层结构的通称。
【脂质体】：将纯磷脂加在水中形成封闭的球形小泡【翻转酶】：催化磷脂从胞质侧单层翻转到另一侧单层的酶，具有一定的选择性。
【胞质面：由于脂双层对胞质溶胶的取向是恒定的，造成脂双层有内外面之分，胞质面是与细胞质紧密连接的。
肌醇磷脂：位于脂双层中非胞质侧，在信号转导中其重要作用。
膜内在蛋白（整合蛋白）：只有用去垢剂裂解脂双层才能从膜上裂解下来的蛋白孔蛋白：β桶型跨膜蛋白，形成亲水的大孔道，穿过线粒体和某些细菌的外膜，允许营养物质和小离子通过细胞皮层：脂膜内表面上由与跨膜蛋白相连的蛋白组成的纤维蛋白网状结构，用于支持与强化细胞膜血影蛋白：纤维状分子，与肌动蛋白一起形成网络结构，给红细胞膜以支撑。
膜域：具有某些独特结构、理化特性或功能的膜蛋白区域糖萼：糖蛋白、蛋白聚糖、糖脂在细胞外表面的多糖覆盖物第十二章膜转运被动转运顺浓度梯度，不消耗能量，通过载体蛋白和通道蛋白转运主动转运逆浓度梯度，消耗能量，只能是通过载体蛋白转运，还要耦合其他提供能量的过程电化学梯度：由浓度梯度与跨膜电压形成的净推动力Na-K泵一种跨膜蛋白将Na泵出，让K流入，用于维持渗透压与膜电位偶联转运蛋白：在转运一种顺浓度梯度的分子同时转运一种逆浓度梯度的分子的跨膜蛋白质同向转运：转运蛋白以同一方向跨膜转运两个溶质；对向反之ATP驱动泵：利用ATP水解的能量将分子逆电化学梯度转运静息膜电位阴阳离子穿过质膜的流动正好达到精确地平衡的稳定状态下的膜电位神经递质由神经细胞突触释放的将电信号转变为化学信号的分子第十三章：线粒体和叶绿体中的能量生产电子传递链：埋在膜内的一系列电子载体，在传递电子的同时把胞内的质子泵送出膜从而产生质子梯度。
化学渗透偶联：把电子传递、质子泵送和ATP合成关联在一起的学说。
即电子传递链在传递电子的同时把胞内的质子泵送出膜从而产生质子梯度，质子再通过ATP合酶回流至胞内，同时产生ATP。
脂质体PPT精选课件
药物不良反应,但是它们
图3 长循环脂质体Doxil 示意图
在体内很容易被免疫系
Fig 3 Schema tic diagram of long2cir culating liposomes Doxil
统识别和吞噬,因此脂质
体可能还没有到达靶区, 就已经被机体清除掉了。长循环脂质体因表面
覆盖了聚乙二醇( polyethylene glycol, PEG) , 形成空间位阻和亲水保
13
相关文献分析 ——脂质体递药系统的临床研究进展
1965 年英国学者Bangham 和Standish 通过电镜 发现磷脂在水中自然形成多层囊泡并将其命名为 脂质体( liposome) 。经过近40 年的不断努力, 脂 质体递药系统也从最初的普通脂质体, 发展为长循 环脂质体、免疫脂质体和热敏脂质体等。 本文将简单介绍脂质体按结构、组成和功能分成 普通脂质体、多囊脂质体、长循环脂质体、热敏 脂质体和免疫脂质体5类, 综述其作为化学药物递 释系统的临床应用现状和临床研究进展。
热敏脂质体可以克服传统脂 质体所遇到的一些问题, 如 药物在肿瘤区释放太慢, 达 不到有效浓度, 可能导致肿 瘤的耐药性等。
3、抗菌药物载体：利用脂质体与生物细胞膜亲和力强 的特性 ,将药物包裹在脂质体内可提高抗菌效果。 庆大霉素脂质体和两性霉素B，可减少药物的耐药 性，降低心脏毒性。
4、激素类药物载体。
8
5.作为基因工程载体 运载核酸至动物细胞 ,运载核酸至植物细胞 .
6.人造血液代用品----- 血红蛋白脂质体 血红蛋白脂质体是一种无抗原、无病毒而携氧、 可用于复苏的液体制品 , 目前正在动物模型上 开展其安全性、有效性及药物动力学研究。
图2 多囊脂质体示意图 Fig 2 Schematic diagr am of multivesicular liposomes
脂质体课件
O O
R
R
R
R
R
R
磷脂酸 (phosphatidic acid,PA)
磷脂酰肌醇 (phosphatidyl inositol,PI)
磷脂酰丝氨酸 (phosphatidyl serine, PS)
脂质体的组成
3、正电荷脂质 硬脂酰胺(sterylamine,SA)、胆固醇衍生物。 普遍应用于基因的传递系统 5、大豆甾醇及其葡萄糖苷 为纯天然品，较安全，价格便宜。 ⑴大豆甾醇葡萄糖苷(SG) 是从提炼豆油残渣中分离出来的甾醇葡萄糖苷的混合物。 能提高脂质体的肝靶向性。 ⑵大豆甾醇（soybean sterol,SS） 是SG去葡萄糖残基的水解产物。与Ch结构相似，能提高脂 质体稳定性，其膜稳定作用大于Ch。
由许多非同心囊泡构成，每个囊泡中包裹着被装载药物的水溶液。 粒径为5～50µ m 。 适用于包裹水溶性物质。
载药量比单层脂质体
和多层脂质体高得多 具有缓释作用。
多囊脂质体的结构
脂质体的分类
普通脂质体(一般脂质材料制成 ) 按结构性能分类 特殊性能脂质体
（特殊的脂质材料制成）
正电荷脂质体 按荷电性分类 负电荷脂质体 中性脂质体
脂质体的制备方法
四、冷冻干燥法 磷脂 高度分散在缓冲盐溶液中
冷冻干燥（干燥物） 脂质体 冷冻温度、速度及时间等因素影响脂质体的包封率和稳定性。 加入冻结保护剂，能降低冻融过程对脂质体的损害。 甘露醇 、D-葡萄糖 此外还有：pH梯度法和前体脂质体法等。 超声波处理
分散到含药物的水性介质中
脂质体的制备方法
有序排列变为无序排列 至一定温度
相变温度 Tc
膜的物理性质改变
膜的横切面增加、双分子层 厚度减少、膜流动性加
药剂学课件--脂质体课件
脂质体的理化性质（相变温度）
Tc以下时，为“胶晶态”（脂肪链全反式，排列紧密，刚性和厚度增加）
Tc以上时，为 “液晶态”
（脂肪链伸缩、弯曲、外扭）
磷脂发生相变时， “胶晶态” “液晶态” “液态”共存， 出现相分离，使膜的流动性增加，易导致内容物泄漏。
脂质体的理化性质（相变温度）
相变温度与脂质体膜稳定性
脂质体的组成
胆固醇与磷脂的排列示意图
பைடு நூலகம்
脂质体的组成
4、正电荷脂质 硬脂酰胺(sterylamine,SA)、胆固醇衍生物。 普遍应用于基因的传递系统 5、大豆甾醇及其葡萄糖苷 为纯天然品，较安全，价格便宜。 ⑴大豆甾醇葡萄糖苷(SG) 是从提炼豆油残渣中分离出来的甾醇葡萄糖苷的混合物。 能提高脂质体的肝靶向性。 ⑵大豆甾醇（soybean sterol,SS） 是SG去葡萄糖残基的水解产物。与Ch结构相似，能提高脂 质体稳定性，其膜稳定作用大于Ch。
各种机械方法分散
多层脂质体
脂质体的制备方法（薄膜法）
1．干膜超声法 超声波仪（探针型和水浴型）超声处理 葡聚糖凝胶柱层析（分离除去未包入的药物） 脂质体混悬液 脂质体混悬液
2．薄膜-振荡分散法 干膜 加入缓冲溶液 脂质体 3．薄膜-匀化法
组织捣机或高压乳匀机匀化 此法较适合工业生产。
液体快速混合器振荡（25℃2min）
HO OH HO OH O
H
+
NH3
H O O P O O
O
C O
COO
HO
O
O
P O O
O
O
P O O
O
O
O O
O O
O
O O
脂质体
参考书《药剂学》第六版《药物新剂型与新技术》第二版内容提要概述别称：类脂小球、液晶微囊6大单室脂质体（LUVs）8模拟细胞膜的研究制剂的可控释放和体内靶向给药在体外培养中将基因和其他物质向细胞内传递9脂质体的组成和结构二棕榈酰-DL-α-磷脂酰胆碱（DPPC）二肉豆蔻酰卵磷脂（DMPC）10高于相变温度时，增加膜有序排列，减少流动性11磷脂的亲水端呈弯曲的弧形，形似“手杖”，与胆固醇分子的亲水基团相结合，形成“U”形结构，两个“U”形结构相对排列，构成双分子层结构•脂质体的结构1314脂质体的性质和特点•脂质体的理化性质–相变温度（Phase Transition Temperature）•当升高温度时，脂质体双分子层中疏水链可从有序变为无序排列，从而使脂膜的物理性质发生一系列变化，可由“胶晶”转变为“液晶”，膜的横切面•分布16脂质体的制备有机溶剂旋转蒸发（氯仿、二氯甲烷）注入法乙醇注入法乙醚注入法25硫酸铵梯度法•HCl29•葡聚糖凝胶（SephadexG50）适合小分子药物，大分子药物不适用–超滤膜过滤法脂质体的质量评价脂质体的形态和粒径•脂质体的形态和粒径–脂质体的粒径和分布（粒径仪）–形态（透射电镜TEM）磷钨酸染色冷冻透射电镜（要求<0.2）38脂质体的作用机制和给药途径脂质体与细胞的相互作用40提高脂质体靶向性途径Enhanced permeability and retention effect)：肿瘤细正常组织中的微血管内皮间隙致密、结构完整，大分子和脂质颗粒不易透过血管壁，而实体瘤组织中血管丰富、血管壁间隙较宽、结构完整性差，淋巴回流缺失，造成大分子类物质和脂质颗粒具有选择性高通透性和滞留性，这种现象被称作实体瘤组织的高通透性和滞留效5.0-6.5。
第11章微球脂质体
肺
0.2~0.4µm： 肝清除
< 10nm
骨髓
100nm
长循环、隐形脂质体
正电荷脂质体：肺
负电荷脂质体：精选肝可编辑ppt
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▪ （2）主动靶向性
修饰脂质体：
生物靶向：抗体、包复、特定配体等；
物理靶向：磁性敏感、pH敏感、热敏感
▪ （3）缓释性：与药物蛋白质结合性质有关
▪ （4）细胞亲和性：与细胞膜融合
▪ 2.磁性铁
▪ 3.生物效应
▪ 4.含铁总量
▪ 5.其他
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第二节 脂质体 Liposome （类脂小球，液晶微囊）
一、概述
定义：将药物包封于类脂质双分子层形成的簿膜
中间所制成的超微型球状载体制剂。
历史：上世纪六十年代初，英国学者Bangham等发现磷
脂分散在水中可形成多层囊，并证明每层均为双分子脂
（一） 淋巴系统定向性 （二） 缓释作用 （三） 增加药物稳定性 （四） 使抗癌药物在靶区具滞留性 （五） 其他用途：治疗网状内皮细胞疾病
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▪ 作用特点： 靶向性和淋巴定向性 细胞亲和性和组织相容性 降低药物毒性 提高药物稳定性 长效作用
▪ 质量评价指标： 包封率、渗漏率和释放度。
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▪ 第一节 微球剂 ▪ 第二节 脂质体
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第一节 微球剂
一、概述
1.定义：指药物分散或被吸附在高分子聚合物 基质中而形成的微粒分散系统，φ1～500μm。 2.特点：1）靶向性；
2）缓（控）释性； 3）栓塞性微球； 4）避免抗药性 。
微球与微囊的区别？
药剂学课件--脂质体课件
将薄膜-振荡分散法制备的较大粒径脂质体 较小粒径的脂质体。
脂质体的制备方法
二、逆相蒸发法
膜材
溶于有机溶剂（氯仿、乙醚） 加入待包封药物的水溶液* 短时超声 继续减压蒸发 充氮气至气味消失
工艺流程
脱落凝胶液
W/O型乳剂
减压蒸发有机溶剂
水性混悬液
超速离心 或凝胶色谱法 除去未包入的药物
胶态 滴加缓冲液
HO OH HO OH O
H
+
NH3
H O O P O O
O
C O
COO
HO
O
O
P O O
O
O
P O O
O
O
O O
O O
O
O O
R
R
R
R
R
R
磷脂酸 (phosphatidic acid,PA)
磷脂酰肌醇 (phosphatidyl inositol,PI)
磷脂酰丝氨酸 (phosphatidyl serine, PS)
脂质体的组成
3、胆固醇(cholesterol, Ch)膜的另一类重要组成成分。
存在：动物细胞的质膜中含量较高，植物中含量较少。 性质：为中性脂质，亦属于双亲性分子，但亲油性大于亲水性。
在脂质体中的状态：作为两性分子，能嵌镶入膜，羟基团朝向亲水面， 脂肪族的链朝向并平行于磷脂双层中心的烃链。胆固醇本身不形成脂 质双层结构，但它能以高浓度方式掺入磷脂膜。 在脂质体中的作用：主要与磷脂相结合，阻止磷脂凝集成晶体结构。 减弱膜中类脂与蛋白质复合体之间的连接，像“缓冲剂”一样起着调 节膜结构“流动性”的作用。
脂质体制备技术
药剂教研室 吴琳华
第11章微球脂质体解读
3.抗菌药物载体 利用脂质体与生物细胞 膜亲和力强的特性，将抗生素包裹在脂质 体内可提高抗菌效果。 4.激素类药物载体 5.酶的载体 6.作为解毒剂的载体 7.作为免疫激活剂、抗肿瘤转移 8.抗结核药物的载体 9.脂质体在遗传工程中应用 10.脂质体作为基因治疗药物的载体 11.其它方面。
（三）
脂质体内药物的包封
1.包封率：测定脂质体中所包含药物量。 2.影响包封率因素 1）类脂质膜材料的投料比：胆固醇含量↑，
水相容积↑，水溶性药物包封率↑。 2） 脂质体电荷的影响： 3） 脂质体粒子大小的影响： 4） 药物溶解度影响 5） 容器的影响
二、 脂质体的制备方法与质量评价 （一）制备方法
类似于微囊的相分离法
（三） 聚合法：高分子单体在介质中发生聚合 1．乳化或增溶聚合法 聚合方法 2. 交联聚合法
3．其他聚合法（辐射聚合法、界面聚合法）
（四） 喷雾干燥法：将药物溶解或分散在高分子材料溶 液中经喷雾干燥而得（适合工业化生产方法）。
三、磁性微球（magnetic microspheres）
脂质体
第一节
一、概述
微球剂
1.定义：指药物分散或被吸附在高分子聚合物 基质中而形成的微粒分散系统，φ1～500μm。 2.特点：1）靶向性； 2）缓（控）释性； 3）栓塞性微球； 4）避免抗药性 。 微球与微囊的区别？
3.分类： 1）可降解微球：白蛋白，明胶，
(1)按基质分 淀粉，聚乳酸等 2）非生物降解微球：聚丙烯酰胺， 乙基纤维素 1）乳化微球：以微球为水相而制 得乳剂 (2)按性状分 2）磁性微球： 3）毫微球粒 表面交联免疫球蛋白 4）免疫微球 包封
5、稳定性：化学稳定性和物理稳定性；
2025高考生物备考教案：第十一章 生物技术与工程 课时7 基因工程的应用与蛋白质工程
课时7基因工程的应用与蛋白质工程1.基因工程的应用2.蛋白质工程3.蛋白质工程与基因工程的比较项目蛋白质工程基因工程区别起点预期的蛋白质功能目的基因实质人工控制下的[11]基因突变基因重组结果生产自然界中没有的蛋白质生产自然界中已有的蛋白质联系蛋白质工程是在基因工程的基础上延伸出来的第二代基因工程基础自测1.外源生长激素基因的表达可以使转基因动物生长得更快。
（√）2.干扰素是一种具有干扰病毒复制作用的糖蛋白，在临床上被广泛应用。
（√）3.利用乳腺生物反应器能够获得一些重要的医药产品，如人的血清白蛋白，这是因为将人的血清白蛋白基因导入了动物的乳腺细胞中。
（×）提示培养动物乳腺生物反应器时，应将目的基因导入受精卵而非导入乳腺细胞中。
4.用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类一般称为基因工程菌。
（√）5.蛋白质工程中，要对蛋白质结构进行设计改造，必须通过改造或合成基因来完成，而不直接改造蛋白质。
（√）深度思考1.某些转基因药物只在雌性动物的乳腺细胞表达的原因是什么？提示将药用蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起，通过显微注射的方法导入哺乳动物的受精卵中，让药用蛋白基因只在乳腺细胞中选择性表达。
2.为什么蛋白质工程的操作对象是基因而不是蛋白质？提示因为任何一种天然蛋白质都是由基因编码的，基因是遗传信息结构与功能的基本单位，改造了基因就可以通过基因的信息传递进而改造蛋白质。
如果直接对蛋白质进行改造，即使改造成功，被改造的蛋白质也无法遗传。
命题点1结合实例考查基因工程的应用1.[2022广东，12分]“绿水逶迤去，青山相向开。
”大力发展低碳经济已成为全社会的共识。
基于某些梭菌的特殊代谢能力，有研究者以某些工业废气（含CO2等一碳温室气体，多来自高污染排放企业）为原料，通过厌氧发酵生产丙酮，构建一种生产高附加值化工产品的新技术。
回答下列问题：（1）研究者针对每个需要扩增的酶基因（如图）设计一对引物，利用PCR技术，在优化反应条件后扩增得到目标酶基因。
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3．主动包封法 Remote loading method ． • 从根本上改变了难以制备高包封率脂质体的局面。 • 主动包封技术的应用与药物的结构密切相关，不能 推广到任意结构的药物，因而受到了限制。 • 弱碱性的药物 采用pH梯度法、硫酸铵梯度法 • 弱酸性的药物 采用醋酸钙梯度法等。
遥控装载—硫酸铵梯度法 遥控装载 硫酸铵梯度法 包封阿霉素隐形脂质体
载药脂质体的结构示意图
药物被脂质体包封后有以下特点： 1．靶向性和淋巴定向性 2．长效性 3．细胞亲和性与组织相容性 4．降低药物毒性 5．提高药物稳定性
脂质体在体内与细胞的作用过程 • • • • 吸附 adsorption 脂交换 lipid exchange 内吞作用 endocytosis 融合 fusion
脂质体 Liposomes
一、概述 Introductions
• 脂质体 liposomes 1965年被英国Bangham提出 • 磷脂分散在水中可形成多层囊泡，每一层均为脂质 双分子层，各层之间被水相隔开
脂质体的示意图
脂质体主要由磷脂和胆固醇组成 磷脂由一个亲水的头部和两个疏水的尾部组成
磷脂的结构示意图
二、制备脂质体的材料
Materials for preparation of liposomes 1．中性磷脂磷 电中性、化学惰性 ． 天然磷脂 磷脂酰胆碱phosphatidylcholine 合成的磷脂 二棕榈酰胆碱dipalmitoyl phosphatidyl choline DPPC 二硬脂酰胆碱distearoyl phosphatidyl choline DSPC 鞘磷脂sphingomyelin 磷脂酰乙醇胺phosphatidylethanolamine
四、脂质体的表征
Characterization of liposomes
1．形态、粒径及其分布 2．包封率和载药量的测定 3．释放度与渗漏率的测定 4．药物体内分布的测定
思考题
1. 脂质体的研究与应用进展 2. 简述脂质体的概念、特点与用途。 3. 简述制备脂质体的常用的材料。 4. 简述pH梯度法制备载药脂质体的原理和方法。
2DOX-NH3.CI 2DOX-NH2 (NH4)2SO4
2NH3 + 2H+ = 2NH4+ + SO42-
2DOX-NH3++2CI-
(DOX-NH2)2SO4
gel-like precipitate
DOX-NH2
2DOX-NH2+2HCI
硫酸铵梯度法包封盐酸阿霉素
隐形脂质体的隐形机理
4．免疫脂质体制备法 ． 抗体与脂质体结合方法有： （1）吸附法 （2）脂质蛋白合法 （3）交联法
脂质体膜制备
挤压制备小粒径脂质体 • 通过挤压使脂质体通过固定孔径的滤膜，脂质体粒 径变小。该方法需要很低的压力，689kPa即可。 • 聚碳酸酯膜（polycarbonate membrane），该膜的通 道是直的并且大小相同，脂质体容易通过，即使脂 质体直径略大于孔径也能通过。一般将脂质体原液 稀释至12µmol/ml后再过膜，脂质体易通过孔径。 • 脂质体加压通过孔时，其结构发生变化，根据所需 脂质体的大小选择膜的孔径。
2．负电荷磷脂 ． 负电荷磷脂又称为酸性磷脂 • 磷脂酸 phosphatidic acid, PA • 磷脂酰甘油 phosphatidyl glycerol, PG • 磷脂酰肌醇 phosphatidylinositol, PI • 磷脂酰丝氨酸 phosphatidyl serine,PS
三、制备脂质体的方法
Preparation of liposomes 1．薄膜法 ． 最早由Bangham报道
• 磷脂等膜材溶于适量的有机溶剂 • 脂溶性药物可加在有机溶剂中，然后在减压旋 转下除去溶剂，使脂质在器壁形成薄膜，加入 含有水溶性药物的缓冲液，进行振摇，则可形 成大多室脂质体，其粒径范围约1-5µm。
2．逆相蒸发法 Reverse-phase evaporation ． 由Szoka提出 • 膜材溶于有机溶剂，加入待包封药物的水溶液，进 行短时超声，直至形成稳定的W/O型乳剂，减压蒸 发有机溶剂，形成脂质体。 • 一般为大单层脂质体 • 包封的药物量大它适合于包封水溶性药物及大分子 生物活性物质
根据化学平衡移动原理而设计的，空白脂质体包 封阿霉素的前提是： 1. 脂质体膜可透过分子型药物； 2. 离子型化合物较少或几乎不透过脂膜； 3. 硫酸阿霉素的溶度积 << 盐酸阿霉素的溶度积。
硫酸铵梯度法包封阿霉素的步骤
1. 制备脂质材料薄膜——旋转蒸发； 2. 用硫酸铵溶液使脂膜水化，形成粗空白脂质体； 3. 挤压使通过聚碳酸酯微孔滤膜，较大粒径的脂质 体被“粉碎”成小粒径的脂质体，得空白脂质体； 4. 通过透析法或凝胶柱过滤，除去空白脂质体囊泡 外部的硫酸铵，从而使脂质体囊泡内、外部的硫 酸铵浓度形成了浓度梯度差(1000倍）； 5. 盐酸阿霉素水溶液与上述空白脂质体混合、60℃ 孵育30min、不断振摇，即得。
3．正电荷脂质 ． 均为人工合成产品 • 硬脂酰胺 stearylamine,SA • 胆固醇衍生物
4．胆固醇 cholesterol ． • 自然界生物膜中的另一类重要的组分 • 中性脂质，两亲性分子，亲油性大于亲水性
胆固醇的结构
5．长循环膜材料 ． 神经节苷脂 ganglioside GM1 • GM1引入了唾液酸残基增强了膜的稳定性、减少 了网状内皮系统细胞对脂质体的摄取，延长了脂 质体的体内循环时间 聚乙二醇衍生物 polyethylene glycol derivatives • 聚乙二醇基则增强了脂质体膜的亲水性，阻止网 状内皮系统细胞对脂质体的摄取，延长了脂质体 的体内循环时间