水的微生物检验

水的微生物检验

一、器材：

1 •培养基：PCA、灭菌双料5支、单料10支/每个样品（乳糖蛋白胨）2．仪器或其他用具：灭菌

三角烧瓶（带塞）且加入稳定剂，灭菌培养皿、灭菌吸管、灭菌镊子、灭菌棉球、灭菌10 ml 生理盐水（灭菌9 ml 生理盐水）、酒精灯（打火机、酒精棉球）、样品筐

二、水样的采集：

1 • 用灭菌棉球将水龙头擦干（钢铁管口用酒精灯烧灼消毒水龙头周围 3 分钟）

2. 完全打开水龙头使水流2-5分钟后，将水龙头关小，以灭菌三角烧瓶接取水样。方法二：

1. 流1-2分钟

2. 关上，擦水龙头四周

3. 打开水龙头，流2-5 分钟

4. 接水

注意：1.加硫代硫酸钠的量：500 ml水加1.5%硫代硫酸钠2ml或每500 ml加0.4ml硫代

硫酸钠。

2. 样品瓶必须专瓶专用，灭菌后须干燥。

3. 人手和手套不得与样品瓶内壁或瓶塞接触。

4. 采样记录用胶纸粘贴或悬挂标签于水样瓶上，注明水样编号、采样者、日期、时间及地点等。

5. 运送水样应避免瓶摇动（充满容器并密封，除冷冻样品），以免水样溢出后又回流瓶

中增加污染。

6. 取样后2 小时内检验，冷藏4小时内检验

7. 做样在无菌间做。

三、细菌总数、大肠菌群测法参照GB5750-85 （2001 版）

水的余氯检测程序

一、器材：配好的比色管10 支，洁净的50ml 比色管1 支，三角锥瓶2个（带塞）

二、水样采集：打开水龙头流水1-2 分钟后，以三角烧瓶接取水样，涮洗3 次，接取200ml 左右，迅

速送到实验室比色。

三、操作：准确吸取2.5ml 邻联甲苯胺溶液于50ml 比色管中，加水样至50ml 刻度处。当接近刻度

时，改用滴管加至刻度处，以与眼平行时，凹液面与刻度相平为准。（盖上瓶塞，颠倒混匀2-3 次），迅速比色，然后审核并做记录。

四、注意事项：

1. 抽取时间：车间上班30 分钟后。

2. 每天三角锥瓶、比色管用完后刷洗并控干。

3. 5ml 吸管每月换1（或2）支。

4. 抽取按编号顺序抽取。

5. 比色管每半年换一次。

抽样程序

一、器材：灭菌镊子8把（2 把备用），抽样塑料袋6个，筐1 个，记号笔，标签

二、抽取方法：

1. 更衣及洗手消毒参照SSOP。清：戴手套且消毒时间为60秒。备注：工作服控制为紫

外线消毒。

2. 取样个数：3 个/车间，1 个半成品，2 个成品开片：抽取堆积在案板上原料/ 未去皮

鱼片/未刷膜鱼片过多或下脚料出现在案子

上，筐数较多或案板冲洗不彻底或大襟油袖较脏等的鱼片。鱼片可以破碎但

摸刺挑虫：抽取积攒较长时间筐里的鱼片或工作服较脏的工人面前的鱼片；挑虫抽取灯检台较脏或手/工作服较脏者的鱼片，且鱼片应完整。

包装：在包装入箱前抽取血红肉较多、鱼片色泽较差的完整鱼片。或工作较差、不认真消毒、工作服不干净的工人处理的鱼片。

方法：将塑料袋撑开向上挽起（手不能碰袋内壁），选取1 个鱼片样品，用灭菌镊子夹住放入袋内，然后将塑料袋封好并标识编号、名称、工序、日期、取样人（规格、原料标

识）

注：1.注意无菌操作，不能污染鱼体

2. 取样结束应尽快将样品送往实验室检验。冷却和易腐食品存放在0-4 C冰箱内。

3. 样品送达实验室，应核查样品包括件数，包装是否完整，冷冻样品是否融化等。并有审查人签名。

4. 待检样品存放时间一般不超过36小时。

表面样品的检验：涂抹法

一、表面样品的内容包括：1）加工人员的物（手套）、工作服2）加工用案台、桌面、刀、筐、案板等

3）加工设备如单冻机、去皮机等4）加工车章地面、墙面5）加工车间、

更衣室的空气6）内包装物料

二、器材：不锈钢框10个、筐10/9ml生理盐水各10支，PCA、去氧胆酸钠、灭菌空烧瓶、试管架、灭

菌镊子10 把、灭菌干棉球、记号笔（油笔加纸）

三、采样方法

1. 手：用灭菌镊子夹取蘸有少量生理盐水的灭菌棉球擦拭手掌面（手背面不取），先

顺手指方向擦一遍，然后垂直手指方向擦一遍。然后将棉球放入10ml 灭菌生理盐

水中，振摇均匀。单位为cfu/手。

2. 刀：取样方法同物，擦拭2遍，且正反面都擦。单位为cfu/把刀。

3. 工器具：取灭菌的100cm2的不锈钢框放在要检查的部位上，用灭菌的镊子夹取无菌棉球蘸取无

菌生理盐水。按前后、左右顺序分别擦拭一遍，然后立即将棉球放入

2

10ml 灭菌生理盐水中，充分振摇。单位为cfu/100cm2

四、接种与培养：

1. 细菌总数：取十倍、百倍两个稀释度，用无菌吸管分别吸取1：10稀释液1ml注入

灭菌平皿中，作两个平皿，倒入琼脂12-15ml，并摇匀。倒置于36 ± 1C培养箱24

小时。1：100 稀释液做法同上。

2. 大肠菌群：做十倍一个稀释度。用无菌吸管吸取1ml 于灭菌平皿中，做两个平皿。倒入配制好的

VRBA12-15ml 摇匀。凝固后再在上层倒入3-5ml 培养基并旋转覆盖于表面。36 ± 1C培养18-24小时。

3. 金黄色葡萄球菌：用无菌吸管吸取0.4、03、0.3 ml，分别涂布于3个表面干燥的

BP琼脂平板，36 ± 1C培养46± 2小时。

五、结果计算及报告方法：

加工车间的空气细菌数的检验：

一、培养基：PCA、36± 1C培养24 ± 1小时，无菌生长

二、采样方法：取车间的四角及中心五个点，约80-150 厘米高度（即约桌面高度），周围四

点距墙1米。在采样点侧开盖暴露5分钟，盖上送检。倒置于36± 1C培养箱培养24小时（最好48 小时）。

三、计算方法：

1．取5个平板计数结果的平均值，报告为“个/平皿”

2．细菌总数（cfu/m 3）=50000N/AT

注：N —培养后平皿上的菌落数（cfu/平皿）

2

A —所用平皿面积（cm）

T —平皿暴露于空气中的时间（min）

附：空气污染程度的参考依据：

菌数空气污染程度评价

30 以下清洁安全

30-50轻度清洁

50-75中等度清洁应加注意

75-100高度污染

100 以上严重污染禁忌

注：1.采样后尽快检测，6小时内检验。

2.若样品保存于0-4 C冷藏，则必须在24小时内检验。