α-酮戊二酸的制备
微生物转化法制备α-酮戊二酸[发明专利]
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(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请(10)申请公布号 (43)申请公布日 (21)申请号 202110006777.9(22)申请日 2021.01.05(71)申请人 雅本化学股份有限公司地址 215433 江苏省苏州市太仓市太仓港港口开发区石化区东方东路18号申请人 湖州颐辉生物科技有限公司(72)发明人 陶荣盛 原犇犇 朱傅赟 郑云 沈正权 孙梁栋 潘震华 沈青 胡海亮 刘萍 (74)专利代理机构 上海申浩律师事务所 31280代理人 贾师英(51)Int.Cl.C12N 1/21(2006.01)C12N 15/70(2006.01)C12N 15/75(2006.01)C12N 15/77(2006.01)C12P 7/50(2006.01)C12R 1/19(2006.01)C12R 1/15(2006.01)C12R 1/125(2006.01) (54)发明名称微生物转化法制备α-酮戊二酸(57)摘要本发明提供了一种共表达L ‑谷氨酸氧化酶和过氧化氢酶的基因工程菌及其应用。
本发明实现了L ‑谷氨酸氧化酶和过氧化氢酶在微生物细胞内的高水平共表达，经过一次发酵即可获得两种酶，简化了发酵工艺。
本发明提供了使用共表达L ‑谷氨酸氧化酶和过氧化氢酶的基因工程菌高效合成α‑酮戊二酸的新工艺，显著提高了生产效率和收率，减少了丁二酸生成量，降低了α‑酮戊二酸的生产成本，具有很高的工业化应用价值。
权利要求书1页 说明书7页序列表23页CN 112625993 A 2021.04.09C N 112625993A1.一种共表达L ‑谷氨酸氧化酶和过氧化氢酶的基因工程菌，其中所述L ‑谷氨酸氧化酶的氨基酸序列是SEQ ID NO.1，所述过氧化氢酶的氨基酸序列选自SEQ ID NO.3、SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.7、SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.11、SEQ ID NO.13。
α酮戊二酸结构
α酮戊二酸结构α酮戊二酸（alpha-ketoglutaric acid）是一种有机化合物，化学式为C5H6O5。
它也被称为2-酮戊二酸或5-羟基己二酸。
α酮戊二酸在生物体中发挥着重要的作用，特别是在三羧酸循环中起着关键的中介物质的作用。
我们来了解一下α酮戊二酸的结构。
α酮戊二酸是一种有机酸，它的分子结构中含有一个酮基和一个羧基。
它可以通过氧化戊二酸或通过氧化谷氨酸得到。
α酮戊二酸的分子结构中，酮基和羧基分别位于分子的两端，中间有一个五碳的骨架。
在水溶液中，α酮戊二酸以离子形式存在，呈现为α酮酸和α酮酸根离子的平衡。
α酮戊二酸在生物体内扮演着重要的角色。
首先，它是三羧酸循环中的一个中间产物。
三羧酸循环是一种生物体内的重要代谢途径，通过将食物中的营养物质转化为能量。
在三羧酸循环中，α酮戊二酸与柠檬酸反应生成脱羧戊二酸，并释放出氢原子和电子，进一步参与细胞内的氧化磷酸化过程，最终合成三磷酸腺苷（ATP）。
α酮戊二酸还参与氨基酸代谢过程中的转氨作用。
转氨作用是一种重要的生化反应，它将氨基酸中的氨基转移到α酮酸上，形成新的氨基酸和新的α酮酸。
这一过程在氨基酸的合成和分解中起到重要的调节作用，维持生物体内氨基酸的平衡和正常代谢。
α酮戊二酸还参与脱氨作用和能量代谢。
在脱氨作用中，α酮戊二酸可以与氨基酸中的氨基反应，形成对应的α酮酸和游离氨基。
这一反应在氨基酸的分解和蛋白质代谢中起到重要的作用。
在能量代谢中，α酮戊二酸在三羧酸循环中释放出的氢原子和电子参与细胞内的氧化磷酸化过程，最终合成ATP，为细胞提供能量。
总结起来，α酮戊二酸是一种在生物体内发挥重要作用的有机化合物。
它在三羧酸循环中起着关键的中介物质的作用，参与氨基酸的转氨作用和脱氨作用，以及细胞内的能量代谢过程。
对于深入了解生物体的代谢过程和细胞功能，研究α酮戊二酸的结构和功能具有重要意义。
注：本文参考了化学知识和生物化学的相关资料，对α酮戊二酸的结构和功能进行了介绍。
赖氏法实验报告
1. 掌握赖氏法测定血清丙氨酸氨基转移酶（ALT）活性的原理和方法。
2. 学会操作赖氏法测定ALT活性的实验步骤。
3. 熟悉ALT测定的临床应用及注意事项。
二、实验原理赖氏法是一种常用的酶偶联速率法，用于测定血清中ALT活性。
该方法利用ALT催化L-丙氨酸和α-酮戊二酸在磷酸盐缓冲液中进行反应，生成L-丙酮酸和α-酮戊二酸，同时NADH被氧化为NAD+。
在特定波长下，NADH的吸光度与ALT活性呈线性关系，通过测定吸光度变化，计算出ALT活性。
三、实验材料与仪器1. 实验材料：（1）血清样本（2）赖氏法ALT测定试剂盒（3）磷酸盐缓冲液（4）L-丙氨酸（5）α-酮戊二酸（6）NADH（7）NAD+（8）分光光度计2. 实验仪器：（1）恒温水浴箱（2）移液器（3）离心机（4）微量滴定板1. 样本处理：取血清样本，按照试剂盒说明书进行稀释。
2. 标准曲线制备：（1）取6个微量滴定板，分别加入不同浓度的标准ALT溶液。
（2）向每个板中加入一定量的磷酸盐缓冲液，混匀。
（3）加入一定量的L-丙氨酸和α-酮戊二酸，混匀。
（4）将滴定板放入恒温水浴箱中，设定反应时间。
（5）反应结束后，加入一定量的NADH和NAD+，混匀。
（6）在特定波长下测定吸光度，以ALT浓度为横坐标，吸光度为纵坐标，绘制标准曲线。
3. 样本测定：（1）按照标准曲线制备的步骤，向微量滴定板中加入血清样本。
（2）按照标准曲线制备的步骤，进行反应和测定吸光度。
（3）根据标准曲线，计算血清样本的ALT活性。
五、结果与分析1. 标准曲线制备：根据标准曲线，得出线性方程为y=0.0068x+0.0015，其中y为吸光度，x为ALT浓度。
2. 样本测定：根据标准曲线，计算血清样本的ALT活性为40 U/L。
六、讨论1. 赖氏法测定ALT活性的原理和步骤简单，操作方便，准确度高。
2. 实验过程中，要注意反应时间的控制，以保证反应充分进行。
3. 标准曲线的制备是实验的关键环节，要确保标准曲线的线性关系良好。
氨基转移作用实验报告
氨基转移作用实验报告氨基转移作用实验报告概述：氨基转移作用是生物化学中一种重要的酶促反应，它在细胞内起着关键的代谢调节作用。
本实验旨在通过观察氨基转移作用的实验现象，了解其机理和应用。
实验材料与方法：1. 实验材料：- 氨基转移酶：选取乳酸脱氢酶（LDH）作为氨基转移酶。
- 底物：选择乳酸和α-酮戊二酸作为底物。
- 辅助试剂：包括缓冲液、辅酶NADH等。
2. 实验方法：- 步骤一：制备实验体系。
1) 首先制备含有LDH的反应液。
2) 分别制备含有乳酸和α-酮戊二酸的底物溶液。
3) 准备辅助试剂。
- 步骤二：进行氨基转移作用实验。
1) 将LDH反应液、乳酸溶液和α-酮戊二酸溶液混合，加入辅助试剂。
2) 记录反应体系的吸光度变化。
- 步骤三：数据处理与分析。
1) 绘制吸光度-时间曲线。
2) 分析曲线的趋势和特点。
实验结果与讨论：在实验中，我们观察到了氨基转移作用的实验现象。
根据实验结果，我们得出以下结论：1. 氨基转移作用是一个动态过程。
在实验过程中，我们观察到反应体系的吸光度随时间的变化而发生明显的变化。
这表明氨基转移作用是一个动态的过程，随着时间的推移，底物被转化为产物。
2. 氨基转移作用具有特异性。
在本实验中，我们选择了乳酸和α-酮戊二酸作为底物。
根据实验结果，我们发现只有在有LDH存在的情况下，反应体系才会发生明显的吸光度变化。
这说明氨基转移作用具有特异性，只有特定的底物和酶才能发生反应。
3. 氨基转移作用在生物代谢中起重要作用。
氨基转移作用是细胞内一种常见的代谢调节过程。
通过将氨基基团从一个底物转移到另一个底物，细胞可以调节代谢途径中的物质转化和平衡。
本实验结果进一步验证了氨基转移作用在生物代谢中的重要性。
结论：通过本实验，我们深入了解了氨基转移作用的实验现象、机理和应用。
氨基转移作用是生物化学中一个重要的酶促反应，对于生物体的代谢调节起着关键作用。
进一步的研究和应用可以帮助我们更好地理解细胞内的代谢过程，并为药物研发和疾病治疗提供理论基础。
α-酮戊二酸
α-酮戊二酸产品定义α-酮戊二酸（英语：α-Ketoglutaricacid）是戊二酸的两种带酮基的衍生物中的一种（如果不特别说明，“酮戊二酸”这个术语大多数指的就α型。
β-酮戊二酸只是酮基的位置不同而已，并且不太常用）白色细结晶性粉末。
熔点113.5℃。
易溶于水、醇、极难溶于醚，久贮变淡灰黄色，易潮解。
这种物质的阴离子，α-酮戊二酸盐是一种重要的生物化合物。
它是谷氨酸脱氨基的酮酸产物，并且是三羧酸循环的中间产物。
产品用途α-酮戊二酸产品的用途：1、主要作为运动营养饮料的成分。
2、有机中间体，生化试剂，测肝功能的配套试剂。
3、降低术后患者和长期病人的机体损耗。
4、在脑部作为酪氨酸和谷氨酸的前体。
（α-酮戊二酸能够通过转氨基作用生成谷氨酸）5、α-酮戊二酸(α-ketoglutaricacid也具有抗氰作用。
试验表明与亚硝酸钠、硫代硫酸钠配伍使用可提高抗氰能力，且有抗惊厥作用。
α-酮戊二酸市场特点分析一、产品特征α-酮戊二酸，又称2-氧代戊二酸，英文名为2-Ketoglutaricacid，分子式是C5H7NO5，分子量为161.1128，CAS登记号为328-50-7，主要作为运动营养饮料的成分。
α-酮戊二酸(α-ketoglutarate，α-KG)是三羧酸循环(TCA循环)的重要中间代谢产物之一，也是重要的有机合成中间体。
参与氨基酸、糖类、蛋白质以及脂肪代谢等重要生理过程。
在微生物细胞的碳氮代谢调控中起着重要作用。
由于α-酮戊二酸在细胞代谢上的重要性，其被广泛应用于医药、饲料和食品等领域。
由于α-KG特殊的化学性质，被广泛用于化学合成行业。
二、价格特征目前我国α-酮戊二酸生产企业数量不多，总体产能较小，导致市场上α-酮戊二酸产品价格昂贵，但随着企业生产规模扩张，以及技术的改进，生产成本逐渐下降，α-酮戊二酸产品的价格也趋于下降。
a-酮戊二酸发酵生产工艺流程
a-酮戊二酸发酵生产工艺流程英文回答：Fermentation is a widely used process in the production of various chemicals, including a-ketoglutaric acid (a-KG). In this process, microorganisms, such as bacteria or fungi, are used to convert a substrate into a desired product. For the production of a-KG, the fermentation process involves several steps.Firstly, a suitable microorganism is selected, which has the ability to produce a-KG. Some common microorganisms used for a-KG fermentation include Corynebacterium glutamicum, Aspergillus oryzae, and Yarrowia lipolytica. These microorganisms are capable of metabolizing glucose or other carbon sources to produce a-KG.Next, a fermentation medium is prepared, which provides the necessary nutrients for the growth and metabolism of the microorganism. The medium typically contains a carbonsource, nitrogen source, minerals, and vitamins. Glucose, sucrose, or molasses can be used as the carbon source,while ammonium sulfate or urea can be used as the nitrogen source.The fermentation process is carried out in a bioreactor, which provides a controlled environment for the growth ofthe microorganism. The bioreactor is equipped with sensorsto monitor and control various parameters such as temperature, pH, and dissolved oxygen. These parameters are crucial for the optimal growth and metabolism of the microorganism.During fermentation, the microorganism consumes the carbon source and produces a-KG as a metabolic byproduct. The a-KG can be accumulated in the fermentation broth or secreted into the medium, depending on the characteristicsof the microorganism. The fermentation process typically lasts for several days to weeks, depending on the growthrate of the microorganism and the desired yield of a-KG.Once the fermentation is complete, the a-KG isseparated from the fermentation broth or medium. Various separation techniques can be used, such as filtration, centrifugation, and chromatography. The purified a-KG can then be further processed and used in various applications, such as the production of pharmaceuticals, food additives,or industrial chemicals.中文回答：酮戊二酸（a-KG）发酵是一种广泛应用于化学品生产的工艺。
d-丙氨酸的制备方法
d-丙氨酸的制备方法丙氨酸（Alanine）是一种氨基酸，广泛存在于生物体内。
它是构成蛋白质的基本单位之一，也是合成维生素B5（泛酸）和胆碱的重要原料。
本文将介绍几种常见的丙氨酸制备方法。
方法一：氨基酸转氨基酸转换法这是一种常见的合成丙氨酸的方法，通常使用α-酮戊二酸为原料进行反应，在适当的条件下，经转氨酶催化反应可以得到丙氨酸。
该方法的优点是反应条件温和，反应选择性高，产物纯度较高。
具体步骤如下：1. 将适量的α-酮戊二酸溶解在苯或醚中，并加入适量的转氨酶。
转氨酶可以通过微生物发酵方法获得。
2. 将溶液保持在37℃下反应一段时间，使转氨酶催化反应进行。
3. 经过一定时间的反应，将反应液进行蒸馏、结晶处理，得到丙氨酸的结晶。
方法二：氨基酸还原法该方法主要是通过氨基酸的还原反应来制备丙氨酸。
该方法的优点是操作简单，高效快捷，成本较低。
具体步骤如下：1. 将适量的丙氨酸溶解在醇中，加热至70-90℃。
2. 将催化剂（如铅、锡和钛等金属）加入到醇溶液中，催化还原反应。
3. 经过一定时间的反应，将反应液进行蒸馏、结晶处理，得到丙氨酸的结晶。
方法三：天然源提取法丙氨酸广泛存在于天然的蛋白质、肉类、鱼类等食品中。
通过从这些天然源中提取丙氨酸进行制备，是一种简单且环保的方法。
具体步骤如下：1. 选择富含丙氨酸的食品原料，如蛋白质含量较高的食物。
2. 将食品原料进行加工处理，如提取、浸泡等，以获得丙氨酸的含量较高的提取液。
3. 对提取液进行酸碱处理、除杂等工艺进行清洁，获得较纯净的丙氨酸。
4. 经过结晶、干燥等处理，得到丙氨酸的结晶。
总结：以上介绍了几种常见的丙氨酸制备方法，包括氨基酸转氨基酸转换法、氨基酸还原法和天然源提取法。
不同的方法适用于不同的实际生产需求，可以根据具体情况选择合适的方法。
丙氨酸作为一种重要的氨基酸，在生物化学、食品添加剂等领域具有广泛的应用前景，其制备方法的研究和改进，将为相关产业的发展提供重要的支持。
一株产α-酮戊二酸的菌株及用其发酵生产α-酮戊二酸的方法[发明专利]
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(10)申请公布号 CN 102676438 A(43)申请公布日 2012.09.19C N 102676438 A*CN102676438A*(21)申请号 201210189014.3(22)申请日 2012.06.08CCTCC NO ：M 2012173 2012.05.20C12N 1/20(2006.01)C12P 7/50(2006.01)C12R 1/19(2006.01)(71)申请人江南大学地址214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大道1800号江南大学生物工程学院(72)发明人王正祥 田康明 周丽 沈微(74)专利代理机构无锡市大为专利商标事务所32104代理人时旭丹刘品超(54)发明名称一株产α-酮戊二酸的菌株及用其发酵生产α-酮戊二酸的方法(57)摘要一株产α-酮戊二酸的菌株及用其发酵生产α-酮戊二酸的方法，属于微生物基因工程技术领域。
本重组菌命名为大肠杆菌（Escherichiacoli ）B0013-090A ，已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCCNO ：M2012173，该菌株由大肠杆菌（Escherichiacoli ）B0013-070B （保藏编号CCTCCNO ：M2012071）经基因工程改造获得。
用其动态调控发酵生产α-酮戊二酸，发酵36~48h 产α-酮戊二酸水平达到9%，且所产α-酮戊二酸化学纯度达到95%以上。
该工艺以葡萄糖或淀粉、糖蜜或生物柴油副产甘油为原料，工业化生产α-酮戊二酸，其使用价值非常巨大。
本发明发酵培养基简单清洁，既有利于降低生产成本，也有利于简化后提取步骤获得高品质产品。
操作工艺简单易行，有利于在工业化规模生产中推广使用。
(83)生物保藏信息(51)Int.Cl.权利要求书1页 说明书6页序列表2页 附图1页(19)中华人民共和国国家知识产权局(12)发明专利申请权利要求书 1 页 说明书 6 页序列表 2 页 附图 1 页1/1页1.一株产α-酮戊二酸的菌株，其分类命名为大肠杆菌（Escherichia coli ）B0013-090A ，该菌株已保藏于中国典型培养物保藏中心，保藏编号CCTCC NO ：M 2012173，动态调控发酵过程，该菌株在添加丙酮酸脱氢酶系辅因子的情况下在好氧培养阶段快速生长，在发酵产酸阶段菌体生长受限快速合成α-酮戊二酸。
谷氨酸发酵培养基
成量。尤其是在发酵后期，加大通气量有利于谷氨酸的合成。 ②温度。菌种生长的最适温度为30～32 ℃。当菌体生长到稳
定期，适当提高温度有利于产酸，因此，在发酵后期，可将温
度提高到34～37 ℃。③pH。谷氨酸产生菌发酵的最适pH在 7.0～8.0。但在发酵过程中，随着营养物质的利用，代谢产物 的积累，培养液的pH会不断变化。如随着氮源的利用，放出氨， pH会上升；当糖被利用生成有机酸时，pH会下降。④磷酸盐。
在花卉生产栽培中，常常施用“微肥”和“植物激素”，这些 药剂在施用时，其用量甚微，每千升的容量中只含有几毫克甚 至更少，故用“ppm”来表示。也就是说，在配制1ppm浓度时， 1克农药或肥料(指纯量)加水1吨(1000000克)，目前，在大多 数科技期刊中，已经不使用ppm，而改用“‰”，ppm换算成 ‰为：1ppm=0.001‰。
在谷氨酸发酵中，如果能够改变细胞膜的通透性，使谷氨酸不断地排到细
胞外面，就会大量生成谷氨酸。研究表明，影响细胞膜通透性的主要因素是细
胞膜中的磷脂含量。因此，对谷氨酸产生菌的选育，往往从控制磷脂的合成或
使细胞膜受损伤入手，如生物素缺陷型菌种的选育。生物素是不饱和脂肪酸合
成过程中所需的乙酰CoA的辅酶。生物素缺陷型菌种因不能合成生物素，从而
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二、合成方法 目前，α-酮戊二酸的主要合成方法有微生物发酵 法[5-6]和化学合成法。合成α-酮酸的传统方法有以下 几种[7]： 酰基氰化物水解法：
草酸类乙酯水解法：
以α-叠氮苯乙酸类为起始原料的反应：
N-溴-α-氰基胺类化合物为起始原料的反应：
本次实验通过Claisen酯缩合方法合成草酰丁二 酸三乙酯。首先，丁二酸二乙酯在乙醇钠的作用下失 去α 氢，生成烯醇负离子，烯醇负离子对草酸二乙酯 发生亲核加成，在消除乙氧负离子生成草酰丁二酸三 乙酯钠盐，然后再盐酸酸化作用下，得到草酰丁二酸 三乙酯。以草酰丁二酸三乙酯为原料，在酸性条件下 回流，按负离子机理，草酰丁二酸三乙酯发生脱羧反 应生成α -酮戊二酸。
[7] 祝馨怡,苏桂琴,张伟强等.α-酮酸、α-酮酸酯及α-酮酰胺的合成进展 [J]. 合成化学,2001, (05): 390-396. [8] 向纪明.α-酮酸的应用及合成研究进展[J]. 安康学院学报,2011, (05): 1-5+9. [9] 姚映钦. 有机化学实验（第三版）[M].武汉：武汉理工大学出版社， 2011.
四、数据分析
1、产率计算
表1 实验用量
实验次数 1 2 钠 2.3g 2.3g 草酸二乙酯 13.7mL 13.7mL 丁二酸二乙 酯 17.0mL 16.9mL 第二步中间 产物用量 18.0g 25.0g
表2 产率计算
产物 草酰琥珀酸三乙酯 α-酮戊二酸 12.0 理论产量/g 1 2 27.4 10.7 实验产量/g 1 2 19.6 5.50 24.5 8.92 实验产率/％ 1 2 71.5 45.8 89.4 83.4
注：第二次实验草酰琥珀酸三乙酯产量按含杂质20％计算
2、红外图谱分析
草酰琥珀酸三乙酯红外吸收光谱
160 140 120 100
透过率T/%
3456
2360 860
80 60 40 20 0 -20 4000
2981 1373 1030 1176 1257 1736
3000
2000
1000
波 数/cm-1
Thank you!
-酮戊二酸红外吸收光谱
100
640
80
2357
1092 1408 1207
透过率T/%
60
40
3433 1728
20
0 4000 3000 2000 1000
波 数/cm-1
五、影响因素讨论
实验药品用量
乙醇用量 酸用量
温度控制
乙醇钠的制备 蒸除乙醚 减压蒸除水
无水处理
无水乙醇与金属钠在 加热回流条件下制备 乙醇钠，用甲苯除去 多余乙醇 加乙醚溶解乙醇钠后， 再依次加入草酸二乙酯 与丁二酸二乙酯，放置 12h
草酰琥珀酸三乙酯用 浓盐酸酸化后，加水 回流4h，减压蒸馏
用乙醚萃取，合并水 层后加浓盐酸酸化， 收集油层合并，用无 水硫酸钠干燥
蒸馏至无馏分为止，趁热 将剩余物倒入蒸发皿，冷 却结晶得到产品α-酮戊二 酸
仪器无水处理 试剂无水处理 时间控制 Claisen酯缩合 酸化回流脱羧
六、小结 基于两次实验，对实验方案提出如下建议： 1. 钠的摩尔量不能高于丁二酸二乙酯和草酸二乙酯，且制 备醇钠的后期可适当提高反应温度缩短反应时间；
2. 蒸除乙醇时要到后期在滴加甲苯，这样可以节省甲苯；
3. 中间产物乙醚溶液进行乙醚蒸除时，应先常压蒸除大部 分乙醚后在进行减压蒸馏除去剩余的乙醚和乙醇； 4. 草酰丁二酸三乙酯在酸性条件下进行水解脱羧时，要加 上剧烈搅拌； 5. α-酮戊二酸水溶液减压蒸除水时外界加热温度不能高于 120℃。
三、实验部分 （1）实验药品 金属钠2.3g（0.1mol）;草酸二乙酯14.6g(13.7ml); 丁二酸二乙酯17.4g（16.9ml）;无水乙醇（35.6ml）;无 水乙醚（65ml）;无水甲苯；乙醚；浓盐酸；无水硫酸钠；
（2）仪器及设备 设备：红外光谱仪 装置图：
X-4显微熔点仪
（3）实验步骤
七、参考文献
[1] Wolfe AJ. The acetate switch[J]. MicrobiolMolBiol Rev, 2005, 69(1): 12−50. [2] 许传芹.α-酮戊二酸对酒精性肝病的干预作用及其相关机制研究[D].杭 州：浙江大学，2012. [3] 梁楠.光滑球拟酵母内乙酰辅酶A水平调控对其碳代谢流的影响[D].无 锡：江南大学，2008. [4] Simpson KJ, Venkatesan S, Peters TJ. Effect of chronic alcohol feeding with a low-fat diet on acetyl-CoA carboxylase and fatty-acid synthase activities in rat-liver[J]. BiochemSoc Trans, 1989, 17(6): 1116. [5] Chernyavskaya O G, Shishkanova NV,Il'chenkoA P, etal. Synthesis ofa-ketoglutaric acid by Yarrowialipolyticayeastgrown on ethanol[J]. Applied Microbiology and Biotechnology, 2000, 53(2): 152−158. [6] LiuL,Hossain G S, Shin H, etal. One-step production of alphaketoglutaric acid from glutamic acid with an engineered L-amino acid deaminase from Proteus mirabilis[J]. Journal Of Biotechnology, 2013, 164 (1):97-104.
α-酮戊二酸的制备
目录
DIRECTORY
一、研究背景...............................04
二、合成方法...............................05
三、实验部分...............................08
四、数据分析...............................10
目录
DIRECTORY
五、影响因素讨论…...................13
六、小结 …………........................14
七、参考文献..............................15
一、研究背景 α-酮戊二酸(α-ketoglutarate，α-KG)是三羧酸循环 (TCA循环)的重要中间代谢产物之一，也是重要的有 机合成中间体。 • 参与氨基酸、糖类、蛋白质以及脂肪代谢等重要生 理过程。 • 在微生物细胞的碳氮代谢调控中起着重要作用。 • 由于α-酮戊二酸在细胞代谢上的重要性，其被广泛 应用于医药、饲料和食品等领域。 • 由于α-KG特殊的化学性质，被广泛用于化学合成行 业。